食用菌母种转管 实验
食用菌实验-母种原种扩大培养
实验五母种、原种接种扩大培养（板书用）一、实验目的熟悉母种、原种接种操作技能。
二、实验材料和用具接种箱或超净工作台，恒温培养箱，接种钩（针），酒精灯，镊子、、火柴，记号笔，记录本，75％酒精及棉球、95％酒精，母种试管斜面，灭菌好的原种培养基。
三、实验步骤与方法1.无菌测定灭菌后的培养基，随机抽出数支斜面试管培养基，置25—28℃的温箱中培养3天，培养基表面仍光滑，无杂菌出现，证明灭菌彻底，即可供接种使用。
2.接种操作过程无菌操作要点：①无菌箱在启用前先灭菌，将待接种的斜面试管、酒精灯、火柴、接种针等放入箱内，紫外线照射半小时以上。
超净工作台则要先灭菌20分钟。
②双手洗净。
打开工作灯，将双手伸入接种箱内，点燃酒精灯。
用75%酒精的棉球擦拭双手，擦拭方向由前向后。
③左手平托两支试管，拇指按住试管底部，外侧一支是供接种用的菌种试管，内侧一支是待转接母种的斜面试管，两支试管的斜面都应朝上。
右手持接种钩，将接种钩的顶端烧红，并将整条接种柄在火焰上过几次灭菌。
④将两支试管的管口部分靠近火焰，用右手同时夹住两个棉塞。
拔掉两支试管的棉塞，并立即以火焰灼烧管口，并适当转动。
操作过程在不离酒精灯火焰一寸远处进行。
⑤用冷却的接种钩，在长满菌丝的斜面挖取少许菌丝及培养基，然后轻轻抽出试管。
迅速伸进待接试管中，将种块置于培养基的中部，盖好塞子。
接种过程中，应注意保持试管与桌面平行，不要远离酒精的火焰，周而复始。
一支母种可扩接20—25支试管。
贴上标签（或用记号笔），注明菌种或菌株名称及日期。
⑥原种接种：3．菌种培养接好种的试管和原种，放在25℃条件下培养，每隔2-3天检查一次。
遇有杂菌的试管要及时选出，以免污染其他试管。
7～10天后菌丝就可长满试管。
原种30天左右长满。
作业：归纳原种和试管种的接种全过程。
实验五母种接种扩大培养一、实验目的通过对接种箱常规消毒、斜面试管培养基母种(即一级种)接种和培养，基本熟悉母种接种操作技能。
食用菌生产技术实训指导教材
《食用菌生产技术》实训指导教材
实训一食用菌形态结构观察
一、目的要求
观察食用菌菌丝体的生长状态，利用显微镜认识食用菌的营养体和繁殖体的微观结构，利用徒手切片观察食用 菌子实体的微观结构，通过对食用菌子实体形态特征的观察，让学生们了解和熟悉各种食用菌子实体的类型和特征 ，并能根据子实体的外形进行分类。
三、内容和方法步骤
（一）菌丝体形态特征观察
1、菌丝体宏观形态观察。①观察平菇、草菇、金针菇、木耳、银耳及香灰菌、蘑菇、猴头、灵芝等食用菌的试 管斜面菌种或PDA平板上生长的菌落，比较其气生菌丝的生长状态，并观察菌落表面是否产生无性胞子。②观察菌 丝体的特殊分化组织：蘑菇菌柄基部的菌丝束；密环菌的菌索；茯苓的菌核；虫草等子囊菌的子座。
3、灭菌：
若采用高压蒸汽灭菌，则标准为1.5kg∕c/128C,1〜2h。如果采用常压蒸汽灭菌，则标准为I。(
TC下8〜10h。
(三)接种
将已灭菌的培养料瓶移入事先消毒过的接种箱内，母种管、用具及手要进行消毒。等培养料温降至35℃左右时 ，按无菌操作方法进行接种，用接种铲取菌种一块放入种瓶内培养料的孔隙边，并使菌丝紧贴在培养料上，塞上棉 签，贴上标签，注明菌种名称和接种日期。
2、菌丝体微观形态观察。①菌丝水浸片的制作：取一载玻片，滴一滴无菌水于载片中央,用接种针挑取少量平 菇菌丝于水滴中，用两根接种针将菌丝拔散。盖上盖玻片，避免气泡产生。②显微观察：将水浸片置于显微镜的载 物
台上，先用10倍的物镜观察菌丝的分支状态，然后转到40倍物镜下仔细观察菌丝的细胞结构等特征，并辩认有 无菌丝锁状联合的痕迹。
4、狗子滤纸保藏法将蘑菇或灵芝置入己消毒的接种箱里的插菇铁丝架上，插菇铁丝架立于装有灭菌滤纸条的培 养皿内，待担抱子弹射在滤纸条上之后，用无菌锻子将载有担抱子的滤纸条移入灭菌的空试管内，塞入棉塞剪平,用 石蜡融封,干燥、低温保藏。
食用菌栽培技术综合性实验
食用菌栽培技术综合性实验植物生产国家级实验教学示范中心《食用菌栽培技术综合性实验》实验项目一览表序号123实验名称原种、栽培种的培育菌种保藏及复壮平菇袋栽建议学时数2学时2学时4学时每组人数4人4人4人克雷姆斯兰县/可以选克雷姆斯兰县克雷姆斯兰县克雷姆斯兰县实验一、原种、栽培种的培育一、实验教学目的能制作适宜培养料，独立完成接种前的准备工作，用无菌操作法准确进行原种、栽培种的接种。
并通过培养观察，分析自己的接种结果。
二、实验基本原理母种、原种、栽培种都是具有统一血缘关系的祖孙三代，品性相同，只是越来越多，越来越健壮。
菌种生产就是从母种开始，到栽培种为止。
