鼠疫快速检测试剂盒(胶体金法)
胶体金法和胶体金免疫层析法的区别
胶体金法和胶体金免疫层析法的区别摘要:一、胶体金法和胶体金免疫层析法的概念与原理二、胶体金法和胶体金免疫层析法的应用领域三、胶体金法和胶体金免疫层析法的优缺点四、总结:胶体金法和胶体金免疫层析法的区别与选择正文:胶体金法和胶体金免疫层析法都是常见的免疫分析技术,广泛应用于医学、生物学等领域。
然而,这两种方法在原理、应用、优缺点等方面存在一定的差异,下面我们将逐一进行分析。
一、胶体金法和胶体金免疫层析法的概念与原理胶体金法:胶体金法是一种免疫标记技术,利用胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体检测。
它通过胶体金颗粒与抗原或抗体的特异性结合,实现对目标物质的检测。
胶体金法具有较高的灵敏度和特异性,且检测结果直观可见。
胶体金免疫层析法:胶体金免疫层析法是一种免疫分析方式,利用特异性抗原抗体免疫结合反应的原理,加上试纸条层析技术进行检测。
它将胶体金作为标记物,通过层析技术将结合后的抗原抗体分离,从而实现对目标物质的快速诊断。
二、胶体金法和胶体金免疫层析法的应用领域胶体金法:胶体金法广泛应用于免疫学、病理学、组织学等领域。
例如,在医学检测中,胶体金法可以用于病原体检测、抗体检测、肿瘤标志物检测等。
胶体金免疫层析法:胶体金免疫层析法主要用于快速诊断技术,如传染病、肿瘤、生育健康等领域。
它具有快速、灵敏、特异性的特点,适用于临床、Point-of-Care 和家庭检测。
三、胶体金法和胶体金免疫层析法的优缺点胶体金法:优点:1.灵敏度高,特异性强;2.检测结果直观,易于判读;3.应用领域广泛,适应性强;缺点:1.胶体金颗粒尺寸较大,可能导致分辨率降低;2.实验条件较严格,操作复杂;胶体金免疫层析法:优点:1.快速检测,结果准确;2.操作简便,适用于基层医疗和家庭检测;3.成本较低,普及度高;缺点:1.相对于胶体金法,灵敏度和特异性略低;2.设备和技术要求较高;四、总结:胶体金法和胶体金免疫层析法的区别与选择胶体金法和胶体金免疫层析法在原理和应用上具有一定的区别。
检验鼠疫菌的荧光免疫染色试剂盒[发明专利]
(10)申请公布号 (43)申请公布日 2010.09.22*CN101839916A*(21)申请号 201010201992.6(22)申请日 2010.06.17G01N 33/569(2006.01)G01N 33/533(2006.01)G01N 33/52(2006.01)(71)申请人新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心地址830002 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市碱泉一街380号(72)发明人雷刚 热娜.吐尔地 蒋卫丁雄杰 徐兵 唐建国(74)专利代理机构乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105代理人汤洁(54)发明名称检验鼠疫菌的荧光免疫染色试剂盒(57)摘要本发明涉及动物鼠疫疫情监测与鼠疫诊断技术领域,是一种检验鼠疫菌的荧光免疫染色试剂盒,其包括荧光素标记抗体1支,荧光抗体保存液2ml×1支,固定液20ml×1瓶,10×稀释液20ml×1瓶,鼠疫菌阳性对照2ml×1支,鼠疫菌阴性对照2ml×1支,抑制用鼠疫F1抗体5ml×1支,1%硫柳汞5ml×1支;所述萤光素标记抗体为异硫氰酸荧光素标记鼠疫F1抗体。
本发明的有益效果:被测物经过氧乙醇固定,使检测过程安全;用荧光显微镜观察染色结果,程序简单,全程60分钟,最小检出量为500个鼠疫菌体/ml ;抑制试验可提高检测结果的准确性;为动物鼠疫监测和诊断提供了准确、稳定、快速、简便的检验器具。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 4 页CN 101839916 AC N 101839916 A1.一种检验鼠疫菌的荧光免疫染色试剂盒,其特征在于包括冻干荧光素标记抗体1支,荧光抗体保存液2ml×1支,固定液20ml×1瓶,10×稀释液20ml×1瓶,鼠疫菌阳性对照2ml×1支,鼠疫菌阴性对照2ml×1支,抑制用鼠疫F1抗体5ml×1支,1%硫柳汞2ml×1支;所述萤光素标记抗体为异硫氰酸荧光素标记鼠疫F1抗体即FITC-F1Ab。
