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培养基的配制及灭菌实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告篇一:培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)n源:包括无机氮和有机氮。
(3)c源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如nacl、Kh2po4等。
微量元素:cu、K、mg、s、p、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DnA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
除病菌需更小。
五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gnacl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告一、实验目的1、掌握培养基的配制方法和原理。
2、学习并掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法和操作要点。
3、了解灭菌在微生物实验中的重要性。
二、实验原理(一)培养基的配制培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
不同的微生物对营养物质的需求不同,因此需要根据培养的微生物种类和实验目的来选择合适的培养基配方。
培养基通常包含碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等成分。
在配制培养基时,需要按照一定的比例准确称量各种成分,并将其溶解在水中,调节 pH 值至合适范围,最后定容至所需体积。
(二)灭菌灭菌是指杀灭或去除物体上所有微生物(包括芽孢和孢子)的方法。
在微生物实验中,为了防止杂菌污染,必须对培养基、实验器具等进行灭菌处理。
高压蒸汽灭菌是一种常用的灭菌方法,其原理是利用高温高压使微生物的蛋白质和核酸变性失活,从而达到灭菌的目的。
一般在 121℃、1034 kPa 的条件下灭菌 15 20 分钟,可以杀灭包括芽孢在内的所有微生物。
三、实验材料和仪器1、材料牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、NaOH 溶液、HCl 溶液、蒸馏水等。
2、仪器电子天平、药匙、玻璃棒、烧杯、量筒、pH 试纸、三角瓶、移液管、高压蒸汽灭菌锅、培养皿等。
四、实验步骤(一)培养基的配制1、计算根据培养基配方,计算所需各种成分的用量。
例如,配制 1000 mL 牛肉膏蛋白胨培养基,需要牛肉膏 3 g、蛋白胨 10 g、氯化钠 5 g、琼脂 15 20 g。
2、称量用电子天平准确称量各种成分。
先称取琼脂,放入三角瓶中,然后分别称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入另一个烧杯中。
3、溶解在烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使各种成分溶解。
将溶解后的溶液倒入三角瓶中,用少量蒸馏水冲洗烧杯,冲洗液也倒入三角瓶中。
4、调节 pH 值用 pH 试纸测定培养基的初始 pH 值,然后用 1 mol/L 的 NaOH 溶液或 1 mol/L 的 HCl 溶液调节 pH 值至 72 74。
实验七培养基的制备及干湿灭菌法
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培养基配制 及干、湿热灭菌
了解配制培养基的基本原理,掌握配
制方法 了解并掌握干、湿热灭菌的原理及方法
一.实验目的及要求
二.实验原理
培养基 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。不同微生物选用不同培养基,但是,不同种类的培养基中,一般应含有水分、碳源、氮源、无机盐、生长因素等。
(二)干、湿热灭菌
药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、可溶性淀粉 、 K2HPO4、 KH2PO4 、 蒸馏水、琼脂、1mol氢氧化钠、花生油、葡萄糖、溴甲酚紫、中性红、乙醇
器材:天平、药匙、瓷缸、玻璃棒、电炉、 PH试纸、试管、三角瓶、移液管、牛皮纸、棉花、线绳、高压锅。
三.材料仪器
向上述烧杯中加入所需要的水量,搅拌,加热使其溶解。如是配制固体培养基,在琼脂的熔化过程中,需不断搅拌,并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待完全熔化后,补足所失水分。 培养基的制备过程 称量---溶解----调节pH值----过滤----分装及包扎----灭菌----灭菌后试管摆放斜面
高压蒸汽灭菌器使用方法
手提式高压蒸汽灭菌器示意图
作业:
1. 在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题 ?为什么? 2.你配制的高氏一号培养基有沉淀产生吗?说明产生或未产生的原因。 3.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么待压力降低为“0”时才能打开排气阀,开盖取物?