原种和栽培种的培育方法基本相同，只是在接种时接的菌种级别不一样。
两菌种培养基的配方可以相同，也可有所区别，由于栽培种经过了母种及原种两次的驯化，其培养基可比原种培养基更粗放些。
三、所牵涉的课程及知识点在该实验中，涉及到了农学类和生物学类专业教学计划中设置的部分专业基础课、专业课，如微生物学（菌丝降解纤维素等，…）、仪器分析(……)，……四、仪器设备及实验材料1.器具：菌种瓶、棉塞、打孔棒、菌种袋、接种耙、大镊子、酒精灯、火柴、酒精棉球、标签、高压灭菌锅、接种箱、消毒药品等。
2．材料：棉籽壳、麸皮、蔗糖、石灰粉、过磷酸钙、母种、原种等。
五、实验内容与方法（一）实验内容1、培养料的配制2、菌种瓶及菌种袋的灌装3、原种的注射4、栽培种的注射（二）方法步骤两菌种的生产过程基本相同，主要区别是注射时取接的菌种不一样。
1.培养基的酿制（1）配方与配制①颗粒培养基（麦粒、玉米粒等）配方：粮食粒98.5%，石膏粉1%，碳酸钙0.5%。
酿制：将晒干的粮食粒晒干，用1%石灰水泡胀，文火煮熟15～20min(甜而狗屎，勿破皮)，捞起晾晒至并无明水后拌入余料。
原种多采用颗粒培养基。
②棉籽壳麦麸培养基配方：棉籽壳87%，麦麸10%，白糖1%，石灰1%，过磷酸钙1%。
配制：将棉籽壳、麦麸、石灰混合为主料，余料溶解于少量水后浇入主料中。
母种转管及培养实训报告
一、实验目的1. 掌握母种转管及培养的基本操作流程；2. 熟悉无菌操作技术，确保菌种纯度；3. 了解食用菌母种在培养过程中的注意事项，提高菌种繁殖能力。
二、实验原理母种转管及培养是指将原始菌种接种到培养基上，经过一定时间的培养，使其繁殖成一定数量的菌丝体，以便进行后续的菌种扩繁和栽培。
无菌操作技术是保证菌种纯度的重要手段。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：马铃薯、葡萄糖、琼脂、水、食用菌菌种、无菌试管、无菌培养基、酒精灯、接种针、接种环、镊子、酒精棉球、火焰炉、培养箱等。
2. 实验仪器：天平、三角瓶、烧杯、漏斗、玻璃棒、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布等。
四、实验步骤1. 培养基配制（1）称取马铃薯200g，去皮，切成小块，加水1200-1300ml，煮沸20min；（2）用双层纱布过滤，取滤液1000ml；（3）将滤液加热至将沸腾时，加入琼脂15-20g，不断搅拌；（4）待琼脂完全溶解后，加入葡萄糖20g，搅拌均匀；（5）用精密pH试纸检测pH值，调整至自然pH值；（6）将培养基分装到无菌试管中，每管约10ml，塞上棉塞；（7）将试管置于高压蒸汽灭菌器中，121℃灭菌30min。
2. 接种（1）将灭菌后的试管取出，待其冷却至室温；（2）用火焰炉烧灼接种针、接种环，待其冷却；（3）用接种针从原始菌种中挑取少量菌丝，接种到无菌培养基上；（4）用火焰炉烧灼接种针、接种环，待其冷却；（5）将接种后的试管放入培养箱中，25℃恒温培养。
3. 转管（1）待菌丝长满试管斜面后，用火焰炉烧灼接种针、接种环，待其冷却；（2）用接种针将菌丝挑取到新的无菌培养基上；（3）将接种后的试管放入培养箱中，25℃恒温培养。
4. 培养与观察（1）定期观察菌丝生长情况，记录菌丝生长速度、颜色、形态等；（2）发现杂菌感染时，及时挑除；（3）待菌丝长满试管斜面后，即可进行后续的菌种扩繁和栽培。
五、实验结果与分析1. 在实验过程中，严格按照无菌操作技术进行操作，确保菌种纯度；2. 通过观察菌丝生长情况，发现菌丝生长速度较快，颜色正常，无杂菌感染；3. 经过转管培养，菌丝繁殖能力得到提高。
实验7 食用菌母种的制作与转管技术
实验注意事项
（1）组织块分离法对于胶质的耳类及菇体较小较薄的菇类，如金 针菇等不太适宜。 （2） 此法应严格遵循无菌操作。 （3）纯化菌丝长至斜面1/2时，挑尖丝转管，培养成再生母种。 （4）控制菌龄菌丝即将长满斜面（一般7～10天）终止培养。分 别用于菌种保藏或繁衍原种。 （5）出菇试验将再生母种扩成原种、栽培种，使其出菇。看产量、 质量、形态、长势、抗性如何，鉴定为优质菌种后，才可供生产 使用。
应用：此法适宜多数食用菌，是野外工作者和种菇专 业户必须掌握的一种方法。
实验原理
2.钩悬法 是一种特别适用于耳类，也适用于伞菌类的多孢分离
法。
实验原理
3.孢子印分离法 取成熟子实体经表面消毒
后，切去菌柄，在20～ 24℃静置一天，大量孢子 落下形成孢子印。 接种环沾少量孢子在试管 培养基上划线培养。
（0.3～0.4立方厘米）大组织，放入斜面培养基上。迅速 塞上棉塞。
如已开伞的种菇、则选菌盖与菌柄交界处的菌肉。 如种菇已受雨淋，吸水较多，应取菌褶作为接种材料。
