血型检查方法学评价及其质量控制培训(PPT 38页)
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血型鉴定试验PPT课件
因为抗原、抗体在适当的比例下，反应最强。若红细胞 悬液过浓，则抗原过剩，抗体不足，每个红细胞均只能吸 收少量抗体，不足以形成凝集。若红细胞悬液过淡，则红 细胞间距离较大，不易集聚在一起，不形成凝集。在实际 血型鉴定时，玻片法用 5% 红细胞悬液敏感性较强，并应 在鉴定过程中不断摇动玻片以促使其相互接触。试管法用 2% 浓度的红细胞悬液
abo血型鉴定试验吉林省临床输血质量控制中心吉林大学中日联谊医院输血科23的红细胞悬液试管法血型鉴定效价滴定5的红细胞悬液玻片法血型鉴定间接抗人球蛋白试验10的红细胞悬液抗体亲和力测定血清标本抗凝或不抗凝血标本37水浴箱玻棒使血块与试管壁分离离心将血清吸至干净试管待用原理
ABO血型鉴定试验
吉林省临床输血质量控制中心 吉林大学中日联谊医院输血科
敏感性较好，容易观察凝集。
ABO血型鉴定试验
为什么玻片法血型鉴定要严格规定观察结果的时间？ 凝集反应出现的快慢与强弱是由抗原抗体的性质决定的,如果抗原 的抗原性强，抗体效价高，凝集反应的第一，第二阶段可以在数秒内 完成；如抗原的抗原性弱，抗体效价也低，则凝集反应不明显，
反应需要一段时间才能完成。
因为血清在空中暴露时间过长，发生浓缩，从而使红细胞聚集，造 成假阳性结果；如果不等反应完成便判定反应结果，可使阳性结果误 报成阴性结果，造成假阴性。所以玻片法血型鉴定要严格规定 观察结果的时间
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
ABO血型鉴定试验
• 离心
ABO血型鉴定试验
• 相对应的抗原抗体反应
ABO血型鉴定试验
• 观察结果
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/1
ABO血型判断
血 型 A B 正定型 抗-A 抗-B — AC — 反定型 BC OC — —
人体血型(ABO型)检验PPT课件
-
21
实验步骤
取干净载玻片
滴加定型剂
取血
消毒
取血
观察
记录结果
消毒 消毒
-
22
①
② 抗- A
抗B 23
③用70－75％的酒精消毒取血部位
消毒取血部位
-
24
④ 用针扎一下消毒部位，使血冒出， 立即滴一滴血液在抗A或B上。
抗A
-
抗B
25
⑤ 再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎的
部位，然后再取一滴血液于抗B或A上。
-
4
血型 A B AB O
可能基因型 IAIA或IAIO
IBIB或IBIO
IAIB
IOIO
-
5
材料
采集管、载玻片、脱脂棉、针、冰箱、 受检者血液 。
-
6
试剂
-
7
实验说明
1．人体的血液是怎样产生的 2．血液有哪些功能 3．血液由哪些成分组成 4．造血需要哪些原料 5．血型 6．父母的血型与子女的血型关系 7．输血 8．血型与性格
对于在生育年龄的妇女和需要反复输血的病人，还必 须使供血者与受血者的Rh血型相合，以避免受血者在 被致敏后产生抗Rh的抗体。
献血前应注意休息，使身体和情绪逐步稳定；不要饱 食或空腹献血；不要吸烟饮酒；不要大量进食油腻食 物；禁服任何药物；否则会破坏血液质量造成不良后 果。
-
19
O型血可以输给任何血型的人吗？
-
9
血液有哪些功能
到目前为止，世界上还没有哪个国家能够人工制造血 液来代替人类自身血液的生理功能。人们之所以把血 液看作为生命的象征，就是在于血液对于维持人体生 命所具有的十分重要的功能。主要有以下几点。
血型检查方法学评价及其质量控制
方法学评价
流式细胞术 在细胞分型方面具有速度快、灵敏度高、特异性好， 检测结果准确，重复性好。 特别适合应用于ABO血型亚型的快速鉴定。 目前有研究指出流式细胞技术亦可通过分离孕妇血 液中的胎儿红细胞用于产前非侵入性胎儿血型检测。
质量控制
1.标准血清 ① 要求：新鲜，在有效期内，效价高，凝集力强，严防污
鉴定方法
