抑菌效果的检测方法
抑菌效力检查法---原理和意义汇总
概述 抑菌效力检查的原理和意义
一、异常毒性的概念
（一）抑菌效力检查的原理 抑菌效力检查是采用微生物法进行，供 试品中含有的抑菌剂会对加入其中的微生物 产生抑制作用，时间越长抑制作用越强，存 活的微生物数量越少。
（二）抑菌效力检查的意义
添加抑菌剂是药物制剂防腐，保障 药品质量的一项重要措施，抑菌效力检查 是用于测定无菌及非无菌制剂的抑菌活性 。因此，抑菌效力检查对于检测、评价和 保障药品质量意义重大。
第一，在药品的研发阶段，无论是添加抑
菌剂，还是药物本身具有抗菌活性，都应 通过抑菌效力检查确认其抗菌效力。 第二，在药品的生产阶段，在药物制剂的 制备过程中要完全防止微生物污染是很困 难的，通过加入适当的抑菌剂可以有效达 到抑菌防腐的目的。抑菌效力检查可以帮 助筛选和确定抑菌剂及其使用浓度。
第三，在药品的贮存阶段，抑菌剂的效力
可能因贮存时间、贮存条件、药品包装材 料等因素发生变化，抑菌效力检查可以检 查成品制剂的抑菌效力在有效期内是否发 生变化。
对于加入抑菌剂的药物制剂，在生产 与贮存期间应该符合《中华人民共和国药 典》（2015年版）抑菌效力检查法（通பைடு நூலகம்则1121）的有关要求。
抗菌测试检测标准
抗菌测试检测标准
抗菌测试是评价物质抑制或杀灭细菌或其他微生物能力的方法。
下面是常见的抗菌测试方法和相关的标准：
1. 纸片扩散法（Disk diffusion method）：根据CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）标准进行抗菌活性测试。
该
标准包括了对不同细菌株和药物的测试方法和结果解读标准。
2. 最小抑菌浓度法（Minimum Inhibitory Concentration, MIC）：根据CLSI或欧洲常用测试方法（EUCAST，European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing）进行细菌的
药敏性测试。
该测试可以确定药物对细菌的最低有效抑制浓度。
3. K-B法（Kirby-Bauer method）：也是一种常用的纸片扩散法，测定细菌对抗生素的药敏感性。
除了上述各种抗菌测试方法外，还有许多其他的标准和指南可供参考，例如：
- 美国药典（USP，United States Pharmacopeia）中的相关方法
规范。
- 欧洲抗菌药物开发委员会（EUCAST）的药敏性测试指南。
- 中国药典（ChP，Chinese Pharmacopoeia）中的抗菌药物相关标准。
这些标准和指南提供了在实验室中进行抗菌测试的具体步骤和结果的解释。
根据不同的应用领域和目的，选择合适的标准进行抗菌测试非常重要。
微生物的抑菌圈检测方法
抑菌圈实验说明抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式，主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。
通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。
用具和材料霉菌培养皿，无菌吸管（或针筒），圆片滤纸（直径2cm），带玻璃珠的无菌水，带过滤漏斗的三角牌，镊子，接种针（环），熔化状态的琼脂培养基（最好保温于45℃左右水浴中），一定浓度的药剂，供试验用的菌种。
试验过程1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，过滤后制成混合孢子悬液。
2.用无菌吸管（或针筒）向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基（约45℃），将菌液与培养基混合均匀，待其冷却。
4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，盖上盖子5.置适宜温度下，培养2~3d，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。
注意事项1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰旁进行。
2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。
