细菌生化微量鉴定管实验结果判定说明
细菌生化微量鉴定管实验结果判定说明
培养后放置4℃5-10分钟若流动为阳凝固为阴
DNA
无色
亮绿色
24
用于肠杆、弧菌，其他建议使用DNA琼脂法
丙二酸盐
蓝色
绿色
24-48
葡萄糖酸盐
橙红色
不变色
24-48
加班氏试剂一滴沸水煮10分钟观察
酒石酸盐
黄色
黄绿色
18-24
每隔12小时观察一次
硝酸盐
还原
红色
不变色
18-24
加还原试剂甲、乙各一滴变红为阳
不变色
10秒
用灭菌牙签刮取菌苔于氧化酶湿试纸上
氧化酶试剂
红→紫黑色
不变色
10-30秒
用滤纸蘸取细菌滴加试剂观察变化
鸟氨酸脱羧酶
褐色
紫色
黄色或不变
18-24
接种对照管一支，并在每管液面加石蜡：对照变黄色，试验管变紫色为阳性；如均变色或不变色为阴性均变紫色需延长观察时间如仍不变色实验无意义
赖氨酸脱梭酶
紫色
加靛基质试剂一滴接触处出现红色为阳性，不变色为阴性含1%NaCl为弧菌科细菌鉴定专用使用方法相同
葡萄糖磷酸盐
胨水（MR、VP用）
红色
不变色
24-48
加MR试剂一滴即可观察结果。加VP甲液两滴、VP乙液一滴放35℃两小时观察1%ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱaCl为弧菌科专用
西蒙氏枸橼酸盐
绿色
蓝色
绿色
24-48
含1%NACl为弧菌科专用使用方法相同
β-半乳糖苷（ONPG）
绿色
深黄色
无色
18-24
接种量要大产生黄色深浅不同加深为阳性
七叶苷
绿色
棕黑色
临床常见细菌手工鉴定和结果判断
临床常见细菌的手工鉴定和结果判断一．细菌的鉴定步骤1、鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。
2、对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。
（我们这里一般都是预先纯化培养）+––+b）G，G，c，对待鉴定的菌种进行革兰染色，3、观察形态（Gc，Gb做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。
要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好，参考鉴定质控单。
4、按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。
另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。
5、复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。
⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。
首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变细菌对染料的通透性）。
第一步：以结晶紫初染（染色液Ⅰ）第二步：以卢戈氏碘液媒染（染色液Ⅱ）乙醇脱色（染色液Ⅲ）95%第三步：用．第四步：最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ）⑵．触酶实验(HO实验)：22a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。
b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。
要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进行实验。
c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。
d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，链球菌属阴性。
临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。
⑶．氧化酶实验（Kovac实验）：a. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
全自动微生物分析系统与细菌微量生化管鉴定细菌的结果分析
中 图分类 号 ：Ｒ ４ ４ ６ ． ５
文献标 识 码 ：Ｂ
文章 编号 ：１ ６ ７ １ － ８ １ ９ ４（ ２ ０ １ ７ ）０ ３ － ０ １ ２ ７ 一
近年 来 ，高速 发展的 电子 计算机技术逐 渐渗透并应 用于 自然科学 的每一个领 域 ，微生物 的检测鉴定技 术也 已逐步 由手 工检测走 向仪器
交流 、精细 动作 、大 运动及 适应性 评分 明显优于对 照组儿 童，２ 组 对 比差异存在统计学 意义 （ Ｐ ＜ Ｏ ． ０ ５ ）。
