常见血型鉴定和交叉配血中问题分析和处理

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a.所有试剂及细胞37℃孵育, 37℃下判读结果 b.将冷自身抗体吸收 c.将血清用0.01mol/L DTT处理和再定型
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼自身免疫性温型抗体
↑自身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自身抗体
↑37℃反应比室温强 ↑血清能凝集自身和其他各型红细胞 ↑若红细胞上吸附自这种自身抗体,在自身或他人血清中
患者接受了ABO血型不同的骨髓移植
原因
三、血清标本的问题
患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗-A、
抗-B作用,结合到红细胞膜上,遮蔽了A、B抗原 位点,不发生凝集
分析和处理
基本程序
1.重新采集标本,以避免采集、标记、污染等错误 2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史 3.彻底洗涤标本或试剂红细胞 4.应用抗-AB、抗-A1、或抗-H检测红细胞 5.分析抗筛结果,确定结果是否受同种异型或自身冷抗
盐水介质交叉配血
只能检出IgM类抗体(主为ABO血型系统抗体),无法检 出IgG,具有很大的危险性,只能在受血者血清中不含 临床有意义抗体的情况下进行。
检测不完全抗体的交叉配血
临床最常见的迟发型输血反应——ABO系统以外的其 他血型(如Rh)的IgG类抗体导致的血型不相容
有输血史、妊娠史或血清中有意外抗体的患者必须进 行不完全抗体的交叉配血试验
Ac:++ Bc: -
吸收放散试验证明: 患者RBC上有A抗原, 无B抗原,为A型
3.将患者血清用O型标准RBC吸收
等份血清+等份O细胞 振荡 室温 15~30min
离心,取上清,转移到另一等份O细胞中
吸收后的血清与标准A、B红细胞反应
Ac: -
Bc:++
患者血清中有 抗-B,无抗-A
患者血型最终确定为A型 RhD(+),输 注2U 经过筛选的A型悬浮RBC后,未见任何 不良反应
交叉配血不相容的原因及解决办法
四、血清蛋白紊乱及白球蛋白比例倒置引起的假凝集:
如多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表现为主 侧凝集
交叉配血不相容的原因及解决办法
五、ABO血型以外的其它血型系统引起的交叉配血不合: 常发生于有输血史、妊娠史的患者,产生主侧凝集。 如抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-I、抗-e和
☆血型抗原表达减弱的常见原因
↑ABO亚型红细胞 ↑白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原
太弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期 的凝集反应 ↑新生儿
分析和处理
一、抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
☆抗原表达减弱所致ABO正反定不符的处理
↑将抗-A、抗-B和抗-A,B试剂与洗涤过的红细胞在 室温或4℃孵育30min,以增强抗原、抗体的结合
血型鉴定和交叉配血 中常见问题分析和处理
Click to ad血d T型itl相e 容性检测 ABO血型正反定不一致的原因分析及处理
交叉配血中常见问题分析及处理 意外抗体筛选的意义和检测方法 C弱licDk检to测ad的d T意itle义和检测方法
第一部分
血型相容性检测
• 受血者和供血者AB0血型是否相容 • 受血者和供血者RhD血型是否相容 • 主次侧交叉配血是否相容 • 受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体
离心速度过大、时间过长 使用了受到细菌污染的试剂 试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误
原因
二、红细胞标本问题
患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细 胞,如骨髓移植患者,或非O型人接受O型红细胞
原因
二、红细胞标本问题
◆某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞,一
些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原减 弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期的凝集 反应
只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用 了大量大分子药物等原因,可发生类 似凝集现象,如缗钱状凝集
