鱼腥草中黄酮类化合物提取分离方法的研究进展

鱼腥草中黄酮类化合物提取分离方法的研究进展赵国文1，张丽萍1，龚靖2，白利涛1，冯朋1（1.四川理工学院材料与化学工程学院，四川自贡643000；2.成都龙泉高科天然药业有限公司，四川成都610100）摘要：黄酮类化合物是具有广泛应用前景的天然药物。

鱼腥草资源丰富，可作为黄酮类化合物的主要来源之一。

阐述了鱼腥草黄酮类化合物的提取、分离方法，并对各提取分离方法的利弊进行了分析；提出了鱼腥草黄酮类化合物提取分离技术的发展前景。

关键词：鱼腥草；黄酮类化合物；提取；分离中图分类号：R931.71文献标识码：A文章编号：1004-874X（2011）06-0158-02Research advancement of extraction and separationof flavonoids from Houttuynia cordata ThundZHAO Guo-wen1，ZHANG Li-ping1，GONG Jing2，BAI Li-tao1，FENG Pong1(1.Department of Materials and Chemical Engineering，Sichuan Institute of Science and Technology，Zigong643000，China；2.Chengdu Longquan High-tech Natural Pharmaceutical Co.LTD.，Chengdu610100，China)Abstract:Flavonoids are natural medicines which have broad applied prospects.Houttuynia cordata Thund is rich in resources and can be used as one of major sources of flavonoids.Extraction and separation of flavonoids from Houttuynia cordata Thund were reviewed in this paper.The advantage and disadvantage of each technology were analysed to provide for extraction and separation of flavonoids from Houttuynia cordata Thund as references.The development prospect of the extraction and separation of flavonoids from Houttuynia cordata Thund was put forward.Key words:Houttuynia cordata Thund；flavonoid；extraction；separation鱼腥草是一种常见的药食两用植物，现已被国家卫生部正式确定为“既是食品，又是药品”的极具开发潜力的资源之一[1]。

鱼腥草含有大量的黄酮类化合物，主要是槲皮素和以槲皮素为甙元的黄酮类化合物，如芦丁、槲皮甙、金丝桃甙等。

现代研究证明黄酮类化合物具有抗病毒、抗氧化和抗衰老等作用，被广泛应用于食品、医药及保健等行业。

黄酮类化合物在人体内不能直接合成,只能从植物中获得，所以近年来科研工作者都积极关注从植物中提取纯度高、活性强的黄酮类化合物成分。

鱼腥草广泛分布于我国中部、东南及西南各省区，尤以四川、湖南、湖北、江苏居多[2]，而且易于大量栽培且栽培技术成熟，资源极其丰富，可作为黄酮类化合物来源的主要资源之一。

因此，利用鱼腥草提取分离制备黄酮类化合物具有很好的经济效益与社会效益。

为了能合理地利用鱼腥草资源，更好地提取分离鱼腥草中黄酮类化合物，现针对鱼腥草黄酮类化合物的提取分离方法进行综述。

1鱼腥草黄酮类化合物的提取方法1.1水提法水提法适于鱼腥草黄酮甙类物质提取。

该法成本低、对环境及人类无毒害，适合工业化大生产，但提取杂质（如无机盐、蛋白质和糖类等）多，提取效率低，现在很少单一使用该法。

戴伟锋等[3]研究了鱼腥草中总黄酮的热水提取方法，并通过正交试验确定了最佳提取工艺条件为：固液比1∶40，提取时间45min，提取温度90℃，提取次数3次。

邱江匀等[4]采用水煎煮法提取鱼腥草中的黄酮，需煎煮3次，每次提取需30min。

1.2有机溶剂提取法有机溶剂提取法是根据黄酮类化合物与杂质极性不同来选择适合的有机溶剂，其选择性好、渗透性强、浸出率比热水法高，但提取产物的有效成分质量分数不高，大量有机溶剂的使用对环境有污染[5]。

一般游离甙元，难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂，黄酮甙类易溶于水、甲醇、乙醇等强极性的溶剂，故高浓度的醇（如90%左右）宜于提取甙元，60%左右浓度的醇水溶液适宜提取甙类[6]。

叶春等[7]采用乙醇提取法从鱼腥草叶中提取总黄酮，其优化的工艺条件为：提取温度80℃，提取时间3 h，乙醇浓度50%，固料比1∶30，其黄酮提取率可达92%以上；与热水浸提法的比较试验表明，用乙醇提取鱼腥草叶中的黄酮类化合物明显高于水提法。

游见明等[8]用乙醇溶液浸提鱼腥草粉末，经过单因素和正交试验得到最佳工艺为：乙醇浓度80%，固液比1∶20，提取时间65min，提取温度70℃，可得黄酮含量为47%。

1.3超声波提取法超声波提取是利用超声波在液体中产生的空化作用[9]，破坏植物细胞和细胞膜结构，从而增加细胞内容物通过细胞膜的穿透能力，有助于黄酮类化合物的释放与收稿日期：2010-11-28作者简介：赵国文（1972-），男，硕士，工程师，E-mail：zhhbjzgw@ 通讯作者：张丽萍（1964-），女，硕士，教授，E-mail：zlp666111@ 广东农业科学2011年第6期158溶出。