细菌生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明
细菌生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明细菌生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明名称结果判定培养时间（小时）注释阳性阴性各类糖（醇、苷）类黄色紫色或不变色18-24根据指示剂不同，如颜色不边为阴性。
非发酵细菌糖类黄色紫色24-48 供非发酵细菌鉴定用。
葡萄糖氧化-酵（OF）葡萄球菌OF 黄色黄色紫色紫色24-4824-48同时接种两支生化管，一支加入灭菌石蜡，覆盖液面，如两支均变黄色，为发酵型（F）；加石蜡管不变色，另一支变黄色，为氧化型（O）；如两支均不变色，为对糖不利用（NR0-）β-半乳糖苷（ONPG）深黄色无色4-18接种菌量要大，产生黄色深浅有不同，黄色加深即为阳性。
七叶苷棕黑色不变色18-24链球菌如阴性反应，需继续观察至第3天。
胆汁七叶苷棕黑色不变色18-24链球菌如阴性反应，需继续观察至第3天。
美蓝牛乳白色蓝色18-24 适用于肠球菌属、链球菌属的鉴定。
蛋白胨水（靛基红色不24-48 加靛基质试剂1滴，接触处出现红色质用）变色为阳性，不变色为阴性。
含水1%Nacl 作弧菌科细菌鉴定用，使用方法相同。
葡萄糖磷酸盐胨水（MR、VP用）红色不变色24-48加MR试剂1滴，即可观察结果。
加VP甲液2滴、VP乙液1滴放35℃孵箱孵育2小时后观察。
含1%Nacl作弧菌科细菌鉴定用，使用方法相同。
西蒙氏枸橼酸盐蓝色绿色24-48含1%Nacl作弧菌科细菌鉴定用，使用方法相同。
尿素红色黄色8-24 使用于尿素分解的细菌。
硫化氢黑色不变色18-24 硫酸亚铁法。
乙酰胺红色黄色24-48如阴性，应继续培养至颜色不加深，才可确认。
硝酸盐胨水（霍乱红用）红色不变色6-24 加浓硫酸1滴。
苯丙氨酸脱氨酶蓝绿色不变色18-24加10%Fecl31滴，在表层产生蓝绿色为阳性。
氧化酶试纸红→紫黑色不变色10秒用灭菌牙签刮取菌苔于氧化酶湿纸片上。
氧化酶试剂红→紫黑色不变色10-30秒将试剂滴于18-24小时培养的菌落上，观察颜色变化，本试剂配好后储冰冻室内可保存2周。
微生物检验报告单的解读
微生物检验报告单的解读微生物检验报告单是一份重要的医学报告单，它能够帮助医生和患者了解身体内存在的微生物，特别是病原菌的种类和数量。
在医疗实践中，微生物检验是一种常见的实验室技术，它能够有效地帮助医生对疾病进行诊断和治疗。
因此，了解如何正确解读微生物检验报告单对于医生和患者来说都是至关重要的。
微生物检验报告单的内容通常包括样品的来源、实验室检测方法、微生物的种类和数量、微生物对不同抗生素的敏感性以及解释和建议。
在得到微生物检验报告单后，医生和患者应该按照以下步骤进行解读和操作：1. 确定检测的类型和样品来源微生物检验通常是通过分离、培养和鉴定样品中的微生物来进行的，因此需要先确定检测的类型和样品来源。
例如，常见的微生物检测类型包括血液、尿液、粪便、脓液、呼吸道分泌物、培养物等。
在得到微生物检验报告单后，需要检查样品来源和检测类型是否符合实际情况。
2. 确认微生物的种类和数量微生物检验报告单会列出样品中存在的微生物种类和数量，并且会将它们分类为正常菌群或病原菌。
在得到微生物检验报告单后，需要检查微生物种类和数量是否符合正常范围，并且需要特别关注病原菌的种类和数量是否超过了正常范围。
3. 了解微生物对不同抗生素的敏感性微生物检验报告单会列出不同抗生素对样品中微生物的敏感性，这对于临床治疗非常重要。
在得到微生物检验报告单后，医生和患者需要了解微生物对哪些抗生素敏感，以便在治疗时选择最合适的药物。
4. 理解解释和建议微生物检验报告单上通常会列出解释和建议，这些内容是医生和患者进行治疗的重要参考资料。
在得到微生物检验报告单后，需要仔细阅读解释和建议，理解并遵循相应的指引。
综上所述，微生物检验报告单的解读对于医生和患者来说都是非常重要的。
在得到微生物检验报告单后，需要按照上述步骤进行解读和操作，并且需要结合临床情况进行治疗。
另外，需要注意的是，微生物检验是一种比较复杂的实验室技术，需要在专业实验室进行，因此在选择检测机构时需要选择正规、专业、可靠的实验室。
怎么解读细菌学检验报告
怎么解读细菌学检验报告细菌学的检验报告是进行体检的常见报告。
作为一名医生，在日常生活中也有许多朋友拿着报告来问我应该如何看懂，今天就为大家详细解读如何来看懂一份细菌学检验报告。
正常菌群人体表面以及和外界相通的泌尿生殖道、口腔、肠道、鼻咽部等腔道中都寄居着微生物，在正常情况下对宿主有利且无害，这种微生物属于正常的微生物群，其中以细菌为主，统称为正常菌群。
人体皮肤中含有的正常菌群有白色念珠菌、丙酸杆菌、棒状杆菌、大肠诶希菌、葡萄球菌、铜绿假单胞菌、非典型分歧杆菌等。
鼻咽腔中含有梭杆菌、甲型链球菌、奈瑟菌、葡萄球菌、肺炎链球菌、丙型链球菌等。
