mxt-七类物质鉴定和提取类实验

整合一归纳七类物质鉴定与提取，全取教材五大基础实验
1.教材规定实验中的“染色剂”归纳
试剂被染成分呈现颜色
斐林试剂还原糖砖红色沉淀
苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液脂肪橘黄色(或红色)
双缩脲试剂蛋白质紫色
甲基绿染液DNA 绿色
吡罗红染液RNA 红色
健那绿染液线粒体蓝绿色
龙胆紫溶液
染色体紫色
醋酸洋红溶液红色
改良苯酚品红染液红色
2.七类物质鉴定和提取类实验总结
实验名称试剂颜色生物材料备注淀粉的鉴定碘液蓝色脱色的叶片
还原糖的鉴定斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨匀浆等现配现用、水浴加热
脂肪的鉴定苏丹Ⅲ(或苏
丹Ⅳ)染液
橘黄(或红)色花生种子切片
需用高倍镜观
察
蛋白质的鉴定双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清等先加A液，后
加B液
绿叶中色素的提取和分离提取液：无
水乙醇；
分离液：层
析液
①胡萝卜素：
橙黄色
②叶黄素：黄
色
③叶绿素a：
蓝绿色
④叶绿素b：
黄绿色
新鲜的绿叶(如
菠菜叶)
加入二氧化硅
是为了研磨得
更充分；加入
碳酸钙可防止
在研磨中色素
被破坏
酒精的鉴定重铬酸钾溶
液
灰绿色
无氧环境中的酵
母菌
酸性条件
鉴定CO2Ca(OH)2(或
溴麝香草酚
蓝水溶液)
变浑浊(或由
蓝变绿再变
黄)
有氧或无氧环境
中的酵母菌
【高考例证】
(2014·广东理综，5)油菜种子成熟过程中部分有机物的变化如图所示，将不同成熟阶段的种子匀浆后检测，结果正确的是()
选项取样时间检测试剂检测结果
A 第10天斐林试剂不显色
B 第20天双缩脲试剂不显色
C 第30天苏丹Ⅲ试剂橘黄色
D 第40天碘液蓝色
解析分析曲线可知，油菜种子在成熟过程中，可溶性糖和淀粉不断转化为脂肪
储存起来。

第10天时仍然存在较多的可溶性糖，可溶性糖中的还原糖与斐林试剂在水浴加热条件下会出现砖红色沉淀，A错误；蛋白质是生物体生命活动的体现者，在整个种子成熟过程中都能检测到蛋白质的存在，B错误；在第30天时，脂肪含量较高，脂肪与苏丹Ⅲ试剂发生反应呈现橘黄色，C正确；在第40天时，淀粉已经消耗殆尽，用碘液检测不会发生显色反应，D错误。

答案
C
物质鉴定类试题的3个易错点
(1)不清楚实验试剂与检测对象的对应关系，如将甲基绿与吡罗红的作用混淆等。

(2)不清楚鉴定试剂的使用方法，如还原糖与斐林试剂反应及DNA与二苯胺反应均需要水浴加热，但双缩脲试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、碘液的使用条件则为常温。

(3)不清楚斐林试剂和双缩脲试剂的相关使用方法，前者是将甲液、乙液混合均匀后再加入样液，使用时需水浴加热，而双缩脲试剂是先加入A液，造成碱性环境后再加入B液，使用时无需加热。

【对点小练】
1.下列有关实验的叙述中错误的是()
A.脂肪鉴定实验中滴加体积分数为50%的酒精的目的是洗去浮色
B.验证唾液淀粉酶是蛋白质的实验中，常用鸡蛋清作为对照组实验中的材料
C.在蛋白质鉴定实验中，为防止蛋清粘在试管壁上，最好对其进行稀释处理
D.在物质鉴定实验中，经健那绿染色，可观察到蓝绿色的细胞核
解析健那绿可使线粒体(而不是细胞核)着色(呈蓝绿色)。