血凝试验 • 玻片法 • 试管法
全自动微板法
流式细胞技术 酶联免疫吸附试验 微柱凝胶试验
鉴定方法
盐水凝集法（salt medium test）
鉴定方法
正定型，玻片法
鉴定方法
玻片法评价 它是目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法。 具有操作简便，节省材料的优点。 但弱凝集反应需要借助显微镜观察确定。
测时间、操作程序简单等优点，目前在各大采供血 机构已得到广泛应用。
鉴定方法
流式细胞技术 • 稀释：将待测血样的红细胞用生理盐水稀释成百分之五
的红细胞悬液。 • 标记：分装各管分别等比加入荧光素标记抗体，避光放
置15min待受检红细胞上的血型抗原与相应荧光标记抗 体结合后，用生理盐水洗涤离心除去未结合抗体。 • 检测：重悬后立即用流式细胞仪检测与荧光标记抗体结 合的红细胞，通过软件分析，从而得到待测样本的红细 胞血型。
A抗原的主要亚型有A1和A2，均能与抗A血清发生 直接凝集反应。
AB血型中也存在相应的A1 B和A2 B亚型。 B亚型较少见，且抗原性弱，故临床意义不大。
ABO血型检测原理
血型抗原与相应抗体在反应介质中形成红细胞和相 应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝 集现象。
正向定型（direct typing） 反向定型（indirect typing）
最新实验五-血型测定课件PPT
O型血可以输给任何血型的人吗？
由于O型血的红细胞上既没有A抗原又没有B抗原， 输给A、B、AB型人后，O型红细胞不被受血者 血清中的相对的抗A或抗B抗体结合，因而输入 的O型红细胞不受破坏，而发挥其良好的携带氧 气和排除二氧化碳的功能，称O型血的人为“万 能输血者”只是从这一点来说的。
在O型血的血清中，含有抗A和抗B两种抗体，输 入其他血型的人的体内后，它可以与受血者血液中 的红细胞发生凝集继而产生溶血。由于输入的血量 少，受血者体内的血液量大，通过血液循环的稀释， 和受血者血浆中存在的一些A型或B型的血型物质 对O型血清中的部分抗A和抗B抗体的中和，可以 把结合的红细胞的溶血机会降低。但是如果输入的 O型血量较大，而且血清中所含抗A抗B抗体浓度 很高，同样可以发生严重的输血反应，所以“万能 输血者”并非万能，它同样潜伏着严重的危险性。
本实验采用红细胞凝集试验，用已知抗Ａ 和抗Ｂ定型血清来测定红细胞上有无相应的Ａ 抗原或Ｂ抗原或AB抗原来确定ABO血型。
人类ABO血型的表型和基因型及其凝集反应
血型
基因型
抗原(红 细胞上)
抗体(血 清中)
血清
血细胞
AB IAIB A B
—
不能使任一血型 可被O,A,B型的 的红细胞凝集 血清凝集
A
采集管、
载玻片、
材 脱脂棉、 料 消毒牙签、
采血针、
受检者血液 。
试剂
生理盐水、 光学显微镜。
实验说明
1．人体的血液是怎样产生的 2．血液有哪些功能 3．血液由哪些成分组成 4．造血需要哪些原料 5．血型 6．父母的血型与子女的血型关系 7．输血 8．血型与性格
1、人体的血液是怎样产生的？
血液是一种流体组织，充满于心血管系统中， 在心脏的推动下不断循环流动。每个人体内的 血液，都是自己体内产生的，不是由母体血液 流入胎儿血管先天带来的。 骨髓是人体最重要的造血器官。在正常情况下 它不仅生成红细胞、粒细胞和血小板，同时也 生成淋巴细胞和单核细胞。骨髓每秒钟可造出 1700万个血细胞。 人体血液中所有不同的血细胞，都是来自于肝 脏、骨髓和胸腺里的始祖细胞——多能干细胞 及由此移行的定向干细胞。 这就是人体血液产 生的基本道理。
红细胞血型和相关检测培训课件
20
RhD定型及其常见问题
1.Rh定型
RhD定型，试管法最经典，多使用微柱凝胶卡
2.RhD阴性确认 IgM抗-D阴性
三个厂家IgG抗-D进行 确认 3/10/2021
抗人球蛋白法进行确认 三种IgG抗-D试剂均为阴性，报RhD阴性
一种或一种以上IgG抗-D试剂为阳性，报弱D
红细胞血型和相关检测 21
主要内容
ABO血型鉴定 RhD血型鉴定 交叉配血试验 红细胞抗体筛查及鉴定 血型鉴定和交叉配血自动分析 吸收放散试验