胶体金法与ELIsA快检方法比较
胶体金法与ELISA法比较1.Elisa方法1.1ELISA方法简介ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
1.2 elisa方法的原理Elisa原理示意图1.3 elisa方法的特点(1)敏感性高,一般是胶体金产品的10倍的灵敏度。
(2)特异性取决于抗原、抗体制备,特异性很高,假阳性、假阴性均比胶体金法低很多。
(3)重复性高,一般批内小于5%,批间小于10%。
(4)结果判断客观,并且是定量分析样品的浓度。
胶体金法有主观因素。
(5)在野外条件下用于大量标标本的检测可以。
同样胶体金法也可以做到,而且更好些。
(6)分析自动化可以,有大型的自动酶免仪,包括加样、洗涤、显色、读数等一系列过程可以自动完成。
胶体金产品现在还很困难做到自动化。
(7)主要设备酶标仪;胶体金法无需任何设备,(8)试验成本低,特别是检测大量样本时,明显降低单个的检测时间及成本。
(9)试剂稳定性在4℃一般可以保存一年。
胶体金法试剂的稳定性更好。
(10)对人的危害性无或很少。
(11)应用范围小的诊断实验室。
2.胶体金方法新型的免疫标记技术。
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。
胶体金法新冠检测试剂盒使用方法
胶体金法新冠检测试剂盒使用方法胶体金法是一种新冠病毒快速检测方法,其原理是通过用于检测特殊抗原或抗体的单克隆抗体与胶体金颗粒结合,在特定的检测线和控制线进行反应,从而实现对新冠病毒的快速检测。
下面是胶体金法新冠检测试剂盒使用方法的详细介绍:准备工作1.打开测试包装,将试剂盒取出,并按照说明书上的图示确认试剂盒各部分的位置。
2.取出样本收集管,准备好样本。
样本可采用鼻咽拭子、咳痰、血清、血浆等样本。
具体需根据不同的试剂盒要求采样。
3.在进行测试之前,需要准备好一台计时器。
操作步骤1.将取出的试剂盒放置在平坦的工作台上,然后拆开试剂盒中的瓶盖,将样本收集管内的样本滴入样本孔中。
2.添加样本后,等待约15-20分钟,以允许样品和试剂反应和移动。
不要移动试剂盒。
3.读取测试结果。
当样品和试剂反应时,胶体金颗粒会在试剂棒上移动,如果样品中存在新冠病毒抗原或抗体,那么它们会与单克隆抗体相结合,形成可视化线条。
检测结果分为两种情况:①“双线(T/Y),表示阳性”,即试剂棒的控制线(C)和检测线(T/Y)均显现为紫红色。
②“单线(C)或无线,表示阴性”,即只有试剂棒的控制线(C)显现为紫红色。
注意事项1.使用前应检查试剂盒包装是否完整,是否已超过保质期限。
2.样本不能超过标记线,否则可能会影响检测结果。
3.每次只能检测一个样本,不能将多个样本放在同一个测试唧筒中。
4.必须在5分钟内读取结果,并避免在阳光下或强光下读取结果。
5.在使用过程中,避免震动或颠簸。
如果在测试过程中不小心将试剂盒颠倒或摇晃,可能会影响测试结果的准确性。
6.操作过程中,应注意事项特别是遵守抗疫防疫要求。
鼠疫监测中胶体金免疫层析法的应用效果评价
5 % fr3 i u e n d tcin o n io y a an t rii e t 1a t e n s r m .M e h d n 2 0 6 o 0 m n tso ee t f t d g is Yes a p s s F ni n i e u o a b n i g t o s I 0 6,rt a
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【 关键 词 】 鼠疫 菌 ; 胶 体 金 免 疫 层 析 法 ( A ; 鼠疫 监 测 I ) C
Ev l to o p lc to o aua in n a p ia in f a s y i plg ur el n e HU sa n a ues v i a c ANG - u , HANG l Deh i
Байду номын сангаас【 摘要 J 目的
了解胶体金免疫层析法在 鼠疫监测 中的作用及其影响因素 。方法