培养基的分类
按照配制培养基的营养物质来源可分为: ⑴天然培养基 :利用天然的有机物配制而成的培养基。如:牛肉膏蛋白胨培养基。 ⑵半合成培养基:既有天然物质又含化学试剂的培养基称半合成培养基。如马铃薯蔗糖培养基。 ⑶合成培养基:采用多种化学试剂配制的,各种成分及其用量都确切知道的培养基。如高氏一号培养基。 根据培养基制成后的物理状态可分为: ⑴液体培养基:呈液体状态的培养基。 ⑵固体培养基:外观呈固体状态的培养基。 ⑶半固体培养基:将各种营养成份按比例配制成营养液后,加入适量固化剂 ,处于半固体状态的培养基。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告培养基的配制与灭菌实验报告引言:细菌培养是微生物学实验中常见的一项技术,而培养基的配制和灭菌则是细菌培养的基础。
本实验旨在探究培养基的配制方法和灭菌技术对细菌培养的影响,为后续的微生物实验打下坚实的基础。
一、培养基的配制培养基是细菌生长和繁殖所需的营养物质,其配制需要考虑细菌的营养需求和生长环境。
本实验选取了常用的液体培养基和固体培养基进行配制。
1. 液体培养基的配制液体培养基的配制相对简单,主要包括基础成分和营养物质的添加。
首先,按照配方中的要求称取所需的基础成分,如蛋白胨、肉汤等。
然后,将基础成分溶解在适量的蒸馏水中,加热至沸腾,搅拌均匀。
待溶液冷却至室温后,再添加适量的营养物质,如葡萄糖、氨基酸等。
最后,用蒸馏水将溶液稀释至所需的体积,调节pH值至适宜范围。
2. 固体培养基的配制固体培养基的配制相对复杂,需要考虑到培养基的凝固和固化。
首先,按照液体培养基的配制方法,将基础成分和营养物质溶解在蒸馏水中。
然后,将溶液加热至沸腾,搅拌均匀。
接着,将溶液倒入试管或培养皿中,待溶液冷却至40-50℃时,添加适量的琼脂或琼脂糖,充分搅拌均匀。
最后,将试管或培养皿密封,放置于室温下,待培养基凝固后,进行灭菌处理。
二、灭菌实验灭菌是为了避免培养基受到外界细菌污染,保证实验的准确性和可靠性。
常用的灭菌方法包括高温灭菌、滤过灭菌和化学灭菌。
1. 高温灭菌高温灭菌是最常见的灭菌方法之一,通过加热培养基使其中的细菌被杀灭。
将配制好的培养基装入培养瓶中,盖上瓶盖,放入高压锅或高温灭菌器中。
加热至121℃,保持15-20分钟,使培养基充分灭菌。
待培养基冷却后,即可进行细菌接种。
2. 滤过灭菌滤过灭菌是一种物理灭菌方法,通过滤器将培养基中的细菌过滤掉。
将配制好的培养基装入滤器中,选择合适的孔径和材质的滤膜。
然后,将滤器连接到真空泵或压力泵上,启动泵进行过滤。
待培养基完全通过滤器后,即可得到无菌的培养基。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、引言在微生物学研究中,培养基的制备与灭菌是非常重要的步骤。
培养基是供养微生物生长和繁殖所必需的营养物质的混合物,而灭菌则是为了消除其中的有害微生物,保证培养基的纯净度。
本实验旨在探讨培养基的制备与灭菌的方法与步骤,以及其对微生物培养的影响。
二、培养基的制备2.1 选择培养基成分培养基的成分根据所需培养的微生物种类和目的而定,常见的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基之前,需要明确所需微生物的营养需求,选择合适的成分。
2.2 配制培养基根据所选的成分和配方,按照一定比例将各种成分溶解在适当的溶剂中,常见的溶剂包括蒸馏水和生理盐水。
注意溶解顺序和温度,保证各种成分充分溶解。
2.3 调节pH值微生物对pH值的要求各不相同,因此在制备培养基时需要调节pH值。
使用酸碱溶液逐滴加入培养基中,同时使用pH试纸或pH计检测pH值,直到达到所需的范围。
2.4 灭菌前的处理在灭菌之前,需要对培养基进行一些处理,包括过滤、加热和冷却等。
过滤可以去除其中的固体杂质和大颗粒微生物。
加热可以杀灭其中的有害微生物,常用的方法包括高温灭菌和压力灭菌。
冷却后的培养基可以用于微生物的培养。
三、灭菌实验3.1 高温灭菌高温灭菌是常用的灭菌方法之一,其原理是利用高温杀灭微生物。
将配制好的培养基倒入培养瓶中,盖上瓶盖,放入高温灭菌器中。
设置合适的温度和时间,一般为121℃,15-20分钟。
