鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器,如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂,由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能,如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂,通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤,得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂:无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取(1)称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄,加入30mL温热的95%乙醇,边加边搅拌均匀。
(2)将混合液冷却至室温,用漏斗过滤,收集滤液。
(3)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化(1)将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚,溶解后过滤。
(2)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定(1)三甲胺的检验:取少量卵磷脂,加入2~5mL氢氧化钠溶液,水浴加热15min,观察红色石蕊试纸是否变蓝,并嗅其气味。
(2)不饱和性检验:取少量卵磷脂,加入3%溴的四氯化碳溶液,振摇观察是否褪色。
(3)磷酸的检验:取少量卵磷脂,加入5~10滴95%乙醇溶液和5~10滴钼酸铵试剂,水浴加热5~10min,观察是否产生蓝色沉淀。
(4)甘油的检验:取少量卵磷脂,加入0.2g硫酸氢钾,小火加热,观察是否有水蒸气放出,嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验,成功从蛋黄中提取出卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀,得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验,验证了提取的卵磷脂纯度较高。
B4组卵磷脂的提取及鉴定
实验结果
1.我们得到粗卵磷脂为1.799克。 2.卵磷脂的最大吸收波长为246nm, 最大吸收值为3.9281.
3.计算Rf值,Rf=2.9/8.10=0.358
Rf=3.5/8.10=0.432
Rf=5.8/8.10=0.716
薄层色谱法中原点到斑点中心的距离
Rf=_______________________________________________
谢谢观赏
实验成功之处
1.小组成员有热情、有信心、有恒 心。
2小组成员的主动性、积极性、参与 度得到了提高。 3.有利于小组成员团结协作,共同 进步。
实验注意事项
1.碘蒸气显色时,应保证层析干燥,碘蒸气 量不可过浓。同时在家碘时应戴手套,注 意安全。 2.紫外吸收光谱测定时样品与对照品溶液 浓度应相同。
3.点样时,点样应少量多次,点样要适量, 要均匀。
什么是卵磷脂?
卵磷脂属ห้องสมุดไป่ตู้一种混合物,是存在于动植物
组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质,
其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、
糖脂、甘油三酸脂以及磷脂。卵磷脂被誉为与
蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。
卵磷脂的作用
1、肝脏的保护神 2、 对心脏健康的积极作用 3、促进大脑发育,增强记忆力 4、 血管的“清道夫” 5、糠尿病患者的营养品 6、有效地化解胆结石 7、 胎、婴儿神经发育的必需品 8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤 9、预防老年痴呆症的发生 10、良好的心理调和剂
鸡蛋中卵磷脂的提取及鉴定
目录
•实验目的及原理
•卵磷脂的含义
•卵磷脂的作用
•实验结果
•实验分析
•实验成功之处
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质;2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法;3.通过提取和鉴定,初步了解卵磷脂的含量。
二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类,具有良好的亲水性和亲油性能。
卵磷脂是细胞膜的组成成分之一,并参与了许多生命过程的调节和控制。
由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基,因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上,形成磷双层结构和微乳液,从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。
2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄,用盐水洗净表面的蛋白质,然后压成泥,称取25g,加入160 ml乙醇和70 ml氯仿,振荡提取24h,滤去蛋黄泥,得到提取液。
用氮气吹干提取液,再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上,加热显色,可以看到卵磷脂的蓝色斑点。
通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点,可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。
三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器:薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。
药品:鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。
三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通;2.对于采用氮气吹干的提取液,需要注意气压和吹干时间,以免造成温度过高或时间过长的现象;3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制,避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常;4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间,尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定;5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。
四、实验结果分析通过本实验,我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量,并通过对标准试剂和实验结果的对比,也可以得到质量较好的卵磷脂含量。
通过初步检测,我们可以确定卵磷脂含量的多少,并初步判断蛋黄的质量。
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
实验过程中,我们遇到了许多困难和挑战,如提取效率不高、鉴定结果不稳定等。通过不断尝试和改 进,我们逐渐找到了解决问题的方法,提高了实验技能和解决问题的能力。
实验不足与改进建议
实验不足
在实验过程中,我们发现提取卵磷脂的 效率不够高,且鉴定结果有时不够准确 。此外,实验过程中也存在一些操作不 规范的问题。
