临床生化检验参考方法
临床常用生化检验项目参考区间
临床常用生化检验项目参考区间在医学检验中，生化检验是一个重要的组成部分，它的重大意义在于可以帮助医生诊断和监测疾病，并判断治疗的效果。
与其他医学检验不同，生化检验的结果是根据实验者设定的参考区间来评估的，而不是定性结果或定量结果。
参考区间是指一组数据经过各种统计分析找出的在健康人群中某一指标的最常见的数值范围。
它的定义通常是指两个值，即上限和下限，表示为X1-X2，其中X1是上线，X2是下线。
生化检查的参考区间受到许多因素的影响，例如性别、年龄、季节、季节性影响等，因此一般针对某些检测项目会提供不同的参考区间，以确保参考区间的准确性。
为了确保结果的准确性，一般建议采用国家批准的参考区间指标，以确保检验数据的准确性。
临床常用生化检验项目有肝功能检测、肾功能检测、血脂检测、血气检测、电解质检测等，它们的参考区间分别如下：1）肝功能检测：ALT、AST、GGT、TBIL、DBIL等，参考区间为正常人的ALT指标为9-45 U/L，AST指标为8-48 U/L，GGT指标在4-51 U/L，TBIL指标在3-21 umol/L，DBIL指标在0-5 umol/L。
2）肾功能检测：SCr指标在62-106 umol/L，BUN指标在3-7.2 mmol/L，CrCle指标在90-150 ml/min，白蛋白指标在35-85 g/L。
3）血脂检测：总胆固醇指标为3.2-5.2 mmol/L，甘油三酯指标为0.5-2.2 mmol/L，高密度脂蛋白指标为1.1-1.9 mmol/L，低密度脂蛋白指标为2.50-3.20 mmol/L。
4）血气检验：pH指标在7.35-7.45之间，PaCO2指标在4.7-6.0 kPa，HCO3-指标在24-32 mmol/L。
5）电解质检验：氯化物指标为97-107 mmol/L，钾指标为3.5-5.3 mmol/L，钠指标为135-145 mmol/L，钙指标为2.2-2.6 mmol/L，磷指标为0.8-1.5 mmol/L，磷指标为1.5-1.9 mmol/L。
临床常用生化检验项目参考区间 第4部分
临床常用生化检验项目参考区间第4部分摘要：一、引言二、临床生化检验项目概述1.常规生化检验项目2.特殊生化检验项目三、参考区间及其意义1.参考区间的定义2.参考区间的应用3.参考区间的划分四、我国常用生化检验项目参考区间标准1.血清生化指标参考区间2.尿液生化指标参考区间3.唾液生化指标参考区间五、临床应用实例1.血清生化指标在疾病诊断中的应用2.尿液生化指标在疾病诊断中的应用3.唾液生化指标在疾病诊断中的应用六、检验结果的解读与分析1.单一指标异常的解读2.多项指标异常的解读3.异常结果的临床意义七、检验过程中的质量控制1.样本采集与处理2.仪器与试剂的选择3.检验操作规范八、总结与展望正文：一、引言临床生化检验是现代医学诊断和监测疾病的重要手段之一。
众多的生化检验项目为临床医生提供了丰富的诊断依据。
然而，如何正确理解和应用这些检验结果，避免误诊和漏诊，成为了临床医生关注的问题。
本文将对临床常用生化检验项目参考区间进行详细阐述，以期为广大临床工作者提供参考。
二、临床生化检验项目概述1.常规生化检验项目常规生化检验项目包括血清生化指标、尿液生化指标和唾液生化指标等。
这些指标可以反映人体器官和系统的功能状态，为临床诊断提供依据。
2.特殊生化检验项目特殊生化检验项目包括免疫生化、酶学、遗传代谢等方面，具有较高的专业性和针对性。
特殊生化检验项目的应用有助于临床医生对疾病进行精准诊断。
三、参考区间及其意义1.参考区间的定义参考区间是指在正常人群中，某一生化指标的分布范围。
合理的参考区间有助于临床医生判断检验结果的异常与否。
2.参考区间的应用参考区间在临床检验中具有重要意义，可以帮助医生识别异常指标，进一步进行疾病诊断和治疗。
3.参考区间的划分划分参考区间时，需充分考虑年龄、性别、生活习惯等因素，以确保检验结果的准确性。
四、我国常用生化检验项目参考区间标准1.血清生化指标参考区间血清生化指标包括血糖、血脂、肝功能、肾功能等。
(整理)检验医学专业实验IV临床生物化学检验部分
自动生化分析仪实际K值测定实际K值：理论K值受样品和试剂的加量准确度、比色杯光径准确度，尤其是ε的影响。
ε在波长和温度等不同时有所不同，故有必要获得用户所用分析仪的实际ε，再计算K值，此为~。
一、340nm波长实际K值测定【实验原理】：通过有NAD+（NADP+）参与的反应途径，用NADH或NADPH标准液来校正仪器。
用己糖激酶（HK）方法测定葡萄糖时，葡萄糖的消耗与NADH的生成呈等摩尔关系。
葡萄糖有标准纯品，当反应达到终点时，NADH的摩尔数等于标准的葡萄糖摩尔数。
