血球计数板使用ppt课件
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• 7．血球计数板的清洁 血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗 后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是 否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直 到干净为止。
7
例题
• 例1：用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数， 若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个 小方格组成，如果一个小方格内酵母菌过多，难 以计数，应先 稀释 后再计数。若多次重复计 数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则 10mL该培养液中酵母菌总数有 2×108 个。
解析 ：根据公式：5×400×10000×10＝2×108
8
• 例2：检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管 吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳 液体的总体积为0．1 mm3。
6
• 5．对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边 上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数 右线”的原则处理，另两边不计数。
• 6．计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计 算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不 时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每 1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 ▲个／mL
解析 ：酵母细胞个数／1mL＝
80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
＝n/ 80×400×10000×10＝5n×105
9
• 例3（2008江苏高考31．）
（4）在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液
A.活的菌数 B.死的菌数 C.总菌数 D.新增殖的菌
15
⑵“离离原上草，一岁一枯荣。野火烧不尽，春风吹又生。远芳 侵古道，晴翠接荒城。”诗中可体现出群落的次生演替 现 象。研究群落通常要研究其丰富度，探究土壤中小动物优势 种的种类及丰富度，随机取样时常用的方法取是样器取样 取样法。
⑶人工设计并制作生态缸，目的是观察这一人工微生态系统的 稳定性。在构建时，是依据生态系统原理，在有限的空间内 把生态系统具有的 基本成分 进行组织。为了使其正常运 转，在设计时一定要考虑 不同营养级生物之间的合适比例 。
染色的根尖置于载玻片上，轻轻盖上盖玻片后即可镜 检
B.对酵母菌计数时，用吸管吸取培养液滴满血球计数板的 计数室及其四周边缘，轻轻盖上盖玻片后即可镜检
C.在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机 溶剂，如无水乙醇等
D.检测试管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入适量斐林试 剂后，摇匀并观察颜色变化
11
1．（7分）酵母菌是探究细胞呼吸方式、种群数量变化的理 想实验材料。血球计数板是酵母菌计数的常用工具。结 合所学知识，回答下列问题：
3
• 2．25×16型的计数板 中央大方格以双线等分成25个中 方格，每个中方格又分成16个小方格，供细胞计数用（见 图三）。一般计数四个角和中央的五个中方格（80个小方 格）的细胞数。 细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
4
二、血球计数板的使用方法步骤
• 1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜 检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；
• 2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专 用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻 片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防 止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖 玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；
血球计数板使用
1
一、血球计数板的规格
• 人教版建议使用2mm×2mm×0.1mm方格 • 苏教版推荐使用1mm×1mm×0.1mm方格
计数室
2
计数室两种规格
• 1．16×25型的计数板 将计数室放大，可见它含16中格， 一般取四角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格） 计数 。 细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
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（1）酵母菌与大肠杆菌相比，在结构上的主要区别是酵母 菌具有 Biblioteka Baidu核膜为界限的细胞核 。
（2）酵母菌常被用来探究细胞呼吸的方式，是因为它 在有氧和无氧条件下都能生存（属于兼性厌氧菌） 。
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（3）血球计数板的计数室长和宽各为1mm，深度为0.1mm， 其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格 ，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格 位于计数室的 四个角和中央的五个中方格 。下图1表示的 是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数 的结果是 24 个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数 为20个，则1mL培养液中酵母菌的总数为 5×106 个。
13
（4）某同学为探究温度对酵母菌种群数量变化的影响，得
到上图2所示结果，由此并不能得出酵母菌的最适培养温
度为25℃。为了确定培养酵母菌的最适温度，需要进一步
实验，写出实验设计思路：
。
在25℃左右再设计以上的温度梯度
14
2.在生态学中，通常要从种群、群落、生态系统等三个层 次开展研究。
⑴ 在“探究培养液中酵母菌数量的动态变化”实验中，用 血球计数板进行抽样检测。下图是血球计数板放大图， 第一次抽样检测结果是4个中方格中共有40个酵母菌， 则每毫升菌液中含有酵母菌 1.6×106 个。所计算出 的酵母菌是 C （从以下选项中选择）。
计数的做法是错误的，正确的方法是 摇匀培养液后再取_样
和 培养后期的样液稀释后再计数
。
（5）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法
是错误的，正确的方法是 浸泡和冲洗
。
10
例4：（2009福建高考1 ）
下列对有关实验的叙述，正确的是
(C )
A.在观察洋葱细胞有丝分裂实验中，将已经解离、漂洗、
• 3．计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降 到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍 镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并 记录。
5
三、血球计数板的使用注意事项
• 1．每天定时取样计数，记录数据。 • 2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震
荡几下，这样使酵母菌分布均匀。 • 3．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培
养液进行稀释以便于酵母菌的计数。 具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，加入成倍 的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得 数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为 宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。 • 4．活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时， 即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个 酵母细胞。
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例题
