蛋黄中卵磷脂的提取讲解
蛋黄卵磷脂的提取
蛋黄卵磷脂的提取[实验目的]1.了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。
2.更好的理解和利用相似相容原理。
3.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。
4.掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。
[仪器与试剂]烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。
氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。
[实验原理]实验采用混合溶液萃取法。
薄层色谱法又称薄板色谱法。
薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。
薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。
[实验步骤]1.蛋黄卵磷脂的提取取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。
抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。
滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。
分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。
干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。
用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。
在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。
2.薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。
展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。
蛋黄中卵磷脂的提取条件研究
蛋黄中卵磷脂的提取条件研究肖雪梅王明辉(南昌理工学院，江西南昌330044)摘要:在传统有机溶剂提取蛋黄卵磷脂的基础上，更为深人地研究了乙醇和丙酮这 两种有机溶剂相互作用的结果。
同时研究了酶法提取时，蛋白酶浓度、乙醇浓度、提取时 间、提取温度四个方面，设定单因素实验，以探讨不同提取条件纯化卵磷脂的效果,为实际 生产提供理论依据。
关键词:卵磷脂提取条件纯化卵磷脂（lecithin)属于一种混合物，是存在于动植 物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质。
其 构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三 酸酯以及磷脂。
卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列 的“第三营养素”。
通常卵磷脂就是指磷脂酰胆碱（Phosphatidyl cho-lineS，PC)，为蛋黄中的主要磷脂。
卵磷脂可调节血脂、预防、解除心脑血管等疾病，是肝脏的保护神，促进脂 肪代谢，防治脂肪肝。
磷脂广泛应用于食品、医药、化 妆品等行业[1]。
1材料与仪器市售新鲜鸡蛋煮熟后取蛋黄、纯化卵磷脂标准品；无水乙醇、乙醚、丙酮、甲醇、氯仿等试剂均为分析纯；蛋白酶（上海生物制品有限公司）；超级恒温水浴锅(HWS-12,上海一恒实验仪器公司）、真空干燥箱(DZF- 6050,上海精宏实验设备有限公司）、电动搅拌 器(DW-X，上海卫凯仪器设备有限公司）、抽滤瓶(WI71701，北京科技有限公司）、旋转蒸发器（RE - 201D，上海卫凯科学仪器公司）。
2有机溶剂提取法2.1实验方案1:乙醇提取法称取煮熟的鸡蛋黄于锥形瓶中研碎成粉末状，称 取l〇g蛋黄和不同体积分数的乙醇（100%、95%、90%、85%)各30mL，一起搅拌30min后至蛋黄粉末与提取 液完全互溶，离心操作lOmin，取上层清液，留沉淀加人 乙醇浸提、离心同上，合并2次上滤液，使用旋转蒸发 器蒸发乙醇后浓缩，将浓缩物粗卵磷脂在真空中进行 冷冻干燥，得淡黄固状的卵磷脂。
称重，其产量结果按 公式(2.1)计算：提取率=(提取后卵磷脂重量/蛋黄重量）x100%(2.1)2.2实验方案2:先乙醇后丙酮提取法15mL不同体积分数（100%、95%、90%、85% )的乙醇置于锥形瓶中与5g蛋黄粉搅拌混匀，浸提步骤同上，往减压蒸馏的物品中慢慢加人10mL丙酮，多次浸 洗，至丙酮洗液无色，干燥，得白色稍黄的卵磷脂。
蛋黄卵磷脂提取方案设计
1.设计背景1.1蛋黄卵磷脂的设计背景介绍蛋黄卵磷脂作为一种天然磷脂，具有重要的生理功能和广泛的应用价值。
在我国，随着食品、医药、化妆品等行业的快速发展，对蛋黄卵磷脂的需求日益增加。
目前国内蛋黄卵磷脂的提取技术相对落后[1]，提取效率低、成本高，且产品质量不稳定，严重制约了相关产业的发展。
因此，针对蛋黄卵磷脂提取方案的设计具有重要的现实意义。
蛋黄卵磷脂主要存在于蛋黄中，其含量约为8%-10%。
蛋黄卵磷脂具有独特的分子结构，使其在乳化、分散、稳定等方面具有优异的性能，因此在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用[2]。
在食品工业中，蛋黄卵磷脂可作为乳化剂、稳定剂、润滑剂等，提高产品的质量和口感；在医药领域，蛋黄卵磷脂具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等生理活性，可用于制备药物载体和保健品；在化妆品行业，蛋黄卵磷脂具有良好的保湿、修复和保护作用，可用于护肤品的研发。
近年来，尽管我国在蛋黄卵磷脂提取技术方面取得了一定的进展，但与发达国家相比，仍存在较大差距。
传统提取方法如有机溶剂提取、超声波辅助提取等存在提取效率低、成本高、环境污染等问题[3]。
研究一种高效、环保、低成本的蛋黄卵磷脂提取方案，对于提高我国蛋黄卵磷脂产品的市场竞争力、促进相关产业可持续发展具有重要意义。
1.2卵磷脂主要化学成分和药理作用1.2.1主要化学成分磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine, PC）：这是卵磷脂中最主要的成分，占卵磷脂总量的40%-50%。