该法具有操作方便、无需加热、保护热不稳定成分、省时、提取率高等优点，但是目前尚处于小规模试验研究阶段，要用于大规模生产，还有待于进一步解决有关工程设备的放大问题。

顾瑶华[10]对鱼腥草中槲皮素分别用3种方法提取（用甲醇回流提取2h；用甲醇浸泡，然后超声提取30min；用甲醇索氏提取至无色），试验表明超声提取效率较高。

吴景林[11]采用超声波提取法对鱼腥草中槲皮素进行提取，超声波提取50min，与回流法需要4h相比，更省时。

1.4微波辅助萃取法微波辅助萃取法是让微波直接作用于分子，使分子热运动加剧，相互碰撞、挤压，从而引起温度升高，产生热效应使其穿透到介质内部，快速破坏细胞壁，从而使被提取物质从体系中迅速地分离提取出来[12]。

此法操作简便省时，具有高效性和强选择性，溶剂用量少、产率高，产物易于纯化[13]，浸出过程中材料细粉不凝聚、不糊化，克服了热水法易凝聚、糊化的不足；但是不利于热不稳定性物质的提取，提取时间过长，温度过高，提取率反而降低。

陈斌等[14]利用微波辅助萃取和超声提取鱼腥草中槲皮素进行研究，微波辅助萃取的时间从30min缩短为4min，槲皮素的提取效率比超声提取高。

1.5酶解法近些年来，随着酶技术的快速发展，科学工作者充分利用了酶的特性开发了新的提取方法。

酶解法是利用酶的专一性和高效性，只破坏植物细胞壁结构，不破坏有效成分，有利于被细胞壁包围的黄酮类化合物的提取，此法采用生物降解技术，其提取条件温和、操作简单，克服了活性成分在高温下易分解破坏的缺点，是一种安全、有效、对环境无污染的提取方法[15]，一般要与其他提取方法联用，不足之处在于提取时间较长。

王白强[16]采用0.6％纤维素酶和0.2％果胶酶对鱼腥草进行酶解处理，在40℃、pH值为6.0条件下，酶解120min，鱼腥草总黄酮的得率可达1.6％，而未用酶解的传统工艺，其得率仅0.8％。

1.6超临界流体萃取法随着国际上超临界流体提取技术迅速发展，用该技术提取植物中的活性成分愈加广泛。

超临界流体萃取法是利用超临界流体处于临界温度和临界压力下，兼有气体和液体的双重特点，对物质具有良好的溶解能力，从而作为溶剂进行萃取分离。

超临界流体萃取的方式可分为动态和静态两种，动态法适合于萃取在超临界流体萃取剂中溶解度很大的物质，静态法适合于萃取与样品基体较难分离或在萃取剂流体内溶解度不大的物质[17]。

最常用的超临界流体是CO2，因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、易回收、无环境污染、价格便宜等优点[18]。

该法提取率高，无溶剂残留污染，对热敏性物质不易破坏而保持天然特征，但生产成本高，对极性较强的物质溶解能力不足，目前还不适于大规模生产[19]。

2鱼腥草黄酮类化合物的分离方法2.1聚酰胺吸附法聚酰胺的吸附作用是通过其酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔合而产生的。

该法分离效果好，适用于制备性分离，但是操作麻烦、耗用时间长、有效成分有损失。

郭艳华等[20]用聚酰胺吸附法对鱼腥草提取液进行纯化，且聚酰胺处理后对黄酮含量的测定无影响，黄酮得率为0.586%。

2.2大孔树脂吸附法大孔树脂吸附法是将提取液直接或经浓缩得浸膏后溶解于溶剂中，再上大孔树脂柱，以适当溶剂洗脱并收集，从而对提取物中的有效成分达到提取分离的方法。

该法具有物化稳定性高、吸附选择性好、解吸条件温和、使用周期长等优点，广泛应用于物质的分离纯化，但是操作麻烦、耗用时间长。

杨国荣等[21]将鱼腥草提取液经AB-8大孔树脂吸附分离总黄酮，在室温条件下，采用70%乙醇溶液400mL作洗脱剂，洗脱速度为1mL/min，大孔树脂重复使用3次后要再生，鱼腥草水提总黄酮得率为2.83%。

2.3固相萃取法固相萃取法是一种利用高效、高选择性的固定相对液态或溶解后的固态样品进行萃取分离的方法。

该方法操作简便，分离效率高，样品不易被污染，固相萃取柱能再生，可以批量生产。

杨亚玲等[22]用固相萃取预分离鱼腥草样品提取液后直接进高效液相色谱测定，取得满意结果。

2.4膜分离法膜分离法主要有超滤、微滤、纳滤和反渗透等。

此法具有操作简便、不需加热、不损坏黄酮类化合物、提取效率高、超滤装置可反复使用和无二次污染等优点。

但膜的强度差，使用寿命不长，易被玷污而影响分离效率。

2.5制备型高效液相色谱法制备型高效液相色谱法具有分离效率高、产率高、分离速度快等优点，且适应于大分子、高沸点、强极性和热稳定性差的化合物的分离。

近年来，制备型高效液相色谱法已经广泛用于黄酮类化合物的分离纯化。

3结论与展望鱼腥草黄酮类化合物提取分离方法很多，基本原理都是通过物理、化学方法破坏细胞壁，再根据鱼腥草黄酮类化合物的极性及溶解性能的差异来达到提取分离的目的。