在需要校正的仪器上测其A即可求得实际摩尔吸光系数，计算出实际K值。
【注意事项】1．减少偶然误差重复测定10次，当CV>5％时，则重新测定10次。
2．减少系统误差使用实际K值计算酶活性。
3．如果实际ε值与理论ε值偏差过大，需对仪器检修和校正。
二、405nm波长实际K值测定【实验原理】：许多酶活性测定时，以人工“色素原”为底物，经酶作用后可释放出在405nm 波长具有吸收峰有色的反应产物，如对硝基苯酚(4-NP)、对硝基苯胺(4-NA)、对硝基-5-氨基苯甲酸(ANBA)。
他们在405nm波长时的理论ε分别为18 700、9 870、9 490。
可使用其相应的纯标准品在需要校正的仪器上测其A即可求得实际ε，计算出实际K值。
以ALP实验(产物为4-NP) 为例测定实际K值。
【注意事项】1．4-NP标准品纯度要求较高，必要时需纯化。
2．其他注意事项参见340nm K值校正。
三、如何校正K值在理论K值或实际K值得情况下，测定某标准品的含量，若测得的结果偏低，则需要把测得的结果调整至原标准品的含量，此时调整的数值称为校正因子，则校正K值=理论（实际）K值×校正因子=理论（实际）K值×校准值÷实测值NADH正负向反应测定酶活性一、血清乳酸脱氢酶测定LD催化反应式为：L-乳酸+ NAD+（LD）→丙酮酸+ NADH + H+在反应过程中，乳酸被氧化生成丙酮酸，同时NAD+还原为NADH。
临床化学分析方法选择与评价
临床化学分析方法选择与评价本文将就临床生化检测中的试剂选择，试验方法的选择，以及实验结果的评价方法进行简单的阐述。
使大家对试验方法的各种评价指标和评价方法有充分的了解，同时能让大家充分认识到实验室的检测方法评价的重要性。
一、对试剂及试剂盒的选择（一）对试剂的要求为了保证一定质量，对生化试剂的要求，首先实验室使用的检验试剂应通过国家食品药品监督管理局 SFDA 的批准，拿到批准文号；第二，产品的名称，应参照 SFDA 颁布的“体外诊断试剂分类目录”确定产品的名称；三，规格型号，应规定可进行测试的次数，也可用包装规格表示。
（二）对试剂盒的要求对试剂盒的要求都有哪些？第一，检测原理，即方法学原理，简单扼要说明测定原理及名称；第二，试剂组份，要明确说明试剂中组份，组成成份的数量、比例及浓度，应采用国际标准或法定单位；第三，所用校准品应该符合国家食品药品监管管理局（ SFDA ）的标准和要求；第四，试剂的稳定性，应该标明试剂盒的贮存条件与有效期，同时还要注意开瓶后试剂的贮存条件与有效期。
有特殊要求时应该明确说明；第五，检测程序，包括校准和质控的程序；第六，参考区间及其参考人群的说明，实验室给临床发报告时候，必须要给出参考区间，结果的参考区间切忌不要直接使用国外人群的参考值，不能代表中国人群的实际情况。
第七，诊断性试剂的性能评估，它的准确性对临床诊治疾病非常重要。
评估包括试剂的敏感性、特异性、精密度、线性范围或可报告范围、抗干扰能力、准确性、溯源性、方法对比结果等；第八，注意事项，应该注明是体外诊断用，以及化学品危害的说明等。
二、实验方法和标准品的选择实验方法根据准确度与精密度的不同，可以分为三级，即：决定性方法（一级参考方法）、参考方法（二级参考方法）和常规方法（厂家选定方法和终用户实验室常规方法）。
（一）标准品的分级标准品可以分为一级标准品（一级参考物质）、二级标准品（二级参考物质）和校准品，前两级是国家认可的，它有标准物质证书。
临床常用生化检验项目参考区间 第4部分
临床常用生化检验项目参考区间第4部分一、胆红素1.总胆红素总胆红素（TBil）是血浆中溶于乙醚和醇类的血红蛋白的代谢产物。
在红细胞被破坏后，血红蛋白被分解为胆红素。
正常情况下，总胆红素的参考值是5.1～17.1μmol/L。
2.直接胆红素直接胆红素（DBil）是胆红素的一种结合形式，这些胆红素结合在胆红素葡萄糖醛酸在肝脏的合成过程中合成的，因此也称为结合胆红素。
正常情况下，直接胆红素的参考值是0～6.8μmol/L。
二、白蛋白白蛋白（ALB）是人体重要的循环蛋白之一，占血浆蛋白总量的60%～70%。
它在维持胶体渗透压、调节血容量和维持酸碱平衡等方面发挥着重要作用。
正常情况下，白蛋白的参考值是40～55g/L。
三、球蛋白球蛋白是一类血浆蛋白质，包括α-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等。
球蛋白在免疫系统中发挥着重要的作用，对机体的抗菌、抗毒、免疫调节等起重要作用。
正常情况下，球蛋白的参考值是20～30g/L。
四、碱性磷酸酶碱性磷酸酶（ALP）是一种由肝脏、骨骼和肠道组织产生的一种酶，对体内的磷酸酯水解反应起着促进作用。
