第二章——血小板检查
《诊断学》 第二节 血小板检测
第二节血小板检测血小板以其数量（血小板计数、血小板平均容积和血小板分布宽度）和功能（黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等）参与初期止血过程。
一、筛检试验（一）血小板计数见本篇第二章。
（二）血块收缩试验【原理】血块收缩试验（clot retraction test，CRT）是在富含血小板的血浆中加入Ca2＋和凝血酶，使血浆凝固形成凝块。
血小板收缩蛋白使血小板伸出伪足，伪足前端连接到纤维蛋白束上。
当伪足向心性收缩，使纤维蛋白网眼缩小，检测析出血清的容积可反映血小板血块收缩能力。
【参考值】①凝块法：血块收缩率（％）=[血清（ml）／全血（ml）×（100％-Hct％）]×10-0％，参考值：65．8％±11．0％。
②血块收缩时间（h）：2h开始收缩，18～24h完全收缩。
【临床意义】1．减低（<40％）见于特发性血小板减少性紫癜（ITP）、血小板增多症、血小板无力症、红细胞增多症、低（无）纤维蛋白原血症（hypo（a）fibrinogenmia）、多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）、原发性巨球蛋白血症（primarymacroglobtr1inemia）等。
2．增高见于先天性和获得性因子Ⅷ缺陷症等。
二、诊断试验（一）血小板相关免疫球蛋白测定【原理】血小板相关免疫球蛋白（platelet associated immunoglobulin，PAIg）包括PAIgG、PAIgM、PAIgA，现以PAIgG 测定为例叙述。
将人抗IgG抗体包被在酶标反应板孔内，加入受检血小板破碎液，再加入酶标记的抗人IgG抗体，与结合在板上的PAIgG 相结合，最后加入底物显色，颜色深浅与血小板破碎液中的PAIgG的量成正相关。
受检者所测得的吸光度（A值）可从标准曲线中计算出血小板破碎液中的PAIgG含量。
近来用流式细胞术（FCM）和免疫荧光显微术测定日趋增多。
【参考值】ELISA法：PAIgG为0～78．8ng／107血小板；PAIgM为0～7．0ng／107血小板；PAIgA为0～2．0ng／107血小板；FCM：一般<10％（应建立本实验室的参考值）。
血小板检查PPT课件
（七）注意事项
▪ .全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防 菌，以免计数时误认。
▪ .针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。 ▪ .同时做多项检查时，优先采计数之血。 ▪ .充池前应充分摇匀，充池后需静置分钟以
上待全部下沉后再计数。内完成。
（八）方法学平价
▪ .草酸铵法对破坏力强，使视野清晰，形态 清楚，是全国临床检验操作规程推荐方法。 由于体积小，易粘附、聚集及破坏等，结 果不甚理想。
▪ 正常人异常<，异常>才有意义。
▪ （）血小板卫星现象：血小板粘附、围绕 于中性粒细胞（或偶尔粘附于单核细胞） 的现象。偶见于抗凝血血涂片中，导致血 液分析仪减少。
二、血小板计数（手 工法）
（Байду номын сангаас）原理
▪ 将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数， 计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏, 固定并防止聚集。
（二）器材 光学显微镜；血球计数板、吸管、试管、采血针等。 （三）试剂：下列试剂任选一种 .草酸铵稀释液：草酸铵 ，蒸馏水加至.首选试剂。 .许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素，枸橼酸
▪ .检测后： ▪ （）用同一份标本制备学血涂片染色精简
观察血小板数量、大小、分布情况，并注 意有无异常增多的红、白细胞碎片。 ▪ （）用参考方法核对。 ▪ （）同一份标本次计数误差要<。
（十一）临床意义
生理变化： ①新生儿<婴儿，出生后个月达成人水平。 ②晨间<午后，春季<冬季，毛细血管<静脉 ③运动、饱餐后上升，休息后恢复。 ④月经期低，经期后上升。 ⑤妊娠中晚期 ，分娩后天
再障等。
巨大血小板
.形态异常
▪ （）幼稚形：颗粒少。 ▪ （）老年形:边缘不规则，颗粒粗，呈离心
第二章血液一般检验第三节血小板计数
集、释放、促凝和血块收缩功能。
一、血小板计数
血小板计数（platelet count, PLT）是测 定全血中血小板的浓度，是止血凝血检 查最常见的试验之一。
血小板计数的适应证为：
①不明原因的出血。
②排除出血性疾病。 ③化疗和放疗病人的监测。 ④疑为骨髓造血系统疾病。 ⑤疑为血小板生成减少、血小板破坏增加、血小板消耗 过多或反应性血小板增多。
病理性血小板减少的原因及意义