对 20 06年 自广西隆林县 、 西林
县 鼠疫监测 中收集的 鼠脏器 、 鼠血清以及既往鼠疫 阳性病人血清 , 利用胶体金免疫层析技术进行 鼠疫菌 F 抗原 ( 1 脏器 ) 与 F 抗体 ( 1 血清 ) 检测。结果 鼠肝脏 10 、 2 份 鼠脾脏 9 份 , 9 胶体金法检测 鼠疫菌 F 抗原均为阴性 ; 1 鼠血 清 25 3 份胶体
h a n ciain o ea u o e wa s ie atrmec r ho d rame t e tia t t fs r ,b t n s p iv f r u i c lr e t t n .Co cu i n Mec r ho d v o n o t e c i e n l so ru c c lr e i i
生物战剂快速检测箱
生物战剂快速检测箱
产品简介:
生物战剂快速检测箱通俗称反恐战剂快速检测箱或叫生物因子快速检测箱,本检测箱可对炭疽杆菌等常见13种生物战剂进行快速筛查!适用于反恐等专业应急反应部门、口岸检疫局、卫生安全部门、公共安全保卫等部门对各种病原微生物的安全监管检测。
检测项目:
主要针对鼻疽菌、类鼻疽菌、布鲁氏菌、炭疽杆菌、鼠疫菌、土拉热菌、A型肉毒毒素、B型金黄色葡萄球菌肠毒素等13种病原微生物/生物制剂的抗原抗体进行现场快速检测。
性能特点:
1、方便随身携带、可在现场即时取样检测。
2、操作间单,不需任何特殊设备仪器和场所环境限制。
3、检测时间短,5~10分出结果,采用胶体金标快速检测法,检测结果可直接肉眼读取。
4、配套品种齐,试剂保质时间长,在冰箱冷藏放置保存可长达一年以上。
检验科传染病四项胶体金法标准操作程序
传染病四项通常指的是乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)和梅毒螺旋体(Syphilis)的检测。
胶体金法是一种快速、简便的免疫层析检测方法,常用于临床实验室进行这些传染病的初筛检测。
以下是检验科进行传染病四项胶体金法标准操作程序的大致步骤:1. 准备阶段:确认胶体金试剂盒的有效期、批号,并按照说明书储存条件保存。
准备必要的器材,如移液器、测试板、计时器、记录表格等。
确保操作环境符合生物安全要求。
2. 样本采集:遵循相关的生物安全规程,采集患者的血液样本,通常为指尖血或静脉血。
确保采血器具的清洁和无菌。
3. 样本处理:根据胶体金试剂盒的说明书,将血液样本加入特定的试剂中,并按照规定的程序进行混合。
等待试剂反应规定的时长,通常为1520分钟。
4. 结果判读:在胶体金测试板上,根据对照线和测试线的出现情况判断结果。
通常,如果对照线和测试线同时出现,判定为阳性;只有对照线出现,判定为阴性;对照线不出,测试线出现,判定为无效,需要重新检测。
5. 结果记录和报告:记录检测结果,并填写检测报告。
如果检测结果为阳性,需要按照实验室规定进行复检,并采取相应的生物安全措施。
6. 废弃物处理:按照规定处理使用后的试剂、样本和废弃物,确保符合环保和生物安全要求。
7. 质量控制:定期进行质量控制检查,包括使用已知阴性和阳性的质控样本进行检测,确保检测系统的准确性。
请注意,以上步骤仅供参考,具体的操作程序应遵循实验室的标准操作规程和胶体金试剂盒的说明书。
操作过程中应严格遵守实验室安全规范,确保检测结果的准确性和安全性。
新冠试剂盒胶体金法使用方法
新冠试剂盒胶体金法使用方法新冠病毒肆虐全球,防控疫情刻不容缓。
随着新冠病毒疫苗的研发和大规模接种,检测成为控制疫情的重要手段之一。
而新冠试剂盒胶体金法是目前常用的检测方法之一,下面我们来了解一下其使用方法。
一、试剂盒背景试剂盒胶体金法(Colloidal Gold Identification Kit)是一种基于胶体金纳米颗粒原理的快速检测方法。
其检测原理为利用特异性抗体将胶体金标记在新冠病毒抗原上,形成一种可见颜色变化的复合物,从而判断样本中是否存在新冠病毒。
二、试剂盒使用方法1. 样品采集试剂盒中常规的样本类型有咽拭子样本和鼻拭子样本,样品采集时应注意保持操作者与被采集者安全距离(通常在1米以上)。
在采集拭子时,应先让被采集者将口腔或鼻腔进行充分清洁,然后再进行拭子采集。
采集时应倾斜头部45度,将拭子插入鼻孔至鼻后壁,旋转拭子4-5圈,再取出拭子。
