生物实验常用试剂配制
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法：(1)磷酸盐缓冲液（PBS）的配制方法：-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。
-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液，然后稀释为需要的浓度。
-例如，1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。
(2) 神经元无血清培养基（Neurobasal Medium）的配制方法：- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。
-根据制造商提供的配方，按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。
-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。
(3) 洗涤缓冲液（Washing Buffer）的配制方法：-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液（PBS）及其他添加剂。
- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。
-根据实验需求，可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。
(4) 乙醇（Ethanol）溶液的配制方法：-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。
- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。
-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。
2.常见缓冲液配制方法：(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法：- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris（三羟甲基氨基甲烷）和Tricine（三甘胺酸）等化学品。
- 根据实验要求，在一定PH范围内，按照不同比例混合Tris和Tricine，溶解于适量的蒸馏水中。
(2) 氯化钾缓冲液（KCl Buffer）的配制方法：- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。
-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。
-根据实验要求，调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。
(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法：- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。
高中生物实验试剂配制方法
高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂试剂甲：将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中，加0.5亳升硫酸，混合均匀。
试剂乙：将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）※临用时试剂甲与试剂乙等量混合※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此，斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。
2、双缩脲试剂取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。
取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。
瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。
※双缩脲试剂使用时，先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液（2mL），振荡摇匀，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，与蛋白质发生紫色反应，因此，双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成，但二者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g/ml；双缩脲试剂中NaOH溶液（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml，CuSO4溶液（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml。
（2）使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后参加10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A 液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序参加，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品，最后补足水到总量。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将结晶硫酸铜溶于500mL水中，加硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸 10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。