答案 D
2.(2016·武汉武昌区调研)下列有关物质(或结构)、相应的鉴定试剂、实验结果都正确的一组是()
A 果糖、斐林试剂、砖红色DNA、健那绿染液、绿色淀粉、碘液、蓝色
B RNA、吡罗红、红色脂肪、苏丹Ⅲ染液、橘黄
色
酒精、酸性重铬酸钾
溶液、灰绿色
C 脂肪、龙胆紫、紫色染色体、甲基绿、绿色CO2、溴麝香草酚蓝、
黄色
D 线粒体、健那绿、蓝绿色胡萝卜素、无水乙醇、黄
色
淀粉酶、双缩脲试剂、
紫色
解析健那绿是对活细胞中线粒体染色的试剂，对DNA染色使用甲基绿染液，A错误；脂肪用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色，将脂肪分别染成橘黄色或红色，B正确；龙胆紫是对染色体染色的试剂，DNA被甲基绿染成绿色，二氧化碳使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，C错误；胡萝卜素可用无水乙醇提取，胡萝卜素呈橙黄色，淀粉酶的化学本质是蛋白质，使用双缩脲试剂检测呈紫色，D错误。

答案 B
3.(2016·湖北武汉调研)下列各项实验中所用的试剂，作用相同的是()
A.“体验制备细胞膜的方法”和“显微镜观察叶绿体”实验中，蒸馏水的作用
B.“绿叶中色素的提取”和“检测生物组织中的脂肪”实验中，酒精的作用
C.“检测生物组织中的还原糖”和“检测生物组织中的蛋白质”实验中，CuSO4的作用
D.“观察植物细胞有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目变化”实验中，盐酸的作用
解析制备细胞膜实验中蒸馏水的作用是使细胞吸水涨破，而显微镜观察叶绿体实验中蒸馏水可以保持细胞的活性，A错误；脂肪检测过程中酒精的作用是洗去浮色，绿叶中色素的提取实验中酒精的作用是溶解色素，B错误；检测生物组织中的还原糖实验用的是新制氢氧化铜，而检测生物组织中的蛋白质用的是铜离子，C错误；“观察植物细胞有丝分裂”用到盐酸的作用是使细胞分离开来，“低温诱导植物染色体数目变化”实验中，盐酸的作用都是使细胞相互分离，D正确。

答案 D
整合二归纳九类观察实验，规范熟练操作流程，重建镜检实验“文件夹”1.显微观察的两种方式
(1)原色观察：即观察材料不用染色，直接用显微镜观察即可。

相关实验有：使用高倍显微镜观察几种细胞、用高倍显微镜观察叶绿体、观察植物细胞的吸水和失水等。

(2)染色观察：即观察材料要经染色剂染色后才可用显微镜观察。

相关实验有：观察DNA和RNA在细胞中的分布、用高倍显微镜观察线粒体、观察细胞的有丝分裂或减数分裂等。

2.显微观察类实验的染色剂与材料选择
3.显微观察3种临时装片的制作方法
装片法
微小生物(如草履虫、衣藻)或大型生物
的部分l细胞(如人口腔上皮细胞、叶表
皮细胞)，直接观察
观察DNA和RNA在细胞中
的分布；用高倍显微镜观察
叶绿体和线粒体；观察植物
细胞的吸水和失水
切片法相对较大、较硬的材料，如花生生物组织中脂肪的检测
【高考例证】
1.(2016·江苏卷，19)下列实验都需要使用光学显微镜进行观察，有关实验现象描述合理的是()
实验标号实验名称观察到的实验现象①
观察植物细胞的质壁分
离和复原
镜检1：几乎整个紫色洋葱鳞片叶外表皮
细胞呈紫色；
镜检2：不同细胞质壁分离的位置、程度
并不一致
②观察多种多样的细胞
菠菜叶表皮细胞由细胞壁、细胞膜、细
胞质和细胞核组成；人口腔上皮细胞具
有细胞核和核糖体
③观察细胞的有丝分裂
洋葱根尖伸长区细胞长，液泡大；分生
区细胞呈正方形，多数细胞中呈紫色的
染色体形态清晰
④
探究酵母菌种群数量的
动态变化
酵母细胞呈球形或椭圆形，细胞核、液
泡和线粒体的形态、数目清晰可见
A.实验①
B.实验②
C.实验③
D.实验④
解析观察植物细胞的质壁分离和复原时，紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中液泡大，占据整体细胞体积的绝大部分，呈紫色，不同细胞的细胞液浓度大小不同，质壁分离的位置、程度并不一致，A正确；用光学显微镜观察多种多样的细胞时，不能观察到核糖体，B错误；洋葱根尖分生区细胞呈正方形，多数细胞处于分裂
间期，观察不到染色体，C错误；线粒体需染色后才能观察到清晰的形态且酵母菌无大液泡，D错误。

