耐热霉菌检测方法
耐热菌的检测方法
耐热菌的检测方法
耐热菌的检测方法包括以下几种：
1. 常规培养方法：通过将样品接种到含有特定培养基的琼脂平板上进行培养，利用耐热菌在高温下能够生长的特性检测其存在。
2. 腹腔注射法：将样品与小鼠混合注射到小鼠的腹腔内，通过观察小鼠的死亡与否来判断样品中是否存在耐热菌。
3. PCR法：使用聚合酶链反应（PCR）扩增样品中的特定基因片段，通过检测扩增产物来确认耐热菌的存在。
4. 培养基过滤法：将样品过滤并收集滤液，将滤液接种到含有特定培养基的琼脂平板上进行培养，通过观察生长的菌落来确定耐热菌的存在。
5. 免疫学检测法：使用特异性抗原与样品中的耐热菌结合，再加入特异性抗体与抗原结合，通过检测抗原-抗体结合的信号来确定耐热菌的存在。
根据具体的需要和实验条件，可以选择适合的检测方法来判断样品中是否存在耐热菌。
10[1].高温耐热菌检测
![10[1].高温耐热菌检测](https://img.taocdn.com/s3/m/0ac41cfc910ef12d2af9e74c.png)
高温耐热菌的测定方法（企业标准）1、设备和材料1.1工作台：超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台，琼脂平板在工作台上暴露15min，每平板不得超过15个菌落。
1.2恒温培养箱：36±1℃。
1.3恒温水浴箱：45±1℃。
1.4 水浴锅、50ml试管。
1.5吸管：1、5 ml和10ml，具0.1ml刻度。
1.6平皿：直径为90mm。
1.7稀释瓶：广口瓶或三角烧瓶，容量为150ml和200ml。
1.8天平：感量0.1g。
2、培养基和试剂2.1 平板计数琼脂。
2.2 75%乙醇。
2.3 稀释剂：0.85%生理盐水。
3、操作程序3.1 样品制备3.1.1无菌取检液10ml放入灭菌试管中,把试管放入沸水锅中,从再度沸腾时起算加热10分钟,取出样品,然后分析与一般生菌数的测定方法相同。
3.1.2液体食品：用灭菌吸管吸取5g样品，放入装有45ml稀释剂的150ml稀释瓶中，制成1：10的样品匀液，吸取样品时，吸管插入液面下不要超过2.5cm。
吸管内液体要在2-4s内完全排入稀释剂中，不要在稀释剂中吹洗吸管。
3.1.3用1ml灭菌吸管准确吸取1：10的样品匀液1ml，放入装有9ml稀释剂的试管中。
制成1：100的样品液，从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中，吸管尖不要碰着瓶口。
吸入的液体应高于所要求的刻度，然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。
3.1.4分别用1ml灭菌吸管按3.1.2条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液，如10-3。
10-4……。
3.1.5分别用灭菌吸管吸取1ml样品液放入适宜标志的平皿内，每个稀释度的样品液用两个平皿，如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3min，应再振摇该样品液。
3.1.6分别加12-15ml平板计数琼脂（已放45±1℃的水浴中恒温）到各平皿内。
立即将平皿内的样品液和琼脂等培养基充分混合，混合方法是将平皿倾斜和旋转，要防止把混合物测到平皿壁和盖上。
霉菌检测方法
霉菌检测方法
霉菌检测方法主要有以下几种：
1. 空气采样法：通过空气采样器采集环境空气中的霉菌颗粒，然后将颗粒落在培养基上进行培养，最后统计出霉菌的数量。
常用的空气采样器有印记培养法（尘埃滚筒采样器）、空气采样盘等。
2. 表面采样法：将待检表面用含有菌落计数培养基的拭子或涂布子擦拭，并将拭子或涂布子放在培养基上培养，然后统计出霉菌的数量。