磷脂酰胆碱由甘油、两个脂肪酸链、磷酸和一个胆碱分子组成，其分子结构决定了其在细胞膜中的重要作用。
磷脂酰乙醇胺（Phosphatidylethanolamine, PE）：这是卵磷脂中的另一主要成分，含量通常在20%-30%之间。
磷脂酰乙醇胺的结构与磷脂酰胆碱类似，但其所连接的亲水性头部基团是乙醇胺。
磷脂酰肌醇（Phosphatidylinositol, PI）：磷脂酰肌醇在卵磷脂中的含量相对较少，大约占5%-10%。
14.实验十四 从蛋黄中提取卵磷脂
一、实验目的
1. 掌握抽滤等基本操作 2.了解从蛋黄中提取卵磷脂的实验方 法
二、实验原理
结构
卵磷脂是磷脂酸的衍生物、别名为磷脂酰胆碱。它 由磷酸、甘油、高级脂肪酸和胆碱组成，其结构式 为：
二、实验原理
性质
1、卵磷脂分子中同时具有亲水基团和亲油基 团、具有良好的乳化性能。
5、加热时，会促使胆碱分解，产生三甲胺的臭味。
6、加硝酸酸化，脂肪酸析出，溶液变浑浊，加酸铅 有脂肪酸铅盐生成，浑浊进一步增强。
7、生成的氢氧化铜沉淀，因水解液中的甘油与之反 应，生成甘油配合物，沉淀溶解。
思考题
1、蛋黄中分离卵磷根据什么原理？ 2、卵磷脂可以化，从结构上分析应做何 解释？
注解和实验指导
1、第一次减压过滤，因刚析出的醇中不溶物很细以 及有少许水分，滤出物浑浊，放置后继续有沉淀析出， 需合并液后，以原布氏漏斗（不换滤纸）反复滤清。
2、蒸去乙醇时，可能最后有少许水分，需搅动加速 蒸发。
3、黄色油状物蒸干后，蒸发皿上的油状物一定要使 其溶于氯仿中，否则会带入杂质。
4、搅动时，析出的卵磷脂可附于玻璃棒上，成团状。
2、可溶于乙醇、乙醚、氯仿，不溶于丙酮。
3、卵磷脂在碱性溶液中加热水解：甘油、脂 肪酸盐、磷酸盐、胆碱
二、实验原理
提取流程
蛋 乙醇提取
残渣
黄
（蛋白、脑磷脂等）
（
含 蛋 白 、
提取液 去乙醇 油状物 （脂肪、卵磷脂等）
脂 肪
氯仿
氯仿-丙酮溶液
、 卵 磷
氯仿溶液 丙酮（脂肪）Fra bibliotek脂 、
沉淀
脑 磷
（卵磷脂）
四、实验步骤
蛋黄中提取卵磷脂技术
蛋黄中提取卵磷脂技术人和动物的肾、肝、小肠和其他器官内均有卵磷脂酶存在，卵磷脂首先水解而生成甘油、脂肪酸、磷酸及胆碱，其中胆碱能在肝脏中对脂肪代谢起作用。
最重要的是它能参与合成乙酰胆碱而成为神经系统活动的重要物质。
在药用方面，可作强身滋补剂，又能治疗婴儿湿疹，可配制成注射剂及乳剂应用，又可作生物试剂，用于细菌培养，其中尤以培养固氮菌及磷菌效果很好。
1卵磷脂的特性卵磷脂主要存在于蛋黄中，含量为10%左右。
卵磷脂溶于乙醚、乙醇、甲醇、三氯甲烷等脂肪溶剂中，但不能溶解于丙酮，也不溶解于水，它的亲水性很强，能在水中膨胀而生成乳状液和胶体溶液，卵磷脂也能与酸、碱和其他盐类如氯化镉等相结合。
卵磷脂一般为淡黄色，但由于卵磷脂分子中含有不饱和脂肪酸，所以很容易氧化而逐渐由淡黄色变为棕褐色。
卵磷脂在空气中易被氧化，同时它能与蛋白质及其他物质生成化合物，所以卵磷脂一般很难得到结晶状态，而是无晶性物质。
2卵磷脂的提取2.1原料及其处理鸡蛋或变质发臭的次劣蛋及全蛋粉、蛋黄粉、冰全蛋和冰蛋黄，均可用于提炼卵磷脂。
除已成为干燥状态的全蛋粉和蛋黄粉外，其他原料还要经过一定的处理。
将鸡蛋或变质发臭的次劣蛋放在存器内，送入-10℃冷库内，使蛋的内容物凝固，然后取出，打蛋壳，将蛋黄分离出来，集中在铝质存器或搪瓷盘中。
如果黄白不能分离的变质蛋或打开壳后取出的蛋液，黄白不能分离的，若不及时提炼，存放在搪瓷盘中，也应送入-10℃冷库里贮存备用。
变质发臭的次劣冰蛋，要分装在搪瓷盘或铝质盘里贮存备用。
将上述原料放入烘箱或烘房内，在55℃下烘6h左右便成干燥状态，研磨成粉末，贮存备用。
2.2提炼卵磷脂2.2.1浸提2.2.1.1浸液的配制处理过的原料（即干燥蛋粉）1份，96%乙醇1份，98.5%甲醇1份。
2.2.1.2浸泡将上面配制好的醇浸液放入大釉缸中，徐徐加入干燥蛋粉，边加边搅，蛋粉加完后，再继续不断地搅拌4～5h。
醇浸液的液面务必高出原料面约30cm，搅拌4～5h后放在室温下使其继续浸泡24～48h，甚至更长时间。
卵磷脂的提取、鉴定和应用
卵磷脂的提取、鉴定和应用卵磷脂的提取、鉴定和应用一、引言卵磷脂是甘油磷脂的一种，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱组成。
卵磷脂广泛存在于动植物中，在植物种子和动物的脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多；其中蛋黄中含量最丰富，高达8—10%，因而得名。
卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等因而可以利用这些溶剂进行提取。
本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。
通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂，两者浓缩后通过离心进行分离，下层为卵磷脂。
新提取的卵磷脂为白色蜡准状物，遇空气可氧化成为黄褐色，这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。
卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲胺，三甲胺有特殊的鱼腥味，可以此鉴别之。
卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂，抗氧化剂，营养添加剂。
二、实验材料和仪器鸡蛋、花生油。
乙醚、10%NaOH。
磁搅拌器，离心机。
三、实验步骤1.卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄，于150毫升三角锥瓶中加入40毫升乙醚，放入磁搅拌器，室温下搅拌提取15分钟。
然后静置30分钟，上层液用带棉花塞的漏斗过滤，往残渣中再加入15毫升乙醚，搅拌提取5分钟。
第二次提取液通过过滤后，与第一次提取液合并，于60度热水浴中蒸去乙醚，将残留物质倒入烧杯中，放如真空干燥器中减压干燥30分钟以初尽乙醚，约可得5g粗提取物。
粗提取物进行离心，十分钟后，下层为卵磷脂，约得2.5-2.8g。
卵磷脂可以通过冷冻干燥得到无水的产物/2.卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g，于试管内加入10%NaOH溶液2毫升，水浴加热数分钟，嗅之是否有鱼醒味，以确定是否卵磷脂。