3/10/2021
红细胞血型和相关检测 1
教学目标
• 掌握ABO和Rh血型鉴定、交叉配血试验原理、方 法和质量控制
• 熟悉红细胞不规则抗体筛查及鉴定方法 • 了解吸收放散试验
3/10/2021
红细胞血型和相关检测
23
（一）盐水介质交叉配血试验
• 本质凝集反应，直接凝集试验 • 检测IgM类抗体 • 方法：试管法 • ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血，表示
无输血禁忌，可以输血
3/10/2021
红细胞血型和相关检测 24
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
3/10/2021
红细胞血型和相关检测 8
结果判定
3/10/2021
红细胞血型和相关检测
9
凝胶技术的原理
内套 管壁
试剂或 盐水 凝胶或 玻璃珠
3/10/2021
反应 室
反应 室底 孔
外管壁
特殊粘液
亲和凝 胶
红细胞血型和相关检测 10
凝胶技术的原理：
RhD定型及其常见问题
1.Rh定型
RhD定型，试管法最经典，多使用微柱凝胶卡
2.RhD阴性确认 IgM抗-D阴性
三个厂家IgG抗-D进行 确认 3/10/2021
抗人球蛋白法进行确认 三种IgG抗-D试剂均为阴性，报RhD阴性
一种或一种以上IgG抗-D试剂为阳性，报弱D
红细胞血型和相关检测 21
主要内容
ABO血型鉴定 RhD血型鉴定 交叉配血试验 红细胞抗体筛查及鉴定 血型鉴定和交叉配血自动分析 吸收放散试验
3/10/2021
红细胞血型和相关检测 1
教学目标
• 掌握ABO和Rh血型鉴定、交叉配血试验原理、方 法和质量控制
• 熟悉红细胞不规则抗体筛查及鉴定方法 • 了解吸收放散试验
3/10/2021
红细胞血型和相关检测
23
（一）盐水介质交叉配血试验
• 本质凝集反应，直接凝集试验 • 检测IgM类抗体 • 方法：试管法 • ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血，表示
无输血禁忌，可以输血
3/10/2021
红细胞血型和相关检测 24
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
3/10/2021
红细胞血型和相关检测 8
结果判定
3/10/2021
红细胞血型和相关检测
9
凝胶技术的原理
内套 管壁
试剂或 盐水 凝胶或 玻璃珠
3/10/2021
反应 室
反应 室底 孔
外管壁
特殊粘液
亲和凝 胶
红细胞血型和相关检测 10
凝胶技术的原理：
血型检查方法学评价及其质量控制
血型检查方法学评价及其质量控制
Rh血型系统抗原及抗体
Rh血型系统抗原 目前已发现的Rh抗原有45种，其中与人类关系最为密切的 是D、E、C、c、e五种。 D抗原的抗原性最强。
Rh血型系统抗体 绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG 型免疫性抗体。 主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种，其 中抗D最为常见。
染 ② 常用的抗血清有： • 人血清ABO血型抗体：稳定性高，已灭活补体 • 人ABO血型单克隆抗体：稳定性较人血清抗体的稳定性
差
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血型检查方法学评价及其质量控制
质量控制
2.被检红细胞 标本新鲜，严防污染。 某些疾病出现假凝集，可加做自身血清和红细胞，
自身红细胞和生理盐水对照试验及结合反定型结果 进行鉴定。 当疑有血浆成分干扰血型鉴定时可用生理盐水反复 洗涤红细胞以除干扰。
PPT文档演模板
血型检查方法学评价及其质量控制
方法学评价
盐水凝集法 操作简便，无需特殊仪器。 玻片法：无需离心，适用于血型普查。但反应时间长，
