骨碎补、淫羊藿配伍杜仲防治小鼠骨质疏松的疗效观察

骨碎补、淫羊藿配伍杜仲防治小鼠

骨质疏松的疗效观察

东北林业大学

陈喜君张媛媛

【摘要】目的研究骨碎补、淫羊藿和杜仲对实验性骨质疏松症小鼠骨代谢生化指标的影响。方法采用维甲酸灌胃造成小鼠实验性骨质疏松症模型，同时灌服高、中、低三种剂量的含有骨碎补、淫羊藿和杜仲的供试药，检测小鼠血清总碱性磷酸酶(AKP)、羟脯胺酸／肌酐值(HOP／Cr)、钙离子(Ca2+)、骨钙素(BGP)的变化。结果三个给供试药剂量组的血清总碱性磷酸酶含量与模型组相比均升高，血清骨钙素、羟脯胺酸／肌酐、血清钙离子与模型组相比均下降(P<0.01或

P<0.05)。结论骨碎补、淫羊藿与杜仲对维甲酸造成的小鼠骨质疏松症有一定的防治作用。

【关键词】淫羊藿；骨碎补；杜仲；骨质疏松；维甲酸

Effect of the combination of three kinds of traditional Chinese medicines on osteoporosis mice

【Abstract】Objective To study the effects of epimedium koreanum ,davallia mariesil and eucommia ulmoides oliver on osteoporosis mice induced by retinoic acid．Methods The osteoporosis mice were induced by retinoic acid and then were fed with epimedium koreanum,davallia mariesil and eucommia ulmoides oliver．The biochemical markers in serum were observed．Results The data showed that the blood AKP were higher in mice treated with three total flavones than mice in model group，the blood HOP／Cr,BGP, Ca2+ were lower in treated mice than model

group(P<0.01 or P<0.05)．Conclusion This study suggests that those three kinds of traditional Chinese medicines can effectively treat the osteoporosis mice induced by retinoic acid．

【Key words】Epimedium koreanum；Davallia mariesil；Eucommia ulmoides oliver; Osteoporosis；Retinoic acid

骨质疏松症(OP)是威胁老年人健康的一种骨代谢疾病，以骨量减少，骨组织显微结构改变导致骨脆性增加和骨折发生率增加为特征的一种系统性、全身性骨骼疾病。杜仲、骨碎补和淫羊藿是中医常用的滋补药材，自古以来被我国中医作为补肾强骨的药材在临床治疗中使用，尤其是在治疗骨质疏松方面，以其整体调治、疗效好等优势，引起了广泛的关注。但是淫羊藿[1、4]、骨碎补和杜仲联合用于骨质疏松治疗未见报道。本实验利用维甲酸[2]建立小鼠骨质疏松症模型，从血清总碱性磷酸酶(AKP)、钙离子(Ca2+)、羟脯胺酸／肌酐值(HOP／Cr)、骨钙素(BGP)指标的变化，初步探讨了这3种中药联合使用对骨质疏松症的影响。

1 材料

1.1药材与试剂

淫羊藿(epimedium sagittatum)批号：110206；骨碎补(davallia mariesil)批号：110212；杜仲(eucommia ulmoides olive)批号：110209，均由哈尔滨市世一堂中药饮片有限责任公司提供。按人体与动物体表面积等效剂量比值计算，小鼠剂量为1.975 g／kg[3]。维甲酸(retinoic acid，RA)，批号：20110305，临用前加蒸馏水配成一定浓度的混悬液。羟脯胺酸(HOP)检测斌剂盒，批号：20100825；肌酐(creatinine)试剂盒，批号：20100621；碱性磷酸酶试剂盒，批号：20100205；血清钙(Ca2+)试剂盒，批号：20110504。

1.2实验动物

昆明种小鼠50只，雌性。体质量(28±1)g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。

1.3主要仪器

超低温冰箱，XD生化分析仪(上海讯达医疗仪器公司)，离心机等。

2 方法

2.1 供试药品的制备

取骨碎补、淫羊藿、杜仲干燥药材（质量比为3:2:3.4），用10倍量纯化水浸泡2小时，煎煮3次，每次2个小时，过滤，滤液合并后减压浓缩成稠膏，干燥即得供试药品备用。

2.2 小鼠骨质疏松模型制备

参考文献[2]方法，取昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只小鼠。分别

为正常组、模型组、供试药低剂量组、供试药中剂量组、供试药高剂量组。除正常组灌胃0.9％氯化钠注射液，其它组按每天（70mg·kg-1）维甲酸连续灌胃14d。

2.3 给药方法

正常组灌胃等体积的0.9％氯化钠注射液，供试药低剂量组(150 mg／kg)、供试药中剂量组(300 mg／kg)、供试药高剂量组(500 mg／kg)，连续灌胃30 d。

2.4 血浆样品

检测小鼠连续灌胃30 d，最后一次给药12 h后称体量并记录。眼眶取血放入离心管中，3 000 r／min离心15min，得到血清，测定Cr、AKP、BGP、Ca2+、HOP。

2.5 统计学处理

用SPSS统计软件处理，LSD检验比较各组差异。试验结果数据均以平均值±标准差表示。

3 结果

由于制造模及采血过程中，个别组小鼠出现死亡及溶血等情况，故每组取8只小鼠数据做为有效数据进行统计分析。

3.1 小鼠体质量的变化见表1。

表1 各组对RA所致0P小鼠质量值的影响(X±S，n=8)

注：与正常组比较，＊P<0.05；与模型组比较，＊＊P<0.01

3.2 各组小鼠生化指标测定结果见表2。

表2 各组小鼠生化指标测定结果(X±S，n=8)