3.乳化作用两支试管中各加入3-5毫升水，一只加卵磷脂少许，溶解后滴加5滴花生油。
另一只也滴入5滴花生油，加塞极力振荡试管，使花生油分散。
观察比较两只试管内的乳化状态。
卵磷脂的提取实验报告
卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言：卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物，存在于生物体细胞膜中，具有重要的生理功能。
本实验旨在通过提取卵磷脂，了解其提取方法和应用。
实验材料与方法：材料：鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器：搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤：1. 取适量鸡蛋，将蛋黄与蛋清分离。
2. 将蛋黄放入搅拌器中，加入适量乙醇，搅拌均匀。
3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心，离心后分为两层，上层为乙醇层，下层为沉淀层。
4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
5. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。
6. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。
7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
8. 加入适量水，摇匀后放置静置。
9. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。
10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
11. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。
12. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。
13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
14. 加入适量水，摇匀后放置静置。
15. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。
结果与讨论：经过多次提取，我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。
实验过程中，通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用，能够有效地分离出卵磷脂。
乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂，而氯化钠则用于调节溶液的渗透压，帮助分离。
氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂，能够与卵磷脂形成复合物，从而实现分离。
卵磷脂作为一种重要的生物大分子，具有多种生理功能。
首先，卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一，能够维持细胞膜的完整性和稳定性。
其次，卵磷脂还参与细胞信号传导，调节细胞功能。
此外，卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能，常被用作食品添加剂和药物载体。
在实际应用中，卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。
例如，可以根据不同来源的卵磷脂进行提取，以获得特定的卵磷脂种类。
卵磷脂的提取与鉴定精品PPT课件
• 卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等溶剂，因而可 以利用这些溶剂进行提取。本实验以乙醇作为 溶剂提取蛋黄中的卵磷脂。通常粗提取液中含 有中性脂肪和卵磷脂，浓缩后通过离心进行分 离，下层为卵磷脂。新提取的卵磷脂为白色蜡 状物，遇空气可氧化成为黄褐色。
• 卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为 三甲胺，三甲胺有特殊的鱼腥味，可以此鉴别 之。
实验二 磷脂的提取及鉴定
【实验目的】
1．熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 2．了解卵磷脂水解后的产物，巩固对卵
磷脂组成结构的认识。
【实验原理】
• 卵磷脂是甘油磷脂的一种，由磷酸、 脂肪酸、甘油和胆碱组成。
• 卵磷脂广泛存在于动植物中，在植物 种子和动物的脑、神经组织、肝脏、肾 上腺以及红细胞中含量最多；其中蛋黄 中含量最丰富，高达8～10%，因而得 名。
2.鉴定
取提取的卵磷脂少许，置试管内加 10%NaOH溶液2ml，水浴加热，看是否产 生鱼腥味。另取一些卵磷脂溶于1ml乙醇中， 添加1-2ml丙酮，观察变化。
注意事项
蒸去乙醇时，切不可用明火（如酒精灯） 直接加热，以免发生火灾。
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You 也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End 演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
• 卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂， 抗氧化剂，营养添加剂。
鸡蛋黄中磷脂的提取及分析
三、仪器和药品 仪器：研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花 药品：熟鸡蛋黄 20％NaOH 溶液 10％Pb(AC)2
丙酮 碘化铋钾溶液
1％CuSO4 溶液
硫酸 95％乙醇 氯仿
四、实验步骤 1．卵磷脂的提取 （1）取熟鸡蛋蛋黄一只，于研钵中研细，先加入 10ml 95％乙醇研磨，再加入 10ml 95％
乙醇充分研磨，减压过滤，布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后，移入研钵中，再加 10ml 95％ 乙醇研磨，减压过滤，滤干后，合并二次滤液，如浑浊可再过滤一次，将澄清滤液移入蒸发 皿内。