血小板增多：血小板超过400×109/L时为血小板
增多（thrombocytosis），血小板大于
1000×109/L常有血栓形成的危险。在原因未明
的血小板增多的病人中，约有50%为恶性疾病。 病理性血小板增多的原因及意义
二、血小板形态检查
（一）正常血小板形态
正常静息状态下，血小板为双面微凸的圆盘形，直 径为1.5～3μm、平均体积为7.2fl的非细胞结构成分。 染色后镜下可呈散在或成簇分布，圆形、椭圆或不规 则。胞质呈淡蓝色或淡红，内含较多的细小紫红色颗粒。 血涂片上，为红细胞数的1/30~1/20，通常每个油镜视 野可见7~25个，分散或3~5成群分布。 参考值： （100~300）×109/L
无大量大型血小板；无异常增多的红、白细胞碎片）。 ◆②用血小板计数的参考方法核对计数结果。 ◆③每份标本最好做2次计数，若2次计数误差小于10%， 取其均值报告；若计数误差大于10%，应做第3次计数，
取2次相近结果的均值报告。
临床意义
生理性改变 每天可有6%～10%的变化。
增多见于：午后、冬季、高原居民、月经后、妊 娠中晚期运动、饱餐后静脉血。 减少见于：早晨、春季、平原居民、月经前、 分娩后、休息后、毛细血管血。
（二）异常血小板形态
血小板检查
·
8
（二）器材
光学显微镜；血球计数板、Hb吸管、试管、采血针 等。
（三）试剂：下列试剂任选一种
1.草酸铵稀释液：草酸铵1.0g,EDTA-Na2 0.012g，蒸 馏水加至100mL.首选试剂。
2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素10g，枸 橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。 过滤冰箱保存。
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病理变化
▪ 1.plt减少： ①生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等 ②破坏过多：ITP、脾亢、SLE等； ③消耗过多：DIC、血栓性血小板减少性紫癜 ④分布异常：脾肿大、血液被稀释等； ⑤先天性：新生儿plt减少症、巨大plt综合征
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▪ 2.plt增多： ①原发性：慢粒、原发性plt增多症、真性红
细胞增多症等； ②反应性：急性化脓性感染、大出血、急性
溶血、肿瘤等； ③其他：外科手术后、脾切除等。
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三、plt平均体积（MPV） 的临床意义
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▪ MPV参考值：6.8~13.6fL ▪ 分析MPV临床意义需结合plt数量变化。 ▪ 1.鉴别plt减少症的原因 ▪ ①plt ，而MPV ，骨髓自身正常，外周血
·
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▪ 4.流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色 标记血小板，根据荧光强度和散射光强度， 用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极 高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小 板计数参考方法。
·
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▪ 5.相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立 体感增强，有助于识别血小板，还可照相 后核对计数结果，作为手工法血小板计数 的参考方法。
Plt 2/3在循环血，其余贮存于脾。
·
血小板的检测PPT课件
血小板计数
血小板计数(platelet count,PC) 是计数单位容积（L） 外周血液中血小板的数量，可以采用镜下目视法，目 前多用自动化血细胞分析仪检测。
参考值：(100-300)X 109/L
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临床意义
（一）. 血小板减少
PC ＜ 100x109/L 称为血小板减少。
1. 血小板生成减少或障碍：见于再障、巨幼贫、急性白 血病、放射性损伤、骨髓纤维化晚期等．
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用EDTA抗凝血测定
