土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1导学案.doc
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案(完美修改)
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1、筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时或其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）尿素可以为农作物提供肥，但是只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
（4）以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：①；②。
（5）PCR（）是一种在体外将。
此项技术的自动化，但是在合成的过程中需要在93℃的条件下，所以要求使用耐高温的2、统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确，一般设置个平板，选择菌落数在的平板进行计数，并取。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
3、设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
二、实验设计实验设计包括，所需、、用具和药品，具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的中。
2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基3．样品的和微生物的与观察4．细菌的计数当菌落数目稳定时，选取菌落数在的平板进行计数。
在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
三、结果分析与评价1、对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助的方法。
2、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的将尿素分解成了。
氨会使培养基的碱性，PH 。
因此，我们可以通过检测培养基变化来判断该化学反应是否发生。
高中生物 2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1
高中生物 2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案新人教版选修1第13课时土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标：1、简述尿素在生产实践中的作用及分解尿素的细菌的作用。
2、研究培养基对微生物的选择作用。
3、进行土壤中分解尿素细菌的分离与计数。
4、简述活菌计数技术的应用。
预学案一、理论基础1、筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于①目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时②抑制或③阻止其他微生物生长。
(2)选择培养基:在微生物学中,将允许④特定种类的微生物生长,同时⑤抑制或⑥阻止其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
2、统计菌落数目:常用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。
当样品的⑦稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个⑧活菌。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确,一般选择菌落数在⑨30~300 的平板进行计数。
此外,测定微生物数量的常用方法还有⑩显微镜直接计数。
3、设置对照:设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了,需有空白对照。
二、实验设计土壤中某样品细菌的分离与计数实验的操作步骤1、土壤取样:从肥沃、湿润的土壤中取样。
先铲去表层土3 cm左右,再取样。
2、制备培养基:准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基,将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
3、微生物的培养与观察:将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL),充分摇匀,吸取上清液 1 mL ,转移至盛有9 mL 的生理盐水的无菌大试管中,依次等比稀释至107稀释度,并按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0、1 mL 进行平板涂布操作。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案一、学习目标1、了解从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
2、学会相关实验操作技能，如制备培养基、无菌操作、涂布平板等。
3、掌握细菌计数的方法和原理。
4、培养科学探究的思维和能力，提高实验设计和数据分析的能力。
二、知识储备1、尿素尿素是一种有机化合物，化学式为 CO(NH₂)₂。
在农业生产中，尿素常被用作氮肥。
2、分解尿素的细菌有些细菌能够产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳。
这些细菌在生态系统的氮循环中起着重要的作用。
3、选择培养基选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长。
对于分离分解尿素的细菌，可以在培养基中加入尿素作为唯一氮源，只有能够分解尿素的细菌才能在这种培养基上生长。
三、实验材料和用具1、土壤样品从富含腐殖质的土壤中采集。
2、试剂尿素、葡萄糖、琼脂、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、酚红指示剂等。
3、仪器高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、涂布器、移液器、显微镜等。
四、实验步骤1、培养基的制备（1）配制基础培养基：称取一定量的 KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、葡萄糖和琼脂，加入蒸馏水，加热溶解后，调节 pH 至 70 72 。
（2）制备选择培养基：在基础培养基中加入尿素，使其成为唯一氮源，最终尿素浓度为 20 g/L 。
加入酚红指示剂，使其在 pH 升高时呈现红色。
（3）将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌。
2、土壤样品的采集与处理（1）在花园或农田中选择土壤肥沃、植被茂盛的地点，用小铲子去除表层土壤，采集 5 10 cm 深处的土壤样品。
（2）将采集的土壤样品放入无菌袋中，带回实验室。
（3）称取 10 g 土壤样品，加入到装有 90 mL 无菌水的锥形瓶中，振荡摇匀，制成 10⁻¹浓度的土壤悬液。
然后依次进行 10 倍稀释，制成 10⁻²、10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵、10⁻⁶等不同浓度的土壤稀释液。
高中生物 专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案新人教版选修1
高中生物专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案新人教版选修1【自主学习】一、筛选菌株（1）原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
（2）途径：用培养基筛选。
在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作培养基。
用其培养的目的是从众多微生物中所需的微生物。
