【微生物检验】食品中细菌总数的测定PPT幻灯片

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(6)等琼脂凝固后,翻转平板,置(36±1)0C恒温箱 内培养(48±2)h取出,计算平板内菌落数目,乘以倍数, 即得每g(每mL)样品所含菌落总数。
3、菌落计算方法 (1)菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜
检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释 度的各平板平均菌落总数。 (2)菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择
注意英文表述
菌落总数aerobic bacterial count 大肠菌群coliform bacteria 沙门氏菌salmonella 致泻性埃希氏菌diarrheogenic escherichia coli 霉菌和酵母molds and yeasts 金黄色葡萄球菌staphyloc
选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定 标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数, 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应 以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状 菌落不到平板的一半,而其余的一半中菌落分布又很均匀, 即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链 状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链, 可视为一个菌落数;如果有不同来源的几条链,则应将每 条链作为一个菌落计。
n2 ——第二稀释度(高稀释倍数)平板个 数(含适宜范围菌落数)
讨论3
成片的菌落如何计数?
讨论4
对原始记录表的评价 设计原始记录表
菌落总数的测定
--平板菌落计数法 菌落总数记录报告
产品名称 生产日期
检验依据 培养基
接种 1
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 空白 备注 检验员:
(4)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计, 选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时, 即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内,每 个稀释度作两个平皿。
(5)稀释液移入平皿后,应及时将凉至460C营养琼脂培 养 基 ( 可 放 置 在 46±10C 水 浴 锅 内 保 温 ) 注 入 平 皿 15ml~20mL,混合均匀.同时将营养琼脂培养基倾入加有 1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
菌落总数的测定
--出现的实际工作问题
➢ 做菌落总数检测时,发现稀释倍数大的比稀释倍数小的平皿上生长 的菌落数还多,而且空白对照又没长菌,我找不出啥原因?
➢ 我做的菌落总数的测定,是把浓缩的复合芽孢杆菌进行10-8、10-9、 10-10稀释,在涂布法吸取0.1ml的3个浓度的时候,培养皿中长出 来的菌2个10-9长了一大片的菌连在一起,10-8也有一个这样,其 他的几乎不长,究竟怎么会事?
➢ 检测菌落总数时,有些菌落难以区别,有没有什么好的试剂,能增加菌 落的可见率?
➢ 我公司做的菌落总数和技术监督局所测的数目存在巨大差别. 是这样的:我公司跟客户采购一批的鸡粉,多次检测此批产品菌落 总数均在5000左右,超过我司的内控标准。但客户检测数目与我 司不符,于是我司把产品送到当地的技术监督局检测,所得结论是 菌落总数为:205个/克。所以我们老总怀疑我们的工作能力,但 问题是在其中一次操作中,我们同时化验两种不同品牌的鸡精,一 种不符合要求,一种可以。
2、检样处理 (1)以无菌操作将检样25g(或25ml)剪碎,放于含有 225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内 预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或 研磨制成1:10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以
8000r/min~100000r/min 的 速 度 处 理 1min , 做 成 1 : 10 的 均匀稀释液。
菌落形成单位colony form unit 微生物学检验 microbiological examination
讨论1
真菌菌落算不算菌落总数?(请学生比较 新老国标中关于菌落的定义的差异)
讨论2
新国标上菌落总数计算公式上n 分别代表 什么?
(n1 ——第一稀释度(低稀释倍数)平板 个数(含适宜范围菌落数)
生产车间 抽样日期
细菌总数
班来自百度文库 检验日期
营养琼脂培养基
A
B
平均数
结果报告数(个/g或ml)
日期:
复核:
日期:
记录表
按照以下原则进行编制: ⑴可以满足检验过程的复现; ⑵可以实现培养基和试剂的溯源及复现其制备过 程; ⑶一页原始记录基本包括该样品的多个常规检验 项目,也就是一份样品的所有微生物检验项目在 一张原始记录上体现。 为了符合实验室资质认定评审的要求,可能会有 点繁,而且基本上没有办法对原始记录作假,因 为记录上体现的内容环环相扣。
(2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐 注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释的试管内(注意吸 管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管混合均匀,制 成1:100的稀释液。 (3)另取1ml的灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增 稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml灭菌吸管。
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