免疫学检验
免疫学检验的方法和特点
免疫学检验的方法和特点免疫学检验是一种通过检测机体免疫系统产生的抗体或抗原来诊断疾病的方法。
它基于免疫反应的原理，利用特定的抗体和抗原之间的相互作用来检测人体内的免疫反应物质。
目前，免疫学检验已经成为临床诊断和科研领域中不可或缺的重要手段之一1.免疫层析：免疫层析是一种将待检测物质（抗体或抗原）移动到特定层析纸或凝胶柱上，通过与特异抗体或抗原的结合来检测它们的方法。
这种方法操作简单，成本较低，适用于检测体液中的抗体或抗原。
2.酶联免疫吸附实验（ELISA）：ELISA是一种利用酶的催化作用检测抗体或抗原的方法。
它包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等多种形式。
ELISA具有高灵敏度、高特异性、操作简便和成本低廉等优点，广泛应用于临床诊断和科研领域。
3.放射免疫分析（RIA）：RIA是一种利用放射性标记物来检测抗体或抗原的方法。
它的原理是将放射性同位素标记在待测抗体或抗原上，通过测量标记物的放射活性来确定待测物质的含量。
RIA具有高灵敏度和高特异性的优势，但由于放射性标记物的使用，操作相对复杂且安全性要求较高。
4.免疫荧光：免疫荧光是一种利用荧光标记的抗体或抗原来检测待检测物质的方法。
它通过检测标记物的荧光强度或光谱来确定待测物质的存在。
免疫荧光具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优势，广泛应用于病原微生物、肿瘤标志物等的检测。
5.流式细胞术：流式细胞术是一种通过流式细胞仪检测细胞表面或细胞内的免疫分子的方法。
它通过将目标细胞与标记有特定抗体的荧光染料反应，再用流式细胞仪对标记的细胞进行激光照射并收集荧光信号来测定免疫分子的表达水平。
流式细胞术具有高灵敏度、多参数分析等优势，广泛应用于细胞免疫学研究和临床诊断。
6.免疫组化：免疫组化是一种利用特异抗体与待检测抗原结合，再通过染色等方法来检测组织或细胞中特定抗原的方法。
免疫组化具有高特异性、高灵敏度、可定量等优势，广泛应用于病理学研究和临床诊断。
常用免疫学检验检测技术
要点一
总结词
要点二
详细描述
蛋白质分析的常用技术
免疫印迹技术是一种用于分离、检测和识别蛋白质的常用 技术。该技术通过将蛋白质混合物在凝胶上进行电泳分离 ，然后将其转移到膜上，再与特异性抗体结合，最后通过 显色反应检测目标蛋白质。免疫印迹技术具有高灵敏度、 高特异性和可同时检测多个蛋白质的特点，广泛应用于生 物学、医学和生物工程领域。
注意事项
由于放射性同位素具有放射性，操作过程中需要注意安全防护，避免对操作人员和环境造成污染。同 时，由于放射免疫分析需要使用放射性同位素标记的抗原，因此成本较高。
优缺点分析
优点
放射免疫分析具有较高的灵敏度和特异性， 可以用于痕量物质的定量检测；操作简便， 易于自动化；测量结果准确可靠。
缺点
由于使用放射性同位素，操作过程中存在安 全风险；成本较高，需要特殊仪器和实验室 条件；对于某些样品，可能存在交叉反应或 非特异性干扰。
化学发光免疫分析（CLIA）
总结词
快速、高灵敏度的定量检测技术
详细描述
化学发光免疫分析是一种基于化学发光反应 的免疫分析技术，通过测量化学发光反应过 程中释放的光子数量来检测抗原或抗体的浓 度。该技术具有快速、高灵敏度和低背景干 扰的优点，广泛应用于传染病、肿瘤标志物
和激素等生物分子检测领域。
免疫印迹技术（Western Blot）
05
其他常用免疫学检验检测技术
时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）
总结词
高灵敏度、高特异性的定量检测技术
详细描述
时间分辨荧光免疫分析是一种基于荧光能量共振转移的免疫分析技术，通过测量荧光标 记物的发射光谱来检测抗原或抗体的浓度。该技术具有高灵敏度、高特异性和低背景干
专升本考试大纲《免疫学检验》
专升本考试大纲《免疫学检验》《免疫学检验》考试大纲课程名称：免疫学检验适应专业：医学检验技术一、考试目的《免疫学检验》是医学检验技术专业主要的专业课程，是应用免疫学理论与技术研究疾病的发生机制、免疫学诊断、治疗和预防的学科。
通过学习将培养学生具有扎实的基础理论和临床实践技能，为学生以后从事科研工作及临床检验工作并对临床检验结果的正确分析打下坚实基础，使学生具有一定的的临床应用思维分析能力和对疾病的诊断及防治能力，同时培养学生具有较强的动手能力和一定的科研能力。
《免疫学检验》课程考试旨在考察学生对基本概念的理解与掌握、熟练的掌握基本理论知识和基本技能。
使学生毕业后能够从事基本的临床检验科工作。
本门课程考试要求由低到高共分为“了解”、“熟悉”、“掌握“三个层次。
其含义为：了解，指学生能懂所学知识，能在有关问题中认识或再现它们。
熟悉，指学生清楚地理解所学知识，并在各种临床见习以及病案分析中正确应用所学知识。
掌握，指学生能较为深刻理解所学知识，在此基础上能够准确、熟练地使用，分析解决较为实际的问题。