02
常用的提取溶剂有氯仿-甲醇混合 溶剂、石油醚等,通过反复提取 可提高卵磷脂的提取率。
卵磷脂的鉴定原理
通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法等现代分析手段对提取的卵磷脂进行结构 分析,确定其化学组成和分子结构。
通过色谱法(如薄层色谱法、高效液相色谱法)对提取的卵磷脂进行纯度鉴定, 确定其中所含杂质和溶剂残留量。
讨论
根据分析结果,与前人研究进行比较, 提出可能的改进措施和未来研究方向。
结论总结
总结
对整个实验过程和结果进行总结,概述实验的主要发现和结论。
展望
提出实验的局限性和不足之处,以及对未来研究的建议和展获与体会
实验收获
通过本次实验,我们成功地从蛋黄中提取了卵磷脂,并对其进行了鉴定。实验过程中,我们掌握了卵 磷脂的提取和鉴定方法,加深了对卵磷脂性质和作用的理解。
展望
未来,卵磷脂的研究将继续深入开展,探索 其在生物体内的生理功能和作用机制。同时, 随着人们对健康饮食的关注度不断提高,卵 磷脂在食品、保健品等领域的应用也将得到 更广泛的发展。我们相信,随着研究的不断 深入和应用领域的拓展,卵磷脂将会为人类 健康事业做出更大的贡献。
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学习卵磷脂的鉴定技术
薄层色谱法
利用薄层色谱法分离和鉴定卵磷脂中 的主要成分,了解其组成和比例。
蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测 实验报告
实验申请实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料:鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂: 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇,均为分析纯试剂.实验仪器: 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。
辅助器材:毛细管(两支)、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒(2个)、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的:1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。
实验原理:卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中含量较高,约10%。
可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们的解吸附能力的不同,使各成分达到分离。
在硅胶薄层板上,样品中的两成分是两种结构近似的染料,在展开剂四氯化碳的作用下。
在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸,再吸附,再解吸,由于极性不同从而分离,展开结束以后,会在薄层板上形成斑点,混合物中的成分得以分离。
参考文献: 刘宝全,所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋,分别将其刨壳,把四个鸡蛋的总的蛋壳,蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中,用筷子捣碎,取100ml丙酮倒入其中,搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤,收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯,取100ml丙酮倒入杯中,重复上步操作,收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。
用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇,放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中,搅拌30min后用布氏漏斗抽滤,收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中,再取100ml混合液浸泡搅拌30min,然后抽滤,将所有滤液收集,倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发,旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
鸡蛋黄中磷脂的提取及分析
三、仪器和药品 仪器:研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花 药品:熟鸡蛋黄 20%NaOH 溶液 10%Pb(AC)2
丙酮 碘化铋钾溶液
1%CuSO4 溶液
硫酸 95%乙醇 氯仿
四、实验步骤 1.卵磷脂的提取 (1)取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入 10ml 95%乙醇研磨,再加入 10ml 95%
乙醇充分研磨,减压过滤,布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移入研钵中,再加 10ml 95% 乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并二次滤液,如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发 皿内。
六.思考题: 1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理? 2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作何解释? 3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么? 4.为什么实验中要进行减压过滤?操作时应注意哪些地方?
脂肪酸的检查:取棉花上沉淀(滤饼)少许,加 1 滴 20%氢氧化钠溶液与 5ml 水,用玻棒搅 拌使其溶解,在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄清液,以硝酸酸化后加入 10%醋酸铅 2 滴,观察 溶液的变化 甘油的检查:取试管一支,加入 1%硫酸铜溶液 1ml(二十滴),2 滴 20%氢氧化钠溶液,振 摇,有氢氧化铜沉淀生成,再加入 1ml 水解液振摇,观察所得结果。 胆碱的检查:取水解液 1ml,滴加硫酸使其酸化(以 pH 试纸试之)加入 1 滴碘化铋钾溶液, 有砖红色沉淀生成。
(2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油状物。 (3)冷却后,加入 5ml 氯仿,搅拌使油状物完全溶解。 (4)在搅拌下慢慢加入 15ml 丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其尽量析出(溶液倒入回收瓶 内)。 2.卵磷脂的水解及其组成分析 (1)水解:取一支干燥大试管,加入提取的一半量的卵磷脂,并加入 5ml 20%氢氧化钠溶 液,放入沸水浴中加热 10 分钟,并用玻棒加以搅拌,使卵磷脂水解,冷却后,在玻璃漏斗中 用棉花过滤。滤液供下面检查用。 (2)检查
实验九卵磷脂的提取和鉴定
实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的:熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。
实验原理:卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子,其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。
卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能,在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。
卵磷脂的提取方法:材料:鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。
1.取足够多的鸡蛋黄,用纯净水洗净后晾干备用。
2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出,剥去蛋壳并取出蛋黄,用刀将其压成泥状。
3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中,加入适量的乙醇,不断搅拌,使其混合均匀。
4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后,将其倒入滤布中,将滤液与滤涤液分离开来。
5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷,用250ml分液漏斗进行振荡后,取出下层酒精分离液。
6.将酒精中的卵磷脂析出,将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解,即可得到卵磷脂。
卵磷脂的鉴定:1.磷钼酸法:将标本加入一定量的磷钼酸试剂,加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解,此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。
其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应,生成黄色的磷钼酸沉淀。
2.碱水解法:将标本与氢氧化钠混合,使卵磷脂水解产生酰基胆碱。
然后加入硫酸和琼脂,沉淀下来的物质即为卵磷脂。
3.利用质谱法进行鉴定:该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征,通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定,进行卵磷脂的鉴定。
实验步骤:1.取少量卵磷脂样品溶于水中。
2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁,然后加入磷钼酸试剂。
3.待磷钼酸在样品中完全溶解后,使用分光光度计测定溶液中吸收光谱,从而得出样品中卵磷脂的质量。
实验结论:通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法,我们可以成功地得到卵磷脂,并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。
这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。
鸡蛋中卵磷脂提取鉴定
卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效:保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性:无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围:护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景:随着消费者对健康和环保的关注度提高, 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
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汇报人:
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性:卵磷脂在油脂中 的溶解度较高,因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化:提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质,需要进行纯化 处理,常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
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卵磷脂的提取方法:通常采用有机 溶剂萃取法,将鸡蛋中的油脂溶解 后,再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同,将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性:卵磷脂难溶于水,易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性:卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值:卵磷脂具有皂化特性
酸碱度:卵磷脂在酸性条件下 稳定,在碱性条件下易水解
红外光谱:卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法:鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法:鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取:使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离:通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理:去除蛋壳,收集蛋 黄
鉴定:通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定:通过光谱、色谱等技 术,对卵磷脂进行鉴定
添加标题
实验十三卵磷脂的提取及其组成鉴定
思考题:
• • • • • • 1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理? 2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作 何解释? 3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么? 4.为什么实验中要进行减压过滤? 操作时应注意哪些地方?
R1 常为饱和脂肪 酸如C16,C18 R2 常为不饱和脂肪 酸如花生四烯酸
1 1 R -COO-CH2 2* R2-COO-C—H
Question 5 卵磷脂彻 底水解的产物是什么?
O 3 CH2 —O—P—O—R OH + R= —CH2CH2-N(CH3)3 OH 为: 卵磷脂
+ HO-CH2CH2-N(CH3)3 OH 胆 碱
由于甘油磷脂分子中磷酸部分还有一个可以电离的H+,而 胆碱或胆胺部分又有碱性基团,故甘油磷脂以偶极离子的形式 存在。 极性端 CO -CH 疏油端,亲水端
实验十三
卵磷脂的提取及其 组成鉴定
• 一、实验目的 • 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。 • 巩固抽滤等基本操作。
• 主讲教师:
二、基本原理
• 卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋 黄中含量较高,约8%。可根据它溶于乙醇、 氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离 得到。卵磷脂可在碱性溶液中加热水解, 得到甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱,可从水 解液中检查出这些组分。其分离提取的流 程如下:
卵磷脂彻底水解的产物是什么?