它在内分泌调节、骨代谢和肝胆疾病中具有重要作用。
正常情况下，碱性磷酸酶的参考值是40～150U/L。
五、尿素尿素是由肝脏合成的氮化合物，主要起着氮化合物的清除和排泄的作用。
尿素的浓度受肾功能、蛋白质摄入、代谢情况的影响。
正常情况下，血清尿素的参考值是3.2～7.5mmol/L。
六、肌酐肌酐（Cr）是由肌肉代谢生成的代谢产物，在肾小球滤过后由肾小管分泌和排泄，因此肌酐的水平可以反映肾小球滤过率。
正常情况下，血清肌酐的参考值是60～110μmol/L。
七、钠钠是维持机体渗透压和酸碱平衡的重要离子之一，对细胞膜的稳定、神经和肌肉的兴奋性起着重要的作用。
正常情况下，血清钠的参考值是135～145mmol/L。
八、钾钾是机体内的主要阳离子之一，对细胞内外的渗透压、神经和肌肉细胞的兴奋性等方面发挥着重要作用。
临床生物化学检验-第5章 常用分析技术
(affinity chromatography)
19
离子交换层析 (ion exchange chromatography, IEC)：是依据各种离子或离子 化合物与固定相离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的方法。
色谱技术 ，发现了液-液即分配色谱法
固定相-
流动相-
20世纪60年代高效液相色谱，high performance liquid chromatography即HPLC
16
1. 按流动相种类分类
气相层析
液相层析
超临界流体 层析 电层析
气体
液体
超临界流体 缓冲溶液、 电场
挥发性有机物
可以溶于水或 有机溶剂中的 各种物资
20
高效液相层析法 (high performance liquid chromatography，HPLC)： 是在经 典液相色谱和气相色谱的基础上发展起来的分析技术。 由于高效固定相填料颗粒小而 均匀（1.7~10μm） ，会引起高阻力（小颗粒具有高柱效），因此采用高压输液泵输送 流动相 ，可大大加快分析速度 ，故又称高压液相层析法。
临床应用：作为参考方法测定钙、镁定值或建立新常规方法作比较试验。 优点： 灵敏度高、选择性好、分析速度快。 缺点：需校准物、分析条件要求高、操作较复杂、测定每一种元素需特 定的空心阴极灯、有些反应的显色剂本身的颜色会影响测定的专一性。
8
1. 校准曲线法：以校准物浓度（系列浓度）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线 ，在相同条件 下测定待测样品 ，然后在标准曲线上查找待测物质浓度。影响因素较多 ，每次需绘制新标准曲线。
临床常用生化检验项目参考区间第4部分
临床常用生化检验项目参考区间第4部分临床常用生化检验项目参考区间第4部分1. 介绍在临床医学中，生化检验是一项重要的诊断工具。
通过对人体生理和病理状态下的生物标志物进行定量分析，可以帮助医生评估患者的健康状况、确定疾病的类型和程度，并监测治疗的效果。
然而，仅有生化指标的数值是不足以做出准确诊断的，还必须将其结果与正常参考区间进行比较。
2. 什么是参考区间参考区间是指某一生化指标在正常人群中的数值范围。
通过对大量正常人群进行统计分析，可以确定出该指标的上限值和下限值。
在临床实践中，医生将患者的检验结果与参考区间进行对比，进而判断其健康状态。
3. 临床常用生化检验项目参考区间的意义临床常用生化检验项目参考区间的确定对于诊断和监测疾病非常重要。
参考区间的建立依赖于大样本的统计分析，能够较为准确地反映出正常人群的生化指标水平范围。
如果患者的检测结果超出参考区间，可能意味着其健康出现问题。
4. 临床常用生化检验项目参考区间的制定方法临床常用生化检验项目参考区间的制定过程相对复杂。
需要收集一定数量的正常人群的生化检验数据。
然后通过统计学方法，计算出各指标的上下限值。
通过多中心研究的验证，确定最终的参考区间范围。
5. 临床常用生化检验项目参考区间的应用临床医生根据参考区间可以判断患者的生化指标是否正常。
如果患者的生化指标超出了参考区间的范围，可能意味着患者存在潜在的健康问题。
此时，医生可以进一步分析患者的病史、临床表现和其他检查结果，以确定是否需要进一步的诊断和治疗。
6. 个人观点和理解在我看来，临床常用生化检验项目参考区间对于现代医学的发展起到了重要的推动作用。
通过对大量正常人群的数据进行分析，参考区间的制定使得医生可以准确、客观地评估患者的健康状态。
参考区间的应用也有助于提高医疗资源的利用效率，将更多的关注点放在异常数值的患者身上，从而提高诊断的准确性和效率。
总结回顾：临床常用生化检验项目参考区间是衡量患者生化指标正常与否的重要依据。
生化检验项目
