维生素E含量测定方法
维生素E含量测定方法
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
含量测定方法名称：维生素E的测定—气相色谱法。
应用范围：该方法采用气相法测定维生素E的含量。
该方法适用维生素E。
方法原理：供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离并检测维生素E和内标正三十二烷的吸收值，计算出其含量。
试剂：正己烷仪器设备：仪器气相色谱仪色谱柱：以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%，或以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚硅氧烷）为分析柱；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
色谱柱和典型色谱条件：柱长30 m，柱内径0.53 mm 或0.32 mm，固定液为100%甲基聚硅氧烷柱温：265℃检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL载气：氮气，流速5 mL/min试样制备：1、称取供试品精密称取该品20mg，放置在棕色具有塞子的瓶中。
2、对照品溶液的制备精密称取维生素E对照品和维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。
3、内标溶液的制备4、供试品溶液的制备该供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。
5、校正因子的测定另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。
“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。
实验九气相色谱法测定维生素E的含量
实验九气相色谱法测定维生素E的含量
一、实验目的
熟悉气相色谱法的操作方法
掌握气相色谱法测定维生素E的色谱条件的选择
掌握基于校正因子的内标一点法的含量测定
二、溶液的制备（预试情况）
内标物溶液的配制：精密称取内标物正三十二烷48mg，置50ml容量瓶中，加正己烷溶解并稀释至刻度，得到浓度为49.6mg/ml的内标物溶液。
对照品溶液的制备：精密称取维生素E对照品20.76mg,精密加入内标物溶液10ml，溶解，得到浓度为2.076mg/ml的对照品溶液。
供试品溶液的制备：精密称取样品30.4mg，精密加入内标物溶液10ml，溶解，即得。
三、色谱条件
流动相：氮气
载气流速： 30ml/min ，空气流速：300ml/min，氢气流速：30ml/min
检测器：氢焰离子化检测器
进样量：2微升
进样口温度：300度
柱温：265度
检测器温度：300度
四、数据处理及结果（）
校正因子的测定：精密吸取对照品2μl，注入气相色谱仪，计算相对校正因子（new calibration建立新的校正曲线，需要输入内标和维生素E的浓度或量，仪器自动给出绝对校正因子，RF显示项下全为NO，ISTD项下内标物选择YES，对照品选择NO，然后点击OK，即可）
样品的测定：精密吸取样品2μl，注入气相色谱仪，计算样品含量。
含量测定方法选择ISTD法，只需要打开样品图谱，即可得到含量。
实验六 维生素E的含量测定-液相色谱
实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。
2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。
二、原理1. 高效液相色谱的特点高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。
2. 高效液相色谱仪(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。
(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。
(3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。
(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。
3. 高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。
(2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。
(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。
(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。
(5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。
(6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。
4. 实验原理反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。
但目前多是采用化学反应的方法将非极性或弱极性的有机物分子键合到载体表面，制成键合相的固定相，所以也称键合相色谱。
这种色谱的分离机理比较复杂，一般认为是液—固吸附和液—液分配并存。
在反向HPLC中常用的键合相有十八烷基硅烷(Ｃ18）、辛基硅烷(Ｃ8)氰基硅烷、氨基硅烷等。
维生素E的含量检验方法
维生素E的含量检验方法一、目的：建立维生素E含量标准检验方法，保证分析结果的准确性。
