血型鉴定与交叉配血 ppt课件
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血型ppt课件
血型鉴定和交叉配血试验
同济医院输血科 魏晴
血型基本知识
一、基本概念
血型： 血液遗传性状,多态性物质 血型系统：由数个相互关联的抗原抗体组
成
二、输血医学中最重要的血型系统
ABO血型系统 、 Rh血型系统
三、分子生物学基础
基因控制，基因的间接或直接产物
ABO血型系统
• 人类最早认识的血型系统 （1900年 Landsteiner 发现）
ABO、 Rh(D)血型鉴定
ABO血型鉴定 • 正反定型两者决定 • 正定型检测红细胞抗原 • 反定型检测血清中抗体 • 正反定型同时检测，才能正确判断ABO血
型 Rh(D)血型鉴定 • 正定型决定 • 正定型检测红细胞膜的D抗原
抗体筛选
• 目的：发现有临床意义的不规则抗体， 保障输血安全。
抗体筛选
• 输血医学中最重要血型系统
ABO血型系统
• 分类 分为A、B、O、AB四种血型 （1）红细胞上是否存在A、B抗原 （2）血清中是否存在抗A或抗B抗体 • 分布
红细胞、组织细胞、体液、分泌液
ABO血型系统分型
红细胞上存在的 血清中存在的 血型ຫໍສະໝຸດ 抗原抗体A抗原
抗B抗体
A
B抗原
抗A抗体
B
A、B抗原
无
AB
卫生部《临床输血技术规范》
筛选细胞
交叉配血
• 目的：检查受血者与供血者是否存在血型 抗原与抗体不合的情况
• 方法 主侧：受血者血清 + 供血者红细胞 次侧：受血者红细胞 + 供血者血清
ABO、Rh血型系统的临床意义
• 输血安全 • 新生儿溶血病 • 器官移植 • 其他
小结
• ABO血型分类 A型、 B型、 O型、AB型
同济医院输血科 魏晴
血型基本知识
一、基本概念
血型： 血液遗传性状,多态性物质 血型系统：由数个相互关联的抗原抗体组
成
二、输血医学中最重要的血型系统
ABO血型系统 、 Rh血型系统
三、分子生物学基础
基因控制，基因的间接或直接产物
ABO血型系统
• 人类最早认识的血型系统 （1900年 Landsteiner 发现）
ABO、 Rh(D)血型鉴定
ABO血型鉴定 • 正反定型两者决定 • 正定型检测红细胞抗原 • 反定型检测血清中抗体 • 正反定型同时检测，才能正确判断ABO血
型 Rh(D)血型鉴定 • 正定型决定 • 正定型检测红细胞膜的D抗原
抗体筛选
• 目的：发现有临床意义的不规则抗体， 保障输血安全。
抗体筛选
• 输血医学中最重要血型系统
ABO血型系统
• 分类 分为A、B、O、AB四种血型 （1）红细胞上是否存在A、B抗原 （2）血清中是否存在抗A或抗B抗体 • 分布
红细胞、组织细胞、体液、分泌液
ABO血型系统分型
红细胞上存在的 血清中存在的 血型ຫໍສະໝຸດ 抗原抗体A抗原
抗B抗体
A
B抗原
抗A抗体
B
A、B抗原
无
AB
卫生部《临床输血技术规范》
筛选细胞
交叉配血
• 目的：检查受血者与供血者是否存在血型 抗原与抗体不合的情况
• 方法 主侧：受血者血清 + 供血者红细胞 次侧：受血者红细胞 + 供血者血清
ABO、Rh血型系统的临床意义
• 输血安全 • 新生儿溶血病 • 器官移植 • 其他
小结
• ABO血型分类 A型、 B型、 O型、AB型
血型鉴定及交叉配血 ppt课件
1min
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
血型鉴定与交叉配血试验
（2） B亚型：B亚型不多见，命名也不统一， 一般称为B亚型或弱B。因其抗原性很弱，故B亚 型的临床意义不大。
3．ABO血型鉴定和交叉配血试验
（1）ABO血型鉴定：ABO血型抗体能在 生理盐水中，与相应红细胞抗原结合而发生凝 集反应。进行ABO血型鉴定时，采用标准的抗A 及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原（BethVincent直接试验），同时用标准的A型及B型红 细胞鉴定被检者血清中的抗体（Simonin反转试 验）。只有被检者红细胞上的抗原鉴定和血清 中的抗体鉴定所得结果完全相符时才能肯定其 血型类别。
用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果
标准血清+被检者红细胞 抗A血清 抗B血清 抗AB血清
（O型血清）
+
—
+
—
+
+
+
+
+
—
—
—
标准红细胞+被检者血清 A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞
—
+
—
+
—
—
—
—
—
+
+
—
被鉴定血 的血型
A型 B型 AB型 O型
（2） 交叉配血试验：输血前必须进行交叉 配血试验，其目的主要是进一步严正供者与受 者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定 错误而导致输血后严重溶血反应。为避免输血
问答题：
1、简述血型系统：
选择题：