常用的表面采样方法有印记培养法、涂布法、拭子法等。
3. 非培养法：非培养法通过分子生物学技术，如PCR（聚合酶链反应）、实时荧光定量PCR、蛋白质检测和DNA测序等方法，直接检测霉菌的DNA、RNA或蛋白质，从而快速准确地确定霉菌的存在。
4. 环境检测仪器：现在市场上也有一些专门用于霉菌检测的仪器，如光学显微镜、荧光显微镜、红外热成像仪等，通过观察霉菌的形态、颜色或热量分布等特征，来判断是否存在霉菌。
需要注意的是，不同的检测方法适用于不同的场景和目的，选择适合的霉菌检测方法需要结合具体情况进行综合考虑。
耐热霉菌检测方法
耐热霉菌（百事可乐）的检测方法
1 适用范围
本方法适用于清汁、浊汁、水及浓缩果汁中耐热霉菌的检测。
2 仪器和试剂
2.1 恒温水浴：80±1℃。
2.2 恒温培养箱：30±1℃。
2.3 灭菌培养皿：直径为150mm。
2.4 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）：按产品说明书配制。
2.5 灭菌蒸馏水。
3 操作步骤
3.1 样品处理
3.1.1 浊汁及浓缩果汁：以无菌操作，取50ml检样于无菌稀释瓶中，再添加50ml无菌蒸馏水。
3.1.2 清汁：以无菌操作，直接吸取100ml检样于无菌瓶中。
3.2 同时称量相似的样品作为温度控制样品。
在温度控制瓶中插入温度计，把实验样品瓶和温度控制瓶同时放入80℃的水浴中。
3.3 当温度控制瓶的温度达到80℃±1℃时开始计时，维持30min。
3.4 把试验样品瓶放入冰浴中冷却后，平均注入到8个无菌培养皿中。
3.5 每个培养皿注入35-40mlPDA琼脂，同时作空白试验。
3.6 待琼脂凝固后，翻转平板放入塑料袋中在30℃下培养14-30天。
3.7 培养结束后，计数8个平板上所有的菌落数。
4 数据处理
浓汁及浊汁以cfu/50ml报告，清汁以cfu/100ml报告。
参考资料：参照R&TS Microbioligy lab 耐热霉菌检测方法。
二部、四部通则微生物检测法
二部、四部通则微生物检测法
二部、四部通则微生物检测法是《中华人民共和国药典》中的重要组成部分，用于检查药品中微生物的污染程度。
二部通则微生物检测法主要用于检测药品中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数，以及控制菌检查。
其中，需氧菌总数检查需要取适量药品，用薄膜过滤器过滤，然后将滤膜放入培养基平板上培养计数。
四部通则微生物检测法主要用于检查中药材及中药饮片的微生物污染程度，检查项目包括需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数、耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希菌和沙门菌。
其中，耐热菌总数检查需要将供试液置水浴中处理30分钟，然后按照需氧菌总数测定方法进行检测。
在进行二部、四部通则微生物检测时，试验环境应符合微生物限度检查的要求，检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。
霉菌 鉴定
霉菌鉴定
霉菌鉴定是一种确定霉菌物种的过程。
下面是一些可能用于鉴定霉菌的常见方法：
1. 外部形态观察：通过肉眼观察霉菌的外部形态特征，包括菌落颜色、菌丝形态和孢子结构等。
2. 显微镜观察：使用显微镜观察霉菌的细胞器官、菌丝结构和孢子等微观特征。
3. 生理生化特性测试：通过对霉菌进行不同生理生化测试，如碳源利用能力、氮源利用能力和温度耐受性等，来判断其特定物种。
4. 分子生物学方法：通过将霉菌的DNA提取并进行PCR 扩增，然后进行序列分析，比对数据库中的霉菌物种，可以确定其物种。