二、依据：GB/T5009.82-2003三、范围：本规程适用于本公司维生素E含量检验操作四、职责：质量检验员对本标准的实施负责五、正文：1、试制和溶液1.1 无水乙醚：:不含有过氧化物。
1.1.1 过氧化物检查方法:用5 mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1 min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后使用。
1.1.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。
弃去10%初馏液和10%残馏液。
1.2 无水乙醇：不得含有醛类物质1.2.1 检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇匀，再加人氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
1.2.2 脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。
取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。
将两者倾人1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50 mL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。
1.3 无水硫酸钠。
1.4 甲醇：重蒸后使用。
1.5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
1.6 抗坏血酸溶液(100 g/L)：临用前配制。
1.7 氢氧化钾溶液(1+1),1.8 氢氧化钠溶液(100 g/1)。
1.9 硝酸银溶液((50 g/L)o1.10 银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3. 9)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
1.11 维生素E标准液：a一生育酚(纯度95%)>Y一生育酚(950o),S一生育酚(纯度95%)。
用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1 mL 相当于1 mg。
临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。
1. 12 内标溶液：称取苯并「e」芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1 mL相当10 ug苯并「e」芘的内标溶液。
维生素e的测定方法
维生素e的测定方法
维生素E是一种重要的脂溶性维生素，具有抗氧化、抗衰老等作用。
对于维生素E的测定，目前主要有以下方法：
1.高效液相色谱法：该方法通过色谱分离、检测维生素E的吸收峰来确定维生素E的含量。
该方法操作简便、准确度高、灵敏度较好，适用于各种样品的测定。
2.比色法：该方法将维生素E与少量2,2'-二联苯酚在酸性条件下反应，生成具有紫色的吸收峰，根据吸光度测定维生素E的含量。
该方法操作简单、易于推广，但是因为受到其他物质的干扰较大，准确度较低。
3.氧化法：该方法将样品与氧气或过氧化氢反应，将维生素E氧化为各自二烯酸，再通过比色法或荧光法测定各自二烯酸的含量来确定维生素E的含量。
该方法准确度高、灵敏度好，但是操作相对复杂，需要一定的实验技巧。
总之，不同的测定方法适用于不同的样品和实验要求，应根据具体情况选择合适的方法进行测定。
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维生素E胶丸的含量测定 综述
维生素E胶丸的含量测定摘要目的：通过气相色谱法测定维生素E胶丸中维生素E的含量方法：照气相色谱法（中国药典2000年版二部附录VE）测定。
以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%；柱温为265℃;理论塔板数按维生素E峰计算应不低于500，维生素E峰与内标物质峰的分离度应大于2。
结果：定量方法——内标对比法：⑴求f⑵求标示量%结论：ChP（2010）规定，维生素E胶丸中含维生素E应为标示量的90.0%~110.0%关键词：维生素E胶丸、维生素E、气相色谱法概述维生素E胶丸是一种可预防维生素E缺乏、用于进行性肌营养不良的辅助治疗、可预防心脑血管疾病、预防动脉粥样硬化、能促进性激素分泌，预防流产的药品。
一、维生素E的研究现状维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E 活性明显降低。
生育酚能促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。
近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环，预防近视发生和发展。
1.维生素E的化学结构（Vitamin E，C31H52O3，FW=472.75）本品为（±）-2，5，7，8-四甲基-2-（4，8，12-三甲基十三烷基）-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯2.维生素E的性状本品为微黄色或黄色透明的黏稠液体；几乎无臭；遇光色渐变深。
本品在无水乙醇、丙酮、乙醚或石油醚中易溶，在水中不溶。
对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
二、气相色谱法气相色谱法是一种在有机化学中对易于挥发而不发生分解的化合物进行分离与分析的色谱技术。
1.原理在气相色谱分析法中，一定量（已知量）的气体或液体分析物被注入到柱一端的进样口中。
