液体乳中黄曲霉毒素M1的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201709)

合集下载

食品毒素控制及检测相关标准汇总

食品安全国家标准
GB 5009.198-2016 食品安全国家标准贝类中失忆性贝类毒素的测定
食品安全国家标准
GB 5009.206-2016 食品安全国家标准水产品中河豚毒素的测定
食品安全国家标准
GB 5009.212-2016 食品安全国家标准贝类中腹泻性贝类毒素的测定
食品安全国家标准
GB 5009.213-2016 食品安全国家标准贝类中麻痹性贝类毒素的测定
农业行业标准
NY/T 2545-2014 植物性农产品中黄曲霉毒素现场筛查技术规程
农业行业标准
NY/T 2547-2014 生鲜乳中黄曲霉毒素M1筛查技术规程
农业行业标准
NY/T 3106-2017 花生黄曲霉毒素检测抽样技术规程
农业行业标准
NY/T 3107-2017 玉米中黄曲霉毒素预防和减控技术规程
食品安全国家标准
GB 5009.22-2016 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定
食品安全国家标准
GB 5009.240-2016 食品安全国家标准食品中伏马毒素的测定
食品安全国家标准
GB 5009.24-2016 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M族的测定
食品安全国家标准
GB 5009.261-2016 食品安全国家标准贝类中神经性贝类毒素的测定
LS/T 6111-2015 粮油检验粮食中黄曲霉毒素B1测定胶体金快速定量法
粮食行业标准
LS/T 6114-2015 粮油检验粮食中赭曲霉毒素A测定胶体金快速定量法
粮食行业标准
LS/T 6122-2017 粮油检验粮油及制品中黄曲霉毒素含量测定柱后光化学衍生高效液相色谱法

《基于荧光适配体传感器快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用研究》范文

《基于荧光适配体传感器快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用研究》篇一一、引言食品安全问题一直备受社会关注。

其中，黄曲霉毒素M1作为液态奶中的主要污染物之一，具有强烈的致癌性，对人体健康造成极大威胁。

因此，开发一种快速、准确、高效的黄曲霉毒素M1检测方法，对于保障食品质量和安全具有重要意义。

本文提出了一种基于荧光适配体传感器的快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法，并对其应用进行了深入研究。

二、方法概述该方法利用荧光适配体传感器技术，通过特异性识别黄曲霉毒素M1，实现快速、灵敏的检测。

具体步骤包括：样品前处理、荧光适配体传感器制备、荧光检测及数据分析。

（一）样品前处理液态奶样品经过适当稀释后，采用固相萃取法进行净化，以去除样品中的杂质和干扰物质，提高检测的准确性和可靠性。

（二）荧光适配体传感器制备荧光适配体传感器采用生物工程方法制备，包括DNA或RNA适配体的合成、荧光基团的标记及传感器的组装等步骤。

制备好的传感器具有高特异性、高灵敏度和良好的稳定性。

（三）荧光检测及数据分析将处理后的样品与荧光适配体传感器混合，通过荧光检测仪器进行荧光强度检测。

根据荧光强度的变化，结合标准曲线，可快速计算出样品中黄曲霉毒素M1的含量。

三、实验结果（一）方法性能评价通过对比国家标准方法，本文所提方法在检测液态奶中黄曲霉毒素M1时，具有更高的灵敏度和更低的检测限。

此外，该方法操作简便、快速，适合大规模样品的检测。

（二）实际样品检测为验证本文所提方法的实际应用效果，我们对市售液态奶进行了检测。

结果显示，部分样品中黄曲霉毒素M1含量超标，为食品安全监管提供了有力支持。

四、应用研究（一）食品安全监管本文所提方法可广泛应用于液态奶及其他乳制品中黄曲霉毒素M1的快速检测，有助于食品安全监管部门及时发现和处理问题产品，保障消费者权益。

（二）食品安全风险评估通过大量样品的检测和分析，可对食品中黄曲霉毒素M1的污染状况进行评估，为制定科学的食品安全风险评估提供依据。

乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定—免疫亲和层析净化液相色谱串联质谱法(二)

乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定—免疫亲和层析净化液相色谱串联质谱法（二）5.1 液相色谱—质谱联用仪，带电喷雾离子源。

