手性药物HPLC分析
手性药物的分离在色谱法中的应用
手性药物的分离在色谱法中的应用
手性药物是指具有手性结构的药物分子，即能够存在两种非重叠的立体异构体，分别为左旋体和右旋体。
左旋体和右旋体的生物学活性、药理学效应以及代谢动力学等方面可能存在显著差异。
对手性药物的分离具有重要的意义。
色谱法是一种常用的分离手性药物的方法，可通过多种不同的基质和条件实现手性药物的分离。
色谱法是通过样品在固定或移动相上的分配和传递行为实现分离的方法。
常见的色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和超高效液相色谱法（UPLC）等。
高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于药物分析的方法。
在手性药物的分离中，HPLC常用的手性担子包括α-酮基-β-环糊精、β-环糊精、碘化环糊精等。
这些手性担子能够与手性药物形成包合物，从而实现手性药物的选择性分离。
还可以通过改变流动相的组成、pH值和温度等条件来调节手性药物与手性担子之间的相互作用，进一步优化分离效果。
HPLC分离后的手性药物可以通过光学旋光仪进行旋光度测定，以确定药物的手性纯度和相对含量。
手性药物HPLC分析
一、概述
分子中含有手性中心的药物为手性药物.
20世纪90年代以来, 药物的光学活性与生 物活性之间的关系引起人们日益重视,手 性药物的研究与开发已成为国内外医药 工作者的一个重要研究方向.
一、概述
手性药物的研究近二十年来发展速度 较快. 2001年诺贝尔化学奖授予3位从 事不对称反应研究的科学家.
法严格控制起始原料或试剂的光学纯 度,制定合理可行的手性杂质的限度.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
1. 直接从起始原料或试剂中引入 其次要根据后续反应的机理,充分分
析后续反应是否会影响已有手性中心 的构型,如可能会产生影响时,应研究 与优化工艺条件,尽量避免或减少外
消旋化的产生.
引入手性环境使对映异构体间呈现物理特性的 差异是手性HPLC进行光学异构体拆分的基础.
四、手性药物的HPLC分析方法
手性固定相法
色谱柱：Chiral-AGP (100mm×4.0mm) 流动相：含0.5％异丙醇的20mM醋酸铵 缓冲溶液（pH4.1，醋酸盐总浓度约 110mM） 流 速：1mL/min 检测波长：225nm
一、概述 单一异构体药物
消旋体药物中的药理活性和治疗作用只由单一 对映体产生. 消除（或减轻）原有混旋体药物的副作用； 降低使用剂量； 提高疗效； 故使用单一活性异构体代替外消旋体药物, 已成为当今制药业的趋势. 2003年世界销售额领先前10之一： 降血脂药辛伐他丁、胃酸分泌抑制剂艾美拉唑
3
HO HO
CH2
C COOH CH3 3
四、手性药物的HPLC分析方法
L-甲基多巴样品中D-对映体的限量检查 流动相添加剂法
手性药物的分离在色谱法中的应用
手性药物的分离在色谱法中的应用手性药物是指具有手性结构的药物。
它们可以分为左旋和右旋两种类型，两者化学性质相同，但左右旋异构体对生物系统的影响却截然不同，这种现象被称为手性诱导失活效应。
因此，在制药过程中需要对手性药物进行分离，以确保药效和安全性。
色谱法是分离手性化合物的主要方法之一，其基本原理是利用不同化合物的物理、化学性质差异，通过分离柱将混合物中的目标物分离出来。
以下是一些色谱法在手性药物分离中的应用。
手性高效液相色谱法（HPLC）手性HPLC是目前最常用于手性药物分离的方法之一，它是利用手性固定相在悬浊液中对手性化合物进行分离。
具有手性结构的固定相与目标分子相互作用，从而实现分离。
手性HPLC可以分别采用手性固定相或手性混合物来进行分离。
此外，在手性HPLC中，主要可以采用簇列技术或化学反应转化手性方法来提高分离效率和选择性。
毛细管电泳（CE）毛细管电泳是一种基于电化学原理的分离技术，它利用电场将样品中的分子分离。
在毛细管电泳中，可以采用手性高分辨涂层来进行手性药物的分离。
在此基础上，还可以采用手性化合物作为毛细管填充剂，进一步提高分离效率和分离度。
气相色谱法（GC）气相色谱法是一种利用气体作为流动相的色谱法。
在处理手性药物时，通常需要使用手性柱和手性混合物。
与HPLC不同，该方法的分离依赖于分子间的“挤压”力。
因此，手性柱具有不同的式样，以保证灵敏度和选择性。
超临界流体色谱法（SFC）SFC是一种介于HPLC和GC之间的色谱法。
它使用超临界流体作为移动相，可以在温度和压力条件下实现高效率的手性药物分离。
通常使用手性柱和手性对映异构体混合物进行分离。
此外，还可以应用具有特定分子功能的催化剂来提高分离效率。
总之，手性药物分离是一项非常复杂的任务，需要使用不同的色谱技术和方法来实现。
无论是HPLC、CE、GC还是SFC，它们都有各自的优缺点和适用范围，因此在选择分离方法时需要综合考虑样品特性，实验设备和分离效率与成本等因素。
浅谈高效液相色谱(HPLC)在目前手性药物分析领域中的应用
体进行分离。铜和锌等都是常用的配位金属。氨基酸及衍生物、 多巴胺、氧氟沙星等均可用此类方法分离[4]。由于目前为止还未 发现任何一种试剂可以作为通用型试剂，所以在选择手性试剂时 可能会经过多次尝试，选择分离效果最好的手性添加剂。
2.3 手性衍生化试剂法（CDR） 当满足以下条件时可以使用手性衍生化试剂法：①手性化 合物对映体中有氨基、羟基或羧基等基团，其容易发生衍生作 用；②反应产物具有稳定的化学性质，手性试剂具有稳定的手 性性质，以及较高的光学纯度，不易发生变化，不会在色谱条 件下发生消旋化反应[5]。根据手性化合物对映体中有氨基、羟 基或羧基等基团以及分离效率之间的差别，将反应产物进行分 离。胺类试剂、酰化试剂氯甲酸酯类等均是目前常用的衍生化 试剂。因为该类方法是使用普通色谱柱，因此成本较低，分离 的灵敏度较高。