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用EDTA抗凝血(双通道)
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用肝素抗凝的
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用枸橼酸钠抗凝
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用Na2-EDTA抗凝血所制的涂片
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用枸橼酸钠抗凝血所制的血涂片
40
用肝素抗凝血所制血涂片
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感谢下 载
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血小板减少伴小血小板病例
Wiskott-Aldrich 综合征
血小板减少伴小血小板（约
1μm）。X性联隐性遗传。T细胞免疫缺陷、感染、湿疹、出血。
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血片中血小板的观察
通过与红细胞比较判断是否正常，是否增加或 减少 （正常情况下红细胞15-20个有1个 血小板）
大小、形态的变化（是否有畸形小板的存在） 聚集性观察（抗凝剂诱导血小板聚集，导致
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血小板的体积
1.正常血小板胞体直径2~4 μm 2.小血小板指直径<2μm 3．大血小板指直径5~7μm 4．巨大血小板指直径>8μm 5．超巨大血小板指直径>20μm
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小血小板、正常血小板、大血小板
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异常血小板形态
1．畸形血小板胞体形态怪异的血小板，其胞体往往巨大或超巨大。 2．少或无颗粒血小板指颗粒无或减少的血小板 3．血小板卫星现象也被称为“玫瑰花形血小板”。
最新 第二章 血液一般检验 06 血小板部分
血小板减少是引起出血的常见原因。当血小板计数为
（20～50）×109/L时，可有轻度出血或手术后出血；低于
20×109/L，可有较严重的出血；低于5×109/L时，可导致严 重出血。血小板超过400×109/L为血小板增多。病理性血小 板减少和增多的原因及临床意义见表2-69。
二、血小板形态检查
（一）正常血小板形态
正常血小板呈两面微凸的圆盘状，直径约1.5～ 3μm，新生血小板体积大，成熟者体积小。 在血涂片上血小板往往 散在或成簇分布，多为圆形、 椭圆形或略欠规则形；胞质 呈淡蓝或淡红色，有细小、
血液分析仪法和流式细胞仪法，其原理见表2-66。
【方法学评价】血小板计数的方法学评价见表267。
【质量保证】避免血小板被激活、破坏，避免杂 物污染是血小板计数的关键。血小板计数不同检测阶
段的质量保证见表2-68。
【参考区间】（100～300）×109/L。
【临床意义】血小板数量随着时间和生理状态的
第三节 血小板检查
一、血小板计数
血小板（platelet,PLT）是由骨髓造血组织中的 巨核细胞产生，具有维持血管内皮完整性以及黏附、 聚集、释放、促凝和血块收缩等功能。血小板计数 （PLT）是测定单位容积的血液中血小板的数量，血 小板计数是止血、凝血检查最常用的筛检试验之一。
【检测原理】血小板计数的方法有显微镜计数法、
分布均匀而相聚或分散于胞
质中的紫红色颗粒（图2图2-53 正常血小板
血小板功能检测
血小板聚集实验血小板活化ＰＡＣ－Ｉ，ＣＤ６２Ｐ一、血小板功能检测项目出血时间、粘附性、聚集性、释放产物、花生四烯酸代谢产物、胞浆游离钙水平测定、凝血活性、膜糖蛋白检测、基因多态性和突变。
常用的检测功能的方法为：血小板聚集性测定(比浊法、阻抗法、循环血小板聚集体、自发性血小板聚集)，近年来，流式细胞仪、PFA-100分析及激光衍射法检测微小聚集体也逐渐地进入临床或临床前阶段。
比浊法测定血小板聚集是应用较广泛的指标，可以用于遗传性血小板疾病诊断指标，也可以作为血栓性疾病中评估其病理反应，指导抗栓药物的应用以及作为抗血小板药物监测之用。
在比浊法的应用中，有几项关键问题应予以注意：(1)血液采集与分离。
(2)诱导剂应用:种类、浓度。
(3)正常值的选定。
流式细胞仪可以检测血小板功能、代谢、尘化及受体表达，而微小聚集体的形成作为血栓形成的早期敏感指标采用激光衍射法的测定也正在评估中，反映体内全血状态下的血小板阻抗法以及血小板内钙离子水平的检测在临床研究中显示其意义。
