【精品】血型鉴定与交叉配血
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血型鉴定及交叉配血 ppt课件
1min
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
血型鉴定与交叉配血
＋表示凝集，－表示无凝集
对抗血清的要求※
①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm2。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
型 （2）立即水平离心1000r/min, 10min. 鉴 定 （3）观察及判断血型结果①阳性：对照管细胞沉
淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中。 ②阴性：对照管和检测管细胞沉淀均在管底。 ③试验失败：对照管细胞在胶上或 胶中，应重新做试验。
（4）报告方式：同生理盐水法。
注意事项
ABO 血 型 鉴 定
【注意事项】
交 1.如果对患者的输血史或妊辰史不明， 叉 必须使用48h内的标本。 配 血 2.不能使用溶血标本。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
3.配血后，受血者/供血者的全部标本 须于2～6℃冰箱保存7d以备复查。
交 叉 配 血
（ 盐 水 凝 集 法 ）
【方法学评价】
本法简易、经济、快速，缺点是
仅用于检查ABO血型系统的IgM 血型抗体是否相配，不能检出不 相配的IgG血型抗体。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
查找原因。
②异型配血时，主侧无凝集无溶血，次侧
有凝集无溶血，可以输少量血；如主侧、
次侧均不凝集或主侧凝集，不能输血，
需查找原因
交 叉 （1）受血者xxx（X型）血清＋供血者xxx 配 （X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 血 （ （2）供血者xxx（X型）血清＋受血者xxx
交叉配血试验的注意事项
血型鉴定及交叉配血
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
注意：1、正反定型一致才能确定结果；
2、所用器材必须清洁干净，避免溶血，专型专用； 3、控制离心速度和时间，防止假阳性和假阴性； 4、抗原抗体比例要适当； 5、溶血时，注意结果的判定； 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明 原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在
制成红细 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
加红细胞悬液1滴（5%）
胞悬液， 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
Pc：patient cell
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
一、正定型 原理：用特异性血型抗体检测被检RBC,在盐水介质
中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检RBC膜上有 无与特异性血型抗体相对应的抗原，进一步判定 血型。
二、ABO血型鉴定：
一、正定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加标准血清1滴
（-A -B ）
加红细胞悬 液1滴（5%）
混匀，离心 1000r/min 观察结果
1min
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
注意：1、正反定型一致才能确定结果；
2、所用器材必须清洁干净，避免溶血，专型专用； 3、控制离心速度和时间，防止假阳性和假阴性； 4、抗原抗体比例要适当； 5、溶血时，注意结果的判定； 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明 原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在
