胶体金试纸条检测技术
胶体金试纸条的原理
胶体金试纸条的原理胶体金试纸条是一种常用于检测特定物质的快速、简便的方法。
其原理基于胶体金颗粒在特定条件下的聚集现象。
胶体金是一种纳米级的金颗粒，具有良好的生物相容性和生物亲和性，被广泛应用于生物医学领域。
在胶体金试纸条上，通常会固定有特定的生物分子，例如抗体或核酸探针。
当待检样品中含有目标物质时，这些生物分子会与目标物质发生特异性结合。
接着，胶体金颗粒会与这些结合的生物分子形成复合物，导致胶体金颗粒的聚集。
胶体金颗粒聚集后，其颜色会发生明显的变化，从红色逐渐变为紫色或蓝色。
这是因为胶体金颗粒在单个状态下呈现红色，而在聚集状态下呈现其他颜色。
这种颜色变化可以肉眼可见，无需任何专门设备，因此胶体金试纸条成为了一种简便、快速的检测方法。
除了颜色变化外，胶体金试纸条还可以通过检测聚集后胶体金颗粒的光学性质来定量分析待检样品中目标物质的浓度。
通过测量胶体金颗粒聚集后的吸光度或散射光强度，可以得到目标物质的浓度信息。
这使得胶体金试纸条不仅可以进行定性检测，还可以进行定量分析。
胶体金试纸条的原理简单易懂，操作方便快捷，因此被广泛应用于临床诊断、食品安全、环境监测等领域。
例如，利用胶体金试纸条可以检测病毒、细菌、荷尔蒙、重金属离子等多种物质，具有很大的应用潜力。
胶体金试纸条的原理基于胶体金颗粒的聚集现象，通过检测颗粒的颜色变化或光学性质变化来实现目标物质的检测和分析。
其简便、快速的特点使其成为一种广泛应用的检测方法，为医学、食品、环保等领域的检测工作提供了重要的帮助。
希望随着技术的不断发展，胶体金试纸条能够在更多领域发挥作用，为人类健康和生活质量提供更多的保障。
最新实验四 胶体金试纸条检测技术
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合（免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG）， 而 显 出 红 色质控线条（R）。
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 ： 操 作 简 单 ， 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
测定
测定时将试纸条下端浸入液体 标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测定
若 标 本 中 有 待 测 特 异 抗 原 ， 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的 毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用 胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗 体。
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的 作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于
静电作用成为一种稳定的胶体状态。
➢胶体金的质量判定标准
胶体金试纸条使用方法
胶体金试纸条使用方法引言：胶体金试纸条是一种常用的检测工具，广泛应用于医疗、环境监测、食品安全等领域。
本文将详细介绍胶体金试纸条的使用方法，包括前期准备、检测步骤和结果判读等内容，旨在帮助读者正确使用胶体金试纸条，获得准确的检测结果。
一、前期准备1. 准备工具和材料：胶体金试纸条、样品、试管、吸管、计时器、去离子水等。
2. 检查胶体金试纸条包装是否完好，过期的试纸条不得使用。
3. 根据需要，选择合适的样品采集容器，并确保容器干净无污染。
4. 检查样品是否合适，根据胶体金试纸条的使用说明，选择适宜的样品。
二、检测步骤1. 取出一根胶体金试纸条并将其放置在水平的台面上。
2. 使用吸管或滴管，将待测样品滴在试纸条上。
注意滴加样品的数量要适量，不要过多或过少。
3. 等待一定的时间，一般为几分钟至十几分钟，根据试纸条上的指示时间为准。
4. 在等待的过程中，可进行其他样品的准备工作或者做其他操作。
5. 检测时间到后，观察试纸条的变化，注意观察试纸条上的颜色变化或其他指示标记的变化。
6. 根据试纸条上的指示，将试纸条与参考颜色对照，确定检测结果。
三、结果判读1. 根据试纸条上的颜色变化和参考颜色对照，确定检测结果。
2. 一般来说，颜色越深表示待测物浓度越高，颜色越浅表示浓度越低。
但具体判读标准需根据试纸条的使用说明来确定。
3. 注意观察试纸条上的其他指示标记，如加号、减号或数字等，根据指示标记的变化来判断检测结果。
4. 将检测结果记录下来，并根据需要进行数据分析或进一步的处理。
四、注意事项1. 使用胶体金试纸条前，务必阅读并理解使用说明，按照说明操作。
2. 检测过程中要注意操作的规范性和准确性，避免操作失误导致结果偏差。
3. 根据试纸条的特点，注意样品的保存和处理方法，避免样品的污染或变质。
4. 不同类型的试纸条适用于不同的样品，选择合适的试纸条进行检测。
5. 注意试纸条的保质期，过期的试纸条不得使用。
6. 试纸条使用后，应妥善保存，避免潮湿或受到其他污染。
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条是一种常用的快速检测方法，它的原理是基于胶体金颗粒的表面等离子体共振（SPR）现象。
胶体金试纸条通常由两部分组成：胶体金颗粒和检测区域。
胶体金颗粒具有特殊的物理性质，当受到特定物质的作用时，其表面等离子体共振会发生变化。
这种变化会导致颗粒的形状、颜色或聚集状态发生改变。