灵敏度差，凝集较弱时易导致定型错误。不适于反向 定型。 试管法：用离心法加速反应，所需时间短，适于急诊 定型。因离心增强红细胞凝集，可发现较弱的凝集现 象，有助于检出亚型，故为常用血型鉴定方法。 只能检测完全抗体易受冷凝集素干扰
鉴定方法
正定型，玻片法
PPT文档演模板
血型检查方法学评价及其质量控制
鉴定方法
玻片法评价 它是目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法。 具有操作简便，节省材料的优点。 但弱凝集反应需要借助显微镜观察确定。
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血型检查方法学评价及其质量控制
鉴定方法
反定型，试管法
血型系统及鉴定PPT课件
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方法学评价
盐水凝集法 可分为玻片法和试管法，操作简便，
无需特殊仪器。
• 玻片法：无需离心，适用于血型普查。但反应时间长， 灵敏度差，凝集较弱时易导致定型错误。血清抗体效 价低时不易出现凝集，故不适于反向定型。
• 试管法：用离心法加速血型抗原抗体反应，故所需时 间短，适于急诊定型。因离心增强红细胞凝集，可发 现较弱的凝集现象，有助于检出亚型，故为常用血型 鉴定方法。
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ABO血型系统抗体
ABO血型抗体按其来源可分为天然抗体和免疫性抗 体。天然抗体主要由自然界中具有与A、B血型抗原结 构相同的物质刺激机体的免疫系统产生，主要为IgM型 免疫球蛋白。免疫性抗体则来自母婴血型不合的妊娠 或血型不合的输血，新生儿血清中的抗体通常是来自 母体的IgG型免疫球蛋白。抗体在出生后3-6个月开始 出现，青春期达到高峰，持续终身，但其效价随年龄 增高而逐步降低。
RH血型鉴定
RH血型检测方法及检测 原理 方法学评价 质量保证 临床意义
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ABO血型系统背景
ABO血型系统---免疫原性最强
1900年，出生于奥地利的美国免疫学家 Karl Landsteiner (1868-1943年)发现不同个体的红细胞膜表面A、 B血型抗（blood -group antigen）和血清中抗A、抗B血型抗体 （blood-group antibody）各不相同，其分布具有一定的规 律性。根据红细胞 膜上是否存在A、B抗原及血清中是否存在抗A、 抗B抗体，可将人 Company Logo 类血型分为 A、B、AB和O型。红细胞膜表面只
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ABO血型系统亚型
红细胞血型检测ppt课件
3)红细胞致敏：受免疫球蛋白致敏的红细胞，在含 高蛋白介质的试剂中，可发生凝集。
4)异常基因型：ABO亚型的检查中，A、B抗原可能
为弱抗原，难以检出。 .
12
5)近期输血：试验前曾输入过其它ABO血型不一致的 血液，使血液标本成为混合血型的红细胞悬液，定 型时显示“混合外观凝集”现象。
6)嵌合体血型：这种血型者体内有两类血型红细胞群 体，定型时可以出现“混合外观凝集”现象。
主要程序：受血者血液标本的处理、ABO血型和 RhD血型鉴定、红细胞同种抗体筛查和鉴定、交 叉配血。
.
3
一、受血者标本的处理
（一） 标本的采集
输血除了需要达到预期的治疗效果外，必须确
保输血安全。血样由临床护士完成，应严格遵守一 次只能为一位受血者抽取标本，标本不得从输液管 或输液侧筋脉中抽取。
（二）标本的接收
反定型：用标准A细胞及B细胞与被检血清反应，检测血清中 是否存在抗体。
由于ABO血型系统抗体多数为IgM类，在室温盐水介质中就 能出现明显的凝集反应。
.
6
.
7
• 正反定型不符分析的基本程序： • 1、重新采集标本 • 2、查询受血者既往病史、输血史和用药史等 • 3、新鲜生理盐水多次洗涤标本和试剂红细胞 • 4、应用抗-AB、抗-A1和抗-H检测红细胞 • 5、分析O型筛选细胞检测结果
.