母种分离视频
实 验 步骤
5. 培养 取接组织的斜面试管放置于
25℃的培养箱中培养。 6. 转管
在菌丝长满斜面之前，菌丝生 长最旺盛时，挑取菌丝进行转管扩 繁。
结果与思考题
1.如何避免因污染而造成的组织分离的失败？ 2.判断你所分离的母钟是否标准？ 3.孢子分离的母种为何一定要做出菇试验？
实验材料
材料：平菇、香菇、杏鲍菇较成熟的子实体 用具：培养皿；试管斜面培养基；酒精灯，接种刀，
75%酒精，消毒液；冰箱；培养箱等。 培养基：PDA斜面培养基
实 验 步骤
1. PDA培养基的配置 配方： 马铃薯浸粉； 5.0g /L；葡萄糖20.0g /L；琼脂 20.0g /L ；
【精品】食用菌菌种母种1级种简法复制创新技术
食用菌菌种母种1级种简法复制创新技术食用菌母种1级种简法复制创新技术摘要：食用菌菌种母种1级种简法复制创新技术，是利用优质的极品食用菌脱毒菌种母种试管在全敞开式无菌开放条件下进行菌丝体试管50倍扩管、分离移植、简法复制的生产创新技术。
具有生产工艺简单、操作技术便捷、原料易得、成本低廉、经济适用等技术创新优势，食用菌从业者和创业者均可无门槛的复制应用和受益。
该创新技术是湖北省宜都市湾市食用菌天麻繁育场技术总监胡文华研发成功的。
关键词：食用菌母种 1级菌种培养基复制创新技术概述：食用菌菌种1级母种的复制生产是食用菌从业者和创业者的入门技术。
由于该入门技术除了高昂的生产设备投入之外，还需要繁杂的技术工艺和精湛的操作技能作为支撑，因而一直留存于科研院所和少数食用菌科研工作者手里，使众多食用菌从业者和终端生产者望而生畏，只有花重金购买。
湖北省宜都市湾市食用菌天麻繁育场技术总监胡文华，经过30多年研发成功的食用菌菌种复制简法生产创新技术，其复制生产创新工艺和操作技能已经简化到了简单得不能再简单的程度，任何食用菌从业者和食用菌终端生产者均可无条件的简法复制创新生产，驱动了食用菌产业创亿万财富之梦想。
现将其简法复制创新生产技术介绍如下：1. 食用菌菌种母种试管培养基简法复制生产1食用菌菌种1级母种（18毫米×180毫米玻璃试管装，简称试管母种，下同）培养基使用的原料是马铃薯、葡萄糖、琼脂（简称PDA培养基），以及在PDA培养基中再添加蛋白胨等价格昂贵的物质原料成为“加富培养基”，其工艺繁杂，生产操作费时费力。
食用菌菌种母种试管培养基简法复制生产采用湖1北3省8宜72都市52湾市33食用58菌天麻繁育场技术总监胡文华发明的“广谱通用型食用菌菌种培养基生产技术”。
这种广谱通用型食用菌菌种培养基以颗粒型谷物为原料，谷粒、麦粒、玉米粒均可，简称颗粒培养基（下同），又称天然无公害培养基。
这种颗粒培养基制作方法特别简单，取谷粒、麦粒、玉米粒一种或多种，与胡文华发明的食用菌种包衣剂混合均匀后，就可以分装试管了。
食用菌栽培学实验指导大纲(上实验课用)
实验一食用菌分类与形态观察•目的: 了解食用菌分类方法, 学会观察食用菌形态结构。
•材料: 各种伞菌的新鲜子实体（香菇、平菇、金针菇、茶树菇、白灵菇、杏孢菇、白平菇）, 子囊菌的干品, 野生食用菌的标本。
平菇、香菇的孢子印。
分类参考书, 显微镜等。
•方法：1.取新鲜子实体观察伞菌的结构, 绘图说明。
2.观察平菇孢子印颜色、大小、形状。
•完成下列表中内容。
食用菌分类与形态观察表1. 中生2. 偏生3. 侧生4. 无菌柄5。
圆柱形 6. 棒状7. 纺锤形8. 棒锤形9. 分枝状10. 基部联合11. 基部膨大呈球形12. 基部膨大呈臼状13. 菌柄扭转14. 基部延长呈假根状圆形 2. 半圆形 3. 圆锥形 4. 卵圆形 5. 钟形 6. 半球形7. 斗笠形8. 匙形9. 扇形10. 漏斗形11. 喇叭形12. 浅漏斗形13. 圆筒形14. 马鞍形1. 子囊菌门盘菌目羊肚菌科(子囊果具蜂窝形或吊钟形菌盖)块菌目块菌科和地菇科角菌目麦角、虫草2. 担子菌门木耳目、银耳目、花耳目属于胶质菌类,非褶菌目、伞菌目鬼笔目和马勃目属于腹菌类实验二母种培养基制作一、实验目的掌握斜面试管培养基的配制、消毒与灭菌等制作过程, 为菌种转管、组织分离制作母种打下基础。
二、常用培养基配方1. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)去皮马铃薯200克, 葡萄糖20克, 琼脂20克, 水1000毫升, pH自然。
2.PDA综合培养基去皮马铃薯200克, 葡萄糖20克, 琼脂20克, 磷酸二氢钾3.0克, 硫酸镁1.5克, 维生素B10.05克, 水1000毫升, pH自然。
三、实验材料和用具天平、电炉, 18×180毫米试管, 止水夹。