高温灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.2 压力灭菌压力灭菌是一种利用高温和高压杀灭微生物的方法。
将配制好的培养基倒入培养瓶中,盖上瓶盖,放入压力灭菌器中。
设置合适的温度和压力,一般为121℃,15-20分钟。
压力灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.3 灭菌效果验证灭菌后的培养基需要进行灭菌效果验证,以确保其中没有活菌存在。
常用的方法包括接种试验和平板计数法。
接种试验是将灭菌后的培养基接种到无菌平板上,观察是否有菌落生长。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告培养基的制备与灭菌实验报告引言:在微生物学研究中,培养基是不可或缺的工具。
培养基的制备和灭菌是保证实验结果准确性和可重复性的重要步骤。
本实验旨在探究培养基的制备方法和灭菌技术的应用。
一、培养基的制备1.1 选择合适的培养基成分培养基的成分根据微生物的需求而定。
常见的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基时,需根据所研究的微生物特性选择合适的成分。
1.2 制备培养基的步骤制备培养基的步骤主要包括称量、溶解、调pH、加热消毒和装瓶。
首先,按照配方称取所需成分,并逐一溶解于适量的蒸馏水中。
随后,根据微生物的需求,调节溶液的pH值。
最后,将溶液装入试管或培养皿中,并加热消毒。
二、灭菌技术的应用2.1 灭菌的目的灭菌是指将培养基、培养器具和实验室环境中的微生物杀灭或去除的过程。
灭菌的目的是为了避免外来微生物的污染,确保实验结果的准确性。
2.2 常用的灭菌方法常用的灭菌方法包括高温灭菌、化学灭菌和紫外线灭菌。
高温灭菌是指将培养基或器具在高温条件下进行加热消毒,常用的方法有烘箱灭菌和压力灭菌。
化学灭菌则是通过使用化学物质如酒精、乙醛等来杀灭微生物。
紫外线灭菌则是利用紫外线的辐射杀灭微生物。
2.3 实验中的灭菌操作在实验中,常用的灭菌操作包括培养基灭菌、器具灭菌和工作台灭菌。
培养基灭菌是将制备好的培养基加热消毒,以杀灭其中的微生物。
器具灭菌则是通过高温、化学物质或紫外线对实验器具进行消毒。
工作台灭菌则是通过紫外线辐射对实验台面进行灭菌处理。
结论:培养基的制备和灭菌是微生物学研究中的重要环节。
正确的培养基制备和灭菌操作可以确保实验结果的准确性和可重复性。
通过本实验,我们学习了培养基的制备方法和常用的灭菌技术,为今后的微生物实验打下了基础。
参考文献:[1] 陈晓玲, 赵莉, 邱晓红, 等. 基础微生物学实验教程[M]. 2版. 北京: 高等教育出版社, 2017.[2] 郭燕妮, 张晓红. 微生物学实验指导[M]. 北京: 高等教育出版社, 2019.。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告一、实验目的1.掌握培养基的配制方法;2.掌握培养基的灭菌方法;3.了解常用的培养基配方和用途。
二、实验仪器和试剂仪器:称量器、自动调pH计、恒温培养箱、高压灭菌器等。
试剂:各种常用的培养基配方、蒸馏水、紫外灯、酒精等。
三、实验步骤1.准备工作首先准备好需要的试剂和仪器,经过试剂和仪器的消毒处理后,将其放置在试验台上,以备使用。
2.培养基的配制培养基的配制是实验的关键步骤之一。
在实验过程中,我们使用锥形试管来制备试验的培养基。
首先需要称量出所需的重量并将其加到试管中,之后按照规定的比例加入蒸馏水、糖和其他的试剂,搅拌均匀。
最后使用自动调pH计来调节培养基的pH,确保在制备培养基过程中能够准确地保持pH值在标准范围内。
3.培养基的灭菌在实验中,我们使用高压灭菌器对制备好的培养基进行灭菌处理,以确保在培养试验过程中,培养基中不会出现杂菌和异物的干扰。
在灭菌过程中,我们需要将培养基放入高压灭菌器中,通过高压和高温来杀死细菌和其他微生物。
同时,也需要不断监测培养基的温度和压力,确保灭菌过程的正常进行。
四、实验结果根据实验的结果可以发现,在正确地配制和灭菌培养基的情况下,我们可以得到符合规定标准的培养基样品。