2、统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目为了保证结果准确，一般设置个平板，选择菌落数在的平板进行计数。
并取。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目，因此，统计结果一般用，而不是用来表示。
3、设置对照对照试验是指除了以外，其他条件都的实验，其作用是实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起的结果。
设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高的可信度。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养该种微生物的培养基作为空白对照。
二、实验设计1、土壤取样（1）取样原因：土壤有“ ”之称。
同其他生物环境相比，土壤的微生物，数量，种类。
（2）土壤要求：富含，pH接近且潮湿。
（3）取样部位：具地表约的土壤层。
2、样品稀释（1）稀释原因：样品的直接影响平板上生长的。
（2）稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在之间，便于计算。
（3）稀释倍数：①测定土壤中细菌的数量，一般选用倍的稀释液进行平板培养；②测定放线菌的数量，一般选用倍稀释；③测定真菌的数量，一般选用倍稀释。
3、微生物的培养与观察（1）培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。
（2）观察：每隔统计一次数目，最后选取菌落数目时的记录作为结果。
4、细菌的计数当菌落数目稳定时，选同一下的3个计数，然后求出，并根据平板所对应的计算出样品中细菌的数目。
三、操作提示1、无菌操作（1）取土样的用具在使用前都需要。
（2）应在旁称取土样，并在火焰附近将土样倒入锥形瓶中，塞好。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数导学案
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【学习目标】1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。
2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。
【学习重点】对土样的选取和选择培养基的配制。
【学习难点】对分解尿素的细菌的计数。
【预习案】1、选择培养基的概念.2、统计菌落的方法有哪些?3、土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作流程是:4、设置对照实验的目的是什么？【探究案】1、筛选菌株的原理及方法是？2、怎样进行土壤取样？怎样分离样品中的分解尿素的细菌？3、如何对样品中的微生物进行计数？试简述相关的方法以及各自的优缺点。
如何计算每克样品中的菌落数？4、如何判断培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？怎样对分离出的菌种作进一步的鉴定？5、在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学从对应的106倍培养基中筛选出的大约230个菌落，但是其他在同样的稀释度下只选择出大约100个菌落.试分析原因并探究方案，根据结果得出结论。
【当堂检测】1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（ )A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；科目：生物编号：第1 页共2页2、下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方:请根据以上配方，回答下列问题：Array（1）该培养基含有微生物所需要的____类营养物质．其中最主要的碳源是______________，氮源是________________．(2）该培养基按物理性质划分是_____培养基；按培养基的作用划分 _______—培养基，该培养基具有选择作用的原因是______________．（3）在该培养基中,可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是_____________________________________．（4）若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素,可在培养基中_____________指示剂,尿素被分解后指示剂变 __________色。
土壤中分解尿素的细菌的分离计数导学案
班级，小组名：，姓名
图2－2－1
在直接计数中也需选择恰当的稀释度，也要求计数尽量准确，接近真实值，其方法：一是计数
中格中菌体数求平均值；二是计数每个中格内菌体数目时，遵循“计上不计下，计左不计右”的原则，防止边界个体的重复计数。
(3)计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400
两种计数方法相比较，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活细菌数目低。
原因是：一方面由于两个或
多个细菌连在一起时，稀释涂布培养后只能观察到一个菌落；另一方面统计结果只是活细菌产生的菌落。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数导学案
． 尿素 1.0g
_____________指示剂，尿素被分解后指示剂变 __________色。
琼脂
15.0g
自来水 科目：生物 编号： 第1 页 共2页
定容至 1000mL
6
导
【学习难点】 对分解尿素的细菌的计数。
【预习案】
学
1、选择培养基的概念。 2、统计菌落的方法有哪些？ 3、土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作流程是：
【当堂检测】
1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水
案 装
B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水 4、设置对照实验的目的是什么？ C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水
【探究案】
1、筛选菌株的原理及方法是？
D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 2、下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：
阜南一中博雅 1+1 高效课堂导学案
编制人：刘维康 审核人：
领导签字：
编号:
时间：
年
月
日
小组：_____
姓名：______ 组内评价：______
教师评价：_______
课题 2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
4、 如何判断培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？怎样对分离出的菌种作进一 步的鉴定？
【学习目标】 1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。 2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 【学习重点】 对土样的选取和选择培养基的配制。 5、在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A 同学从对应的 10 倍培养基中筛选出 的大约 230 个菌落，但是其他在同样的稀释度下只选择出大约 100 个菌落。试分析原因并探究方案， 根据结果得出结论。
高中生物土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案
土壤中分解尿素细菌的分离与计数一、学习目标：1.研究培养基对微生物的选择作用。
2.进行微生物数量的测定。
二、自主学习一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于________________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。
