正典球虫卵囊简易监测法
实训球虫病实验室诊断技术
浮聚法
称取2g粪便置于烧杯中 加入少量漂浮液将粪便充分搅开 再加入约10-20倍的漂浮液搅匀 将粪液倒于试管，用吸管加至凸出瓶口为止，静
置30min左右 用盖玻片轻轻接触液面顶部，提起后放于载玻片
上镜检。
未孢子化卵囊
孢子化卵囊
一、实训目标
掌握球虫病的实验室诊断技术，认识鸡的球虫卵囊。
二、实训材料
器材与药品：生物显微镜、塑料袋、天平、玻璃棒、 铁丝圈、烧杯、镊子、带凹载玻片、盖玻片、饱和 盐水
检查材料：含有球虫卵囊的粪样
三、实训步骤
1、片法
在载玻片上滴一滴生理盐水。 取少量粪便与其混合，除去粗渣，加盖玻片。 先用低倍镜观察，发现后换高倍镜检查。
2、漂浮法 原理：用比重较虫卵大的溶液作为漂浮液，使球虫
卵囊浮于液体表面，进行集中检查。
饱和盐水漂浮法：
称取5-10g粪便置于100-200ml的烧杯中 加入少量漂浮液将粪便充分搅开 再加入约20倍的漂浮液搅匀，静置30min左右 用金属圈平着接触液面，提起将液膜抖落于载玻片上，多次
动物粪便中球虫卵囊的检测方法
动物粪便中球虫卵囊的检测方法1 目的（适用范围）本方法适用于猪、禽、兔、犬、猫球虫病感染的检测。
2 依据（参考）标准《动物球虫病诊断技术》（GB/T 18647-2002）3 原理卵囊通常存在于宿主粪便中，从粪便中分离球虫卵囊最常用的方法为饱和食盐溶液漂浮法。
饱和食盐溶液密度高于卵囊密度，而低于粪便中大多数杂质，经离心或静置沉淀后，大部分杂质沉淀在容器底部，卵囊漂浮在悬浮溶液的表面，然后收集表层漂浮物；由于卵囊比重大于水的比重，所以表层漂浮物用自来水稀释离心后，卵囊沉淀富集于离心管底部即可得到大量球虫卵囊。
4 材料4.1 被检样品被检动物的新鲜粪便不少于30 g。
4.2 试剂耗材饱和食盐水、60目筛网、50 mL和100 mL烧杯、玻璃棒、15 mL离心管、自制铁丝吊环（或细菌接种环）、载玻片、盖玻片、香柏油、麦克马氏计数板。
4.3 仪器设备电子天平、托盘天平、低速离心机、1 mL移液器、显微镜、手动计数器。
5 检测方法5.1 定性检查5.1.1 取被检动物的新鲜粪便5 g，放入50 mL烧杯中，加入3倍体积的水，用玻璃棒搅拌均匀，经60目筛网过滤。
5.1.2 将滤液移入离心管中，在天平上平衡，于离心机上以3000 r/min离心3 min，弃上清液，在沉淀中再加入适量水，将沉淀吹起，平衡离心同上，弃上清液，如此重复2~3次至上清液清亮，弃上清液。
5.1.3 在沉淀中加入5倍体积的饱和食盐水，用玻璃棒将沉淀搅拌均匀，在天平上平衡，于离心机上以3000 r/min离心5 min，小心快速用铁丝吊环蘸取液膜，抖于载玻片上，盖上盖玻片，于100~400倍镜下检查。
5.1.4 结果判定：（1）若发现球虫卵囊，判为阳性，说明该动物已感染球虫，并可根据附录卵囊形态特征，初步确定为哪一属的球虫。
（2）若未发现球虫卵囊，需重复检查5次，仍未见球虫卵囊，本粪样可判为阴性。
5.2 定量检查5.2.1 对定性检查中呈现阳性的粪样进行定量检查。
检测仔猪球虫卵囊方法的观察
８ ５
６ ２
７ ２ ． ９
昭平
钟 山
３ ６
４ ６
２ ３
２ ８
６ ３ ． ９
６ ０ ． ７
富 川 平 桂
７ ２ ９ ２
５ ６ ７ １
７ ７ ． ８ ７ ７ ． ２
总计
３ ３ １
２ ４ ０
７ ２ ． ５
表 ２ 饱 和 盐 水 漂 浮法
法 和 直 接 镜 检 法 ３种 方 法 检 测 仔 猾 球 虫病 ，观 察 结 果 表 明 Ｔ ｅ ｌ ｅ ｍａ ｎ法 是 最 有 效 的 卵 囊检 出法 。
关 键 词 ：猪 ；球 虫病 ；球 虫 卵 囊 ；Ｔｅ ｌ ｅ ｍａ ｎ法 ；饱 和 盐 水 漂
浮 法 ： 直 接 镜 检 法 ： 比 较
离 心机 、 显微 镜 、载 玻 片 、纱 布、氯 化 钠 、醋 酸 、 乙醚 。
１ ． ３ 试 验 方 法
八 步 昭 平
钟 山
８ ５ ３ ６
４ ６
２ ９
３ ４ ． １
ｌ １
２ Ｏ
３ Ｏ ． ５
４３ ． ５
１ ＿ ３ ． １ 直接 镜 检 法
称取 １ ｇ粪 便 样 品 ，用 ５ ｍ ｌ 生 玛ａ 盐 水 稀 释 ，将 稀 释 后 的 样 品 均 匀 涂 于 载 玻 片 中 央 ，用普 通 显 做镜 镜 检 ，观 察 结 果 。
