第九节工业微生物菌种保藏技术优秀课件

基本方法：
生活态
培养基传代培养 斜面、平板 寄主传代培养
休眠态
冷冻 干燥
液氮、低温冰箱 沙土管、冷冻真空干燥
由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不 同的保藏方法有不同的适应性，因此，在具体选择 保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏物的使 用特点及现有条件等进行综合考虑。
对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能 多的采用各种不同的手段进行保藏，以免因某种方 法的失败而导致菌种的丧失。
冷冻保藏种类
一、普通冷冻保藏技术(-20℃) 二、超低温冷冻保藏技术(-60一-80℃) 三、液氮冷冻保藏技术
普通冷冻保藏技术(-20℃)
将液体培养物或从琼脂斜面培养物收获的细胞分接 到试管或指管肉，然后贮藏于一冰箱的冷藏室中， 或于温度范围在-5～-20℃的普通冰箱(-20℃)中。 或者，将菌种培养在小的试管或培养瓶斜面上，待 生长适度后，将试管或瓶口用橡胶塞严格封好，同 上置于冰箱中保存。 用此方法可以维持若干微生物的活力1—2年。
YM 云南省微生物研究所
中国微生物菌种保藏管理委员会组织机构
中 国 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 委 员 会 办 事 处 (CCCCM): 中 国 科 学 院 微 生 物 研 究 所 内 ,北 京 (AS),100080
1.普 通 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (CCGMC) 中 国 科 学 院 微 生 物 研 究 所 ,北 京 (AS),100080:真 菌 、 细 菌 中 国 科 学 院 武 汉 病 毒 研 究 所 ,武 汉 (AS-IV),430071:病 毒
第九节工业微生物菌种保藏 技术
一、理想的菌种保藏方法应具备 的条件
(1) 经长期保藏后菌种存活健在； (2) 保证高产突变株不改变表型和基因型，特别
是不改变初级代谢产物和次级代谢产物生产的 高产能力。 (3)菌种保藏的基本措施是低温、干燥、真空。
一、微生物菌种保藏
基本要求：
在一定时间内使菌种不死、不变、不乱
2.农 业 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (ACCC) 中 国 农 业 科 学 院 土 壤 肥 料 研 究 所 ,北 京 (ISF),100081
3.工 业 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (CICC) 轻 工 业 部 食 品 发 酵 工 业 科 学 研 究 所 ,北 京 (IFFI),100027
1．离心收获对数生长中期至后期的微生物细胞； 2．用新鲜培养基重新悬浮所收获的细胞； 3．加入等体积的20％甘油或10％二甲亚砜； 4．混匀后分装入冷冻指管或安瓿中，于-70℃超 低温冰箱中保藏。
4.医 学 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (CMCC) 中 国 医 学 科 学 院 皮 肤 病 研 究 所 ,南 京 (ID),210042:真 菌 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ,北 京 (NICPBP),100050:细 菌 中 国 医 学 科 学 院 病 毒 研 究 所 ,北 京 (IV),100052:病 毒
5.抗 菌 素 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (CACC) 中 国 医 学 科 学 院 抗 菌 素 研 究 所 ,北 京 (IA),100050 四 川 抗 菌 素 工 业 研 究 所 ,成 都 (SIA),610051:新 抗 菌 素 菌 种 华 北 制 药 厂 抗 菌 素 研 究 所 ,石 家 庄 (IANP),050015:生 产 用 抗 菌 素 菌 种
6.兽 医 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (CVCC) 农 业 部 兽 医 药 品 监 察 所 ,北 京 (CIVBP),100081
7.林 业 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 (CFCC)
中 国 林 业 科 学 院 ,北 京 (C A F ),1 0 0 0 9 1
二、工业微生物菌种保藏技术
应注意的是经过一次解冻的菌株培养物不宜再 用来保藏。
保藏过程中应注意控制保藏温度，培养瓶或试 管应严格密封。
这一方法虽简便易行，但不适宜多数微生物的 长期保藏。
二、超低温冷冻保藏技术(-60一-80℃)
要求长期保藏的微生物菌种，一般都要求在-60℃以 下进行保藏。 在超低温冷藏柜中保藏菌种的一般方法是：
(ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ)超低温或在液氮中冷冻保藏； (2)冷冻干燥或真空干燥保藏； (3) 转接培养或斜面传代保藏； (4)土壤或陶瓷珠等载体于燥保藏。
菌种保藏方法
暂时保藏法
斜面传代法 穿刺法
长期保藏法
液体石蜡法 甘油管法 砂管保藏法 砂土管保藏法 滤纸片保藏法 冷冻干燥保藏法 液氮冷冻法
2.1 冷冻保藏
冷冻保藏为保藏微生物菌种的最简单而有效的 方法。 通过冷冻，使微生物代谢活动停止。一般而言， 冷冻温度愈低，效果愈好。为了获得满意的冷 冻结果，通常应在培养物中加入一定的冷冻保 护剂。冷冻保藏时温度要求在-20℃以下，同 时应认真掌握好冷冻速度和解冻速变。 冷冻深藏的缺点之一是培养物运输较困难。
国际重要菌种保藏机构
缩 写
名 称
A TCC 美 国 标 准 菌 种 保 藏 所 ， 美 国 马 里 兰 州 ， 罗 克 维 尔 市
CBS 真 菌 中 心 收 藏 所 ， 荷 兰 ， 巴 尔 恩 市
NCT国 立 标 准 菌 种 保 藏 所 ， 英 国 ， 伦 敦 C
中国菌种保藏单位
缩写
名称
缩写
名称
中国农业微生物菌种保藏管
中国农业科学院土壤肥料研究
ACCC 理中心
ISF 所
SH
上海市农业科学院食用菌研 究所
CACC
抗菌素菌种保藏管理中心
IA
中国医学科学院抗菌素研究 所
SIA
四川抗菌素工业研究所
CCGM 普通微生物菌种保藏管理中 C心
AS
中国科学院微生物研究所
AS-IV 中国科学院武汉病毒研究所 CFCC 林业微生物菌种保藏管理中心
CAF
中国林业科学院菌种保藏管 理中心
CICC
工业微生物菌种保藏管理中心
IFFI
轻工业部食品发酵工业科学 研究所
CMCC
医学微生物菌种保藏管理中心
ID
中国医学科学院皮肤病研究 所
NICPB
卫生部药品生物制品监察所
IV 中国医学科学院病毒研究所 CVCC 兽医微生物菌种保藏管理中心
CIVBP 中国兽医药品监察所