六．思考题： 1．蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理？ 2．卵磷脂可以皂化，从结构分析应作何解释？ 3．卵磷脂可作乳化剂，这是为什么？ 4．为什么实验中要进行减压过滤？操作时应注意哪些地方？
脂肪酸的检查：取棉花上沉淀(滤饼)少许，加 1 滴 20％氢氧化钠溶液与 5ml 水，用玻棒搅 拌使其溶解，在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄清液，以硝酸酸化后加入 10％醋酸铅 2 滴，观察 溶液的变化 甘油的检查：取试管一支，加入 1％硫酸铜溶液 1ml(二十滴)，2 滴 20％氢氧化钠溶液，振 摇，有氢氧化铜沉淀生成，再加入 1ml 水解液振摇，观察所得结果。 胆碱的检查：取水解液 1ml，滴加硫酸使其酸化（以 pH 试纸试之）加入 1 滴碘化铋钾溶液， 有砖红色沉淀生成。
（2）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干，得到黄色油状物。 （3）冷却后，加入 5ml 氯仿，搅拌使油状物完全溶解。 （4）在搅拌下慢慢加入 15ml 丙酮，即有卵磷脂析出，搅动使其尽量析出（溶液倒入回收瓶 内）。 2．卵磷脂的水解及其组成分析 （1）水解：取一支干燥大试管，加入提取的一半量的卵磷脂，并加入 5ml 20％氢氧化钠溶 液，放入沸水浴中加热 10 分钟，并用玻棒加以搅拌，使卵磷脂水解，冷却后，在玻璃漏斗中 用棉花过滤。滤液供下面检查用。 （2）检查
鸡蛋中卵磷脂提取鉴定
卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效：保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性：无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围：护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景：随着消费者对健康和环保的关注度提高， 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
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汇报人：
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性：卵磷脂在油脂中 的溶解度较高，因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化：提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质，需要进行纯化 处理，常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
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卵磷脂的提取方法：通常采用有机 溶剂萃取法，将鸡蛋中的油脂溶解 后，再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同，将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性：卵磷脂难溶于水，易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性：卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值：卵磷脂具有皂化特性
酸碱度：卵磷脂在酸性条件下 稳定，在碱性条件下易水解
红外光谱：卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法：鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法：鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取：使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离：通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理：去除蛋壳，收集蛋 黄
鉴定：通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定：通过光谱、色谱等技 术，对卵磷脂进行鉴定
添加标题
卵磷脂的制备及鉴定
卵磷脂的制备及鉴定卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。
2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。
二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。
三、实验原理将卵黄中加乙醇，卵磷脂溶于乙醇溶液中，分离提取，蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。
但由于乙醇抽提时，其他脂质也一起被抽提，如甘油三酯、甾醇等。
利用卵磷脂不溶于丙酮的性质，用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂，能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。
无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀，因此，可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来，由此除去蛋白质、脂肪等杂质，再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。
四、实验仪器、试剂与材料1、仪器：离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。
溶液：取氯化锌10g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，2、试液：l0%的ZnCl2即得。