1、根据红细胞表面的抗原和血清中的抗体判断血型， 正确的是（）
A、红细胞表面有A抗原，血清中有抗B抗体，为A型 B、红细胞表面有B抗原，血清中有抗A抗体，为A型 C、红细胞表面有A抗原，血清中有抗A和抗B抗体，为
3．ABO血型鉴定和交叉配血试验
（1）ABO血型鉴定：ABO血型抗体能在 生理盐水中，与相应红细胞抗原结合而发生凝 集反应。进行ABO血型鉴定时，采用标准的抗A 及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原（BethVincent直接试验），同时用标准的A型及B型红 细胞鉴定被检者血清中的抗体（Simonin反转试 验）。只有被检者红细胞上的抗原鉴定和血清 中的抗体鉴定所得结果完全相符时才能肯定其 血型类别。
用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果
标准血清+被检者红细胞 抗A血清 抗B血清 抗AB血清
（O型血清）
+
—
+
—
+
+
+
+
+
—
—
—
标准红细胞+被检者血清 A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞
—
+
—
+
—
—
—
—
—
+
+
—
被鉴定血 的血型
A型 B型 AB型 O型
（2） 交叉配血试验：输血前必须进行交叉 配血试验，其目的主要是进一步严正供者与受 者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定 错误而导致输血后严重溶血反应。为避免输血
问答题：
1、简述血型系统：
选择题：
1、根据红细胞表面的抗原和血清中的抗体判断血型， 正确的是（）
A、红细胞表面有A抗原，血清中有抗B抗体，为A型 B、红细胞表面有B抗原，血清中有抗A抗体，为A型 C、红细胞表面有A抗原，血清中有抗A和抗B抗体，为
血型鉴定及交叉配血
严格进行血型鉴定和交叉配血试验， 确保供、受体血型一致。
症状
寒战、高热、腰背酸痛、血红蛋白尿、 黄疸等，严重者出现血压下降、休克 和急性肾衰竭。
非溶血性输血反应
发生机制
与免疫因素有关，如过敏反应、 发热反应等。
症状
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹、咳嗽、 呼吸困难等，严重者出现过敏性
休克。
预防
对有过敏史的受血者进行预防性 用药，输血前仔细询问受血者过
O型血与疾病的关系
O型血人群患心血管疾病的风险 较低，但也有一定的风险。
O型血人群对某些病毒和细菌的 抵抗力较强，如流感病毒、肺炎
球菌等。
O型血人群患某些癌症的风险较 高，特别是结直肠癌和乳腺癌。
04 输血反应
CHAPTER
溶血性输血反应
发生机制
预防
由于供、受体的血型抗原不匹配，导 致红细胞在血液循环中溶解破坏。
A型血人群易感染某 些病毒和细菌，如流 感病毒、幽门螺杆菌 等。
A型血人群患癌症的 风险也相对较高，特 别是消化系统癌症。
B型血与疾病的关系
B型血人群患心血管疾病的风 险较低，但也有一定的风险。
B型血人群患某些自身免疫性 疾病的风险较高，如类风湿性 关节炎、系统性红斑狼疮等。
B型血人群易感染某些病毒和 细菌，如流感病毒、肺炎球菌 等。
敏史。
输血传播疾病
疾病种类
包括乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等。
传播途径
通过血液中携带病毒的微量红细胞或白细胞传播。
预防
对献血者进行严格的筛选和检测，采用病毒灭活 技术处理血液制品。
05 输血前检查
CHAPTER
输血前检查的内容
01
02
03
交叉配血检验(临床检验课件)
4.在急诊配血时, 对急需情况可采用试管法配血，在15min内发血。 对特急情况应立即发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。然后 尽快复查血型和配血，如表现有配血禁忌，应立即通知负责医师及 时处理。
血型鉴定与交叉配血的异常 责任性错误
假 阴 性 1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱 3. 红 细 胞 悬 液 浓 度 配 置 不 当 4. 将 溶 血 反 应 误 认 为 不 凝 集
微柱凝胶试验原理
凝胶微柱：试管上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26～103 nm的葡聚 糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞 通过 缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清）
微柱凝胶试验原理