度 和 有 氧 条 件 下 进 行 ， 又称 外 生 性 发育 ，其 所需 时 间 称 为 孢 子 发 育 时 间 或 孢 子 化 时 间 。猪 球 虫 寄生 于猪 的 小 肠 ，根 据 文 献 记 载 有 的猪 体 可 感 染 ４种 和 以 上的球 虫 。 仔 猪 感 染 球 虫 后 可 引 起 腹 泻 ，从 而 导 致 断 奶 仔 猪 体重 大 大 减 轻 。此 外 ，仔 猪 感 染 球 虫 后 易 继 发 感 染 大 肠 杆 菌 腐 、传 染 性 胃肠 炎 和 轮 状 病 毒 的感 染 ，严 重危 害 养 猪 业 ，常 给 养 猪 业 带 来 较 严 重 的 经
兔粪便球虫卵囊的分离及计数
兔粪便球虫卵囊的分离及计数摘要：兔球虫是养兔业生产上最常见的兔寄生虫病，在各品种家兔中均易发生，以25日龄的小兔最易感染。
因此，在日常生产中对兔球虫的诊断就显得尤为重要。
本实验采取粪便球虫卵囊的分离观察来进行兔艾美尔球虫实验室诊断。
1、材料与方法1.1材料家兔粪便、光学显微镜、载玻片、盖玻片、搪瓷杯、玻璃棒、锥形瓶，量筒、离心管、过滤筛、饱和NaCl、电光显微镜1.2方法粪便球虫卵囊的分离及计数单个球虫卵囊的分离观察2、步骤2.1粪便球虫卵囊的计数取锥形瓶一只，量取56ml水，标记液面高度；将水倒掉重新量取60ml水，标记液面高度；将水吸出一部分至56ml处，加入家兔粪便至页面上升到60ml处为止，加入碎石子摇匀。
用吸管吸取1.5ml分别置于四张载玻片上，加盖玻片放在显微镜下观察。
通过一次查找出视野中所有球虫卵囊数目并计算。
2.2粪便球虫卵囊的分离在搪瓷杯中加入3~5g家兔粪便，量取45ml水拌成糊状再稀释，将稀释好的家兔粪便溶液通过60目筛过滤，弃滤渣，取其滤液再通过120目筛过滤，弃滤渣。
将过滤好的滤液倒入离心管中，保持滤液为45ml，放入离心机离心5min（2000r/min）。
完全弃掉离心管上层清液，向沉渣中加入几滴饱和NaCl，用玻璃棒倒匀，继续加NaCl至10ml，放入离心机离心2~3min（2000r/min）。
（2000r/min）3min。
将上层液取出8ml左右放入另一只离心管，加水至45ml，进行第三次离心，取出离心管，用吸管吸取一滴上层液置于载玻片上，放在电光显微镜下观察。
3、结果3.1在玻片上观察到的球虫卵囊分别为：2，3，3，4，因此，该粪便样品中球虫卵囊总数为1200个；3.2在显微镜下观察到的球虫卵囊为椭圆形，以孢子化，可观察到其近似圆形的孢子囊。
4、讨论4.1视野中虫卵数量甚少可能是由于摇匀的不够充分或者所取的粪便太少。
食品中虫蛋的检测方法研究
食品中虫蛋的检测方法研究随着国民经济的发展和生活水平的提高，人们对食品质量和安全性的关注也日益增加。
食品中存在虫蛋是一种常见的食品卫生问题，因此，开展食品中虫蛋的检测方法研究具有重要的理论和实际意义。
下面将介绍几种常用的食品中虫蛋的检测方法。
1.直观外观检查法直观外观检查法是最直接、最简便的虫蛋检测方法。
通过肉眼观察食品外观来判断是否存在虫蛋。
但是，由于虫蛋往往很小且隐蔽，很难通过目视检查发现，因此，这种方法的可靠性和准确性相对较低。
在实际应用中，通常需要结合其他的检测方法一起使用。
2.显微镜检查法显微镜检查法是一种常用的虫蛋检测方法。
通过将食品样品制备成薄片或悬液，然后使用显微镜观察虫蛋的形态特征来确定是否存在虫蛋。
这种方法对于虫蛋的检测具有较高的准确性和精确度，但是操作步骤较为繁琐，需要一定的实验室条件和设备。
对于常规食品监管来说，不太适用于大规模样品检测。
3.X射线检查法X射线检查法是一种新兴的虫蛋检测方法。
通过使用X射线技术，将食品样品进行扫描，然后分析虫蛋的特征以确定是否存在虫蛋。
相比于其他方法，X射线检查法具有非常高的灵敏度和准确性，且可以快速进行大规模样品检测。
但是，这种方法对设备和人员的要求较高，成本相对较高。
4.DNA检测法DNA检测法是一种基于分子生物学的虫蛋检测方法。
通过采集食品样品中的DNA，然后使用特定的引物和PCR（聚合酶链式反应）技术扩增目标基因的片段，最后使用凝胶电泳分析扩增产物来确定是否存在虫蛋。
这种方法具有高度的特异性和敏感性，并且可以快速进行大规模样品检测。
但是，这种方法对实验室条件和设备要求较高，操作较为复杂。
综上所述，食品中虫蛋的检测方法有很多种，每种方法都有其适用的范围和特点。
在实际应用中，可以根据不同的食品和检测需求选择合适的检测方法。
同时，还需要不断探索、研发更加高效、准确且成本较低的虫蛋检测方法，以保障食品质量和安全。