5.2 色谱柱：ACQUITYUPLC HSS T31,柱长100mm,柱内径2.1mm；填料粒径1.8nm,或同等性能的色谱柱。

5.3天平：感量为0.001g和0.00001g。

5.4匀浆器。

5.5 超声波清洗器。

5.6 离心机：转速≥6000转/分钟。

5.7 50mL具塞PVC离心管。

5.8 水浴:温控30℃±2℃,50℃±2℃,温度范围25℃～60℃。

5.9 容量瓶:100mL。

5.10 玻璃烧杯:250mL,50mL。

5.11 刻度的磨口玻璃试管:5mL,10mL,20mL。

5.12 移液管：1.0mL,2.0mL和50.0mL。

5.13 玻璃棒。

5.14 10目圆孔筛。

5.15 250mL分液漏斗。

5.16 100mL圆底烧瓶。

5.17 旋转蒸发仪。

5.18 pH计:精度为0.01。

5.19 250mL具塞锥形瓶。

5.20 免疫亲和柱：针筒式3mL。

5.21 10mL和50mL一次性注射器。

5.22 固相萃取装置(带真空系统)。

5.23 一次性微孔滤头：带0.22um微孔滤膜(水相系)。

6 分析步骤 6.1 试液提取 6.1.1 乳：称取50g(精确至0.01g)混匀的试样，置于50mL具塞离心管(5.7)中，在水浴(5.8)中加热到35℃～37℃。

在6000转/分钟下离心15min。

收集所有上清液，供净化用。

6.1.2 发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型)：称取50g(精确至0.01g)混匀的试样，用0.5mol/L的溶液(4.11)在酸度计(5.18)指示下调pH至7.4,在9500转/分钟下匀浆(5.4)5min,以下按6.1.1举行操作。

6.1.3 乳粉和粉状婴幼儿配方食品：称取10g(精确至0.01g)试样，置于250mL烧杯中。

牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1的快速测定

牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1的快速测定张鹏;张艺兵;王晶;王雄【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2002(030)006【摘要】采用免疫亲和柱--荧光光度法快速测定了牛乳及乳制品中黄曲霉毒素M1.试样经过离心、脱脂、过滤后,滤液经过键合有黄曲霉毒素M1特殊抗体的免疫亲和柱净化,此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一的识别能力,黄曲霉毒素M1键合在分离柱中的抗体上.用甲醇与水之比为10:90的混合液将免疫亲和柱上杂质除去;以甲醇与水之比为80:20的混合液通过分离柱洗脱;加入溴溶液衍生,以提高测定灵敏度.衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1,检测低限为0.1μg/kg;在0.1～1.0μg/kg范围内,回收率为89.6%～96.1%,变异系数为0.52%～5.8%,分析一个样品的时间小于30min,分析过程中不使用黄曲霉毒素M1标准物质.结果表明,本方法具有准确、简单、快速、安全等优点,可以满足少量和批量样品的检测需要.【总页数】3页(P30-32)【作者】张鹏;张艺兵;王晶;王雄【作者单位】青岛出入境检验检疫局,山东,青岛,266002;青岛出入境检验检疫局,山东,青岛,266002;国家标准物质研究中心,北京,100013;北京中检维康技术有限公司,北京,100044【正文语种】中文【中图分类】TS252.7【相关文献】1.在线固相萃取富集-高效液相色谱法快速测定牛奶中黄曲霉毒素M1 [J], 丁俭;李培武;李光明;王秀嫔;马飞2.免疫亲和柱-高效液相色谱紫外法检测牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1 [J], 陈冬东;代汉霞;彭涛;姚佳;王昕;张建新;里南;王雄3.免疫亲和柱高效液相色谱法快速测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2 [J], 李佐卿;章再婷;谢东华;康继韬;孙大为4.建立牛奶中黄曲霉毒素M1含量的超高效液相快速测定法 [J], 王安波;孙思;杨梅;汪俭;刘文锋5.超高效液相色谱-串联质谱法和胶体金快速定量法测定牛奶中黄曲霉毒素M1比较 [J], 张振宇;柴磊;李明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

生乳中黄曲霉毒素M1快速检测方法的比对

Quality Control生乳中黄曲霉毒素M1快速检测方法的比对李婕，曹学思，杨爱君*，何瑛，纪坤发，罗少杰广东燕塘乳业股份有限公司，广东广州 510000摘要：[目的]分析酶联免疫吸附法（ELISA）测定生乳中黄曲霉毒素M1残留量结果的重现性、回收率和精密度，以及胶体金免疫层析法与其结果的呼应度，证实2 种方法联合使用的可行性。

[方法]用胶体金快速检测试纸条对生乳样品中的黄曲霉素M1进行检测，并用黄曲霉毒素M1 ELISA检测试剂盒（鲜奶检出下限为0.018 μg/kg）做对照试验。

[结果]胶体金快速检测试纸条对生乳中不同浓度黄曲霉毒素M1残留量的检测结果呈现梯度效应，并能与ELISA检测试剂盒的定量检测结果呼应。

ELISA法对生乳中黄曲霉毒素M1不同浓度残留量的定量试验结果重现性较好，具有较高的稳定性。

回收率为94.83%～100.53%，RSD值在1.11%～3.01%之间。

[结论]2 种快速检测方法对生乳中黄曲霉毒素M1的测定便捷快速，结果稳定准确、可信度高，可作为乳品企业日常快速进行原奶验收工作的基础数据参考。

关键词：生乳；黄曲霉毒素M1；胶体金免疫层析法；酶联免疫吸附法文章编号：1671-4393（2023）12-0074-06 DOI:10.12377/1671-4393.23.12.150 引言黄曲霉毒素（Aflatoxin，AF）是迄今发现污染农产品毒力最强的一类生物毒素[1]。