答案 A
2.(2015·山东卷，3)下列有关生物学实验的叙述，正确的是()
A.叶绿体色素滤液细线浸入层析液，可导致滤纸条上色素带重叠
B.低温诱导大蒜根尖时间过短，可能导致难以观察到染色体加倍的细胞
C.用显微镜观察洋葱根尖装片时，需保持细胞活性以便观察有丝分裂过程
D.将洋葱表皮放入0.3 g/mL蔗糖溶液中，水分交换平衡后制成装片观察质壁分离过程
解析色素分离时，若滤液细线浸入层析液，不能分离出各色素带，A错误；低温诱导染色体数目加倍实验中，若诱导大蒜根尖时间过短，染色体数目可能并未加倍，B正确；用显微镜观察洋葱根尖细胞装片时，细胞在解离时已死亡，不可能再继续分裂进程了，C错误；观察植物细胞质壁分离时，先制作装片，再观察细胞质壁分离状况，D错误。

答案 B
选择合适的材料是实验成功的关键
(1)观察DNA、RNA在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞(无细胞核，几乎不含DNA、RNA)。

(2)不能用观察叶绿体的材料来观察线粒体(叶绿体中的色素颜色会掩盖健那绿染色后的颜色变化)。

(3)观察细胞的有丝分裂或低温诱导染色体加倍时，应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞(长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞，这些细胞没有分裂能力)。

(4)观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢或植物的雄蕊，而不宜选用动物的卵巢或植物的雌蕊(雄配子产生数量远远多于雌配子的)。

(5)观察叶绿体时，若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的下表皮(靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少)。

(6)观察植物细胞的质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞(含有大的液泡)。

【对点小练】
1.(2017·山东潍坊检测)下列实验与选用的试剂组合正确的是()
A.观察线粒体——甲基绿染液
B.探究酵母菌的呼吸方式——酸性重铬酸钾
C.观察DNA和RNA在细胞中的分布——健那绿、吡罗红染液
D.检测生物组织中的蛋白质——斐林试剂
解析观察线粒体所使用的染色剂为“健那绿”而不是“甲基绿”，A错误；酸性重铬酸钾可检测酒精存在，故可确认酵母菌的呼吸类型，B正确；观察DNA、RNA分布可使用甲基绿—吡罗红染液，C错误；检测蛋白质应使用双缩脲试剂，D错误。

答案 B
2.(2016·河北邯郸二模，12)黑藻是一种水生植物，叶片小而薄，小王同学利用黑藻进行下列生物学实验，其中错误的是()
解析叶绿体本身有颜色，不需染色，用蒸馏水制片就可以了，A正确；探究CO2浓度对光合速率的影响，至少要设置3个组：无CO2组、低CO2组、高CO2组，B错误；30%蔗糖溶液可使成熟植物细胞发生质壁分离，用清水处理发生质壁分离的成熟植物细胞使其发生质壁分离复原，C正确；提取叶绿体色素要用到无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅，无水乙醇用于叶绿体色素的提取，碳酸钙防止色素被破坏，二氧化硅使研磨充分，利于色素释放，D正确。

答案 B
3.小杨对4种实验材料的研究及观察记录见下表，不正确的是()
解析大肠杆菌是原核生物，没有细胞核，无法观察到核仁。

答案 D。