诊断球虫病及用药方法
诊断球虫病及用药方法
快速诊断“球虫病”与用药方法
鞍山冠篮答鸽友问（28）
今天有位鸽友留言：您好，我是新手刚养鸽不久，我身边的朋友都说我的鸽子有球虫病，我不知如何是好，想向您请教，希望告知！谢谢！
鞍山冠篮：首先我谢谢您对我的信任！关于您提出的问题，我得先向您介绍一下球虫病的诊断方法，您再对症治疗，避免用错了药，产生不必要的麻烦。
球虫病的快速诊断方法是：家飞时易疲劳、没有耐力、双脚收不起来，休息时鼻毛竖立，它们吃食、喝水结束后，把它们抓起来，摸它们的嗉囊里面满满的全是水，摸不到粮食粒，头天晚上喂的粮食，第2天嗉囊内还有没有消化完的粮食。
在没有洗澡的情况下脚变成鲜红色，还没有粉白鳞片状。
治疗用药的方法：
方法1、“复方甲苯咪唑”又叫“速效肠虫净”，这种药是“盐酸左旋咪唑”和“甲苯咪唑”合成的一种药物。
此药在给爱鸽使用时，一片药分6份，喂6只，以此类推，每2月预防1次。
种鸽合对前2个月停止使用，用药后记得用肝精排毒。
方法2、“甲苯咪唑”又叫“一片灵”，使用时每片分5份，每只每天喂1份，连喂3天，以后每3个月循环此方法1次，种鸽合对前2个月停用，用后肝精排毒。
方法3、“磺胺喹恶啉”此药每1000毫升的凉白开水里加入1克，混合以后让它们自由饮用，连续3天，以后每2个月就给它们饮用3天，种鸽合对前2个月停用，用后肝精排毒。
这几种预防球虫病的用药，效果都很好，您可根据自己实际情况来操作，最好是这几种药交叉使用，原因是球虫病的耐药性比较强，避免产生耐药。
说的不好，仅供参考！有何见解，互相交流！。
宠物疾病诊疗-粪便检查--粪便中寄生虫卵检查
1.植物导管：梯纹、网纹、孔纹 2.螺纹和环纹 3.管胞 4.植物纤维 5.小麦的颖毛 6.真菌的孢子 7.谷壳的一些部分 8.稻米胚乳 9.植物的薄皮细胞 10.植物的薄皮细胞 11.淀粉粒 12.花粉粒 13. 植物线虫的一些虫卵 14.螨的卵（未发育） 15.螨的卵（已发育）
11
钩虫卵
蛔虫卵
主要用于检查线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊等比重较小的卵及卵囊。
取5-10g粪便捣碎后，放于一容器内，加5-10倍量清水搅匀。经4060孔铜筛过滤后，让滤液自然沉淀约20分钟，倒掉上清液ห้องสมุดไป่ตู้反复2-3次 ，至上清液清亮为止。 最后倾倒掉大部分上清液，留约为沉淀物1／2 的溶液量，用胶帽吸管吹吸均匀后，吸取少量于载玻片上，加盖玻片镜 检。
粪便中寄生虫卵检查
取50%甘油水溶液或普通水1-2滴放于载玻片上，镊取黄 豆大小的被检粪块与之混匀，剔除粗粪渣，加上盖玻片镜 检虫卵。此法最为简便，但检出率不高。
取大约10g粪便放于一容器内，压碎， 加入适量饱和盐水搅匀，过 滤，静置0.5小时左右（或2000转/分，离心5~10分钟），用直径0.51.0cm的 金属圈蘸取表面液膜，抖落于载玻片上，加盖片后镜检；或 用盖玻片直接蘸取液面，放于载玻片上，在显微镜下检查。
绦虫卵
连载：认识球虫病（14）球虫卵囊计数入门
连载：认识球虫病（14）球虫卵囊计数入门连载的前面十三篇文章，错过的可以在本公众号查看历史消息，建议有耐心的兔友们看完，小编承认是有点复杂，我努力用最通俗的表达方式来叙述吧。
本系列连载是小编多年来查阅大量国内外关于兔球虫病的资料，通过自己的理解，再用比较简单的语言叙述出来，不代表权威，只代表我个人的理解，仅供参考。
希望起到抛砖引玉的效果。
欢迎专家或者同仁批评指正。
简单的球虫卵囊镜检方法，用兔粪在载玻片上直接涂抹，说真的，那只是一种非常简单并且不靠谱的方法，检出的可靠性不高，不足以作为诊断球虫病的参考依据。
并且主要是抽查软粪稀粪，即使有大量的球虫卵囊，如果恰好涂抹的那粒兔粪上某一部分没有球虫卵囊，镜检结果就出问题了。
我们今天说说球虫卵囊的计数，非常重要1、通过计数，我们可以知道每克兔粪（无论正常兔粪还是稀粪软粪）的所含的球虫卵囊个数。
结果尽可能靠谱。
2、通过对采取用药等措施前后计数的结果对比，我们可以知道，我们采取的措施是不是有效，药物有没有产生耐药性，所用药物是不是劣质产品等。
方法：1、配置食盐饱和溶液，60毫升备用。
2、取新鲜兔粪2克。
3、在烧杯里，将这2克兔粪与10ml食盐饱和溶液混合搅拌。
再倒入50ml食盐饱和溶液，搅拌。