常见的有AFB1、AFB2、AFG1、AFG2，其中AFB1的含量与毒力最大[2]。

黄曲霉毒素B1通常存在于花生、玉米、坚果等农副产品中[3]。

黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的4-羟基衍生物[2]。

它是动物在摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料和食品后在体内产生的代谢物[4]，可致癌、致畸、致突变，其结构为二呋喃环和香豆素，溶于多种有机试剂，如氯仿、乙腈和甲醇等[5，6]，存在于作者简介：李婕（1989-），女，广东广州人，本科，食品工程助理工程师，研究方向为乳品质量安全检测；曹学思（1997-），女，广东广州人，本科，食品安全工程助理工程师，研究方向为乳品质量安全检测；何瑛（1987-），女，广东广州人，本科，食品安全高级工程师，研究方向为乳品质量检测和质量保证；纪坤发（1986-），男，广东汕头人，大专，食品安全工程师，研究方向为乳品质量检测；罗少杰（1962-），男，广东江门人，大专，食品技术员，研究方向为乳品质量检测。

牛奶中黄曲霉毒素M1的检测方法

牛奶中黄曲霉毒素M1的检测方法食品质量与安全王婉婷摘要：采用免疫亲和柱—荧光光度法快速测定和微细柱快速检测方法测定牛乳中黄曲霉毒素M1，方法具有准确、简单、快速、安全等优点，可以满足少量和批量样品的检测需要。

关键词：牛奶；黄曲霉毒素M1；快速检测Rapid detecting aflatoxin m1 in milkStudent majoring in Food Quality and Safety WangWantingAbstract:Aflatoxin M1 i n milk are extracted and separated by immunoaffinity column and Micro column for rapid detection methodKey words: milk ;rapid detecting aflatoxin M1 ;aflatioxin M1 immunoaffinity column一．前言近代研究表明当奶牛食用饲料中含有黄曲霉素Bl时,牛奶和其他乳制品会含有黄曲霉素Ml ［1］。

黄曲霉毒素Ml的毒性和致癌性与黄曲霉毒素Bl的基本相似。

由于牛乳及其制品是人类特别是婴儿的主要食品，因此各国对其限量的要求十分严格。

我国及许多国家规定牛奶及奶制品中黄曲霉毒素Ml的含量不得超过0.5ug\kg；所以，快速、方便、准确的检测方法在牛奶的检测中十分重要，二．主要检测方法2.1免疫亲和柱—荧光光度法快速测定2.1.1测定原理：试样经过离心、脱脂、过滤后，滤液经过键合有黄曲霉毒素Ml 特殊抗体的免疫亲和柱净化，此抗体对黄曲霉毒素Ml具有专一的识别能力，黄曲霉毒素Ml键合在分离柱中的抗体上。

用甲醇与水之比为10：90的混合液将免疫亲和柱上杂质除去；以甲醇与水之比为80：20 的混合液通过分离柱洗脱，加入溴溶液衍生，以提高测定灵敏度。

衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素Ml。

牛奶中黄曲霉毒素M1残留检测技术的研究进展

牛奶中黄曲霉毒素M1残留检测技术的研究进展作者：高宝龙范春刚王震郑玮丽王妙姝杨赛来源：《食品安全导刊》2021年第07期摘要：牛奶中黄曲霉毒素M1残留对人们健康存在很大危害，因此探索黄曲霉毒素M1残留的检测技术的研究具有重要的意义。

本文介绍的黄曲霉毒素M1残留的检测技术有金标试纸法、原位衍生荧光法、液相色谱法，电子鼻法以及光学免疫传感器法。

关键词：黄曲霉毒素M1;药物残留;检测技术黄曲霉毒素是由真菌类生物所产生的一种代谢产物，在人们生活中比较常见[1]。

人们食用含有黄曲霉毒素的食物，毒素便会在身体中逐渐积累，进而威胁人体健康，其主要体现在：①对人类以及动物的组织器官产生损伤，进而抑制免疫功能;②对人类以及动物的肝、胃、肾等致畸、致癌、致突变而引发癌的发生等;③对于婴幼儿的健康也会产生影响，婴幼儿的一些解毒器官尚未发育完善，如果食用的乳汁或奶粉等食品中含有黄曲霉素残留，将严重威胁婴幼儿健康[2]。

黄曲霉毒素M1有时也在原料奶中出现，但是在牛奶中的含量远远低于其他食品中的含量，如果不及时排查原因降低其风险也会对消费者造成一定潜在威胁。

牛奶中黄曲霉毒素的产生主要为奶牛采食发霉变质饲料（霉变饲料黄曲霉毒素以黄曲霉毒素B1形式存在）后，体内的饲料会发生转化，黄曲霉毒素由B1形式转化为另一种黄曲霉毒素M1形式并随奶牛产奶而进入牛奶及奶制品当中[3]。