在使用胶体金试纸条进行检测时，样品溶液会被加到试纸条的检测区域上。
如果样品中含有需要检测的物质，这些物质会与胶体金颗粒产生特定的相互作用。
这种作用可以是物质与金颗粒表面的化学反应，也可以是物质与金颗粒之间的物理吸附。
当作用发生时，胶体金颗粒的表面等离子体共振发生改变，导致颗粒的形状、颜色或聚集状态发生变化。
这种变化可以通过肉眼观察或色谱仪等设备进行检测。
根据试纸条上颗粒的变化程度，可以判断样品中目标物质的浓度或存在与否。
需要注意的是，不同的胶体金试纸条适用于不同的检测目标物质。
因此，在选择试纸条时，需要根据具体的检测要求选择合适的试纸条。
此外，在进行胶体金试纸条检测时，正确的操作步骤和仪器校准也是保证检测准确性的重要因素。
胶体金检测技术-
阳性结果 样品中可能含有等于或源自于3ng/ml的盐酸克伦特罗。培训资料
四、ß -激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍
以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例
一．适用范围： 主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊 尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要 5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb)。也就是说当 尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml时，检测 卡才能检测到。
试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无 法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性， 从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。 因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。 3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
尿样一开始在NC膜上泳动时，是利用毛细管作用，如果 风吹太阳晒，NC膜上的尿样蒸发后难以到达吸水纸的位置，会 产生假阳性结果，因此，检测时要避免阳光直射和电风扇、空 调的风直吹。
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二 、包装 每个包装袋中包含盐酸克伦特罗免疫胶体金快速检测卡 ，滴管1个、干燥剂1片。
三、现场筛查步骤
1. 在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡 和待检样本溶液恢复至室温。
2. 从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内就地 使用。
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3．将检测卡平放，用移液器或滴管吸取尿液样品溶液，垂 直滴加3滴（约80ul）于加样孔中，加样后开始计时。
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图1 金颗粒示意 图
在溶液中金颗粒呈 圆形, 表面带有负电 荷 , 由于静电的排斥 力 , 使其在水中保稳 定状态，形成稳定 的胶体状态。
培训资料 3. 胶体金试纸条的构造
胶体金法试纸最低检测限测试方法
胶体金法试纸最低检测限测试方法近年来，胶体金法试纸在医学、生物学和环境领域得到了广泛的应用，其快速、灵敏的特点使其成为一种重要的检测手段。
然而，胶体金法试纸的最低检测限测试方法对于其准确性和可靠性至关重要。
本文将从深度和广度的角度探讨胶体金法试纸最低检测限测试方法，以便读者更全面地了解这一主题。
1. 胶体金法试纸的基本原理让我们简要回顾一下胶体金法试纸的基本原理。
胶体金法试纸是利用胶体金颗粒与特定生物分子或化学物质发生反应，在试纸上产生可见信号的一种快速检测方法。
其原理是基于胶体金颗粒在特定条件下的聚集现象，从而产生颜色变化或光学信号，用以表示被检测物质的存在或浓度。
2. 胶体金法试纸最低检测限的重要性胶体金法试纸的最低检测限是指能够准确检测出被测物质的最低浓度。
低检测限意味着试纸在较低浓度下仍能产生可靠的检测结果，这对于医学诊断、环境监测等领域具有重要意义。
确立准确、可靠的最低检测限测试方法对于胶体金法试纸的应用至关重要。
3. 最低检测限测试方法的步骤在进行胶体金法试纸最低检测限测试时，通常包括以下步骤：1) 准备标准溶液：首先需要准备一系列不同浓度的标准溶液，以确定被测物质的最低检测限。
2) 进行试验：将标准溶液分别添加到胶体金法试纸上，观察并记录产生的信号。
3) 分析数据：根据试验结果，利用统计学方法或曲线拟合等手段确定最低检测限。
4. 方法的改进和优化为了获得更准确、可靠的最低检测限，研究者们还不断改进和优化测试方法。
可以采用增强信号的方法，如表面增强拉曼光谱技术，来提高试纸的灵敏度；或者利用微流控技术，实现自动化的样品处理和检测，从而减少测试误差。
5. 个人观点和理解在我看来，胶体金法试纸最低检测限测试方法的不断完善和优化将对其在医学诊断、环境监测等领域的应用产生重大影响。
通过确立准确、可靠的最低检测限测试方法，胶体金法试纸将能够更准确地检测出微量的生物分子或化学物质，为相关领域的研究和应用带来新的机遇和突破。
免疫层析快速诊断技术简介胶体金