（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。
（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。
乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份，-20℃贮存。
（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。
注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。
（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。
（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
分子生物学实验常用试剂配制
分子生物学实验常用试剂配制分子生物学实验常用试剂配制(1) 0.01M PBS缓冲液：一袋粉制PBS缓冲液（中杉有售）加1000ml蒸馏水。
0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
(2) 0.01M枸橼酸盐缓冲液：一袋粉制枸橼酸盐缓冲液（中杉有售）加1000ml蒸馏水。
0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠3g，柠檬酸0.4g。
(3)1mol/L的TBS缓冲液（pH8.0）：在800ml水中溶解121gTris碱，用1N的HCl 调至pH8.0,加水至1000ml。
(4) 1‰DEPC水：1mlDEPC加入1000ml新鲜三蒸水中，剧烈震荡20分钟使充分混匀，37o C至少放置2h或过夜，HIRAYAMA HV-50高压灭菌器高温高压30分钟降解DEPC，4℃保存。
(5) 1%琼脂糖凝胶：取琼脂糖0.2g置烧杯中，加入20ml的1×TAE缓冲液，封闭锥形瓶口，放入微波炉内加热，不时摇动，使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液，待琼脂糖全部熔化后取出摇匀，冷却至60℃左右，加入10mg/ml溴化乙锭（EB）1μl，EB的终浓度为0.5μg/ ml，充分混匀。
将温热的凝胶倒入已经放好梳子的凝胶槽中，厚度约为3-5mm，注意不要有气泡，将凝胶放置室温待其自然凝固。
凝固后从胶槽中轻轻取出梳子。
(6)0.5mol/L EDTA缓冲液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O，用10 mmol/L NaOH调至pH8.0，加水至1000ml。
(7) 50×TAE缓冲液：Tris碱242g，17.4mol/L冰乙酸57.1ml，0.5mol/L EDTA (PH8.0)100ml加蒸馏水至1000ml。
生物学实验室常用试剂的配制方法
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA 的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。
甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。
生物实验室常用培养基和溶液配制
#1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)#组份浓度：1MTris-HCl 配制量：1L配制方法：1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
在800ml水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl 调节pH值至所需值。
pH 7.4 HCl 70ml; pH 7.6 HCl 60ml; pH 8.0 HCl 42ml4.加水将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
#10&timeTEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量：1L 配制方法：1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
#1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度：1.5MTris-HCl 配制量：1L配制方法：1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
#3M醋酸钠(pH5.2)#组份浓度：3M醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
#Tris-HCl平衡苯酚#配制方法：1.使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。
生物化学实验常用试剂的配制方法
生物化学实验常用试剂的配制方法1、0.5mol/L 氢氧化钠溶液 *组份浓度 0.5mol/L*配制量 2L*配置方法 1.准确称取氢氧化钠 40g。
2.用去离子水溶解并稀释至 2L。
2、0.5mol/L 盐酸溶液 *组份浓度 0.5mol/L*配制量 2L*配置方法 1.准确量取盐酸 83.4mL。
2.用去离子水稀释至 2L。
4、0.2％葡萄糖标准溶液 *组份浓度 0.2％*配制量 1L*配置方法 1.称取葡萄糖 2.5g 置于称量瓶中，在70℃干燥 2 小时。
2.干燥器中冷却至室温，重复干燥，冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖 2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至 1L5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清 *组份浓度 250μg/mL白蛋白标准液 *配制量 2L*配置方法 1.准确称取 250mg标准牛血清白蛋白。