因此在奶牛饲喂过程中需要保证饲料的质量及品质，对消费者负责。

随着人们生活水平的提高，牛奶在人们的饮食结构中占据非常重要的地位，人们对于健康的重视度也越来越高，因此为了有效保证牛奶的食品安全，必须建立起有效的黄曲霉毒素M1残留检测方法，从国家标准来看，牛奶中黄曲霉毒素M1的最大允许量为0.5 μg/kg，而河北新希望天香乳业有限公司企业内部标准牛奶中黄曲霉毒素M1的最大允许量为0.2 μg/kg[4]。

目前有关牛奶中黄曲霉毒素M1残留检测技术有金标试纸法、原位衍生荧光法、液相色谱法电子鼻法和光学免疫传感器法。

生鲜牛乳中黄曲霉毒素M1快速检测报告

生鲜牛乳中黄曲霉毒素M1快速检测报告帕提古丽·托乎提【摘要】[目的]为快速、准确检测出生鲜牛乳中黄曲霉毒素M1,保证牛奶卫生安全.[方法]采用SNAP黄曲霉毒素M1快速检测试剂盒检测生鲜牛乳中黄曲霉毒素M1.在2012年4月、9月和2013年6月分别对新疆巴州辖区内16个奶站的奶缸、奶牛养殖小区、运输车辆分别抽16份生鲜乳样品检测黄曲霉毒素M1.[结果]16份生鲜乳样品中检测黄曲霉毒素M1,结果全部为阴性.[结论]对巴州辖区内16个奶站的奶缸、奶牛养殖小区、运输车辆进行了生鲜牛乳黄曲霉毒素M1抽样检测项目,16份生鲜牛乳样品结果全部为阴性,未检出黄曲霉毒素M1,合格率为100％.【期刊名称】《中国牛业科学》【年(卷),期】2014(040)001【总页数】2页(P13-14)【关键词】生鲜牛乳;黄曲霉毒素M1;SNAP快速检测【作者】帕提古丽·托乎提【作者单位】新疆巴州动物疾病控制与诊断中心新疆库尔勒841000【正文语种】中文【中图分类】S879.1黄曲霉毒素主要是黄曲霉素菌和寄生曲霉菌的代谢产物，广泛存在于玉米、谷物、棉籽等农作物和动物饲料中，黄曲霉素菌和寄生曲霉菌污染粮食和饲料后，产生多种结构相近的化合物统称为黄曲霉素［1］。

目前发现的黄曲霉素有20多种，曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉、特异曲霉和特溜曲霉4种产毒菌株的代谢产物。

饲料在自然条件下污染的黄曲霉毒素主要包括B1，B2，G1和G2四种，B1最多，G1之次，B2和G2很少，B1毒性和致癌性最大。

黄曲霉毒素B11993年被世界卫生组织列为I类致癌物。

一般B1含量作为评价饲料好坏的主要指标［2］。

黄曲霉毒素M1是有牛、羊、猪等哺乳动物食用被黄曲霉毒素B1污染的饲料后，在体内经过代谢后产生的，主要存在于动物的乳汁、肝、肾、乳腺中，肉中残留较少。

黄曲霉毒素M1也是一种强毒致癌物，2002年被世界卫生组织列为I类致癌物。

黄曲霉毒素Bl在奶牛体内转换为Ml，并分布在牛奶中，人若食用含有超标黄曲霉毒素M1的牛奶后，能使人发生肝炎、肝癌，对人体健康造成伤害［1］。

新型,快速,低成本SPE法检测乳制品中黄曲霉毒素M1解决方案V1

新型，快速，低成本SPE法检测乳制品中黄曲霉毒素M17月20日，广州市工商局在官网公布了近期对市面上乳制品及含乳食品的抽检结果。

由湖南长沙亚华乳业有限公司生产的南山奶粉问题最为严重，5个批次的婴幼儿奶粉均检出含有黄曲霉毒素M1。

值得注意的是，知名品牌光明奶油、本土沙湾姜汁撞奶均在不合格之列，爱馨多洋奶粉更是两月三登“黑榜”。

目前检测黄曲霉毒素的方法通常为免疫亲和层析净化高效液相色谱法和酶联免疫吸附法（ELISA）这两种方法。

酶联免疫吸附法（ELISA）操作简单，快速，但灵敏度低且会出现假阳性，需使用免疫亲和柱法进行精确定性、定量，而免疫亲和柱又存在使用繁琐、价格昂贵、储存条件苛刻、保存期短等缺点。