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 灵敏度问题 业人员，携带方便，可随时随地进行。
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：在临床检测中，样品可能有尿、血液、 血清、唾液或其他体液。在非临床检测中，样本可能是由 土壤、粉尘、植物或者食品制备的微量溶液。
这种检测可以以独立的试纸条，也可以 以装在塑料盒中的形式进行。
总的来说，做此项检测至少需要50ul的 液体标本，可在5－30分钟完成。
胶体金纸条的不同种类
层析法技术优势:简单\现场\快速
试纸条组成结构
控制线（C线）
与常规诊断方法相比：
优点 快速：全部检测过程仅需 5-30分钟。
缺点 定量问题
AJQ3000: 0.5-5mm 最小喷量
BJQ3000:10nl/drop
AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
胶体金结果判读方法：
1.色卡法
将反应好的试纸条T线颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一 个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。 2.图形扫描法
胶体金层析法
胶体金层析法
胶体金层析法（Colloidal Gold Lateral Flow Assay）是一种常见的免疫层析检测技术，也被称为“快速测试纸条”或“快速诊断试纸条”。
这种技术被广泛用于医学诊断、食品安全检测、环境监测等领域。
下面是胶体金层析法的基本原理和步骤：
原理：
1.抗原-抗体反应：根据抗原和抗体之间的特异性结合原理，将被检测的分
子（如蛋白质、病毒抗原等）与特异性抗体结合。
2.胶体金标记：抗体或抗原被标记上胶体金颗粒，使其呈现颜色。
3.层析效应：在试纸条上形成的吸附带将试剂中的标记复合物隔离出来，
通过毛细管作用，使其沿着试纸条上的纵向扩散。
步骤：
1.取得待检样本（如血液、尿液、食品提取物等）。
2.将待检样本加入试剂盒中，与试剂中的抗体或抗原相结合。
3.混合物通过毛细管效应在试纸条上扩散。
4.当待检样本中存在目标分子时，会与试纸条上的抗体或抗原结合，形成可
见的标记复合物。
5.标记复合物在试纸条上的特定区域显示出色带，从而进行目标物的定性或
半定量检测。
这种技术具有简单、快速、便携、成本低等优点，在诊断和快速检测中应用广泛。
例如，它被用于临床诊断、药物滥用检测、感染病原体检测（如流感、艾滋病毒等）以及食品安全检测等领域。
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（ HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
基础金核
双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位
外层离子层
H+分散在胶体间的溶液中
zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥，以维持 胶体金的稳定状态。
胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功 能，而不被坏其生物活性，可以与蛋白质 等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白）等非 共价结合，形成胶体金标记物。
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行，
至参照区与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG），而显出红色质 控线条（R）。
测
定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就会出结
果，而其它方法如 ELISA 需要 1-2h ， PCR 需要时间 更长。
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果
阴性对照
结果易于判定：阴、阳性呈色很明源自，肉眼很容易判断。特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标记，这
决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、
犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙
虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
technique）是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛 细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一 端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现 颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。有三种反应 模式：夹心法，间接法，竞争抑制法。
胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激 素（ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。