胃部一般无菌。
肠道中含有假单胞菌、乳杆菌、破伤风梭菌、白色念珠菌、大肠诶希菌、产气荚膜梭菌、消化链球菌、变形杆菌、葡萄球菌、产气肠杆菌、真杆菌、双歧杆菌等。
口腔中含有螺旋体、表皮葡萄球菌、类杆菌、奈瑟菌、肺炎链球菌、念珠菌、丙型链球菌、梭杆菌、甲型链球菌、棒状杆菌。
阴道中含有厌氧菌、乳杆菌、大肠诶希菌、棒状球菌、念珠菌。
眼结膜中含有结膜干燥杆菌、葡萄球菌。
前尿道中含有肠球菌、葡萄球菌、非致病性废弃杆菌、棒状杆菌。
病原菌病原菌是指能够入侵宿主产生感染的微生物，包括病毒、细菌、真菌等。
按照病性能够将病原菌分为致病菌和条件致病菌。
致病菌的种类少但毒性强，条件致病菌的种类多且不断增加，毒性较弱。
临床上一般将病原菌和致病菌进行混合称呼，但病原菌的范围要明显大于致病菌。
细菌药敏试验，测试抗菌药物品种如何确定抗菌药有两百余种，药敏试验中不需要包括每一种抗菌药。
测试的抗菌药纸片种类是根据各类细菌对抗菌药的敏感性及临床可能选用药物进行确定的，同类药物一般选择一到两个代表品种。
美国临床实验室标准委员会对各种细菌的药敏试验中适合测试的药物品种机型推荐，例如测定葡萄球菌属的药敏试验中应当包括红霉素、复方磺胺甲恶唑、苯唑西林、克林霉素、万古霉素、青霉素。
同时也可以根据具体情况来增加其他品种例如呋喃妥因、环丙沙星、利福平、氯霉素、庆大霉素等。
细菌生化微量管使用说明
不生长
24-48
O-F糖、醇生化管
黄色
兰色
24-48
供非发酵细菌鉴定用。
（鸟、赖）氨酸脱羧酶
紫色
黄色
24-48
供非发酵细菌鉴定用，使用方法结果观察与发酵菌氨基酸脱羧酶相同。
血清菊糖
红色
不变色
24
石牛乳
24-72
本培养基可观察五种反应：1.产酸：呈粉红色，2.产碱：呈兰紫色；3.产气：培养基有气泡或中间断裂；4.凝固：若发酵乳糖产酸甚多，可使酪蛋白凝固；5.液化：若将凝固的酪蛋白继续水解为蛋白胨，使培养基上段变清。
UIM
（尿素、靛基质、动力）
12-24
经培养后生化管变红色为尿素阳性；动力观察与半固体琼脂相同；加靛基质试剂后上部变红色为阳性，否则为阴性。
葡萄糖酸盐
黄色或橙色
不变色
24-48
经35℃培养24-48小时后加入班氏试剂3-5滴，隔水煮沸数分钟观察结果。
明胶
4℃呈液态
4℃呈固态
48-72
观察时，将其倒置，然后用手指轻轻弹动玻管，观察有无液体流动，有流动为阳性；无液体流动为阴性，夏天应置4℃10分钟后观察结果。
硫化氢
黑色
无黑色
6-24
尿素
红色
黄色
12-24
粘液酸
黄色
兰色
12-24
丙二酸盐
兰色
绿色
24-48
七叶苷
棕黑色
不变色
18-24
胆汁七叶苷
棕黑色
不变色
18-24
酒石酸盐
黄色
红色
24-48
硝酸盐胨水（霍乱红试验）
红色
不变红色
24
微生实验报告 2012.12.实验十二、细菌常用生理生化反应实验结果观察测定
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察一、结果观察1、葡萄糖发酵实验直接观察试管：试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌，不变者为阴性菌。
2、V. P. 反应和甲基红试验:将培养好的液体培养基分装于两个干净的小试管中,在一管中滴入2-3滴甲基红试剂, 溶液变红的为甲基红阳性菌,不变的为甲基红阴性菌. 在另一管中加入V. P. 试剂,在37℃保温15分钟, 变红者为阳性菌,不变者为阴性菌。
3、吲哚实验在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌。
4、硝酸盐还原实验在点滴板上滴入革里斯试剂A液和B液，如过溶液变红说明有亚硝酸盐，为硝酸盐还原阳性菌，如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂，如果变蓝，说明此菌为阴性菌；如果不变色，说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌。
5、柠檬酸盐实验直接观察斜面，斜面变兰色者为柠檬酸盐利用阳性菌，不变者为阴性菌。
6、明胶水解向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌。
7、淀粉水解实验向培养好的淀粉培养基平板上加入碘液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为淀粉水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌。
8、硫化氢产生实验直接观察培养好的培养基，出现黑色沉淀者为阳性菌，不变者为阴性菌。