通过实验,我们也可以更加深入地理解常见的培养基配方和用途,为今后的实验研究提供更加可靠和高质量的实验基础。
五、实验思考在实验过程中,我们还需要注意以下几个问题:1.实验时需要仔细操作,避免粗心大意和疏忽带来的不好的影响。
2.在配制和灭菌时,需要严格遵守规定的操作流程和步骤,以免影响前后实验结果的统一性和准确性。
3.值得注意的是,在配制和灭菌过程中,需要注意卫生和消毒处理,以避免细菌和其他微生物的污染和繁殖。
4.在实验过程中,还需要对实验结果进行仔细的分析和讲解,以便更好的理解和掌握实验原理和方法。
综上所述,在实验培养基的配制和灭菌实验中,需要做好多方面的考虑和准备,以确保实验能够顺利进行,并能获得稳定、高质量和高准确度的结果。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告实验名称:培养基的配制与灭菌实验
实验目的:了解培养基的配制方法和灭菌技术,掌握实验操作
技能,培养实验室操作能力。
实验原理:
1. 培养基配制
培养基的配制是在一定比例下将各种营养成分混合组成的,包
括碳水化合物、胺基酸、氮源、矿物质等,以提供生长和繁殖细
菌所需的条件。
2. 灭菌
细菌培养需要具备无菌环境,因此必须对培养基进行灭菌处理。
实验中常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌。
实验器材和试剂:
1. 水浴锅
2. 培养瓶和试管
3. 称量硬度高的玻璃容器
4. 试剂:琼脂、提取物、蔗糖、酵母提取物、胆汁、NaCl,
实验步骤:
1. 培养基配制
按照比例将各种营养成分混合,加入含有一定含量的蔗糖和酵母提取物的琼脂,再加入一定量的胆汁和NaCl,配制成固体培养基。
将琼脂和提取物等放入庞大的试管中;配合无水熔点管等研磨出来的溶液进行试管的分离悬胶操作,所得的琼脂可以冷藏保存。
2. 灭菌
将培养基装入培养瓶中,放入水浴锅中加热,使水温达到100℃左右,进行高压蒸汽灭菌。
灭菌后将培养基放置在无菌环境中,
待其温度降至40℃左右,即可使用。
实验结果和分析:
实验结果表明,配制的培养基已可以暂存和使用,经过高温蒸
汽灭菌可以达到无菌效果。
实验结论:
本实验灭菌技术和培养基配制方法是现代微生物学实验检测的
基础,熟练掌握这些操作技能可以提高实验室操作能力,为实验
的顺利开展提供有力保障。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在掌握培养基的制备方法和灭菌技术,为后续的微生物培养提供保障。
二、实验原理1. 培养基的制备方法:(1)选用适当的基质:如蛋白胨、肉汤、蔗糖等;(2)添加必需元素:如氮源、碳源、矿物质盐等;(3)调节pH值:使其接近微生物生长最适pH值;(4)加入琼脂:使液态培养基凝固成固态培养基。
2. 灭菌技术:灭菌是指将微生物及其孢子全部杀灭或去除,以保证培养基无菌。
常用的灭菌方法有高温灭菌法和化学药剂灭菌法。
三、实验材料和设备材料:蛋白胨、肉汤、琼脂、氧化钠等。
设备:量筒、天平、自动移液器、恒温水浴器等。
四、实验步骤1. 制备液态培养基:(1)称取所需的蛋白胨和肉汤,按比例混合加入适量的蒸馏水中,搅拌均匀;(2)调节pH值至7.0-7.2,若pH值过高可加入适量的氧化钠溶液;(3)将制好的液态培养基分装到不锈钢培养皿中,每个培养皿约20ml;(4)将分装好的液态培养基在恒温水浴器中加热至沸腾,持续煮沸10分钟。
2. 制备固态培养基:(1)按照液态培养基制备方法制备好液态培养基;(2)将琼脂加入到液态培养基中,搅拌均匀;(3)将制好的固态培养基分装到无菌试管或无菌平板中;(4)在恒温水浴器中加热至琼脂完全溶解。
3. 灭菌:将制备好的液态和固态培养基放入高压灭菌锅中进行灭菌处理,温度和时间根据不同材料和设备而定。
五、实验结果经过灭菌处理后,制备好的液态和固态培养基均无菌,可以用于微生物培养。
六、实验注意事项1. 实验过程中要严格遵守无菌操作规范,以保证培养基无菌。
2. 制备液态培养基时,要注意加入必需元素的比例和pH值的调节。
3. 制备固态培养基时,要注意琼脂的加入量和溶解度。
4. 灭菌处理时,要根据实验材料和设备选择合适的灭菌方法和时间。
5. 实验结束后,要对实验器材进行消毒处理。