制成红细 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
加红细胞悬液1滴（5%）
胞悬液， 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
Pc：patient cell
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
一、正定型 原理：用特异性血型抗体检测被检RBC,在盐水介质
中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检RBC膜上有 无与特异性血型抗体相对应的抗原，进一步判定 血型。
二、ABO血型鉴定：
一、正定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加标准血清1滴
（-A -B ）
加红细胞悬 液1滴（5%）
混匀，离心 1000r/min 观察结果
1min
实验7ABO血型鉴定及交叉配血实验_基础生物学实验(安徽大学研究生复试用,生物 生命科学)
实验七ABO血型鉴定及交叉配血实验一、实验目的通过鉴定实验和配血实验来学习、掌握人类ABO血型的原理和方法。
二、实验原理血型是特指血细胞膜表面抗原的类型。
ABO血型系统是一类常用的血液分型体系。
在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。
A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。
血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。
在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型(表7-1)。
统不同，人群中Rh血型的不匹配非常罕见，尤其在黄种人中，Rh(+)型占到99.7%,而Rh(-)型还不到0.3%。
所以在医疗输血中，通常只考虑献血者和输血者之间ABO血型是否匹配。
ABO血型在人群中的分布，存在着地理环境及民族、种族的差异，在我国汉族人群中，各血型的比例由多到少依次是O(34.11%)﹥ B(28.98%)﹥A(28.29%)﹥AB(8.69%)。
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象。
输血时，主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集，其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血的主侧，后者称为交叉配血的次侧。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”。
如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
三、实验材料人外周血四、实验器材与试剂(一)器材采血针、尖头滴管、载玻片、1.5ml Eppendorf管、75%酒精棉球、消毒干棉球和记号笔。
(二)仪器显微镜、离心机。
(三)试剂标准A血清、标准B血清、生理盐水、碘酒。
五、实验操作（一）ABO血型鉴定1．用记号笔在载玻片两端分别作好标记A、B。
血型鉴定及交叉配血
严格进行血型鉴定和交叉配血试验， 确保供、受体血型一致。
症状
寒战、高热、腰背酸痛、血红蛋白尿、 黄疸等，严重者出现血压下降、休克 和急性肾衰竭。
非溶血性输血反应
发生机制
与免疫因素有关，如过敏反应、 发热反应等。
症状
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹、咳嗽、 呼吸困难等，严重者出现过敏性
休克。
预防
对有过敏史的受血者进行预防性 用药，输血前仔细询问受血者过
O型血与疾病的关系
O型血人群患心血管疾病的风险 较低，但也有一定的风险。
O型血人群对某些病毒和细菌的 抵抗力较强，如流感病毒、肺炎
球菌等。
O型血人群患某些癌症的风险较 高，特别是结直肠癌和乳腺癌。
04 输血反应
CHAPTER
溶血性输血反应
发生机制