3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物死亡。
也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。
5.各种微生物的最适生长温度不同（例如霉菌一般为25~30℃，细菌一般为32~37℃等），恒温培养时宜分开放置。
结果评判由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散，因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈（加入该防霉剂对供试菌有抑制效果）。
抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。
在一定的药剂浓度范围内，药剂的浓度越高则抑菌圈的直径越大。
此法同样适合于测定单个菌的抗菌效果。
抑菌类产品抑菌性能测试方法
其他菌种
其他菌种
白念、铜绿
液体、凝胶、固体 液体、凝胶、固体 液体
0.5mL混合液 +5mLPBS 对照组用染菌载片
5×105~5×106
直接取样
0.5mL混合液 +4.5mLPBS
对照组是同材质不
/
含抑菌成分的样品
5×105~5×106
1×104~9×1 04
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演示完毕感谢观看
20min 20min30s 21min 21min30s 27min 27min30s
WS650：产品测试浓度样液与加入其中的菌 作用完成后，直接取样（即不做稀释）于平皿 中作活菌菌落计数
QB2738：取试验菌与样品混合液0.5mL加 入到含4.5mL经灭菌的PBS试管中
0 2 载 体 抑 菌
抑菌类产品抑菌性能测试方法
➢ GB15979-2002《一次性使用卫 生用品卫生标准》—附录C4、C5 ➢ QB/T 2738-2012《日化产品抗 菌抑菌效果的评价方法》 ➢ 消毒技术规范 ➢ WS/T 650-2019《抗菌和抑菌 效果评价方法》
液体类
凝胶类
固体类
适用产品性状
15979 2738 消规 650
常用菌株
1
2
3
金黄色葡萄球菌 ATCC6538
大肠杆菌8099 白色念珠菌ATCC10231
0 1 悬 液 法
浓度为5×106~4.5×107cfu/mL
作用至一定时间后，吸取0. 5 mL样液至含5 mL PBS的试管内
滴加0.1mL菌悬液
2min 5min 5mL样液 2min 5min
10min 20min
作用至一定时间后，将样片夹至含5 mL PBS的试管内
日化产品长效抑菌效果的评价方法
日化产品长效抑菌效果的评价方法一、微生物培养法微生物培养法是通过将一定量的日化产品加入培养基中，然后接种微生物，在一定温度下培养一段时间后，观察和测量生长的菌落数来评价抑菌效果。
该方法可以直观地反映微生物的生长情况，从而判断抑菌效果。
二、抑菌圈法抑菌圈法是在琼脂平板上划线接种已知菌种，然后将待测的日化产品涂布于平板上，观察抑菌圈的大小来判断抑菌效果。
该方法简单易行，适用于表面抑菌剂效果的测定。
三、重量法重量法是通过测量抑菌前后样品的质量变化来评价抑菌效果。
该方法适用于能够去除微生物的日化产品效果的测定，如某些洗手液、清洁剂等。
四、表面观察法表面观察法是通过观察实验前后样品表面的变化来判断抑菌效果。
该方法适用于表面杀菌剂效果的测定，如某些消毒液、抗菌湿巾等。
五、残留量法残留量法是通过测量抑菌后样品中有效成分的残留量来判断抑菌效果。
该方法适用于能够定量检测有效成分的日化产品效果的测定。
六、计时法计时法是在一定的时间内，观察抑菌剂对微生物生长的抑制作用，通过比较抑菌剂处理组和对照组微生物的生长情况来判断抑菌效果。
该方法适用于能够观察到微生物生长变化的抑菌剂效果的测定。
七、反复实验法反复实验法是在相同条件下进行多次重复实验，取平均值作为实验结果，以提高实验的准确性和可靠性。
该方法适用于任何需要重复实验的抑菌剂效果的测定。
八、质量控制法质量控制法是通过建立质量控制标准，对实验全过程进行质量监控，以保证实验结果的准确性和可靠性。
该方法适用于任何需要保证实验质量的抑菌剂效果的测定。