七、实验结论本实验通过制备液态和固态培养基以及灭菌处理等操作,掌握了培养基制备和灭菌技术。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告实验目的,掌握培养基的制备方法和灭菌技术,保证培养基无菌,为微生物实验提供良好的生长条件。
一、培养基的制备。
1.1 培养基的组成。
培养基是微生物生长和繁殖的营养物质,通常包括碳源、氮源、矿物质盐和生长因子等。
根据不同微生物的需求,培养基的组成也有所不同。
1.2 制备步骤。
(1)称取适量的葡萄糖、蛋白胨、氯化钠等原料;(2)加入适量的蒸馏水,搅拌均匀;(3)调节pH值,通常为7.0-7.2;(4)分装至试管或培养皿中,加入琼脂(如需要固体培养基);(5)高压蒸汽灭菌15分钟。
二、培养基的灭菌实验。
2.1 灭菌方法。
培养基的灭菌是为了保证培养基中无菌,通常采用高压蒸汽灭菌法。
在高压下,微生物及其孢子、病毒等能够被有效杀灭。
2.2 实验步骤。
(1)将制备好的培养基分装至试管或培养皿中;(2)密封好容器,放入高压灭菌锅中;(3)加水至适当高度,密封锅盖;(4)加热至121摄氏度,压力达到1.05kg/cm2后开始计时,持续15分钟;(5)关火,等待冷却后取出培养基。
实验结果,经过高压蒸汽灭菌处理后,培养基中无任何微生物生长。
证明培养基已达到无菌状态,可以用于微生物的培养和实验。
结论,通过本次实验,我们掌握了培养基的制备方法和灭菌技术,为后续的微生物实验提供了良好的条件。
同时,也加深了对无菌技术的理解和应用。
参考文献:[1] 陈华. 微生物学实验指导. 北京,高等教育出版社, 2015.[2] 王明. 实验室微生物学. 上海,上海科学技术出版社, 2018.以上为培养基的制备与灭菌实验报告。
(文档结束)。
培养基的制备与灭菌实验报告详细
培养基的制备与灭菌实验报告详细集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)N源:包括无机氮和有机氮。
(3)C源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如NaCl、KH2PO4等。
微量元素:Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1MPa、121℃、15~30min可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
微生物培养基配制实验报告(共5篇)
微生物培养基配制实验报告(共5篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)N源:包括无机氮和有机氮。
(3)C源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如NaCl、KH2PO4等。
微量元素:Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
除病菌需更小。
五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告培养基的配制与灭菌实验报告引言:在微生物学研究中,培养基的配制和灭菌是非常重要的实验步骤。
培养基是供养菌落生长和繁殖所必需的营养物质的混合物,而灭菌则是为了杀灭培养基中可能存在的有害微生物,以保证实验结果的准确性和可靠性。
本实验旨在探究不同培养基的配制方法以及灭菌的效果,并提供一种简单可行的实验方案。
一、培养基的配制1. 培养基的种类在微生物学实验中,常用的培养基有固体培养基和液体培养基两种。
固体培养基主要用于菌落计数、分离纯种菌落以及观察微生物生长形态等实验,而液体培养基则适用于大规模培养、生物化学分析等实验。
2. 培养基的配方培养基的配方根据不同微生物的需求而定,常见的培养基配方包括营养物、水和琼脂。
营养物可以是有机物如蛋白胨、肉汤,也可以是无机盐如硝酸钠、磷酸氢二钾等。
水的选择要注意纯净度,最好使用经过蒸馏或纯化的水。
琼脂是一种提供凝胶状基质的物质,常用于制备固体培养基。
3. 培养基的制备步骤(1)称取所需的营养物和琼脂,按照一定比例加入适量的水中。