预防
由于供、受体的血型抗原不匹配，导 致红细胞在血液循环中溶解破坏。
A型血人群易感染某 些病毒和细菌，如流 感病毒、幽门螺杆菌 等。
A型血人群患癌症的 风险也相对较高，特 别是消化系统癌症。
B型血与疾病的关系
B型血人群患心血管疾病的风 险较低，但也有一定的风险。
B型血人群患某些自身免疫性 疾病的风险较高，如类风湿性 关节炎、系统性红斑狼疮等。
B型血人群易感染某些病毒和 细菌，如流感病毒、肺炎球菌 等。
敏史。
输血传播疾病
疾病种类
包括乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等。
传播途径
通过血液中携带病毒的微量红细胞或白细胞传播。
预防
对献血者进行严格的筛选和检测，采用病毒灭活 技术处理血液制品。
05 输血前检查
CHAPTER
输血前检查的内容
01
02
03
实验三血型鉴定(交叉配血)
交叉配血
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
实验15 血型鉴定&交叉配血
【操作】 正定型 （一）试管法： 1、制备5%RBC被检生理盐水悬液： 1mlN.S+2d末梢血→成大红色 2、取小试管2支，分别标记抗A、抗B 3、在抗A管滴加抗A标准血清1d、 抗B管滴加抗B标准血清1d 4、于两管各滴加1d被检悬液 5、1500r/min离心1min 6、观察结果 轻弹试管底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集， 呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。
一、 ABO血型系统鉴定
（二）玻片法
抗A标准检悬液1d 竹签混匀，静置15min，观察结果： 肉眼与显微镜下观察有无凝集
一、 ABO血型系统鉴定
结果判断： eg： 抗A标准血清+RBC悬液→凝集； 抗B标准血清+RBC悬液→不凝集 结果报告： 血型正定型为： X型
一、 ABO血型系统鉴定
【原理】 ABO血型系统天然抗体（IgM）分子量大， 能在生理盐水介质中与相应RBC抗原结合 发生凝集反应，以标准血清（抗A、抗B） 鉴定红细胞上的抗原（正定型），或用标 准红细胞鉴定被见血清的抗体（反定型）。 当出现凝集时，存在与已知抗体相应抗原 或已知抗原相应的抗体。
一、 ABO血型系统鉴定
｝A型
二、交叉配血试验
【原理】 将受血者的红细胞与血清分别同供血者的 血清与红细胞混合，观察有无凝集现象 ， 来判断受血者与供血者之间配血是否相合。
二、交叉配血试验
【操作】 1、准备：①制备受血者RBC悬液 ②制备供血者RBC悬液 ③制备受血者血清 ④制备供血者血清 2、取小试管2支，分别标记主侧、次侧 3、加血清和细胞悬液： 在主侧管中分别加②和③各1滴， 在次侧管分别加④和①悬液各1滴，混匀。 4、1 000r/min离心1 min。 5、观察结果 同ABO血型正定型试管法。
一、 ABO血型系统鉴定
（二）玻片法
抗A标准检悬液1d 竹签混匀，静置15min，观察结果： 肉眼与显微镜下观察有无凝集
一、 ABO血型系统鉴定
结果判断： eg： 抗A标准血清+RBC悬液→凝集； 抗B标准血清+RBC悬液→不凝集 结果报告： 血型正定型为： X型
一、 ABO血型系统鉴定
【原理】 ABO血型系统天然抗体（IgM）分子量大， 能在生理盐水介质中与相应RBC抗原结合 发生凝集反应，以标准血清（抗A、抗B） 鉴定红细胞上的抗原（正定型），或用标 准红细胞鉴定被见血清的抗体（反定型）。 当出现凝集时，存在与已知抗体相应抗原 或已知抗原相应的抗体。
一、 ABO血型系统鉴定
｝A型
二、交叉配血试验
【原理】 将受血者的红细胞与血清分别同供血者的 血清与红细胞混合，观察有无凝集现象 ， 来判断受血者与供血者之间配血是否相合。
二、交叉配血试验
【操作】 1、准备：①制备受血者RBC悬液 ②制备供血者RBC悬液 ③制备受血者血清 ④制备供血者血清 2、取小试管2支，分别标记主侧、次侧 3、加血清和细胞悬液： 在主侧管中分别加②和③各1滴， 在次侧管分别加④和①悬液各1滴，混匀。 4、1 000r/min离心1 min。 5、观察结果 同ABO血型正定型试管法。
血型鉴定与交叉配血试验
ABO血型输血关系
O
AB
AB
B
B
A
A
O
3、输血原则：