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心 后观察凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上 部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳 性游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱， 而到达小柱的底部，证明未发生凝集判断凝集反 应阴性
报告方式
格式Ⅱ： 受血者
供血者
试验 结果
照
血型 血型
PS+DC PC+DS
盐水介质 酶介质 抗球蛋白介质
名：
反应情况 PS+PC 阳性对照 阴性对
签
交叉配血试验
同。
聚凝胺配血法 原理与Rh血型鉴定聚凝胺法原理相
交叉配血试验
聚凝胺配血法的结果如果加入解聚液后观察到 凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，为 配血相容。
第十四讲 交 叉 配 血
交叉配血试验
交叉配血（cross matching）试验是输血前必须做的红细胞系统的 配合性试验，以确保受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体 成分。可分为主侧配血和次侧配血。
主侧： 受血者血浆
血型鉴定与交叉配血的异常 责任性错误
假 阴 性 1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱 3. 红 细 胞 悬 液 浓 度 配 置 不 当 4. 将 溶 血 反 应 误 认 为 不 凝 集
微柱凝胶试验原理
凝胶微柱：试管上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26～103 nm的葡聚 糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞 通过 缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清）
微柱凝胶试验原理
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心 后观察凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上 部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳 性游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱， 而到达小柱的底部，证明未发生凝集判断凝集反 应阴性
报告方式
格式Ⅱ： 受血者
供血者
试验 结果
照
血型 血型
PS+DC PC+DS
盐水介质 酶介质 抗球蛋白介质
名：
反应情况 PS+PC 阳性对照 阴性对
签
交叉配血试验
同。
聚凝胺配血法 原理与Rh血型鉴定聚凝胺法原理相
交叉配血试验
聚凝胺配血法的结果如果加入解聚液后观察到 凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，为 配血相容。
第十四讲 交 叉 配 血
交叉配血试验
交叉配血（cross matching）试验是输血前必须做的红细胞系统的 配合性试验，以确保受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体 成分。可分为主侧配血和次侧配血。
主侧： 受血者血浆
实验15 血型鉴定&交叉配血
【操作】 正定型 （一）试管法： 1、制备5%RBC被检生理盐水悬液： 1mlN.S+2d末梢血→成大红色 2、取小试管2支，分别标记抗A、抗B 3、在抗A管滴加抗A标准血清1d、 抗B管滴加抗B标准血清1d 4、于两管各滴加1d被检悬液 5、1500r/min离心1min 6、观察结果 轻弹试管底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集， 呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。
一、 ABO血型系统鉴定
（二）玻片法
抗A标准检悬液1d 竹签混匀，静置15min，观察结果： 肉眼与显微镜下观察有无凝集
一、 ABO血型系统鉴定
结果判断： eg： 抗A标准血清+RBC悬液→凝集； 抗B标准血清+RBC悬液→不凝集 结果报告： 血型正定型为： X型
一、 ABO血型系统鉴定
【原理】 ABO血型系统天然抗体（IgM）分子量大， 能在生理盐水介质中与相应RBC抗原结合 发生凝集反应，以标准血清（抗A、抗B） 鉴定红细胞上的抗原（正定型），或用标 准红细胞鉴定被见血清的抗体（反定型）。 当出现凝集时，存在与已知抗体相应抗原 或已知抗原相应的抗体。
一、 ABO血型系统鉴定
｝A型
二、交叉配血试验
【原理】 将受血者的红细胞与血清分别同供血者的 血清与红细胞混合，观察有无凝集现象 ， 来判断受血者与供血者之间配血是否相合。
二、交叉配血试验