针对上述问题，迪马科技最新开发出新型、快速、低成本的ProElut TM固相萃取方法。

该方法可实现与免疫亲和柱法相当的高精度回收率结果，但使用成本却大大降低。

ProElut TM固相萃取法单个样品的检测成本为免疫亲和柱法的1/4，酶联免疫法的1/2，同时ProElut TM固相萃取法简单易操作、不需要专用的大型设备、对操作人员要求不高，特别适用于各种食品生产企业及检测机构，将大大降低黄曲霉毒素的检测成本。

以下为使用ProElut TM固相萃取柱开发的黄曲霉毒素M1的检测方案，供您参考！1 适用范围适用于牛奶、奶粉、乳酪等乳制品中黄曲霉毒素M1的检测。

2 样品准备/提取2.1 牛奶、原料乳等液态奶制品(1) 称取5g样品，加入5mL乙腈，涡旋混合1min；(2) 再加入10mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5min；(3) 取上清液5mL，作为上样液待净化。

2.2 奶粉、乳酪等固体奶制品(1) 称取2g样品，加入5mL水，涡旋混合2min，样品与水充分混匀；(2) 加入5mL乙腈，涡旋混合1 min；(3) 再加入10mL乙腈，涡旋混合1min，4000rpm，离心5min；(4) 取上清液5mL，作为上样液待净化。

黄曲霉毒素M1快速检测卡(胶体金法)说明书

黄曲霉毒素M1快速检测卡(胶体金法)说明书【产品名称】产品名称：黄曲霉毒素M1快速检测卡(胶体金法)英文名称：Aflatoxin M1 Rapid Test Card (Colloidal Gold)【产品简介】黄曲霉毒素是一类丝状真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）产生的具有很强致癌性的有毒代谢产物，黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物, 主要存在于乳及乳制品中。

本产品用于快速检测纯牛奶和婴幼儿配方奶粉中的黄曲霉毒素M1残留，整个检测过程只需要20分钟左右，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。

【包装规格】5次/盒。

【产品组成】黄曲霉毒素M1快速检测卡（5条）；1mL刻度吸管（5支）；奶粉取样勺（1支）；提取瓶（内含黄曲霉毒素M1提取液4mL，5瓶）。

【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。

【检出限】本产品检测方法对纯牛奶黄曲霉毒素M1的检出限为0.5μg/kg，对婴幼儿配方奶粉（以粉末计）黄曲霉毒素M1的检出限为0.5μg/kg。

根据《食品真菌毒素限量GB2761-2011》规定，液态乳黄曲霉毒素M1检出限量为0.5μg/kg，婴幼儿配方乳粉（以粉末计）黄曲霉毒素M1检出限量为0.5μg/kg。

【使用方法】1、纯牛奶检测：用吸管吸取2mL纯牛奶（吸管刻度线处为1mL，连续吸取两次），加入提取瓶中，盖紧瓶盖后振荡混匀；奶粉检测：用取样勺量取1平勺奶粉（约0.4g），加入提取瓶中，盖紧瓶盖后振荡混匀。

2、将提取瓶放在热水（60-70℃）中水浴5分钟，取出待检。

3、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用吸管从提取瓶中吸取样品，垂直滴加3滴（约100μL）于检测卡加样孔（S孔）中。

4、室温环境计时10分钟，根据示意图判定结果。

【结果判定】阴性（-）：T线显色比C线深或一样深，均表示样品中黄曲霉毒素M1浓度低于检出限。

阳性（+）：T线显色比C线明显变浅或T线不显色，表示样品中黄曲霉毒素M1浓度等于或高于检出限。

牛奶中黄曲霉毒素M1的测定能力验证方法研究

牛奶中黄曲霉毒素M1的测定能力验证方法研究发布时间：2021-10-08T08:25:23.842Z 来源：《科学与技术》2021年第29卷15期作者：韩世忠[导读] 黄曲霉毒素M1是一种毒性极强的剧毒物质，牛奶是易受黄曲霉毒素M1污染的食品种类。

韩世忠河南金测检测技术服务有限公司，河南郑州450000摘要黄曲霉毒素M1是一种毒性极强的剧毒物质，牛奶是易受黄曲霉毒素M1污染的食品种类。

通过参加能力验证，利用高效液相色谱法对牛奶试样中黄曲霉毒素M1进行测定。

结果表明，在线性系列浓度范围为0.2~4.0 ng/mL时，R2=0.9999；三个添加水平的黄曲霉毒素M1平均回收率在87.3%~95.5%，能力验证结果显示，两个牛奶测试样品z值分别为-0.1和-0.4，能力验证结果满意，说明该检测方法准确、可靠，适于牛奶中黄曲霉毒素M1的测定。

关键词牛奶、黄曲霉毒素M1、能力验证图分类号 S859.3 文献标识码：B黄曲霉毒素M1（AFM1）于1993年被世界卫生组织癌症研究机构划定为I类致癌物质，是一种毒性极强的剧毒物质，牛乳及其制品是易受黄曲霉毒素M1污染的食品之一[1]。

