卵磷脂的提取

卵磷脂的提取

一、实验原理

卵磷脂为两性分子，既具有脂溶性，又具有亲水性，其等电点为6.7。纯净的卵磷脂为淡黄色，液态，有清淡柔和的风味和香味。卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中，也能溶于水中成为胶体状态，但不溶于丙酮，且不同的磷脂在有机溶剂中的溶解度不同，故可用这些有机溶剂来提取分离卵磷脂。

卵磷脂的提取方法有有机溶剂法;无机盐复合沉淀法；乙酸乙酯纯化法；超临界Co2萃取法；色谱法和酶法等。

有机溶剂法：根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的，该方法提取卵磷脂具有分离效率高，生产周期短，易实现自动化等优点，但所得卵磷脂纯度不高。

本实验采取有机溶剂法对卵磷脂进行粗提取，再进一步纯化。

二、试验材料的依据

三、操作步骤

1、原蛋液处理

原料蛋去壳，蛋内容物搅拌、过滤，取培养皿称量原蛋液2g于50~55℃的真空干燥器中烘干，磨成粉末。

2、原料粉浸泡

用乙醇和甲醇1：1的混合液浸泡，混合液的用量为原料粉的2倍，浸泡时醇液以高出粉面30~35cm为原则：

先将混合醇液倒入烧杯中，然后边搅拌边加入原料粉，持续搅拌到醇浸液为金黄色，用倾泻法（即将沉淀上澄清液沿玻棒小心倾入漏斗,尽可能使沉淀留在杯中。少量是为防止洗涤后溶液太多,多次是为是清洗的更干净）吸取金黄色醇浸液，沉淀物倒入细纱布中，压出余下的浸泡液，移至前浸液中。

3、蒸馏浓缩

甲醇的沸点为66.78℃，乙醇的沸点为78.4℃，故将醇浸液加热至78~80℃时醇变成气体，由分馏柱进入冷凝管;再变成液体而积存于接受瓶中。当蒸馏出2/3的醇液时，便可升高蒸馏温度达80~85℃，继续蒸馏至烧瓶中残液已呈浊厚油状物，而冷凝管中已不再滴下回收醇液时，即可停止蒸馏，准备进行沉淀净化。

沉淀净化是用丙酮进行。方法是将平底（或圆底）大烧杯中残余的油状物倒出，加入油状物2倍量的丙酮，以便净化沉淀。加丙酮时应用玻璃棒搅拌，静置，待其沉淀分层。

将上层浑浊的丙酮洗液倾出，加入同量的丙酮搅拌洗净，放入已干燥、称重且标记了的离心管中，4000r/min离心10min，这样重复两三次。

4、干燥

取离心管中的沉淀物进行真空干燥，箱内温度应保持在25~30℃。干燥时间的长短取决于卵磷脂的干湿程度，既得粗卵磷脂。

5、纯化

将粗卵磷脂称重后溶于无水乙醇，制备卵磷脂含量约10%的乙醇溶液，加入Zncl2溶液，使Zncl2含量相当于卵磷脂的10%，室温搅拌0.5h，分离沉淀物，加入适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌1h，再用丙酮反复妍洗，直至丙酮洗液近无色，得到白色腊状的精卵磷脂。真空干燥，称重。

四、试剂与仪器

试剂：鲜鸡蛋、乙醇-甲醇1:1混合溶液、丙酮、无水乙醇、ZnCl2

仪器：烧杯、玻璃棒、漏斗、滤纸、培养皿、细布纱、真空干燥器、馏装置（蒸馏烧瓶、冷凝管、接收器）、温度计、石棉网、铁架台、电炉、量筒、离心机

五、结论与分析

笼养鸡蛋卵磷脂的含量

管号样品质量离心管质量总质量卵磷脂质量卵磷脂含量

1 2.5500 2.8671 2.8851 0.0180 0.720%

2 2.5100 2.775

3 2.775

4 0.0001 0.004%

3 2.5900 2.7590 2.7718 0.0128 0.521%

4 2.5600 2.7883 2.8083 0.0200 0.800%

5 2.5500 2.7669 2.7724 0.0055 0.220%

6 2.5200 2.8000 2.8299 0.0299 1.196%