【操作】 1、准备：①制备受血者RBC悬液 ②制备供血者RBC悬液 ③制备受血者血清 ④制备供血者血清 2、取小试管2支，分别标记主侧、次侧 3、加血清和细胞悬液： 在主侧管中分别加②和③各1滴， 在次侧管分别加④和①悬液各1滴，混匀。 4、1 000r/min离心1 min。 5、观察结果 同ABO血型正定型试管法。
一、 ABO血型系统鉴定
（二）玻片法
抗A标准检悬液1d 竹签混匀，静置15min，观察结果： 肉眼与显微镜下观察有无凝集
一、 ABO血型系统鉴定
结果判断： eg： 抗A标准血清+RBC悬液→凝集； 抗B标准血清+RBC悬液→不凝集 结果报告： 血型正定型为： X型
一、 ABO血型系统鉴定
【原理】 ABO血型系统天然抗体（IgM）分子量大， 能在生理盐水介质中与相应RBC抗原结合 发生凝集反应，以标准血清（抗A、抗B） 鉴定红细胞上的抗原（正定型），或用标 准红细胞鉴定被见血清的抗体（反定型）。 当出现凝集时，存在与已知抗体相应抗原 或已知抗原相应的抗体。
一、 ABO血型系统鉴定
｝A型
二、交叉配血试验
【原理】 将受血者的红细胞与血清分别同供血者的 血清与红细胞混合，观察有无凝集现象 ， 来判断受血者与供血者之间配血是否相合。
二、交叉配血试验
【操作】 1、准备：①制备受血者RBC悬液 ②制备供血者RBC悬液 ③制备受血者血清 ④制备供血者血清 2、取小试管2支，分别标记主侧、次侧 3、加血清和细胞悬液： 在主侧管中分别加②和③各1滴， 在次侧管分别加④和①悬液各1滴，混匀。 4、1 000r/min离心1 min。 5、观察结果 同ABO血型正定型试管法。
血型鉴定与交叉配血
血型鉴定与交叉配血试验（1）ABO血型鉴定：正反定型标准血清+被检者红细胞标准红细胞+被检者血清被鉴定的血型抗A 血清抗B 血清抗AB血清（O型血清）A型红细胞B型红细胞O型红细胞+-+-+-A型-+++--B型+++---AB型---++-O型用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果正定型反定型（2）交叉配血试验：输血前必须进行交叉配血试验，其目的主要是进一步验证供者与受者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定错误导致输血后严重溶血反应。
Ø交叉配血试验常采用试管法进行Ø受血者血清加供血者红细胞悬液相配的一管称为主侧Ø供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为次侧（一）ABO血型系统（一）ABO血型系统交叉配血的结果判断：Ø同型血 主侧管与次侧管均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；不论何种原因导致主侧管有凝集时，则绝对不可输用。
Ø异型血 主侧管无凝集及溶血，而次侧管出现凝集，但凝集较弱，效价<1∶200，可以试输少量（不超过200ml）该型血液。
理论上可以，但实际上不允许这样做，并且做的临床实际价值不大。
配血方法的选择：ABO血型系统 Ø对无输血史及妊娠史者，可只作盐水介质凝集试验。
Ø对有反复输血史及妊娠史者，则应作间接抗球蛋白配血法。
Ø在48小时内输入5L或更多量的大量输血时，因需同时输入多名供血者的血液，因此除了进行受血者与各供血者的交叉配血外，还应坚持作供血者之间的交叉配血试验，只有相互交叉配合完全相合时才能输用。
（一）ABO血型系统一、红细胞血型系统受血者有输血史、妊娠史或短期内要大量输血时按规定要进行意外抗体的筛查4.ABO血型系统的临床意义（1）在输血上的意义Ø输血在临床上的应用颇为广泛，如严重失血或某些手术时，输血常是治疗和抢救的重要措施。
Ø为防止输血反应必须坚持同型输血。
交叉配血试验.ppt
谢谢交叉配血试验.ppt
演讲人
交叉配血实验主要是用于供血前确认供者血型与受者血型是不是配合，尽量的避免 输血反应。输血前必须进行两项输血实验，血型鉴定和交叉匹配。
理论上一旦已知受血者血型便可输注配合的血液，是在实践中供者血和受者血可以 仍然有不相容的情况，主要是因为供血可能包含其他非常规血型抗原，而受血者血 清中如存在针对这些抗原的抗体就可能会造成输血反应，所以交叉配血是非常重要 的。
交叉配血实验是观察主副实验是不是发生凝集决定临床输血的可行性，血型完全配 合，输血是最安全的。血型部分配合，尽在应急的时候少量输血并需要严密观察是 不是有输血反应，血型完全不配合是绝对不要输血的。
总之血型完全配合或者是部分配合是可以输血的指征，血型完全不配合也就是主实验和 副实验均凝集是严禁输血的。
演讲人
交叉配血实验主要是用于供血前确认供者血型与受者血型是不是配合，尽量的避免 输血反应。输血前必须进行两项输血实验，血型鉴定和交叉匹配。
理论上一旦已知受血者血型便可输注配合的血液，是在实践中供者血和受者血可以 仍然有不相容的情况，主要是因为供血可能包含其他非常规血型抗原，而受血者血 清中如存在针对这些抗原的抗体就可能会造成输血反应，所以交叉配血是非常重要 的。
交叉配血实验是观察主副实验是不是发生凝集决定临床输血的可行性，血型完全配 合，输血是最安全的。血型部分配合，尽在应急的时候少量输血并需要严密观察是 不是有输血反应，血型完全不配合是绝对不要输血的。