如是咽拭子采集,则需在扁桃体周围刮拭,避免舌头、颊黏膜及口腔分泌物。
2. 样品处理样品采集完成后,需进行处理以获取检测所需的样品液。
对于咽拭子样本,应在采集后使用3-5ml的病毒保存液滴入管中,轻摇混合,取刷头回收组织细胞和分泌物,尽量不要加压,避免污染。
对于鼻拭子样本,将拭子插入病毒保存液垂直移动数次(外来物附着拭子的先拭屑去除),使拭子头彻底浸润液面,旋转拭子头数次后取出拭子头,丢入垃圾桶中。
3. 试剂操作将处理好的样品液加入试剂盒中,待15-20分钟后,观察化学试剂盒对应位置是否有结果出现。
根据颜色变化判断样本中是否有新冠病毒抗原。
通常情况下,病毒抗原阳性为两条红线,阴性为一条红线,无效为无测试线。
待结果出现后可以进行结果判读。
4. 结果判读根据化学试剂盒上的标识,判断试剂盒中线条的变化情况。
如有两条红线,则代表样本中含有新冠病毒抗原,为阳性;如只有一条红线,则代表样本中不含新冠病毒抗原,为阴性;如没有线条出现,则代表测试无效。
同时,注意检测过程中的卫生安全,避免交叉感染。
鼠疫抗体胶体金快速检验法在一起动物鼠疫检测中的应用
关键 词 : 鼠 疫 疫 源 地 胶 体 金
中图分类 号: R 4 4 6 编号 : 1 6 7 2 — 8 3 5 1 ( 2 0 1 4) 0 6 — 0 0 6 9 — 0 1
依照《 全国鼠疫监测 工作方 案》 的要求 , 2 0 0 9年 4月 鼠疫常 亚种 1 株、 秃病蚤蒙冀 亚种 1 株) 均为 自毙 鼠及其寄生 鼠体蚤 。 规监测中 ,在内蒙古鄂托克前旗与宁夏平 罗县交界地区的长爪 3 结 论 沙 鼠疫源地内 , 采集到 1 只子午沙鼠血清 , 使用胶体金检测方法 胶体金免疫层析法 ( g o l d i mm u n o c h r o m a t o g r a p h v a s s a y , G I —
升加入试剂 的加样孔 内, 从滴 加样 品开始计 时 , 1 5 m i n内观察结 3 . 3 本次鼠问鼠疫疫情经过许多部门的协同配合 ,疫 区得到了科 果。阳性结果 为: 可见两条 紫红 色条带 , 即质控线和检测线皆显 学处理 , 疫情得 以及时控制。 快速检测方法的使用 , 极 大地提高了 色; 阴性结果为 : 仅见一条紫红色条带 , 即只有质控线显色 ; 无效 疫区处理的及时 l 生, 快速判断缩短 了处理时间 , 提高了工作效率。
疟疾快速检测试剂盒使用说明书
疟疾快速检测试剂盒(胶体金法)使用说明书【产品名称】通用名称:疟疾快速检测试剂盒(胶体金法)英文名称: Malaria Test【包装规格】25人份/盒。
【预期用途】疟原虫抗原检测试剂盒(胶体金法)是体外免疫层析试验,用于定性检测具有疟疾症状和体征人群EDTA抗凝静脉血或毛细血管血中的恶性疟原虫抗原和间日疟原虫抗原,可对恶性疟原虫、间日疟原虫做出辅助诊断,并可对恶性疟原虫和间日疟原虫做出鉴别诊断。
该试验不用于无症状人群的筛查。
【检验原理】疟原虫抗原检测试剂盒(胶体金法)使用的是薄膜免疫层析技术,该技术用单克隆抗体检测静脉血和末梢血中的恶性疟原虫抗原和间日疟原虫抗原,这两种抗体与对照抗体固定到膜支持物上形成三条不同的线,膜支持物与样品垫相连,结合有可视粒子的对照抗体和抗疟原虫抗体浸渗在样品垫上,组成检测条。
检测条位于一块书形铰链状的检测卡中,与冲洗垫和吸收垫一道参与检测板闭合后薄膜的清洗。
检测时,将全血加到样品垫上,标本中存在的疟原虫抗原与抗疟原虫抗体结合物结合。
将A试剂液加到检测条的底部,使抗原结合物复合物沿检测条流动,在固定抗体处被捕获,形成检测线,固定的对照抗体捕获对照结合物,形成对照线。
一旦血标本流过检测条,就将检测板闭合,使加到冲洗垫中的A试剂把检测条上多余的血液冲去。
检验结果可用紫红色线的存在与否来解释。
15分钟读数时,阳性结果将包括一条检测线(或两条检测线)和一条对照线,阴性结果只产生一条对照线,阴性表明标本中未检出疟原虫抗原。
如果不出现对照线,不管检测线出现与否,结果都为无效。
【主要组成成份】1.2.A试剂:含去污剂和叠氮钠的Tris缓冲液。
3.毛细管:EDTA抗凝毛细管,用于将末梢全血加入到检测卡中。
自备材料采血针、灭菌拭子或棉球、时钟、秒表或跑表注:加样时,要使用能加样15μl体积的经过校准的加样器。
【储存条件及有效期】试剂盒在2-37℃贮藏。