过去常使用酶消化法、分布结晶法等非色谱方法对手性药 物进行拆分，拆分过程耗时、烦琐，具有较大的不可控性，近 年来随着色谱技术的不断发展，在对手性药物进行拆分方面有 了较为广泛的应用[2]。 目前在手性药物进行拆分时较为常用的 方法有气象色谱、毛细管电泳和毛细管色谱以及高效液相色谱 法等，其中高效液相色谱法（HPLC）以其反应速度快、效率 高、准确性强等特点被广泛应用。
究进展[J].药物分析杂志,2015,35(7):1127-1133. [2] 刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用
[D].成都:西南大学,2008. [3] 潘永玉.手性药物的对映体分离方法与药物动力学研究[D].沈阳:
沈阳药科大学,2007. [4] 康自华,阳小成,陈婷.高效液相色谱法在药物分析中的应用[J].广
高效液相色谱（HPLC）是一种在近年来被广泛应用的色 谱分析方法，其与传统色谱法相比，具有效率高、灵敏性高和 分析分离速度快等优点。高效液相色谱法原理上可对所有的 热稳定性差、沸点高和相对分子质量大的有机物进行分离和分 析，其不仅可用于对手性药物的定量分析，而且可用于制备分 离，在手性药物分析领域具有较为广泛的应用。
手性药物拆分技术及分析
手性药物拆分技术及分析在药物研究和开发中，手性药物是一个非常重要的领域。
手性药物指的是分子结构中含有手性中心（手性碳原子）的化合物，左旋和右旋两种异构体具有不同的生物活性和体内代谢途径。
因此，正确地分析和分离手性药物对于药物研究和有效性的评估至关重要。
手性药物分析技术主要包括色谱法、光学活性法和核磁共振（NMR）法。
色谱法是一种常用的手性药物分析方法。
它基于手性药物的两种对映异构体在手性固定相上的不同吸附能力进行分离。
常见的色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）和毛细管电泳法。
HPLC通常使用手性固定相柱，通过选择性地吸附左旋或右旋手性分子，实现对手性药物的分离。
毛细管电泳是一种高效的手性药物分析方法，基于对映异构体在电场中的迁移速率不同，通过毛细管中背景电解质的浓度和pH值调节来分离手性药物。
光学活性法是一种基于光学活性性质来分析和测定手性药物的方法。
光学活性手性药物由于具有旋光性，可以引起光的偏振方向发生旋转。
常用的光学活性法包括旋光仪法和圆二色光谱法。
旋光仪法是通过测定手性分子对光的旋转角度来判断手性药物的对映异构体的含量和比例。
圆二色光谱法则是测量手性分子对不同波长光的吸收性质，通过对波长的差异来判断手性药物的对映异构体。
核磁共振（NMR）是一种基于核磁共振现象来分析手性药物的方法。
NMR技术通过检测手性碳原子或核自旋的信号来确定手性药物的结构和对映异构体的比例。
通过对样品进行核磁共振实验后，通过解释谱图的峰位和峰形等信息，可以得到手性药物的分析结果。
此外，还有一些其他的手性药物分析方法，如质谱法、X射线衍射法和环光谱法等。
这些方法在手性药物分析中各有优劣，适用于不同类别和性质的手性药物。
总之，手性药物分析技术对于药物研究和评估的重要性不可忽视。
科学家们通过不断研究和发展新的手性分析技术，为新药开发和治疗提供了更可靠和准确的手性药物分析方法。
高效液相色谱法在手性药物拆分中应用
高效液相色谱法在手性药物拆分中的应用纲要：外消旋化合物的手性分别是获取单调对映体的方法之一。
跟着人们对纯光学药物的需求日趋增添，各样手性分别技术得以快速发展。
近几十年来，在这些手性分别技术中，高效液相色谱法( HPLC ) 被公以为是一种强盛、快速、高效的分别技术，它已成功应用于对映体药物的分别剖析和制备中。
HPLC 用于敌手性药物分别的研究已获得很大进展，而且研发了大批可应用于手性小分子和聚合物分别的手性固定相，大大提升HPLC 的手性辨别能力。
本文以HPLC 的手性药物分别为焦点，介绍了近几年高效液相色谱法手性固定相的新发展和应用。
重点词：高效液相色谱法手性药物手性拆分Application of High Performance Liquid Chromatography in Chiral Separation of PharmaceuticalsAbstract：Resolution of racemic compounds is one of the potential ways of obtaining both enantiomers. The increasing demand for enantiopure drugs has led to the development of a variety of stereoselective separation technologies. Among several resolution techniques in the past few decades, high performance liquid chromatography ( HPLC ) is well recognized as a powerful, fast and efficient technique, which has been successfully employed for analysis and preparation of enantiomers of drugs. Enantioseparation by HPLC has significantly advanced, and a large number of chiral stationary phases ( CSPs ) for HPLC have been developed using both chiral small molecules and polymers with chiral recognition abilities. This review focuses on various HPLC methods for chiral separation of pharmaceuticals, many new developments and applications are introduced in chiral stationary phase of HPLC in recent years.Keywords：HPLC; Chiral drug; Chiral separation;引言手性药物是指药物分子构造中引下手性中心后，获取的一对互为实物与镜像的对映异构体，是当前药物研究领域的热门之一。