二、命题指导思想和原则命题总的指导思想是：全面考查学生对本课程的基本原理、基本概念和主要知识点学习、理解和掌握的情况。
命题的原则是：主观题和客观题相结合，题目数量多、范围广，基本知识一般要占60%左右，稍微灵活一点的题目要点30%左右，较难的题目要占10%左右，考核学生综合运用知识的能力。
三、考试内容免疫学概论1、掌握免疫、免疫学、临床免疫学、免疫学检验的概念。
2、熟悉免疫学的分支和免疫学检验的内容。
3、了解临床免疫学和免疫学检验的进展。
免疫器官和免疫细胞1、掌握免疫器官和组织的组成；免疫器官和组织的功能。
2、熟悉免疫器官和组织的结构；淋巴细胞再循环的概念。
3、了解黏膜相关淋巴组织；淋巴细胞再循环的生物学意义。
抗原1、掌握抗原的概念与两种特性；抗原的异物性与特异性。
2、熟悉影响抗原免疫应答的因素；抗原的种类。
免疫学检验
免疫学检验概述免疫学检验是一种通过检测人体免疫系统的功能和状态来评估健康状况的方法。
免疫学检验主要用于检测和诊断免疫相关疾病、监测免疫治疗效果和评估免疫功能。
在免疫学检验中，通常使用抗体和抗原相互作用的原理进行检测。
抗体是一种由免疫系统产生的特异性蛋白质，可以与抗原结合，形成免疫复合物。
通过检测免疫复合物的形成和浓度变化，可以获得相关信息和数据来评估免疫系统的功能和状态。
常见的免疫学检验方法免疫荧光检测免疫荧光检测是一种常用的免疫学检验方法。
它利用荧光标记的抗体与目标分子（如抗原、细胞表面分子等）发生特异性结合，然后使用荧光显微镜观察荧光信号的强度和分布情况。
免疫荧光检测具有高灵敏度和特异性的优势，可以用于检测抗体、抗原和免疫细胞的分布和表达情况。
在临床诊断中，免疫荧光检测常用于检测自身抗体、病毒抗体和细胞免疫功能等方面。
免疫酶联免疫吸附试验（ELISA）免疫酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常见的免疫学检验方法。
它基于酶标记的抗体与抗原特异性结合的原理，利用酶催化的反应产生可测量的信号。
ELISA具有高精确性和灵敏度的特点，可用于检测抗体、抗原和细胞因子的浓度。
在临床检验中，ELISA常用于检测病毒感染、风湿性疾病和免疫调节等方面。
流式细胞术流式细胞术是一种免疫学检验方法，可以同时检测和分析多种免疫细胞类型和功能的改变。
它基于细胞表面标志物的特异性结合和荧光标记的抗体的检测，通过流式细胞仪实现高通量的细胞检测和分析。
流式细胞术广泛应用于免疫学研究和临床诊断中。
它可以用于检测细胞表面分子的表达情况、分析细胞亚群的比例和功能状态，并可进行细胞分选和细胞功能实验等。
免疫学检验的临床应用免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要的应用价值。
它可以用于检测和诊断多种免疫相关疾病，如自身免疫病、感染性疾病和免疫缺陷病等。
在自身免疫病的诊断中，免疫学检验可以检测自身抗体的产生和水平变化，帮助确定疾病类型和活动度。
免疫学检验的方法和特点
免疫学检验的方法和特点免疫学检验是一种通过检测和分析机体免疫系统相关指标来评估机体免疫功能的方法。
它可以用于疾病的诊断、预防和治疗过程中，对于研究免疫系统的功能和疾病的免疫机制也具有重要意义。
免疫学检验的方法主要包括体外诊断试验、免疫组化技术和流式细胞术等。
下面将逐一介绍这些方法的特点和应用。
1. 体外诊断试验：体外诊断试验是最常用的免疫学检验方法之一，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫分析（RIA）、免疫印迹（Western Blot）等。
这些试验通过检测血清中的抗体或抗原来评估机体的免疫状态。
其特点是操作简单、结果准确可靠、样本来源广泛，可以用于检测多种疾病，如感染病、自身免疫病等。
体外诊断试验的优势在于可以进行大规模筛查，对于人群健康状况的监测和疾病的早期诊断具有重要意义。
2. 免疫组化技术：免疫组化技术是利用抗体与组织或细胞中特定分子的结合反应来检测和定位这些分子的方法。
常用的免疫组化技术包括免疫组织化学（IHC）和免疫荧光染色（IF）等。
这些技术可以用于检测和定位肿瘤标志物、炎症细胞因子、免疫细胞表面标志物等，对于疾病的诊断和治疗有重要的指导意义。
免疫组化技术的优势在于可以直接观察到分子的表达和分布情况，具有较高的灵敏度和特异性。
3. 流式细胞术：流式细胞术是一种通过检测和分析细胞表面标志物来鉴定和分类细胞的方法。
通过标记细胞表面的抗原或抗体，结合流式细胞仪的高速流式分析技术，可以对单个细胞进行高通量的检测和分析。
流式细胞术可以用于检测和鉴定免疫细胞亚群、肿瘤细胞、干细胞等，对于疾病的诊断和治疗选择有重要的指导作用。
流式细胞术的优势在于可以同时检测多个指标，对于复杂的样本分析有较高的效率和准确性。
免疫学检验的特点包括以下几个方面：1. 高度特异性：免疫学检验方法可以通过特异的抗体-抗原反应来检测和定量分析特定的分子或细胞，具有较高的特异性。
这使得免疫学检验方法在疾病的诊断和治疗中具有重要的优势，可以准确地鉴定和区分不同的疾病类型。
免疫学检测的方法有哪几种