二、实验结果1、葡萄糖发酵实验阳性：大肠杆菌（半固体培养基变黄，左图）阴性：恶臭假单胞菌（保持紫色不变，右图）2、V. P. 反应和甲基红试验：（1）V．P．实验阳性：大肠杆菌（加入40%的KOH溶液10～20滴，再加入等量的α-萘酚溶液，放入37℃恒温箱中保温15～30分钟，培养液出现红色，右图）阴性：产气杆菌（同上操作，培养基不变色，左图）（2）甲基红试验阳性：产气杆菌（加入 M．R．试剂3-4滴后变红，左图）阴性：大肠杆菌（加入 M．R．试剂3-4滴后不变色，右图）3、吲哚实验阳性：大肠杆菌（乙醚层呈现玫瑰红色，右图）阴性：产气杆菌（左图）4、硝酸盐还原实验阳性：大肠杆菌（滴入革里斯试剂后变红，左下图）阴性：恶臭假单胞菌（滴入二苯胺试剂后变蓝，右上图）5、柠檬酸盐利用实验阳性：产气杆菌（溴麝香草酚蓝的斜面呈蓝色，右图）阴性：大肠杆菌（斜面培养基不变色，左图）6、明胶水解实验阴性：大肠杆菌（菌落周围没有出现透明圈，上图）7、淀粉水解实验阳性：枯草杆菌（加入碘液，菌落周围出现透明圈，下图）阴性：大肠杆菌（菌落周围没有出现透明圈，上图）8、产硫化氢实验阳性：变形杆菌（出现黑色沉淀，左图）阴性：大肠杆菌（未出现黑色沉淀，右图）思考题1、你的实验结果与实验预期是否相同？如果不同试分析原因。
微生物检验报告单的解读
微生物检验报告单的解读微生物检验报告单是检验实验室提供的一份关于样品中微生物检验结果的报告，通常包含样品的基本信息、微生物检验结果以及检验结果的解读。
下面是简单的微生物检验报告单解读：1. 基本信息检验报告单上通常会包含样品的基本信息，如样品编号、送检单位、样品名称、送检人、送检日期等。
这些信息有助于追溯样品的来源和提供相应的参考。
2. 微生物检验结果微生物检验结果通常以表格的形式呈现，包括具体微生物的名称、数量、检出情况以及检出限等信息。
常见的微生物检验结果包括细菌、真菌、病毒等。
每种微生物的检出情况会被标注为阳性（+）或阴性（-），阳性表示在样品中检测到了该微生物，阴性表示未检测到。
3. 检出限检出限指微生物检测的最低限度，即只有超过了这个限度才能被检测出来。
某个微生物的检出限为10 CFU/mL，意味着只有样品中含有超过10个可培养的微生物单位（例如细菌）才能被检测出来。
4. 解读结果对于每一种微生物的检测结果，报告单中通常会提供一个解读结果，用于帮助读者理解报告的意义。
解读结果可以通过以下几个方面进行解释：- 是否符合规定标准：根据相关标准或要求，判断样品的微生物数量是否符合规定标准。
对于某种食品样品，微生物数量超过了国家卫生标准的限度，那么结果可能被解读为不合格。
- 是否存在潜在风险：根据微生物的种类和数量，判断样品中是否存在潜在的健康或安全风险。
某种细菌是食品中常见的致病菌，可能会导致食物中毒，那么结果可能被解读为存在潜在风险。
- 需要进一步操作或处理：根据微生物的检出情况，判断是否需要进一步的处理或操作。
如果样品中检测到了细菌污染，可能需要进行额外的杀菌处理或改进生产工艺。
5. 建议和建议措施根据微生物检验结果和解读，报告单中通常会提供一些建议和建议措施，以帮助读者采取有效的措施来解决问题。
报告可能建议进行更频繁的清洁和消毒、改进生产工艺、更换原材料、修复设备等。
这些建议有助于保持样品的微生物质量和安全性。
细菌鉴定之生化反应
2 杆菌肽试验
原理：A群链球菌对杆菌肽几乎全敏感， 而其他链球菌则耐药 培养基：BAP 方法：同纸片法药敏0.04U/片 结果：＞10mm敏感；＜10mm耐药 意义：A群链球菌敏感
3 奥普托欣Optochin试验
原理：肺炎链球菌对Optochin敏感，其他链球 菌无抑制作用 培养基：BAP 方法：同纸片法药敏 5ug/ 5ug/片 结果：抑菌环直径＞14mm敏感；≤14mm耐药 此时加做胆汁溶菌试验证实 意义：肺炎链球菌对Optochin敏感
7 葡萄糖酸盐试验
原理：某些细菌能氧化葡萄糖酸盐作为唯一碳源，生成2-酮基葡萄 糖酸盐。加入班氏试剂，于沸水煮沸10分钟，出现砖红色沉淀，表 明有葡萄糖酸盐的存在 培养基：2-酮基葡萄糖酸盐肉汤 方法：待测菌接种于培养基，35 ℃培养18-24h，于其中加入 0.3ml浓缩班氏试剂，然后沸水中煮沸10分钟，出现砖红色沉淀表 明有葡萄糖酸盐的存在 意义：用于肠杆菌科分类
结果：在两划线交界处出现箭头样溶血区为阳性 意义：B群链球菌阳性，马红球菌出现反CAMP现象
7 胆汁溶菌酶试验
原理：胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌，使细菌发生自溶 试剂：10%去氧胆酸钠或纯牛胆汁 方法： 平板法：滴加10%去氧胆酸钠一环于被测菌落上35 ℃30min观察结果 试管法：0.9ml被测菌培养物加入10% 10%去氧胆酸钠0.1ml后置35 ℃水浴 0.1ml 35
5 V-P试验