九、微生物计数法微生物计数法是通过在琼脂平板上接种一定量的待测微生物样品，在一定温度下培养一段时间后，对菌落进行计数来判断抑菌效果。
该方法适用于能够进行微生物计数的抑菌剂效果的测定。
抑菌试验方法总结用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称
抑菌试验方法总结用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验。
通过抑菌实验，可以测定一个药物的最低抑菌浓度，用以评价该药物的抑菌性能，这是抗菌药物的最基本的药效学数据。
主要方法有进行定性测定的扩散法（如抑菌斑试验）和进行定量测定的稀释法（如最低抑菌浓度实验）。
1、定性测定（1）纸片扩散法(disk diffusion test)，K-B法：WHO推荐的全球统一的标准方法。
原理：含有定量抗菌货物的纸睡帖在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度。
在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。
质控：标准菌株的抑菌圈直径应落在预期范围内，如果超出该范围，应视为失控而予以纠正。
影响因素：培养基的质量、药敏纸片的质量、接种菌量、试验操作质量、孵育条件、抑菌圈测量工具的精度和质控菌株本身的药敏特性等均能影响试验结果的准确性。
操作方法：按每1000 ml蒸馏水称取Muller-hinton Agar 38 g配备M—H琼脂，按每个平皿(直径9 mm)25 ml进行分装。
将孵育16—24 h的菌种分别接种生理盐水试管中，校正浓度至0.5麦氏标准(相当于1.0×108 CFU／m1)。
用无菌棉签拭蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余菌液后在M—H琼脂表面，均匀涂布接种3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1周。
平板在室温下干燥3—5 min后用无菌镊子将药物纸片紧贴于琼脂表面．置35℃孵育16 18 h。
记录抑菌圈的直径，实验。
重复10次。
主要用于比较不同抗菌物质，或者通过不同方法提取的同一种物质的效果。
（2）打孔法药敏实验：待M—H平板干后，用无菌棉签蘸取菌液(相当于1.0×108CFU／m1)，在培养基平板上密集划线接种。
抑菌测试标准
抑菌测试标准抑菌测试标准是一种用于评估和比较不同产品或材料的抗菌性能和效果的标准化的测试方法。
这种测试方法通常用于医疗、食品、化妆品、日用品等领域，以确保产品的抗菌性能达到预期效果，从而保证产品的安全性和有效性。
下面将详细介绍抑菌测试标准的概述、测试方法、应用领域和发展趋势等方面。
一、抑菌测试标准的概述抑菌测试标准是一种通过在一定条件下培养细菌，并观察和比较不同产品或材料的抗菌效果的标准化的测试方法。
这种测试方法可以评估产品或材料的抗菌性能和效果，以及其对于不同细菌的抑制作用。
抑菌测试标准通常由政府机构或行业协会制定和发布，以确保不同产品或材料的抗菌性能能够进行比较和评估。
二、抑菌测试标准的测试方法抑菌测试标准的测试方法包括以下步骤：1.选取测试菌种：根据产品或材料的特点和用途，选取具有代表性的菌种进行测试。
常见的测试菌种包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等。
2.制备菌悬液：将选取的菌种接种在营养培养基中，培养一定时间后，将细菌悬挂在无菌生理盐水中，制备成一定浓度的菌悬液。
3.接种菌悬液：将制备好的菌悬液涂抹或滴加在测试产品或材料的表面或与材料接触的介质中。
4.培养：将接种后的样品在一定温度和湿度条件下培养一定时间，使细菌充分生长繁殖。
5.观察：观察不同样品对于细菌生长的抑制作用，记录各个样品上的细菌数量和生长情况。
6.数据分析：根据观察结果，对不同样品的抗菌性能进行比较和分析，得出各个样品的抑菌率、杀菌率等指标。
7.结果判定：根据抑菌测试标准的判定标准，对各个样品的抗菌性能进行评级，并给出相应的评价报告。
三、抑菌测试标准的实际应用抑菌测试标准在实际应用中具有广泛的应用领域，例如：1.医疗领域：用于评估医用材料、医疗器械等的抗菌性能和效果，以保证医疗安全和有效。
2.食品工业：用于评估食品包装材料的抗菌性能和效果，以保证食品的卫生和质量。