二、血小板功能检测的临床应用1、出血性疾病：分遗传性和获得性二类，采用常规的血小板聚集试验对遗传性血小板疾病即可作出初步诊断。
2、血栓性疾病：大多数血栓性疾病均可以检测到血小板反应性增高，(这对疾病的病理过程，指导疾病治精选资料，欢迎下载。
疗均有一定；意义，许多指标在疾病中的意义也作比较研究，一些分子标志物在反映血小板活化方面有较高的灵敏度)。
P选择素是反映血小板活化的较敏感指标，而血小板聚集性测定较为简便。
最近的一些研究也表明血小板活化指标不仪在反映血小板活化方面有意义，而且对某些疾病具有预示意义。
譬如，胶原诱导血小板聚集在妊娠25周升高，则预示先兆子痫，具有较高的灵敏性和精确性，也有采用血小板数、MPV 和聚集三项来综合预示先兆子痫。
采用MPV、血小板数和P选择素，发现不稳定心绞痛和心肌梗死有差别。
这表明血小板检测在临床上足十分有用的。
在血小板参与功能血栓形成的机制中，除了上述获得性原因外，近年来的研究也证明存在遗传因素。
血小板功能检测
血小板聚集实验血小板活化ＰＡＣ－Ｉ，ＣＤ６２Ｐ一、血小板功能检测项目出血时间、粘附性、聚集性、释放产物、花生四烯酸代谢产物、胞浆游离钙水平测定、凝血活性、膜糖蛋白检测、基因多态性和突变。
常用的检测功能的方法为：血小板聚集性测定(比浊法、阻抗法、循环血小板聚集体、自发性血小板聚集)，近年来，流式细胞仪、PFA-100分析及激光衍射法检测微小聚集体也逐渐地进入临床或临床前阶段。
比浊法测定血小板聚集是应用较广泛的指标，可以用于遗传性血小板疾病诊断指标，也可以作为血栓性疾病中评估其病理反应，指导抗栓药物的应用以及作为抗血小板药物监测之用。
在比浊法的应用中，有几项关键问题应予以注意：(1)血液采集与分离。
(2)诱导剂应用:种类、浓度。
(3)正常值的选定。
流式细胞仪可以检测血小板功能、代谢、尘化及受体表达，而微小聚集体的形成作为血栓形成的早期敏感指标采用激光衍射法的测定也正在评估中，反映体内全血状态下的血小板阻抗法以及血小板内钙离子水平的检测在临床研究中显示其意义。
二、血小板功能检测的临床应用1、出血性疾病：分遗传性和获得性二类，采用常规的血小板聚集试验对遗传性血小板疾病即可作出初步诊断。
2、血栓性疾病：大多数血栓性疾病均可以检测到血小板反应性增高，(这对疾病的病理过程，指导疾病治精选资料，欢迎下载。
疗均有一定；意义，许多指标在疾病中的意义也作比较研究，一些分子标志物在反映血小板活化方面有较高的灵敏度)。
P选择素是反映血小板活化的较敏感指标，而血小板聚集性测定较为简便。
最近的一些研究也表明血小板活化指标不仪在反映血小板活化方面有意义，而且对某些疾病具有预示意义。
譬如，胶原诱导血小板聚集在妊娠25周升高，则预示先兆子痫，具有较高的灵敏性和精确性，也有采用血小板数、MPV 和聚集三项来综合预示先兆子痫。
采用MPV、血小板数和P选择素，发现不稳定心绞痛和心肌梗死有差别。
这表明血小板检测在临床上足十分有用的。
在血小板参与功能血栓形成的机制中，除了上述获得性原因外，近年来的研究也证明存在遗传因素。
血小板检查
▪ 5.相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立 体感增强，有助于识别血小板，还可照相 后核对计数结果，作为手工法血小板计数 的参考方法。
▪ （九）参考值：（100~300）×109/L
（十）质量保证
▪ 原则是：避免血小板被激活、破坏，避免 杂物污染。
▪ 1.检测前：采血要顺畅，抗凝剂选用合适， 储存时间适当；
▪ 2、血小板平均体积（MPV）
▪ 3、血小板分布宽度(PDW) ▪ 4、血小板比积(PCT)
血液分析仪测
二、血小板计数（手工法）
（一）原理
▪ 将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数， 计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏 RBC, 固定Pt并防止聚集。
（二）器材
光学显微镜；血球计数板、Hb吸管、试管、采血针 等。
（三）试剂：下列试剂任选一种
1.草酸铵稀释液：草酸铵1.0g,EDTA-Na2 0.012g，蒸 馏水加至100mL.首选试剂。
2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素10g，枸 橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。 过滤冰箱保存。
（四）操作
▪ 1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL。 ▪ 2.取末梢血20μL加入试管中，迅速摇匀。
细胞增多症等； ②反应性：急性化脓性感染、大出血、急性
溶血、肿瘤等； ③其他：外科手术后、脾切除等。
三、plt平均体积（MPV）的 临床意义
