自体肿瘤抗原的简单制备方法1

自体肿瘤抗原的简单制备方法

一、取材：肿瘤组织或胸、腹水中的癌细胞，然后生理盐水洗2-3次，去除血块、杂物等。离心转速2000/分，5′钟每次。对肿瘤组织要剪去脂肪，非肿瘤组织和坏死部分。

二、将组织置于研钵中碾碎，然后加入纯水，一般＜2g加入5ml，≥2-5克加入10ml，6-10g加入20ml, 然后用纱布过滤，过滤前先将纱布用纯水洗去表面的线头和杂物，洗2次，然后拧去水分，盖在试管口上对组织液进行过滤，纱布用2层；如果过滤后残留组织较多，可继续研磨，再次过滤，过滤后的液体置入-20℃或-80℃冻存，每隔1天取出，置温下完全融解后再冷存，反复5次。

胸腹水中获得的癌细胞洗净后按上述比例加入纯水，吹打、反复冻融。

三、应用：将冻存液在室温下融解，达到室温时，离心：5000-6000转/分，45′，然后将上清用一次无菌过滤品过滤，置入另一试管中，然后取1ml加1mlDC 培养基加入第二次转化后的DC瓶中[72hr后第二次加入GM/IL-4的DC中]，促成熟后再加入多肽抗原。