胶体金法各种方法法原理

合集下载
相关主题
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

双抗体夹心法原理

以FABP 为例(检测抗原)

阳性反应

Y1=F14A (标记了胶体金)

Y2=F104B (固定在NC 膜上即T 线)

Y3=羊抗鼠IgG (固定在NC 膜上即C 线)

此方法较常用,主要用于较大分子量的蛋白(抗原)的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的,原理类似。

样品(血清)含FABP 蛋白

金标记F14A 抗体

金-F14A-FABP

金-F14A-FABP-F14A

金-F14A-羊抗鼠IgG

金-F14A-FABP

羊抗鼠IgG

显示红色 显示红色

金标记F14A 抗体

不显色 显示红色

金-F14A-羊抗鼠IgG

阴性反应

阳性反应

竞争法原理

以吗啡为例(检测抗原)

阳性反应

Y1=胶体金标记的吗啡单抗 Y2=吗啡-BSA 偶联物 Y3=羊抗鼠

此方法主要用于小分子抗原(毒品、农药、肽链等)的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC 膜上,常常用化学方法把小分子偶联到BSA 等大分子物质上再固定于NC 膜上。此结果与双抗原夹心法相反,阴性CT 两条都是红线,阳性只有C 线一条红线。

金-吗啡抗体-吗啡

吗啡-BSA

金标记吗啡抗体

显示红色

不显色

金-吗啡抗体-吗啡

羊抗鼠

样品(尿液)含吗啡

显示红色

显示红色 金标记吗啡抗体

金-吗啡抗体-羊抗鼠

阴性尿液抗体-吗

阴性反应

阳性反应

间接法原理

以HIV 为例(检测抗体)

此方法主要用于血清中抗体检测,纯化或者重组的抗原固定于NC 膜上,标记多为蛋白A(ProteinA 或叫SPA ,抗体Fc 端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金过量,一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就是间接法。

显示红色 显示红色

显示红色

不显色

相关文档
最新文档