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中αVE的含量
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量一、实验目的本实验旨在采用高效液相色谱法（HPLC）测定维生素E胶囊中α-生育酚（α-VE）的含量，为药品质量控制提供依据。
二、实验原理高效液相色谱法是一种分离和分析技术，利用色谱柱将样品中的各组分进行分离，然后通过检测器对分离后的组分进行检测和定量。
本实验采用C18色谱柱，以甲醇-水为流动相，荧光检测器检测维生素E。
维生素E在流动相中的分配系数不同，因此各组分在色谱柱上的保留时间也不同，从而实现分离。
三、实验步骤1.试剂与仪器准备：甲醇（色谱纯）、维生素E标准品、维生素E胶囊样品、C18色谱柱、荧光检测器、高效液相色谱仪。
2.标准溶液制备：精确称取适量维生素E标准品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的标准溶液。
3.样品溶液制备：取适量维生素E胶囊样品，破碎后混合均匀，精确称取适量样品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的样品溶液。
4.色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（90:10，v/v），流速为1.0mL/min，荧光检测器激发波长为295nm，发射波长为330nm。
柱温为室温。
5.标准曲线绘制：分别精密吸取不同浓度的标准溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
6.样品测定：精密吸取样品溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
根据标准曲线计算样品中α-VE的含量。
7.数据处理与分析：将实验数据录入表格，进行数据处理与分析，得出实验结果。
四、实验结果与讨论1.实验结果：通过高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，得到如下数据：标准曲线方程：y = ax + b相关系数：r样品中α-VE的含量：X μg/粒回收率：Y%相对标准偏差（RSD）：Z%2.实验讨论：本实验采用高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，方法简便、准确、重现性好。
高效液相色谱法测定维生素E乳中维生素E的含量
高效液相色谱法测定维生素E乳中维生素E的含量目的建立测定维生素E乳中维生素E含量测定的方法。
方法采用SHISEIDO CAPCELL PAK MGⅡC18色谱柱，以甲醇为流动相；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm。
结果维生素E在浓度在0.133～0.931 mg/ml内与峰面积具有良好的线性关系，平均回收率为100.5%，RSD = 1.0%。
结论本方法测定维生素E乳中维生素E含量简便、快速、准确。
标签：维生素E乳；高效液相色谱法；含量测定市售的维生素E乳由维生素E和其他基质组成，具有治疗皮肤干燥及因季节变化所引起的皮肤瘙痒的作用。
原标准中维生素E的含量测定分别采用紫外分光光度法和气相色谱的方法。
为了更有效地控制该药品的质量，本研究采用了反相高效液相色谱法测定维生素E乳中維生素E的含量，方法准确、简便。
1 仪器与试药1.1 仪器岛津高效液相色谱仪（SPD-10Avp检测器，岛津LC-10ATvp泵，LC-Solution 色谱数据工作站）；XS105型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。
1.2 试药维生素 E 标准品（中国药品生物制品检定所，批号：100062-201008），维生素E乳（北京吉康利通医药科技有限公司自制，批号：20110302，20110303，20110304）。
甲醇为色谱纯，水为纯化水，无水乙醇为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：SHISEIDO CAPCELL PAK MGⅡC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱温：室温；流动相：甲醇；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm；进样量：20.0 μl。
理论塔板数按维生素E峰计算应大于2400。
2.2 供试品溶液的制备精密量取本品5 ml（样品标示量为10 mg/ml），置100 ml量瓶中，加入无水乙醇至刻度，振摇使充分溶解后过0.45 μm有机滤膜滤过，作为供试品溶液。
维生素E测定方法
维生素E测定方法 Prepared on 22 November 2020MM_FS_CNG_0793饲料添加剂维生素E粉检验规程滴定法称量法MM_FS_CNG_0793饲料添加剂维生素E粉1.适用范围本方法适用于以维生素E为原料，加入适当的吸附剂制成的维生素E粉，在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。
2. 分子式、分子量分子式：C31H52O3分子量：(按1983年国际原子量)3.技术要求.外观和性状本品为类白色或淡黄色粉末，易吸潮。
.粒度本品90％通过三号筛。
.项目和指标4.过程简述.外观及粒度称取样品50g，用肉眼观察颜色，再用三号筛测定。
.鉴别主要试剂无水乙醇；硝酸。
鉴别方法称取样品约相当于维生素E15mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热约15min，溶液显橙红色。
.维生素E含量测定主要试剂95％乙醇；无水乙醇；硫酸；二苯胺：1％(g/ml)硫酸溶液；硫酸铈；硫酸铈标准液：L。