4、用40~80目铜筛网过滤掉粪渣。
5、用移液器将烧杯上部粪液加入计数器的两个计数室内。
每个计数室的容量为0.15ml，尽量填满，不留气泡。
6、将计数板置于显微镜载物台，静置1~2分钟。
7、镜检，计数，沿计数室内的小格左右，再右左，数完20个小格里的球虫卵囊个数。
8、计算公式：每克兔粪中的球虫卵囊数（OPG），OPG=2个计数器内球虫卵囊总数X100。
或者OPG=1个计数室内球虫卵囊总数X200。
前面一个公式相对更准确。
假设我们在一个计数室计数的球虫卵囊个数10个，根据上述计算公式，OPG=10*200=2000，也就是说结果为每克兔粪的球虫卵囊个数为2000个。
9、结果：每克兔粪中OPG值达到10000个，即可视为被测兔子处于球虫病发病状态。
球虫实验-闫文朝
实验二、粪便中球虫卵囊的计数、分离和孢子化培养技术（Counting, isolation and sporulation technology forcoccidial oocysts in feces）【目的要求】认识动物常见重要球虫卵囊的形态特征；掌握粪便中球虫卵囊的计数、分离和孢子化培养基本操作方法。
这些操作是实验室开展球虫研究最常用的实验技术。
【基本原理】卵囊通常存在于宿主粪便中，从粪便中分离球虫卵囊的方法有饱和食盐溶液漂浮法、饱和蔗糖溶液漂浮法和饱和硫酸镁溶液漂浮法，其中最常用的方法为饱和食盐溶液漂浮法。
其原理是悬浮溶液如饱和食盐溶液密度高于卵囊密度，而低于粪便中大多数杂质，经离心或静置沉淀后，大部分杂质沉淀在容器底部，卵囊漂浮在悬浮溶液的表面，然后收集表层漂浮物；由于卵囊比重大于水的比重，所以表层漂浮物用自来水稀释离心后，卵囊沉淀富集于离心管底部即可得到大量球虫卵囊。
计算球虫感染强度即每克粪便中卵囊数量（oocysts per gram, OPG）和保存卵囊悬液中卵囊数量通常用麦克马斯特法(McMaster’s method)和血细胞计数板计数法，应用最广泛的是麦克马斯特法。
麦克马斯特计数法的原理是用饱和食盐溶液作为悬浮溶液，把卵囊与比重较大杂质分开，使卵囊漂浮至计数室表层，与计数室上层刻度部分处在同一层面上（或同一视野内）；计数板上每个计数室容积为1×1×0.15=0.15mL（如图1示），镜检计数0.15 mL计数室内卵囊数量，最后根据粪便克数和悬液稀释倍数计算OPG值或单位体积内卵囊浓度。
图1 麦克马斯特计数板结构示意图在适宜的温度通常25-28℃，湿度和充足的氧气条件下，球虫卵囊在体外进行减数分裂，一个卵囊内形成4个孢子囊，每个孢子囊内通过有丝分裂产生2个子孢子。
由于粪便中大量的杂质影响氧气扩散，杂菌生长消耗氧气，使卵囊发育不良，因此孢子化培养最好在分离后进行。
仔猪球虫病的诊治
仔猪球虫病的诊治仔猪球虫病是一种由球虫寄生引起的疾病，主要发生在仔猪身上。
该病主要通过新生仔猪的脐带感染、催乳后食用母猪粪便、以及直接与感染病猪接触传播。
诊断仔猪球虫病的方法主要有以下几种：1. 临床症状：仔猪球虫病的主要症状包括厌食、腹泻、疲倦、贫血等。
通过观察病猪的临床症状可以初步判断病情是否为仔猪球虫病。
2. 球虫卵检测：可以通过仔猪粪便的检测来确定仔猪是否感染了球虫。
将采集到的仔猪粪便样本放入盐水中，然后放置一段时间，用显微镜观察是否有球虫卵的存在。
3. 病理检测：在仔猪死后，可以对其进行尸检，观察肠道、淋巴结等组织是否有病变，并寻找球虫的存在。
治疗仔猪球虫病的方法主要有以下几种：1. 药物治疗：常用的药物包括吡咯醚、氢吡呋酮、阿苯达唑、红霉素等。
根据兽医的建议，合理选择药物，并按照药物使用说明进行治疗。
2. 饲养管理：密切注意仔猪的饲养环境，保持环境的清洁和干燥，定期清理仔猪舍和更换饮水设备，以减少球虫的传播。
3. 预防接种：根据兽医的建议，为仔猪接种球虫疫苗，提高其免疫力，预防球虫的感染。
除了以上的诊断和治疗方法，预防仔猪球虫病也是至关重要的。
以下是一些预防措施：1. 母猪防控：对母猪定期进行驱虫，减少母猪身上的球虫感染。
保持母猪圈的清洁和卫生也有助于减少球虫的传播。
2. 仔猪饲养管理：加强仔猪的饲养管理，保持饲料的清洁，避免交叉感染。
同时定期更换饲喂器具和饮水设备，减少球虫的存活和繁殖。
3. 卫生隔离：新产的仔猪要与其他健康猪隔离，避免接触感染病原体。
隔离期间观察仔猪的健康状况，如出现异常症状，及时进行治疗或报告兽医。
仔猪球虫病的诊断和治疗需要综合考虑临床症状、病理检测和球虫卵检测等方法。