11
ABO定型试验中的常见问题：
造成这种正反定型不一致的原因主要有：
1)技术和管理错误：这是ABO定型中产生异常结果 的主要原因，包括：标本或试剂搞错；器材不洁；
试剂污染或失效；离心过度或不足；阳性反应产 生溶血现象未能识别；漏加试剂；结果记录或判 断错误；细胞与血清间比例不适当。
血型检查方法学评价及其质量控制培训课件
血型检查方法学评价及 其质量控制培训课件
演讲人
目录
01. 血型检查方法学评价 02. 血型检查的质量控制 03. 血型检查的培训课件
方法学评价的目的
01
02
03
04
确定血型检查 方法的准确性
和可靠性
评估血型检查 方法的灵敏度
和特异性
确定血型检查 方法的适用范
围和局限性
指导血型检查 方法的选择和
方法学评价的步骤01确定评价指标：如灵敏度、特异
性、准确度等
02
选择评价样本：包括阳性样本、
阴性样本、临界样本等
03
进行方法学评价：按照评价指标
进行实验，并记录实验结果
04
分析评价结果：对实验结果进行
分析，得出评价结论
05
确定质量控制措施：根据评价结
果，制定相应的质量控制措施，
确保实验结果的准确性和可靠性
应用
方法学评价的内容
血型检查方法学 的选择：根据检 测目的和样本类 型选择合适的方 法
01
血型检查方法学 的质量控制：包 括人员培训、仪 器设备校准、试 剂质量控制等
03
02
04
血型检查方法学 的评价指标：包 括准确性、灵敏 度、特异性、精 密度等
血型检查方法学 的改进：根据评 价结果进行方法 改进，提高检测 质量
建立质量管 理体系：包 括质量管理 组织、质量 管理制度、 质量管理流 程等
01
02
03
04
质量控制的实施
01
制定质量控制计划：明 确质量控制目标、方法 和步骤
02
培训员工：提高员工对 质量控制的认识和技能
03
定期检查：对血型检查 过程进行定期检查，确 保质量
演讲人
目录
01. 血型检查方法学评价 02. 血型检查的质量控制 03. 血型检查的培训课件
方法学评价的目的
01
02
03
04
确定血型检查 方法的准确性
和可靠性
评估血型检查 方法的灵敏度
和特异性
确定血型检查 方法的适用范
围和局限性
指导血型检查 方法的选择和
方法学评价的步骤01确定评价指标：如灵敏度、特异
性、准确度等
02
选择评价样本：包括阳性样本、
阴性样本、临界样本等
03
进行方法学评价：按照评价指标
进行实验，并记录实验结果
04
分析评价结果：对实验结果进行
分析，得出评价结论
05
确定质量控制措施：根据评价结
果，制定相应的质量控制措施，
确保实验结果的准确性和可靠性
应用
方法学评价的内容
血型检查方法学 的选择：根据检 测目的和样本类 型选择合适的方 法
01
血型检查方法学 的质量控制：包 括人员培训、仪 器设备校准、试 剂质量控制等
03
02
04
血型检查方法学 的评价指标：包 括准确性、灵敏 度、特异性、精 密度等
血型检查方法学 的改进：根据评 价结果进行方法 改进，提高检测 质量
建立质量管 理体系：包 括质量管理 组织、质量 管理制度、 质量管理流 程等
01
02
03
04
质量控制的实施
01
制定质量控制计划：明 确质量控制目标、方法 和步骤
02
培训员工：提高员工对 质量控制的认识和技能
03
定期检查：对血型检查 过程进行定期检查，确 保质量
《血型分析培训》课件
仪器与试剂的校准和维护
定期对仪器和试剂进行校准和维护， 确保其性能和准确度。
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特殊情况
某些遗传疾病可能会影响 血型的表现，如镰状细胞 贫血。
血型与健康的关系
疾病易感性
某些血型可能与特定疾病 的发生有关，如A型血与 胃癌、消化道癌症等消化 系统肿瘤的易感性相关。
输血反应
不同血型之间的输血可能 导致严重的免疫反应，因 此输血前需要进行严格的 配型。
营养与代谢
不同血型的人可能对某些 营养成分的吸收和代谢存 在差异，影响健康状况。
《血型分析培训》ppt 课件
目 录
• 血型基础知识 • 血型分析原理 • 血型分析应用 • 血型分析案例 • 总结与展望
01
血型基础知识
血型的定义与分类
01
02
03
04Leabharlann 血型定义血型是指血液成分（包括红细 胞、白细胞、血小板）表面的
抗原类型。
血型分类
常见的血型分类方法有ABO 血型系统和Rh血型系统。
总结词
法医学鉴定案例解析介绍了涉及法医学领域的血型分析案例，如亲子鉴定、犯罪嫌疑人身份确认等。