生化检验项目生化检验项目是一项重要的医学检验方法，用于评估人体的生理功能和疾病状态。
本文将详细介绍生化检验项目的标准格式，包括项目名称、检验原理、样本要求、参考范围和临床意义等内容。
一、项目名称：生化检验项目二、检验原理：生化检验项目通过测定体液中的生物化学物质的含量或者活性来评估人体的生理功能和疾病状态。
常用的生化指标包括血糖、血脂、肝功能、肾功能、电解质、血清蛋白、酶类等。
三、样本要求：1. 血液样本：普通采用静脉血，需空腹采样或者根据具体项目要求选择适当的采样时间。
采样前需告知患者避免进食、饮水和剧烈运动，以避免结果的干扰。
2. 尿液样本：普通采用早晨第一次排尿的中段尿，需注意尽量避免尿液中的杂质污染。
四、参考范围：参考范围是根据正常人群的检验结果进行统计分析得出的一组数值范围。
不同性别、年龄和生理状态的人群参考范围可能有所差异，具体参考范围应根据实验室的参考值表进行解读。
五、临床意义：1. 血糖：用于评估糖尿病的患病程度和操纵情况。
2. 血脂：用于评估血脂异常的风险，如高胆固醇血症、高甘油三酯血症等。
3. 肝功能：用于评估肝脏疾病，如肝炎、肝硬化等。
4. 肾功能：用于评估肾脏疾病，如肾炎、肾结石等。
5. 电解质：用于评估电解质平衡情况，如钠、钾、钙、镁等离子的含量。
6. 血清蛋白：用于评估机体的营养状况和免疫功能。
7. 酶类：用于评估特定器官或者组织的损伤情况，如心肌酶、肝酶等。
六、注意事项：1. 严格按照标本采集、保存和运输的规范操作，以确保结果的准确性。
2. 结果的解读应综合临床症状和其他检查结果进行综合分析。
3. 部份检验项目可能需要特殊的仪器和试剂，实验室应具备相应的设备和技术人员。
4. 检验结果可能受到个体差异、药物干扰、实验方法等因素的影响，应谨慎解读。
综上所述，生化检验项目是一项重要的医学检验方法，通过测定体液中的生物化学物质的含量或者活性来评估人体的生理功能和疾病状态。
标准格式的生化检验报告应包括项目名称、检验原理、样本要求、参考范围和临床意义等内容。
生化检验项目
生化检验项目生化检验项目是一种常见的医学检验方法，用于评估人体内各种生化指标的水平，以帮助医生判断身体的健康状况和诊断疾病。
本文将详细介绍生化检验项目的常见指标及其参考范围。
1. 血常规指标：- 白细胞计数：正常参考范围为4.0-10.0 × 10^9/L，用于评估身体的免疫功能和感染情况。
- 红细胞计数：正常参考范围为4.2-5.8 × 10^12/L，用于评估贫血和血液循环情况。
- 血红蛋白：正常参考范围为130-175 g/L，用于评估贫血和氧气输送能力。
- 血小板计数：正常参考范围为125-350 × 10^9/L，用于评估血液凝固功能和出血倾向。
2. 肝功能指标：- 谷丙转氨酶（ALT）：正常参考范围为5-40 U/L，用于评估肝脏功能和肝细胞损伤程度。
- 谷草转氨酶（AST）：正常参考范围为8-38 U/L，用于评估肝脏功能和肝细胞损伤程度。
- 总胆红素：正常参考范围为3.4-17.1 μmol/L，用于评估胆道功能和肝胆系统疾病。
- 白蛋白：正常参考范围为35-55 g/L，用于评估肝脏合成功能和营养状况。
3. 肾功能指标：- 尿素氮（BUN）：正常参考范围为2.5-8.0 mmol/L，用于评估肾脏排泄功能和氮代谢情况。
- 肌酐：正常参考范围为53-115 μmol/L，用于评估肾脏滤过功能和肾小球功能。
- 尿酸：正常参考范围为150-420 μmol/L，用于评估尿酸代谢和痛风风险。
4. 血脂指标：- 总胆固醇：正常参考范围为3.6-5.2 mmol/L，用于评估血液中胆固醇水平和心血管疾病风险。
- 甘油三酯：正常参考范围为0.56-1.70 mmol/L，用于评估血液中脂肪代谢和心血管疾病风险。
- 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：正常参考范围为0.9-1.5 mmol/L，用于评估血液中良好胆固醇水平。
- 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：正常参考范围为2.07-3.10 mmol/L，用于评估血液中不良胆固醇水平和心血管疾病风险。
临床常用生化检验项目参考区间 第4部分
临床常用生化检验项目参考区间第4部分（原创版）目录1.引言2.临床常用生化检验项目参考区间的范围和应用3.规范性引用文件4.参考区间的验证5.结论正文1.引言在医疗卫生机构临床实验室中，生化检验项目是常用的一种检验方法，其检验结果的准确性和可靠性对于诊断和治疗疾病具有重要意义。