2.用 0.03mol/LpH7.8 的磷酸缓冲液溶解并定容至 1L。
3.4℃保存。
6、Folin 试剂甲*配置方法 1.称取 10g氢氧化钠溶于 400mL去离子水中，加入 50g 无水碳酸钠，溶解，待用。
2.称取 0.5g酒石酸钾钠，溶于 80mL去离子水中，加入 0.25g 硫酸铜.5水，溶解。
3.将 1：2：去离子水按 20：4：1的比例混合即可。
4. 4℃保存，可用一周。
7、Folin 试剂乙*配置方法1.在 500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠.2水 25.0359g，钼酸钠.2水6.2526g，去离子水 175mL，85％磷酸 12.5mL，浓盐酸 25mL，充分混合。
2.回流 10 小时，再加硫酸锂 37.5g，去离子水 12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾 15min，以驱除过量的溴，冷却后定容到 250mL。
4.于棕色瓶中保存，可使用多年注意：上述制备地 Folin 试剂乙地贮备液浓度一般在 2mol/L 左右，几种操作方案都是把 Folin 试剂乙稀释至 1mol/L 的浓度作为应用液，我们这时是把贮备液于使用前稀释 18 倍，使之浓度为 0.1mol/L 略高。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
生物实验常用溶液的配制(整理版)
生物实验常用溶液的配制一、DNA电泳相关：1、DNA电泳缓冲液：（1）Tris-乙酸（TAE）缓冲液：TAE较为常用，且价格低，但其缓冲能力较弱。
所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环，而且TAE需要经常更新；且要加入EDTA，目的在于鳌合二价离子，抑制DNase，以保护DNA。
① TAE使用液：1×：40mmol/L Tris-乙酸1mmol/L EDTA② TAE贮存液（每L）：50×：242g Tris碱57.1ml 冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）（2）Tris-硼酸（TBE）缓冲液：① TBE使用液：0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸1mmol/L EDTA② TBE贮存液（每L）：5×：54g Tris碱27.5ml 硼酸20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）（3）Tris-磷酸（TPE）缓冲液：① TPE使用液：1×：90mmol/L Tris-磷酸2mmol/L EDTA② TPE贮存液（每L）：10×：108g Tris碱15.5ml 85%磷酸40ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）2、1%（线性DNA分子大小为400-6000）琼脂糖凝胶DNA电泳操作过程：①制胶：按要求取1g琼脂糖加入1×TAE（或0.5×TAE）电泳缓冲液100ml，置于三角瓶中，在沸水浴或微波炉中加热至琼脂糖溶解（一般中低火温，3-5min即可）；②溶液冷却至60℃，加入EB至0.5μg/ml（2-3ml即可）,充分混匀；③迅速倒入备好的胶模中；④凝胶完全凝固后，小心移去梳子和封口胶带，将凝胶放入电泳槽中；⑤加入能没过胶面1mm深的电泳缓冲液（TAE）；⑥DNA样品与加样缓冲液（溴酚蓝）混合后，用微量移液吸头加样；⑦盖上电泳槽并通电，使DNA向正极移动（黑极→红极），1-5V/cm（80V电压左右）进行电泳（30min 左右）；⑧电泳完毕，切断电源，取出凝胶于紫外投射光源下观察并拍照。
生化试剂配制实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。
2. 熟悉实验操作规范，提高实验技能。
3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。
二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用，它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。
本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂，加深对实验原理和操作步骤的理解。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。
2. 试剂：氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。
四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚，置于烧杯中。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。
配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
中学生物实验中常用试剂的配制及作用
中学生物实验中常用试剂的配制及作用郑英皇湖南省沅陵县第七中学1.碘液配制：取2g碘化钾，溶解在5ml蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。
溶液在光亮处容易变成紫色，必须保存在暗色玻璃瓶里。
作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。
2.斐林试剂配制：斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家斐林（Hermann von Fehling，1812年--1885年）在1849年发明的。
斐林试剂斐林试剂A和斐林试剂B配制而成的。
斐林试剂A 是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液，斐林试剂B是硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL 的溶液。