O 答: O CH2 O C R1 完全水解 R2 C O C H O + CH2 O P CH2CH2N(CH3)3 O O O CH2 OH R1 C OH HO P OH 磷酸 O HO C H OH CH2 OH R2 C OH
甘油
脂肪酸
HOCH2CH2N(CH3)3 OH- 胆碱
实验二:鸡蛋卵磷脂的制备与检测(薄层色谱技术)
实验中所得产品为黄色油状粘稠液体。此时,产物中主要成 分为卵磷脂,其次含有少量杂质。纯净新鲜的卵磷脂应为白色蜡 状物,与空气接触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈黄褐色。 ⑴ TLC 版样示意图
卵磷脂为两性分子,既具有油脂性,又具有亲水性。其等电点 为 5N O MPQ。呈白色至桔黄色粉末或团块,有清淡柔和的风味 和香味。卵磷脂易溶于氯仿,可溶于乙醚、甲醇、乙醇、正己烷 等有机溶剂中,在水中变为胶体状态,但不溶于丙酮,且不同的 磷脂在有机溶剂中的溶解度不同。卵磷脂为吸水性很强的蜡状固 体,由于分子中存在大量不饱和脂肪酸,存放过程中易受光线、 空气及温度的影响而变质,产生能溶血的有毒物质。因此,刚制 备时为白色,放置一段时间后变为黄色,久置变为棕褐色。因此, 需在低温干燥条件下保存,不能放置在阳光直射、潮湿、高温处, 以免吸潮、氧化、分解变质。 卵磷脂是生命的基础物质,存在于每个细胞之中,但更多的是集 中在人及动物体的大脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统及 心、肝、肾等重要器官和各种微生物、禽蛋以及大部分植物的种 子之中。卵磷脂是人体组织中含量最高的磷脂,是构成神经组织 的重要成分,属于神经高级营养素,被誉为与蛋白质、维生素并 列的“第三营养素”。卵磷脂在食品工业中可以作为乳化剂、抗 氧化剂、食用香料的微胶囊壁材、新型保健食品;在医药业中可 以用作药物脂质体、药物辅剂、药物缓释剂;在化妆品业中可作 为乳化剂、皮肤及黏膜修补剂;在纺织业中可用作乳化剂、铺展 剂、渗透剂,也可用于洗涤、脱胶、丝光处理染色、漂白和整理 等;还可以用作农作物的杀菌剂、水果和花卉的保鲜剂、鱼类饲 料、油墨乳化剂以及工业助剂等领域,应用前景广阔。
实训 卵磷脂的提取及其组成鉴定
实训卵磷脂的提取及其组成鉴定一、实验目的1、加深了解磷脂类物质的结构和性质2、学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法2、掌握卵磷脂的组成鉴定的原理和方法二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
卵磷脂分离提取的流程如下:三、仪器和试剂仪器研钵、布氏漏斗、蒸发皿、水浴锅(沸水)、玻璃漏斗、玻棒、小烧杯、试管、纱布、酒精灯。
试剂1、熟鸡蛋黄2、红色石蕊试纸3、95%乙醇4、20%氢氧化钠溶液5、钼酸铵试剂:将6g钼酸铵溶于15mL蒸馏水中,加入5mL浓氨水,另外将24mL浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后使用。
6、丙酮7、氯仿8、10%溴的四氯化碳溶液9、硝酸10、1%硫酸铜溶液11、10%醋酸铅溶液四、操作步骤(一)卵磷脂的提取1、取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入10ml 95%乙醇研磨,再加入20ml 95%乙醇充分研磨,减压过滤(应盖满漏斗),滤干后,如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发皿内。
2、将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油状物。
3、冷却后,加入5ml氯仿,搅拌使油状物完全溶解。
4、在搅拌下慢慢加入15ml丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其尽量析出,将氯仿丙酮溶液倒掉,取沉淀。
(二)卵磷脂的组成鉴定1、水解及三甲胺的检验取一支干燥大试管,加入提取的卵磷脂,并加入5ml 20%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热10分钟,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
实验十三卵磷脂的提取及其组成鉴定
入蒸发皿内。
• (2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油 状物。
• (3)冷却后,加入5ml氯仿,搅拌使油状物完全溶解。
• (4)在搅拌下慢慢加入15ml丙酮,即有卵磷脂析出,
•
搅动使其尽量析出(溶液倒入回收瓶内)。
2.卵磷脂的水解及其组成鉴定
Pb(AC)2 1%CuSO4溶液 硫酸 95%乙醇 氯仿 丙酮 碘化铋钾溶液
四、实验步骤
• 1.卵磷脂的提取
(1)取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入10ml 95%乙醇研磨,再加入10ml 95%乙醇充分研磨,减压过 滤(应盖满漏斗),布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后, 移入研钵中,再加10ml 95%乙醇研磨,减压过滤,滤干
否则会带入杂质。 • 4. 搅动时,析出的卵磷脂可粘附于玻棒上,成团状。 • 5. 加热时,会促使胆碱分解,产生三甲胺的臭味。 • 6. 加硝酸酸化,脂肪酸析出,溶液变浑浊,加醋酸铅有脂肪酸铅盐生
成,浑浊进一步增强。 • 7. 生成的氢氧化铜沉淀.因水解液中的甘油与之反应,生成甘油铜,
沉淀逐步溶解。 • 8胆. 碱克生劳成特砖试红剂色为的含沉有淀KI。-BiI3复盐的有色溶液,与含氮碱性化合物如
思考题:
• 1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理?
• 2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作
•
何解释?
• 3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么?
• 4.为什么实验中要进行减压过滤?
•
操作时应注意哪些地方?