为了保证生化检验项目的质量，我国制定了一系列参考区间标准，本文主要介绍临床常用生化检验项目参考区间第 4 部分：血清三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺激素。
2.临床常用生化检验项目参考区间的范围和应用本标准规定了中国成人血清甲状腺相关激素的参考区间及其应用。
本标准适用于医疗卫生机构临床实验室血清三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺激素检验结果的报告和解释，有关体外诊断产品生产厂商也可参照使用。
3.规范性引用文件本标准的制定参考了以下文件：- WST 402-2012 临床实验室检验项目参考区间的制定- NCCLS-C28-A2 关于临床实验室如何确定和建立生物参考区间4.参考区间的验证参考区间的验证是一个复杂的过程，包括精密度、正确度、线性和可报告范围的验证。
验证参考区间的过程需要使用明确标准选择的参考个体进行检验，从参考人群中选择足够数量的个体组成参考样本组，通过对参考样本组进行检验获得参考值，然后对参考值进行分布分析，根据分布参数建立参考限，最后确定参考区间。
5.结论本标准规定了临床常用生化检验项目参考区间第 4 部分：血清三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺激素的参考区间及其应用，为临床实验室检验结果的报告和解释提供了参考。
临床生化检查操作方法
临床生化检查操作方法临床生化检查是临床医学中常用的一种检查手段，通过对患者的血液、尿液、体液等样本进行化学成分的检测，以及相关酶、蛋白质和代谢物的定量分析，从而获得临床诊断和治疗的重要信息。
操作方法的规范性和准确性对于检查结果的可靠性至关重要。
以下是临床生化检查的操作方法的详细介绍。
一、采集标本：1. 血液标本的采集：采用无菌操作技术，首先对患者进行适当的准备工作，观察采血部位的皮肤是否有感染或者受伤，选择最佳的采血部位，用75%酒精或碘伏消毒皮肤。
待消毒液干燥后，将采血针插入血管，并用一次性注射器采集适量的血液样本。
2. 尿液标本的采集：让患者进行体位改变，取晨尿或者全天的尿液作为标本。
在采集前，要让患者对尿液容器和个人卫生进行准备，然后清洁外生殖器，用无菌尿杯收集尿液。
3. 其他体液标本的采集：根据具体的实验要求进行操作，家居情况下由专业医务人员进行操作。
二、标本处理：1. 血液标本的处理：采集完成后，将血液标本转移到干净的试剂管中，并用适当的抗凝剂处理，如EDTA、肝素等。
对于需要血清的检查，应该在样本凝固后离心分离血清。
2. 尿液标本的处理：将采集的尿液标本转移到干净的试剂管中，进行适当的处理，如稀释、离心、沉淀等。
根据实验目的的不同，处理方法也会有所不同。
3. 其他体液标本的处理：根据具体的实验操作要求，进行相应的标本处理。
三、检测操作：1. 准备实验物品：准备所需的试剂、仪器和耗材等实验物品，并按照相关规范对其进行检验和校准。
2. 样本的加样：将处理好的标本加样到相应的检测仪器中，注意加样的数量和质量以及操作的规范性。
3. 实验操作：按照实验操作手册的要求，进行相应的实验操作，如温度、时间、反应物的加入顺序等方面的操作要求。
4. 数据记录：记录实验操作的过程和结果，包括样本的编号、操作的时间、试剂和仪器的规格、结果的数字和单位等。
四、结果分析和报告：1. 结果分析：对实验获得的数据进行分析，比对参考值，并结合患者的临床资料进行结果的解释。
临床生化检验方法与试剂盒评价 医学课件
第二十一章 临床生化检验方法与试剂盒评价
（二）检测系统比对的实施步骤
①制订分析质量目标 ②仪器性能评价
③确定对比检测系统 ④初步评价检测系统
⑤比对
步内 骤容
可接受性判断
第23页
允许不精密度、允许 偏倚和允许总误差
准确度和精密度
参考系统或 公认的测定系统
性能指标
40-100例
测定系统的关键要素
第19页
第二十一章 临床生化检验方法与试剂盒评价
2.对仪器性能进行评价 保证仪器处于良好 的工作状态，具备可接受的精密度和准确 度。 3. 确定对比检测系统 比如具有溯源文件 的HK法测定血糖的配套检测系统，并对该 检测系统的性能进行验证，核实其准确度 和精密度。
第20页
第二十一章 临床生化检验方法与试剂盒评价
第29页
第二十一章 临床生化检验方法与试剂盒评价
三 方法学评价实验