3、试剂与材料：氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。
五、操作步骤1、粗提：取鸡蛋卵黄适量，用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取，离心分离（300Or/min，5min），将沉淀物重复提取3次，回收上清液。
然后减压蒸馏（45℃）至近干，用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。
加入丙酮溶解，抽滤，分离出沉淀，真空干燥（40℃，3Omin），得到淡黄色的粗卵磷脂，称重。
2、精制：取一定量的卵磷脂粗品，加无水乙醇溶解，得到约10%的乙醇粗提溶液，室温搅拌0.5h。
分离沉淀物，液。
加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl2加适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌lh，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色蜡状的精制卵磷脂；干燥；称重。
3、鉴定：（1）薄层色谱分析：取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液，用GF254硅胶板以氯仿：甲醇：水（65：25：4）为展开剂，展开，取出，干燥，碘蒸气显色。
（2）紫外吸收光谱测定：将一定量卵磷脂制成0.l%无水乙醇溶液，照紫外分光光法在190～40Onm处测定，卵磷脂的紫外最大吸波长在215nm。
卵磷脂的提取与鉴定
二、实验原理 卵磷脂是甘油磷脂的一种，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆 碱组成。卵磷脂广泛存在于动植物中，在植物种子和动物的 脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多；其中 蛋黄中含量最丰富，高达8～10%，因而得名。 卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等溶剂，因而可以利用这些溶 剂进行提取。本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。 通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂，两者浓缩后通过离 心进行分离，下层为卵磷脂。新提取的卵磷脂为白色蜡准状 物，遇空气可氧化成为黄褐色，这是由于其中不饱和脂肪酸 被氧化所致。卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲 胺，三甲胺有特殊的鱼腥味，可以此鉴别之。 卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂，抗氧化剂，营 养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器 材料：鸡蛋、花生油。 试剂：乙醚、10%NaOH。 仪器：磁力搅拌器，离心机。
四、实验步骤 1、卵磷脂的提取 取15g生鸡蛋黄于250mL三角锥瓶中，加入40mL乙醚， 室温下磁力搅拌提取15min。然后静置30min，上层液用带 棉花塞的漏斗过滤，往残渣中再加入15mL乙醚，搅拌提 取5min。第二次提取液通过过滤后，与第一次提取液合并， 于60℃热水浴中蒸去乙醚，将残留物质倒入烧杯中，再于 真空干燥器中进行减压干燥30min，以除尽乙醚，约可得 5g粗提取物。粗提取物进行离心10min后，下层为卵磷脂， 约得2.5-2.8g。卵磷脂可以通过冷冻干燥得到无水的产物。 2、卵磷脂的鉴定 取以上提取物约0.1g，于试管内加入10%NaOH溶液 2mL，水浴加热数分钟，嗅之是否有鱼腥味，以确定是否 卵磷脂。
Байду номын сангаас
五.结果记录与分析：
鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
四、卵磷脂的提取
➢ 蛋黄中含有丰富的卵磷脂，牛奶、动物的脑、骨 髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中 都含有卵磷脂。
6、有效地化解胆结石
• 体内过多的胆固醇会发生沉淀，从而形成胆结石，胆结石90%是 由胆固醇组成。胆汁中的主要成分是卵磷脂，此外还有水份、 胆固醇、矿物质及色素等，卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、 消化及吸收，从而使胆汁中的胆固醇保持液体状。如果每天摄 取一定量的卵磷脂可以有效地防止胆结石的形成，并对已形成 的胆结石结构
R1 常为饱和脂肪 酸如C16，C18
R2 常为不饱和脂 肪酸如花生四烯
酸
1 R1-COO-CH2
2* R2-COO-C—H
3
O
CH2 —O—P—O—R
OH
+
-
R= —CH2CH2-N(CH3)3 OH
卵磷脂
精品
非极性端 疏水端，亲油端
极性端
CO2-CH2 疏油端，亲水端
- CO2-CH O
+
CH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3
O
H-OH
磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于这种特点， 使得磷脂类化合物在细胞中起着重要的生理作用。
精品
三、卵磷脂的作用
1、肝脏的保护神
• 磷脂中的胆碱对脂肪有亲和力，若体内胆碱不足，则会影响 脂肪代谢，造成脂肪在肝内积聚，形成脂肪肝甚至会发炎肿 胀。卵磷脂不但可以预防脂肪肝，还能促进肝细胞再生，同 时，磷脂可降低血清胆固醇含量，防止肝硬化并有助于肝功 能的恢复。
精品
2、对心脏健康的积极作用
• 在20世纪60年代，科学家们 就发现卵磷脂可能具有保护 心脏的作用，在进一步的研 究中，终于证实卵磷脂对心 脏健康有积极作用。这是因 为它能调节胆固醇在人体内 的含量、有效降低胆固醇、 高血脂及冠心病的发病率。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告实验报告卵磷脂的提取和鉴定实验目的：了解卵磷脂的提取方法，并通过实验鉴定卵磷脂的纯度。
实验原理：卵磷脂是一种磷脂类物质，具有重要的生物学功能。
卵磷脂的提取可以采用乙醇-醋酸法。
具体步骤如下：1. 取鸡蛋黄1个，加入乙醇5ml，充分混匀。