5. 抗生素敏感性测试：对霉菌进行抗生素敏感性测试，根据不同物种对抗生素的反应来判断其可能的分类。
请注意，霉菌的鉴定需要专业的实验室设备和技术，并且有些物种可能需要更复杂的鉴定方法。
因此，如果你需要确切的霉菌鉴定结果，建议向专业实验室寻求帮助。
耐热耐酸菌的检测
耐酸耐热菌（库克）的检测方法1 适用范围本方法适用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐酸耐热菌的检测。
2 仪器和试剂2.1 恒温水浴：80±1℃。
2.2 恒温培养箱：40±1℃。
2.3 灭菌培养皿：直径为90mm。
2.4 灭菌试管：18×180mm。
2.5 滤膜：0.45um水系一次性滤膜。
2.6 酵母粉。
2.7 蛋白胨。
2.8 琼脂粉。
2.9 葡萄糖。
2.10 吐温80。
2.11 12.5%苹果酸。
2.12 灭菌蒸馏水。
2.13 K氏培养基平板：在1000ml的三角瓶中放入500ml蒸馏水，加入1.25g酵母粉、2.50g 蛋白胨、6.50g琼脂粉、0.5g 葡萄糖和0.5ml吐温80，使其溶解，轻轻盖上三角瓶的盖子，在121℃灭菌25分钟；在一个小烧杯中加入10ml蒸馏水和1.25克的苹果酸，搅拌直至溶解，将苹果酸的水溶液用0.45um的滤膜过滤，将处理过的苹果酸水溶液加入到灭菌的K氏培养基中，搅拌均匀，使其pH值达到3.7±0.1。
当冷却到大约50℃时，将K氏培养基倾注到培养皿中，凝固后在0-5℃的冰箱中储存，有效期60天，并记录配制日期。
3 操作步骤3.1 样品处理3.1.1 浓缩清汁：打开水浴锅，调整温度到80±1℃。
以无菌操作，取10ml浓缩清汁于15ml灭菌的试管中，再移取10ml浓缩清汁于另一带有温度计的15mL的试管中，作为温度控制用，盖上样品试管的盖子。
将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中，当温度达到80±1℃，开始计时，维持13分钟（用计时器计时）。
冷却至室温，用90-100ml的灭菌蒸馏水将热处理过的样品转入灭菌容器中，摇匀。
将稀释后的样品溶液用0.45um的滤膜真空过滤。
3.1.2 清汁、水：打开水浴锅，调整温度到80±1℃。
以无菌操作，取150ml清汁（或水）于已灭过菌的玻璃样品瓶中，再移取150ml清汁（或水）于另一带有温度计的玻璃样品瓶中，作为温度控制用，盖上样品瓶的盖子。
耐酸耐热菌的测定
耐酸耐热菌的测定(企业内控法)(总4页)页内文档均可自由编辑，此页仅为封面耐酸耐热菌的测定（企业内控法）1、适用范围本方法仅适用于浓缩苹果清汁中耐酸耐热菌的测定。
2、设备和材料2．1、广口三角瓶，250mL、1000mL。
2．2水浴箱：80℃水浴。
2．3、冰箱。
2．4、量筒：50mL。
2．5、灭菌镊子。
2．6、酒精灯。
2．7、培养箱： 50±1℃。
2．8、玻璃铅笔。
2．9、溶剂过滤器。
2. 10、µm滤膜：Ø50mm。
2．11、真空泵。
2．12、温度计。
2．13、培养皿。
2．14、高压蒸汽灭菌锅。
3、培养基和试剂3．1、K氏培养基3．1．1、组成A：酵母浸膏 1.25g蛋白胨 2.50g葡萄糖 0.5g琼脂 7.5g吐温80将上述各种试剂放入1L的三角瓶中,加入500mL的蒸馏水,在电炉上加热溶解后,在121℃高压灭菌20分钟。
3．1．2、组成B：苹果酸 1.25g将苹果酸用10mL的蒸馏水溶解,通过一次性无菌注射器和针头式过滤器连接,将苹果酸溶液过滤到已灭菌的培养基中,混匀。
3．1．3、平板制作当已酸化的K氏培养基温度降至50℃左右时，将其分装倒入已灭菌的培养皿中，待培养基凝固后，用牛皮纸包扎好，放入冰箱中保存，一般可保存60天。