美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）于2005年更 名为临床和实验室标准研究院（CLSI）。制订了一系列评 价方案（evaluation protocols，EP），包括: 临床化学设备精密度评价（EP5-A） 定量分析方法的线性评价（EP6-A） 干扰试验（EP7-A） 方法对比评价及偏差评估（EP9-A2） 定量方法的初步评价（EP10-A2） 定性方法的评价（EP12-A） 基质效应评价（EP14-A）、。 EP不仅可用来评价临床生物化学检验方法性能，也可用以 评价试剂盒和分析仪器的性能。
标准计量局、参考实验室、试剂盒供应
商、临床实验室
3
保证仪器良好的工作状态、严格的操作
规程和质量控制、实验室内部测定系统
的比对、实验室间的比对
第25页
临床生化检验方法的选择和评价课件
29
测定方法结果 差异（试验－比较）
零 线
比较方法结果
差异分析图
比较方法结果
对比分析图
30
❖2．回收试验 所谓回收即分析方法正确 测定加入常规分析样品中的纯分析物的 能力。目的是测定比例系统误差，以衡 量候选方法的准确度。 （1）方法：将被分析的纯品标准液加 入样品中，成为分析样品，原样品加入 同量的无分析物的溶液作基础样品，然 后用实验方法分析，两者测定结果的差 值为回收量。
2种方法分别作双份测定，如临床标本 的量太少可将2份含量相近的标本混合。 ❖ ②每天测定8个标本，双份测定时第一 次按顺序1，2……7，8，第二次8， 7……2，1，共测试5天。
28
结果分析
(1)作图分析 1)差异分析 2)对比分析
–– 差异图: Y轴:试验方法与比较方法之差 X轴:比较方法的测定值 –– 对比图:
❖方法学评价（evaluation of methodology）通过实验途径测定分析 方法的技术性能，并评价其是否能接 受。 评价实验的过程就是对误差的测定。
14
主要的方法技术性能指标： 准确度(accuracy) 灵敏度(sensitivity) 特异度(specificity) 分析测量范围(analytical measure range, AMR)评价实验的过程就是对误 差的测定。
④干扰可能是造成误差的一个重要原因， 如果干扰物是恒定的将引起恒定误差， 如干扰物随病理生理因素影响，将引起 随机误差。
因此，实验室应了解各种测定方法的干扰 情况
38
❖ 2．试验前准备 ❖ ①应做的主要干扰物为病人标本中常常
出现的黄疸，脂血和溶血；某些药物如 维生素C等；实验常用的抗凝剂，防腐 剂和稳定剂。 ❖ ②质量保证，不存在系统误差；批内精 密度在可接受范围内；应不存在前后结 果的交叉污染；实验过程有质控监督。
临床生化实验方法的选择和评价
引起原因：
方法误差：最严重、最难避免的误差，是 方法的分析性能所固有的缺陷所致。可通 过方法的选择和评价来减少。
仪器和试剂误差：常见仪器波长未校准， 量器不准，试剂质量差等。
2）随机误差（random error，RE）：
试验形式与方法 (1)批内重复性试验：用同一份标本在短时间内用候选 方法作多次(一般20次)重复测定。 (2)日内重复性试验：在一天内对一个或数个标本作数批 重复测定。 ( 3)日间重复性试验：将同一标本分成数份，按方法每
3）灵敏度：化学反应中能检出的最小量。
4）特异性：分析测定中只对某一成分起反应， 其他物质对反应毫无影响或基本无影响。
5）线性范围：实验方法所能检测标本中某物质 的浓度范围。
（二）方法评价实验 1、重复性实验：实验的目的是检测候选方法的随机误 差。方法是对同一材料(标准液、质控液、标本等)分成 数份试验标本进行多次分析测定
2、实验误差 实验误差：测定值与真值之差 1）系统误差（systematic error， SE） ：一系列分析测 定的结果对真值或靶值存在有同一倾向的偏差。一般 由恒定因素引起，重复测定，重复出现，消除系统误 差可提高测定的准确度。 分为：
恒定误差：由干扰物引起的使测定值与真值存在的误 差，与干扰物浓度相关，与被测物浓度无关。
火焰光度法 火焰光度法 免疫化学法 双缩脲法 离子交换层析法 尿素酶法 尿酸酶法（紫外法） 重氮反应法 己糖激酶法
Abell-Kendall法，胆固醇氧化酶法
酶法 MDH-NADH法 LDH-NADH法 连续监测产物生成法 NAD+偶联法
2、标准品的分级
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
RELA-2007
比对样品：A、B两水平，每水平个5瓶。 比对结果：2008年5月中旬报告
血清尿素
方法
（1）以[13C,15N2]尿素为内标 （2）用无水乙醇沉淀、去除血清中的蛋白类物质 （3）依次使用丙二醛-二甲基缩醛和N-甲基-(三甲 基硅烷基)-三氟乙酰胺（MSTFA）将尿素衍生成 为三甲基硅烷氧基嘧啶 （4）用GC/MS分析衍生产物，以包括法定量
临床生化检验参考方法 建立的工作进展
张天娇 卫生部临床检验中心