预防也是非常重要的，通过母猪防控、饲养管理和卫生隔离等措施，可以降低仔猪球虫病的发生和传播风险。
球虫实验
二、实验器材1.仪器设备。
上海XSP-2C生物显微镜（具备10倍目镜和低倍、高倍物镜及油镜）；目镜测微尺和物镜测微尺；盖玻片、载玻片、牙签、洗瓶、平皿；剪刀及手术刀；离心管；血细胞计数板。
2.实验材料。
感染球虫的患鸡,常见的球虫卵囊,蔗糖、食盐、硫酸镁、铬硫酸、重铬酸钾等。
三、实验方法、步骤和操作要领（一）球虫的形态观察随宿主粪便排出的卵囊呈卵圆形、圆形或球形；无色、淡黄色或淡绿色，其形态大小随球虫种类而异。
外被有两层囊壁，外壁较厚，轮廓清晰；内壁较薄。
内含颗粒状的胞质(即原生质团)。
卵囊内具有一至多个孢子囊，每个孢子囊内含有一至多个子孢子，因种类而异。
艾美耳属的球虫种类经发育后，原生质团分裂为四个孢子囊，每个孢子囊内含有两个子孢子。
有些种类的球虫在卵囊的极端具有明显的卵膜孔，有些球虫的卵囊内膜突出于卵膜孔之外，形成极帽。
畜禽常见球虫的种类：1．牛球虫。
文献报道的有10种，其中9种为艾美耳属（Eimeria）球虫，另外一种为阿沙卡等孢球虫（Isospora akscaica）。
以邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)致病力最强，牛艾美耳球虫(E.bovis)致病力较强，它们寄生于牛消化道的上皮细胞。
(1)邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)。
卵囊呈亚球形或球形，平均直径为18.6μｍ×14.6μｍ。
淡黄色，无卵膜孔，胞质充满整个卵囊，无极体。
卵囊孢子化时间为24～72小时。
(2)牛艾美耳球虫(E.bovis)。
卵囊呈卵圆形，褐色，有卵膜孔，平均大小27.7μｍ×20.3μｍ，卵囊孢子化时间为48～72小时。
2. 兔球虫。
种类很多，有16种，属艾美耳属。
仅介绍两种如下。
(1)斯氏艾美耳球虫(E.stiedae)。
寄生于肝、胆管上皮细胞内。
致病力最强。
卵囊甚大，长椭圆形，大小为26～40μｍ×16～25μｍ，略带淡红色，囊壁较厚，具卵膜孔。
(2)穿孔艾美耳球虫(E.perforans)。
球虫检查操作步骤
球虫粪便检查法
饱和食盐漂浮法：取3克（7,8个粪球左右）粪便在小烧杯中磨碎，加入少量
饱和盐水，搅拌均匀，再加入适量饱和食盐水，用筛子（40或60目）将粪便过滤到另一容器内，静置3-5分钟，此时比重轻的虫卵就浮到液体的表面，用细胶头滴管吸取上层液体注入麦克马斯特计数板中，放到显微镜下（10×)，放置1-2分钟后观察，若感染，可看到球虫卵囊。
也可用直径5～10毫米的铁丝圈蘸取表面液膜，抖落于载玻片上，置于显微镜下镜检。
饱和食盐水的制备：在1000毫升水中加入380～400克食盐。
煮沸使其溶解，
待凉后使用。
（应注意变凉后的溶液中如出现食盐结晶的沉淀，则说明该食盐溶液饱和，符合要求）。
所需仪器：饱和食盐水、小烧杯、筛网、玻璃棒、细胶头滴管、麦克马斯特计数板、显微镜。
3种方法检测仔猪球虫卵囊的比较研究
3种方法检测仔猪球虫卵囊的比较研究农向;梁梓;宋琳芝;张利;张妍娜;伍红;秦天莺【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2008(036)024【摘要】[目的]为有效检测仔猪球虫卵囊提供参考[方法]通过对检测仔猪球虫病的3种方法(直接涂片镜检法、饱和盐水漂浮法和Teleman法)进行比较,研究检测仔猪球虫卵囊的有效方法.[结果]比较3种方法分别对仔猪球虫卵囊阳性检出的效果,结果表明,Teleman法能观察到较清楚的圆形球虫卵囊,是检测效果最好的方法.对仔猪球虫卵囊检出率的比较结果表明,Teleman法和饱和盐水漂浮法是较好的仔猪球虫卵囊检出方法,而检出比率Teleman法最高.饱和盐水漂浮法、直接镜检法都由于粪便中存在脂肪颗粒等异物而影响检测效果.对检测的结果进行分析可知近年来乐山仔猪球虫病发病率有所升高.[结论]Teleman法是最有效的卵囊检出方法.