3．2、蒸馏水。
4、检验程序：检样适当稀释80℃水浴13分钟无菌水膜过滤检样膜过滤膜放入平板培养基培养50±1℃ 4天菌落计数报告5、操作步骤5．1、将装有150mL蒸馏水的三角瓶、µm的滤膜、50mL量筒、过滤装置于121℃灭菌15min。
5．2、用已灭菌的50mL量筒取待检浓缩果汁50mL，加入已灭菌的盛有150mL灭菌蒸馏水的三角瓶中，混匀。
5．3将稀释的样品放入80℃的水浴中，同时放置一个带有温度计的控制样，做为温度控制。
观察温度计，待温度升至80℃时开始计时，维持13min，将样品取出并迅速用自来水冷却。
5．4、用已灭菌的µm的滤膜及真空抽滤装置过滤热处理后的果汁,移取抽滤装置的上部,将镊子在酒精灯上灭菌后,用镊子将滤膜移置于预先准备好的K氏培养基上,轻敲滤膜几次,使其与滤膜充分接触。
霉菌试验标准和条件
霉菌试验
一、概述
二、霉菌的试验方法
三、防霉措施
四、有关标准
概述
霉菌的危害
霉菌试验的定义
霉菌试验的目的
霉菌对材料和产品的影响
直接危害是霉菌生长食取材料中的有机成分，直接导致结构破坏、强度降低、物理性质变化等。间接危害是霉菌分泌的新陈代谢排泄物有机酸和其他离子化合物，造成电解或老化效应，某些触媒剂，还促成氧化或分解作用的发生，间接导致材料及部件的损坏。长霉造成的故障模式：
风速控制
风速控制试验设备工作空间的风速，控制在s—2m/s之间。试验箱(室)的风速应保证试验箱内温、湿度的均匀。如果风速过小，箱内会产生温度梯度影响霉菌的生长；风速过大，会将孢子吹落使悬挂的试品晃动抖掉孢子，尤其在孢子萌发的初期更严重。
5、试验过程中的检查
前七天，是霉菌孢子生长发育的关键时期.七天后检查对照样品长霉情况，长霉覆盖面积达90％以上时，说明试验条件适宜，否则说明试验条件不适宜，试验应重新进行。
（7）有外壳的产品，应定期进行清理，除去可供霉菌生长的营养物质如灰尘和污垢，以防止产品长霉和损坏。
（8）．自然通风容易积聚灰尘，所以产品内部易于积聚灰尘的部位应有足够适度的空气流，以阻止霉菌的生长。
（9）为了防止产品在运输和贮存过程中长霉可以采用防潮包防霉包装。
（10）如材料和产品允许时，也可用紫外线或臭氧法灭菌。
橡胶材料的抗霉菌性能测试方法
橡胶材料的抗霉菌性能测试方法橡胶材料作为一种重要的工程材料，广泛应用于各行各业。
然而，由于其物性特点和封闭性等因素，橡胶材料容易滋生霉菌，导致材料的性能下降甚至失效。
因此，对橡胶材料的抗霉菌性能进行测试十分重要。
本文将介绍几种常见的抗霉菌性能测试方法。
一、米尔迪尼菌生长抑制法米尔迪尼菌是一种常见的霉菌，常常会在潮湿环境下滋生。
通过观察橡胶材料与米尔迪尼菌接触后的生长情况，可以评估橡胶材料的抗霉菌性能。
具体实验步骤如下：1. 准备一定数量的米尔迪尼菌培养基；2. 将橡胶样品切割成适当大小，并将其放置在培养基上；3. 在适宜的温度和湿度下培养一定时间；4. 观察和记录橡胶样品上米尔迪尼菌的生长程度。
二、真菌透过阻力法真菌透过阻力法用于评估橡胶材料对真菌穿透的抵抗能力。
该方法主要通过测量真菌在橡胶样品中透过的时间来评估抗真菌性能。
具体步骤如下：1. 准备一定数量的真菌悬液；2. 将橡胶样品放置在筛选器上，筛选器底部设置培养基；3. 将真菌悬液滴在橡胶样品上方；4. 在适当的温度和湿度下培养一定时间；5. 观察和记录真菌透过橡胶样品的时间，并计算透过阻力。
三、霉菌侵蚀法霉菌侵蚀法是常用的评估橡胶材料抗霉菌性能的方法之一。
该方法通过将橡胶样品暴露在含有霉菌的培养基中，观察霉菌对橡胶材料的侵蚀情况。
具体步骤如下：1. 准备一定数量的霉菌培养基；2. 将橡胶样品放置在培养基中，保持一定的湿度和温度；3. 在适当的时间间隔内观察和记录橡胶样品表面上的霉菌生长情况；4. 根据霉菌生长的程度，对橡胶材料的抗霉菌性能进行评估。