试剂有效期为自生产之日起24个月。
鼠疫耶尔森菌鼠疫杆菌PCR检测试剂盒说明书
鼠疫耶尔森菌鼠疫杆菌PCR检测试剂盒说明书鼠疫耶尔森菌鼠疫杆菌PCR检测试剂盒说明书产品特征:灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
特异性强:采纳热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增。
重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
原理:所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
需要自备的器材:1.仪器:分析天平、离心机、荧光PCR扩增仪、组织研磨器、20℃冰箱、可调移液器(2L、20L、200L、1000L)。
2.耗材:荧光PCR反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5mL经焦碳酸二乙酯(DEPC)水处理的灭菌离心管、吸头(10L、200L、1000L)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:1.产品仅用于科研即开即用,用户只需要供给样品DNA模板,操作简单,定量精准快速。
2.引物经过优化,特异性强。
预期的PCR产物长度为560bp。
3.PCRmix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
4.供给阳性对比,便于分析试验结果。
检测方法:1.Ⅰ法:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的加添与PCR产物的加添wan全同步。
定量PCR扩增荧光曲线图PCR产物熔解曲线图2.TaqMan探针法:探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团汲取;PCR扩增时,Taq酶的53外切酶活性将探针酶切降解,产品仅用于科研使报告荧光基团和淬灭荧光基团分别,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成wan全同步。
荧光定量PCR试验步骤:①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其wan全溶解。
鼠疫抗体快速检测
鼠疫抗体快速检测鼠疫抗体检测试剂(胶体金法)Plague Diagnosis Kit(cOlloidal Gold)【药品名称】通用名:鼠疫抗体检测试剂(胶体金法)英文名:Plague Diagnosis Kit(cOlloidal Gold)汉语拼音:shuyi kangti kuaisu jiance shi ji(jiaoti jinfa)【使用目的】检测人或哺乳动物血清中的鼠疫抗体【试验原理】本试剂将鼠疫F1抗原包被在硝酸纤维膜上,用于捕捉标本中鼠疫菌抗体,用标记了SPA(金黄色球菌蛋白A)的免疫胶体金探针进行检测,可用于人或动物鼠疫菌感染诊断。
人或哺乳动物感染鼠疫菌1周后出现特异性血清抗体,可用本试剂检测。
疑是鼠疫菌感染动物,也可用本试剂检测。
【主要组成成分】1、鼠疫抗体快速检测卡2、使用说明书【样本要求】本品适用于人或哺乳动物血清【实验方法】1、取待检人或动物血清标本10微升,加生理盐水40微升(即按1:40稀释),作为检测液备用。
2、取出试剂一个,撕开外包装,吸取上述检测液,滴加3-4滴于试剂圆孔中,2分钟后开始观察结果,15分钟终止观察。
【对实验结果的解释】阳性结果:试剂窗口“C”和“T”(对照和检测)处出现2条红色沉淀线为阳性,即有鼠疫菌感染。
阴线结果:试剂窗口“C”(对照)处出现1条红色沉淀线为阴线,即无鼠疫菌感染。
试剂失效:试剂窗口“C”和“T”(对照和检测)均无红色沉淀线,即试剂失效。
【该试验方法的局限性】本试验仅用于鼠疫抗体的定性检测【注意事项】1、本试验适用于人和大多数哺乳动物血清标本。
2、如需检测待检标本的最高血清滴度,可将阳性血清继续对倍稀释,重复上述操作步骤,直至检测阴性。
3、试剂取出后应立即使用,以保证干燥,因为试剂在空气中暴露时间过长后会受潮失效。