工作背景
检验结果的准确性和可比性已受到广泛的重视，
提高和保证检验结果的准确性和可比性的有效手 段是开展量值溯源工作，而检验量值溯源的基础 是参考系统。
临床检验参考系统包括参考方法、参考物质和参
考实验室，其中参考方法是关键，参考物质由参 考方法定值，参考实验室是运行参考方法的实验 室。
血清肌酐
拟参加相关国际比对：RELA-2008
其他重要项目参考方法的建立
血清胆固醇
HPLC法 ID-GC/MS法 ID-LC/MS/MS法 血清总甘油三酯 HPLC法 ID-LC/MS/MS法 脂蛋白类 超速离心-HPLC法 酶学 无机离子：血清钠 ICP-MS 法
总结
已基本完成参考方法建立的项目
美国国家标准和技术研究所 NIST 中国计量科学研究院 NIM/NRCCRM 德国国家计量研究院 PTB 日本国家计量研究院 NMIJ 韩国标准与科学研究所 KRISS 新西兰惠灵顿医院 Wellington Hospital，New Zealand
比对样品
• 冰冻人血清（每种5ml×4瓶） 男性血清：正常成年男性 女性血清：正常成年、非绝经期女性 •每种血清中的3瓶供正式测定 余下1 瓶用于预实验或结果的验证
NMIJ（日本） Wellington Hospital 0.063 (新西兰) KRISS（韩国）
比对结果— — 女性血清
比对结果— — 男性血清
CCQM-K66b
2007年进行，由美国NIST发起，参加机构包括
美国国家标准和技术研究所 NIST 中国计量科学研究院 NIM/NRCCRM 德国国家计量研究院 PTB 日本国家计量研究院 NMIJ 英国政府化学家实验室 LGC 墨西哥国家计量科学研究院 CENAM 澳大利亚国家计量科学研究院 NMIA
完成血清葡萄糖、尿酸参考方法的建立 完成血清甲状腺素、雌二醇、皮质醇参考
方法的建立 参考方法的应用工作
谢计划资助项目
（2007BAI05B09） 国家863计划资助项目 (2006AA020909)
工作背景
检验项目 1、代谢物类：胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素 2、离子类：钠、钾、氯、钙、镁 3、酶学类：丙氨酸氨基转移酶、 -谷氨酰转移酶、天门冬氨酸 氨基转移酶、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶 4、非肽激素类：T3、T4、孕酮、雌二醇、皮质醇 5、脂蛋白类：高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇 （共约24项）
血清孕酮
方法学评价
（1）精密度： 血清孕酮测定的总变异系数为0.69%～2.12% （2）回收率： 平均分析回收率为98.3%～100.1%。 （3）参考物质分析: 分析血清孕酮标准物质ERM-DA347，测定结 果 与靶值得偏差小于1.5% 。
血清孕酮
参加国际比对的情况
CCQM-P77b（与中国计量科学研究院合作） CCQM-K63b（与中国计量科学研究院合作） RELA-2007
CENAM（墨西哥）
ID-GC/MS ID-C/MS/MS ID-C/MS/MS ID-GC/MS ID-C/MS/MS ID-C/MS/MS ID-GC/MS ID-GC/MS
KRISS（韩国） LGC（英国） NIM（中国） NIST(美国) NMI（澳大利亚） NMIJ（日本） PTB（德国）
a：肌酐；b：内标 图 LC/MS/MS分析肌酐和内标的色谱图
血清肌酐
与干扰物质肌酸的分离
a：肌酸；b：肌酐 图4 LC/MS/MS测定肌酐与肌酸的色谱图
血清肌酐
方法学评价 （1）精密度： 批内、批间和总变异系数的平均值分别为0.57%（ 范 围0.52%～0.61 %）、0.43%（范围0.11 %～0.59 %）和 0.73%(范围0.62%～0.83 %)。 （2）回收率： 加样回收试验的回收率范围为99.09%～101.13%。 （3）参考物质分析： 分析两种参考物质SRM 909b和SRM 967b，测定结果 与认定值的偏差小于0.4%。
血清尿素
方法学评价 （1）精密度： 批内、批间和总变异系数的平均值分别为0.38%（ 范 围0.12%～0.47 %）、0.62%（范围0.49 %～0.87 %） 和0.73%(范围0.51%～0.93 %)。 （2）回收率 回收试验的回收率范围为99.37 ～100.95%。 （3）参考物质分析： 分析美国国家标准和技术研究院（NIST）2个水平的 血清标准物质SRM909b，测定结果与靶值的偏差小于 0.2%