临用时斐林试剂A与斐林试剂B等量混合。
作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，水浴加热，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中是否有还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
3.班氏尿糖定性试剂配制：173克柠檬酸钠和100克无水碳酸钠溶解于800毫升水中。
再取17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中，慢慢将此溶液加入上述溶液中，最后用水稀释到1升，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
作用：鉴定还原性糖，在沸水浴加热条件下与还原糖反应而生成砖红色的Cu2O沉淀，使用原理同斐林试剂，都是二价铜离子与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀，所不同的是班氏试剂可长期使用。
4.双缩脲试剂配制：双缩脲试剂（biuret reagent）是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO4)两种试剂组成。
双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液；双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
双缩脲试剂使用时，先向2mL蛋白质溶液加入2mL双缩脲试剂A，振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴双缩脲试剂B，振荡摇匀后观察现象。
常用试剂配置方法
常用试剂配置方法常用试剂1.0 20 mM Tris-HCl（pH 7.1）缓冲液Tris碱 2.42 g0.02 mol/L盐酸91.2 mL加双蒸水至1000 mL酸度计检测pH，棕色瓶4℃保存。
*0.02 mol/L盐酸的配制：用洁净的2mL吸管吸取0.9mL浓HCl，加至预先装有300mL左右双蒸水的500mL烧杯中，然后倒入500mL 容量瓶中，用双蒸水稀释至500mL，盖上瓶塞，摇匀。
中华绒螯蟹血液抗凝剂2.0 罗氏沼虾血液抗凝剂罗氏沼虾血液抗凝剂（（1）柠檬酸三钠·2H2O 100mM（7.35g）EDTA-Na210 mM（0.93g）无水葡萄糖82mM（3.69g）NaCl 20mM（0.29g）10mM Tris-HCl 20mM Tris-HCl（pH7.1）（125mL）将Tris-HCl以外的各成分置于250mL烧杯中，用少量（约50mL）的DD水溶解，然后加入20mM Tris-HCl （pH7.1）125mL，用酸度计测pH，再用0.02 mol/L盐酸将pH调至7.56，倒入容量瓶中加入DD水至250mL。
罗氏沼虾血液抗凝剂（（2）3.0 罗氏沼虾血液抗凝剂柠檬酸三钠·2H2O 0.114M（8.38g）NaCl 0.1M（1.46g）用0.1N HCl调pH至7.45，加DD水至250mL▲淡水虾普遍使用改良的Alsever溶液溶液：：MAS））（改良的4.0 罗氏沼虾血液抗凝剂罗氏沼虾血液抗凝剂（（3）（柠檬酸钠（无水）30mM（0.8g）EDTA 11.6mM（0.34g）Tween80 10μl双蒸水100mlpH7.45血液抗凝剂（（AB，Smith and S?derh?ll,1983）氏原螯虾血液抗凝剂5.0 柯氏原螯虾血液抗凝剂NaCl 0.14M（0.82g）葡萄糖0.1M（1.8g）柠檬酸三钠（无水）30mM（0.8g）柠檬酸·H2O 26mM（0.55g）EDTA 10mM（0.29g）双蒸水100mlpH4.66.0 甲壳类抗凝剂NaCl 0.45M（2.63g）葡萄糖0.1M（18g）柠檬酸钠30mM（0.8g）柠檬酸·H2O 26mM（0.55g）EDTA 20mM（0.58g）双蒸水100mlpH4.5氏抗凝剂（中国对虾、日本鲟、菲律宾蛤仔使用效果较好）7.0 Alsever氏抗凝剂葡萄糖0.114M（2.05g）柠檬酸钠30mM（0.8g）NaCl 72mM（0.42g）双蒸水加至100ml8.0 CAD抗凝剂（配制方法参见蔡武城等《生物化学实验技术教程》，复旦大学生出版社，1983，47）柠檬酸三钠（Na3C6H5O7·2H2O）（分析纯） 1.32g柠檬酸（C6H5O7·H2O）（分析纯）0.44g无水葡萄糖（C6H12O6）（分析纯） 1.47g（或C6H12O6·H2O）1.32g置于三角烧瓶内，先用70~80℃新鲜蒸馏水或去离子水100ml溶解，再加入0.1~0.2g活性炭，搅拌后静置10min过滤，所得滤液即是。
中学生物实验中常用试剂的配制及作用
中学生物实验中常用试剂的配制及作用1.碘液配制：取2g碘化钾，溶解在5ml蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。
溶液在光亮处容易变成紫色，必须保存在暗色玻璃瓶里。
作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。
2.斐林试剂配制：斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家斐林（Hermann von Fehling，1812年--1885年）在1849年发明的。
斐林试剂斐林试剂A和斐林试剂B配制而成的。
斐林试剂A是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL 的溶液，斐林试剂B是硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液。
临用时斐林试剂A与斐林试剂B等量混合。
作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，水浴加热，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中是否有还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