(2)将容器密封,并在高压蒸汽灭菌器中进行高温高压灭菌,以杀灭培养基中的有害微生物。
(3)取出灭菌后的培养基,待其冷却至适宜生长温度后,即可使用。
二、灭菌实验1. 灭菌的重要性灭菌是为了消除培养基中的有害微生物,以保证实验结果的准确性和可靠性。
如果培养基未经灭菌处理,其中可能存在的细菌、真菌等微生物会与待测微生物相互干扰,导致实验结果的偏差。
2. 灭菌方法(1)高温高压灭菌:将培养基密封于容器中,放入高压蒸汽灭菌器中进行高温高压处理。
高温高压可以有效杀灭细菌、真菌等微生物。
(2)化学灭菌:使用化学消毒剂如酒精、过氧化氢等进行灭菌处理。
这种方法适用于一些耐热菌种,但需要注意化学消毒剂的浓度和作用时间,以避免对待测微生物产生不良影响。
3. 灭菌效果的验证为了验证灭菌效果,可以将灭菌后的培养基分别接种于无菌平板上,并进行培养观察。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告实验目的,通过本次实验,掌握培养基的制备方法和灭菌技术,为后续微生物培养实验打下基础。
一、培养基的制备。
1.准备所需试剂和设备,蔗糖、蛋白胨、酵母提取物、琼脂、蒸馏水、培养皿、量筒、坩埚、移液器等。
2.称取适量蔗糖、蛋白胨、酵母提取物加入蒸馏水中,充分溶解后调节pH值至7.0。
3.加入适量琼脂,搅拌均匀。
4.分装至培养皿中,待凝固后进行灭菌处理。
二、培养基的灭菌。
1.将制备好的培养基装入培养皿中,封口。
2.将培养皿放入高压灭菌锅中,进行高压灭菌处理。
3.灭菌条件,121℃,压力为15psi,持续20分钟。
4.取出培养皿,放置在无菌工作台上待凉,避免细菌再次污染。
5.观察培养基表面是否有凝固不均匀或气泡,如有则说明灭菌不彻底,需重新处理。
三、实验结果。
1.经过灭菌处理的培养基表面平整,无气泡,无明显异物。
2.在无菌条件下打开培养皿,用无菌移液器移取适量微生物菌种接种于培养基表面。
3.将接种好的培养皿放入培养箱中,进行培养观察。
4.培养箱条件,温度控制在37℃,培养时间根据不同微生物而定。
四、实验结论。
本次实验通过制备培养基和灭菌处理,成功培养出微生物菌种,并观察到了微生物的生长情况。
培养基的制备和灭菌是微生物实验中非常重要的步骤,只有保证培养基的无菌,才能得到准确的实验结果。
通过本次实验的学习,相信对于今后的微生物实验有了更深入的认识和理解。
五、实验注意事项。
1.在制备培养基时,需注意称取试剂的准确性和加入顺序。
2.灭菌处理时,要确保培养基充分接受高压蒸汽的灭菌作用。
3.实验操作要在无菌条件下进行,避免外界污染。
4.培养箱的温度和培养时间要根据不同微生物的生长特性进行调整。
六、实验延伸。
在今后的实验中,可以尝试不同种类的培养基制备和灭菌处理,观察其对微生物生长的影响,进一步探索微生物的生长规律和特性。
总之,培养基的制备和灭菌是微生物实验中不可或缺的重要环节,只有掌握了这些基本技能,才能进行准确可靠的微生物实验。
微生物培养基的配置与灭菌实验报告
微生物培养基的配置与灭菌实验报告好嘞,今天咱们来聊聊微生物培养基的配置和灭菌实验。
这可是个既有趣又重要的话题,咱们的日常生活中其实离不开这些小家伙,微生物在我们身边随时随地都在忙碌着呢。
你知道吗?微生物就像是自然界的“小工人”,它们能帮助分解有机物,促进土壤肥沃,甚至在我们的消化系统里默默奉献,真是少不了的好帮手。
咱们得搞清楚什么是培养基。
哎呀,简单来说,培养基就是给微生物提供食物和环境的“餐桌”。
就像我们吃饭需要饭菜一样,微生物在实验室里也需要专门的培养基来成长。
想象一下,咱们在厨房里准备晚餐,得有米、有菜、还有调料才能做出美味的菜肴。
微生物也一样,它们需要各种营养成分,比如糖、氨基酸和矿物质。
培养基的配方千变万化,各种各样,简直就像厨师的秘制菜谱,谁的手艺好,微生物就长得快。
说到培养基的配置,首先得准备好所有的原料,像是买菜一样,得有计划。
我们常用的有营养琼脂、LB培养基等等。
把它们混合在一起,就像调配饮料,得按比例来。
把干粉加到水里,搅拌均匀,直到它们彻底溶解。
这个过程其实蛮有趣的,看到那些粉末在水里渐渐消失,心里总会有种成就感。
然后,把这个混合物倒进试管或者培养皿里,接着就要加热了,嘿,这时候的关键环节来啦。
就要进行灭菌了。