手性药物分离分析技术概况
手性药物分离分析技术概况手性药物是指具有立体异构性质的药物，它们的左右对称体被称为对映体。
由于对映体的结构和性质存在差异，它们对体内的相互作用和药效也可能有显著影响。
因此，对手性药物进行分离分析是药物研究和制备过程中非常重要的一环。
手性药物的分离分析技术包括物理分离方法和化学分析方法。
物理分离方法是基于对映体之间物理性质的差异进行区分，常用的技术包括手性色谱、手性电泳和手性萃取。
化学分析方法则是通过制备具有对映体选择性的试剂进行分析，包括手性固相微萃取、手性气相色谱和核磁共振等。
手性色谱是分离分析手性药物常用的技术之一，包括手性高效液相色谱（HPLC）、手性毛细管电泳（CE）和手性薄层色谱（TLC）。
其中，HPLC是最常用的手性色谱技术。
它利用手性色谱柱上的膜相对对映体进行区分，可分离不同的对映体。
HPLC分离手性药物的条件包括手性色谱柱类型、流动相组成和温度控制等。
手性电泳是基于电泳效应进行分离，包括毛细管区带电泳和开管电泳。
手性电泳技术能够快速分离对映体，具有高效、高分辨率和低样品消耗的特点。
手性萃取是通过特定的手性选择性试剂将对映体分离出来，常用的手性萃取试剂包括环糊精和几丁聚糖等。
手性萃取技术通常结合其他分析方法进行测定。
手性固相微萃取是一种基于固相萃取原理的手性分离技术，它利用手性固相微柱提取对映体物质，再通过其他方法进行分析。
它具有简单、灵敏和高效的特点。
手性气相色谱是通过将样品分离的物质与手性气相色谱柱上的手性烷基硅氧烷相互作用，达到对映体的分离。
手性气相色谱具有高分辨率、高灵敏度和高选择性。
核磁共振是通过核磁共振技术对手性药物进行分析，其中最常用的是氢核磁共振技术。
核磁共振技术能够提供对映体的结构、构象和化学位移等信息。
同时，光谱仪也可以通过测定两个对映体的旋光度差异进行分析。
总之，手性药物分离分析技术是药物研究和制备过程中必不可少的技术。
通过选择适当的分离技术，可以有效地分离对映体，获得具有高纯度的手性药物，并研究其生物活性和作用机制。
药物分析手性hplc
一、手性药物的拆分方法与机制
1950年Dalgliesh采用纸色谱拆分了手性药物芳族氨基 酸，由此提出三点相互作用的理论概念，这就是“三点 手性识别模式”他认为至少有三个作用力，其中一个要 有立体选择性，可以是吸引的也可以是排斥的。这些作 用力可以是氢键、偶极-偶极作用、π-π作用，经典作用 疏水作用或空间作用
Байду номын сангаас
• 三种手性分离方法的比较
CDR优点：条件相对简易，只需采用普通HPLC的 固定相和流动相即可，而且通过衍生化有利于增 加检测灵敏度；缺点：样品中相关化合物须预先 分离、衍生化手性试剂的光学纯度的要求高以及 异构体对的衍生化反应速率不一 CMP优点：不必做柱前衍生化；对固定相也无特 殊要求；样品的非对映异构化络合具有可逆性而 且有利于制备。缺点：可拆分的化合物范围有限； 某些添加剂不够稳定而且往往会干扰检测 CSP优点:能广泛用于各类化合物，制备分离方便， 定量分析的可靠性较高。缺点：样品有时须做柱 前衍生化，对样品结果有一定的限制，其适用性 尚不及普通HPLC的固定相那样广泛
（一）柱前手性衍生化法
对映异构体与手性试剂反应，其产物为相应的非对映异构 体对。本法需要高化学纯度的手性衍生化试剂，衍生化反 应往往比较繁琐时，各对映体生化反应的速率有时也不同
（二）手性流动相拆分法
1.配基交换型手性添加剂 2.环糊精类添加剂 3.手性离子对络合剂 （三）手性固定相拆分法
药物研究中手性分离分析方法及技巧
药物研究中手性分离分析方法及技巧药物研究中手性分离分析是指将手性药物中的手性异构体（也称为对映体）分离出来，并进行定量分析。
由于手性异构体具有不对称的结构，其物理化学性质和药理活性可能差异巨大，因此手性分离分析对于药物研究具有重要意义。
以下将介绍几种常用的手性分离分析方法及技巧。
1.气相色谱法（GC法）：GC法是通过在手性固定相柱上进行气相色谱分析，分离手性异构体。
该方法基于手性碳氢化合物在手性固定相上的不同吸附能力来实现手性分离。
同时，通过合适的手性底物和手性固定相的选择，还可以更好地提高手性分离的选择性和灵敏度。
2.液相色谱法（HPLC法）：HPLC法是手性分离分析中最常用的方法之一、常见的手性固定相有手性液相、手性离子对和手性硅胶等。
通过在手性固定相上进行液相色谱分析，利用手性化合物在固定相上的差异相互作用，实现手性分离。
此外，还可以结合负载式手性液相色谱法、手性离子对液相色谱法等技术，提高手性分离效果。
3.毛细管电泳法（CE法）：CE法是一种高效、快速的分离技术，特别适用于分析手性药物。
通过在毛细管中施加电场，利用手性化合物在毛细管中的迁移速率差异实现分离。
此外，还可以通过改变运行缓冲液的组成、pH值等条件，调节手性分离的选择性和分离效果。
除了上述主要的手性分离分析方法外，还存在一些辅助技巧和方法，可以进一步提高手性分离的效果：1.共处理：将两个手性化合物混合在一起进行共处理，通过比较混合物中手性峰的相对峰度等信息，来判断手性分离的效果。
2.离子对调整：通过调整分析液中离子对的浓度和种类，来改变手性分离的效果。
一般来说，手性离子对可以提高手性分离的分辨率和选择性。
3.pH调控：通过改变液相色谱系统中溶液的pH值，可以影响毛细管电泳法和液相色谱法中手性分离效果。
pH值的改变可以调节化合物分子的电荷状态，从而影响手性分离的选择性。
总之，手性分离分析方法及技巧在药物研究中起着重要的作用。
通过合理选择合适的手性分离方法，并结合辅助技巧和方法，可以实现对手性异构体的高效、准确的分离和定量分析，从而为药物研究提供有价值的数据。
手性药物的分离在色谱法中的应用
手性药物的分离在色谱法中的应用手性药物是由手性分子组成的药物，它们的各种生物活性和药效是与它们的绝对构型直接相关的。