将血清用生理盐水稀释3倍或用盐 水替换技术可消除
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼冷自身抗体,如抗-I、抗-IH、抗-IA等(自凝)
☆引起意外血清学反应的因素
↑抗体太弱或消失
↑非正常高浓度的抗-A、抗-B可引起前带现象 ↑A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗-A1 ↑患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物
等原因,可发生类似凝集现象,如缗钱状凝集
分析和处理
三、意外的血清学反应所致的ABO正 反定不符
☆引起意外血清学反应的因素
二、红细胞标本问题
患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏(包 被)自身红细胞,以至自发地发生凝集,而不是试剂 的特异性免疫反应所致
红细胞表面包被IgG类抗体
原因
三、血清标本的问题
小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集, 如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。
原因
↑冷自身抗体,如抗-I、抗-IH、抗-IA等
↑自身免疫性温型抗体
↑同种抗体/意外抗体
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼抗体太弱或消失
如新生儿、老年人、免疫抑制患者,应注意患者的年 龄和诊断
▼非正常高浓度的抗-A、抗-B可引起前带现象,导致假
阴性,将血清稀释或用EDTA(2.5%)处理可消除 ▼A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗-A1, 抗-A1
原因
二、红细胞标本问题
红细胞获得性或遗传性的异常,如获得性B抗原红 细胞或Tn/T多凝集红细胞,人血清抗-A、抗-B 试剂可能与这些异常的红细胞反应
原因
二、红细胞标本问题
使用未洗涤的红细胞标本,其表面黏附的血浆或 血清中含针对抗-A、抗-B试剂中染色剂或其他 成分的抗体,出现假阳性反应
原因
病情简介
患者,女,38岁,因骨痛、贫血 2个月入院; Hb 65 g/L ,WBC 6.4 ×109 / L,PL T 90 ×109 / L, 尿本周蛋白阳性,BUN、Cr 均异常; 骨髓象示:浆细胞37% 。诊断:多发性骨髓瘤。有 既往输血史。
血型血清学检查
正定: A型,RhD(+) 反定: O型 直抗: (-) 抗筛: (+)
体干扰 6.室温孵育30min后,离心观察结果,以检测弱的抗原
抗体反应 7.用自身红细胞对照,以确定自身抗体的干扰
分析和处理
ABO正反定不符的分类
一、 抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定不符
三、 意外的血清学反应所致的ABO正反定不符
分析和处理
一、抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
抗体特异性抗体鉴定,选择抗原阴性的红细胞做反定
应用举例
多发性骨髓瘤致ABO血型鉴定困难1例
多发性骨髓瘤(MM):
一种恶性浆细胞疾病,大量分泌异常的单克隆 免疫球蛋白(M 蛋白) ,影响红细胞表面负电荷状 态,血清蛋白浓度和比例异常,A/G比例失调,红细 胞呈缗钱状非特异性聚集,给血型鉴定带来一定的 困难。
抗-Fyb等,用经筛选的不含相应抗原的血液进行 交叉配血即可消除。
交叉配血不相容的原因及解决办法
六、献血者红细胞DAT阳性:大约万分之一健康人包被
了IgG或补体的红细胞,不应输用此类细胞。
交叉配血不相容的原因及解决办法
处理
1.吸收试验
6次洗涤后的患者压积红细胞

等量的抗-A、抗-B血清(1:128) 4℃ 1h
离心,取上清,测吸收液的抗-A、抗-B效价
抗-A降低明显,抗-B 1:128
2.放散试验
彻底洗 涤
吸收后的患者RBC用NS洗涤6次+等量的NS 56℃ 10~15min
放散液与5%标准 A、B RBC反应
↗分泌型者唾液中无B血型物质 ↗乙酸酐处理能明显减弱其反应,但正常B细胞不受
影响
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性类A抗原
↗ 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性Tn 抗原激活,类同A抗原
↗ Tn和T一样属隐蔽性抗原,激活暴露后与所有血型的血 清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝)
三、血清标本的问题
免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老 年人ABO抗体减弱