R1 常为饱和脂肪 酸如C16,C18 R2 常为不饱和脂肪 酸如花生四烯酸
Question 5 卵磷脂彻 R1-COO1-CH2 底水解的产物是什么?
鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
整理课件
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8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤
• 正常人体内含有许多毒素,特别是在肠道内,当这些毒素含量 过高时,便会随着血液循环沉积在皮肤上,从而形成色斑或青 春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂,它能分解体内过多的 毒素,并经肝脏和肾脏的处理排出体外,当体内的毒素降低到 一定的浓度时,脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还 具有一定的亲水性,并有增加血红素的功能,如果每天服用一 定量的卵磷脂,就能为皮肤提供充分的水分和氧气,使皮肤变 得光滑柔润。
整理课件
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10、良好的心理调和剂
• 社会竞争日趋激烈,人们长期处在紧张的环境和种种压力下, 常患有焦虑、急躁、易怒、失眠、耳鸣等症,即植物神经紊 乱,通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂,可使大脑神经 及时得到营养补充,保持健康的工作状态,利于消除疲劳, 激化脑细胞,改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等 症。
整理课件
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9、预防老年痴呆症的发生
• 人随着年龄增长,记忆力会减退,其原因与乙酰胆碱含量 不足有一定关系。脑部的神经传导物质(乙酰胆碱)减少 是引起老年痴呆的主要原因,乙酰胆碱是神经系统信息传 递时必需的化合物。而且“胆碱”是卵磷脂的基本成分, 卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的 乙酰结合为“乙酰胆碱”,从而成为大脑提供充分的信息 传导物质,大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱,并很 快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退 的进程,预防或推迟老年痴呆的发生。
整理课件
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以蛋黄为原料的制备工艺
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g (两吸管)蛋黄于50 mL小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30 mL
滤纸过滤
将滤液置于蒸发皿内,水浴 锅中蒸干,所得干物即为卵 磷脂粗品。
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
氯仿
丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
Байду номын сангаас
脂肪 卵磷脂
【实验步骤】
1.卵磷脂的提取
〔1〕取1个熟的鸡蛋黄,置于研钵中研细, 加 入15mL 95%乙醇溶液,研磨,搅拌 均匀。减压过滤,收集滤液。将漏斗的 残渣移入研钵内,加15mL 95%乙醇溶液, 研磨,过滤(滤液应完全透明),将两次 滤液合并于蒸发皿内。
〔2〕脂肪酸的检查
取棉花上沉淀少许,加5mL水,搅 拌,有无泡沫生成?过滤,得滤液,以 浓硝酸酸化后参加数滴10%醋酸铅溶液, 观察有何现象?
〔3〕甘油的检查
取小试管一支,参加1滴5%硫酸铜溶液, 2滴10%氢氧化钠溶液,振摇,有氢氧化铜沉 淀生成。参加水解液,沉淀溶解后,得深蓝色 甘油铜溶液。
〔4〕胆碱的检查
取1mL滤液,滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊 试纸检查),加克劳特试剂1滴,有砖红色沉淀 生成。
〔5〕磷酸的检查
取一支干净试管,参加10滴滤液和5 滴95%乙醇溶液,用硝酸酸化,加1mL 钼酸铵试剂,观察有何现象产生?最后 直接用火加热5min~10min,观察有无 黄色磷钼酸铵沉淀生成?