纱布, 棉塞, 牛皮纸, 皮筋, 手套、菜板、刀、恒温箱, 三角漏斗、支架（每组一套）。
手提式高压灭菌锅。
马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等。
四、实验步骤与方法1. PDA培养基的配制2. 装管、捆把3. 灭菌锅内加适量水→灭菌物品放内锅→加热→压力表0.05Pa 时放气→压力表1.15Pa (121-126℃)时计时30分钟。
实验7食用菌母种的制作与转管技术
结果讨论
本实验成功制作出食用菌母种，为后 续的栽培和生产提供了优质的种源。
本实验中严格的无菌操作对于防止杂 菌污染起到了关键作用，在实际生产 中也需要高度重视无菌操作，以确保 食用菌的纯度和质量。
在实验过程中，我们发现适宜的温度 和湿度条件对母种菌丝的生长具有重 要影响，这为实际生产中控制食用菌 生长环境提供了理论依据。
无菌操作
在实验过程中，要始终保持无 菌操作，避免杂菌污染。
温度控制
不同食用菌对温度的要求不同 ，要保持恒定的温度以利于菌
丝生长。
湿度控制
保持适宜的湿度，避免培养基 过度干燥或湿度过高导致杂菌
滋生。
定期检查
在培养过程中要定期检查菌丝 生长情况，发现异常及时处理
。
04
实验结果与分析
实验结果
实验成功制作出食用菌母种，菌 丝洁白、浓密、健壮，生长旺盛。
05
结论与建议
结论
实验7成功地展示了食用菌母种的制作和转管技术，确保了菌种的纯度和活性。
在实验过程中，我们观察到菌种的生长速度和形态特征，为后续的实验和研究提供 了基础数据。
通过实验，我们验证了母种培养基的配方和制备方法，为食用菌的规模化生产提供 了技术支持。
建议
01
为了进一步提高菌种的产量和质量，建议优化母种培养基的配 方，添加适量的营养成分或生长因子。
保障食品安全
培养创新型人才
实验能够培养学生的创新思维和实践 能力，为培养具备创新精神和实践能 力的人才提供有力支持。
通过实验，学生将了解食用菌母种的 质量控制和安全管理，这对于保障食 品安全和消费者权益具有积极作用。
02
实验材料与设备
实验材料
01
食用菌的实验
食用菌的实验实验一母种培养基的制作一、本次实验的目的和要求学会母种培养基的配制方法，了解食用菌母种制作的工艺流程和制作母种的基本技能。
二、实验内容或原理母种培养基配制。
工艺流程：培养基配方培养基的配制分装试管理灭菌摆斜面三、需用的仪器或试剂等仪器：接种箱或超净工作台、高压灭菌锅、电炉、天平、试管、试管架、漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管。
试剂：、马铃薯、葡萄糖、琼脂等。
四、实验步骤1.培养基配方以PDA培养基为例，马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。
为经强化营养或准备保藏菌种，可添加KH2PO43g、MgSO4.7H2O1.5g、VB110mg。
2.培养基配制首先将马铃薯去皮、洗净、挖去芽眼、切成薄片，称取200 g，放入铝锅中用1000ml清水加热煮沸，维持20min左右，煮至软而不烂为止。
用双层湿沙布过滤，然后取滤液并补足蒸发损失的水分。
再加入琼脂继续加热泪，待琼脂溶化后，添加葡萄糖及其它成分，搅拌均匀后准备装管。
3.分装试管培养基配制后应趁热分装。
装管时勿使管内外壁沾上溶液，以免浸湿棉塞，污染杂菌。
装管后塞上棉塞。
棉塞的大小、松紧度应适宜，以用手提棉塞、试管不脱落为准。
然后每10支度试管扎成一捆，棉塞上方用牛皮纸包好，避免灭菌时被水蒸汽浸湿。
4.灭菌灭菌前将水加至锅内水位标记高度。
将试管放入锅内，盖上锅盖，对角旋紧锅上螺旋，并闭排气阀，开始加热，当锅内蒸汽大量排出时再继续排汽3-5 min，关闭放气阀。
当压力表指针指到0.15 Kg/cm2时（灭菌所需压强）开始计时，继续维持该压强30min。
灭菌结束持压力表指针自然回到”0”位时打开放汽阀，排出锅内剩余蒸汽后，打开锅盖。
注意切忌在压力表未到”0”位时就放汽，以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞，造成以后菌种的污染。
5、摆斜面当培养基的温度降到60℃时，将试管斜面放在木棒上，使呈斜面，斜面的长度以占试管长度的1/2为宜。
讲稿-12食用菌栽培实验指导
实验一母种培养基配制（4 学时）一、实验目的掌握固化培养基的配制，学会棉塞的制作方法。
分析有天然原料与无天然原料培养基在配制过程中的不同。
二、基本技能训练内容制备马铃薯滤液；融化琼脂；培养基的分装；棉塞的制作。