3.化妆品行业：用于评估化妆品的抗菌性能和效果，以保证产品的安全性和有效性。
抑菌剂效力测定
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一、概述
抑菌剂效力检查法系用于测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以 评价最终产品的抑菌效力，同时也可用于指导生产企业在制剂研发阶 段抑菌剂的确定。
如果药物本身不含有充分的抗菌活性，那么应根据制剂特性（如水溶 液制剂）添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常储存和使用过程中可 能发生微生物污染和大量繁殖尤其多剂量包装的制剂，避免因药物微 生物污染及对患者造成伤害。
抑菌剂效力测定
举例
1、氯化钠注射液、碳酸氢钠注射液不含抑菌剂加入菌从初始到 6h就开始无限增加，不具抑菌力，抗病毒口服液从初始到24 h对 数值无变化，72h后明显降低，具一定的抑菌力。
2、呋麻滴鼻液、硫糖铝混悬液、阿昔洛韦滴眼液、鲸脂滴耳液、 洁尔阴洗液从初始值到7天后计算值大于1.0 lg降低值，从初始值 到14天后计算值大于3.0 lg,具较强的抑菌效力。
取白色念珠菌、黑曲霉孢子各50～100cfu，分别注入无菌平皿中， 立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿， 混匀，凝固，置20～25℃培养72小时，计数；
同时，用对应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。
结果判定
被检培养基的菌落数与对照培养基菌落数相比大于70%，菌落 形态大小应与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性 检查符合规定。
菌液的制备同控制菌培养基适用性检查
培养基的适用性检查
适用性检查
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌各50～100cfu，分 别注入无菌平皿中，立即倾注胰酷胨大豆琼脂培养基，每株试验菌 平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30～35℃培养48小时，计数；
抑菌效果的检测方法
抑菌效果的检测方法
另外，我们还可以从化学角度来考虑。
常见的抑菌效果检测方法包括最小抑菌浓度法和扩散法。
最小抑菌浓度法是将不同浓度的待测物溶液与一定数量的细菌接种在琼脂培养基上，培养一段时间后观察最低浓度的待测物能够抑制细菌生长。
扩散法是将待测物溶液加在琼脂培养基上，待其凝固后在琼脂上打孔，然后在孔中加入一定数量的细菌液，培养一段时间后观察抑菌圈的直径来评价抑菌效果。
此外，还可以从临床角度考虑。
在医药领域，抑菌效果的检测方法包括在体外和体内实验。
在体外实验中，可以使用培养皿法或微量稀释法来评价抗菌药物的抑菌效果。
在体内实验中，可以通过动物模型来评价抗菌药物的疗效和抑菌效果。
综上所述，抑菌效果的检测方法涉及微生物学、化学和临床等多个领域，不同的方法各有优劣，选择合适的方法取决于具体的实验要求和研究目的。
希望以上信息能够对你有所帮助。
中国药典2015年版抑菌效力检查法解读
中国药典2015年版抑菌效力检查法解读我国药典2015年版抑菌效力检查法解读1. 引言我国药典是我国用于规范药品质量标准的重要法律文件，其中关于抑菌效力检查法的规定对药品抑菌效力的检测至关重要。
本文将深入解读我国药典2015年版关于抑菌效力检查法的相关内容，旨在帮助读者全面理解抑菌效力的检测方法和标准。
2. 抑菌效力检查法的概述抑菌效力是指药品在规定条件下对微生物的抑制或杀灭作用，是评价药品杀菌能力的重要指标之一。
我国药典2015年版包含了对于抑菌效力的检查方法和标准，主要涉及了试验菌种的选择、培养基的配制、药品浓度的确定等方面的内容。
3. 抑菌效力检查法的步骤我国药典2015年版对抑菌效力的检查方法包括了以下几个关键步骤：（1）试验菌种的选择：根据药品的适用范围和目的，选择合适的试验菌种进行检测。
（2）培养基的配制：按照规定的配方和方法制备含有试验菌种的培养基。
（3）药品浓度的确定：确定药品的最小抑菌浓度，即在不同浓度下对试验菌种的抑菌效果。