• 例1：用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数， 若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个 小方格组成，如果一个小方格内酵母菌过多，难 以计数，应先 稀释 后再计数。若多次重复计 数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则 10mL该培养液中酵母菌总数有 2×108 个。
解析 ：根据公式：5×400×10000×10＝2×108
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• 例2：检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管 吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳 液体的总体积为0．1 mm3。
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• 5．对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边 上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数 右线”的原则处理，另两边不计数。
• 6．计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计 算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不 时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每 1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 ▲个／mL
解析 ：酵母细胞个数／1mL＝
80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
＝n/ 80×400×10000×10＝5n×105
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• 例3（2008江苏高考31．）
（4）在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液
A.活的菌数 B.死的菌数 C.总菌数 D.新增殖的菌
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⑵“离离原上草，一岁一枯荣。野火烧不尽，春风吹又生。远芳 侵古道，晴翠接荒城。”诗中可体现出群落的次生演替 现 象。研究群落通常要研究其丰富度，探究土壤中小动物优势 种的种类及丰富度，随机取样时常用的方法取是样器取样 取样法。
⑶人工设计并制作生态缸，目的是观察这一人工微生态系统的 稳定性。在构建时，是依据生态系统原理，在有限的空间内 把生态系统具有的 基本成分 进行组织。为了使其正常运 转，在设计时一定要考虑 不同营养级生物之间的合适比例 。
染色的根尖置于载玻片上，轻轻盖上盖玻片后即可镜 检
B.对酵母菌计数时，用吸管吸取培养液滴满血球计数板的 计数室及其四周边缘，轻轻盖上盖玻片后即可镜检
C.在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机 溶剂，如无水乙醇等
D.检测试管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入适量斐林试 剂后，摇匀并观察颜色变化
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1．（7分）酵母菌是探究细胞呼吸方式、种群数量变化的理 想实验材料。血球计数板是酵母菌计数的常用工具。结 合所学知识，回答下列问题：
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• 2．25×16型的计数板 中央大方格以双线等分成25个中 方格，每个中方格又分成16个小方格，供细胞计数用（见 图三）。一般计数四个角和中央的五个中方格（80个小方 格）的细胞数。 细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
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二、血球计数板的使用方法步骤
• 1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜 检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；
• 2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专 用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻 片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防 止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖 玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；
血球计数板使用
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一、血球计数板的规格
• 人教版建议使用2mm×2mm×0.1mm方格 • 苏教版推荐使用1mm×1mm×0.1mm方格
计数室
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计数室两种规格
• 1．16×25型的计数板 将计数室放大，可见它含16中格， 一般取四角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格） 计数 。 细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
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（1）酵母菌与大肠杆菌相比，在结构上的主要区别是酵母 菌具有 Biblioteka Baidu核膜为界限的细胞核 。
（2）酵母菌常被用来探究细胞呼吸的方式，是因为它 在有氧和无氧条件下都能生存（属于兼性厌氧菌） 。
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（3）血球计数板的计数室长和宽各为1mm，深度为0.1mm， 其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格 ，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格 位于计数室的 四个角和中央的五个中方格 。下图1表示的 是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数 的结果是 24 个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数 为20个，则1mL培养液中酵母菌的总数为 5×106 个。
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（4）某同学为探究温度对酵母菌种群数量变化的影响，得
到上图2所示结果，由此并不能得出酵母菌的最适培养温
度为25℃。为了确定培养酵母菌的最适温度，需要进一步
实验，写出实验设计思路：
。
在25℃左右再设计以上的温度梯度
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2.在生态学中，通常要从种群、群落、生态系统等三个层 次开展研究。
⑴ 在“探究培养液中酵母菌数量的动态变化”实验中，用 血球计数板进行抽样检测。下图是血球计数板放大图， 第一次抽样检测结果是4个中方格中共有40个酵母菌， 则每毫升菌液中含有酵母菌 1.6×106 个。所计算出 的酵母菌是 C （从以下选项中选择）。
计数的做法是错误的，正确的方法是 摇匀培养液后再取_样
和 培养后期的样液稀释后再计数
。
（5）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法
是错误的，正确的方法是 浸泡和冲洗
。
10
例4：（2009福建高考1 ）
下列对有关实验的叙述，正确的是
(C )
A.在观察洋葱细胞有丝分裂实验中，将已经解离、漂洗、
• 3．计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降 到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍 镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并 记录。
5
三、血球计数板的使用注意事项
• 1．每天定时取样计数，记录数据。 • 2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震
荡几下，这样使酵母菌分布均匀。 • 3．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培
养液进行稀释以便于酵母菌的计数。 具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，加入成倍 的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得 数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为 宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。 • 4．活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时， 即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个 酵母细胞。