3.班氏尿糖定性试剂配制：173克柠檬酸钠和100克无水碳酸钠溶解于800毫升水中。
再取17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中，慢慢将此溶液加入上述溶液中，最后用水稀释到1升，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
作用：鉴定还原性糖，在沸水浴加热条件下与还原糖反应而生成砖红色的Cu2O沉淀，使用原理同斐林试剂，都是二价铜离子与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀，所不同的是班氏试剂可长期使用。
4.双缩脲试剂配制：双缩脲试剂（biuret reagent）是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO4)两种试剂组成。
双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液；双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
双缩脲试剂使用时，先向2mL蛋白质溶液加入2mL双缩脲试剂A，振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴双缩脲试剂B，振荡摇匀后观察现象。
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一，蛋白质电泳相关试剂及缓冲液（一）30％（W/V）丙烯酰胺溶液﹡组分浓度30％（W/V）Acrylamide﹡配制量100ml﹡配制方法1．称取下列试剂，置于250ml烧杯中。
Acrylamide 29gBIS 1g2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。
3．置于棕色瓶中4℃保存。
（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。
配制时应戴手套操作）（二）40％（W/V）丙烯酰胺溶液﹡组分浓度40％（W/V）Acrylamide﹡配制量100ml﹡配制方法1．称取下列试剂，置于200ml烧杯中Acrylamide 38gBIS 2g2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。
3．置于棕色瓶中4℃保存。
（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。
配制时应戴手套操作）（三）10％（W/V）过硫酸铵﹡组分浓度10％（W/V）过硫酸铵﹡配制量10ml﹡配制方法1．称取1g过硫酸铵。
2．加入10ml的去离子水后搅拌溶解，贮存于4℃。
（注意：10％过硫酸铵溶液在4℃保存能使用两周左右，过期会失去催化效果）（四）5X Tris－Glycine Buffer﹡组分浓度0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5％（W/V）SDS﹡配制量1L﹡配制方法1．称取下列试剂，置于1L的烧杯中Tris 15.1gGlycine 94g SDS 5.0g2．加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。
3．加入去离子水定容至1L后，室温保存。
（五）2X SDS－PAGE Loading Buffer﹡组分浓度100mM Tris－HCl （pH 6.8）4％（W/V）SDS0.2％（W/V）溴酚蓝20％（V/V）甘油2％（W/V）β－巯基乙醇﹡配制量5ml﹡配制方法1．称取下列试剂，置于15ml塑料离心管中1M Tris－HCl （pH 6.8）0.5mlSDS 0.2g溴酚蓝10mg甘油1ml2．加入去离子水溶解定容至5ml。
3．小份分装，0.5ml一管，室温保存。
4．使用前将25μl的β－巯基乙醇加入混匀。
（六）5X SDS－PAGE Loading Buffer﹡组分浓度250mM Tris－HCl （pH 6.8）10％（W/V）SDS0.5％（W/V）溴酚蓝50％（V/V）甘油5％（W/V）β－巯基乙醇﹡配制量5ml﹡配制方法1．称取下列试剂，置于15ml塑料离心管中1M Tris－HCl （pH 6.8） 1.25mlSDS 0.5g溴酚蓝25mg甘油 2.5ml2．加入去离子水溶解定容至5ml。
3．小份分装，0.5ml一管，室温保存。
4．使用前将25μl的β－巯基乙醇加入混匀。
二，核酸电泳相关试剂及缓冲液（一）50X TAE Buffer （pH8.5）﹡组分浓度2M Tris－醋酸，100mM EDTA﹡配制量 1L﹡配制方法 1．称取下列试剂，置于1L 烧杯中 Tris 242.2g Na 2EDTA ·2H 2O 37.2g2．加入约800ml 的去离子水，充分搅拌溶解，再加入57.1ml 的醋酸，充分搅匀3．加去离子水将溶液定容至1L 后，室温保存。
（二）10X TBE Buffer （pH8.3）﹡组分浓度 890mM Tris －醋酸，20mM EDTA ﹡配制量 1L﹡配制方法 1．称取下列试剂，置于1L 烧杯中 Tris 108g Na 2EDTA ·2H 2O 7.44g硼酸 55g 2．加入约800ml 的去离子水，充分搅拌溶解。
3．加去离子水将溶液定容至1L 后，室温保存。
（三）10X MOPS Buffer﹡组分浓度 200mM MOPS ，20mM NaAc ，10mM EDTA ﹡配制量 1L ﹡配制方法1．称取41.8g MOPS ，置于1L 烧杯中，加入约800mlDEPC 处理水，搅拌溶解。
2．用1M NaOH 调节pH 至7.0。
3．再加入一下试剂1M NaAc （DEPC 处理） 20ml 0.5M EDTA （pH8.0）（DEPC 处理） 20ml 4．用DEPC 处理水将溶液定容至1L 。
5．用0.45μm 滤膜过滤除杂，室温避光保存。
（注意：溶液见光或高温灭菌后会变黄，仍可以使用，但变黑则不能使用）（四）溴化乙锭（10mg/ml ）﹡组分浓度 10mg/ml 溴化乙锭 ﹡配制量 100ml ﹡配制方法1．称取1.0g 溴化乙锭，加入到200ml 容器中。