按中国药典一九八五版二部附录134页制备和标定。
测定方法称取样品约相当于维生素E (准确至，置于100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度。
振摇30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，准确吸取续滤液50ml，置于回流瓶中，再加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，准确吸取25ml，加乙醇20ml，水10ml，二苯胺硫酸溶液2滴，用L硫酸铈标准液滴定，滴定速度以每10s 25滴为宜，至溶液由亮黄色转变为灰紫色。
持续10s，即为终点，并将滴定结果用空白试验校正。
计算和结果的表示所含维生素E 相当于标示量的百分数X 1(％)按式(1)计算：)1(1008002364.0)((%)01 ⨯⨯⨯⨯⨯-=KG F V V X 式中：V ──样品溶液消耗硫酸铈标准液的体积，ml ；V 0──空白溶液消耗硫酸铈标准液的体积，ml ；F ──硫酸铈标准液浓度校正系数；──滴定度(每1ml L 硫酸铈标准液相当于的C 31H 52O 3)；8──样品稀释倍数；G ──样品重量，g ；K ──维生素E 的标示量(如5010033100251002010010100,,,,等)。
维生素E的含量检验方法
维生素E的含量检验方法一、目的：建立维生素E含量标准检验方法，保证分析结果的准确性。
二、依据：GB/T5009.82-2003三、范围：本规程适用于本公司维生素E含量检验操作四、职责：质量检验员对本标准的实施负责五、正文：1、试制和溶液1.1 无水乙醚：:不含有过氧化物。
1.1.1 过氧化物检查方法:用5 mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1 min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后使用。
1.1.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。
弃去10%初馏液和10%残馏液。
1.2 无水乙醇：不得含有醛类物质1.2.1 检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇匀，再加人氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
1.2.2 脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。
取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。
将两者倾人1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50 mL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。
1.3 无水硫酸钠。
1.4 甲醇：重蒸后使用。
1.5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
1.6 抗坏血酸溶液(100 g/L)：临用前配制。
1.7 氢氧化钾溶液(1+1),1.8 氢氧化钠溶液(100 g/1)。
1.9 硝酸银溶液((50 g/L)o1.10 银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3. 9)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
1.11 维生素E标准液：a一生育酚(纯度95%)>Y一生育酚(950o),S一生育酚(纯度95%)。
用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1 mL 相当于1 mg。
临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。
1. 12 内标溶液：称取苯并「e」芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1 mL相当10 ug苯并「e」芘的内标溶液。
维生素E含量测定方法
高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定色谱条件色谱柱：采用C18柱(长150 mm，内径4.6mm，粒径4-5μm)流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水) 比例：(98 + 2 )流速：1.2 ml/min检测波长:285 nm柱温: 25±2 ℃进样量：20 μL溶液制备标准溶液的制备：本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约0.1g(准确至0.0002),置50mL棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。
绘制标准曲线把制成2.008 mg/mL的溶液作为贮备液。
分别准确移取0.5、1.25、2.5、3.75、5mL 至10mL 的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为0.1004、0.251、0.502、0.753、1.004mg/ml的五种溶液，分别经0.45μm 滤膜滤过,滤液作为标准溶液。
用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从0.1004——1.004mg/ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。