详细描述
法医学鉴定案例解析主要针对涉及法医学领域的血型分析案例，如亲子鉴定、犯罪嫌疑人身份确认等 。通过对这些案例的解析，学员可以了解法医学领域对血型分析的需求和应用，提高在相关领域的专 业能力。
05
总结与展望
血型分析的重要性和意义
保障输血安全
血型分析是输血前的重要步骤， 通过准确鉴定血型，确保供血者 和受血者血型相容，预防输血反
应和溶血病的发生。
辅助临床诊断
血型分析结果有助于医生诊断某些 遗传性疾病和免疫系统疾病，例如 ABO血型遗传病、镰状细胞贫血等 。
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ABO血型系统 ABO血型系统抗原 ABO血型系统抗体 ABO血型系统亚型
ABO血型鉴定 检测原理 鉴定方法 方法学评价 质量控制
RH血型系统 RH血型系统抗原 RH血型系统抗体
RH血型鉴定 检测原理 鉴定方法 方法学评价 质量控制
ABO血型系统抗体
分为天然抗体和免疫性抗体 天然抗体主要为IgM型免疫球蛋白 免疫性抗体则来自母婴血型不合的妊娠或血型不合
鉴定方法
血凝试验 • 玻片法 • 试管法
全自动微板法
流式细胞技术 酶联免疫吸附试验 微柱凝胶试验
鉴定方法
盐水凝集法（salt medium test）
鉴定方法
正定型，玻片法
鉴定方法
玻片法评价 它是目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法。 具有操作简便，节省材料的优点。 但弱凝集反应需要借助显微镜观察确定。
质量控制
3.试验器材 器材清洁、干燥、标记清楚。 用试管法定型时，应同时进行正向和反向定型。须设置对
照。 红细胞浓度按要求配置，红细胞与相应抗体的比例适当。 反应温度、反应时间、离心时间。 弱A亚型和弱B亚型，肉眼判断必同时须用显微镜复查。
Rh血型系统抗原及抗体
Rh血型系统抗原 目前已发现的Rh抗原有45种，其中与人类关系最为密切的 是D、E、C、c、e五种。 D抗原的抗原性最强。
白凝胶作为反应介质。 结果既可肉眼观察，也可用血型分析仪分析。
鉴定方法
全自动微板法 • 标准化加样、孵育、离心、
悬浮、静止 • 反应前后吸光度值增加数
值的计算 • 对血型进行正定型与反定
型
方法学评价
全自动微板法 此法正反定型试验，准确率高，且能提高检测灵敏
度，使弱凝集样本更加易显现。 快速、准确、自动化程度高等优点，适合批量操作。 血型微量化检测具有节约大量昂贵抗血清、缩短检
A抗原的主要亚型有A1和A2，均能与抗A血清发生 直接凝集反应。
AB血型中也存在相应的A1 B和A2 B亚型。 B亚型较少见，且抗原性弱，故临床意义不大。
ABO血型检测原理
血型抗原与相应抗体在反应介质中形成红细胞和相 应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝 集现象。
正向定型（direct typing） 反向定型（indirect typing）
方法学评价
流式细胞术 在细胞分型方面具有速度快、灵敏度高、特异性好， 检测结果准确，重复性好。 特别适合应用于ABO血型亚型的快速鉴定。 目前有研究指出流式细胞技术亦可通过分离孕妇血液 中的胎儿红细胞用于产前非侵入性胎儿血型检测。
质量控制
1.标准血清 ① 要求：新鲜，在有效期内，效价高，凝集力强，严防污
血型检查方法学评价 及其质量控制
血型概述
血型是人类血液以血型抗原为表现型的遗传性状， ABO血型系统和Rh血型系统是红细胞的两大血型抗原 抗体系统，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意 义。
血型鉴定(blood typing)是临床输血的首要问题， 正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。
主要内容
测时间、操作程序简单等优点，目前在各大采供血 机构已得到广泛应用。
鉴定方法
流式细胞技术 • 稀释：将待测血样的红细胞用生理盐水稀释成百分之五
的红细胞悬液。 • 标记：分装各管分别等比加入荧光素标记抗体，避光放
置15min待受检红细胞上的血型抗原与相应荧光标记抗 体结合后，用生理盐水洗涤离心除去未结合抗体。 • 检测：重悬后立即用流式细胞仪检测与荧光标记抗体结 合的红细胞，通过软件分析，从而得到待测样本的红细 胞血型。
