91型法医鉴定及亲子鉴定试剂盒产品说明书
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前言
本试剂盒采用多色荧光标记、多重PCR复合扩增方法对人基因组DNA
中STR位点的多态性进行检测,通过分析扩增结果来确定血样、精斑、
牙齿、骨骼、毛发、唾液等生物检材的基因型。AGCU 10+1 STR荧光检测
试剂盒可以进行11个DNA位点(10个STR位点和1个性别位点)的同步
扩增并利用四色荧光技术进行检测。本试剂盒包含的DNA位点有Amelogenin 、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、D8S1179、D21S11、
D18S51、vWA、D5S818、FGA。
试剂盒规格
本试剂盒可供200次样品实验。
试剂盒组成
扩增前试剂盒
Reaction Mix 1000μl ×2支含PCR缓冲液、MgCl2和dNTPs Primers 10+1 1000μl ×1支含11个位点的11对引物
热启动酶100μl ×1支 5 U/μl
Control DNA 9947A200μl ×1支含0.1ng/μl 9947A基因组DNA sdH2O 1500μl×1支超纯水
扩增后试剂盒
10+1Allelic Ladder 50μl ×1支含11个位点的等位基因(见附表)AGCU Marker
ROX-450
250μl ×1支荧光分子量内标
实验所需主要仪器设备
PCR扩增仪、ABI遗传分析仪(310、3100、3130等)、高速离心机、洁
净工作台、微量移液器、冰箱、紫外分光光度计、电炉或恒温水浴锅。
试剂盒使用方法
(试剂使用前请轻微振荡,并短暂离心)
1. DNA提取及定量
待检样品先用磁珠法或Chelex-100法提取基因组DNA,提取的样品基因组DNA定量在约0.1ng/μl~0.5 ng/μl。
2. PCR反应
按如下过程实验:
PCR反应体系
基因组DNA模板10μl(含基因组DNA约2ng)
Primers 10+1 5μl
Reaction Mix 10μl
热启动酶0.5μl
总体积25μl
每次实验都要求同时做阴性对照和阳性对照
PCR循环参数
初始变性热循环终延伸保温
9 95℃11分钟
62℃1分钟,72℃1分钟
20个循环:94℃1分钟,
60℃1分钟,72℃1分钟
60℃,45分钟4℃维持
3. 电泳检测
取2μl PCR产物或10+1 Allelic Ladder分别与0.5μl AGCU Marker ROX-450和15μl去离子甲酰胺混合,95℃变性5分钟后立即冷却用于电泳检测。
(Matrix标准品由FAM、HEX、TAMRA、ROX组成,位点基因分型数据软件由我公司免费提供)
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附表. 11个DNA位点信息
位点荧光标记10+1 Allelic Ladder中的等位基因9947A基因型Amelogenin FAM X,Y X ,X
D3S1358 FAM12,13,14,15,16,17,18,19 14,15
D13S317 FAM8,9,10,11,12,13,14,15 11,11
D7S820 FAM6,7,8,9,10,11,12,13,14,15 10,11
D16S539 FAM5,6,8,9,10,11,12,13,14,15 11,12
D8S1179 HEX8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19 13,13
D21S11 HEX 24,24.2,25,26,27,28,28.2,29,29.2,
30,30.2,31,31.2,32,32.2,33,
33.2,34,34.2,35,35.2,36,37
30,30
D18S51 HEX 10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,
20,21,22,23,24,25,26
15,19
vWA TAMRA 11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21 17,18 D5S818 TAMRA7,8,9,10,11,12,13,14,15 11,11
FGA TAMRA 18,19,20,21,22,23,24,25,
26,26.2,27,28,29,30
23,24
注意:
●本试剂盒有效期为一年,生产日期及批号见产品包装。
●收到试剂盒后请保存于-20℃,试剂盒请不要反复冻融。
●建议用量少的用户小管分装后冻存。
试剂盒的详细使用说明请查阅AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒用户手册。
AGCU 10+1 STR荧光检测试剂
盒
产
品
说
明
书
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生产商:XX中德美联生物技术XX
地址:XX市惠山区文惠路18-1号2层
邮编:214174
电话:00,83598208
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