四、生物导电法生物导电法通过测量橡胶材料与霉菌之间的生物导电性能来评估橡胶材料的抗霉菌性能。
霉菌在橡胶材料上生长会导致生物导电性能的变化，从而可以反映抗霉菌性能的好坏。
具体步骤如下：1. 准备一定数量的霉菌培养基和橡胶样品；2. 将橡胶样品放置在霉菌培养基中；3. 通过测量橡胶样品的生物导电性能，观察和记录霉菌对橡胶材料的影响；4. 根据生物导电性能的变化评估橡胶材料的抗霉菌性能。
中国药典微生物检测方法
中国药典微生物检测方法中国药典微生物检测方法包括细菌总数检测、大肠菌群计数、金黄色葡萄球菌检测、沙门氏菌检测、志贺氏菌检测、阪崎肠杆菌检测、霉菌和酵母菌计数、耐热芽孢杆菌检测、总大肠菌群计数、总致病菌检测、革兰氏阴性杆菌检测、铜绿假单胞菌检测、水中总大肠菌群计数、水中总致病菌检测、水中细菌总数检测、水中大肠菌群计数等。
1.细菌总数检测：采用倾注平板法或涂布平板法接种样品，在适宜的温度和湿度条件下培养细菌，计数并计算细菌总数。
2.大肠菌群计数：采用乳糖发酵试验或双糖铁琼脂培养基培养细菌，通过微生物发酵产酸反应，初步判断细菌是否属于大肠菌群，并对可疑阳性管进行分离培养和生化鉴定。
3.金黄色葡萄球菌检测：采用血平板或营养肉汤培养基接种样品，培养后观察菌落特征，进行溶血试验，鉴定金黄色葡萄球菌。
4.沙门氏菌检测：采用沙门氏菌选择性培养基或营养肉汤培养基接种样品，培养后观察菌落特征，进行生化鉴定和血清学试验，鉴定沙门氏菌。
5.志贺氏菌检测：采用志贺氏菌选择性培养基或营养肉汤培养基接种样品，培养后观察菌落特征，进行生化鉴定和血清学试验，鉴定志贺氏菌。
6.阪崎肠杆菌检测：采用阪崎肠杆菌选择性培养基或营养肉汤培养基接种样品，培养后观察菌落特征，进行生化鉴定和血清学试验，鉴定阪崎肠杆菌。
7.霉菌和酵母菌计数：采用沙保氏琼脂培养基或麦芽汁培养基接种样品，在适宜的温度和湿度条件下培养霉菌和酵母菌，计数并计算霉菌和酵母菌总数。
8.耐热芽孢杆菌检测：采用普通肉汤培养基接种样品，在70℃下培养样品，观察有无芽孢形成，并进行芽孢染色和镜检观察，判断是否为耐热芽孢杆菌。
9.总大肠菌群计数：采用乳糖发酵试验或双糖铁琼脂培养基培养细菌，通过微生物发酵产酸反应，初步判断细菌是否属于大肠菌群，并对可疑阳性管进行分离培养和生化鉴定。
10.总致病菌检测：采用各种选择性培养基或营养肉汤培养基接种样品，针对不同致病菌的特性，观察菌落特征，进行生化鉴定和血清学试验，检测样品中是否存在各种致病菌。
耐热霉菌
1 简介 2 生长条件 3 来源 4污染饮料的表现 5控制与检测
简介
1 霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉的真菌”，构 霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉的真菌” 霉菌体的基本单位称为菌丝，呈长管状， 成 霉菌体的基本单位称为菌丝，呈长管状，宽度 2～10 微米，可不断自前端生长并分枝。无隔或有隔， ～ 微米，可不断自前端生长并分枝。无隔或有隔， 具1 至多个细胞核 2 在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料， 在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料， 称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝， 称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝， 可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。 可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。大量菌丝交织 成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体。 成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体。