1、代谢物类：胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素 2、离子类：钠、钾、氯、钙、镁 3、酶学类：丙氨酸氨基转移酶、 -谷氨酰转移酶、天门冬氨酸 氨基转移酶、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶 4、非肽激素类：T3、T4、孕酮、雌二醇、皮质醇 5、脂蛋白类：高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇
下一步工作计划
同位素稀释/色谱/质谱联用技术
目前国际公认的可准确测定小分子化合物的方法 可用于一级参考测量过程的测量原理 同位素内标 “ 理想” 的内标物，与待测物没有结构上的差异 色谱/质谱联用测定系统 高特异性 高灵敏性
色谱/质谱联用测定系统
气相色谱/质谱联用系统 Agilent 6890 N /5975 MSD
比对结果— — 女性血清
参与实验室 NIST（美国） NIM（中国） PTB（德国） NMIJ（日本） Wellington Hospital (新西兰) KRISS （韩国） 测定结果 标准不确定度 扩展不确定度 （ng/g） （ng/g） （ ng/g）
1.876 1.90 1.946 2.26 1.75 0.023 0.02 0.025 0.043 \ 0.047 0.04 0.061 0.087 \ 未报回数据
国际计量局物质量咨询委员会（CCQM）
•由国际计量局（BIPM）国际计量委员会于1993年成立 包括35个会员和观察员组织 •下设7个工作组 ，每年召开两次工作会议 •针对不同领域，每年开展多项国际间比对活动
CCQM-P77b
2006年进行，由美国NIST发起，参加的机构包括
分析方法
ID-LC/MS/MS ID-GC/MS ID-GC/MS ID-LC/MS/MS 免疫分析法
比对结果— — 男性血清
参与实验室 NIST（美国） NIM（中国） PTB（德国） 测定结果 标准不确定度 扩展不确定度 分析方法 （ng/g） （ng/g） （ng/g） 0.0402 0.0032 0.0063 ID-LC/MS/MS 0.045 0.003 0.006 ID-GC/MS 未报回数据 未报回数据 \ \ 未报回数据 免疫分析法
比对样品
• 冰冻人血清（每种 5ml×4瓶） 女性血清：正常成年、非绝经期女性 • 每种血清中的3瓶供正式测定 余下1 瓶用于预实验或结果的验证
比对结果
参与实验室 测定结果 （ng/g ） 3.15 2.891 2.74 2.88 2.806 2.799 2.85 2.834 标准 不确定度 （ng/g ） 0.12 0.0846 0.04 0.04 0.035 0.038 0.031 0.038 扩展 不确定度 （ng/g） 0.23 0.1861 0.09 0.08 0.07 0.076 0.063 0.085 分析方法
血清尿素
参加国际比对
RELA-2007
血清肌酐
方法
（1）以[2H3]肌酐为内标， （2）用无水乙醇沉淀血清中的蛋白质 （3）用氯仿纯化 （4）用液相色谱串联质谱（LC/MS/MS）分离测定 （5）以包括法定量。
血清肌酐
图
肌酐和内标一级全扫描质谱图和主要相关离子图
血清肌酐
图 肌酐[M+H]+离子（母离子）二级全扫描质谱图和主要子离子图
血清孕酮
CH3 C O
HFBA
CH3 C O
O O F7C3 C O
(Ⅰ)
(Ⅱ)
(Ⅰ) 孕酮(孕甾－4烯-3，20－二酮) (Ⅱ) 孕酮衍生产物（孕甾-3，5-二烯-20-酮-3-七氟丁酸酯） 图：孕酮和内标的衍生化
血清孕酮
1. 孕酮 2.内标 图3同位素稀释/气相色谱/质谱法测定血清孕酮（A）和内标（B）色谱图
Progesterone, ng/g
2.7 2.8 2.9 3.0 3.1 3.2 3.3
比对结果
LGC
NMIA
NIST
PTB
NMIJ
NIM
KRISS
CENAM
RELA-2007
2003年，国际临床化学联合会（IFCC）为配合检验医学 溯源联合会（JCTLM）的工作，与德国临床化学会 （DGKL）共同发起的环形比对试验（Ring-trial），每年 进行一次。 参加2007-RELA激素类比对
色谱/质谱联用测定系统
液相色谱/串联质谱系统
高效液相色谱仪Agilent 1200和串联三重四极杆质谱仪API 4000
血清孕酮
方法
（1）以[3,4-13C2]孕酮为内标，用正己烷提取血清 （2）以羟丙基-β-环糊精水溶液对提取液作净化处理 （3）用七氟丁酸酐对孕酮进行衍生化 （4）用气相色谱分离衍生产物，质谱选择离子监测模 式检测孕酮与内标的特定碎片离子 （5）包括法定量