总之血型完全配合或者是部分配合是可以输血的指征，血型完全不配合也就是主实验和 副实验均凝集是严禁输血的。
血型鉴定与交叉配血
• 约80%以上Rh阴性受血者在接受Rh 阳性血液后能产生抗体。
• 首次输血不合不发生输血反应,但再 次输血如受血者或者孕妇血浆中含 有Rh抗体时,与含有相应抗原血液相 遇，将引起严重的输血反应 或新生 儿溶血病。
• 输血前须定Rh血型
三、交叉配血、输血原则
1、交叉配血 主侧交叉配血：
受血者血清+献血者红细胞 次侧交叉配血:：
3、抗体
抗A、 抗B、抗AB属IgG 或IgM型，天然性 抗体以IgM为主，免疫性以IgG为主（如 输血、妊娠后）。 O血型血清内抗体属IgG。新生儿溶血与 IgG有关。抗体也终生不变
4、血型鉴定
用已知的标准血清和红细胞与待测的血液进行 特异性反应，根据凝集结果定
正向定型：用已知抗体特异性的血清检查红细 胞的抗原
反向定型：用已知血型的红细胞检查血清中抗 体
5. 意义
输血 辅助诊断新生儿溶血病 与临床意义
1900年发现ABO血型，1940年发现Rh血型 。
抗原有C c D E e五种 ，一般以D定型。
临床上将含有D抗原的红细胞称为Rh阳 性，不含D抗原的为Rh阴性.我国人群汉 族Rh（+）占99.7％， Rh(—)占0.3％。
血型（表型）红细胞上抗原 血浆中抗体 基因型
A
A
抗B
AA、AO
B
B
抗A
BB、BO
O
无
抗A、 抗B、抗AB OO
AB
A、B
无
AB
2、抗原
A、B抗原（含H抗原）在胚胎期已 形成，出生时抗原性不强，故胎 儿、新生儿定血型时凝集性差。
血型抗原终生不变。H抗原属分泌 型物质，存在各组织中，以唾液 为多，可辅助鉴定ABO血型。
血型鉴定和交叉配血专题培训课件
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
血型鉴定与交叉合血课件
一 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分 布。
•血型鉴定与交叉合血
•6
2.玻片法
（1) 取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格， 标明抗-A、抗-B、抗A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B、 抗-A+B分型血清1滴于标明的方格内，再各加受检者2 ％红细胞悬液1滴，混和。
（ 2) 另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成 方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检 者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞 悬液1滴。
抗-A、抗-B 、抗-A+B,用滴管分别加抗-A、抗-B 、抗-A+B分 型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细 胞盐水悬液1滴，混和。
（ 2）另取洁净小试管（内径10mm×60mm)3支，分别标 明A、B、O细胞,用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部， 再以滴管分别加入5％ A、B、O试剂红细胞盐水悬液1滴，混 和。
•
•血型鉴定与交叉合血
•15
5)如果试验结果未见凝集，应将试验至少在 室温和4℃放置30min，用显微镜检查核 实。
6) 若疑为A抗原或B抗原减弱，将受检红细胞与抗-A 或抗-B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作 A、B、H血型物质测定。后者只对80%HAB分泌型 的人有用。
7) 若试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水l 滴，混和，往往可使缗钱现象消失。应注意，不 要先加盐水l滴于受检者血清中而后和红细胞作试 验，以免使血清中抗体被稀释。
十─
十
A
─十
十
B
──
─
O
十十
十
AB
受检者血清+试剂RBC
A细胞 ─ 十 十
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抗球蛋白介质配血 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法
聚凝胺介质配血
凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
只能检测IgM抗体，不能检测IgG抗体
凝聚胺(Polybrene)配血法
原理：凝聚胺分子是带高价阳离子多聚