实验五 蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定
【实验目的】
1.掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。
2.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 3.了解卵磷脂水解后的产物,稳固对卵
磷脂组成构造的认识。
【实验原理】
残渣(蛋白质、脑磷
脂) 乙醇提取
蛋黄 过滤
蛋白质 脂肪 卵磷脂 脑磷脂
蒸去乙醇
乙醇溶液
油状物
脂肪
卵磷脂
本卷须知
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告实验报告卵磷脂的提取和鉴定实验目的:了解卵磷脂的提取方法,并通过实验鉴定卵磷脂的纯度。
实验原理:卵磷脂是一种磷脂类物质,具有重要的生物学功能。
卵磷脂的提取可以采用乙醇-醋酸法。
具体步骤如下:1. 取鸡蛋黄1个,加入乙醇5ml,充分混匀。
2. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。
3. 将混合液过滤,得到固体物质。
4. 将固体物质溶解在氯仿中,得到卵磷脂样品。
通过卵磷脂的紫外吸收光谱,可以鉴定卵磷脂的纯度。
卵磷脂的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。
卵磷脂的纯度越高,吸收峰越尖锐,吸收强度越大。
实验仪器和试剂:乙醇、醋酸、氯仿、紫外分光光度计。
实验步骤:1. 取鸡蛋黄1个,放置室温下1小时。
2. 用清水清洗后风干。
3. 取鸡蛋黄5g,磨碎成细末。
4. 将鸡蛋黄末加入乙醇5ml,充分混匀。
5. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。
6. 将混合液倒入漏斗中,过滤掉固体物质。
7. 将固体物质溶解在氯仿中,摇匀,得到卵磷脂样品。
8. 在紫外分光光度计上测试卵磷脂的吸光度。
实验结果:卵磷脂样品的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。
经过检测,本次实验制备的卵磷脂纯度较高,吸收峰尖锐,吸收强度较大。
实验结论:本次实验熟悉了卵磷脂的提取方法,并通过紫外吸收光谱鉴定卵磷脂的纯度。
实验结果表明,利用乙醇-醋酸法可以有效地提取卵磷脂,并制备出具有较高纯度的卵磷脂样品。
卵磷脂的提取与TLC检测
实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与TLC检测
实验原料:鲜鸡蛋、纯化卵磷脂
实验试剂:
实验仪器:旋转蒸发仪、恒温水浴箱、真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平烘箱、固定厚度涂布器、方形层析缸、玻璃板、研钵
辅助器材:毛细管、玻璃棒、滤纸、漏斗、10ml量筒、50ml量筒、烧杯,圆底烧瓶等
操作步骤: 操作说明及结果纪录:
取10.0g 鸡蛋黄
蛋黄用30ml 丙酮(
pH8)搅拌1h
过滤
后,滤渣用丙酮洗2-3次 用30ml 乙醇-石油醚(3:1)混合试剂搅拌浸 提1h 抽滤 旋转蒸发(40℃) 收集产品,进行检测 TLC 检测 制板 称取 20 g 孔径为 6 nm 的硅胶 60, 用 45mL 1- 1mol ·L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 用涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。
点样
用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。
展开
将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约 6 cm/h当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。
显色
将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现。
实验二:鸡蛋卵磷脂的制备与检测(薄层色谱技术)
g)打开旋转开关,开始旋转。 h)蒸发完毕后,先停止转动,再调解升降杆,脱离水面。 i)打开活塞放气,直到与外界大气压接近。 j)取下蒸馏烧瓶,关闭水泵与电源。 补充: 在蒸馏时进行减压蒸馏 原因: i)减压能提高蒸发速度 ii)减压能降低沸点 在加热时要进行旋转(原因:旋转时能增大蒸发面积且加快蒸发速度提高蒸 发质量。 蒸发完毕后,要先打开活塞,流通空气,使大气压相等,防止倒流,污染 原料。)
卵磷脂的提取、鉴定和应用 实验指导书
卵磷脂的提取、鉴定和应用实验指导书一、实验目的通过实验,进一步加深对卵磷脂特性和用途等相关知识的理解,掌握卵磷脂的提取和鉴定方法。
二、实验原理卵磷脂是甘油磷脂中的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油及胆碱组成:其中,R1为硬脂酸或软脂酸;R2为油酸、亚油酸、亚麻酸或花生四烯酸等不饱和脂肪酸。
卵磷脂广泛分布于动植物中,在植物种籽和动物的脑、神经组织、肝、肾上腺以及红细胞中含量较多;蛋黄中含量最丰富,高达8~10%,因而得名。
卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等,因而可以利用这些溶剂进行提取。
本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。
通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂,两者浓缩后通过离心进行分离,下层为卵磷脂。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物,遇空气即氧化变成黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。
卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺,三甲胺有特异的鱼腥臭味,可以此鉴别之。
卵磷脂在食品工业中广泛用作乳化剂,抗氧化剂和营养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器鸡蛋;花生油;乙醚;10%NaOH;磁力搅拌器;离心机等。
四、实验内容1、卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄(通常含水50%,脂类32%,蛋白质16%,灰分2%),于150mL三角锥瓶中加入40mL乙醚,放入磁力搅拌器,室温下搅拌提取15分钟,然后静置30分钟,上层清液于带棉花塞到50mL烧杯中过滤,往残渣中再加入15mL乙醚,搅拌提取5分钟。
第二次提取液过滤后,与第一次提取液合并,于60o C热水浴蒸去乙醚,将残留物倒入烧杯中,约可得5g粗提取物。
粗提取物进行离心(4000转/分)10分钟,下层为卵磷脂,约得2.5~2.8g。
卵磷脂可以通过冷冻干燥得无水的产物。
2、卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g,分为两份于试管内加入10% 氢氧化钠溶液2mL,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼腥味,以确定是否为卵磷脂。
3、乳化作用在两支试管中各加入3~5mL水,一支加卵磷脂少许,溶解后滴加5滴花生油;另一支也滴入5滴花生油,加塞极力振摇试管,使花生油分散。
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收集沉淀物
冷丙酮50 mL
搅拌1 h,过滤。 收集沉淀,40℃真空干燥
五、卵磷脂的溶解性观察
药勺刮取取粗提物少许,置干燥试管底部
加入1mL 乙醚,用玻棒搅动
现象?