样品溶液的制备：维生素E粉样品溶液的制备制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤1.研磨把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。
2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸上，称取维生素E 粉约1g(约相当于维生素E 0.5g，准确至0.0002g),置50mL棕色量瓶中。
3.水浴溶解加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20 min。
4.移取定容冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL到10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL容量瓶中的溶液中移取2.5mL放置到10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。
VE含量测定
我们在评价食品的营养价值，开发利 用高含量维生素的食品资源，指导人们合 理调整膳食结构，指导制定加工工艺或贮 存条件，最大限量地保留各种维生素，还 要控制强化食品中加入量，防中毒，都离 不开分析检测工作。
维生素分类：脂溶性（A、D、E、K）
水溶性（B族、C）
测定方法
生物鉴定法
优点
不用详尽分离
缺点
优点:有望获得同步荧光信号最强、半高宽度最小的 单峰同步荧光光谱。
直接295nm激发，325nm处测量。 则溶剂Raman光谱严重干扰测定! 同步荧光扫描技术（可变角同步 扫描技术）
（三）荧光分光光度法
同步荧光扫描法测定血清中VitE的含量 1、药物本身具有荧光 2、溶剂产生的拉曼光谱影响测定方法的灵敏度和准 确度 3、采用同步荧光扫描法测定，消除干扰
二、脂溶性V的测定
VA、VD、VE、VK与类脂物一起存于食物中，摄食时 可吸收，可在体内积贮。 脂溶性维生素具有以下理化性质： 1.溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于脂肪、 乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。 2.耐酸碱性：维生素A、D对酸不稳定， 对碱稳 定，维生素E对碱不稳定，但在抗氧化剂存在下或惰 性气体保护下，也能经受碱的煮沸。
耐热性、耐氧化性
耐热性
氧化性
易被氧化（光、热促进其氧化）
VA
好，能经受煮沸
VD
VE VK
好，能经受煮沸
好，能经受煮沸
不易被氧化
在空气中能慢慢被氧化 （光、热、碱促进其氧化） 易被光、氧化剂及醇破坏
好，能经受煮沸
维生素E含量测定
应该采用何种方法？
CH 3 CH 3 CH 3 C O O CH 3 O CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3
维生素E片的含量测定
2、鉴别
（1） 硝酸反应
（2） 三氯化铁－联吡啶反应
（3） UV法 0.01%无水乙醇中
λmax = 284nmλmin = 254nm
E11c%m = 41.0～45.5
维生素EUV图
维生素E的紫外吸收图片
（4）TLC法
薄层板：硅胶G 展开剂：环己烷 -乙醚（4 ：1） 显色剂：硫酸 VitE Rf = 0.7
维生素E的化学结构
维生素E是一类与生殖功能有关的维生素，化学结构 均为苯并二氢吡喃衍生物，结构中有酚羟基，故亦称生 育酚。已知主要有α、β、γ、δ、ε、ζ1、ζ2、η八种异 构体，其中α-生育酚活性最强。
维生素E性质
1．维生素E醋酸酯为微黄色或黄色透明的粘稠液体。 2．结构中含有3个手性碳原子，具有旋光活性。目 前供药用的维生素E醋酸酯是人工合成的外消旋体。 3．维生素E结构中侧链上的叔碳原子(C-4′，C-8′， C-12′)易被氧化，维生素E醋酸酯遇光颜色变深。 用途：用于习惯性流产、不孕症、更年期障碍及延缓 衰老等。
2、
鉴别
（1）三氯化锑反应
Vi tS A b 3 C蓝 l 色 紫红
CHCl3
条件 无水无醇 （2） UV法
Vi t无 A 水 乙 H C 醇 l 去 V 水 itA
△
λmax为326nm λmax为350～390nm
一个吸收峰
三个吸收峰
维生素A和去水维生素A的紫外吸收光谱 1.维生素A 2.去水维生素A
❖易发生脱氢、脱水、聚合反应
（2）共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫 外 线 O、 2、 氧 化 剂
环氧化 物 [O]V V
it醛 A it酸 A
❖ △或有金属离子存在时氧化↑
维生素E软胶囊含量测定
维生素E 软胶囊含量测定一、测定方法 采用气相色谱法（内标法）测定。
1.色谱条件与系统适用性试验 用硅酮（OV-17）为固定液，涂布浓度为2%的填充柱，或用100%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱；柱温265℃。
理论板数按维生素E 峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E 峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
最常用检测器是氢火焰离子化检测器，载气通常是氮气，分离度除另有规定外，应大于1.5。
2)(54.52/h R W t n = 2112)(2W W t t R R R +-= 式中 n 为理论塔板数； R 为分离度；R t 为保留时间； R t 为保留时间；2/h W 为半高峰宽。
W 为峰宽。
2.校正因子的测定 取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释成1.0mg/ml 溶液，作为内标溶液。