三、主要仪器设备与材料天平、称量纸、牛角匙、精密pH 试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等；马铃薯、葡萄糖或蔗糖、麸皮、琼脂、水。
四、实验方法1、配方（PDA）:马铃薯200g，葡萄糖20g,琼脂15~20g,自来水1000ml, pH自然。
2、制作方法1）制滤液：马铃薯去皮和芽眼，切成0.5mm粗的长条，称取200g放入锅中，加水1000ml, 将其煮沸后再文火煮20min。
用双层纱布过滤，滤液用水定容至1000ml。
2）化琼脂：将滤液加热至即将沸腾时加入琼脂，不断搅拌（控制火力不要使培养基溢出或烧焦）。
琼脂完全融化后加入剩余原料，并使其溶解（用热水不足水量）。
3）分装：通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试管中，装量约占试管高度的1/4（分装三角瓶以不超过其容积的一半为宜）。
管口或瓶口不要沾染培养基。
4）制棉塞：棉花以白色长绒的不脱脂棉花为宜。
根据试管口大小取棉花，将其卷成棉塞，最好外包一层纱布。
将棉塞塞入试管口。
棉塞长度约6~7cm，塞入试管2/3。
要求外表光滑，外包的纱布无皱折，松紧适宜等。
5）包扎：管口堵入棉塞后7 或9 支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
五、实验报告要求完成实验报告、详细记录培养基配制过程，并回答分装的技术要求有哪些？实验二母种的转管与组织分离（2 学时）一、实验目的清楚无菌操作要点，熟练操作母种转管、组织分离技术。
能正确分析自己的接种结果。
二、基本技能训练内容接种环境的处理；母种的转管；组织分离。
三、主要仪器设备与材料超净工作台、酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉球、大镊子、75%酒精、标签纸等；空白斜面培养基、平菇母种、平菇子实体等。
实验7 食用菌母种的制作与转管技术
食用菌母种制作与转管技术
实验目 的
掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操 作技术；
明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重 要性。
实验原理
母种
原种
栽培种
实验原理
1.组织分离法：用子实体的某一部 分来分离菌种的方法。
优势：方法简便，后代不易发生变 异，是食用菌栽培中防止品性退化， 保持优良品种特性常用的一种手段。
121℃高压灭菌15min。
实 验 步骤
2.种菇的选择 选择无病虫害、典型、八成成熟的食用菌子实体。
3. 环境和种菇消毒 在接种箱内，用镊子夹着燃烧的酒精棉球迅速擦拭菇
体。 或选用的子实体用0.1％开汞水或70％酒精表面消毒，
用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。
实 验 步骤
4.取接组织 将菇体撕开，用无菌尖头镊在柄盖交界处取绿豆粒
应用：此法适宜多数食用菌，是野外工作者和种菇专 业户必须掌握的一种方法。
实验原理
2.钩悬法 是一种特别适用于耳类，也适用于伞菌类的多孢分离
法。
实验原理
3.孢子印分离法 取成熟子实体经表面消毒
后，切去菌柄，在20～ 24℃静置一天，大量孢子 落下形成孢子印。 接种环沾少量孢子在试管 培养基上划线培养。
母种转管视频
实验注意事项
（1）组织块分离法对于胶质的耳类及菇体较小较薄的菇类，如金 针菇等不太适宜。 （2） 此法应严格遵循无菌操作。 （3）纯化菌丝长至斜面1/2时，挑尖丝转管，培养成再生母种。 （4）控制菌龄菌丝即将长满斜面（一般7～10天）终止培养。分 别用于菌种保藏或繁衍原种。 （5）出菇试验将再生母种扩成原种、栽培种，使其出菇。看产量、 质量、形态、长势、抗性如何，鉴定为优质菌种后，才可供生产 使用。
灵芝菌种扩制母种转管方法
灵芝菌种扩制母种转管方法灵芝母种转管技术分离、保藏的母种数量少，需扩大繁殖成再生母种才能满足原种制作的需求。
母种是菌种生产之本，必须纯度高，生活力强。
凡保藏时间长和衰老的母种，需复壮后方可应用。
在无菌条件下，把斜面菌丝移植到空白斜面上的方法称为转管。
其程序是：1.选取新鲜灵芝斜面菌种1支，在酒精灯火焰旁将棉塞顺时针转松并稍往外移动，而后右手小指和无名指基部夹紧棉塞取下，同时拿起接种刀垂直火焰上烧红并慢慢倾斜灼烧至接种时可能伸入试管内的刀柄部分，反复灼烧数次，伸人试管内贴在管壁上冷却，从斜面底部往前纵切1~2刀，以切破菌苔为度。
取出接种刀放在接种工具架上，换取接种锄，跟上述一样灼烧处理，将斜面菌种自底部往前横切若干刀，整个斜面菌种被分割成许多方形小块，也可用接种钩纵横划成小菌块，塞上原棉塞并把切割的斜面菌种放在左手掌心和食指之间。