原理：细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，后者脱羧产生乙酰甲基甲醇， 乙酰甲基甲醇在碱性环境中被氧化为二乙酰，进而与培养基中蛋白 胨内精氨酸中的胍基作用，生成红色化合物，即为V-P试验阳性。α 奈酚可加速此反应 培养基：葡萄糖蛋白胨水 方法：待测菌接种于培养基，35 ℃48h，加入甲液（6%α奈酚酒 精溶液）和乙液（40 %KOH溶液） 结果：20min内出现红色为阳性，如无红色，且于35 ℃4h 后仍如 故即为阴性 意义：本试验常与甲基红一起试验，前者阳性则后者多阴性
微生物检验报告单的解读
微生物检验报告单的解读微生物检验报告单是在医疗、环境卫生、食品安全等领域中常见的一种检测报告，它通常用来确定样本中是否存在微生物污染或感染。
微生物检验报告单通常包括样本信息、检测项目、检测结果及解读等内容。
对于普通人来说，可能很难理解报告中所涉及的术语和数据，下面我们来简单解读一份常见的微生物检验报告单。
一、样本信息微生物检验报告单的第一部分通常包括样本信息，包括样本编号、送检单位、送检日期等。
这些信息用于确定样本的来源和送检时间，确保检测结果的准确性。
二、检测项目微生物检验报告单中的检测项目通常包括了各种微生物的检测指标，如细菌、真菌、病毒等，也可能会有对抗生素的敏感性测试项目。
在检测项目中，通常会列出具体的检测方法和标准，以及针对不同微生物的特定检测要求。
三、检测结果微生物检验报告单的核心部分是检测结果。
检测结果会列出各种微生物的检测值或者阳性/阴性结果，如果有对抗生素的敏感性测试，还会列出针对不同抗生素的敏感性指标。
在这部分，通常还会列出参考值范围，帮助解读检测结果。
四、解读微生物检验报告单中的解读部分是非常重要的，它通常由专业的医学技术人员或者医生来进行解读。
在解读部分，会根据检测结果进行分析，判断样本中是否存在微生物感染或者污染。
对于阳性结果的项目，解读部分还会指导后续的处理和治疗方案。
五、参考范围在微生物检验报告单中，通常还会列出各项检测指标的参考范围。
参考范围是根据健康人群的平均水平和常见微生物的感染情况确定的，它可以帮助我们更好地理解检测结果是否正常。
六、注意事项微生物检验报告单的最后一部分通常是注意事项，这部分会列出针对检测结果的一些注意事项或建议措施，以帮助受检者更好地处理检测结果带来的影响。
解读微生物检验报告单是需要专业知识和经验的，一般情况下，我们建议受检者在收到检测结果后咨询专业医生或者技术人员进行解读和分析，及时采取相应的处理和治疗措施。
需要注意的是，微生物检验报告单仅为辅助诊断工具，不能代替临床诊断，如果有疑问或需进一步检查，应及时就诊，接受专业医生的指导和治疗。
微生物鉴定常用的生理生化试验实验报告
山东大学实验报告2017年12月4 日___________________________ 科目：微生物学实验题目：微生物鉴定常用的生理生化试验姓名：丁志康一、目的要求1.证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。
3.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。
4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
5.了解IMViC反应的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
二、基本原理1、生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。
胞外酶只要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被运输至细胞内。
如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖；脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白质为氨基酸等。
这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实；淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域，用碘测定不在产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。
脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH，使pH降低，加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色变成深红色，说明胞外存在着脂肪酶。
2、糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。
绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。