另取维生素E 对照品约20mg ，精密称定，置棕色具塞瓶中，精密加内标溶液10ml ，密塞，振摇使溶解。
取1~3µl 注入气相色谱仪，计算校正因子。
sR R s c c A A f ⨯=式中 f 为校正因子； s A 为内标物的峰面积或峰高；R A 为对照品的峰面积或峰高；s c 为内标物的浓度；R c 为对照品的浓度。
例 按《中国药典》2010年版-二部规定用气相色谱法测定维生素E 软胶囊的含量。
先试验系统适用性：取含有维生素E 对照品2.015mg/ml 与内标物正三十二烷1.012mg/ml 的混合溶液2µl 注入气相色谱仪。
测定数据如下，计算理论板数、分离度和校正因子各为多少？并判定色谱系统适用性是否符合规定？解 理论板数n=5.5422/)(h R W t =5.542)52.068.9(=1921 分离度6.302.108.1)86.568.9(2)(22112=+-=+-=W W t t R R R校正因子s R R s c c A A f ⨯=5.1012.1015.21955423614546421=⨯= ∵理论板数大于500，分离度大于1.5，∴色谱系统适用性符合规定。
维生素药物分析 维生素E的含量测定
维生素E的含量测定
校正因子的计算
校正因子 f AS / mS AR / mR
式中，AS：为内标物的峰面积 AR：为对照品的峰面积
mS：为加入内标物的质量 mR：为加入对照品的质量
维生素E的含量测定
含量的计算
含量
mi
f
Ai AS / mS
式中，Ai：为供试品峰面积 mi：为供试品的含量
维生素E的含量测定
标示量的计算
标示量%
（mi
/Vi）1000 10 1/1000 取样量 标示量
平均片量
100
%
式中，平均片量、标示量均以mg为单位 mi/Vi：为1μL供试品溶液中所含维生素E的质量，μg
10：为供试品溶液的总体积，mL 1/1000：为将μg换算成mg
1000：为将1μL中的质量换算为1mL中的质量，μg
维生素E的含量测定——内标法
维生素E的含量测定
维生素E
维生素E是有8种形式的脂溶性维生素，为一重要的抗氧化剂。维生素E包括生育酚 和三烯生育酚两类共8种化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，α-生 育酚是自然界中分布最广泛含量最丰富活性最高的维生素E形式。
维生素E的含量测定
测定原理
03
样品的测定
测定方法
取本品20粒精密称定，清出内容物混合均匀。囊壳以乙醚清洗干净，置通 风处使溶剂自然挥尽，再精密称定囊壳质量，求得平均每粒质量，精密称取内 容物适量（约相当于维生素E 20mg），置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标 溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取取1῀3μL注入气相色谱仪，计算含量。
供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸 收检测器于波长254nm处检测维生素E（C31H52O3）和内标正三十二烷的吸收 值，计算出其含量。
维生素A和维生素E的测定方法
维生素A和维生素E的测定方法（HPLC）杨月欣教授等高效液相色谱法最小检出量分别为VA：；α-E：；γ-E：；δ-E：。
1.原理食物中的维生素A及维生素E经皂化提取以后，将其不可皂化的部分提取到有机溶剂中。
用HPLC法测定维生素A 及维生素E的含量。
2. 适用范围GB12388-90 本法适用于各种食物和饲料的测定3. 仪器（1）高压液相色谱仪（带紫外检测器）（2）六孔恒温水浴锅（3）旋转蒸发器（4）高纯氮气（5）高速离心机4. 试剂本实验所用试剂皆为分析纯，所用水皆为蒸馏水4.1 无水乙醇：重蒸，不含有醛类物质检查方法：取2ml银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。
取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。
将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天（不时摇动，促进反应），经过滤，置蒸馏瓶蒸馏，弃去初蒸出的50ml。
当乙醇中：4.2 10%抗坏血酸溶液（Vc）W/V 临用前配制4.3 50%氢氧化钾溶液（KOH）W/V4.4 无水乙醚重蒸，不含过氧化物过氧化物检查方法：用5ml乙醚加1ml10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后使用。
4.4.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放入铁丝或铁末少许。
弃去10%初馏液和10%残馏液。
4.5 pH 1-14试纸4.6 无水硫酸钠Na2SO44.7 甲醇色谱纯或分析纯重蒸后使用4.8 重蒸水蒸馏水中加入少量高锰酸钾重蒸后使用4.9 苯并〔e〕芘标准液称取苯并〔e〕芘（纯度98%），用脱醛乙醇配制成1ml相当于5μg苯并〔e〕芘的内标溶液。
4.10 维生素A标准液视黄醇（纯度85% Sigma公司）用脱醛乙醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄醇。
临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。
天然维生素E软胶囊中维生素E的含量测定
天然维生素E软胶囊中维生素E的含量测定目的应用高效液相色谱法（HPLC）建立天然维生素E软胶囊的含量测定方法。
方法采用Alltima C18色谱柱（150 mm × 4.6 mm，5 μm），以甲醇为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长285 nm。