季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中 和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝 聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的 Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的 吸引力。
酶介质法
红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木 瓜酶或唾液酶破坏红细胞表面的唾液酸， 降低红细胞表面的负电荷，减少红细胞 表面的排斥力，促进Rh抗原与相应的抗 体结合而产生凝集。
低离子强度溶液实验
红细胞外围的阴离子是红细胞稳定因素 之一，降低反应介质的离子强度，可减 少外围阴离子，促进带正电荷的IgG性 Rh抗体与红细胞发生凝集反应，从而增 加凝集强度。
反定型是用已知A细胞和B细胞来测 定血清中有无相应的抗A或抗B。
ABO血型鉴定实验原理
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红 细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗 体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗 体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→ 从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B 抗原→判断血型。
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
血型抗原
红细胞血型抗原： 已确定的有29个系统、200多种抗原
其中必查血型抗原： ABO抗原和RhD抗原
原理
根据红细胞膜上有无A抗原或B抗 原，将血型分为A型、B型、AB型 及O型四种。通常利用红细胞凝集 试验，通过正定型和反定型鉴定 ABO血型。
血型鉴定
正定型是用已知抗A和抗B分型血清 来测定红细胞上有无相应的A抗原或 B抗原；
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
献
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
血
者
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶
凝
血现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红
细胞在允许范围内，可 以有凝集现象，但不可
不
以有溶血。
凝
集
交叉配血试验方法
盐水介质配血
酶介质配血 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶
某些疾病如多发性骨髓瘤、慢性肝病患 者所致的高球蛋白血症可能使红细胞出 现凝集
标本无溶血
Rh血型鉴定
Reaction of antibodies
血型血清学检测的基本原理
凝聚胺实验
凝聚胺是带高价阳离子的季铵盐，溶解 后产生正电荷中和红细胞表面的负电荷， 减少红细胞表面的排斥力，有利于红细 胞凝集。
时间长 凝集较弱时易导致定型错误
实验原理
血型不相容的两人血液 混合,则红细胞可凝集成簇
含某种凝 集原的红 细胞
含相应凝
+ 集素的血 清
红细胞凝集反应 (agglutination)
观察结果 如有凝集反应可见到呈红色点 状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有 无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低 倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见 红细胞聚集成团。
当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与 红细胞发生紧密结合，此时加入枸橼酸盐 解聚液以消除聚凝胺的正电荷，使IgM或 IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开； 如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体， 加入解聚液可使非特异性凝集消失。
凝聚胺(Polybrene)配血方法
患
者
主
献
侧
次 侧
室温放置 1 分钟
完全不凝:血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐， 用手轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升， 随即成为均匀的悬液；
轻微凝集:必须将液体转到载玻片上镜检后判 定凝集程度。