有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳糖、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳的等）；有些细菌只产酸不产气。
例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。
发酵培养基含有蛋白胨，指示剂（溴甲酚紫），倒置的德汉氏小管和不同的糖类。
当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色（pH5.2）。
气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。
3、IMViC反应是吲哚试验、甲基红试验、伏-普试验和柠檬酸试验4个试验的首字母缩写。
细菌微量生化鉴定管使用说明书
北京索莱宝科技有限公司
第1页，共1页细菌微量生化鉴定管使用说明书
货号：L7710
规格：20支
保存：RT，有效期一年。
产品说明：
一、实验准备：
1、安瓿瓶：从包装盒中取出安瓿瓶，朝易折点（瓶颈上方蓝点）反方向用力折开安瓿瓶；或用砂轮划一圈安瓿瓶瓶颈，然后用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶架中。
如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。
2、试管：从包装盒中取出试管，插入试管架中。
如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。
注：折开安瓿瓶时最好包裹纱布，以免划伤手指。
二、接种方法：
1、直接接种：用接种针从平板上挑取已纯化分离的同一菌落接种于需要试验的试管（安瓿瓶）中。
2、菌悬液法：取一内盛2mL 无菌水试管，用接种针从平板上挑取已纯化单个菌落至无菌水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液，滴入需要试验的试管（安瓿瓶）中，每管3滴。
注：如内容物为半固体或斜面，请直接穿刺接种。
三、接种完成后放36℃±1℃培养或检测标准中所规定的培养温度。
（建议加盖）产品名称
结果判断
培养时间（h）
阳性
阴性乳糖发酵管黄色紫色或紫灰色18-24。
病原微生物的检验项目及结果解释
病原微生物的检验项目及结果解释微生物检查包括：细菌、真菌、衣原体、支原体及病毒等。
这对于查明致病原因和选择用药十分重要。
但除细菌和真菌外，直接查找方法比较复杂。
细菌培养，采集血、痰、咽试子、大便、小便、创面分泌物等标本进行培养，看有无致病菌生长，正常应为阴性或少量非致病菌；真菌检查，标本涂片或培养，检出真菌为不正常。
病原微生物的检验主要是检测与l临床患者致病性有关的病原性微生物，对感染性疾病进行快速、准确地诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，防止微生物产生耐药性和医院内感染的发生。
基础知识1.什么是微生物?什么是病原微生物?微生物是需借助光学显微镜或电-y：显微镜放大观察到的结构简单，个体微小的生物的总称。
微生物的种类很多，医学微生物尤其是临床微生物主要有细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等。
微生物在自然界中广泛存在，与人类和自然界其他生物共生共存，绝大多数对人类和自然界是有益的，只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病，这部分微生物才称为病原微生物，比如结核分枝杆菌可引起结核病，痢疾杆菌可以引起痢疾等。
2.什么是细菌?细菌分哪几种?细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。
其体积微小，以微米作为测量单位，无色半透明，只有经过染色才能观察到细菌的轮廓及其结构。
经革兰染色，可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌。
细菌主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成，有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。
根据形状则可分为三类，即：球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧形菌)。
3.什么是病毒?病毒分哪几种?病毒是结构最简单、体积最微小(纳米)的一类非细胞型微生物，介于生命和非生命之间的一种物质形式，其必须严格寄生在活细胞内，含有单一种核酸即脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因组和蛋白质外壳，没有细胞结构，对抗生素不敏感，但对于干扰素敏感。