在许多情况下，手性药物的两种异构体（左手和右手）的活性和毒性可能截然不同。
因此，对这些药物分子的分离和纯化成为了化学、药物研究领域的一个重要问题。
高效液相色谱法（HPLC）是一种优秀的手性药物分离和纯化的方法，其领先的分辨能力和分离效率使其在药物研究领域崭露头角。
1. 手性药物分离的基本原理手性药物分离的基本原理是结合拥有不同手性的分离柱，例如手性固定相柱和手性选择相柱。
手性固定相柱的分离机理，与分子中原子的手性不同，能产生化学和物理相互作用，因此在不同的分离相互作用下，左手和右手异构体会被分离。
手性选择相柱的分离机理与样品和手性配体的互作用有关，通过配体的稳定性和与样品的选择性作用，达到左右异构体的选择级别不同的以分离目的。
（1）手性固定相柱分离法手性固定相柱分离法是一种基于手性固定相柱的手性药物分离方法，有机合成手法制备的手性固定相柱通常包括手性多醇、手性脂肪酸、手性聚醚和手性多肽等，选择手性固定相柱进行手性分离具有选择性强、效果稳定等特点。
此外，其中含有胆固醇和环糊精等手性结构的化合物也可以应用于该方法。
手性选择相柱从手性配体分离药物，它与手性固定相柱的分离原理有所不同。
手性选择相柱通常包括带有手性标识化合物的蛋白质和不带手性标识的蛋白质。
在hand选择相柱分离中，手性标识的配体与药物分子的性质相似，可以通过配体特异性识别挑选出最终形成单独的物质。
总之，手性药物分离是药物研究和生产中的重要问题。
色谱法是一种优秀的手性药物分离和纯化技术，因其分辨率和分离效率高，在手性药物的制备和应用中具有广泛的应用前景。
高效液相色谱法在手性药物对映异构体拆分中的应用
高效液相色谱法在手性药物对映异构体拆分中的应用随着不对称合成技术及手性拆分技术日趋成熟，手性药物研究已经成为新药研发的一大热点。
由于手性药物的对映体之间在药效学、药代动力学等方面存在较大差异，因此建立手性拆分的质量控制方法十分重要。
一、什么是手性异构和对映异构体当药物分子中碳原子上连接有4个不相同的基团时，该碳原子被称为不对称碳或手性碳（中心），会导致药物分子存在异构体，如果两个异构体之间的关系如同一个物体的立体结构在照镜子，这个立体结构和它在镜子中的像互为对映异构体（对映体）。
图1是手性对映异构体的图示。
图1手性对映异构体图示对映体具有相同的物理性质（如熔点，沸点，溶解度，折射率，酸性，密度等），热力学性质（如自由能，焓、熵等）和化学性质。
除非在手性环境（如手性试剂，手性溶剂）中才表现出差异。
对映体对偏振光的作用不同，它们的比旋光度数值相同，但方向相反。
对映体的生物活性不相同，化学反应中表现出等速率。
等量的左旋体与右旋体的混合物构成外消旋体。
从对映体中分离出单纯一个光学异构体的方法称手性拆分。
最普通的手性拆分方法是消旋旋体与光学活性相反的离子（称拆分剂）作用生成非对映体。
手性药物对映体拆分的方法主要有非色谱法和色谱法。
非色谱法（主要包括结晶法、微生物消化法等）耗时长，过程繁琐不能制备高纯度对映体，色谱法是基于把对映体的混合物转换成非对映异构体，然后利用它们在化学或物理性质上的差异进行分离。
主要包括气相色谱(GC)、超临界流体色谱(SFC)、毛细管电泳(CE)和毛细管电色谱(CEC)等。
表1罗列了色谱手性拆分的发展史。
其中高效液相色谱(HPLC)因其独特的优势成为手性分析领域最常用的一种技术。
表1色谱手性拆分发展史年份里程碑1939年Henderson和Rule在乳糖上色谱分离外消旋樟脑衍生物1984年Armstrong和DeMond：制备出硅胶键合环糊精固定相二、HPLC手性拆分方法手性药物拆分法通常分为直接法和间接法两大类。
手性药物的拆分高效液相色谱HPLC
1.3 环糊精手性固定相
OH
HO O OHOHO
OHO OH O
HO
OH
O OH
O
OH O
HO
OH
O OH
O OH
O
OHO OH O OH
HO
?-CD环状构型（俯视图）
环糊精包封药物的立体结构
环糊精分子中每个葡萄糖单元含有5个手性碳原子，如β-CD含有 35个手性碳原子，同时与各种有机分子形成包容配合物，分子 整体上具有光学活性和立体识别能力，是一种理想的手性选择剂
? 此类CSPs还有几个显著的缺点：负载量低， ? 进样量大于 lμg就可观察到过载现象；对周围环境过
于敏感， 0.1单位的 pH值变化就可 ? 能导致容量因子 20％的变化；稳定性差，必须使用
预柱提高寿命；结构选择性差，很容易受干扰。
1.7其它类CSPs
? 1.配体交换类 CSPs
? 当配体给出的电子能够进入过渡金属空的 d轨道， 就能形成金属配位络合物。这种配位络合物具有非 常明确的几何形状，配体在空间只能占据某种给定 的位置，配体交换手性色谱分离的机理就是基于此。
? 随着异丙醇含量的减少,流动相的极性减弱,对映体在CDMPC 上的保留逐渐增强,分离度逐渐增大;但分离因子基本不变,说 明流动相极性的改变不影响手性固定相识别的实质。
? 除托品酸和酮洛芬外,其它溶质都获得了基线分离。
? CDMPC上手性识别主要取决于溶质的结构,包括大小、形状 和环的数目。
? 西替立嗪在固定相上的保留最强,获得了最好的分离;而托品 酸保留虽强,却只获得部分分离,说明溶质保留的强弱并不是 手性识别的关键因素,可能溶质在固定相手性空腔中的包容作 用以及溶质体积大小和立体结构对其适应性才是关键。
手性动态固定相HPLC法拆分2甲胺基2邻氯苯基环己酮对映体
催化与分离提纯技术手性动态固定相HPLC 法拆分2-甲胺基-2-邻氯苯基环己酮对映体李乃瑄，肖如亭，高素华，杨俊杰（天津理工学院化学工程系，天津300191）＊摘要：在Nov a-Pak PhenyI 色谱柱上建立了拆分2-甲胺基-2-邻氯苯基环己酮（氯胺酮）对映体的H PLC 方法。
以甲醇、（c H3 PO4 ）= 0. 2 m mo I / L 磷酸水溶液为流动相，V（甲醇）1 V（磷酸）= 45155，再添加N-苄氧羰基-S-苯基-L-半胱胺酸（BPC）为手性动态固定相试剂，（c BPC）= 6. 5 mmo I / L，流动相流速 1. 0 m L / m i n，检测波长254 nm，氯胺酮对映体的分离选择性系数 1. 08，分离度1. 94，质量浓度测定的线性范围0. 1 ~ 2. 0 mg/m L，相对标准偏差0. 30% ~ 0. 68% ，最小检测限为0. 78 !g。