输血前一定要作交叉配血，防止发生输血反应；②强调同型配血；③婴幼儿禁忌异型配血；④大量输血时，还应进行献血员间的配血试验；⑤可根据病情需要选择成分输血。
安全输血标准操作程序
01
受血者在输血前必须做输血前四项检查（乙、丙、艾、梅）
三查三对：核对输血申请单病人姓名、科别、床号与血标本写的姓名、科别、床号是否相符
（二）Rh 血型系统
Rh血型能识别的抗原共43种，常见的抗原有五种，分别是D、C、E、c、e。以 D抗原的抗原性最强，故常以其存在与否定为Rh阳性或阴性，即凡含D抗原者为Rh阳性，不含D抗原者为Rh阴性。Rh 血型系统与ABO系统不同的是很少含有天然抗体，大部分是因受免疫刺激后而产生免疫抗体。
第一次输血：
B
B
anti-A
B/B、B/O
ABLeabharlann A&B---A/B
一、ABO血型鉴定
抗A血清
抗A血清
A型血
抗B血清
单击此处输入你的正文
抗B血清
抗A血清 B型血 抗B血清 抗A血清 抗B血清 AB型血 B型血
红细胞凝集反应和输血： 当含有凝集原A的红细胞与含有A凝集素的血清相混合时，或含有凝集原B的红细胞和含有B凝集素的血清相混合时，红细胞即可凝集成团，即凝集反应 。通常在输血时，主要考虑供血者的红细胞不被受血者的血浆所凝集。从理论上讲O型血者的血细胞不含A、B凝集原，曾被认为是可供任何型的受血者；而AB血型则可接受任何血型者的供血。通过深入研究，发现各类血型还存在亚型，情况较复杂。故现在输血，除要求同型外，在输血前，受血者和供血者的血清和红细胞之间还必需进行交叉配血试验，两方面均不发生凝集反应时，方可输血。
血型鉴定与交叉配血
血型鉴定与交叉配血试验（1）ABO血型鉴定：正反定型标准血清+被检者红细胞标准红细胞+被检者血清被鉴定的血型抗A 血清抗B 血清抗AB血清（O型血清）A型红细胞B型红细胞O型红细胞+-+-+-A型-+++--B型+++---AB型---++-O型用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果正定型反定型（2）交叉配血试验：输血前必须进行交叉配血试验，其目的主要是进一步验证供者与受者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定错误导致输血后严重溶血反应。
Ø交叉配血试验常采用试管法进行Ø受血者血清加供血者红细胞悬液相配的一管称为主侧Ø供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为次侧（一）ABO血型系统（一）ABO血型系统交叉配血的结果判断：Ø同型血 主侧管与次侧管均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；不论何种原因导致主侧管有凝集时，则绝对不可输用。
Ø异型血 主侧管无凝集及溶血，而次侧管出现凝集，但凝集较弱，效价<1∶200，可以试输少量（不超过200ml）该型血液。
理论上可以，但实际上不允许这样做，并且做的临床实际价值不大。
配血方法的选择：ABO血型系统 Ø对无输血史及妊娠史者，可只作盐水介质凝集试验。
Ø对有反复输血史及妊娠史者，则应作间接抗球蛋白配血法。
Ø在48小时内输入5L或更多量的大量输血时，因需同时输入多名供血者的血液，因此除了进行受血者与各供血者的交叉配血外，还应坚持作供血者之间的交叉配血试验，只有相互交叉配合完全相合时才能输用。
（一）ABO血型系统一、红细胞血型系统受血者有输血史、妊娠史或短期内要大量输血时按规定要进行意外抗体的筛查4.ABO血型系统的临床意义（1）在输血上的意义Ø输血在临床上的应用颇为广泛，如严重失血或某些手术时，输血常是治疗和抢救的重要措施。
Ø为防止输血反应必须坚持同型输血。
ABO血型鉴定及交叉配血
（一）排除人为因素或操作失误(第一步) 复检ABO血型:
1)重新采集血样:分抗凝血和不抗凝血的2管, 排除血样采错、静脉输液处采样和血样 不规范等因素。 2)核对试剂、器材：核对试剂效期, 仔细阅读试剂说明书, 特别是操作规程和注意事 项;核对离心机转速、时间、离心力, 以及其它器材有无污染, 排除试剂、器材, 特别是 离心力不标准的干扰。