按传播途径病毒可分为呼吸道病毒、胃肠道病毒、经性传播感染的病毒和狂犬病毒等。
常见的细菌生化反应操作和结果判断
常见的细菌⽣化反应操作和结果判断⼀．糖发酵试验1.原理由于各种细菌所含酶类的不同，故对糖（醇）的分解能⼒不同，其代谢产物也不⼀样。
有的细菌能分解某些糖⽽产酸和产⽓，有些细菌能分解某些糖只能产酸，还有⼀些细菌因缺乏某些糖分分解酶则不能分解某些糖类。
细菌对糖的不同分解能⼒可⽤来鉴别细菌。
2.⽅法将⼤肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种葡萄糖、乳糖发酵管，35℃培养18～24⼩时观察结果。
3.结果观察结果时，⾸先确定细菌是否⽣长，细菌⽣长则培养基呈混浊状态，再确定细菌对糖的分解情况。
(1)不分解糖：培养基颜⾊与接种前相⽐⽆变化，记录时以“-”表⽰。
(2)分解糖只产酸不产⽓：培养基中所含的指⽰剂（溴甲酚紫）由紫⾊变为黄⾊，液体培养基的倒置管中未发现⽓泡。
若为半固体培养基，则培养基内未见⽓泡或琼脂断裂，记录是以“+”表⽰。
(3)分解糖既产酸⼜产⽓：除培养基中的指⽰剂颜⾊改变外，在液体培养基的倒置⼩管中出现⽓泡，若为半固体培养基，则培养基内可见⽓泡或琼脂断裂，记录时以“⊕”表⽰。
本试验⼤肠埃希菌分解葡萄糖和乳糖产酸⼜产⽓“⊕”，伤寒沙门菌分解葡萄糖只产酸不产⽓“+”，不分解乳糖“-”。
⼆．甲基红试验（MR试验）1.原理某些细菌发酵葡萄糖形成丙酮酸，丙酮酸可进⼀步分解为甲酸、⼄酸等酸性物质，使培养基的PH下降⾄4.4以下，此时加⼊甲基红指⽰剂后培养基呈现红⾊反应（阳性）。
有些细菌分解葡萄糖产⽣酸进⼀步转化为醇、醛、酮等⾮酸物质，使培养基的PH在5.4以上，加⼊甲基红指⽰剂呈黄⾊（阴性）。
2.⽅法将⼤肠埃希菌和产⽓肠杆菌分别接种于葡萄糖蛋⽩胨⽔中，经35℃培养24⼩时，观察结果。
3.结果在培养物中加⼊甲基红指⽰剂2～3滴，⽴即观察，呈现红⾊为阳性，黄⾊为阴性。
本实验⼤肠埃希菌为阳性，产⽓肠杆菌为阴性。
三.V-P试验1.原理有些细菌在发酵葡萄糖产⽣丙酮酸后，使丙酮酸脱羧，形成中性的⼄酰甲基甲醇，后者在碱性环境中被空⽓中的氧⽓氧化为⼆⼄酰。
微生物检验报告单的解读
微生物检验报告单的解读微生物检验是一种重要的实验室分析方法，主要用于检测食品、水源、环境等物质中的微生物质量或微生物种类。
微生物检验报告单记录了检测样本中的微生物种类及其数量，对于保障食品安全和环境卫生具有重要的意义。
下面让我们来了解一下微生物检验报告单的解读方法。
1. 报告单的基本信息微生物检验报告单中包含了样本的基本信息，如样本编号、名称、检测日期、检测机构等。
在解读报告单时，需要仔细核对这些信息是否准确无误，以确保报告结果的可靠性。
2. 检测项目和检出限报告单中列出了进行的微生物检测项目和相应的检出限。
不同的微生物检测项目需要不同的检测方法和仪器，因此在检测前需要根据具体情况进行项目选择。
检出限是指在检测中可以得到可靠结果的最小微生物数目，不同的微生物具有不同的检出限，低于检出限的结果则不能确定该微生物是否存在于样本中。
3. 检测结果和分析微生物检验报告单中的检测结果一般以菌落计数形式呈现，即按照特定的培养基将样本中的微生物分离出来进行培养，然后数出所形成菌落的数量。
检测结果通常会按照不同的微生物种类列出，其中包括了每个微生物的数量、单位以及检出率等信息。
通过分析这些结果，可以评估样本中微生物的种类和质量，并判断其是否存在食品安全或环境卫生隐患。
4. 结论和建议在检测结果分析完毕之后，报告单会给出相应的结论和建议。
检测结果可以分为合格、不合格和可疑三种情况，如果微生物质量正常，则会给出“合格”结论，否则则会给出“不合格”结论。
在给出结论的同时，报告单还会给出相应的建议，如如何改善微生物污染、如何提高环境卫生和饮食卫生等方面的建议。
总之，微生物检验是确保食品安全和环境卫生的一个重要手段，对于正确解读微生物检验报告单，需要了解报告单中的基本信息、检测项目和检出限、检测结果和分析以及结论和建议等内容。
通过认真分析和理解报告单，可以及早发现微生物污染问题，采取相应的措施和预防措施，从而提高食品质量和环境卫生水平。
如何解读细菌学检验报告
如何解读细菌学检验报告细菌学检测是临床上的一种十分常见的检测项目，细菌学检验是对血液以及组织和相关分泌物进行检测的方法，主要目的是了解其中的细菌类型、含量，从而为疾病的诊断和治疗提供依据。
比如痰及下呼吸道分泌物标本的细菌学检验，以咳痰为检测标本，血液及骨髓的细菌学检验，以血液和骨髓为检测标本，尿液细菌学检验，以尿液为标本。
细菌学的检测报告几乎是天天可见，只要生病到医院做体检，一般都会涉及到细菌学检测。
那么细菌学检测的报告中究竟包含了什么信息呢？要怎么解读细菌学检验报告，才能得到最真实的身体状况呢？下面就为大家科普一下细菌学检验报告的解读方法。
一、细菌学检验报告细菌学检验是对感染的部位进行检查，并且判断引起感染的细菌类型的过程，可以为后续治疗提供依据。