来源
4 空气 空气不是微生物生长繁殖的场所。 空气不是微生物生长繁殖的场所。然而空气 中也确实含有一定数量的微生物， 中也确实含有一定数量的微生物，这些微 生物是随风飘扬而悬浮在大气中或附着在 飞扬起来的尘埃或液滴上。 飞扬起来的尘埃或液滴上。这些微生物可 来自土壤、 来自土壤、水、人和动植物体表的脱落物 和呼吸道、消化道的排泄物。 和呼吸道、消化道的排泄物。空气中的微 生物主要为霉菌、 生物主要为霉菌、放线菌的孢子和细菌的 芽孢及酵母
生长条件
■霉菌中纯黄丝衣霉耐热能力很强是一种能 霉菌中纯黄丝衣霉耐热能力很强是一种能 分解果胶的霉菌，它能形成子囊孢子， 分解果胶的霉菌，它能形成子囊孢子，加 还能生存。 热85℃，3Omin还能生存 ℃ 还能生存
生长条件
3 气体 微生物与O2有着十分密切的关系 有着十分密切的关系。 微生物与 有着十分密切的关系。一般来 在有氧的环境中， 讲，在有氧的环境中，微生物进行有氧呼 生长、代谢速度快， 吸，生长、代谢速度快，食品变质速度也 缺乏O2条件下 条件下， 快；缺乏 条件下，由厌氧性微生物引起 的食品变质速度较慢。 存在与否决定着 的食品变质速度较慢。O2存在与否决定着 兼性厌氧微生物是否生长和生长速度的快 慢。
耐热菌的检测与控制
耐热菌的检测与控制摘要：主要对香辛料进行了耐热菌数量的检测。
试验原理主要参照菌落总数测走法，分别对在常温、70°C、80°C、90°C、100°C水浴1 h处理条件下的香辛料进行了耐热菌的测走。
得出的结论为香辛料中存在耐热菌，并根据试验结果分析了如何控制香辛料中的耐热菌。
关键词：耐热菌；香辛料；控制1前言耐热菌是指在实验型巴氏杀菌温度下可以存活的菌体，乳微细菌、芽泡菌通常可100 % 存活，一些微球菌的耐热性差，产碱杆菌仅有1%〜10%存活，链球菌（即粪肠球菌）、乳杆菌和一些棒状杆菌是耐热菌，可在60 °C下耐受20min ,但仅有1 %左右的菌株可耐受到63 °C 30min ,常见的耐热菌有芽抱菌属芽抱菌，芽抱菌属芽抱菌属是乳中污染的主要的耐热菌种，蜡样芽砲杆菌是许多食品的污染菌种，可引起人的食物中毒，当人体摄入含有大量活菌的食品时即可能引起呕吐、腹泻、肠绞痛等为主要症状的食物中毒，一般在食品中含有105〜108个/g活菌时就可能引起食物中毒。
耐热菌的检测国际上普颯采用的是美国KFL （Krueger Food Laboratories,库格食品实验室）或澳大利亚Berri公司的方法苹果浓缩汁中耐热菌的间接ELISA （酶联免疫吸附法）快速检测方法曲,傅里叶变换红外光谱（FT-IR）⑷，常规检测培养法，英基本原理是将待检果汁中的微生物富集到无菌滤膜上，然后富集菌的滤膜在选择性培养基上培养4-5d 后菌落计数例⑹。
目前，食品行业中开展耐热菌检测项目的企业为之不多，主要是奶制品、果汁、饼干烘烤类食品企业。
国标中没有耐热菌检测方法，而且国标肉制品里也未限制检测耐热菌。
为进一步保证公司产品质量，保障食品安全，检测中心对易超出菌落总数内控标准的部分产品进行了分析，主要是凉拌产品细菌总数超标，凉拌产品在生产过程中较难控制微生物，工艺较为复杂，综合判断可能是拌制时的香辛料菌落总数不合格，导致产品不合格，所以对香辛料进行了耐热菌的检测。
耐热霉菌孢子的测定作业指导书
耐热霉菌孢子的测定作业指导书1.目的测定果汁或其它同类产品中是否有耐热霉菌孢子。
2.适用范围适用于果汁或其它同类产品的微生物测试。