【总页数】2页(P10467-10467,10475)【作者】农向;梁梓;宋琳芝;张利;张妍娜;伍红;秦天莺【作者单位】乐山师范学院化学与生命科学学院,四川乐山,614000;乐山师范学院化学与生命科学学院,四川乐山,614000;乐山师范学院化学与生命科学学院,四川乐山,614000;乐山师范学院化学与生命科学学院,四川乐山,614000;乐山师范学院化学与生命科学学院,四川乐山,614000;西南民族大学生命科学学院,四川成都,610041;西南民族大学生命科学学院,四川成都,610041【正文语种】中文【中图分类】S828【相关文献】1.两种方法提取柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊基因组DNA的对比试验 [J], 张志敏;于三科;林青;余招锋;翟军军2.3种方法检测仔猪球虫卵囊的比较研究 [J], 农向;梁梓;宋琳芝;张利;张妍娜;伍红;秦开莺3.柔嫩艾美耳球虫敏感株与耐药株成熟卵囊中葡萄糖含量的检测 [J], 马立农;陈杖榴;余亮彬4.仔猪感染猪等孢球虫排卵囊规律观察 [J], 姚雷;宁长申;张龙现;菅复春;张敏;王芳;朱静;吕彪;孙彦平5.鸡胚接种柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫活卵囊的免疫保护试验 [J], 党海斌;蔡建平;于三科;覃宗华;叶秀华;林青;陈闻;简永利因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
动物球虫检测国家标准
本标准适用于禽类和兔球虫检测病原检查1材料准备1.1饱和盐水,配制方法见附录A(标准的附录)1.2 60目铜丝网或尼龙网、100mL量杯、0mL和100mL烧杯、5mL玻璃瓶、吸管、子、天平、离心机、麦氏虫卵计数板、载玻片、盖玻片、显微镜等。
1.3被检动物或动物群的新鲜粪便不少于200g2操作方法2.1定性检查2-1.1取被检动物或动物群的新鲜类便10g,放人50mL烧杯中,加人适量水2.1.2轻轻搅匀,经60目铜丝网或尼龙网过滤2.1.3将滤液移入4支10mL~15mL试管,2500r/min离心10min2.1.4傾去上清液,各質沉淀物中加人少量饱和盐水,混匀。
各管的沉淀物混悬液移人ー个5mL玻璃瓶2.1.5用饱和盐水(见附录A)加满,置上盖玻片(盖玻片须能与液面接触),静置10min2.1.6取下盖玻片,放在载玻片上2.1.7置载玻片于显微镜台上,用10×10或10×40的倍数进行检査。
2.1.8判定a)发现球虫卵,判为阳性,说明该动物(群)已感染球虫,并可根据附录C(提示的附录)卵囊形态特征,初步确定为哪一属的球虫b)未发现球虫卵囊,需重复检查5次,仍未见球虫卵囊,本类样可判为阴性。
只有连续检查粪便7d~10d,均未发现球虫卵囊,方可说明该动物(群)未感染球虫1.2定量检查1.2.2.1对定性检查中阳性的样,要进行定量检查1.-2.2.2取待检样2g,放入50mL烧杯。
1-2-2.3加入少量自来水搅匀,经60目铜丝网或尼龙网过滤,并用自来水冲洗几次滤网1-2.2.4滤液经2500r/min离心10min1.2-2.5用少量傀和盐水将沉淀物匀,移入100mL量杯,加饱和盐水至60mL.处,充分混匀。
1.2.2.6用吸管吸取混悬液注满麦氏虫卵计数板,静置5min1.2.2.7将麦氏虫卵计数板置于显微憶下检查,用10×10或10×10信,数出每个刻室(cm×1cm0.15cm=0.15cm',100个小方格)内的所有卵襄数,让算出平均值A。
食品中虫蛋的检测方法研究
食品中虫蛋的检测方法研究食品安全一直是人们非常关注的问题，而其中一个重要的方面就是虫蛋的检测。
虫蛋是食品中的常见污染物之一，它既会造成消费者的心理压力，也可能对健康造成潜在危害。
因此，如何准确、高效地检测食品中的虫蛋一直是食品研究领域的热点之一。
对于食品中虫蛋的检测方法，目前主要有以下几种常用的技术：观察法、计数法、PCR技术和光学识别技术。
观察法是最为简便的一种方法，通过肉眼观察食品中是否有虫蛋存在。
这种方法虽然简单易行，但存在着一定的局限性。
首先，只有较大的虫蛋才能通过肉眼观察发现，而微小的虫蛋很难被观察到；其次，观察法无法对虫蛋的种类和数量进行准确的判断，只能作为初步的筛查方法使用。
计数法是一种相对精确的虫蛋检测方法。
它通过将食品样品加工成适合计数的形式，如水浸法、溶解法等，然后使用显微镜进行观察和计数。
这种方法可以对虫蛋的数量进行准确统计，但需要消耗较多的时间和人力物力，且样品加工过程中易造成虫蛋的破损，从而影响检测结果的准确性。