(2)选择培养基在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
(3)分离分解尿素的细菌的选择培养基①在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是____________，提供氮源的是________，琼脂的作用是凝固剂。
②该培养基对微生物具有选择作用。
其选择机制是________________________________才能在该培养基上生长。
③土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是______________________________________________________。
Taq细菌能忍受93℃左右的高温，是在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的，这说明，在寻找目的菌株时，要根据____________________________________________。
2．统计菌落数目的方法(1)稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的____________，通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作第一，设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择________稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养并计算菌落数。
为使结果接近真实值，可将同一稀释度涂布到三个或三个以上的平板上，培养并计算出__________。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案一、学习目标1、了解从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
2、掌握无菌操作技术和微生物培养的基本操作。
3、学会利用选择培养基分离微生物，并能对其进行计数。
二、学习重难点1、重点（1）从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
（2）微生物培养的基本操作和无菌技术。
2、难点（1）选择培养基的配制和作用原理。
（2）微生物的计数方法和误差分析。
三、知识回顾1、培养基的类型和作用按物理性质可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。
按用途可分为选择培养基和鉴别培养基。
2、无菌技术包括消毒和灭菌。
消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3、微生物的接种方法平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
四、新课导入在农业生产中，尿素是一种常用的氮肥。
但尿素不能直接被农作物吸收利用，需要土壤中的细菌将其分解为氨，才能被植物吸收。
那么，如何从土壤中分离出能够分解尿素的细菌呢？这就是我们今天要学习的内容。
五、实验原理1、土壤中含有大量的微生物，其中就包括能够分解尿素的细菌。
这些细菌能够产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳。
2、在以尿素为唯一氮源的培养基上，只有能够产生脲酶的细菌才能生长繁殖，其他微生物则不能生长。
六、实验材料和用具1、实验材料土壤样品：从富含腐殖质的土壤中采集。
培养基：尿素固体培养基（尿素 10g、葡萄糖 05g、NaCl 05g、KH2PO4 02g、琼脂 20g、蒸馏水 100mL）。
2、实验用具无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、涂布器、移液管、显微镜等。
七、实验步骤1、土壤样品的采集在富含腐殖质的土壤中，用无菌小铲铲取表层土 5~10g，装入无菌信封中。
土壤中分解尿素的细菌的分离导学案-学生版
2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、预习学案1．基础知识1．1 尿素是一种重要的肥，农作物（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为，这是因为细菌能合成。
1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供的条件（包括等），同时其他微生物生长。
1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是法。
除此之外，也是测定微生物数量的常用方法。
1．4 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于1个活菌。
通过统计，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
1．5统计的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是菌落。
因此，统计结果一般用来表示。
1．6设置对照的主要目的是排除因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
1．7对照实验是指除了条件外，其他条件都的实验。
满足该条件的称为，未满足该条件的称为组。
2．实验设计2．1 实验设计的内容包括、、和等。
2．2 根据图示2－7填写以下实验流程：Array2．3 土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性的潮湿土壤中，约70％～90％为。
2．4 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是。
2．5 培养不同微生物往往需要不同培养温度和时间。
细菌一般在培养1～2d，放线菌一般在培养5～7d，霉菌一般在的温度下培养3～4d。
2．6菌落的特征包括等方面。
2．7实验过程1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要。
2）应在旁称取土壤10 g。
将称好的土样倒入盛有90mL 的锥形瓶中，塞好棉塞。
3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在旁进行。
4）实验时要对培养皿作好标记。
注明等。
5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先。
3．结果分析与评价3．1对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助的方法。
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太原二十中问题导学案
使用时间：年月巳
学习过
程
学习过程
【合作探究】（小组讨论、交流、展示）
探究一、筛选菌株的培养基
KH2PO4 1.4g
NaHPOt 2.1g
MgSO.
H2O0. 2g
葡萄糖
10.
0g
尿素 1.0g
琼脂15.
0g
将上述物质溶解后，用蒸馅水定容到lOOOmLo
思考：
1、该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？碳源：氮源：
2、此配方能否筛选出产生腿酶的细菌？为什么？
—。
只有产生服酶的细菌才能利用—作为氮源而生存。
探究二、统计菌落数目：
1、活体计数法一一稀释涂布平板法
（1）操作方法：稀释涂布平板一统计菌落数。
（2）原理：1个菌落一1个活菌。
（3）统计原则
%1、选_坦二3QQ. 土菌落画珑统it.
%1、每仝稀.释度取3企垩板取其主均值
思考：
1、1个菌落1个活菌。
2、统计的菌落数实际活的细菌数。
3、用稀释涂布平板法一定要重复实验，一般至少要涂布3个平板。
4、重复实验结果中小于30菌落的不用
1.尝试“统计菌落数目”。
学
习
过
学习过
程
课后反思基础训练册：将基础知识整理到作业本上；完成该节训练题。
为了使所有学生都能有一个思考的过程，我改进了以往所用的小组合作学习，采用先让学生独立思考，再进行同桌或小组交流的形式，并在学生独立思考时，留给足够的时间。
课堂的时间是有限的，也是宝贵的，但是我们不能因为时间的宝贵而剥夺学生该有的时间
学习过程
板书设计。