4、试剂用过后放入包装袋中,集中消毒后在处理,以防污染环境。
胶体金法新冠检测试剂盒使用方法
胶体金法新冠检测试剂盒使用方法胶体金法是一种常用于新冠病毒检测的方法,也称为快速诊断试剂盒。
下面是关于胶体金法新冠检测试剂盒使用方法的详细说明。
1.准备工作:-将试剂盒从冰箱中取出,并放置于室温下30分钟,使其达到室温。
-检查试剂盒的包装是否完好,确认过期日期是否合适。
如有损坏或过期,禁止使用。
-打开试剂盒包装,取出所需试剂。
2.样本采集:-样本采集通常使用咽喉拭子或鼻液,在专业人员的指导下进行。
-拭子取自咽喉部或鼻腔,需尽量触及到炎症部位。
-将采集到的样本放入提供的稀释液中,确保充分混合。
3.样本处理:-取出试剂盒中的稀释液瓶,打开盖子,将稀释液倒入一个干净的容器中。
-取一部分样本,将其加入到稀释液中,并彻底混合。
-等待5分钟,让混合后的样本与稀释液充分反应。
4.贴膜处理:-把试剂盒中的膜杆取出,并将其贴在专门设计的试剂区域上,确保完全覆盖。
-注意避免触碰试剂区域,以免影响结果的准确性。
5.加样:-使用一次性移液器,将稀释液和样本混合液加入到试剂盒中,滴在贴膜的起始位置处。
-贴膜上的反应开始后,将试剂盒放置在水平位置,避免移动或振动。
6.结果读取:-等待10-15分钟,直到出现红色线条。
-结果有两种情况:一个红色测试线出现表示阴性,两个红色测试线出现表示阳性。
-如果没有任何红色线条出现,表示结果无效,需要重新进行检测。
7.结果判读:-阅读结果应该在规定的时间内进行,避免时间过长导致结果不准确。
-记录测试日期、时间以及结果,方便后续查询和分析。
8.结果初步判断:-阳性结果可能有不同程度的颜色深浅,颜色越深表示病毒载量越高。
-阴性结果表示在所使用的样本中未检测到新冠病毒。
9.结果确认:-由于胶体金法是一种初步筛查方法,为了确认结果的准确性,应当进行PCR检测等进一步的实验室测试。
总结:以上是胶体金法新冠检测试剂盒的使用方法的详细说明。
在进行检测前,请确保充分熟悉试剂盒的使用说明,并遵循相关操作规范。
检测鼠疫抗原金标层析试剂盒的研制及应用
检测鼠疫抗原金标层析试剂盒的研制及应用王丽;于守鸿;谢辉;王梅;杨永海;祁芝珍;王津【期刊名称】《地方病通报》【年(卷),期】2006(21)5【摘要】目的建立一种敏感、快速、简便的检测鼠疫抗原的诊断方法。
方法以胶体金标记纯化的鼠疫单克隆抗体(M cAb),在硝酸纤维素膜上检测线处包被M cAb,组装成检测鼠疫抗原层析试纸条(盒)(G ICA)。
在试剂盒的样品孔内滴加被检材料100μL,观察金标抗体释放后NC膜上检测线和质控线的反应情况,检测线和对照线同时出现红色条带判为阳性,仅对照线出现红色条带判为阴性,对照线未出现条带为无效试验。
结果G ICA可检出鼠疫活菌10万菌体/mL,检出F1抗原1ng/mL,鼠疫实验动物脏器悬液检测阳性,鼠疫患者(死者)及自毙动物在收到检材后半小时内出现阳性定性结果。
结论金标层析诊断试剂条达到检测鼠疫抗原敏感特异、使用简便、诊断快速的效果。
【总页数】3页(P14-16)【关键词】胶体金层析试纸盒;快速诊断;鼠疫抗原【作者】王丽;于守鸿;谢辉;王梅;杨永海;祁芝珍;王津【作者单位】青海省地方病预防控制所;军事医学科学院微生物流行病研究所【正文语种】中文【中图分类】R378.61;R446【相关文献】1.胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性分析 [J], 田棣;何静;刘祎;张万菊;徐磊;陈功祥;周志统;胡芸文2.重组鼠疫菌F1抗原制备胶体金免疫层析试纸条的研制与现场应用评价 [J], 杜春红;王鹏;张建中;高子厚;尹家祥;张正飞;李寿芹;谭红丽;宋志忠;3.重组鼠疫菌F1抗原制备胶体金免疫层析试纸条的研制与现场应用评价 [J], 杜春红;王鹏;张建中;高子厚;尹家祥;张正飞;李寿芹;谭红丽;宋志忠4.金标层析法检测猪瘟病毒抗原的临床应用 [J], 权中会;阴明亮;魏拣选;张国士;马保华5.快速检测O9抗原沙门菌免疫金标层析法的建立及其应用研究 [J], 柳健;焦新安;曹春梅;张敏;丁昌平;包广宇因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