Rh血型系统抗体 绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG 型免疫性抗体。 主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种，其 中抗D最为常见。
Rh血型检测方法
酶介质法
聚凝胺试验 （polybrene test）
染 ② 常用的抗血清有： • 人血清ABO血型抗体：稳定性高，已灭活补体 • 人ABO血型单克隆抗体：稳定性较人血清抗体的稳定性差
质量控制
2.被检红细胞 标本新鲜，严防污染。 某些疾病出现假凝集，可加做自身血清和红细胞，
自身红细胞和生理盐水对照试验及结合反定型结果 进行鉴定。 当疑有血浆成分干扰血型鉴定时可用生理盐水反复 洗涤红细胞以除干扰。
鉴定方法
反定型，试管法
鉴定方法
试管法评价——优点 试管法是交叉配血试验中最基础的试验方法之一。 与玻片法原理相同，但是借助试管更大的反应空间，
并对待测红细胞予以一定的浓度的稀释或者加入更 多的待测红细胞，通过低速离心后可根据有无肉眼 可见凝集反应来判断结果。 由于待测红细胞经过稀释，在一定程度上减少了血 液中非特异性抗体的浓度，从而提高了试验的敏感 性。比玻片法更具有准确可靠的优点。
的输血，通常是来自母体的IgG型免疫球蛋白。
ABO血型系统抗体
两种抗体的比较
特性 分子量（kD）
IgM型 1000
IgG型 160
耐热性（70℃）
破坏
稳定
与红细胞结合最适 温度（℃） 与红细胞反应介质
被血型物质中和 通过胎盘
4-25
生理盐水
能 不能
பைடு நூலகம்
37
酶处理或清蛋白 溶液 不能 能
ABO血型系统亚型
鉴定方法
试管法评价——缺点 只能检测出完全抗体（抗A、抗B）引起的血型不
合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出，有输 血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。 本实验中的生理盐水对血清（浆）中的抗体有稀释 作用，易导致配血结果假阴性。 易受冷凝集素的干扰。
方法学评价
盐水凝集法 操作简便，无需特殊仪器。 玻片法：无需离心，适用于血型普查。但反应时间长，
灵敏度差，凝集较弱时易导致定型错误。不适于反向 定型。 试管法：用离心法加速反应，所需时间短，适于急诊 定型。因离心增强红细胞凝集，可发现较弱的凝集现 象，有助于检出亚型，故为常用血型鉴定方法。 只能检测完全抗体易受冷凝集素干扰
鉴定方法
凝胶微柱法
鉴定方法
凝胶微柱法的结果
方法学评价
凝胶微柱法 重复性好，特异性和灵敏度高，结果准确。 试剂成本较高，需用离心设备。 根据不同需要可选用中性凝胶、特异凝胶或抗球蛋
ABO血型鉴定 检测原理 鉴定方法 方法学评价 质量控制
RH血型系统 RH血型系统抗原 RH血型系统抗体
RH血型鉴定 检测原理 鉴定方法 方法学评价 质量控制
ABO血型系统抗体
分为天然抗体和免疫性抗体 天然抗体主要为IgM型免疫球蛋白 免疫性抗体则来自母婴血型不合的妊娠或血型不合
鉴定方法
血凝试验 • 玻片法 • 试管法
全自动微板法
流式细胞技术 酶联免疫吸附试验 微柱凝胶试验
鉴定方法
盐水凝集法（salt medium test）
鉴定方法
正定型，玻片法
鉴定方法
玻片法评价 它是目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法。 具有操作简便，节省材料的优点。 但弱凝集反应需要借助显微镜观察确定。
质量控制
3.试验器材 器材清洁、干燥、标记清楚。 用试管法定型时，应同时进行正向和反向定型。须设置对
照。 红细胞浓度按要求配置，红细胞与相应抗体的比例适当。 反应温度、反应时间、离心时间。 弱A亚型和弱B亚型，肉眼判断必同时须用显微镜复查。
Rh血型系统抗原及抗体
Rh血型系统抗原 目前已发现的Rh抗原有45种，其中与人类关系最为密切的 是D、E、C、c、e五种。 D抗原的抗原性最强。
白凝胶作为反应介质。 结果既可肉眼观察，也可用血型分析仪分析。
鉴定方法
全自动微板法 • 标准化加样、孵育、离心、
悬浮、静止 • 反应前后吸光度值增加数
值的计算 • 对血型进行正定型与反定
型
方法学评价
全自动微板法 此法正反定型试验，准确率高，且能提高检测灵敏
度，使弱凝集样本更加易显现。 快速、准确、自动化程度高等优点，适合批量操作。 血型微量化检测具有节约大量昂贵抗血清、缩短检
A抗原的主要亚型有A1和A2，均能与抗A血清发生 直接凝集反应。
AB血型中也存在相应的A1 B和A2 B亚型。 B亚型较少见，且抗原性弱，故临床意义不大。