（4）培养时间和条件：根据试验需要，在规定的时间和条件下进行培养。
（5）结果的判定：根据试验的结果判定药品的抑菌效力符合标准要求。
4. 抑菌效力检查法的标准我国药典2015年版对抑菌效力检查的标准包括了对于不同药品的抑菌效力的具体要求，主要从抑菌率、抑菌效力等方面进行了详细的规定。
这些标准不仅明确了药品的抑菌效力要求，也为药品质量的检测提供了具体的操作指南。
5. 个人观点和理解抑菌效力检查法是保障药品质量安全的重要环节，有效的抑菌效力检测有助于保障患者用药安全。
我国药典2015年版对于抑菌效力的检查方法和标准的详细规定，为药品生产企业和药品监管部门提供了具体的操作指南。
在实际操作中，需要严格按照药典要求进行操作，确保检测结果的准确性和可靠性。
6. 总结我国药典2015年版关于抑菌效力检查法的相关内容对于药品抑菌效力的检测提供了明确的方法和标准，有助于规范药品质量标准，保障患者用药的安全。
抑菌检测报告
抑菌检测报告
检测对象：XXX药物
检测目的：获取该药物的抑菌效果，为制定该药物在临床应用中的具体用法提供参考。
检测方法：采用圆片扩散法检测该药物的抑菌效果。
首先，在两个含有不同菌群的琼脂平板上，分别将该药物和氯霉素作为对照物涂抹上去。
然后，根据实验要求，一盘上分别涂抹5个不同浓度的药物液体，另一盘上则是6个不同浓度。
涂抹后将两个琼脂平板在培养箱中进行孵育。
检测结果：根据孵育的结果，我们对该药物的抑菌效果进行了统计和分析。
在两个含菌群的琼脂平板中，该药物的抑菌效果分别优于氯霉素，呈现出强烈的抑菌作用。
通过统计各浓度液体对不同菌株的抑菌效果，我们发现该药物具有一定的抑菌效果，但是在较低浓度下，抑菌效果并不是很显著。
在合理范围内增加药物浓度，抑菌效果得到明显提升，但同时也带来了药物在人体中的毒副作用，需要根据实际情况选择最合适的用药方案。
结论：该药物具有一定的抑菌效果，但需根据药物浓度和用药量选择最合适的使用方案。
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法近年来，随着抗生素的广泛使用以及细菌耐药性的增加，抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）的测定变得日益重要。
MIC是指抗菌药物能够抑制细菌生长的最低浓度，是评估抗菌药物对细菌耐药性的一种重要方法。
下面介绍几种测定抗菌药物MIC的方法。
1. 琼脂扩散法琼脂扩散法是一种经典的MIC测定方法。
该方法基于抗生素与菌株相互作用抑制菌株生长的原理。
实验中将不同浓度的抗生素溶液加入琼脂平板中，并在琼脂表面均匀涂布细菌悬液。
待菌株在琼脂表面生长形成克隆后，观察克隆周围清晰的无菌区域大小，根据无菌区域所对应的抗生素浓度计算MIC值。
该方法简单易行，但由于该方法目测判断，因此存在主观性差异和读片误差的问题。
2. 荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑）（Alamar blue）法荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑）法是一种高通量及准确性较高的MIC测定方法。
该方法基于菌株呼吸代谢消耗的荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑）的发光信号变化来评估抗生素的MIC值。
实验中将不同浓度的抗生素溶液加入微孔板中，并添加细菌悬液及荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑），经过一定时间后读取板上的荧光信号，测算MIC 值。
该方法准确性高，可用于筛选大量样本的抗菌药物敏感性，但需要特殊设备和耗费较多经费。
3. 壳聚糖纳米粒子微滴法壳聚糖纳米粒子微滴法是一种新兴的MIC测定方法。
该方法基于壳聚糖纳米粒子本身具有抑菌作用及微滴原理，实验中将不同浓度的抗生素与含菌液的溶液制成微滴，并添加壳聚糖纳米粒子，待微滴凝胶后进行观察，根据微滴内的细菌生长情况评估折射率值，进而计算MIC值。
这种方法具有较高的准确性和可靠性，但需要特殊仪器和技术支持。
4. 测序MIC法随着测序技术的发展，现已出现测序MIC法。
该方法基于高通量测序技术，对菌株进行全基因组测序，确定细菌株中抗生素耐药基因的编码序列，并进行序列比对和分析，确定抗生素的MIC值。