为什么要灭菌呢?因为咱们可不想在实验里“招来”一些不速之客,别让那些坏微生物跟我们争食。
一般来说,咱们用高温灭菌,最常见的就是高压蒸汽灭菌,听起来就很专业对吧?简单来说,就是把培养基放进一个像锅一样的设备里,给它加热、加压,这样细菌和其他微生物就会被消灭得干干净净。
想想看,微生物们在高温高压的环境下,一定是心里发慌,忙着逃命。
经过灭菌的培养基就可以冷却,等温度适中后,可以用无菌操作将其倒入预先准备好的培养皿中。
这个过程可不能马虎哦,手一定要保持干净,避免二次污染。
别小看这一步,有时候一不小心就会把外面的细菌带进去,这样一来,实验的结果可就全毁了。
就像是做饭的时候不小心把沙子洒进去,谁还敢吃啊。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告实验目的:掌握培养基制备的基本操作技巧,理解培养基的重要性以及灭菌操作的必要性。
实验原理:培养基是一种提供营养物质和环境条件的物质,用于微生物的培养和繁殖。
通常包括碳源、氮源、无机盐和其他必需营养物质等。
培养基的配制主要包括以下步骤:1.称取所需的化学试剂和溶质,按照一定比例称取固体试剂和溶液试剂。
2.将固体试剂加入蒸馏水中,溶解并搅拌均匀。
然后加入相应量的溶液试剂。
3.调节溶液的pH值,通常使用酸和碱进行调节,直至达到所需的pH 值。
4.将培养基溶液装入培养瓶或试管中,密封和标记。
灭菌操作是为了杀灭或去除试验中的微生物,以保证实验的可靠性和安全性。
常见的灭菌方法有高温热处理、高压灭菌和化学灭菌等。
实验材料和设备:1.培养基配制所需化学试剂和溶液。
2.培养瓶和试管。
3.电子天平、酸碱仪和pH计。
4.高压灭菌锅。
实验步骤:1.根据实验要求选择合适的培养基配方。
2.按照所需比例称取固体试剂和溶液试剂。
3.将固体试剂加入适量蒸馏水中,溶解并搅拌均匀。
4.加入相应量的溶液试剂。
5.使用酸和碱调节溶液的pH值,直至达到所需值。
6.将培养基溶液装入培养瓶或试管中,密封和标记。
7.准备好待灭菌的培养基样品和高压灭菌锅。
8.将培养基样品放入高压灭菌锅中,进行高压灭菌操作。
9.灭菌结束后取出培养基样品,观察样品的无菌性。
实验结果:制备完成的培养基溶液应该是透明且无悬浮物的。
经过高压灭菌处理后的培养基样品应该是无菌的,没有任何微生物的生长。
实验讨论:在实验中,我们使用了高压灭菌锅进行灭菌操作。
高压灭菌通常可以在较短时间内灭菌,且能够彻底杀灭微生物,保证培养基的无菌性。
然而,操作时需要注意灭菌锅的安全使用,并遵循相应的操作规程,确保操作人员的安全。
总结:通过本实验,我掌握了培养基制备的基本操作技巧,了解了培养基的重要性以及灭菌操作的必要性。
制备无菌培养基是微生物实验中的基础工作,对于后续实验的结果和判断具有重要影响。
培养基的配制分装和灭菌实验报告
培养基的配制分装和灭菌实验报告
培养基的配制:
1、称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
2、加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂煳底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
3、分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
5、包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
培养基配制注意事项:
1、培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2、PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH 或lmol/LHCL溶液进行调节。
3、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
4、培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