通常由于细菌感染引起的疾病有呼吸道感染、消化系统感染、淋球菌感染淋病、新型隐球菌感染等。
不同的检测项目所得到的结果是不相同的，需要对这些结果进行分析，得到最终的诊断结果。
第一，如果细菌学检测报告中显示金黄色葡萄球菌的含量超过60%，则很有可能患有急性化脓性脊髓炎。
肠杆菌和变形杆菌的含量为13-18%，也可以作为判断化脓性脊髓炎的依据。
第二，脑膜炎双球菌、肺炎双球菌、嗜血杆菌是造成化脓性脑膜炎的最常见的病菌，其次是金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等，一般可以在脑脊液中找到致病病菌。
第三，从脑脊液涂片的墨汁染色中可以发现带有夹馍的圆形隐球菌，说明患有真菌性脑膜炎。
第四，腹泻等症状时，可以从粪便中检测出致病病菌，比如大肠杆菌，是导致肠炎的最常见的致病病菌。
在检测结果中如果发现某种细菌为阳性，也不必惊慌，因为并不是所有的阳性培养都是真正的病原菌，因为细菌的培养和检测结果的临床意义和所选取的标本有很大的关系，比如关节液、胸腔积液、血液等无菌标本的检测结果具有更加重要的意义，但在检测的时候有可能因为外部的污染导致样本不对，检测结果也可能出现差异。
二、细菌药敏试验报告的相关解读（一）药敏试验报告中的S、I、R 分别代表了什么药敏实验是检测人对某种药物的敏感度的检测，其中不同的参数指标会用简单的字母来代替，方便医生之间了解患者的情况，而且书写简便。
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红色
18-24
如不变色再加锌粉少许侯如呈红色，证实硝酸盐未被还原判断为阴性反之为阳性
40%胆汁
浑浊生长
无变化
18-24
做D群链球菌鉴定
PH9.6肉汤
浑浊生长
无变化
18-24
6.%高盐肉汤浑浊Βιβλιοθήκη 长无变化18-24
尿素
无色
红色
黄色
8-24
适用于尿素分解的细菌
硫化氢
无色
黑色
不变色
18-24
硫酸亚铁法
乙酰胺
黄色
红色
黄色
24-48
如阴性，应继续培养至颜色不加深才可确认
硝酸盐胨水（霍乱）
红色
不变色
6-24
加浓硫酸一滴
苯丙氨酸脱氨酶
无色
蓝绿色
不变色
18-24
加10%FeCl3一滴.在表层产生蓝绿色为阳性
氧化酶试纸
红→紫黑色
加靛基质试剂一滴接触处出现红色为阳性，不变色为阴性含1%NaCl为弧菌科细菌鉴定专用使用方法相同
葡萄糖磷酸盐
胨水（MR、VP用）
红色
不变色
24-48
加MR试剂一滴即可观察结果。加VP甲液两滴、VP乙液一滴放35℃两小时观察1%NaCl为弧菌科专用
西蒙氏枸橼酸盐
绿色
蓝色
绿色
24-48
含1%NACl为弧菌科专用使用方法相同
细菌生化微量鉴定管实验结果判定说明
名
称
结果判定
培养时间
（h）
注
释
原颜色
阳
阴
各类糖醇苷
紫色
黄色
紫色或不变
18-24
根据指示剂不同颜色不变为阴性
非发酵菌糖
绿色
黄色
紫色/不变
24-48
仅供非发酵细菌鉴定使用
葡萄糖（O-F）
葡萄球（O-F）
紫色
黄色
黄色
紫色
紫色
24-48
24-48
同时接种两只生化管一只加入灭菌石蜡覆盖液面如两支均变黄为发酵型（F）；加石蜡管不变色另一支变色为氧化性（O）两支均不变色为阴性（NRO-）
β-半乳糖苷（ONPG）
绿色
深黄色
无色
18-24
接种量要大产生黄色深浅不同加深为阳性
七叶苷
绿色
棕黑色
不变色
18-24
链球菌如阴性反应应连续观察至第三天
胆汁七叶苷
棕黑色
不变色
18-24
链球菌如阴性反应应连续观察至第三天
醋酸盐
蓝色
绿色
24-48
每12小时观察一次
蛋白胨水（靛基质用）
无色
红色
不变色
24-48
18-24
培养后放置4℃5-10分钟若流动为阳凝固为阴
DNA
无色
亮绿色
24
用于肠杆、弧菌，其他建议使用DNA琼脂法
丙二酸盐
蓝色
绿色
24-48
葡萄糖酸盐
橙红色
不变色
24-48
加班氏试剂一滴沸水煮10分钟观察
酒石酸盐
黄色
黄绿色
18-24
每隔12小时观察一次
硝酸盐
还原
红色
不变色
18-24
加还原试剂甲、乙各一滴变红为阳
不变色
10秒
用灭菌牙签刮取菌苔于氧化酶湿试纸上
氧化酶试剂
红→紫黑色
不变色
10-30秒
用滤纸蘸取细菌滴加试剂观察变化
鸟氨酸脱羧酶
褐色
紫色
黄色或不变
18-24
接种对照管一支，并在每管液面加石蜡：对照变黄色，试验管变紫色为阳性；如均变色或不变色为阴性均变紫色需延长观察时间如仍不变色实验无意义
赖氨酸脱梭酶
紫色
黄色或不变
18-24
精氨酸脱梭酶
紫色
黄色或不变
18-24
精氨酸双水解酶
红色
不变色
24-48
不加石蜡同时接种对照管非发酵用
非发酵
鸟脱羧
紫色
黄色或不变
24-48
1、不加石蜡
2、含NaCl的各类氨基酸使用方法同上液面需加石蜡做弧菌鉴定用
赖脱羧
紫色
黄色或不变
24-48
精脱羧
紫色
黄色或不变
24-48
明胶
液化
凝固