牛乳中黄曲霉毒素M1的存在，主要是奶牛食用了受黄曲霉毒素污染的饲料，经乳畜体内羟化酶转化而成[2]。

目前牛乳中黄曲霉毒素M1的检测方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、免疫亲和柱-荧光光度法、酶联免疫吸附法、双流向酶联免疫吸附法、放射免疫法、免疫胶体金法等[3]。

本文通过能力验证，利用高效液相色谱法对牛奶试样中黄曲霉毒素M1进行测定，研究方法的准确性和可靠性，以提高实验室的整体检测水平。

1 材料与方法1.1材料1.1.1样品测试样品为牛奶，由中国检验检疫科学研究院测试评价中心提供（编号21-H977、21-F208）。

黄曲霉毒素M1标准溶液浓度10 μg/mL，由坛墨质检科技股份有限公司标准物质中心提供，证书编号：2622011。

乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的检测方案

乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的检测方案近日，蒙牛纯牛奶被检测出强致癌物——黄曲霉毒素M1，消息一出顿时又掀起一股食品安全隐患的讨论。

相比之前的三聚氰胺，黄曲霉素是否更难检测？现整理出全套的专业检测方案，让乳和乳制品中黄曲霉毒素M1无处躲藏。

1. 试用范围牛奶，奶粉，发酵乳，干酪，奶油等乳制品2. 方法原理黄曲霉毒素M1易溶于极性溶剂，因此均匀基质中的黄曲霉毒素M1可以通过甲醇/水震荡分散提取，对于高脂肪/油含量的样品基质加入正己烷予以脱脂。

本方法采用免疫亲和柱净化，荧光检测器测定乳制品中黄曲霉毒素M1。

3. 所需设备和耗材黄曲霉毒素免疫亲和柱：Welchrom? IAC (1ml，25支/盒；3ml，15支/盒)（上海月旭提供）；高效液相装置带荧光检测器；均质机；水平振荡器；SPE转接头及50ml大容量上样器：Welchrom? SPE Adapter（上海月旭提供）；分析天平（精度0.02 g)；SPE装置带抽真空系统：Welchrom? SPE Device（上海月旭提供）；黄曲霉毒素M1标准品；PBS 缓冲溶液：称取1.16 g Na2HPO4，0.20 g KH2 PO4，8 g NaCl和0.2 g KCl 溶于900ml 水中，用HCL或NaOH调节pH至7.4，然后定容至1000ml；甲醇（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；正己烷（分析纯）。

4. 样品前处理牛奶样品1. 称取25g(精确至0.01 g)混匀的样品，置于50 mL具塞离心管中，水浴加热至35℃～37 ℃，6000 r/min下离心10 min。

收集全部上清液，待净化；2. 发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型)3. 称取25 g(精确至0.01 g)混匀的样品，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值至7.4，9500r/min下均质5 min，水浴加热至35℃～37 ℃，6000 r/min下离心10 min。

收集全部上清液，待净化。

牛奶中黄曲霉毒素M1胶体金试纸条的研究

２０１４年１月
霞瑟礴究蓠器笈
ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＡｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ检测分析
７６
第３５卷第１期
ＤＯＩ：１０．３９６９ｄ．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１４．０１．０２１
ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．ＣｏｌｌｏｉｄａｌｇｏｌｄｍａｒｋｅｄｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｍｏｎｏｅｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔａｌａｆｔｏｘｉｎＭ１ａｎｄｆｒｅｅｚｅｉｎｔｏｍｉ（￣ｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅａｇｅｎｔｓ，ｓａｍｐｌｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｃｕｓｈｉｏｎａｎｄｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｉｆｌｍｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｉｎｓｔａｌｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｔｒｉｐ．Ｔｈｅｒｅｓｕｈｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｗａｓ０．３Ｌｉｎｍｉｌｋ．Ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｉｍｅｗｉｔｈｉｎ１０ａｉｒｎ．Ｔｈｅｒｅ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔ（）ｅｓｔａｂｌｉｓｈａｒａｐｉｄａｓｓａｙｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｌｆａｔｏｘｉｎＭ１，ｇｏｌｄｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔ０ｇｒａｐｈｙａｓｓａｙ（ＧＩＣＡ）

《基于荧光适配体传感器快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用研究》范文

《基于荧光适配体传感器快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用研究》篇一一、引言随着食品工业的快速发展，食品安全问题日益受到人们的关注。

黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）作为乳制品中的常见污染物，具有潜在毒性及致癌性，对消费者的健康构成了严重的威胁。