5、培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告(文章一):培养基的制备与灭菌实验报告xx师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌(一)、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
(二)、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。
(三)、实验材料1. 药品:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
(四)、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2.灭菌前玻璃器皿的包装(1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
(2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。
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南昌大学实验报告
学生姓名:学号:专业班级:
实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:
实验七培养基的配制和灭菌
一、实验目的:
1 、学习玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作;
2、了解配制微生物培养基的基本原理,本实验通过学习常用细菌培养基的配制来了解并掌握常规培养基配制和无菌水的制备方法;
3、学习各类物品的包装及灭菌技术;
二、实验基本原理:
培养基是应科研、生产需要,根据微生物对营养的需求按一定比例人工配置的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合营养物,任何培养基都应具备微生物生长所需要的六大类营养要素。
培养基配制好后应立即灭菌后备用。
由于微生物的种类及代谢的多样性,因而培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法也各有差异,除一些特殊培养基外,一般培养基的配制过程大致相同。
一款成熟的培养基配方都会在其配方后面附上配制方法及pH值、灭菌温度等其他配制要求。
三、主要仪器设备及耗材:
1、药品及试剂:
可溶性淀粉、营养琼脂(或牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、10%NaOH,10%HCl)
2 、仪器及其它
高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、pH试纸(1-14)、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、培养皿、吸管、玻璃珠等
四、实验步骤:
(一)培养基的制备与分装
1 称量:按培养基配方比例依次准确地称取药品。
(可溶性淀粉先用少量冷水溶化后再加入)
2 熔化:在沸水浴锅中加热熔化。
3 调pH:10%NaOH,10%HCl调pH至7.4-7.6。
4 过滤:趁热用多层纱布过滤(本实验勿需过滤)
5 分装:将溶化的固体培养基趁热加至漏斗上,装试管时,装量不超过试管的1/4,注意管口不要沾上培养基。
6 加塞:试管应先捆成一捆,然后再于棉塞外包扎牛皮纸,贴上标签,注明培养基名称、日期、组别。
(二)无菌水的制备
用量筒量取150ml自来水于带玻璃珠三角瓶中,塞上棉塞,包扎牛皮纸。
(三)器皿的准备
1、培养皿的包装每6~10个一包,用旧报纸包扎(或放在特制铁皮圆筒里加盖扣严)。
2、吸管的包装首先在吸管的上端塞上一小段棉花,用长纸条包扎、打结。
(四)培养基、无菌水、器皿的灭菌
1、将培养基、无菌水放入高压蒸汽灭菌锅内,湿热灭菌。
2、培养基灭菌完毕,将试管培养基搁成斜面。
3、器皿放入干热灭菌箱内干热灭菌。
(注:详情请同学参考教材实验五培养基的配制和灭菌)
五、思考讨论题
1、培养基是根据什么原理配制的?
2、营养琼脂中含有些什么成分?
3、为什么湿热灭菌比干热灭菌优越?
六、实验体会及对实验改进的建议。