关键词：2-甲胺基-2-邻氯苯基环己酮；氯胺酮；拆分；对映体；H P L C；手性动态固定相试剂中图分类号：O658 文献标识码：A 文章编号：1003 - 5214（2003）07 - 0396 - 03R es o l u t i o n of 2-M e t hy l a m i n o-2-!-c h l o r o ph e ny l c y c l o h e x a n o n e En a n t i o m e r s by HPLC with Ch ir a l Dyn a m i c S t a t e S t a t i o n a r y P h a seLI N a i-x u a n，X I A O Ru-t i n g，G A O S u-hua，YANG un-ji e（D e pa rt m e n t of Ch e m i ca l Eng i n e e r i ng，T i an j i n I n s t i t u t e of T e chno l ogy，T i an j i n300191，Ch i na）Ab s t r ac t：R es o I u t i o n of e n a n t i o m e r s of 2-m e t hy I a m i n o-2-o-c h I o r o ph e ny I cyc I o h e x a n o n e（k e t a m i n e）w as s t ud i e d by means of HPLC. MethanoI and 0. 2 mmoI / L agueous ph os ph o r i c a c i d〔V（m e t h a n o I ）1 V （agueous ph os ph o r i c a c i d）= 45155〕was used as m o b i I e ph as e，c o n t a i n i n g N-b e n z y I o xyc a r b o ny I-S- ph e ny I-L-cy s t e i n e（BP C）〔（c BPC）= 6. 5 mmoI / L〕as c h i r a I dy n a m i c state s t a t i o n a r y phase age n t，a t fIow rate of 1. 0 m L / m i n i n Nova-P ak PhenyI c oIumn w i t h UV-detector of 254 nm. Th i s method ga v e se p a r a t i o n s e I e c t i v i t y c oe ff i c i e n t of 1. 08，se p a r a t i o n degree of 1. 94，I i n ea r range of 0. 1 - 2. 0 m g/mL and r e I a t i v e standard d e v i a t i o n of 0. 30% - 0. 68% i n d e t e r m i n a t i o n of c o nc e n tr a t i o n.The m i n i mumd e t e c t i o n I i m i t w as 0. 78 !g.K e y w o r d s：2-m e t hy I a m i n o-2-o-c h I o r o ph e ny I cyc I o h e x a n o n e；k e t a m i n e；r es o I u t i o n；e n a n t i o m e r；H P L C；ch i r a I dy n a m i c state s t a t i o n a r y phase age n tF o und a ti o n it e m：N a t u r a I s c i e nc e f o und a t i o n of T i a n ji n c i t y（023606811）；S c i e nc e and t e c hn o I og yf o und a t i o n of T i a n ji n c i t y e duc a t i o n c o mm i ss i o n（01-20510）2-甲胺基-2-邻氯苯基环己酮（商品名氯胺酮，k e t a m i n e）是外科临床常用的一种胃肠外神经麻醉药，目前一直以外消旋体形式入药。
色谱技术在手性药物拆分中的应用分析
色谱技术在手性药物拆分中的应用分析色谱技术是一种广泛应用于化学分析领域的分离和鉴定方法。
在手性药物的研究和开发过程中，色谱技术起着重要的作用。
本文将从手性药物的定义开始，介绍色谱技术在手性药物拆分中的应用分析。
手性药物是指分子结构中存在非对称中心，其分子构型可以存在两个立体异构体，即对映异构体。
这两种立体异构体被称为手性对，分别是左旋异构体和右旋异构体。
右旋异构体通常被称为R体，左旋异构体被称为S体。
在生物体内，由于手性药物与蛋白质、酶等分子的立体选择性相互作用，两个手性异构体的药效、药代动力学和毒理学性质可能存在差异。
拆分手性药物的目的是将其两个手性异构体分离出来，以便对它们进行独立的研究和评价。
色谱技术由于其高效、灵敏、准确和可靠的特点，成为了拆分手性药物的首选方法。
液相色谱技术（HPLC）是最常用的手性药物拆分方法之一。
HPLC通过对手性分子与手性固定相之间的相互作用进行分离。
手性固定相通常是由手性区分聚合物或小分子手性配体涂覆在硅胶微球上形成的。
选择合适的手性固定相和流动相，可以实现对手性药物的定量和定性分离。
气相色谱技术（GC）也可以用于手性药物的拆分。