试管法(反定型)
Ac
Bc
受检者血清 2滴
2滴
2滴
5%的A型红细胞悬液
1滴
5%的B型红细胞悬液
1滴
立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心 15秒。
轻轻扣动试管底部，观察结果----同前
时间短 可发现较弱凝集
血型判定
正定型
反定型
抗A
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
结果 O
+
--
+
-
A
-
++
-
-
B
+
+-
-
-
AB
凝胶微柱法
质量控制
人血清ABO血型抗体
高度特异性
效价 抗A不低于1:128 抗B不低于1:64 高亲和性理 血型抗体与对应红细胞抗 原在室温下的盐水介质中出现凝集 反应。通过离心，观察受血者血清 与供血者红细胞(主侧)以及受血者 红细胞与供血者血清(次侧)之间有 无凝集现象，判断受血者与供血者 之间有无ABO血型不合的情况。
红细胞血型系统交叉配血试验
交叉配血试验的内容
患
主侧配血
者
用患者血清与供
>1mm2 无冷凝集素 无菌
人ABO血型单克隆抗体
特异性 亲和性 抗A对A1/A2/A2B出现凝集时
间分别为15秒、30秒、45秒，抗B出现 时间为15秒 效价 抗A1和抗B均为1:128 灭活补体 否则可能发生溶血，影响血 性判断
被检红细胞
标本新鲜 细菌污染的红细胞上T抗原激 活，与标准血清中抗T抗体结合，发生凝 集
判断血型 根据被试者红细胞是否被A， B型标准血清所凝集，判断其血型。
2.试管法(正定型)
A
B
A标准血清
2滴
B标准血清
2滴
受试者的红细胞悬液
1滴
1滴
混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。
取出观察结果:
完全凝集:管底部有红细胞的凝块，管底细胞 边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；
抗球蛋白试验
不完全抗体多于相应红细胞结合，在盐 水介质中不出现凝集，利用抗球蛋白抗 体作为第二抗体，链接致敏红细胞表面 的特异性抗体，使致敏红细胞出现特异 性凝集。
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性
聚凝胺介质配血
凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
只能检测IgM抗体，不能检测IgG抗体
凝聚胺(Polybrene)配血法
原理：凝聚胺分子是带高价阳离子多聚
季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中 和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝 聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的 Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的 吸引力。
酶介质法
红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木 瓜酶或唾液酶破坏红细胞表面的唾液酸， 降低红细胞表面的负电荷，减少红细胞 表面的排斥力，促进Rh抗原与相应的抗 体结合而产生凝集。
低离子强度溶液实验
红细胞外围的阴离子是红细胞稳定因素 之一，降低反应介质的离子强度，可减 少外围阴离子，促进带正电荷的IgG性 Rh抗体与红细胞发生凝集反应，从而增 加凝集强度。
反定型是用已知A细胞和B细胞来测 定血清中有无相应的抗A或抗B。
ABO血型鉴定实验原理
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红 细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗 体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗 体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→ 从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B 抗原→判断血型。
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
血型抗原
红细胞血型抗原： 已确定的有29个系统、200多种抗原
其中必查血型抗原： ABO抗原和RhD抗原
原理
根据红细胞膜上有无A抗原或B抗 原，将血型分为A型、B型、AB型 及O型四种。通常利用红细胞凝集 试验，通过正定型和反定型鉴定 ABO血型。
血型鉴定
正定型是用已知抗A和抗B分型血清 来测定红细胞上有无相应的A抗原或 B抗原；
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