取空白斜面1支，放在左手中指与无名指之间与斜面菌种试管紧靠，管口对齐，并旋松棉塞。
2.手拿接种铲或接种刀，如上述方法灼烧灭菌。
以下操作均需使试管口靠近火焰，并略向下倾斜。
3.用右手无名指与小指基部夹住菌种试管的棉塞，小指基部与手掌夹住空白斜面棉塞，轻轻拔下。
4.将灼烧后的接种刀伸入空白斜面内贴住管壁前后移动冷却，然后取出伸入菌种试管内，挑取1小块稍带琼脂的菌苔，慢慢抽出并迅速伸入空白斜面试管内，将菌块安放在斜面中央。
5.灼烧试管口，并在火焰旁将棉塞塞上接种后的斜面试管上。
6.将刀部灼烧灭菌后放回架上，腾出手将塞塞紧放在一旁。
然后重新取空白斜面放在左手菌种试管旁，如前接第二支斜面。
如此，直至全部斜面接完。
每支斜面一般转管30支以上空白斜面。
接后在试管上方贴上标签，注明名称、菌号、日期，放入28度恒温箱内培养。
以上就是xx对灵芝的介绍，如您有更好的补充请在下方留言告诉我们。
食用菌栽培种的制作与培养-实验三
实验三、食用菌栽培种的制作与培养一、目的要求：1、了解栽培种培养料的配制原理及过程；2、掌握培养料的配制方法。
二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、铁铲、电子称、绣花针、水桶、聚丙烯菌种袋（12厘米×24厘米）、耐高温皮筋、接种铲、75%酒精、石灰粉、石膏粉、玉米芯颗粒、棉籽皮、玉米粉、平菇原种（夏福2号）、香菇原种（丰产1号）。
三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 配方平菇：玉米芯87%、玉米粉10%、石灰粉3%。
（料水比：1:1.5）。
香菇：棉籽皮88%、玉米粉10%、石膏粉2%。
（料水比：1:1.2）。
2.培养基的配制（1）拌料。
按配方中各种营养成分的配比称量各种原料，并混合在一起。
称取自来水，泼洒到干料中，搅拌均匀。
堆闷24小时。
（2）测培养料含水量。
培养料拌好后，用手抓一把培养料握在手中，攥紧，手指缝中有水渗出但不下滴，含水量为60%-65%，若含水量不足，可再加少量的水，充分搅拌均匀，再检测，直至含水量合适为止。
（3）测培养料PH值。
用PH试纸测定两种培养料的PH值。
平菇栽培种培养料PH值为8-9，香菇栽培种培养料PH值为6.5。
（4）装袋。
将拌好的培养料装入聚丙烯塑料袋中，边装边压实，注意装袋松紧适度，用手指按压有弹性。
用耐高温皮筋系紧袋口。
（5）灭菌。
121℃,2小时，灭菌结束后，培养料冷却至30℃以下待用。
②接种与培养1.接种。
将接种袋放入紫外灯灭菌的无菌操作台。
将平菇和香菇原种瓶放入5%的石灰水中消毒。
两人合作接种，一人以无菌操作方法用接种铲捣碎平菇或香菇原种，另一人在酒精灯火焰旁打开栽培种袋口（袋口应倾斜在火焰旁，切勿直立），迅速将原种接到袋中并铺满料面，系紧袋口。
用绣花针在有菌种的地方扎8个透气孔。
2.培养。
将栽培袋搬到培养室避光培养，培养室的温度控制在23℃左右。
四、实验结果每2人制作平菇和香菇栽培种各一袋。
记录栽培种菌丝的生长情况及菌种的外观。
食用菌母种制作技术
食用菌母种制作技术在食用菌生产中，母种的培养是至关重要的一环。
母种质量的优劣，直接影响到食用菌产量的高低和栽培的成败。
下面小编给大家分享了食用菌母种制作技术，一起来了解一下吧!食用菌母种制作技术制作培养基先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。
然后在马铃薯煮汁中加琼脂20克和蔗糖20克煮溶，后补足水至1000毫升，调节pH值在5.5～6。
调好pH值后进行分装，一般将培养基装至试管的1/4处，而后加盖棉塞，再用牛皮纸将试管每10支捆成一捆。
分装时，注意培养基不可沾在近试管口的壁上，以免日后生霉菌。
分装后要立即进行高压灭菌，不可过夜。
高压灭菌将用牛皮纸捆好的试管(棉塞朝上)竖直放入高压锅内进行灭菌。
在0.11兆帕压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。
灭菌时，放汽要充分，否则影响灭菌效果。
开锅取出试管后趁热摆放，使培养基成斜面。
试管的斜面以距棉塞3厘米为宜，斜面摆成后，不宜再摆动。
一级菌种扩管扩管要在无菌条件下进行，先将扩管工具、培养基及菌种放到扩管箱内，然后按每立方米用高锰酸钾5克、40%的甲醛溶液10毫升的量进行熏蒸消毒30分钟。
扩管方法：先将扩管铲在酒精灯火焰上灼烧消毒，然后拔掉母种管上的棉塞，铲一块米粒大的母种，在酒精灯火焰无菌区内迅速送入菌种试管内。