在GC中，手性药物通常通过在毛细管柱上涂覆手性化合物实现分离。
毛细管柱上的手性化合物会与手性药物产生手性识别作用，从而使两个手性异构体分离。
超高效液相色谱技术（UHPLC）、离子色谱技术（IC）和凝胶渗透色谱技术（GPC）等也可以应用于手性药物的拆分分析。
这些技术可以进一步提高分离效率和灵敏度，并增加对手性药物性质的了解。
色谱技术是一种在手性药物拆分中广泛应用的分析方法。
通过选择合适的手性固定相和流动相，液相色谱和气相色谱都能有效地分离手性药物的两个手性异构体。
超高效液相色谱、离子色谱和凝胶渗透色谱等技术的应用，可以进一步提高分离效率和灵敏度。
这些研究为合理设计和开发手性药物提供了有力的支持。
HPLC手性固定相法在体内药物分析中的应用
手性柱的分类和应用举例
配体交换相 将手性配体通过各种间隔基与硅胶键合，属亲水性
固定相。通过一个金属离子与一个配体分子和一 个对映体溶质分子结合成可逆的非对映体而达到 分离。 例：苏丹等[16]用Phenomenex chirex 3126 配体色 谱柱，对肌肽对映体进行了拆分。。
手性柱的分类和应用举例
❖ 直接法 手性选择剂键合到固定相表面或加入流动相中， 药物对映体通过与手性选择剂形成的暂时的非对 映络合物的能量差或稳定性不同而达到分离的目 的。 手性固定相法（CSP）
手性柱的分类和应用举例
π-氢键型键合固定柱 将有光学活性的有机小分子通过一定间隔基键合到硅胶柱上。 以Pirkle型应用最为广泛。 分离原理在与溶质间的n-n相互作用，氢键作用和偶极-偶极作用。 Pirkle型手性固定相通过链烃基将手性有机小分子链接到硅胶载体上制得。含端
❖Astec Cellulose DMP系列(纤维素型手性柱),适 用于正相、极性有机和SFC模式；
❖Astec P-CAP和P-CAP-DP系列(多环胺聚合物手 性柱),溶剂范围广；
❖Astec CLC (Copper Ligand Exchange) 系列( 配位交换型手性柱),用于分析非芳香有机酸、氨基
手性柱的分类和应用举例
含碳水化合物的手性固定相 包括醋酸纤维素、 其他纤维素衍生物（如环糊精、冠醚）和直链淀 粉等。
纤维素-三苯甲酸酯涂敷在氨丙基硅烷化硅胶上便得 到CTB固定相
手性柱的分类和应用举例
含碳水化合物的手性固定相
微晶纤维素+异氰酸苯酯→纤维素-三苯基氨基甲酸 酯
三苯基氨基甲酸酯涂敷在氨基键合的硅胶上 →CTPC
反应停事件
手性药物的药代动力学
手性药物的拆分——高效液相色谱(HPLC)
SiO2
OH
(CH3O)3Si(CH2)3NH(CH2)2NH2 SiO2
O Si(CH2)3NH(CH2)2NH2
(1)
(OH)2
H3C
SO2Cl
(OTs)2
(2)
SiO2 O
n(NHR)
H2NR
SiO2 O
β-CD固定相改性过程
n(OTs)
1.5 刷型手性固定相
刷型手性固定相（CSP）是通过链烃基将手性有机 小分子链接到硅胶载体上制得，又叫Pirkle型手性固 定相。
刷型手性固定相的合成主要有两种途径，即含端羧 基或异氰酸酯基的手性基团的化合物与氨基键合硅 胶进行缩合反应，分别形成含酰胺型或脲型结构的 手性固定相：
OH
O
+
O
H
OH
OH
n
NCO
OCONH
H
NHOCO
O
O OCONH
n
3.纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）（CDMPC）
商品名为手性OD柱，具有极高的光学拆分能力，是广泛使用的 手性固定相之一。以微晶纤维素与3，5-二甲基苯基异氰酸酯反 应，将生成的纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）以 15%的量涂敷在氨丙基硅胶上，制得CDMPC-CSP：
Dalgliesh 三点相互作用
a
b
Y d
c (S)-选择剂
A
D
X
B
C （R)-对映体
a
b
药物分析中的手性分析技术研究
药物分析中的手性分析技术研究手性分析技术在药物分析中的研究药物是人类对抗疾病的重要工具，但很多药物都存在手性的特性。
手性分析技术的发展对于药物的研究与合成具有重要的意义。
本文将介绍药物分析中的手性分析技术及其研究进展。
一、手性与药物手性是化学中常见的现象，指的是分子存在两个非重叠的立体异构体，分别被称为左旋体和右旋体。
由于手性分子的空间结构不对称，其在生物体内的代谢与作用机制往往存在差异。
一种手性药物的两个异构体在生物作用上可能具有完全相反的效果。
因此，对手性药物的手性分析具有重要的理论和实践意义。
二、手性分析技术的原理在药物分析中，常用的手性分析技术主要包括气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）、毛细管电泳法（CE）等。
这些技术利用手性分离柱或手性分离剂作为分离介质，通过衡量手性分子的分离度来确定样品中手性异构体的相对含量。
1. 气相色谱法（GC）气相色谱法是一种常用的手性分析技术。
该技术利用手性柱通过手性相互作用实现手性分离。
常见的手性柱包括化学手性柱和拓展手性柱。
气相色谱法具有分离度高、分析速度快、准确性高的优点，广泛应用于药物分析中。
2. 液相色谱法（HPLC）液相色谱法是另一种常用的手性分析技术。
该技术主要利用手性分离剂与手性分析物之间的相互作用实现手性分离。
液相色谱法分离度较高，适用性广泛，常用于药物的手性分析及手性异构体的定量分析。
3. 毛细管电泳法（CE）毛细管电泳法是利用毛细管中的电渗流和电泳作用实现手性分离的一种分析技术。
该技术具有分离度高、样品消耗少等特点，适用于药物样品中手性异构体的分析与检测。
三、手性分析技术的应用手性分析技术在药物研究与开发中具有广泛的应用。
通过手性分析，可以评估药物的手性纯度、分离手性异构体、研究手性异构体的代谢过程等。
1. 评估药物的手性纯度药物合成过程中，常常会产生手性异构体的混合物。
通过手性分析技术，可以确定药物样品中各个手性异构体的相对含量，评估药物的手性纯度，确保药物的质量和疗效。
几种芳环类手性药物HPLC拆分机理初探与应用研究的开题报告