加入2mL丙酮
现象?
六、卵磷脂的鉴定
1.三甲胺的检验 取干燥试管一支,加入少量提取物和3mL 10% NaOH溶液, 水浴加热15min,在管口放一片蒸馏水润湿过的红色石蕊试 纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味,记录。
卵磷脂的化学结构
R1 常为饱和脂肪 酸如C16,C18 R2 常为不饱和脂 肪酸如花生四烯 酸
1 R1-COO-CH2 2* R2-COO-C—H O 3 CH2 —O—P—O—R OH
+ R= —N(CH3)3 OH 卵磷脂
CO2-CH2 CO2-CH
极性端 疏油端,亲水端
非极性端 疏水端,亲油端
O + CH2O-P-O-CH - 2CH2-N(CH3)3 O
H-OH
磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于这种特 点,使得磷脂类化合物在细胞中起着重要的生理作用。
三、卵磷脂的作用
1、肝脏的保护神
• 磷脂中的胆碱对脂肪有亲和力,若体内胆碱不足,则会影响 脂肪代谢,造成脂肪在肝内积聚,形成脂肪肝甚至会发炎肿 胀。卵磷脂不但可以预防脂肪肝,还能促进肝细胞再生,同 时,磷脂可降低血清胆固醇含量,防止肝硬化并有助于肝功 能的恢复。
5、糠尿病患者的营养品
• 卵磷脂不足会使胰脏机能下降,无法分泌充分的胰岛素,不能 有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中,这是导致糖尿病的基 本原因之一。如每天食用20克以上的卵磷脂,则糖尿病的恢复 是相当显著的。很多病人甚至可不必再注射胰岛素。特别是对 糖尿坏疽及动脉硬化等并发症患者更为有效。
6、有效地化解胆结石
蛋黄中卵磷脂的提取、纯 化和鉴定
一、卵磷脂的概述:
卵磷脂被誉为与蛋白质、 维生素并列的“第三营养素”, • 卵磷脂是生命的基础物质, 人类生命自始至终都离不开它 的滋养和保护。卵磷脂存在于 每个细胞之中,更多的是集中 在脑及神经系统、血液循环系 统、免疫系统以及肝、心、肾 等重要器官。 • 1844年法国人Gohley从蛋 黄中发现卵磷脂(蛋黄素), 并以希腊文命名为Lecithos (卵磷脂)。
10、良好的心理调和剂
• 社会竞争日趋激烈,人们长期处在紧张的环境和种种压力下, 常患有焦虑、急躁、易怒、失眠、耳鸣等症,即植物神经紊 乱,通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂,可使大脑神经 及时得到营养补充,保持健康的工作状态,利于消除疲劳, 激化脑细胞,改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等 症。
以蛋黄为原料的制备工艺
(一)卵磷脂粗品的提取
取约10 g (两吸管)蛋黄于50 mL小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30 mL
滤纸过滤
将滤液置于蒸发皿内,水浴 锅中蒸干,所得干物即为卵 磷脂粗品。
(二)、卵磷脂的纯化
2 g粗卵磷脂溶解于20 mL无水乙醇中
10%ZnCl2的水溶液2 mL
室温下搅拌0.5 h,过滤。
•
二、卵磷脂的理化性质
• 化学名称:磷脂酰胆碱(Phosphatidylcholine) • 简称:PC • 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体,由于制 取或精制方法、储存条件不同被氧化而呈现淡黄色至棕色。 白色蜡状物质,无熔点,有旋光性,在空气中因不饱和脂 肪酸烃链氧化而变色。极易溶于乙醚及乙醇,不溶于水和 丙酮 • 磷脂酰胆碱(PC)在醇中的溶解度比磷脂酰乙醇胺(PE) 及磷脂酰肌醇(PI)高,故根据溶解性能的不同使之分离 提纯。
8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤
• 正常人体内含有许多毒素,特别是在肠道内,当这些毒素含量 过高时,便会随着血液循环沉积在皮肤上,从而形成色斑或青 春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂,它能分解体内过多的 毒素,并经肝脏和肾脏的处理排出体外,当体内的毒素降低到 一定的浓度时,脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还 具有一定的亲水性,并有增加血红素的功能,如果每天服用一 定量的卵磷脂,就能为皮肤提供充分的水分和氧气,使皮肤变 得光滑柔润。
