第一章—第七章作业

《生物制药工艺》第一章—第七章作业

一、名词解释：

1、生物药物：是以生物体、生物组织或其成份为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物

2、反义药物：以人工合成的十至几十个反义寡核苷酸序列，它能与模板DNA或mRNA 互补形成稳定的双链结构，抑制靶基因的转录和M R N A翻译，达到抗肿瘤和抗病毒作用。

3、Ks盐析：在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作Ks盐析法。Ks盐析法多用于提取液的前期分离工作

4、吸附法(adsorption method)：指利用吸附作用，将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上，利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异，使目的物和其它物质分离，达到浓缩和提纯目的的方法。

5、全排阻：

二、问答题

1、基因重组药物与基因药物有什么区别？1.

答：基因重组药物是指应用重组DNA技术（包括基因工程技术和蛋白质工程技术）制造的重组多肽、蛋白质类药物和疫苗、单克隆抗体与细胞因子等，药物的化学成分属于多肽或蛋白质；基因药物是以基因物质（RNA或DNA及其衍生物）作为治疗的物质基础，包括基因治疗用的重组目的DNA片段、重组疫苗、反义药物和核酶等，药物的化学成分为核酸或其衍生物。

2、简述生物活性物质分离纯化的主要原理。

分子形状和大小；电荷差异；分子极性和溶解度大小；吸附特性；生物配基特性。

3、什么是盐析作用？盐析的原理是什么？

1、向蛋白质溶液中逐渐加入中性盐，高盐浓度时，蛋白质溶解度随之减小，发生了盐析作用。产生盐析作用的一个原因是由于盐离子与蛋白质表面具相反电性的离子基团结合，形成离子对，因此盐离子部分中和了蛋白质的电性，使蛋白质分子之间电排斥作用减弱而能相互靠拢，聚集起来。盐析作用的另一个原因是由于中性盐的亲水性比蛋白质大，盐离子在水中发生水化而使蛋白质脱去了水化膜，暴露出疏水区域，由于疏水区域的相互作用，使其沉淀。

4、有机溶剂沉淀影响沉淀效果的因素有那些？

（1）有机溶剂种类及用量（2）pH（3）温度无机盐的含量

（4）某些金属离子的助沉淀作用(5)样品浓度

5、影响吸附的因素有哪些？

1吸附剂的特性：吸附现象在界面发生，因此吸附剂比表面积愈大，吸附量愈多。附剂的机械强度好，吸附速度快②吸附物的性质：能使表面张力降低的物质，易为表面所吸附；一般极性吸附剂易吸附极性物质，非极性吸附剂易吸附非极性物质；溶质从较易溶解的溶剂中被吸附时，吸附量较少；对于同系列物质，吸附量的变化是有规则的；吸附物若能与溶剂形成氢键，则吸附物极易溶于溶剂之中。③吸附条件：温度：吸附热越大，温度对吸附的影响越大；PH 值：溶液的pH值溶液pH值可控制吸附剂或吸附物解离情况，进而影响吸附量，对蛋白质或酶类等两性物质，一般在等电点附近吸附量最大；盐浓度；溶剂的影响。④吸附物浓度与吸附剂用量：一般情况下吸附物浓度大时，吸附量也大。

6、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？

当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较小分子量在柱中停留时间大于大分子物质，于是样品中各组分即按分子大小顺序分开，大分子物质先出来。

对于一个特定的体系，待测物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式

Vb=－k log M+ b

以3个以上的已知分子量标准蛋白过柱，测取各自的V值，一V值作纵坐标，log M为横坐标作标准曲线，在同一系统中测取未知物质的V值可有标准曲线求出分子量。

《生物制药工艺》第八章—第十二章作业

一、名词解释

1、尼柯尔斯基方程式：

其中m1、m2及C1、C2分别代表树脂上和溶液中的两种离子的浓度。K值的大小取决于树脂和交换离子的性质，以及交换条件。K＞1时说明离子A1比离子A2对树脂有较大的吸引力；反之，K＜1时树脂对A2的吸引力大于A1。

2、偶极离子排斥作用：许多生化物质都是两性物质。其中有些是偶极离子。因为它们即使净电荷为零时，正电中心和负电中心并不重叠，遂成偶极。偶极离子在离子交换过程中的行为是很特殊的。

3、亲和反胶团萃取（Affinity-based resersed micellar extraction）：

4、相对离心力：由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同，离心力而受变化，RCF就是实际离心场转化为重力加速度的倍数

5、沉降系数：在单位离心力场中，颗粒的沉降速度

6、超滤：是一项分子级膜分离手段，以压力差为推动力将不同分子量的物质进行选择性分离。一般用于液相分离，也可用于气相分离。

7、浓差极化现象：外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜，大分子被截留于膜表面，并逐渐形成浓度度。

二、问答题

1、下图为离子交换法应用实例，请填写生产工艺流程中的空格（可选因素：阴离子交换树脂，阳离子交换树脂， 0.05mol/L 氨水，0.1mol/L 氨水，2mol/L 氨水）。简述从“滤液”开始，以后步骤的分离原理？

阳离子交换树脂，0.05mol/L 氨水，0.1mol/L 氨水，2mol/L 氨水

滤液调节到pH2.5时，氨基酸带正电荷，因此选用阳离子交换树脂，之后根据氨基酸等电点的不同，依次用0.05mol/L 氨水，0.1mol/L 氨水，2mol/L 氨水洗脱。酸性氨基酸等电点低，因此用0.05mol/L 氨水就可洗脱下来，而碱性氨基酸等电点高，因此需用2mol/L 氨水才能将之洗脱下来

2、对亲和层析的公式 L

K L V Ve ][100+= 进行说明。设 K L =10-7，求[L 0] Ve 为洗脱体积； V0固定相（柱床）体积； [L0]为固定化配基浓度；KL 为亲和对解离常数（亲和势）；只有当阻留值≥10时，亲和层析才是有效（分离）的。1+[L0]/ KL ≥10，将KL =10-7，代入得：[L0]/10-7≥9，所以，[L0]≥9×10-7

3、试述等密度离心法及其特点。 答：当 不 同 颗 粒 存 在 密 度 差 时，在 离 心 力 场 下，颗 粒 或 向 下 沉 降，或 向 上 浮 起 ，一直 沿

梯度移动到与其密度恰好相等的位置上（即等密度点）形成区带，这种离心分离方法称为等密度离心法。等密度离心法是根据颗粒的密度差异进行的离心分离的一种方法。 特点： （1）