2. 加入醋酸10ml，再次充分混匀。
3. 将混合液过滤，得到固体物质。
4. 将固体物质溶解在氯仿中，得到卵磷脂样品。
通过卵磷脂的紫外吸收光谱，可以鉴定卵磷脂的纯度。
卵磷脂的吸收峰位于短波长紫外区，主要吸收波长为206nm和223nm。
卵磷脂的纯度越高，吸收峰越尖锐，吸收强度越大。
实验仪器和试剂：乙醇、醋酸、氯仿、紫外分光光度计。
实验步骤：1. 取鸡蛋黄1个，放置室温下1小时。
2. 用清水清洗后风干。
3. 取鸡蛋黄5g，磨碎成细末。
4. 将鸡蛋黄末加入乙醇5ml，充分混匀。
5. 加入醋酸10ml，再次充分混匀。
6. 将混合液倒入漏斗中，过滤掉固体物质。
7. 将固体物质溶解在氯仿中，摇匀，得到卵磷脂样品。
8. 在紫外分光光度计上测试卵磷脂的吸光度。
实验结果：卵磷脂样品的吸收峰位于短波长紫外区，主要吸收波长为206nm和223nm。
经过检测，本次实验制备的卵磷脂纯度较高，吸收峰尖锐，吸收强度较大。
实验结论：本次实验熟悉了卵磷脂的提取方法，并通过紫外吸收光谱鉴定卵磷脂的纯度。
实验结果表明，利用乙醇-醋酸法可以有效地提取卵磷脂，并制备出具有较高纯度的卵磷脂样品。
蛋黄卵磷脂的提取方案
蛋黄卵磷脂的提取方案实验目的：1、了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。
2、更好的理解和利用相似相容原理。
3、熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。
4、掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。
仪器与试剂烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。
氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。
实验原理：实验采用混合溶液萃取法。
薄层色谱法又称薄板色谱法。
薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。
薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。
实验步骤：蛋黄卵磷脂的提取，取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL 混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。
抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。
滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。
分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。
干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。
用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。
在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。
薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm 左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。
展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。
蛋黄卵磷脂的分离与提纯
参数为：乙醇浓度 : (*% （ 质量分数） ，乙醇与蛋 黄粉的 比 例 为 ( ; $#,- < +，萃 取 温 度 #* ; 9*= ， 萃取时间 *’# ; $’#>；第二步超临界 56! 萃取的较 佳操作参数为：萃取压力 !& ; ?@，萃取温度 &* ; 9#= ，萃取时间 ! ; &>，分离压力 # ; (1?@， 分离温度 "* ; "#= 。这种方法的优点是可以获得 不含有机溶剂的高纯度蛋黄卵磷脂，而且有着优 越的氧化稳定性。存在的问题是在大规模生产过 程中，在超临界 56! 萃取的后期，会出现萃取器 中的物料黏度太大，致使超临界 56! 无法穿过料 层，传质效果变差。 （ !）超临界 56! 萃取 7 超临界 56! 8 乙醇萃 取 第一步用超临界 56! 萃取蛋黄粉，以 除去蛋黄油。第二步在超临界 56! 中加入一定比
+］ 。 提高到 &%" 和 !$$" ［
% " 柱层析法 柱层析是以吸附剂为固定相。当移动相中的 溶质通过固定相时，由于 吸 附 和 解 吸 能 力 不 同， 达到分离的目的。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、 硅藻土等，洗脱液常选用氯仿、低碳醇等几种溶
’］ 剂的混合物。赵彬侠等［ 对 +%" 的蛋国家已实现了工业化生产。磷 脂由于它的全面、特有功能而被誉为 “ 头脑的食 品” 、“ 人脑的黄金” 、“ 天然之精神安定剂” 、 “天 然的利尿剂” 、“ 血管的清道夫” 、“ 可食用的化妆 品” 、“ 细胞的保护神” 、“ 伟大的营养师”等风靡 全球。 二、卵磷脂的主要特性和生理功能 卵磷脂为两性分子，既具有油脂性，又具有 亲水性。其等电点为 5N O MPQ。呈白色至桔黄色粉 末或团块，有清淡柔和的风味和香味。卵磷脂易 溶于氯仿，可溶于乙醚、甲醇、乙醇、正己烷等 有机溶剂中，在水中变为胶体状态，但不溶于丙 酮，且不同的磷脂在有机 溶 剂 中 的 溶 解 度 不 同。 卵磷脂为吸水性很强的蜡状固体，由于分子中存 在大量不饱和脂肪酸，存放过程中易受光线、空 气及温度的影响而变质，产生能溶血的有毒物质。 因此，刚制备时为白色，放置一段时间后变为黄 色，久置变为棕褐色。因此，需在低温干燥条件 下保存，不 能 放 置 在 阳 光 直 射、潮 湿、高 温 处， 以免吸潮、氧化、分解变质。卵磷脂在 <!R 以下 密闭储存可超过一年，但温度降低到 =R 左右会影 响其物理稳定性，冷冻会使油相分离。 卵磷脂是生命的基础物质，存在于每个细胞 之中，但更多的是集中在人及动物体的大脑及神 经系统、血液循环系统、免疫系统及心、肝、肾 等重要器官和各种微生物、禽蛋以及大部分植物 的种子之中。卵磷脂是人体组织中含量最高的磷 脂，是构成神经组织的重要成分，属于神经高级 营养素，人类生命自始至终都离不开它的滋养和 M!