（三）临床治疗的影响 1.大量输液 患者ABO抗体被稀释, 干扰ABO反定型。 2.静脉输入高分子药物 静脉输入高分子药物，如甘露醇、右旋糖苷和羟乙基淀粉等， 可导致红细胞成钱串状，干扰结果判定。 3.近期输过异型红细胞、异型血浆 近期输过异型血的样本正定型可能呈mf, 近期输 异型血浆可能干扰ABO反定型。 4.单采血浆或血浆置换治疗 如果患者血浆被稀释,干扰ABO反定型。 5.异基因造血干细胞移植：ABO或RhD异基因造血干细胞移植, 可一度呈嵌合体。
（二）复习临床资料(第二步) 分析可能导致正、反定型不一致的原因并予以, 归纳、分类 1.患者年龄、性别 <6个月的婴儿或老年人ABO正反定型不合可能为生理性的因素, 有妊娠生育史的妇女可能产生不规则抗体干扰ABO反定型。 2.临床治疗 1)大量输液； 2)静脉输注高分子药物； 3)输异型血； 4)血浆置换治疗； 5)造血干细胞移植 。
在标记好的三支管中各加1滴对应的试剂红细胞
无凝集
无凝集 凝集
血型：A型
ABO反定型鉴定
受检者红细胞与标准血清 （正定型）
ABO血型表现型反应格局表
受检者血清（浆）与标准红细 胞（反定型）
抗-A + +
抗-B + +
Ac
Bc
Oc
-
+
血型鉴定及交叉配血
理。
血型不符：重新核对血样和 血型鉴定结果，确保准确无 误。
溶血现象：血液中红细胞破 裂导致溶血，需重新进行交源自叉配血试验。交叉配血的注意事项
血型鉴定必须准确无误 受血者与供血者血型要匹配 交叉配血试验中应避免外界干扰因素 输血前必须进行全面检查，确保血液安全
血型鉴定和交叉配血的实 验操作
章节副标题
血型鉴定的重要性：在输血、器官移植和 新生儿溶血病诊断等方面具有重要意义。
血型鉴定的基本原理和方法
血型鉴定的定 义：通过检测 红细胞表面抗 原，确定个体 血型的过程。
血型分类：A 型、B型、AB 型和O型，每 种血型又分为 阳性和阴性两
种亚型。
血型抗原：红 细胞表面的抗 原物质，包括 AB抗原和H抗
原等。
血型抗体：存 在于血清中的 抗体，与红细 胞表面的抗原 发生特异性结
合。
血型鉴定的应用场景
输血：确保受血者血 型与供血者血型相匹 配，避免输血反应
亲子鉴定：通过血型 遗传规律，判断父母 与子女之间的亲缘关 系
法律鉴定：在刑事 案件或民事纠纷中， 通过血型鉴定来辅 助判定身份或亲子 关系
人类学研究：通过血 型分布研究人类迁徙、 种族起源等问题
实验前的准备
实验器材：试管、 注射器、抗A抗B 标准血清等
实验试剂：生理 盐水、A型血和B 型血样本
实验步骤：准备 器材和试剂，进 行交叉配血实验
注意事项：确保 器材和试剂无菌 、无污染，遵循 实验室安全规定
血型鉴定实验操作流程
准备试剂和器 材：确保所需 的试剂和器材 已经准备好， 包括抗A、抗B 血清、血型抗
记录结果：记录交叉配血试验的结果，并进行分析。如果存在凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液 不匹配，不能进行输血。如果未发现凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液匹配，可以进行输血。
血型不符：重新核对血样和 血型鉴定结果，确保准确无 误。
溶血现象：血液中红细胞破 裂导致溶血，需重新进行交源自叉配血试验。交叉配血的注意事项
血型鉴定必须准确无误 受血者与供血者血型要匹配 交叉配血试验中应避免外界干扰因素 输血前必须进行全面检查，确保血液安全
血型鉴定和交叉配血的实 验操作
章节副标题
血型鉴定的重要性：在输血、器官移植和 新生儿溶血病诊断等方面具有重要意义。
血型鉴定的基本原理和方法
血型鉴定的定 义：通过检测 红细胞表面抗 原，确定个体 血型的过程。
血型分类：A 型、B型、AB 型和O型，每 种血型又分为 阳性和阴性两
种亚型。
血型抗原：红 细胞表面的抗 原物质，包括 AB抗原和H抗
原等。
血型抗体：存 在于血清中的 抗体，与红细 胞表面的抗原 发生特异性结
合。
血型鉴定的应用场景
输血：确保受血者血 型与供血者血型相匹 配，避免输血反应
亲子鉴定：通过血型 遗传规律，判断父母 与子女之间的亲缘关 系
法律鉴定：在刑事 案件或民事纠纷中， 通过血型鉴定来辅 助判定身份或亲子 关系
人类学研究：通过血 型分布研究人类迁徙、 种族起源等问题
实验前的准备
实验器材：试管、 注射器、抗A抗B 标准血清等
实验试剂：生理 盐水、A型血和B 型血样本
实验步骤：准备 器材和试剂，进 行交叉配血实验
注意事项：确保 器材和试剂无菌 、无污染，遵循 实验室安全规定
血型鉴定实验操作流程