扩管后的母种培育10~15天即可投入生产。
食用菌母种怎么制作母种制作：母种培养基配制：母种培养基的原料是马铃薯，葡萄糖，蛋白胨，水，琼脂粉，以配制一千毫升的母种培养基为例，将马铃薯去皮后称重200克，葡萄糖20克，琼脂粉20克，蛋白胨10克，用量杯量取1000毫升的水倒入锅中，用刀将马铃薯切成片加入锅中，用文火煮沸，煮至用筷子轻轻一插既可插入，这时可以用四层的纱布过滤煮好的马铃薯汁，然后倒在量桶里，看一下，如果不足一千毫升可加水补足一千毫升，在倒入锅中煮，最后加入称好的葡萄糖、琼脂粉、蛋白胨，为了防止锅底烧焦要边加热边搅拌，煮至完全溶化，母种培养基就配制好了。
食用菌实践教学项目
食用菌实践教学项目实践教学部分项目一食用菌形态结构的观察一、实训目的通过食用菌认识和掌握常见的栽培食用菌的形态特征，观察其双核菌丝和锁状联合的结构。
二、材料准备：新鲜的食用菌子实体若干种；浸、干制标本若干种。
三、用具准备：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖刀、解剖针、解剖剪等。
四、观察方法（一）菌丝体形态结构观察1、菌丝体宏观形态结构观察2、菌丝体微观形态结构观察（二）食用菌子实体形态结构观察1、食用菌子实体宏观形态观察（1）观察其子实体的组成部分及其形态特征。
（2）用解剖刀纵切子实体观察其菇盖组成。
菌肉的颜色、质地、菌褶形状和着生情况（离生、延生、直生、弯生）。
（3）观察其菌柄的组成，菌柄的质地，中实或中空。
2、食用菌子实体微观形态观察选择新鲜幼嫩子实体→菌盖上取一小块菌褶于置左手，右手持刀片→横切菌褶若干薄片放入有蒸馏水的培养皿中→取载玻片于中央加半滴蒸馏水→用小镊子小心而轻快地在水内将切下的薄片挑起→放入载片水滴→染色加盖片→置显微镜下先用低倍镜，再用高倍镜观察菌两侧子实层，担子和担孢子着生情况和结构。
五、作业1、绘香菇、平菇子实体形态及纵剖面简图，并注明各部位名称。
2、绘担子及孢子着生情况图，并注明各部位名称。
项目二食用菌母种培养基的制作一、实训目的熟练掌握马铃薯培养基（PDA）培养基的制备技术二、原理制种是食用菌生产中的关键环节，菌种好坏直接影响食用菌的产量和质量。
菌种的好坏又取决于多个因素，如培养基的制备、种源质量、接种技术、保存条件等等。
按菌种培养的不同阶段，可分为母种、原种和栽培种三类。
母种质量的优劣直接影响到原种和栽培种的质量，所以说在把关母种质量环节上；各种影响因素显得尤为重要。
母种培养基的制备看似简单，要真正做好也非易事。
现在有许多栽培户自己制作母种，由于制作规程不严格，极易出现问题，又由于缺乏系统的专业知识，出现问题也不会解决，致使菌种污染，造成损失。
现就如何提高制作母种培养基的质量，通过制作过程中的几点注意事项进行阐述，希望给从事菌种制作的技术人员和食用菌栽培户提供借鉴和帮助。
工作报告之食用菌栽培实验报告
食用菌栽培实验报告【篇一：食用菌栽培学实习报告】《食用菌栽培学》——实习报告专业：植物保护专业班级：10级张之洞班姓名：耿莹学号：2010301201130二〇一二年十一月一、学习目的与任务（一）学习目的食用菌栽培学是一门应用基础学科的学科，不仅要求掌握扎实的理论知识，还要结合生产实际来加深理解和体会，真正的实现学以致用，理论和实践相结合。
本次食用菌的实习旨在让我们更好的了解和学习食用菌栽培学的知识，熟悉湖北省食用菌产业发展情况，而且还提高了我们的动手能力，创新意识和创新能力，我们亲自加入生产食用菌的多个环节，培养我们吃苦耐劳、团队意识和沟通交流的品质。
通过此次的课程实习，进一步脱框我们的视野以及对食用菌产业的理解，增长对这产业美好前景的信心。
（二）实习任务1、参加菌种制作的各项操作。
2、参加食用菌栽培的各项操作。
3、参加菇房和菇场栽培管理工作。
4、参观食用菌生产企业，参与食用菌市场行情调查。
二、实习时间2012年10月28日至2012年11月4日。
三、实习单位及地点华中农业大学食用菌菌种试验中心、武汉东西湖如意生鲜食品净菜配送公司(如意食用菌高科技公司)、湖北裕国菇业有限公司、长久菌种厂、三里岗香菇基地、裕国菇业试验基地、裕国菇业生产线、三友食用菌研究开发有限公司、新洲许易产业园、天添食用菌科技产业。
四、试验内容1华中农业大学黑木耳、香菇、平菇代料栽培生产实践2、观看湖北菇菌产业发展三十年历史和香菇生产技术的视频3、“中国香菇之乡”的随州三里岗以及新洲各工厂、公司参观学习五、实习过程具体工作时对集中食用菌的传统生产进行了解和实践；第二阶段是赶赴随州市以及新洲市的各大工厂公司进行参观学习；第三阶段是再次回到菌种试验中心进行平菇的最后装袋灭菌工作。