免疫学检测的方法有哪几种免疫学检测是以分子生物学、免疫学等作为理论基础，应用于多种疾病诊断以及病情预估的检测方法。
尽管免疫学检测在临床中较为常见，但多数人对其包含的具体方法了解的并不透彻，下面就免疫学的检测项目及方法进行科普。
1. 免疫学检测项目临床免疫学检测的项目包含种类很多，以下列几种的应用较为频繁，临床较为常见，即细胞免疫检测、体液免疫检测、感染免疫检测、肿瘤标志物检测以及自身抗体检测，而移植免疫学检测项目则较为少见。
（1）细胞免疫检测：细胞免疫学检测通常会针对多种类型的细胞进行含量及形态的测定，除了我们熟悉的淋巴细胞、粒细胞以及巨噬细胞以外，还包含前体细胞及单核细胞等[1]。
（2）体液免疫检测：体液免疫检测是针对免疫球蛋白（IgA、IgE 、IgG、IgM）、血清B因子以及血清补体（CH50、C3、C4）进行含量及形态的测定。
通过体液检测结果能够让医师了解受检者的体液免疫功能情况，进而判断其是否患有免疫性疾病或者感染性疾病；通过对血清补体指标的检测结果还能判断受检者是否患有肾小球肾炎、急性感染性疾病或者红斑狼疮等疾病[2]。
（3）感染免疫检测：感染免疫检测主要通过对寄生虫、病毒及细菌等指标的测定，判断受检者是否感染轮状病毒、结核杆菌、脑炎病毒、艾滋病毒、寄生虫或者微生物等。
（4）肿瘤标志物检测：肿瘤标志物检测是针对酶类、激素类、组织多肽抗原、糖类抗原、甲胎蛋白（AFP）以及癌坯抗原（CEA）等多种标志物的检测。
医师可通过检测结果判断受检者是否患有肿瘤及肿瘤的良恶程度，进而对病情、预后以及治疗效果展开预估和评价[3]。
（5）自身抗体检测：自身抗体检测是针对多种不同抗体的测定，包括抗核抗体、抗组织细胞、风湿因子等。
医师可根据这些指标的检测结果判断受检者是否患有炎性疾病、甲状腺以及风湿免疫性疾病等。
（6）移植免疫学检测：移植免疫学检测主要针对接受移植治疗的患者，并对其移植前后的相关指标进行检测和比较，有助于医师判断移植组织是否出现排斥反应，以便能够及时作出应对[4]。
免疫学检验方法有哪些 (3)
免疫学检验方法有哪些
免疫学检验方法主要包括以下几种：
1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：通过将待检样品加入特异性抗体或抗原包被的微孔板中，利用酶标记技术和底物发色反应来检测目标物的浓度或活性。
2. 免疫印迹（Western blot）：将蛋白质样品分离并转移到膜上，然后用特定抗体标记的酶或荧光染料检测目标蛋白质的存在。
通常用于检测抗体的特异性和蛋白质的表达量。
3. 免疫荧光染色（Immunofluorescence stning）：通过将待检样品与特定抗体结合，并用荧光标记的二抗或直接标记的抗体检测目标物的存在。
4. 免疫组织化学（Immunohistochemistry）：将组织切片或细胞片贴培养后，使用特异性抗体和酶、荧光染料或金粒等标记物来检测目标蛋白质在组织或细胞中的表达。
5. 流式细胞术（Flow cytometry）：将待检样品中的细胞与特异性抗体结合，并用荧光标记的二抗或直接标记的抗体检测目标细胞的存在和数量。
6. 中和试验（Neutralization assay）：通过将待检抗体与病毒或细菌感染的细胞或动物结合，观察抗体是否能够中和病毒或细菌的活性。
7. 结合力测定试验（Binding assay）：通过将待检抗体与其靶标物结合，并用荧光标记的二抗或直接标记的抗体检测结合的情况。
以上仅为免疫学检验方法的一部分，根据具体实验目的和样品特点，还可以使用其他更特殊的技术，如免疫电镜
（Immunoelectron microscopy）、免疫贴片（Immunospot assay）等。
临床免疫学检验技术
三、酶联免疫吸附试验（enzyme-
linked immunosorbent assay,ELISA）
• 4.捕获法 用于测定特异性IgM类抗体。被检 血清中针对某抗原旳特异性IgM和IgG常同步 存在，为防止IgG旳干扰，一般采用捕获法 来测定IgM。先将已知特异性抗体（如抗人μ 链）包被于固相载体上，加待测人血清样本， 其中旳IgM（IgM分子相对于固相抗μ链又是 一种抗原）被固相抗μ链抗体特异性捕获， 形成IgM-抗IgM复合物。洗涤除去血清中旳 其他Ig和杂质；加特异性抗原试剂，该抗原 只与固相上旳特异性IgM结合。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 5. 生物素—亲合素ELISA（avidin—biotin— peroxi—dase complex，ABC-ELISA）是将生 物素（biotin）和亲合素(avidin)或链霉亲合素 (streptavidin,SA)引入ELISA旳措施。生物素是 一种小分子物质，经活化后可高比度旳偶联 抗体或抗原等大分子。亲合素（或链霉亲合 素）与生物素旳结合力极强，一分子亲合素 可与4个生物素分子结合。在反应系统中引入 生物素和酶标识亲合素，可将ELISA旳反应多 级放大，明显提升检测措施旳敏感性。
临床免疫学检验技术