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2.乙醇溶液配制浓度存在误差
改进与优化
一、蛋黄粉丙酮脱脂效果优化方案 丙酮与卵磷脂料液比优化
1、 尝试各种不同料液比情况下的脱脂效果，分为1:3、1:6、1:9、1:12、1:15
2、 尝试脱脂时间下的脱脂效果：0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h(考察指 标：丙酮不溶物质量，越小表示除杂越多，效果越好)
03
乙醇溶解丙酮粉 提取卵磷脂:用 分析纯的无水乙 醇配制出99.7% 的乙醇溶夜,将 丙酮粉溶于其中 （每克丙酮粉加 9.5ml乙醇）， 在40℃下静置 （水浴锅），再 用真空抽滤装置 过滤至残渣较干 不粘手。
04
浓缩：水浴的 温度控制在 80-85℃为宜 。 浓缩至冷凝管 口不再滴 出 乙醇，圆底烧 瓶中的物液泛 起细小较密的 泡沫时去除热 源，继续在水 浴中存放半小 时后即可。
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系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要 器官。
存在于油料作物种子和蛋黄中，尤其在蛋黄中含量最高。
牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及 大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在体内多与蛋白质 结合，以脂肪蛋白质(脂蛋白)的形态存在着，所以卵磷脂 是以丰富的姿态存在于自然界当中，所以建议人们尽量 摄取足够多种类的食物。
生化分离工程三级项目
—蛋黄中卵磷脂的分离纯化 第五组 组长： 组员：
指导教师：
什么是卵磷脂？ 卵磷脂有哪些功效？ 卵磷脂的分布及蛋黄中的 卵磷脂？ 提取卵磷脂的方法有哪些？
01
02
03
04 01 02 03
实验原理
实验材料及主要仪器
原始数据及数据处理
04 05
结果分析与讨论
改进与优化
01
PART ONE
提取卵磷脂的方法
超临界CO2-乙醇 夹带剂萃取法
微波辅助萃取法
优点
缺点 优点 缺点
萃取物无溶剂残留，杂质含量 较低,卵磷脂含量高
对仪器及反应条件要求较严格 提取用时短，溶剂用量少，提 取率高，节能 对仪器要求高，操作较复杂 提取效率较高，工艺成熟，成 本较低 产品中容易有化学溶剂丙酮的 残留 无化学溶剂残留 工艺要求高、产量较低，因此 成本较高
实验材料和仪器
实验材料：鸡蛋、无水乙醇、丙酮 仪器：电子天平、真空抽气机、干燥箱、恒温水浴锅、
旋转蒸发仪、抽滤漏斗、厚壁烧瓶、磨口瓶
实验步骤
01
蛋黄的分离： 将鸡蛋打人 培养皿中用 小烧杯分离 成蛋白和蛋 黄 。称量蛋 黄重量（G） 及小烧杯重 量（G0）
02
丙酮脱水去油： 选用分析纯的丙 酮， 丙酮的体积 与蛋黄的克数 (mL／g) 比例为 3：1静置15min 后真空抽滤，水 分和溶于丙酮的 其它脂质在滤液 中， 而蛋黄卵磷 脂则留于滤渣即 蛋黄粉中。称量 滤渣重量（G1)。
卵磷脂
卵磷脂
卵磷脂被英美科学家喻之为“健脑的黄金，养心的极
品”，被日本营养学家称为“本世纪最伟大的保健品”。 确切的卵磷脂是磷脂酰胆碱Pc，但商业“卵磷脂”是一 类含磷酸根脂质的总和，包括磷脂酸PA、磷脂酰胆胺(脑 磷脂)PE、磷脂酰胆碱(卵磷脂)PC、磷脂酰丝胺酸PS 、磷 脂酰甘油PG和磷脂酰肌醇PI 6种。
血管的“清道夫” 卵磷脂具有乳化分解油 脂的作用，对高血脂和 高胆固醇有显著的功效， 可预防和治疗动脉硬化。 可预防老年痴呆的发生 人记忆力减退，其原因 与乙酰胆碱含量不足有 一定关系。人脑能直接 从血液中摄取磷脂，并 很快转化为乙酰胆碱。
对人体有什么好处 呢？
卵磷脂的分布
卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经
[15]肖虹,周裔彬,尚岩岩,邵磊,胡经纬,毛晓文. 超声辅助提取鸡蛋卵磷脂的工艺研究[J]. 食品工业科 技,2010,08:255-257.