ABO血型检测原理
血型抗原与相应抗体在反应介质中形成红细胞和相 应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝 集现象。
正向定型（direct typing） 反向定型（indirect typing）
方法学评价
流式细胞术 在细胞分型方面具有速度快、灵敏度高、特异性好， 检测结果准确，重复性好。 特别适合应用于ABO血型亚型的快速鉴定。 目前有研究指出流式细胞技术亦可通过分离孕妇血液 中的胎儿红细胞用于产前非侵入性胎儿血型检测。
质量控制
1.标准血清 ① 要求：新鲜，在有效期内，效价高，凝集力强，严防污
血型检查方法学评价 及其质量控制
血型概述
血型是人类血液以血型抗原为表现型的遗传性状， ABO血型系统和Rh血型系统是红细胞的两大血型抗原 抗体系统，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意 义。
血型鉴定(blood typing)是临床输血的首要问题， 正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。
主要内容
测时间、操作程序简单等优点，目前在各大采供血 机构已得到广泛应用。
鉴定方法
流式细胞技术 • 稀释：将待测血样的红细胞用生理盐水稀释成百分之五
的红细胞悬液。 • 标记：分装各管分别等比加入荧光素标记抗体，避光放
置15min待受检红细胞上的血型抗原与相应荧光标记抗 体结合后，用生理盐水洗涤离心除去未结合抗体。 • 检测：重悬后立即用流式细胞仪检测与荧光标记抗体结 合的红细胞，通过软件分析，从而得到待测样本的红细 胞血型。
Rh血型系统抗体 绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG 型免疫性抗体。 主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种，其 中抗D最为常见。
Rh血型检测方法
酶介质法
聚凝胺试验 （polybrene test）
染 ② 常用的抗血清有： • 人血清ABO血型抗体：稳定性高，已灭活补体 • 人ABO血型单克隆抗体：稳定性较人血清抗体的稳定性差
质量控制
2.被检红细胞 标本新鲜，严防污染。 某些疾病出现假凝集，可加做自身血清和红细胞，
自身红细胞和生理盐水对照试验及结合反定型结果 进行鉴定。 当疑有血浆成分干扰血型鉴定时可用生理盐水反复 洗涤红细胞以除干扰。
鉴定方法
反定型，试管法
鉴定方法
试管法评价——优点 试管法是交叉配血试验中最基础的试验方法之一。 与玻片法原理相同，但是借助试管更大的反应空间，
并对待测红细胞予以一定的浓度的稀释或者加入更 多的待测红细胞，通过低速离心后可根据有无肉眼 可见凝集反应来判断结果。 由于待测红细胞经过稀释，在一定程度上减少了血 液中非特异性抗体的浓度，从而提高了试验的敏感 性。比玻片法更具有准确可靠的优点。
的输血，通常是来自母体的IgG型免疫球蛋白。
ABO血型系统抗体
两种抗体的比较
特性 分子量（kD）
IgM型 1000
IgG型 160
耐热性（70℃）
破坏
稳定
与红细胞结合最适 温度（℃） 与红细胞反应介质
被血型物质中和 通过胎盘
4-25
生理盐水
能 不能
பைடு நூலகம்
37
酶处理或清蛋白 溶液 不能 能
ABO血型系统亚型
鉴定方法
试管法评价——缺点 只能检测出完全抗体（抗A、抗B）引起的血型不
合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出，有输 血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。 本实验中的生理盐水对血清（浆）中的抗体有稀释 作用，易导致配血结果假阴性。 易受冷凝集素的干扰。
方法学评价
盐水凝集法 操作简便，无需特殊仪器。 玻片法：无需离心，适用于血型普查。但反应时间长，
灵敏度差，凝集较弱时易导致定型错误。不适于反向 定型。 试管法：用离心法加速反应，所需时间短，适于急诊 定型。因离心增强红细胞凝集，可发现较弱的凝集现 象，有助于检出亚型，故为常用血型鉴定方法。 只能检测完全抗体易受冷凝集素干扰
鉴定方法
凝胶微柱法
鉴定方法
凝胶微柱法的结果
方法学评价
凝胶微柱法 重复性好，特异性和灵敏度高，结果准确。 试剂成本较高，需用离心设备。 根据不同需要可选用中性凝胶、特异凝胶或抗球蛋