结果在本方法中，维生素E的线性关系良好，线性相关系数为0.9999；专属性强，精密度和稳定性良好，相对标准偏差（RSD）分别为0.17%和0.87%；平均加样回收率（n = 6）为100.8%，加样回收率良好。
含量测定结果显示3个批号样品中维生素E的含量分别为标示量的101.2%、100.8%、102.7%。
结论该方法准确、简单、快速，可用于天然维生素E软胶囊的含量测定。
[Abstract] Objective To establish a high performance liquid chromatography （HPLC）method for the determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules. Methods An Alltima C18 column （150 mm× 4.6 mm，5 μm）was used for the separation，with methanol as the mobile phase at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 285 nm. Results The method showed good linearity with correlation coefficient of 0.9999 for vitamin E. The assay method showed good specificity. The precision and stability were satisfactory with the relative standard deviations （RSD）of 0.17% and 0.87% respectively. The average spiked recovery was 100.8% （n = 6），the recovery rate was good. The determination results was 101.2%，100.8% and 102.7% of the labeled amount of the three batches of samples respectively. Conclusion The established method is accurate，simple and fast，and can be used for determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules.[Key words] Natural Vitamin E Soft Capsules；Natural vitamin E；HPLC；Determination维生素E为微黄色至黃色澄清的黏稠液体，几乎无臭，遇光色渐变深，不溶于水，溶于无水乙醇、丙酮等有机溶剂，在空气中会缓慢氧化，紫外线照射可使其分解。
维生素E检测方法研究
维生素E检测方法研究液相色谱法检测的生育酚方法报告一、生育酚简介又称维生素E，是一种脂溶性维生素，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感。
维生素E为微带粘性的淡黄色油状物，在无氧条件下较为稳定，甚至加热至200?以上也不被破坏。
但在空气中维生素E极易被氧化，颜色变深。
维生素E易于氧化，故能保护其他易被氧化的物质(如维生素A及不饱和脂肪酸等)不被破坏。
维生素E的化学名称为(1)-2、5、7、8-四甲基 2-(-4、8、12-三甲基十三烷基)-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯，分子式为CHO，结构式为: 31523根据其化学结构可分为生育酚及生育三烯酚两类。
生育酚主要有四种衍生物，按甲基位置分为α、β、γ和δ四种。
其中，α-生育酚:R，R=CH;β-生育酚:R=H，R=CH;γ-123123生育酚:R=CH，R=H;δ-生育酚:R，R=H。
维生素E以α-生育酚生理活性最高，β-13212及γ-生育酚仅为α-生育酚的40%和8%。
二、色谱方法的选择现行标准中维生素E的检测仅有两个标准——《食品中维生素A和维生素E的测定》(GB/T 5009.82-2003)和《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》(NY/T 1598-2008)，其中前者介绍了液相色谱法和比色法两种方法。
[1]目前有的文献中指出，气相色谱法虽能正确定量维生素E，但是对不同型分离困难，为了使α-维生素E与β-维生素E及γ-维生素E分离，预先要将试样进行三甲基硅烷化或酯化，同时胆同醇等硬脂类对测定有干扰。
另外，如果前期样品处理不好，很容易对毛细管柱造成污染。
故建议使用液相色谱法。
三、内标法和外标法的选择1、两种方法的区别:内标法外标法内标物与待测物相似，且均出峰不需要标准曲线需要，可两点需要，需多点优点定量准确操作简便缺点不容易选择内标物;操作精度高与标准品严格相同的操作条件 2、在《食品中维生素A和维生素E的测定》中采用了内标法，内标物为苯并[a]芘，另外文献中也有使用正三十二烷及十六酸十六醇酯等。
维生素e的含量测定方法 -回复
维生素e的含量测定方法-回复维生素E（Vitamin E）是一种重要的脂溶性维生素，对人体健康有许多益处。
它具有较强的抗氧化性能，能够保护细胞免受自由基的损害，从而减缓衰老的过程，维护血管、肌肤以及眼睛的健康。
要正确测定维生素E的含量，有许多可行的方法。
在此，我们将介绍一种常用的方法高效液相色谱法（HPLC），以及步骤和要点。
步骤一: 样品准备首先，我们需要准备样品。
这可以是食物中提取的维生素E，或者是维生素E补充剂。
将样品粉碎，以获得更好的分散性。
根据样品资料，选择合适的样品量，常规情况下为0.2~0.5克。