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用旳一门学科。免疫检验技术 则要点论述各类免疫学技术旳基本原理、 措施类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物旳抗原或抗体对传染病旳诊疗起到主要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
免疫学检验常用的方法
免疫学检验常用的方法
免疫学检验是临床医学中非常重要的一门学科，主要用于诊断疾病的发病机制、检测疾病的标志以及评估疾病的预后。
下面列举几种常用的免疫学检验方法: 1. 抗体检测：抗体检测是免疫学检验中最常用的方法之一。
它主要用于检测患者体内是否存在特定病原体的抗体，例如乙肝抗原抗体检测、艾滋病抗体检测等。
2. 抗原检测：抗原检测是指通过检测患者体内是否存在特定抗原来诊断疾病的方法。
例如，流感病毒抗原检测可用于诊断季节性流感。
3. 免疫荧光检测：免疫荧光检测是一种常用的免疫学检验方法。
它主要用于检测细胞内的蛋白质、抗体等分子。
例如，免疫荧光染色可用于检测宫颈鳞状细胞中 HPV 病毒的存在。
4. 聚合酶链反应 (PCR) 检测：聚合酶链反应检测是一种用于检测病原体的分子生物学方法。
它主要用于诊断病毒、细菌等病原体感染。
例如，PCR 检测可用于诊断 HIV 感染。
5. 免疫细胞检测：免疫细胞检测是一种用于评估免疫系统功能的方法。
它主要用于检测免疫细胞的数量和功能，例如，流式细胞术可用于检测免疫细胞的表型。
以上是几种常用的免疫学检验方法。
除此之外，还有免疫印迹法、生物传感器法、纳米颗粒法等先进的检测技术，这些技术不仅可以提高检测的灵敏度和特异性，还可以降低检测的成本。
免疫学检验的质量控制
免疫学检验的质量控制引言免疫学检验是一种重要的临床检验方法，广泛应用于疾病的诊断、治疗与预防。
而保证免疫学检验的质量控制则是确保检验结果准确可靠的关键因素之一。
本文将从质量控制的概念、质量控制的重要性、常用的质量控制方法等方面进行介绍。
质量控制的概念质量控制是通过标准化程序和方法来维持和改进检验过程的可靠性和准确性。
它包括内部质量控制和外部质量控制两个方面。
•内部质量控制：是指在实验室内部进行的一系列活动，旨在确保检验结果的准确性和可靠性。
这包括对仪器、试剂、设备、人员等进行监控和管理，以及按照标准操作程序进行实验。
•外部质量控制：是指通过参与外部质量评价和比对活动，与其他实验室进行对比，以评估实验室的检验准确性和可靠性。
质量控制的重要性质量控制对于免疫学检验的准确性和可靠性至关重要。
具体有以下几个方面的重要性：1.病人诊断与治疗：免疫学检验结果直接影响着疾病的诊断和治疗方案的制定。
如果质量控制不到位，检验结果可能出现偏差，导致误诊或误治疗。
2.科学研究：科学研究需要可重复性和可比性的数据支持，而质量控制正是保证检验结果的可靠性和可比性的手段之一。
3.实验室的信誉和声誉：质量控制是评价一个实验室工作质量的重要指标，一个严格遵守质量控制要求的实验室将获得更高的信誉和声誉。
常用的质量控制方法1.内部质量控制方法–定期校准：需要使用标准品对仪器进行定期校准，以确保仪器的精确度和准确性。
–仪器质量控制：使用已知浓度的质控品，对仪器进行日常的质量控制监测。
可以设定不同的质控水平，如低、中、高三个水平，以评估仪器的良率和准确度。
–仪器维护和保养：定期维护和保养仪器，保证其正常工作和准确性。
2.外部质量控制方法–参与外部质量评价：通过参与外部质量评价方案，接受其他实验室的比对。
这可以评估实验室的准确性和可靠性，并及时发现和纠正存在的问题。
–建立质量保证指标：建立适当的质量保证指标，参照国内外标准，对实验室的检验项目进行质量评价。
免疫学检验试题及答案
免疫学检验试题及答案【一】免疫学检验试题1. 什么是免疫学检验？它在临床诊断中的作用是什么？2. 请简要介绍一下常见的免疫学检验方法。
3. 在免疫学检验中，我们常用的血清学指标有哪些？请列举并简要说明其临床意义。
4. 免疫学检验中的免疫组化方法有哪些？请简要介绍其中的原理及应用。
【二】免疫学检验答案1. 免疫学检验是通过检测人体免疫系统相关指标，对疾病进行判断、诊断、治疗和预防的一种实验室技术。
它的作用在于帮助医生了解患者免疫系统的功能状态，辅助临床诊断和治疗决策。
2. 常见的免疫学检验方法包括：酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光染色法、放射免疫测定法、免疫电泳法等。
这些方法通过检测抗原与抗体的相互作用，从而确定免疫反应的程度和特异性。
3. 常用的血清学指标包括：抗核抗体（ANA）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、免疫球蛋白（Ig）等。
这些指标可以反映免疫系统的活性、炎症程度和免疫功能状态，对于自身免疫性疾病、感染性疾病和过敏反应的诊断具有重要意义。
4. 免疫组化方法主要包括免疫组织化学（IHC）、流式细胞术（FACS）、免疫组织化学原位杂交（ISH）等。