3.职责3.1微生物检验员负责本文件的执行；3.2微生物领班负责监督本文件的有效执行。
4.定义无5.程序5.1稀释空白样的准备5.1.1 用托盘天平称取 20 克酵母提取物于称重皿；5.1.2 往 1.5 升烧瓶内注入 980 亳升水；5.1.3 再往烧瓶内加入 20 克酵母提取物；5.1.4 用磁力搅拌器搅拌 10 分钟；5.1.5 分取 50 亳升溶液到 99 亳升的玻璃稀释瓶，盖紧；5.1.6 放入高温灭菌釜，在 121℃ 25 分钟；5.1.7 冷却至室温并储存。
注：稀释空白样为一年有效保存期。
5.2样品准备5.2.1 用干净的容器收集样品。
（容器不必消毒）按以下步骤稀释样品。
5.2.2 如果样品是不含防腐剂并且未经混比的饮料，用移液管取 20 毫升加入经灭菌之酵母提取液中（50ml），并盖紧。
5.2.3 如果样品不属于（5.2.2）所述，用移液管取 1 毫升加入经灭菌的酵母提取液中（50ml），并盖紧。
5.2.4 耐热霉菌检测样品量为：终糖浆糖浆最后一缸样品量为 10ml,每批最后一终糖浆缸成品样品量为 20ml。
5.3耐热霉菌的测试5.3.1 样品的热处理：(a)开启恒温水浴，设定控制温度到 77℃，并让水浴加热至设定温度；(b)将样品和空白放置入水浴保持 30 分钟；（另取一瓶子放入温度计来确定温度已到达要求，然后开始计时）；(c)保持时间结束后，移出样品度让其冷却至室温。
5.3.2 将样品放入培养箱，在 30±1℃下放置四星期。
5.3.3 每星期观察霉菌生长情况。
5.4在第四周末，倾倒样品使之通过 20 目滤格并寻找霉菌。
霉菌可能是长在瓶中液体表面的“绒毛状”物体基在滤格上“果冻状”物体。
5.5记录结果。
6.培训及发放部门6.1培训6.1.1 微生物领班负责本文件的培训，向检测人员解释有关流程并发放相关文件，指导及观察检测人员执行程序的情况。
耐热菌检测方法大全
耐热菌检测方法大全方法一耐酸耐热菌（库克）的检测方法1 适用范围本方法适用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐酸耐热菌的检测。
2 仪器和试剂2.1 恒温水浴：80±1℃。
2.2 恒温培养箱：40±1℃。
2.3 灭菌培养皿：直径为90mm。
2.4 灭菌试管：18×180mm。
2.5 滤膜：0.45um水系一次性滤膜。
2.6 酵母粉。
2.7 蛋白胨。
2.8 琼脂粉。
2.9 葡萄糖。
2.10 吐温80。
2.11 12.5%苹果酸。
2.12 灭菌蒸馏水。
2.13 K氏培养基平板：在1000ml的三角瓶中放入500ml蒸馏水，加入1.25g酵母粉、2.50g 蛋白胨、6.50g琼脂粉、0.5g 葡萄糖和0.5ml吐温80，使其溶解，轻轻盖上三角瓶的盖子，在121℃灭菌25分钟；在一个小烧杯中加入10ml蒸馏水和1.25克的苹果酸，搅拌直至溶解，将苹果酸的水溶液用0.45um的滤膜过滤，将处理过的苹果酸水溶液加入到灭菌的K氏培养基中，搅拌均匀，使其pH值达到3.7±0.1。
当冷却到大约50℃时，将K氏培养基倾注到培养皿中，凝固后在0-5℃的冰箱中储存，有效期60天，并记录配制日期。
3 操作步骤3.1 样品处理3.1.1 浓缩清汁：打开水浴锅，调整温度到80±1℃。
以无菌操作，取10ml浓缩清汁于15ml灭菌的试管中，再移取10ml浓缩清汁于另一带有温度计的15mL的试管中，作为温度控制用，盖上样品试管的盖子。
将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中，当温度达到80±1℃，开始计时，维持13分钟（用计时器计时）。
冷却至室温，用90-100ml的灭菌蒸馏水将热处理过的样品转入灭菌容器中，摇匀。