准备试剂和器 材：确保所需 的试剂和器材 已经准备好， 包括抗A、抗B 血清、血型抗
记录结果：记录交叉配血试验的结果，并进行分析。如果存在凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液 不匹配，不能进行输血。如果未发现凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液匹配，可以进行输血。
血型鉴定与交叉配血
• 约80%以上Rh阴性受血者在接受Rh 阳性血液后能产生抗体。
• 首次输血不合不发生输血反应,但再 次输血如受血者或者孕妇血浆中含 有Rh抗体时,与含有相应抗原血液相 遇，将引起严重的输血反应 或新生 儿溶血病。
• 输血前须定Rh血型
三、交叉配血、输血原则
1、交叉配血 主侧交叉配血：
受血者血清+献血者红细胞 次侧交叉配血:：
3、抗体
抗A、 抗B、抗AB属IgG 或IgM型，天然性 抗体以IgM为主，免疫性以IgG为主（如 输血、妊娠后）。 O血型血清内抗体属IgG。新生儿溶血与 IgG有关。抗体也终生不变
4、血型鉴定
用已知的标准血清和红细胞与待测的血液进行 特异性反应，根据凝集结果定
正向定型：用已知抗体特异性的血清检查红细 胞的抗原
反向定型：用已知血型的红细胞检查血清中抗 体
5. 意义
输血 辅助诊断新生儿溶血病 与临床意义
1900年发现ABO血型，1940年发现Rh血型 。
抗原有C c D E e五种 ，一般以D定型。
临床上将含有D抗原的红细胞称为Rh阳 性，不含D抗原的为Rh阴性.我国人群汉 族Rh（+）占99.7％， Rh(—)占0.3％。
血型（表型）红细胞上抗原 血浆中抗体 基因型
A
A
抗B
AA、AO
B
B
抗A
BB、BO
O
无
抗A、 抗B、抗AB OO
AB
A、B
无
AB
2、抗原
A、B抗原（含H抗原）在胚胎期已 形成，出生时抗原性不强，故胎 儿、新生儿定血型时凝集性差。
血型抗原终生不变。H抗原属分泌 型物质，存在各组织中，以唾液 为多，可辅助鉴定ABO血型。
血型鉴定与交叉配血制度
血型鉴定与交叉配血制度
1．病人急需鉴定血型或交叉配合时，医生应在检验单上注明“急”字，并注明时间到分。
2．血型鉴定包括ABO血型和Rh(D)血型，两人核对操作，正反定型相符，方可报告。
3．交叉配血试验的血样标本必须是输血前3天之内的。
4．输血科工作人员必须认真核对申请单、受血者和供血者的血样，复查受血者和供血者ABO血型，Rh(D)血型，正确无误后再进行交叉配血。
5．凡输注全血、浓缩RBC、洗涤RBC、冰冻RBC、浓缩WBC、浓缩血小板、机采血小板，都应做交叉配血试验，输注血浆(普通浆、冰冻血浆)也应做次侧配血试验。
6．血库必须严格按照实验规程操作，认真仔细做好交叉配血试验，两人核对操作相符，方可报告，并详细填写好“交叉配血报告单”，报告单上必须双人签名，时间精确到分钟。
7．交叉配血合格后，受血者与供血者的血样及主侧、次侧管均应放入2～6℃专用冰箱内至少保存7天，以备对输血不良反应追查原因。
8．对于手术上或其他急诊大输血时，输血科应先交叉配合1~2袋血并及时送往病室或手术室，然后再交叉配合剩下的血液。
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受、供血者如果
ABO血型相同，但其他血型不同时，在交叉配
血时也可出现凝集，为避免异型血输入后的
溶血反应，在目前许多实验室都不能进行稀
有血型鉴定的情况下，全靠交叉配血发现这
些血型的不同及免疫抗体的存在。
3.当受血者一次输血超过1600～2000m1，
或在48小时内输入5L或更多血时,称为大量
输血,这时就需要多个供血者的血液,在配血
盐 水 凝 集 法 ）
报告方式
（X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 （3）受血者xxx与供血者xxx配血是否相合
DC1滴
PS1滴
主侧配血管
1000r/min 离心1min 观 察 上 层 液 有 无 溶 血
轻摇试管
肉眼观察有无凝集
有凝集 （复查）
PC1滴
DS1滴
镜检证实 无凝集
次侧配血管
交叉配血盐水介质法操作示意图
5．盐水配血试验阴性，但有反复输血史或 妊娠史的受血者，应加酶法、抗人球蛋白 法等配血。 6．为确保输血的安全，应输同型血。