这些方法通过标记抗原或抗体的特异性染色方法，将其定位于组织或细胞内，用于研究疾病的发生机制和免疫反应的过程。
【三】总结免疫学检验作为现代医学诊断的重要手段之一，可以全面了解人体免疫系统的状态，为临床诊断和治疗提供有力的依据。
在进行免疫学检验时，我们需要熟悉各种常见的检验方法和指标，以及其在临床中的应用与意义。
同时，免疫组化方法也是研究免疫反应和细胞信号传导等方面的重要工具，对于理解疾病的发生机制和进行新药开发具有重要意义。
通过不断的学习和探索，我们可以更好地应用免疫学检验技术，提高临床诊断的准确性和治疗的效果。
免疫学检验教材
免疫学检验教材
免疫学检验是医学检验专业的一门重要课程，这里为你推荐两本免疫学检验教材。
《免疫学和免疫学检验》。
这本书融基础与实验技术为一体，第一版于1989年出版，受到医学检验界同道和医药院校的欢迎和好评，获国家教育
委员会优秀教材奖。
第二版于1997年出版，在第一版的基础上作了许多成功的修改和补充，反映了90年代以来免疫学和免疫学检验方面的主要进展。
该书由三部分组成，第一篇为免疫学基础，该篇在保留第一版基本章节的基础上，扩展了新内涵，引入了一些新的概念；在内容上删繁就简，突出新重点；在编排上突破传统习惯，大胆进行了重组尝试。
《免疫学检验》。
这本书是2010年人民卫生出版社出版的图书，作者是刘辉。
该书作者全部来自教学一线，其中有两位是医院检验科主任，对纳入教材的内容均进行了认真讨论和斟酌，使之符合高职高专的培养要求。
在语言叙述风格上注意简明扼要，尽可能多采用图表，使篇幅大幅度缩减，适合教学和学习。
同时还制作了配套光盘，内容包括各章可改写的PPT课件和部
分补充材料，可以作为该书教学和阅读的补充资料。
该书也可作为从事医学检验人员的专业参考书籍。
此外，《临床免疫学检验》、《免疫学实验技术》、《实用免疫学检验》等也是值得推荐的免疫学检验教材。
建议根据自身需求选择合适的教材。
01 免疫学检验概论
适应性免疫应答
由抗原激发后获得 有，产生记忆细胞 96h后启动 特异性抗原识别受体，胚系基因重 排编码，高度多样性 T细胞识别APC提呈的肽-MHC,B细胞 直接识别抗原表位,具有高度特异性 经克隆扩增和分化，成为效应细胞 后发挥免疫作用，有记忆性 较长
作用特点 持续时间
适应性免疫应答
T
T
效应淋巴细 胞
免 疫 的 类 型
来源：是人在出生以后才产生的。
特异性免疫 特点：只能对某一特定的病原体 （获得性免疫/适 或异物起防御作用，对其它的病 应性免疫） 原体无效。（专一性）
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1.固有免疫与适应免疫
• 一、概念
• 非特异性免疫（固有免疫）-----是指机体对异物的无
选择性地阻挡，排斥和清除
• 适应免疫(特异性免疫)-----免疫系统可以准确地识别对自
一、免疫的概念
1.免疫的传统概念：机体对再次感 染具有的抵抗力称为免疫。
2.免疫的现代概念：
免疫（immunity）是指机体免疫系统识 别“自身”与“异己”物质,并通过免疫 应答排除抗原性异物，以维持机体生理 平衡的功能。
第一章
免疫学基本内容及发展简史
人民卫生出版社
免疫观念的改变
传统观念
针对病原因子 （非己） 免疫防御 免疫反应、免疫耐受 免疫反应 免疫防御、免疫损害
现代观念
针对“一切”抗原物 质 （非己、自身）
尺度“双刃剑”
免疫的类型
非特异性免疫 （先天免疫 /固有免疫） 来源：人类在长期进化的过程 中逐渐建立起来的一种天然防 御功能。 特点：是先天遗传的，不针对 哪一种病原体，对多种病原体 都有防御作用。（非专一性）
(HuHuiQiong)
临床免疫学检验(名解及答题)
临床免疫学检验【名词解释】1、enzyme immunoassay（EIA）酶免疫分析技术，是以酶标记的抗体（抗原）作为主要试剂，将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。
2、colloidal gold immunoassay胶体金免疫技术，是以胶体金作为示踪标记物或显色剂，应用于抗原抗体反应的一种标记免疫测定技术。
3、immunoblot test（IBT）免疫印迹试验，是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的技术。
4、precipitation reaction沉淀反应，指可溶性抗原与相应抗体在适当的条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
5、agglutination reaction凝集反应，指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
6、immunogen免疫原，指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7、adjuvant （immunoadjuvant）佐剂（免疫佐剂），指预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质。