献
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
血
者
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶
凝
血现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红
细胞在允许范围内，可 以有凝集现象，但不可
不
以有溶血。
凝
集
交叉配血试验方法
盐水介质配血
酶介质配血 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶
某些疾病如多发性骨髓瘤、慢性肝病患 者所致的高球蛋白血症可能使红细胞出 现凝集
标本无溶血
Rh血型鉴定
Reaction of antibodies
血型血清学检测的基本原理
凝聚胺实验
凝聚胺是带高价阳离子的季铵盐，溶解 后产生正电荷中和红细胞表面的负电荷， 减少红细胞表面的排斥力，有利于红细 胞凝集。
时间长 凝集较弱时易导致定型错误
实验原理
血型不相容的两人血液 混合,则红细胞可凝集成簇
含某种凝 集原的红 细胞
含相应凝
+ 集素的血 清
红细胞凝集反应 (agglutination)
观察结果 如有凝集反应可见到呈红色点 状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有 无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低 倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见 红细胞聚集成团。
当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与 红细胞发生紧密结合，此时加入枸橼酸盐 解聚液以消除聚凝胺的正电荷，使IgM或 IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开； 如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体， 加入解聚液可使非特异性凝集消失。
凝聚胺(Polybrene)配血方法
患
者
主
献
侧
次 侧
室温放置 1 分钟
完全不凝:血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐， 用手轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升， 随即成为均匀的悬液；
轻微凝集:必须将液体转到载玻片上镜检后判 定凝集程度。
试管法(反定型)
Ac
Bc
受检者血清 2滴
2滴
2滴
5%的A型红细胞悬液
1滴
5%的B型红细胞悬液
1滴
立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心 15秒。
轻轻扣动试管底部，观察结果----同前
时间短 可发现较弱凝集
血型判定
正定型
反定型
抗A
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
结果 O
+
--
+
-
A
-
++
-
-
B
+
+-
-
-
AB
凝胶微柱法
质量控制
人血清ABO血型抗体
高度特异性
效价 抗A不低于1:128 抗B不低于1:64 高亲和性理 血型抗体与对应红细胞抗 原在室温下的盐水介质中出现凝集 反应。通过离心，观察受血者血清 与供血者红细胞(主侧)以及受血者 红细胞与供血者血清(次侧)之间有 无凝集现象，判断受血者与供血者 之间有无ABO血型不合的情况。
红细胞血型系统交叉配血试验
交叉配血试验的内容
患
主侧配血
者
用患者血清与供
>1mm2 无冷凝集素 无菌
人ABO血型单克隆抗体
特异性 亲和性 抗A对A1/A2/A2B出现凝集时
间分别为15秒、30秒、45秒，抗B出现 时间为15秒 效价 抗A1和抗B均为1:128 灭活补体 否则可能发生溶血，影响血 性判断
被检红细胞
标本新鲜 细菌污染的红细胞上T抗原激 活，与标准血清中抗T抗体结合，发生凝 集
判断血型 根据被试者红细胞是否被A， B型标准血清所凝集，判断其血型。
2.试管法(正定型)
A
B
A标准血清
2滴
B标准血清
2滴
受试者的红细胞悬液
1滴
1滴
混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。
取出观察结果:
完全凝集:管底部有红细胞的凝块，管底细胞 边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；
抗球蛋白试验
不完全抗体多于相应红细胞结合，在盐 水介质中不出现凝集，利用抗球蛋白抗 体作为第二抗体，链接致敏红细胞表面 的特异性抗体，使致敏红细胞出现特异 性凝集。
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性