PCR技术（聚合酶链反应技术）是近年来广泛应用于食品检测领域的一种快速、高效的方法。
它通过扩增虫蛋样品中的特定DNA片段，从而实现对虫蛋的定性和定量检测。
优点是PCR技术灵敏度高、操作简单、结果可靠。
但也存在着耗时长、检测成本高等问题，以及需要复杂的实验设备和技术操作。
光学识别技术是一种基于图像处理和模式识别的虫蛋检测方法。
它利用高分辨率的图像设备，通过对食品样品中的特征信息进行分析和比对，判断其中是否存在虫蛋。
这种方法可以实现对虫蛋的准确检测，并且速度较快，不需要进行复杂的样品处理。
然而，光学识别技术目前仍处于探索阶段，与其他传统方法相比还有一定的局限性和不足之处。
随着科技的不断进步，食品中虫蛋检测方法也在不断创新和改进。
近年来，一些新兴的技术逐渐应用于虫蛋检测领域，如电化学检测、纳米粒子检测等。
这些新技术在提高检测速度和准确性方面具有较大的潜力，然而仍需要进一步的研究和实践验证。
球虫卵囊染色法.pdf
1.适应症：用于食道胃底静脉破裂出血患者的紧急止血。
2.术前准备(1)告之患者该治疗的优点和缺点。
尤其是在插管时可能引起出血量增大和吸入性肺炎。
(2)开具医嘱，通知护理部做好准备。
(3)物品准备①护理部检查三腔二囊管的消毒情况、是否通畅、膨胀性是否良好、刻度是否清晰。
②护理部准备消毒的石蜡油、牵引绳、装250ml水的500ml盐水瓶、剪刀、止血钳两把、50ml 注射器。
3.操作流程(1)在胃管、胃气囊、食管气囊涂以石蜡油，并嘱患者喝少许石蜡油。
(2)将三腔管的远端从患者鼻腔插入，达咽部时，嘱患者吞咽唾沫，使三腔管顺利送入。
将三腔管插至65cm处，若由通胃管的腔能抽出胃内容物，即表示管端已达幽门。
(3)用注射器向胃囊注入空气200～300ml，使胃气囊膨胀，即用止血钳将此管夹紧，以免漏气。
再将三腔管向外牵引，直至感觉有轻度弹性阻力，表示胃气囊已压于胃底贲门处。
用装250ml水的500ml盐水瓶，通过滑车装置牵引三腔管，固定于床脚架上，以免三腔管滑人胃内。
(4)随后向通到食管气囊的腔注入空气50～70ml，使压迫食管下1／3，用止血钳将此管夹紧，以免漏气，最后用注射器吸出全部胃内容物。
4.注意事项(1)气囊压迫期间，食管气囊每12. 24小时应放气一次，同时将三腔管向胃内送入少许，使胃底也减轻压力，并抽取胃内容物了解有无出血。
一般放气30分钟后可再充气。
(2)三腔管填塞，一般以3～5天为限，如有继续出血，可适当延长填塞时间。
再出血停止24小时后，应在放气状态下再观察24小时，如仍无出血，方可拔管。
用物准备1. 插管用物：治疗盘、无菌碗、三腔二囊管、纱布、短镊子、生理盐水、 50ml ～ 100ml 注射器 2 副、液体石蜡、棉签、胶布或固定套、弹簧夹、血管钳、治疗巾、小弯盘；负压吸引器；血压计、听诊器、护理记录单。
2. 牵引用物：牵引架、滑轮、绷带、牵引物。
3. 拔管用物：治疗盘、小药杯内备石蜡油 20 ～ 30ml 、松节油、 70% 酒精、棉签、纱布、弯盘。
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正典球虫卵囊简易监测法
一、正典球虫卵囊简易监测法及工具盒简介
正典球虫卵囊简易监测法是广东省佛山市正典生物技术有限公司是根据寄生虫病诊断中常用的饱和盐水浮卵法加以改良而成的，专用于检测鸡粪中球虫卵囊。
本法可测定每克粪便中鸡球虫卵囊的数量，克服了饱和盐水浮卵法只能定性，不能定量的缺点，准确性虽较麦氏克粪便虫卵计数法稍差，但其操作和对设备的要求大为简化，仅需1台可放大100倍的显微镜，少量饱和食盐水和1套正典球虫卵囊简易监测工具盒，即可在十多分钟内完成对一群鸡的球虫病或疫苗免疫效果的快速监测。
正典球虫卵囊简易监测工具盒中包括：1本正典球虫卵囊简易监测法操作说明书、1块双凹载波片、1个100ml量杯、1个标准取液环和1把小汤匙。
二、鸡球虫病基本知识
鸡球虫病的发生机理与危害
a.球虫在鸡体内进行的是一种有限数量的发育与繁殖。
b.鸡要感染一定数量有致病力的球虫，亦即食入足够数量的孢子化卵囊，才
会在感染后的第4~5天引致发病。
c.球虫病对养鸡生产造成的危害是综合性和多方面的。
1.柔嫩艾美耳球虫（引致盲肠球虫病）
高发时间：地面平养：3~4周龄
网上或笼养：3~20多周龄不等
致病特征：下鲜红色血痢，盲肠肿大和粘膜严重坏死出血，是鸡的7 种球虫中致病力最强的一种。
寄生部位：盲肠上皮细胞和粘膜下层。