因此，对液态奶中黄曲霉毒素M1的快速、准确检测显得尤为重要。

传统的检测方法如色谱法、质谱法等虽然具有较高的灵敏度，但操作复杂、耗时较长，难以满足快速检测的需求。

近年来，荧光适配体传感器因其高灵敏度、快速响应及操作简便等优点，在生物分析、食品安全检测等领域得到了广泛应用。

本文旨在研究基于荧光适配体传感器的快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用。

二、方法本研究采用荧光适配体传感器技术，通过生物分子识别原理实现对黄曲霉毒素M1的快速检测。

首先，设计并合成特异性识别黄曲霉毒素M1的荧光适配体。

然后，将荧光适配体与液态奶样品混合，通过适配体与AFM1的特异性结合，形成适配体-AFM1复合物。

在复合物形成过程中，荧光信号发生变化，通过检测荧光信号的强度变化，即可实现对AFM1的定量检测。

三、实验结果通过实验，我们成功制备了基于荧光适配体传感器的黄曲霉毒素M1检测系统。

该系统具有高灵敏度、快速响应的特点。

在最佳实验条件下，该系统对AFM1的检测范围为XX-XX ng/mL，且具有良好的线性关系。

同时，该系统对其他常见污染物无交叉反应，具有较高的选择性。

此外，我们还对实际液态奶样品进行了检测，结果表明该系统具有良好的实际应用价值。

四、讨论本研究利用荧光适配体传感器技术实现了对液态奶中黄曲霉毒素M1的快速、准确检测。

与传统的检测方法相比，该方法具有以下优点：一是高灵敏度，能够实现对AFM1的微量检测；二是快速响应，能够在短时间内完成检测；三是操作简便，无需复杂的样品前处理步骤；四是具有良好的选择性，能够避免其他污染物的干扰。

因此，该方法在食品安全检测领域具有广泛的应用前景。

《基于荧光适配体传感器快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用研究》范文

《基于荧光适配体传感器快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法及应用研究》篇一一、引言随着食品工业的快速发展，食品质量与安全成为人们关注的焦点。

黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）是乳制品中常见的一种污染物，其危害性极强，易对消费者健康构成威胁。

传统的检测方法通常存在操作复杂、耗时和成本高等问题，难以满足快速、准确的检测需求。

因此，研究开发一种快速、准确且成本低廉的黄曲霉毒素M1检测方法，对于保障食品质量与安全具有重要意义。

本文基于荧光适配体传感器技术，研究了一种快速检测液态奶中黄曲霉毒素M1的方法，并对其应用进行了探讨。

二、荧光适配体传感器原理荧光适配体传感器是一种新型的生物传感器技术，通过与靶标分子的特异性结合来实现快速、准确的检测。

该技术以适配体作为识别元件，利用其高特异性和高亲和性的特点，实现对目标分子的精确检测。

当适配体与目标分子结合后，会引起其构象变化，从而影响与之连接的荧光分子的发光特性，这种变化可被检测并转化为目标分子的浓度信息。

三、基于荧光适配体传感器的黄曲霉毒素M1检测方法本研究利用荧光适配体传感器的原理，结合生物工程技术和纳米技术，设计了一种新型的黄曲霉毒素M1检测方法。

具体步骤如下：1. 适配体的设计与合成：根据黄曲霉毒素M1的分子结构，设计并合成具有高特异性和高亲和性的适配体。

2. 传感器制备：将适配体与荧光分子进行连接，制备成荧光适配体传感器。

3. 样品处理：取待测液态奶样品进行处理，如离心、过滤等操作，去除可能干扰检测的物质。

4. 检测：将处理后的样品加入荧光适配体传感器中，观察荧光信号的变化。

5. 结果分析：根据荧光信号的变化程度，结合标准曲线，计算出样品中黄曲霉毒素M1的浓度。

四、方法应用及研究本研究将基于荧光适配体传感器的黄曲霉毒素M1检测方法应用于实际液态奶样品中。

通过对比传统检测方法和本方法的结果，发现本方法具有以下优点：1. 快速：本方法可在短时间内完成检测，大大缩短了检测周期。

超高效液相色谱-串联质谱法和胶体金快速定量法测定牛奶中黄曲霉毒素M1比较

2019年1月下摘　要：采用免疫亲和层析净化超高效液相色谱-串联质谱法和胶体金快速定量法测定牛奶中黄曲霉毒素M1含量，用这两种方法测定添加不同浓度黄曲霉毒素M1的牛奶，两种方法测定黄曲霉毒素M1牛奶样品的测定结果相对偏差小，相关性好。

胶体金快速定量法检测简便快速，能用于大批量样品的快速筛查。

关键词：牛奶；黄曲霉毒素M1；超高效液相色谱-串联质谱；胶体金快速定量1　前言黄曲霉毒素M1（AFM1）是由常见的黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的代谢产物，其物理化学性质稳定。

哺乳类动物摄入被AFB1污染的饲料后，在体内羟基衍生转化成AFM1。

AFM1的危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。

牛奶中的黄曲霉毒素主要来源于饲料。

黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为1类致癌物。

我国规定牛奶中黄曲霉毒素 M1含量不得超过0.5 μg/kg。

2　材料与方法2.1　材料与仪器PBS 清洗缓冲液（Charm公司）；AFM1、AFM1-13C17标准液（Romer公司）；AFM1免疫亲和柱（Romer公司）；玻璃纤维滤纸（Whatman公司）；ROSA黄曲霉毒素M1胶体金快速定量检测条（Charm公司，检测限0.5μg/kg）。