8、hapten半抗原，指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
如多糖、多肽、类脂和核酸等物质。
9、monoclonal antibody（McAb）单克隆抗体，设法将单个B细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体。
10、Polyclonal antibody（PcAb）多克隆抗体，亦称免疫血清，用抗原以不同途径免疫动物，从动物血清中获取抗体，该类含有抗体的血清称为抗血清。
由于免疫动物的抗原往往具有多种抗原表位，可激活体内多个B细胞克隆产生针对抗原多种表位的混合抗体，因而抗血清也称为多克隆抗体。
11、tumor antigen肿瘤抗原，指细胞癌变过程中新出现的或异常表达的抗原物质。
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1简述双抗体夹心法的原理。
DA连接于固相载体上的抗体和酶标抗体，与待检抗原上两个不同的抗原决定基结合，形成固相抗体一抗原一酶标抗体复合物。
由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待检抗原是过量的，因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。
测定复合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物质量，即可确定待检抗原含量。
2何谓金免疫测定技术?简述其技术类型及原理。
DA金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反应的一类免疫学测定技术，其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验。
1)斑点金免疫渗滤试验：在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中，依次滴加标本、免疫金及洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材料上，故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用，达到快速检测目的，阳性反应在膜上呈现红色斑点。
2)斑点金免疫层析试验：是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分析技术，滴加在膜一端的标本溶液受载体膜的毛细管作用向另一端移动，犹如层析一般，在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化，无关物则越过该区域而被分离，然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。
3简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。
单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。
4简述抗原抗体反应的原理。
答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合5简述抗原抗体反应的类型。
答：抗原抗体反应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗体反应等。
6什么是带现象?答：在抗原抗体反应等价带前后，由于抗体或抗原过量(形成前带或后带)，上清液中可测出游离的抗体或抗原，形成的沉淀物少，不出现可见反应，这种现象在做血清学试验时称为带现象。
7影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。
稳定条件：①电解质：常用O．85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液；②酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反应一般在pH为6～8时进行；③温度：一般以15，40℃为宜，最佳反应温度为37℃。
8试述免疫血清应如何进行纯化。
免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。
提纯IgG类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。
另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。
方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse4B上，通过亲和层析去除杂抗体。