几种芳环类手性药物HPLC拆分机理初探与应用研究的开题报告一、研究背景手性药物是指化合物分子中的立体异构体，其左右手两个异构体具有不同的生物活性，药理学效应和理化性质，因此在药物的制备、分析和治疗等方面具有重要的意义。
目前，手性药物的制备和分析方法主要包括手性合成、质谱和色谱等方法。
其中，高效液相色谱（HPLC）是目前应用最广泛的手性药物分析方法之一。
近年来，由于手性药物的不断增多以及其在临床治疗中的应用价值不断增强，对于手性药物的分离和定量分析方法研究越来越受到科学家的关注。
对于芳环类手性药物而言，其分子结构中含有苯环及其衍生物，因此在分析中要考虑到它们的分子结构和性质。
目前，对于芳环类手性药物的分析方法研究还相对较少，需要深入研究。
二、研究内容本研究旨在通过初探HPLC拆分技术和机理，对几种常见的芳环类手性药物进行分析，并讨论其在药物分析和制备中的应用。
具体研究内容包括：1.研究苯环和其衍生物在HPLC拆分中的机理，并对其进行适当的优化处理；2.对几种常见的芳环类手性药物，包括左旋和右旋异构体进行定量分析，研究它们的分子结构和性质对于HPLC拆分的影响；3.通过对药物的分离和定量分析，探究HPLC拆分技术在手性药物制备和临床治疗中的应用。
三、研究意义本研究通过初探芳环类手性药物HPLC拆分技术和机理，对手性药物的分离和定量分析方法进行探究。
这对于提高手性药物的制备和分析水平，促进手性药物的临床应用和治疗效果的提高具有重要的理论和实践意义。
同时，对于HPLC拆分技术的发展和应用也具有重要的促进作用。
四、研究方法本研究主要采用实验研究的方法，在HPLC分析仪上进行芳环类手性药物的分析。
具体步骤包括：1．选取几种常见的芳环类手性药物，进行样品制备和前处理；2．建立手性柱，对于苯环和其衍生物进行调控优化，试验各种参数；3．进行药物样品的HPLC分析，确定左旋和右旋异构体的峰值和峰面积；4．进行数据处理和分析，探究药物分子中芳环类结构和性质对于HPLC拆分的影响；5．研究HPLC拆分技术在手性药物制备和临床治疗中的应用。
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三、质量研究与质量标准
手性药物质量标准的特点是质量控
制项目要体现其光学特征的质量控制.
三、质量研究与质量标准
（一）质量标准研究
1. 研究项目的确定 ① 比旋度 ② 立体专属性的鉴别项 ③ 立体异构体杂质检查 ④ 立体专属性的含量测定等是反映 药物立体化学特征的检测项目.
1. 直接从起始原料或试剂中引入
光学纯度主要取决于以下两个方面： （1）起始原料或试剂的光学纯度； （2）后续反应过程是否会影响到已有 的手性中心, 从而产生外消旋化的可 能性及程度.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
1. 直接从起始原料或试剂中引入 首先要采用立体专属性的分析方
第七讲 手性药物的HPLC分析方法
一、概述
分子中含有手性中心的药物为手性药物.
20世纪90年代以来, 药物的光学活性与生 物活性之间的关系引起人们日益重视,手 性药物的研究与开发已成为国内外医药 工作者的一个重要研究方向.
一、概述
手性药物的研究近二十年来发展速度 较快. 2001年诺贝尔化学奖授予3位从 事不对称反应研究的科学家.
引入手性环境使对映异构体间呈现物理特性的 差异是手性HPLC进行光学异构体拆分的基础.
四、手性药物的HPLC分析方法
手性固定相法
色谱柱：Chiral-AGP (100mm×4.0mm) 流动相：含0.5％异丙醇的20mM醋酸铵 缓冲溶液（pH4.1，醋酸盐总浓度约 110mM） 流 速：1mL/min 检测波长：225nm
法严格控制起始原料或试剂的光学纯 度,制定合理可行的手性杂质的限度.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
1. 直接从起始原料或试剂中引入 其次要根据后续反应的机理,充分分
析后续反应是否会影响已有手性中心 的构型,如可能会产生影响时,应研究 与优化工艺条件,尽量避免或减少外
消旋化的产生.
二、手性药物的合成纯度控制
在原料药制备工艺研究时应根据手 性中心的引入方式,采取有效的过程控 制手段,严格控制产品的光学纯度. 光学纯度(Optical purity)： 根据实验测定的旋光度,在两个对映异构 体混合物中,一个对映体所占的百分数.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
1. 直接从起始原料或试剂中引入 最后在进行工艺研究时,对引入手
性中心后的每步反应的中间体中的
立体异构体杂质进行检测,分析与
监测外消旋化的可能性.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
2. 通过不对称合成
采用立体选择性或专属性的反应 （包括酶催化反应）在分子中引入所需 构型的手性中心,所以终产品的光学纯 度直接取决于该步反应的立体选择性.
一、概述
手性药物在我国的市场潜力也很大. 中国目前的药物市场居全球第7位, 居美 国、日本、德国、法国、英国和意大利之 后, 到2010年,中国的药物市场将超越英国 和意大利列第5位. 随着人们对用药安全、高效等方面要求, 手性药物的需求会逐年增长.
一、概述
1992年,美国FDA发布手性药物指导原则, 要求所有在美国申请上市的消旋体新药, 均需测定其立体异构体组成,并提供报告 说明药物中所含对映体各自的药理作用、 毒性及临床效果. 加拿大、欧共体等也制订了相关的“指 南”.
一、概述
2006年1月,我国药审中心制定 《手性药物药学研究技术指导原则 （第二稿）》
一、概述
临床应用的手性药物,除天然和半合 成药物外,人工合成药物仍以外消旋体 供药为主,约占全部合成手性药物的 87%以上.
一、概述
尽管手性药物的不同对映体之间在 理化性质方面有许多相似的地方, 药 物在参与体内生理过程时涉及到手性 分子或手性环境,则不同的立体异构 体产生不同的治疗效果、副作用甚至 毒性反应.