4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体未产生或很弱,一 般只做正定型
原因
三、血清标本的问题
血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋 白增多可引起非特异凝集,如缗钱状红细胞的非特 异凝集。
血清中含抗-A、抗-B以外的其他红细胞抗体,如 抗-M、抗-I等。
↑用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞,以增 强抗原、抗体的结合
↑应用抗-AB、抗-A1、或抗-H检测红细胞
分析和处理
↑用人血清抗-A、抗-B进行吸收放散试验,检测弱A、
B抗原,但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸收放 散试验,单克隆抗-A、抗-B必须经过系统验证, 且同时要做O型血吸收放散试验作对照
↗蛋白酶能降解Tn分子,消除与抗A凝集反应性,而正常 A抗原不受影响,也可通过AB血清证实
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼混合视野凝集
↗非O型人近期输用O型血 ↗骨髓移植后 ↗A3细胞与抗-A呈典型的混合视野凝集现象 ↗单合子的镶嵌红细胞、双合子的交移体红细胞
分析和处理
↗常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病,也可发生 在正常人
↗通常只有A 型人能出现获得性B抗原 ↗常伴有T和T n多凝集红细胞出现(细菌感染时) ↗自身抗-B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性B红细胞(鉴定)
↗调整人血清抗-B试剂pH至6.0时,即不与获得性B 细胞反应
均可出现凝集
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼自身免疫性温型抗体 ↑正定被误认为AB型,反定被误认为O型
用递增温度(22℃,37℃,45℃)洗涤红细胞后 再做血型鉴定
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼同种抗体/意外抗体 室温下抗-P、抗-M、抗E等,可能出现意外反应,干 扰ABO血型鉴定
第三部分
交叉配血试验中常见问题分析和处理
交叉配血原则
除非极为紧急情况,输血前患者与献血者必须进 行交叉配血
受血者血清中无即刻或迟发性地凝集和(或)溶解 所输入的红细胞的抗体
献血者血清中无即刻或迟发性地凝集和(或)溶解 受血者红细胞的抗体
方法
盐水介质交叉配血 检测不完全抗体的交叉配血
容,出现问题最多的是,其次才是技术错误。
复查血型
责任错误
二、患者存在冷反应自身抗体:采用自身对照和37 ℃水 浴以及递增盐水温度洗涤患者红细胞等方法排除非 特异性凝集的干扰
交叉配血不相容的原因及解决办法
三、患者存在温反应自身抗体:采用吸收放散试验后取
患者的红细胞与血清和同型的洗涤红细胞进行交叉 配血。
↑检测唾液中A、B和H血型抗原物质
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反 应所致的ABO正反定不符
☆ 引起抗-A、抗-B血清意外反应的因素
↑ 获得性B红细胞
↑ 获得性类A抗原
↑ 混合视野凝集 ↑抗体包被红细胞
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性B红细胞(特征)
第二部分
ABO 正 反 定 型 不 符 的原因分析和处理
原因
一、实验者操作技术的错误 二、红细胞标本问题 三、血清标本的问题
原因
一Байду номын сангаас实验者操作技术错误
1.假阴性结果
未加入抗体或血清 未识别溶血 血清与红细胞比例不当 离心速度、时间不够
使用失效或错误试剂 实验结果记录、解释错误
原因
2.假阳性结果
包括抗人球蛋白法、蛋白酶法、促凝剂法等
抗人球蛋白法
鉴定不完全抗体最可靠的方法,传统的抗人球法不能成 为临床输血的常规检验。1986年,Lapierre发明的微柱 凝胶抗球蛋白试验准确、可靠、不需洗涤,可方便的应 用于抗体筛检和交叉配血试验
交叉配血不相容的原因及解决办法
一、血型鉴定错误:受血者、献血者红细胞ABO血型不相
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼抗体包被红细胞
↗ 患HDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成 人,其红细胞严重包被IgG抗体分子
↗与含一定蛋白质浓度的试剂(抗-D、抗-A、抗 -B)产生凝集
↗45 ℃放散后,抗体解离,即可准确定型
分析和处理
三、意外的血清学反应所致的ABO正 反定不符
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