▪ MPV参考值：6.8~13.6fL ▪ 分析MPV临床意义需结合plt数量变化。 ▪ 1.鉴别plt减少症的原因 ▪ ①plt ，而MPV ，骨髓自身正常，外周血
▪ 2.检测中：手工法计数要定期检查稀释液质 量，仪器法要质控合格；
▪ 3.检测后： ▪ （1）用同一份标本制备学血涂片染色精简
老年健康服务《血小板检查》
血小板检查
一血小板计数〔l，使用真空采血系统时用紫色帽真空管采血。
〔2〕参考值：〔100～300〕×10⒐／L。
〔3〕临床意义
①血小板增多：血小板＞400×10⒐／L称为血小板增多。
它常见于：骨髓增生性疾病，如慢性粒细胞白血病、特发性血小板增多症、真性红细胞增多症等。
反响性增多，如急性感染、急性失血或溶血、某些恶性肿瘤患者等。
②血小板减少：血小板＜100×10⒐／L称为血小板减少，当血小板＜50×10⒐／L时可发生自发血小性出血。
它常见于：血小板生成障碍，如再生障碍性贫血、急性白血病、骨髓转移瘤、放射线损伤等；血小板破坏或消耗过多，如特发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进、系统性红斑狼疮、弥散性血管内凝血〔DIC〕等；血小板分布异常，如肝硬化所致脾大、输入大量库存血或大量血浆所致血液稀释；感染或中毒，如伤寒、败血症、化学药物中毒等。
二．血小板平均体积〔MPV〕表示单个血小板的平均容积〔1〕临床意义
①增加：血小板破坏增加但骨髓造血功能良好；出现在造血功能抑制解除后，是血功能恢复的首要表现。
②减少：造血功能不良，血小板生成减少：局部白血病患者；假设随血小板数持续下降，是骨髓造血功能衰竭的指标之
三．血小板分布宽度〔PDW〕反映血小板容积大小的离散度，用所测单个血小板容积大小的易变系数〔CV％〕表示。
〔1〕参考值：15％～17％。
〔2〕临床意义
①增高：说明血小板大小悬殊，可见于急性髓性白血病、慢性粒细胞性白血病、巨幼细胞贫血、牌切除等。
②减少：表示血小板大小的均一性高。
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血 小 板 减 少 血 小 板 增 多
弥 漫 性 血 管 内 出 血
原发性血小板减少性紫癜
血小板计数 @普通显微镜直接镜检法 直接计数：用血小板稀释液将血液稀释一定倍数。混匀并滴入改良牛鲍计数 板，在普通显微镜下计数一定范围内血小板数。经换算求得每升血液中血小 板数。 间接计数：少用 观察要点： 1、血小板数量（正常8-15/油镜视野） 2、血小板大小是否一致，有无巨或者小型血小板出现 3、血小板形态有无改变、胞质颜色、颗粒有无、多少、分布情况、有无 4、血小板分布情况 @血细胞分析仪法（应用最多）
血小板临床意义
参考值（100-300）×10^9/L @生理性变化 1、早晨低，午后高 2、剧烈运动、饱餐后高 3、月经初期低，经后期高 4、妊娠中晚期及新生儿高 静脉血>毛细血管 @病理变化 1、血小板减少(<100×10^9/L) 生成障碍 如再障、恶性肿瘤、急性白血病等 破坏或消耗过多 原发性血小板减少性紫癜（ITP）弥漫性血管内出血（DIC） 血小板分布异常 脾大、血液被稀释（输入大量库存血） 先天性血小板减少 新生儿血小板减少症 巨大血小板综合征 2、血小板增多（>400×10^9/L） 1、原发性血小板增多 急性粒细胞白细胞、真性红细胞增多症 2、反应性血小板增多 急性化脓性感染、急性大出血 3、其他 外科手术后、脾切除后 血小板减低是引起出血常见原因。 <（20-50）×10^9/L 轻度出血、术后出血 < 20×10^9/L 较严重出血 < 5×10^9/L 严重出血
异常血小板形态 @大小异常 1、小血小板 < 1.5um,主要见于缺铁贫、再障 2、大血小板 直径4-7um，>7 um,称巨血小板，比红细胞还大，可能会误认为 点彩红细胞或淋巴细胞 @形态异常 出现蛇状、星芒、不规则、畸形，正常人偶见(<2%)。因影响血小板形态因素很多 ，故异常血小板>10%具有临床意义。多见于再障、急性白血病等。 @分布异常 1、血小板不聚集 血小板散在分布，少见成堆出现。见于血小板无力症。 2、血小板过度聚集 每堆血小板量太多，见于原发性血小板增多症、骨髓纤维化
@流式细胞仪法
质量保证 1、血小板假性减低 采血不顺血小板破坏 血液有凝块 EDTA-K2抗凝血采血后1h不稳定，还可引起血小板聚集、 储存时间过久（寿命9-12天） 大血小板增多 2、血小板假性偏高 温度过低激活血小板，应室温 异常增多的红、白细胞碎片 稀释液被污染
谢 谢
血小板的检查（PLT）
血 小 板 计 数
血 小 板 检 查 临 床 意 义 异 常 血 小 板 形 态 正 常 血 小 板 形 态
血小板形态 体积：体积很小，2-5um新生血小板体积较大，成熟较小。 形状：圆形、椭圆形或不规则形 胞质：淡蓝色或粉红色，中心部位有若干细小的紫红色颗粒，称颗粒区，其 周围部分为透明的胞质区称透明区 胞核：无 存在形式：3-5个成群聚集成团，散在极少见。