9叙述杂交瘤技术的基本原理。
杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。
10简述间接血凝试验的基本原理。
间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验11何谓间接凝集反应？将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在条件下，出现特异性的凝集现象，称为间接凝集反应12间接凝集反应如何进行分类？各试验的原理是什么根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验；根据载体种类，分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验；根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验,间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。
将可溶性抗原与载体颗粒结合，再与标本中的抗体反应，通过抗体桥联，形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块，为阳性反应。
反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。
用特异性抗体致敏颗粒，与样品中的待检抗原反应，通过抗原桥联，形成肉眼可见的凝集为阳性。
临床上用于检测HbsAg、AFP 等。
间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体，用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。
将标本与抗体试剂相反应，然后加入致敏抗原，若出现凝集现象，说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象，则说明待检标本中含有相应抗原，凝集反应被抑制。
同理，用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂，检测标本中的抗体，称为反向间接凝集试验。
协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似，但所用载体为金黄色葡萄球菌，该菌细胞壁上的SPA 能与特异性抗体的IgG 的Fc 段结合（IgG3除外），抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍能与相应抗原特异性结合。
当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时，就成为抗体致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。
间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验，用已知的抗原或抗体致敏红细胞，然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反应，出现红细胞凝集者为阳性。
根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。
胶乳凝集试验是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。
13 HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么？答：1.淋巴细胞：不能生长，5到7天死亡；DNA的主要合成途径被A阻断2.骨髓瘤细胞：不能生长，5到7天死亡；HGPRT缺乏，DNA合成的旁路途经受阻3.骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成杂交瘤细胞，可长期生长繁殖。
利用淋巴细胞的HGRT将Ｈ合成为嘌呤碱并最终与Ｔ一起合成ＤＮＡ从淋巴细胞获得产生某种抗体的遗传信息，从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力14 简述免疫系统的三个生理功能。
答：免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御：是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。
该功能正常时，机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害，即抗感染免疫；异常情况下，反应过高会引起超敏反应，反应过低或缺失可发生免疫缺陷。
免疫自稳：是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。