胶体金标法快速检测鼠疫F1抗体的现场应用
胶体金标法快速检测鼠疫F1抗体的现场应用张洪英;洪梅;朱虹;张丽云;杨智明;胡晓玲;董兴齐【期刊名称】《中华地方病学杂志》【年(卷),期】2005(024)005【摘要】目的了解胶体金标快速检测试剂盒检测鼠疫FI抗体的现场应用.方法按鼠疫快速诊断盒(胶体金标法)的使用说明进行,并与间接血凝微量法(IHA)进行比较.结果检测了来自云南家鼠鼠疫流行区和非流行区血清共335份,检出腺鼠疫病人血清阳性32份,与IHA法结果一致.结论胶体金标鼠疫FI抗体快诊盒诊断鼠疫简便、快速、特异、敏感,便于现场鼠疫监测应用.【总页数】3页(P569-571)【作者】张洪英;洪梅;朱虹;张丽云;杨智明;胡晓玲;董兴齐【作者单位】671000,大理,云南省地方病防治所;671000,大理,云南省地方病防治所;中国人民解放军军事医学科学院微生物与流行病学研究所;671000,大理,云南省地方病防治所;671000,大理,云南省地方病防治所;671000,大理,云南省地方病防治所;671000,大理,云南省地方病防治所【正文语种】中文【中图分类】R516.8【相关文献】1.胶体金免疫层析法检测鼠疫F1抗体技术的应用及效果评价 [J], 刘合智;杨顺林;史献明;白雪薇;王海峰;张月芝;李玉贵;杜国义;白小英;胡乐乐2.鼠疫F1单克隆抗体的胶体金标记及斑点渗滤法检测F1抗原方法的建立 [J], 王鹏;郭英;石丽媛;董兴齐;于国林3.胶体金标法快速诊断鼠疫的现场应用 [J], 于守鸿;王丽;魏建斌;沈红斌;莫清云;白玛折阳;谢辉;王梅;杨汉青;赵小龙4.胶体金免疫层析法快速检测鼠疫耶尔森菌F1抗体 [J], 胡孔新;王静;周蕾;闫中强;李伟;姚李四;牛春莉;李瑾;马颖;陈维娜5.鼠疫F1抗体胶体金检测河北省部分人群血清F1抗体水平的流行病学调查 [J], 杜国义;史献明;董国润;刘合智;李玉贵;白万翔;乔峰;张月枝;杨顺林;郑金萍;杨建民;齐继东;高少坤;杨小燕;白晓英;胡乐乐;白雪薇;王晓红;吕岩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
鼠疫检测新技术、新方法
胶体金检测技术:
原理:将F1-McAb抗体以条带状固定在NC 膜上, 胶体金标记F1-McAb吸附在结合垫上,与待测 样品反应,通过目测的胶体金标记复合物得到 直观的显色结果。
检测类别:
结果判读:
阳性
阴性
无效
无效
预变性95℃
5min 1min 1min 1min
1个循环
鼠疫菌PCR检测 反应程序
变性95℃ 退火72℃ 延伸72℃
30个循环
变性72℃
5min
鼠疫PCR检测电泳结果判定
内参基因 Pla Fra
M
1
2
3
4
5
6
阳性结果:内参基因+Pla+Fra 阴性结果:内参基因
核酸杂交技术
待检测DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维 素或尼龙膜上,与其互补的单链DNA或RNA探针 用放射性或非放射性标记。在膜上杂交时,探 针通过氢键与其互补的靶序列结合,洗去未结 合的游离探针后,经放射自显影或显色反应检 测特异结合的探针。
材料的前处理
细胞破碎,核酸释放
核酸分离、纯化
沉淀或吸附核酸,去除杂质
核酸溶解缓冲液
全自动核酸、蛋白提取仪
聚合酶链式反应(PCR技术)
简史: 1971年,Khorana提出:DNA变性后,与合适引物进行 杂交,在DNA聚合酶作用下,延伸引物,并不断重复该过 程,即可克隆tRNA基因。 1985年,Mullis等人 发明聚合酶链反应(PCR), 随后,Mullis所属公司PE推 出第一台PCR自动化热循环仪。
ELISA
鼠疫标记检测技术
胶体金
ELISA技术
原理: 1.使抗原或抗体结合到到某种固相载体表面,并保持其免 疫活性. 2.在测定时,把受检标本和酶标抗原或抗体按不同的步骤 与固相载体表面抗原抗体反应. 3.用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其 它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检 物质量成一定比例. 4.加入底物,通过颜色变化来测定.