THANKS
WE WILL TRY OUR BEST（づ~ 3~)づ
127.965
得率计算
G2 - G0 η 100 % G
卵磷脂得率=（127.965-111.077）/35.402*100%=47.7035％>11%
结果分析与讨论
卵磷脂得率高于一般水平11%左右，可能原因如下：
1.在最初蛋黄与蛋白的分离过程中，蛋白去除不彻底。 2.丙酮脱脂时间不足 导致提取物中含有大量杂质。
二、 丙酮不溶物乙醇萃取效果优化方案
1、试验不同乙醇浓度下的萃取效果 分成四组进行单因素试验来进行验证 乙 醇浓度分别为50%、60%、70%、80%、90%、100% （料液比1:7，水浴时间 1.5h，水浴温度35%） 2、试验不同萃取时间下的萃取效果 分成八组进行单因素试验来进行验证 萃 取时间分别为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h (料液比1:7，乙 醇浓度选取已优化参数，水浴温度35℃) 3、试验不同萃取温度下的萃取效果 分成八组进行单因素试验来进行验证 萃 取温度分别为15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃（前两个因 素选用已优化参数，；料液比1:7）
丙酮提取法
优点 缺点
√
低温超滤法
优点 缺点
配位吸附柱层析 法
优点
分离系统可循环使用，成本低 廉。较为环保，分离周期短， 毒性小
对所用仪器要求高
缺点
02
PART TWO
实验部分
实验原理
卵黄中的甘油三酸酯占全部脂类的60%，磷脂约占28%,甾 醇脂及其他约占6%。磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿，部分溶 于乙醇，极难溶于丙酮；卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等 有机溶剂，但不溶于丙酮；丙酮能够溶解油脂和游离脂肪 酸、甘油三酯等。因此本实验采用化学试剂从蛋黄中提取 卵磷脂时，先采用丙酮脱水去其他脂类，再用乙醇对丙酮 粉进行溶解，抽滤浓缩干燥最终获得卵磷脂。
1844年法国人Gohley从蛋黄中发现卵磷脂，并以希腊文
命名为Lecithos（卵磷脂），通用药品名称为Lecithin，也 自此揭开了其神秘的面纱。
卵磷脂是磷脂的一种，又名磷脂酰胆碱，简称PC。磷脂
酰胆碱由甘油基，脂肪酸基和胆碱构成。
卵磷脂的功效
肝脏的保护神 卵磷脂不但可预防脂肪 肝，还能促进肝细胞再 生，防止肝硬化并有助 于肝功能的恢复。
胎、婴儿神经发育的必 需品 婴幼儿时期是 大脑形成发育最关键时 期，卵磷脂可以促进大 脑神经系统与脑容积的 增长、发育。 能有效地化解胆结石 胆结石90％是由胆固 醇组成，卵磷脂可以将 多余的胆固醇分解、消 化及吸收。
糖尿病患者的营养品 不足会使胰脏机能下降， 无法分泌充分的胰岛素， 不能有效地将血液中的 葡萄糖运送到细胞中。 柔润皮肤 能分解体内过多的毒素， 并经肝脏和肾脏的处理 排出体外，可消除青春 痘、雀斑。 良好的心理调和剂 补充卵磷脂，可使大脑 神经及时得到营养，改 善因神经紧张而引起的 急躁、易怒、失眠等症。
05
干燥：浓缩后 所得的物液流 动性很强，含 有较多水分。 考虑其抗热性 较差，故放在 不高60 ℃的 烘箱中，至其 不再呈流动性， 具有粘稠感时 取出。称量干 燥后质量（G2） 并计算得率。
数据
原始数据记录 蛋黄重量G（g） 小烧杯重量G0（g） 干燥后烧杯重量G2（g）
35.402
111.077