抑菌效力检查法
151
1 1 2 1 抑菌效力检查法
中 国 药 典 2015年版
表 1 培 养 基 适 用 性 检 査 、方法适 用 性 试 验 、抑菌效力测定用的试验苗及新鲜培养物制备
试验菌株
金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus )
CCMCCCB)26 003〕
铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa)
在 药 品 生 产 过 程 中 ，抑 菌 剂 不 能 用 于 替 代 药 品 生 产 的 G M P 管 理 ，不 能 作 为 非 无 菌 制 剂 降 低 微 生 物 污 染 的 唯 一 途 径 ，也 不 能 作 为 控 制 多 剂 量 包 装 制 剂 灭 菌 前 的 生 物 负 载 的 手 段 。所 有 抑 菌 剂 都 具 有 一 定 的 毒 性 ，制 剂 中 抑 菌 剂 的 量 应 为 最 低 有 效 量 。同 时 ，为 保 证 用 药 安 全 ，成 品 制 剂 中 的 抑 菌 剂 有效浓度应低于对人体有害的浓度。
培养时间 18〜 2 4 小时 18〜 2 4 小时 18〜 2 4 小时 24〜 4 8 小时 5〜7 天或直到获得丰富的孢子
菌 液 制 备 后 若 在 室 温 下 放 置 ，应 在 2 小 时 内 使 用 ；若保 存 在 2〜8 C ，可 在 2 4 小 时 内 使 用 。黑 曲 霉 孢 子 悬 液 可 保 存 在 2〜8 * C , 在 验 证 过 的 贮 存 期 内 使 用 。
如 果 药 物 本 身 不 具 有 充 分 的 抗 菌 效 力 ，那 么 应 根 据 制 剂 特 性 （如 水 溶 性 制 剂 ）添 加 适 宜 的 抑 菌 剂 ，以 防 止 制 剂 在 正 常 贮 藏 或 使 用 过 程 中 由 于 微 生 物 污 染 和 繁 殖 ，使 药 物 变 质 而 对 使 用 者 造 成 危 害 ，尤 其 是 多 剂 量 包 装 的 制 剂 。
抗菌性能检测一般知识
抗菌性能检测一般知识
目前，整理织物抑菌效果测试方法一般有以下几种：
1.AATCC 9O-1982法晕出法
2.AATCC lOO-1981法汲尽培养法
3.CTM 0923法摇晃烧瓶法（美国道康宁公司的试验方法）
具体试验操作如下：
1.晕出法：在培养基上，接种上细菌培养液之后，将整理织物小块复盖在培养基上，而后在一定条件下使细菌繁殖一定时间，检查织物复盖部位是否有"菌落"生长，也检查织物周围渗出无菌区城的大小尺寸。
复盖区无菌落，抑菌效果属于优良，晕出圈越大，表明整理剂从织物上渗出量越多。
2.汲尽培养法；吸一毫升细菌培养液，滴在一小块整理织物上，使溶液正好被织物全部吸收，放置一定时何后，用培养液将织物上的细菌液洗落（稀释），摇匀，取样置于培养基上，在一定条件下，使细菌繁殖一定时间，检查培养基上“菌落”数，与空白样品对比。
3.摇晃烧瓶法，在盛有稀释液的有塞三角烧瓶中，投入样品（纺织品），而后移入细菌液，在一定条件下，摇晃一小时，取出一毫升试验液，置于固体培养基上，在一定条件下使细菌繁殖一定时间，检查菌落数与空白样品比较，计算抑菌率。
以上三种方法，对于非渗出性的整理剂来讲以摇晃烧瓶法较为准确。
在抑菌率测试中，很可能发生误差，主要原因有；
（1）菌株的活力和纯度不易一敦，因此既要求钝种，还安求选育培养至繁殖速度呈对数增长后的稳定期问取样。
（2）织物上可能有复盖物或离子屏蔽化合物，因此，测试前应将整理织物洗净。
（3）自培养液中吸取菌液时，细菌仍处在新陈代谢过程中，因此，对照样品之间的取样时间越接近越好。
纸片法抑菌试验实验报告
一、实验目的1. 掌握纸片法抑菌试验的基本原理和操作方法。
2. 了解抑菌试验在微生物学研究和临床医学中的应用。
3. 通过实验，学会分析实验结果，为临床用药提供参考。
二、实验原理纸片法抑菌试验是一种常用的微生物学实验方法，用于检测细菌对各种抗生素的敏感性。
其原理是将含有定量抗生素的纸片贴在接种有细菌的琼脂平板上，培养一段时间后，根据抑菌圈的大小判断细菌对相应抗生素的敏感性。
三、实验材料1. 细菌菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素纸片：青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等。