• 体内过多的胆固醇会发生沉淀,从而形成胆结石,胆结石 90% 是由胆固醇组成。胆汁中的主要成分是卵磷脂,此外还有水份、 胆固醇、矿物质及色素等,卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、 消化及吸收,从而使胆汁中的胆固醇保持液体状。如果每天摄 取一定量的卵磷脂可以有效地防止胆结石的形成,并对已形成 的胆结石也能起到化解的作用。
7、 胎、婴儿神经发育的必需品
• 正常情况下,孕妇体内的羊水中含有大量的卵磷脂。人体脑细 胞约有150亿个,其中70%早在母体中就已经形成。为了促进胎 儿脑细胞能健康发育,孕妇补充足够的卵磷脂是很重要的。婴 幼儿时期是大脑形成发育最关键时期,卵磷脂可以促进大脑神 经系统与脑容积的增长、发育。因此美国食品和药物管理局 (FDA)规定在婴儿奶粉中必需添加卵磷脂。
9、预防老年痴呆症的发生 • 人随着年龄增长,记忆力会减退,其原因与乙酰胆碱含量 不足有一定关系。脑部的神经传导物质(乙酰胆碱)减少 是引起老年痴呆的主要原因,乙酰胆碱是神经系统信息传 递时必需的化合物。而且“胆碱”是卵磷脂的基本成分, 卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的 乙酰结合为“乙酰胆碱”,从而成为大脑提供充分的信息 传导物质,大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱,并很 快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退 的进程,预防或推迟老年痴呆的发生。
4、血管的“清道夫”
• 卵磷脂具有乳化、分解油脂的作用,可增进血液循环,改善 血清脂质,清除过氧化物,使血液中胆固醇及中性脂肪含量 降低,减少脂肪在血管内壁的滞留时间,促进粥样硬化斑的 消散,防止由胆固醇引起的血管内膜损伤。服用卵磷脂对高 血脂和高胆固醇具有显著的功效,因而可预防和治疗动脉硬 化症(高血压、心肌梗塞、脑溢血)。
将上述加热过的溶液过滤。滤液性状:
2.磷酸的检验 取干净试管一支,加入10滴上述滤液,加入10滴95%乙 醇,摇匀,再加入10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管 放入热水浴中加热5~10min,观察有何变化。
七、思考题
1. 2. 3. 4. 5. 卵磷酯的用途? 医药工业中制备卵磷酯的方法? 本实验有哪些步骤可以改进? 文字与照片记录实验过程的重要性? 通风橱的重要性?
四、卵磷脂的提取
蛋黄中含有丰富的卵磷脂,牛奶、动物的脑、骨 髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中 都含有卵磷脂。 卵磷脂在体内多与蛋白质结合,以脂肪蛋白质 (脂蛋白)的形态存在着,所以卵磷脂是以丰富的 姿态存在于自然界当中,所以建议人们尽量摄取 足够多种类的食物 。
卵磷脂实验原理
• 卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等 植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中,尤其 在蛋黄中含量较多(10%左右); • 卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可 将其与中性脂肪分离开; • 卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷 脂和脑磷脂分离。
注意事项
1. 注意安全:本实验中的乙醚、丙酮及乙醇 均为易燃药品。氯化锌具腐蚀性。 2. 实验过程要细致,培养耐心。
2、对心脏健康的积极作用
• 在20世纪60年代,科学家们 就发现卵磷脂可能具有保护 心脏的作用,在进一步的研 究中,终于证实卵磷脂对心 脏健康有积极作用。这是因 为它能调节胆固醇在人体内 的含量、有效降低胆固醇、 高血脂及冠心病的发病率。
3、促进大脑发育,增强记忆力
• 美国北卡罗来纳州DUKE大学心理学教授药学博士沃伦来克在 报告中提到:用卵磷脂饲育怀孕的大鼠,其后代在智力测验 (迷宫测试)中,记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的后 代。北卡罗来纳大学营养学部教授及主任,会议的首席专家, 医学博士、药学博士史蒂文·泽瑟尔在大会贺词中说: “总结有关卵磷脂的所有研究成果,我们应 当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂,这 对于她们的婴儿的智力发育是很重要的。” 美国食品与药物管理委员会(FDA)规定,所 有婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。