将稀释后的样品溶液用0.45um的滤膜真空过滤。
3.1.2 清汁、水：打开水浴锅，调整温度到80±1℃。
以无菌操作，取150ml清汁（或水）于已灭过菌的玻璃样品瓶中，再移取150ml清汁（或水）于另一带有温度计的玻璃样品瓶中，作为温度控制用，盖上样品瓶的盖子。
霉菌试验标准和条件
霉菌试验标准和条件 The document was finally revised on 2021霉菌试验一、概述二、霉菌的试验方法三、防霉措施四、有关标准概述霉菌的危害霉菌试验的定义霉菌试验的目的霉菌对材料和产品的影响直接危害是霉菌生长食取材料中的有机成分，直接导致结构破坏、强度降低、物理性质变化等。
间接危害是霉菌分泌的新陈代谢排泄物有机酸和其他离子化合物，造成电解或老化效应，某些触媒剂，还促成氧化或分解作用的发生，间接导致材料及部件的损坏。
长霉造成的故障模式：---引起电子或电气设备失灵---减低绝缘材料的电性能---造成燃油系统的腐蚀和堵塞---破坏密封---使金属件腐蚀---使玻璃产生蚀刻低压与霉菌这两个因素的组合不会增大二者本身的影响太阳辐射与霉菌因为太阳辐射产生热，所以这个组合不可能产生影响，和高温与霉菌的组合相同。
此外未经过滤的太阳辐射中的紫外线具有显着的杀菌作用盐雾与霉菌这是一个相容的组合湿度与霉菌湿度有助于霉菌和微生物的生长，但不会增大它们的影响高温与霉菌霉菌和微生物的生长，需要比较高的温度，但是，在71℃（160 ℉）以上，霉菌和微生物就不能生长了低温与霉菌低温影响霉菌的生长。
在零度以下，霉菌保持在假死状态霉菌试验的定义霉菌试验是气候环境试验的一个项目。
用于考核产品或材料抵抗霉菌侵袭的能力。
它于一般环境试验一样，考虑产品在实际运输、储存或使用中，最易遭受霉菌危害的环境条件，在试验室中用人工模拟创造霉菌生长最适宜环境进行试验。
霉菌试验的目的为确定产品抗霉菌侵蚀能力，必须制定一个与实际工作条件相似，能判断霉菌的侵蚀作用和给出正确评价的试验方法。
它将为产品的选材、结构和设计提供依据以保证产品能在有大量霉菌存在的气候环境中安全可靠地运行二、霉菌试验方法：1、霉菌试验的分类：天然暴露试验：直接暴露在选定的湿热环境中。
有室内、室外的暴露试验和埋土试验的方法。
试验室人工加速试验：常用有湿室悬挂法和无机盐琼脂平皿法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
耐热霉菌（百事可乐）的检测方法
1 适用范围
本方法适用于清汁、浊汁、水及浓缩果汁中耐热霉菌的检测。
2 仪器和试剂
2.1 恒温水浴：80±1℃。
2.2 恒温培养箱：30±1℃。
2.3 灭菌培养皿：直径为150mm。
2.4 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）：按产品说明书配制。
2.5 灭菌蒸馏水。
3 操作步骤
3.1 样品处理
3.1.1 浊汁及浓缩果汁：以无菌操作，取50ml检样于无菌稀释瓶中，再添加50ml无菌蒸馏水。
3.1.2 清汁：以无菌操作，直接吸取100ml检样于无菌瓶中。
3.2 同时称量相似的样品作为温度控制样品。
在温度控制瓶中插入温度计，把实验样品瓶和温度控制瓶同时放入80℃的水浴中。
3.3 当温度控制瓶的温度达到80℃±1℃时开始计时，维持30min。
3.4 把试验样品瓶放入冰浴中冷却后，平均注入到8个无菌培养皿中。
3.5 每个培养皿注入35-40mlPDA琼脂，同时作空白试验。
3.6 待琼脂凝固后，翻转平板放入塑料袋中在30℃下培养14-30天。
3.7 培养结束后，计数8个平板上所有的菌落数。
4 数据处理
浓汁及浊汁以cfu/50ml报告，清汁以cfu/100ml报告。
参考资料：参照R&TS Microbioligy lab 耐热霉菌检测方法。