三、血型鉴定与交叉配血的异常及其克服 办法
（一）责任性错误
血型鉴定和交叉配血的技术并不复杂，
因配血错误而导致输入不合血液的事故中，
大多数是因为不严格执行操作规程或操作
ABO血型鉴定错误可以引起严重的后
果。
鉴定结果错误因素主要有技术问题及
ABO血型本身的问题。
二、交叉配血
（一）交叉配血的重要性
交叉配血是在输血前必须做的试验。 交叉配血中最重要的是ABO血型配合， 必需ABO血型相同，且交叉配血无凝 集才能输血。
（二）交叉配血一些基本概念
概念：是检查供血者与受血者是否含有不相 合的抗原和抗体成分的试验，主要是检查受 血者血清中有无破坏献血者RBC的抗体。
【注意事项】
交 1.如果对患者的输血史或妊辰史不明， 叉 必须使用48h内的标本。 配 血 2.不能使用溶血标本。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
3.配血后，受血者/供血者的全部标本 须于2～6℃冰箱保存7d以备复查。
交 叉 配 血
（ 盐 水 凝 集 法 ）
【方法学评价】
本法简易、经济、快速，缺点是
仅用于检查ABO血型系统的IgM 血型抗体是否相配，不能检出不 相配的IgG血型抗体。
血型抗体）
2、聚凝胺法 3、抗人球蛋白法 4、蛋白酶法 5、微柱凝胶法
方法选择原则
①无输血及妊娠史者，只需作盐水配血。※
②有输血史，妇女有原因不明的流产史及新生 儿溶血病者，应用木瓜酶或抗人球蛋白、聚凝 胺介质法。
③有多发性骨髓瘤，进行性结核，肝损伤，输 过右旋糖酐的病人，为避免假阳性，作抗人球 蛋白配血。
正常人红细胞上有T抗原，血清中有抗T，但因红 细胞表面存在的唾液酸使T抗原无活性，如果红
细胞被细菌污染，细菌酶消化了红细胞表面的唾
液酸，暴露出T抗原而被激活，可与多数人血清 凝集称为多凝集，如与所有人血清都凝集称为全 凝集。出现这两种现象时可用多份AB型血清加以 证实，因此种现象与AB型血清也发生凝集，应重
时不但受血者和供血者之间要交配血,多
个供血者之间也应互相交叉配血,为保证受
血者的安全，要求主侧、次侧及献血员之间
交叉配血均不凝集时，方可输血。
4.在急诊配血时, 对急需情况可采用试管 法配血，在15min内发血。对特急情况应立即 发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。 然后尽快复查血型和配血，如表现有配血禁 忌，应立即通知负责医师及时处理。
红细胞呈缗钱状排列
某些疾病如肝病、肾炎因患者血清中白蛋 白含量低而致球蛋白含量相对或绝对性增 高，使红细胞成钱串状排列，外观类似凝 集，真与假的区别是在镜下观察时，假凝 集红稀薄成钱串状排列，形状基本完整， 加一滴等渗盐水于玻片上并混匀后钱串状 排列消失，而真凝集加等渗盐水红细胞不 会散开。
全凝集或多凝集现象
正反定型结果不一致的解决办法
⑤如怀疑血清中有抗A1，可用数份A2红细 胞标本进行检验。 ⑥如果试验结果未见凝集，应将反应管至 少在室温和40℃分别放置30min，用显 微镜检查。 ⑦若怀疑是由于抗原减弱造成的正反定型 不符，可进一步做木瓜酶试验、直接抗 球蛋白试验、吸收放散试验等加以鉴别。
ABO 血 型 鉴 定
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
1. 离心机选择：一般使用微柱凝胶卡专用 水平离心机。使凝集复合物不偏向一侧， 特别是阴性结果不偏向管底之一侧，以 免造成弱阳性假象。 2. 操作：蒋待检者的稀释后的悬红用微量 加样枪分别加在A.B.D和阴性对照孔各 50ul 3. 离心：为了应用不同离心半径和不同离 心机进行凝胶试验，应通过试验设定每 台离心机的最佳时间和速度。
1、室温盐水配血法
交 叉 配 血 【原理】天然IgM类血型抗体与对应红细 胞在室温下的盐水介质中出现凝集反应。
通过离心，观察受血者血清与供血者红
细胞（主侧）以及受血者红细胞与供血
者血清（次侧）之间有无凝集的现象，
判断受血者与供血者之间有无ABO血型
不合的现象。
判断配血是否相合※
交 ①ABO同型配血，主、次侧均无溶血及凝 叉 集，血型相合，可以输血；主、次侧任 配 血 何一管发生溶血或凝集，不可输血，应
交叉配血试验的注意事项
1．用于交叉配血的病人（受血者）血液标 本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是
刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管
的血液。
2．采用试管法作交叉配血试验，最好
不用玻片法。
3．用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防 纤维凝块的形成。 4．配血管中发生溶血现象，表明有抗原抗 体反应同时还有补体参与，是配血不合的 严重情况，应十分重视。
清抗体
＋表示凝集，－表示无凝集
对抗血清的要求※
①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
查方法。
正反定型结果不一致的解决办法
ABO
项
血 ①首先重复试验，如果仍然不符继续下列试 验。 型 鉴 ②重新采集新鲜血液标本，以纠正因污染或 定 样本错误造成的不符合。 （ 盐 水 ③多次洗涤被测红细胞和标准红细胞，除去 法 可能会影响试验结果的血浆中或红细胞保 ） 存试剂中的化学成分。 注 意 事 ④用抗A1、抗A+B检测红细胞。
凝胶上层，而未和抗体结合的红细胞则沉
于凝胶底部（管底尖部）※。
【器材】微量吸样枪，一次性吸头，微柱凝
胶卡专用水平离心机。
【试剂】 特异性凝胶微柱卡
【操作】
ABO
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
（1）将被检者红细胞（不用洗涤）配成2％～3％ 生理盐水悬液，向已标记好的特异性凝胶微柱卡 血 的微管反应腔内加50μL.
Dc1滴
PS1滴
低离子 溶液 0.6ml
加凝聚胺2滴， 混匀15s
弃去上清 不凝集：试剂无效 1000r/min 离心1min 加解聚液2滴
主侧配血管
混匀 主 侧 、 次 侧 配 血 管
PC1滴
DS1滴
凝集 1 分 钟
次侧配血管
镜检判断配血是否 相合
交叉配血凝聚胺介质法操作示意图
【方法学评价】
供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉 配血※）
受血者红细胞与供血者血清反应（次侧交叉 配血※）
献血者
红细胞 血清
受血者
红细胞 血清
交叉配血目的 ①发现ABO血型鉴定的错误。
②发现不规则凝集素。如冷凝集素。
③发现其他血型抗体和一些不规则抗体。
（三）交叉配血方法
1、室温盐水配血法（只能检出IgM型
操作标准化，结果特异、准确可靠，重
血 型 可手工、半自动及全自动操作 鉴 定 不足之处：
复性好、灵敏度高。
需要特殊试剂和离心机 成本较高。
【原理】凝胶具有分子筛效应和亲合效应，
ABO 血 型 鉴 定
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
在微株凝胶介质中红细胞抗原与相应抗体
结合，经低速离心，凝集的红细胞悬浮在
（ 盐 水 法 ） 注 意 事 项
2．凝胶微柱法
凝胶具有分子筛效应和亲合效应 亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合 ABO
血 分子筛效应：低速离心后，凝集红细胞 型 悬浮在凝胶中，而未被抗体结合的红细 鉴 胞则沉于凝胶底部（管底尖部）。 定 结果观察：
肉眼/血型分析仪
ABO
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
4.类B抗原
5.自身免疫性温性抗体
冷凝集
冷凝集素是指冷反应型抗红细胞抗体，这些 自身抗体只能在低温时与红细胞膜相关抗原 结合。疑为存在冷凝集时，正定型采用经37 度生理盐水洗涤的红细胞3次，反定型采用患 者经4度放置1hr后分离的血清，将反应管放 37度水浴5min后观察结果。交叉配血存在冷 凝集现象时，仍然认为交叉配血是相合的， 可以输血。但需提醒临床保温输血。
【方法学评价】本法是确定不完全 抗体最可靠的方法※，但操作较 繁琐，需多次洗涤，需要时间长， 试剂较贵，故始终未能成为临床 常规的配血方法。
交叉配血试验的临床意义
1．进一步验证受血者和供血者血型鉴 定是否正确，发现ABO系统的不规则抗体， 以避免血型鉴定错误而导致的输血后的严 重溶血反应。
2．发现其他的血型抗体
（ 盐 水 凝 集 法 ）
查找原因。
②异型配血时，主侧无凝集无溶血，次侧
有凝集无溶血，可以输少量血；如主侧、
次侧均不凝集或主侧凝集，不能输血，
需查找原因