3. 琼脂培养基：M-H琼脂培养基。
4. 实验器材：无菌平板、无菌镊子、无菌棉签、酒精灯、游标卡尺等。
四、实验步骤1. 将琼脂培养基融化后，待其冷却至50℃左右，倒入无菌平板中，均匀铺开，待其凝固。
2. 将待检菌接种于M-H琼脂平板上，用无菌棉签均匀涂抹。
3. 待菌液干燥后，用无菌镊子取抗生素纸片，贴在平板上，纸片间距大于24mm。
4. 将平板置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
5. 观察并测量抑菌圈直径，记录数据。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为敏感，抑菌圈直径分别为15mm、12mm、18mm、20mm。
2. 大肠杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为耐药，抑菌圈直径分别为0mm、0mm、0mm、0mm。
3. 肺炎克雷伯菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为耐药，抑菌圈直径分别为0mm、0mm、0mm、0mm。
根据实验结果，金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素敏感，可作为临床治疗金黄色葡萄球菌感染的首选药物。
大肠杆菌和肺炎克雷伯菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为耐药，需要根据耐药性选择其他抗生素进行治疗。
六、实验讨论1. 纸片法抑菌试验是一种简单、快速、经济的抑菌试验方法，广泛应用于微生物学研究和临床医学中。
日化产品抑菌效果快速检测方法
中国洗涤用品工业杂志 《工业与公共设施清洁》
日化产品抑菌效果快速检测方法
谷爱军 于 文 （西安开米股份有限公司，陕西 西安，710075）
摘 要：本文论述了以2,3,5-三苯基氯化四氮唑（简称TTC）作为指示剂，避光灭菌后添加到营养琼脂 中制成TTC显色培养基。通过悬液定量法，对大肠埃希菌（ATCC 25922）、金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）进行抑菌试验，仅需24h即可得出结果，比现有标准要求的48h观察结果大大缩短了时间。本研究建 立的方法简便快捷，检测结果稳定可靠。 关键词：氯化三苯基四氮唑；抑菌；快速检测 中图分类号：TQ649.4 文献标识码：Ａ 文章编号：1672—2701（2019）03—60—05
由表1可知：A瓶和B瓶菌落回收数，与营养琼 脂对照组的相对偏差均＜10%，而C瓶外观呈现红褐 色，培养的阳性菌回收菌数与对照组有明显差异。 因此，本实验选择以A瓶显色培养基的制备方法，
三种灭菌方式
营养琼脂对照 A瓶 B瓶 C瓶
表1 不同的灭菌方式对TTC指示剂的影响
大肠埃希菌平均 回收菌数103 相对偏差%
由表2可知：含0.01mg/mL、0.02mg/mL、 0.03mg/mL、0.04mg/mL、0.05mg/mLTTC营养琼 脂培养基都对大肠杆菌均无抑制现象；但对金黄色 葡萄球菌显色均敏感，当TTC浓度大于0.02mg/mL
时，平皿的回收菌数与营养琼脂对照组比较相对偏 差略大，有一定的抑制现象，而且浓度越高，抑菌 作用越明显。可能与革兰氏阳性菌细胞壁上肽聚糖 和磷壁酸含量高，而革兰氏阴性菌肽聚糖和磷壁 酸含量少，此外，还有脂蛋白、外膜、脂多糖等 结构的不同而导致对TCC敏感性不同[4]。 最终选择 0.02mg/mL的TTC作为显色剂，既保证菌落良好的 显色效果，且不抑制细菌的生长。 2.5 不同色素对含0.02mg /mL TTC显色培养基的 影响
抑菌效果的检测方法
抑菌效果的检测方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：抑菌效果的检测方法在实际生活中具有重要意义，特别是在医疗、食品加工等领域。
为了确保产品的安全性和质量，我们需要对抑菌效果进行有效检测。
本文将介绍一些常用的抑菌效果检测方法及其原理，希望能够为读者提供参考。
一、菌落计数法菌落计数法是一种常用的抑菌效果检测方法，通过计算样品中细菌的数量来评估其抑菌效果。