本次实习分为三个阶段，第一阶段主要是在菌种试验中心，（一）栽培实习实习期间，我们首先按在老师的带领下了解了菌种试验中心的大致布局，这也提醒我们在今后菌种场的布局方面，应该考虑各生产部门间的位置关系，从而更合理、更科学、更节省的进行安排。
食用菌转接的操作方法
食用菌转接的操作方法
食用菌转接是一种将菌种从一个培养基转移到另一个培养基的方法，用来保存和传播菌种。
以下是一般的食用菌转接操作方法：
1. 准备培养基：准备好需要转接的培养基，可以是固体培养基（如琼脂）或液体培养基（如蔗糖水）。
2. 消毒工具：消毒转接操作所需的工具，如火炬、培养皿、移液管、医用酒精喷雾器等。
3. 消毒操作空间：确保操作空间干净、无尘、无菌，并使用酒精或紫外线灯对操作区域进行消毒。
4. 开展转接：将待转接的食用菌菌种（例如在琼脂培养基上生长的菌落）放在操作台上，用消毒的移液管或灭菌毛细管，从菌落中吸取一定量的细胞悬液。
5. 转移到新培养基：将提取的细胞悬液滴在新的培养基上，可以是固体培养基（如新的琼脂培养基）或液体培养基（如新的蔗糖水）。
滴液后，可以使用灭菌的铁勺或棉签在培养基表面轻轻拖曳，以帮助细胞悬液均匀分布。
6. 培养条件：将转接后的培养基置于适当的培养条件下，如适宜的温度、湿度和光照。
7. 观察和记录：在培养基上观察转接后的菌落生长情况，并记录菌落特征和生长速度等信息。
请注意，食用菌的转接操作需要严格遵守无菌操作的原则，以确保菌种的纯度和生长状态。
同时，根据不同的食用菌种类和个体特性，可能会有一些微调和调整操作的步骤。
最好在有经验的人指导下进行操作，以确保成功转接。
食用菌母种污染的纯化
食用菌母种污染的纯化
食用菌母种是食用菌产品高产的关键，食用菌前两级菌种必须纯培养，如果污染了杂菌可试用以下方法。
细菌污染提纯法
1、材料含量为4万单位/mL的庆大霉素1支；经高压灭菌的PDA 斜面培养基10支(试管规格18mm×180mm)，无菌1mL注射器1支；6号针头1个。
2、方法在无菌箱内，把4万单位/mL的庆大霉素用无菌注射器分别注入1O支冷却至45℃左右的斜面试管培养基中，摇动培养基使之充分混匀，立即摆斜面。
然后把被细菌污染的菌种以无菌操作方法移人该斜面培养基中，置25℃下培养。
两次可把细菌甩掉，效果甚佳，对食用菌菌丝无抑制作用。
霉菌污染提纯法
1、试管棉塞受湖污染了霉茼大都出现在斜面前端，可在酒精灯火焰连同培养基一起灼烧，使局部受热烤死霉菌。
试管后半部用湿纱布包裹，然后转管。
2、斜面中间出现霉茸用一块比霉菌稍大的滤纸，滴上甲醛或酒精，用无菌镊轻轻益在霉菌菌落上，可抑制霉菌生长，待食用菌菌丝伸展稍长，立刻转管，即得纯化菌丝。
也可从污染较远的一端挑起少量菌丝，移植到新的斜面培养基前端，当菌丝萌发向外蔓延时，及时将种块连同培养基挖出。
连续处理2～3次，可得纯化菌丝。
此法也可用于处理放线菌的污染。
3、斜面出现霉茼严重时也可到药店购买制霉菌素片剂。
把药片放在无菌水中片刻去掉糖衣后放入盛有10mL的小三角瓶中，操作方法同“细菌污染提纯法”第2点。
两次可把霉菌甩掉。
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实验+示教
课时安排
2课时
课时
实验内容与方法
教师
活动
学生
活动
时间
1、材料准备：高锰酸钾，福尔马林溶液，坩埚或烧杯、75%酒精棉球，0.25%新洁尔灭溶液，5%的石炭酸溶液，喷雾器等。
2、用具准备：平菇试管母种，母种培养基，超净工作台，接种工具，酒精灯，火、记号笔。
3、操作步骤：
（1）用0.25%的新洁尔溶液清洗接种箱内外。将子实体、接种工具、酒精灯、火柴、记号笔、斜面培养基、培养皿、小剪刀，酒精棉球等，置于接种箱内。用福尔马林加高锰酸钾产生蒸气，同时打开紫外灯管，灭菌30分钟。
60min
小结
据学生操作情况，指出存在的不足和问题。
提问
1、思考、回答
30min
实验报告
当堂交。
（2）用肥皂洗手并在清水洗净后，再用酒精棉球擦手，将手插入接种箱的袖套内。
（3）点燃酒精灯，灼烧接种工具。
（4）将子实体从中间一撕两半，用小剪刀挑起菌肉，并放在斜面培养基上，塞好棉塞。
（5）写上菌种名称、日期等。
（6）放在25—280C恒温下培养八至十天左右菌丝可布满斜面。此即为母种。
演示、指导
实际操作
课程名称
食用菌生产技术
使用教材
食用菌生产技术
主编：陈俏彪
教师姓名
张世姣
上课班级
16级农管
上课地点
食用菌实验室
实验课题
食用菌转管
实验目的
1、熟悉超净工作台的消毒灭菌方法，掌握食用菌母种转管技术
实验重点
1、转管技术
实验难点
转管技术
实验用品
平菇试管母种、母种培养基、接种箱、接种铲、酒精灯、火柴、酒精棉球、肥皂等