然后，将样品置于适当的容器中，并密封以防止维生素E的挥发或氧化。
步骤二: 提取过程接下来，我们需要进行维生素E的提取。
这是一种溶剂萃取的方法。
加入适量的萃取溶剂，常见的有乙醇、醚类、氯仿等。
注意，选择合适的萃取溶剂不仅要考虑溶解度，还要考虑其在分析过程中对仪器设备的影响。
样品和溶剂的比例一般为1:10。
然后，利用涡旋振荡器或超声波清洗机将样品与溶剂充分混合，进行提取过程。
提取时间一般为15~30分钟，提取温度可以控制在10~30摄氏度之间。
步骤三: 净化过程提取得到的提取液中可能还包含一些杂质，需要进行净化处理。
通常，我们会利用固相萃取柱（SPE）来进行净化。
选择合适的SPE柱根据维生素E的物理性质和样品特点。
将样品溶液转移至SPE柱中，注意控制流速以保证良好的净化效果。
一般来说，首先使用无极性固相材料进行预洗，然后再使用高极性固相材料进行后处理。
此过程可有效去除大部分杂质。
步骤四: 色谱分析在样品处理完成后，我们就可以进行色谱分析了。
将经过净化的样品溶液注入色谱柱中。
常见的色谱柱是正相色谱柱，填充物可以是矽胶或其他材料。
在色谱分析中，通常会选择适当的流动相，如正己烷/乙酸乙酯/异丙醇。
根据维生素E的特征峰，设置合适的检测波长，通常为280纳米。
然后，利用高效液相色谱仪（HPLC）进行分离和定性分析。
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高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定
色谱条件
色谱柱：采用C18柱(长150 mm，内径4.6mm，粒径4-5μm)
流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水) 比例：(98 + 2 )
流速：1.2 ml/min
检测波长:285 nm
柱温: 25±2 ℃
进样量：20 μL
溶液制备
标准溶液的制备：
本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约0.1g(准确至0.0002),置50mL 棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。
绘制标准曲线
把制成2.008 mg/mL的溶液作为贮备液。
分别准确移取0.5、1.25、2.5、3.75、5mL 至10mL的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为0.1004、0.251、0.502、0.753、1.004mg/ml的五种溶液，分别经0.45μm 滤膜滤过,滤液作为标准溶液。
用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从0.1004——1.004mg/ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。
样品溶液的制备：
维生素E粉样品溶液的制备
制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤
1.研磨把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。
2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸
上，称取维生素E 粉约1g(约相当于维生素E 0.5g，准确至0.0002g),置50mL棕
色量瓶中。
3.水浴溶解加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20 min。
4.移取定容冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL
到10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL容量瓶中的
溶液中移取2.5mL放置到10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。
5.过滤把制备好的溶液经0.45μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。
维生素E油样品溶液的制备
用注射器直接抽取E油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生素E油样品约
20mg,(准确至0.0002),置50mL棕色容量瓶中,加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶10min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀；经0.45μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。
测定步骤
用100L的进样针抽取60μL的维生素E粉、E油的样品溶液,注入液相色谱仪，按色谱条件操作,得到色谱峰面积(A i)，每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的峰面积(A st)，用外标法计算。
计算和结果的描述
计算公式
维生素E 的含量X 2以质量分数(%)表示
X 2=m st ×P st ×A i m i ×A st
×100%
式中：
X 2——样品中维生素E 的含量﹙%﹚
m st ——标准品的质量﹙g ﹚
m i ——样品的质量﹙g ﹚
P st ——维生素E 标准品的含量﹙%﹚
A i ——样品溶液中维生素E 的峰面积
A st ——标准溶液中维生素E 的峰面积
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