该功能正常时，机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物，而对自身成分保持免疫耐受；该功能失调时，可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。
免疫监视：是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功能。
该功能失调时，有可能导致肿瘤发生，或因病毒不能清除而出现持续感染。
15 决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?(1)抗原稀释法：将可溶性抗原作一系列倍比稀释，然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清，37℃反应后，产生的沉淀量随抗原量变化而不同，以沉淀物最多的管为最适比例管。
(2)抗体稀释法：是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应，出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。
(3)棋盘格法：亦称方阵法。
抗原抗体同时稀释，可一次完成抗原和抗体的滴定，并找出抗原、抗体的最适比。
是前二法的结合16 简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。
(1)原理：待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。
(2)技术要点：将抗体和热融化琼脂(约50％)混合，倾注成平板。
待凝固后在琼脂板上打孔，孔中加入已稀释的抗原液，和不同浓度的抗原标准品，置37~12温箱，24～48h后观察孔周围沉淀环。
量取沉淀环直径，通过抗原标准品，计算待测抗原的浓度。
17 在双向免疫扩散试验中，如何判定结果?双向免疫扩散中，出现沉淀线，表明存在相应的抗原、抗体，不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。
沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体含量高；靠近抗体孔，提示抗原含量较多18 免疫电泳技术的优点是什么?免疫电泳有哪些用途?1)优点：免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术，既有抗原抗体反应的高度特异性，又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力，广泛应用于牛物医学领域。
(2)用途：①纯化抗原或抗体的成分分析，分析其纯度；②正常及异常体液中蛋白质成分的分析，如无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症、多发性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析，多发性骨髓瘤血清M蛋白的检测和鉴定；③免疫后不同抗体组分的动态变化研究19 对流免疫电泳时，抗体为什么流向负极?大部分蛋白质抗原在碱性溶液中带负电荷，电泳时从负极向正极泳动，而抗体IgG分子量大，暴露的极性基团较少，在缓冲液中解离的也少，向正极的泳动速度较慢，电泳时由电渗引向负极的液流速度超过了IgG向正极的泳动，带动抗体流向负极，使抗原和抗体定向对流并发生反应，出现肉眼可见的沉淀线。
20 简述火箭免疫电泳的原理和主要用途。
(1)原理：火箭免疫电泳是将单向免疫扩散和电泳相结合的技术。
抗原在电场作用下，在含有适量抗体的琼脂糖凝胶中向正极泳动，逐渐形成梯度浓度，在抗原抗体比例适当时形成沉淀，随着抗原量的减少，沉淀带越来越窄，形成火箭峰样沉淀，峰形高低与抗原量呈正相关。
用已知量标准抗原作对照，绘制标准曲线，根据检测样品沉淀峰的高度可算出待测抗原的含量。
(2)主要用途：①抗原蛋白定量，如IgA、IgG、IgM和sIgA检测；②C3、C4及其裂解产物检测；③AFP等检测。
21 免疫浊度测定的基本原理是什么?有哪些类型?(1)基本原理：免疫浊度测定是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。
当可溶性抗原与相应的抗体特异结合，在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时，可以形成不溶性的免疫复合物，使反应液出现浊度。
这种浊度可用肉眼或仪器测知，并可通过浊度推算出复合物的量，即抗原或抗体的量。
(2)类型：按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。
按测定速度可分为速率比浊法和终点比浊法。
22 散射免疫比浊法的基本原理是什么?沿水平轴照射的一定波长的光，在通过溶液时，光线可被其中的免疫复合物粒子颗粒折射，发生偏转，产生散射光。