卵囊形态：呈宽卵圆形，大小约22×19微米。
2.毒害艾美耳球虫（引致急性小肠球虫病）
高发时间：主要发生于6周龄以上的中大鸡
致病特征：血粪呈酱油色，小肠中段严重肿胀几乎为正常直径的两倍，肠壁增厚，有明显的淡白色斑点，粘膜上有出血点。
肠道受破坏特别严重，
病程较长，常与肠道梭菌并发感染。
寄生部位：主要寄生在小肠中段。
在严重感染的病例，病变可能扩展到肠道的整个范围。
卵囊形态：呈椭圆形或长卵圆形，大小约20×17微米。
3.巨型艾美耳球虫（引起亚临床球虫病）
致病特征：眼观无明显特征，常引起小肠中段肠壁增厚，有轻度出血，粪便含水量增高，不成形，内含较多未消化饲料，主要影响饲料消化和营
养吸收，容易误诊为其它肠道疾病。
寄生部位：主要寄生在小肠中段。
在严重感染的病例，病变可能扩展到整个小肠范围。
卵囊形态：较其它种类球虫卵囊明显要大，呈卵圆形，大小约31×21微米。
4.堆型艾美耳球虫（引起亚临床球虫病）
致病特征：轻度感染时眼观无明显特征，严重感染时十二指肠粘膜上可见梯状横向排列的白斑。
十二指肠粘膜增厚，有轻度出血，粪便含水量增
高，不成形，内含较多未消化饲料，主要影响饲料消化和营养吸收，
易与其它肠道疾病混淆。
寄生部位：主要寄生在十二指肠。
卵囊形态：较柔嫩、毒害艾美耳球虫卵囊要小，呈偏圆形，大小约18×15微米。
5.布氏艾美耳球虫（目前国内不常见）
致病特征：致病力较柔嫩、毒害艾美耳球虫稍弱，但国内罕有病例。
寄生部位：主要寄生于卵黄蒂至盲肠连接处。
卵囊形态：大小与柔嫩艾美耳球虫相似，呈卵圆形，大小约25×19微米。
6.早熟艾美耳球虫
致病特征：致病作用不明显，引起的病变肉眼不可见，在长期饲养的鸡群中可观测到轻微影响。
寄生部位：主要寄生在十二指肠。
卵囊形态：大小与毒害艾美耳球虫相似，呈卵圆形，大小约21×17微米。
7.和缓艾美耳球虫
致病特征：目前认为该种类几乎无致病力，仅有对增重和其它疾病的潜在影响。
寄生部位：主要寄生于小肠下段，即卵黄蒂至盲肠连接处。
卵囊形态：较堆型艾美耳球虫小，呈圆形，大小约15×14微米。
三、 正典球虫卵囊简易监测法操作说明
1. 准备工作
a.材料
可放大100倍的显微镜1台、饱和食盐水适量、正典球虫卵囊简易监测工具盒1套、收集鸡粪用胶袋或容器适量。
b.饱和盐水配制方法
在一定量水中（最好用沸水），边搅拌边加入纯食盐，直至有少量食盐不再溶解为止，待冷却后使用。
c.粪样采集
从鸡舍地面的多个位置采集新鲜粪便样品，小肠粪约20堆，盲肠粪约5堆，装入收集鸡粪用胶袋或容器中。
同一栋鸡舍或同一群鸡的粪样为1个样品。
2. 检测步骤：
a. 将所采集到的1个粪样充分搅拌均匀。
b. 用正典球虫卵囊简易监测工具盒中的小汤匙取半匙（约3~5克），装入100ml 量杯中，加入10ml 饱和食盐水，用小汤匙不断搅拌至粪样彻底分散均匀后，再加入约50ml 饱和食盐水，搅拌均匀后静置10分钟以上。
c. 用取液环轻轻蘸取最上层液面，抖落到双凹载玻片上的圆坑中，在液面不同位置处如此操作3次，形成1个与圆坑面积大小相同的液滴。
d. 将双凹玻片置于显微镜下观察（倍数10×10），观察液面的中部位置，计算卵囊最密集位置1个视野中的卵囊和种类数量。
3. 根据鸡球虫卵囊的形态判别种类
巨型艾
美耳球
虫卵囊 堆型艾美耳球虫卵囊 柔嫩、
毒害艾
美耳球虫卵囊
4.结果判定
视野中每个卵囊代表所取每克粪样中含该种类卵囊约1000个。
四、正典球虫卵囊简易监测法在鸡亚临床球虫病诊断中的应用
毒害、巨型和堆型艾美耳球虫寄生在鸡的小肠，当其为亚临床感染时极少引起鸡只大量死亡和典型病状，故易被养鸡生产者忽略或误诊。
因其寄生部位为营养吸收的主要部位，其在肠粘膜寄生和破坏的过程常造成饲料营养消化吸收不良，又为其它病原突破肠道防卫系统大量繁殖创造极为有利的条件。
对养鸡生产所造成的损失甚至大于急性球虫病。
因其无明显眼观特征病变或症状，故确诊需检查发病鸡的粪便中是否含有卵囊。
取有异常的粪样按正典球虫卵囊简易监测法进行检查，即可确诊。
五、正典球虫卵囊简易监测法在正典球苗免疫监测中的应用
正典球苗因使用了首创的免疫前不需停水的5小时饮水接种法，鸡群免疫极为均匀，首免后产生的子代卵囊集中于免疫后的6~8天排出，孙代卵囊集中于免疫后13~15天排出，且每堆粪便中的卵囊数量差异不大，故可通过正典球虫卵囊简易监测法检测少量粪样反应整个鸡群的免疫状况。
具体指标如下：。