2．加入去离子水100ml ，充分搅拌数小时完全溶解溴化乙锭。
3．将溶液转入棕色瓶，室温避光保存。
4．溴化乙锭最终工作浓度为0.5μg/ml 。
（五）6X DNA Loading Buffer （单染料）﹡组分浓度0.25％（W/M ） 溴酚蓝 30％（W/M ） 甘油 ﹡配制量 10ml ﹡配制方法1．称取下列试剂，置于15ml 塑料离心管中溴酚兰 25mg2．向离心管中6ml 去离子水，充分搅拌溶解。
3．加入3ml 甘油混匀，最终用去离子水定容至10ml ，室温保存。
（六） 6X DNA Loading Buffer （双染料）﹡组分浓度0.25％（m/M ） 溴酚蓝0.25％（m/M ） 二甲苯腈蓝FF 30％（m/M ） 甘油 ﹡配制量 10ml ﹡配制方法1．称取下列试剂，置于15ml 塑料离心管中溴酚兰 25mg 二甲苯腈蓝FF 25mg2．向离心管中6ml 去离子水，充分搅拌溶解。
3．加入3ml 甘油混匀，最终用去离子水定容至10ml ，室温保存。
（七）10X RNA Loading Buffer （单染料）﹡组分浓度10mM EDTA0.25％（m/M ） 溴酚蓝 50％（m/M ） 甘油﹡配制量 10ml ﹡配制方法1．称取下列试剂，置于15ml 塑料离心管中 0.5M EDTA （pH 8.0） 200μl 溴酚兰 25mg2．向离心管中4mlDEPC 处理水，充分搅拌溶解。
3．加入5ml 甘油混匀，用DEPC 处理水定容至10ml ，室温保存。
（八）10X RNA Loading Buffer （单染料）﹡组分浓度 10mM EDTA0.25％（W/V ） 溴酚蓝0.25％（W/V）二甲苯腈蓝FF50％（V/V）甘油﹡配制量 10ml﹡配制方法1．称取下列试剂，置于15ml塑料离心管中0.5M EDTA（pH 8.0） 200μl溴酚兰 25mg二甲苯腈蓝FF 25mg2．向离心管中4mlDEPC处理水，充分搅拌溶解。
3．加入5ml甘油混匀，用DEPC处理水定容至10ml，室温保存。
三，分子生物学常用试剂（一），氨苄青霉素﹡组分浓度100mg/ml 氨苄青霉素﹡配制量 50ml﹡配制方法1．称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
（二），卡那霉素﹡组分浓度50mg/ml卡那霉素﹡配制量 50ml﹡配制方法1．称取2.5g 卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
（三）RNase A﹡组分浓度10mg/ml RNase A﹡配制量 50ml﹡配制方法1．取0.5g RNase A置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．100℃煮沸15min,缓慢冷却至室温，小份分装（1ml 一管）后，置于－20℃保存。
（四）IPTG﹡组分浓度24mg/ml IPTG﹡配制量 50ml ﹡配制方法1．称取1.2g IPTG置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．用0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
（五）X-Gal﹡组分浓度20mg/ml X-Gal﹡配制量 50ml﹡配制方法1．称取1g X-Gal置于50ml塑料离心管中。
2．加入40mlDMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解之后定容至50ml。
3．小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
（六）DTT﹡组分浓度1M DTT﹡配制量 10ml﹡配制方法1．称取1.54g DTT置于15ml塑料离心管中。
2．加入8ml的10mM NaAc（pH5.2），充分混合溶解之后定容至10ml。
3．用0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
（七）EDTA溶液﹡组分浓度0.5M EDTA﹡配制量 1L﹡配制方法1．称取186.1g Na2EDTA·2H2O置于1L烧杯中。
2．加入800ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约20gNaOH），当pH接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。
4．小份分装后，高温高压灭菌，室温保存。
四，于定量PCR检测的SY BR®Green I 核酸染料采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测双链DNA时，SYBR®Green I最灵敏的荧光染料，当其结合到核酸上时，会产生很强的荧光及高量子产额，DNA/SYBR®Green I复合物的量子产额约为0.8。
由于与核酸结合后能产生很强的信号，背景极低，并且对核酸的亲和力高，因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。
SYBR®Green I的最低检出限：20pg DNA（254nm）；60pg DNA（300nm 紫外透射）；此外，SYBR®Green I还可以用于检测寡核苷酸（1-2ng，300nm紫外透射），比EB灵敏20至100倍。
SYBR®Green I用于电泳检测DNA时，既可预染，也可电泳后再进行染色。
SYBR®Green I用于琼脂糖电泳检测DNA后，可直接将DNA转移至膜上，进行后续核酸印迹杂交反应。
此外，SYBR®Green I与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用，可直接进行消化或连接。
SYBR®Green I主要用于溶液中DNA的定量，特别适用于荧光定量PCR检测（即实时PCR）。
SYBR®Green I原液是无水DMSO配制10,000倍浓缩液。
配制工作液时需用TAE、TE或TBE缓冲液。
SYBR®Green I应避光存放，原液保存于—20℃；工作液保存于4℃，最好存于密封聚丙烯容器。