具体操作步骤如下：1.准备不同浓度的细菌溶液，分别涂抹在含有抑菌物质的培养基上。
2.将培养皿放入恒温培养箱中，培养一定时间后观察细菌的生长情况。
3.根据培养皿上形成的菌落数量，计算出细菌的数量。
4.通过比较不同样品中细菌数量的差异，评估抑菌效果的高低。
菌落计数法的优点是操作简单易行，可以快速获得结果。
但也存在一些局限性，比如只适用于某些特定细菌的检测，对于耗时长的样品测试不太适用。
二、最小抑菌浓度法2.将不同浓度的溶液与含有一定数量细菌的培养基混合。
3.培养一定时间后观察细菌生长情况，确定不同浓度下的最小抑菌浓度。
最小抑菌浓度法的优点是可以准确地确定抑菌物质的抑菌效果，并且可以比较不同抑菌物质之间的差异。
但需要较长时间进行实验，操作相对复杂。
三、透明圈法透明圈法是一种通过测定抑菌物质在琼脂培养基上形成的透明圈直径来评估其抑菌效果的方法。
操作步骤如下：1.将含有一定数量细菌的琼脂培养基均匀涂抹在平板上。
3.培养一定时间后观察琼脂培养基上形成的透明圈直径。
透明圈法的优点是操作简单，能够快速得出结果。
但其仅适用于一些能够形成透明圈的细菌，对于其他细菌可能不太适用。
在实际应用中，以上三种抑菌效果检测方法可以结合使用，以提高检测结果的准确性和可靠性。
还可以根据不同的需求选择合适的检测方法，以更好地评估抑菌效果。
希望本文能够对读者有所帮助，谢谢！第二篇示例：抑菌效果的检测方法是指在实验室环境中，通过一系列的实验方法检测杀菌剂或杀菌产品对细菌、真菌等微生物的杀灭效果。
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抑菌效果的检测方法：将抗生素菌株进行平板划线分离，长
出单菌落后，在421房间的超净工作台上找到直径7mm的
打孔器（只有一个，请大家不要拿到其它地方去！），用该打孔器在单菌落上打取菌落块，若菌落块卡在打孔器内，请用接种针挑出来，将菌落块以菌落面向上的方式放置在已经涂
布有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌的平板上，培养48小时后测量抑菌圈的直径。
发帖位置: Tuesday, March 25, 2014
微生物学实验安排及自主实验要求
第6周：1.口腔微生物的染色观察与显微镜油镜的使用；
第7周：2.培养基的制备；3.高压蒸汽灭菌；
第8周：4.土壤中微生物的分离；
第9周：5.微生物菌落的观察；6. 微生物的分离纯化与菌种保存
第10周：7.细菌的革兰氏染色；8.放线菌装片的制作及观察；
第11周：9.酵母菌装片的制作及观察；10.霉菌装片的制作及观察；
第12周：11.酸奶的制作
第13周：12.水中大肠菌群的检测；
第12-14周：自主实验——抗生素产生菌的分离纯化及抗菌活性测定；
第15周：实验考核（无菌操作、制片、染色、油镜观察）；
各组提交自主实验项目总结报告，要求按照正式发表的科研论文进行写作；自主实验总结汇报。
要求：1.以一个班为单位，3~4人一组（即每张桌子上的同学分成两个自主实验小组
2.禁止选择以青霉为筛选目标的实验方案，各组自己查阅相
关资料然后设计实验方案主要包括样品的采集、所用的培养基配方、分离方法、鉴定的方法、活性测定的方法等方面；
各组长在第9周上实验课时将纸质实验方案提交给指导教师(实验方案请标明：2012级*班*组+组长姓名+联系电话+组员姓名）
发帖位置: Tuesday, March 25, 2014
抗生素产生菌的分离与抗菌活性检测
1. 分离纯化获得1株以上具有明显抑制测试菌生长作用的
产抗生素菌株，测试菌建议选用：金黄色葡萄球菌或大肠杆菌，只要对任何一种测试菌有比较明显的抑菌圈就可以了。
2. 对上述菌株进行初步鉴定，包括菌体形态、大小、菌落形
态等、以及一些本实验室可以完成的生理生化反应，在此基础上对上述菌株鉴定到属名。
3. 条件允许的情况下，选取一株菌进行液体摇床发酵培养（250ml三角瓶内装50ml液体培养基，统一采用28℃，150r/min），测试其发酵液的抑菌活性，测试时请向徐老师借牛津杯6个，分别加入发酵液上清液100μl、200μl，培养48小时后，测量抑菌直径，各组间以抑菌圈直径大小比较产抗生素活性的大小。
注意：尽可能多留一些图片资料，如抑菌圈、菌体形态、菌落形态等的图片，拍照时请注意在拍照物上留下清晰的标记
如“ 12级？班？组***”，实验过程中要留下详尽的原始实验记录。