间接法：又称手性试剂衍生化（CDR）
对映体混合物以手性试剂作柱前衍 生,形成一非対映异构体对,使药物对映 体间呈现理化特性的差异,然后以常规 固定相分离 测定.
四、手性药物的HPLC分析方法
直接法和间接法共同特点
均以现代HPLC技术为基础,并引入 不对称中心,不同的是间接法（手性衍生法） 是将其引入分子（溶质）内，而直接法 （手性流动相添加剂法、手性固定相法）引 入分子间.
一、概述 单一异构体药物
消旋体药物中的药理活性和治疗作用只由单一 对映体产生. 消除（或减轻）原有混旋体药物的副作用； 降低使用剂量； 提高疗效； 故使用单一活性异构体代替外消旋体药物, 已成为当今制药业的趋势. 2003年世界销售额领先前10之一： 降血脂药辛伐他丁、胃酸分泌抑制剂艾美拉唑
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
3. 消旋体的拆分
采用手性拆分试剂与外消旋的 中间体或终产品反应生成非对映异 构体,分离纯化得到所需的非对映 异构体,再去掉手性拆分试剂,从而 得到所需的手性药物.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度 控制终产品的光学纯度,采取以下措施： 首先应采用光学纯度尽可能高的拆分试剂； 其次,应尽量纯化与拆分试剂反应所得的 非对映异构体； 除此之外,采用制备型的手性色谱法来直接分 离对映异构体,从而得到所需的目标化合物.
四、手性药物的HPLC分析方法
牛血清白蛋白固定相（BSA） 可用于酸性化合物对映体的分离
手性固定相法 色谱柱：Chiral-BSA 流动相：含5mM辛酸和10％异丙醇的 100mM磷酸钠缓冲溶液（pH7） 流 速：1mL/min 检测波长：225nm
四、手性药物的HPLC分析方法
人血清白蛋白固定相（HSA）
右丙氧芬是镇痛药；左丙氧芬是镇咳药
一、概述 (3) 一个有活性；另一个对映体有 严重毒副作用
镇静药反应停（thalidomide,沙利度胺） 右旋体（R型）有镇静作用,左旋体（S 型)具有胚胎毒性和致畸作用.
17000例以上
一、概述 (4)两对映体药理作用不同,但合并用药 有利
如降压药-萘必洛尔的右旋体为β-受体阻滞 剂,而左旋体能降低外周血管的阻力,并对心脏 有保护作用； 抗高血压药物茚达立酮的R异构体具有利尿 作用,但有增加血中尿酸的副作用,而S异构体却 有促进尿酸排泄的作用,可有效降低R异构体的 副作用,两者合用有利. S与R异构体的比例为1:4或1:8时治疗效果最好.
一、概述
不同构型的立体异构体的药理作用也 可能不同,大致可分为以下几种情况:
(1) 药物的药理作用两个对映体中主要 由其中的一个对映体产生
如S-萘普生的镇痛作用比其R异构体强35倍. 特布他林的R-对映体的支气管扩张作用比 其S异构体强200倍.
一、概述
(2) 两个对映体具有完全相反的药理作用
如新型苯哌啶类镇痛药-哌西那朵的 右旋异构体为阿片受体的激动剂,而其 左旋体则为阿片受体的拮抗剂.
一、概述
固定比例（非消旋体）对映体药物
为产生最佳疗效需要开发两种对映体 固定比例的非消旋混合物. 茚达立酮是以消旋体形式上市的抗高血压药. 右旋体利尿作用,但引起尿酸滞留, 左旋体排 尿酸作用,因此确定两者比例消除不良反应, 达最佳疗效.
现正研究1：4或1：8混合物.
二、手性药物的合成纯度控制
手性药物药学研究的主要任务就 是为药物的筛选与进一步研究提供足 够数量与纯度的立体异构体.
3
HO HO
CH2
C COOH CH3 3
四、手性药物的HPLC分析方法
L-甲基多巴样品中D-对映体的限量检查 流动相添加剂法
三、质量研究与质量标准
稳定性研究
稳定性研究中采用的手性分析方 法,要进行全面的验证工作,以保证 分析方法的立体专属性.
三、质量研究与质量标准
2. 分析方法及其选择
高效液相色谱法 毛细管电泳法 气相色谱法 薄层色谱法 超临界流体色谱法 比旋度法
三、质量研究与质量标准
3. 分析方法专属性的验证
1. 柱前手性衍生-对映体与手性试剂反应 2. 手性流动相拆分-手性试剂加入流动相中 3.手性固定相拆分
四、手性药物的HPLC分析方法
手性流动相添加剂法（CMPA） 直接法 手性固定相法（CSP）
引入“手性识别试剂”或“手性环 境”（手性固定相、手性流动相添加剂） 至色谱系统中.
四、手性药物的HPLC分析方法
一、概述 (5) 两个对映体具有完全相同的药理作用
如普罗帕酮的两个对映体具有相同 的抗心率失常作用. 无需使用单一对映体.
一、概述 对手性药物开发
消旋体药物？
单一対映体药物？ 固定比例（非消旋体）对映体？
一、概述 消旋体药物
两种对映体药理性质和治疗作用类似或互补； 对映体在体内有明显的外消旋作用或不稳定； 缺少对映体选择性合成途径； 无治疗作用的对映体无毒性或毒性可忽略. 哌甲酯——治疗儿童多动症.治疗作用只存在 d-对映体,l-对映体不产生有害的 毒副作用,生产成本较低.
二、手性药物药学研究的基本思路 （一）质量标准研究 稳定性研究
根据稳定性研究中手性杂质的变化 情况,判断手性药物的立体构型在各种 环境因素的影响下,以及放置过程中是 否稳定,是否有外消旋化现象的产生, 从而确定是否需在质量标准中控制这 些手性杂质.
三、质量研究与质量标准
稳定性研究
首先应建立灵敏、立体专属性的 光学纯度检测指标,以监测立体构 型的稳定性.
3. 消旋体的拆分
二、手性药物药学研究的基本思路 （二）选择制剂的剂型、处方与工艺