鼠疫F1抗原胶体金试纸条的研制及初步应用的开题报告
鼠疫F1抗原胶体金试纸条的研制及初步应用的开题报告一、研究背景和意义鼠疫是一种由鼠疫杆菌引起的传染病,其传播途径主要是老鼠、跳蚤等小动物媒介。
一旦发生鼠疫疫情,对人们的生命和资产都会造成严重的危害。
因此,对鼠疫的快速准确检测和诊断显得尤为重要。
目前,传统的鼠疫检测方法主要是采用文化和血清学检测方法,但这些方法存在着操作繁琐、耗时长、检测灵敏度低等问题。
因此,开发一种快速、准确、便捷的鼠疫检测方法显得尤为迫切和必要。
本研究基于胶体金技术,使用鼠疫F1抗原作为检测对象,开发了一种鼠疫F1抗原胶体金试纸条,该试纸条具有操作简单、检测时间短、灵敏度高等优点,可以为鼠疫的快速诊断和防控提供有力的支持。
二、研究内容和方法本研究的主要内容是开发一种鼠疫F1抗原胶体金试纸条,并对其进行初步应用。
具体方法如下:1.制备鼠疫F1抗原胶体金试纸条(1)制备金纳米颗粒按照标准操作流程制备金纳米颗粒,调整金纳米颗粒的浓度和粒径以达到最佳反应条件。
(2)免疫反应将鼠疫F1抗原与金纳米颗粒共同免疫,使鼠疫F1抗原与金纳米颗粒充分结合,形成鼠疫F1抗原胶体金纳米复合物。
(3)制备试纸条将具有吸液性的纸条(如滤纸)浸泡在胶体金溶液中,静置干燥后制备出鼠疫F1抗原胶体金试纸条。
2.对鼠疫F1抗原胶体金试纸条进行检测(1)样品处理收集鼠疫阳性和阴性样品,取出样品上清液。
(2)检测操作将样品上清液滴加到鼠疫F1抗原胶体金试纸条上,待10分钟后观察试纸条的反应情况,根据结果进行判断。
三、预期成果及意义1.制备出一种鼠疫F1抗原胶体金试纸条,具有操作简单、检测时间短、灵敏度高等优点。
2.对所制备的试纸条进行初步应用,验证其准确性和可行性。
3.为鼠疫的快速诊断和防控提供了一种新的检测方法,具有广阔的应用前景和社会意义。
四、进度安排1.前期工作(1周)(1)查阅相关文献,了解胶体金技术在鼠疫检测中的应用研究。
(2)收集鼠疫样品,进行初步处理和贮存。
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鼠疫快速检测试剂盒(胶体金法)
鼠疫概述:
鼠疫是由鼠疫杆菌(Yersinia pestis)引起一种自然疫源性的烈性传染病。
因其传播速度快、传染性强、病死率高、社会危害性大,被我国法定为甲类传染病。
鼠疫主要通过鼠蚤类传播,曾在历史上有过三次大暴发流行。
其临床症状主要表现为发热、严重毒血症症状、淋巴结肿大、肺炎、出血倾向等;随着现代社会交通的发展,对鼠疫快速诊断,尽早发现控制其传播的速度有着重要的意义!
产品简介:
鼠疫抗原快速检测试剂盒采用胶体金标记技术,应用膜层析双抗体夹心法原理检测组织样本中的鼠疫菌抗原。
用于疑似鼠疫病例的辅助诊断及现场筛查。
性能特点:
1、特异性:本品与假结核杆菌、布氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、土拉菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、变形杆菌的108/ml悬液及正常人血清、褐家鼠血清样品,无交叉反应。
2、最低检出量:用生理盐水配制鼠疫菌F1抗原,最低检出量为1ng/ml。
检测原理:
本试剂盒以鼠疫菌特异性抗体致敏硝酸纤维素膜和制备免疫胶体金探针,应用层析式双抗体夹心法原理,用于临床标本、污染物和环境中鼠疫菌抗原的检出,也可用于纯培养鼠疫菌的鉴定。
临床标本中,淋巴液的检出率高于血清和尿液。
试剂盒组成:
1、鼠疫抗原快速检测板
2、样本稀释液
3、说明书
4、干燥剂
包装规格:10人份/盒,单人份独立包装。
储存条件:4-25℃避光保存,不得冻存。
有效日期:2年
生产企业:广州市标健生物科技有限公司
样本要求:
制备样品检测液
1、纯培养细菌:挑取疑似鼠疫菌单个菌落,于小试管中制成0.3ml生理盐水菌悬液作为样品检测液。
2、临床标本:取疑似鼠疫患者或病畜腹股沟淋巴结针刺吸出物、脑脊液、血、痰和尿液标本,或死亡动物肝脾研磨标本,加少量生理盐水(约0.3ml)充分振荡混均,自然沉降后取上清作为样品检测液。
3、环境中污染物:取疑似鼠疫菌污染的土壤、灰尘,或物体表面、动物皮毛的擦拭子,浸
于1ml生理盐水中,自然沉降后或挤干擦拭子,取上清作为样品检测液,或取疑似污染水0.3ml作为样品检测液。
检测方法:
从试剂盒中取一份检测板,撕开外包装,吸取样品检测液,滴加3-4滴(约150μl)于试剂园孔中,5分钟后开始观察结果,15分钟终止观察。
结果解释:
1、阳性结果:试剂窗口“C”和“T”(对照和检测)处出现2条红色沉淀线为阳性,即有鼠疫菌检出。
2、阴性结果:试剂窗口“C”(对照)处出现1条红色沉淀线为阴性,即无鼠疫菌检出。
3、失效结果:试剂窗口“C”和“T”(对照和检测)均无红色沉淀线,即试纸卡失效。
注意事项:
1、本试剂盒仅供体外检测用。
检测过程中所涉及的样本及物品均应按照有高度传染性的样本处理,彻底焚毁。
2、检测板务必密封保存。