UPLC-Xevo TQ MS型超高效液相色谱-串联质谱仪（Waters公司）；孵育器、读数仪（Charm公司）。

2.2　方法2.2.1　免疫亲和层析净化超高效液相色谱-串联质谱法（1）样品前处理牛奶中的黄曲霉毒素M1含量测定一般按照GB 5009.24-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M族的测定》第一法同位素稀释液相色谱-串联质谱法进行测定。

（2）液相色谱条件色谱柱：CORTECS UPLC C18 Column，（1.6 μm，2.1 mm X 100 mm）；流动相A为乙腈；流动相B为0.2%甲酸水梯度洗脱；柱温为40℃；进样量为5μl。

液体乳中黄曲霉毒素M1的快速检测胶体金免疫层析法

液体乳中黄曲霉毒素M1的快速检测胶体金免疫层析法（征求意见稿）1范围本方法规定了牛奶、羊奶、牦牛奶等液体乳中黄曲霉毒素M1的胶体金免疫层析快速检测方法。

本方法适用于生鲜乳、灭菌乳（巴氏奶、UHT奶）中黄曲霉毒素M1的快速测定。

2原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。

样品中的黄曲霉毒素M1与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。

通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中黄曲霉毒素M1进行定性判定。

3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

3.1试剂甲醇。

3.2参考物质黄曲霉毒素M1参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥90%。

表1黄曲霉毒素M1参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量注：或等同可溯源物质。

3.3标准溶液的配制3.3.1黄曲霉毒素M1标准储备液（100μg/mL）：精密称取适量黄曲霉毒素M1标准品（3.2.1），置于10mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的黄曲霉毒素M1标准储备液。

-20℃避光保存备用，有效期3个月。

3.3.2黄曲霉毒素M1标准中间液（100ng/mL）：精密量取黄曲霉毒素M1标准储备液（100μg/mL）（3.3.1）0.1mL，置于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100ng/mL 的黄曲霉毒素M1标准中间液。

临用新制。

3.4材料黄曲霉毒素M1胶体金免疫层析试剂盒，适用基质为牛奶。

3.4.1金标微孔。

3.4.2试纸条或检测卡。

4仪器和设备4.1移液器：200µL、1mL和10mL。

4.2涡旋混合器。

4.3电子天平：感量为0.01g。

4.4环境条件：温度15℃—35℃，湿度≤80%。

5分析步骤5.1试样制备取适量有代表性样品充分混匀。

酶联免疫吸附和胶体金技术对黄曲霉毒素M1检测的结合验证

Quality Control质量安全酶联免疫吸附和胶体金技术对黄曲霉毒素M1检测的结合验证乔宽，王路阳，王艳飞，张云鲜，时长旭蒙牛乳业（焦作）有限公司，河南焦作 454100摘要：[目的]为准确完成生牛乳中黄曲霉毒素M1检测。

[方法]对比分析酶标仪、胶体金读数仪检测生牛乳中黄曲霉毒素M1的处理过程和检测数据。

[结果]发现2 种方法检验操作过程各有优劣，检测结果能满足不同需求。

酶标仪可用于半定量检测，并进行精准检测和半定量复核。

胶体金读数仪适合快速定性筛查。

[结论]2 种方法可配合使用，相互补充，灵活运用设备优势，高效完成检测需求。

关键词：酶标仪；胶体金读数仪；黄曲霉毒素M1；生牛乳文章编号：1671-4393（2024）01-0069-05 DOI:10.12377/1671-4393.24.01.130 引言黄曲霉毒素（AFT）是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素。

其衍生物有约20 种，分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等。

其中B1的毒性最大，致癌性最强。

动物食用黄曲霉毒素污染的饲料后，在肝脏、肾脏、肌肉、血液、乳汁及蛋品中可测出极微量毒素[1]。

黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）是动物摄入黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）后在体内经羟基化形成的代谢产物，毒性仅次于AFB1，WHO将其列为ⅡB类致癌物。

AFM1主要存在于动物的乳汁、肾脏、肝脏、蛋、肉和尿中，以乳中最常见。

牛乳及其制品是易受黄曲霉毒素污染的食品之一[2，3]。

若把发霉谷物作为饲料饲喂动物，其中的黄曲霉毒素在24 h之后就能进入乳中。

黄曲霉毒素被动物食用后，一部分会蓄积在体内，另外一部分会转化到乳汁和尿液中，转化率一般为3.45%～11.39%，排出AFM1的量为AFB1摄入量的1%～3%。

黄曲霉毒素M1进入人或动物体内后，除抑制DNA、RNA合成外，也抑制肝脏蛋白质合成，导致人体中毒。