植物病害标本采集、制作和鉴定

实训十、植物病害标本采集、制作和鉴定

一、目的要求

通过采集和制作标本，了解植物病害标本采集要求，学会标本的采集与记录，掌握植物病害标本的制作方法，进一步巩固病害知识，每人抽签完成1份病害标本。

二、材料和用具标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、枝剪、手锯、标本缸、酵酸铜、硫酸铜、95％乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馏水等。

三、内容与方法

（一）病害标本的采集

1 标本采集基本要求

采集完整的标本，最好是先摄影然后再压制或浸渍保存,拍照越清晰越好，要求拍正常植株和病害部位。每号标本，样本数量应至少采集2-3份。

2 取样部位

（1）标本上有子实体的应尽量在老叶上采集

因为它比较成熟，许多真菌有性阶段的子实体都在枯死的枝叶上出现，而无性阶段子实体大多在活体上可以找到。

（2）柔软多汁的子实体或果实材料，则应采集新发病的幼果。

（3）病毒病应尽量采集顶梢与新叶。

（4）线虫病害标本应采病变组织，为害根部的线虫病害标本除采集病根外还应采集根围土壤。

（5）表现蔫萎的植株要连根挖出，有时还要连同根际的土壤等一同采集。

（6）对于粗大的树枝和植株，则宜削取一片或割取一截。

（7）如果病害在叶、果实和枝干上都有表现时，尽量采集全面。

（8）寄生类应和寄主一起采集。病害症状很特殊病害，要连同植株的枝叶或花一起采集，以便鉴、定其寄主名称。

3 标本数据记录和标本编号

要求记录准确、简要、完整。完整的记录与标签同样十分重要，要有寄主名称、

采集日期与地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。

4 标本采集方法

（1）枝干类、根部病害标本的采集

取其得病部位，用锯、枝剪或高枝剪采取，切勿用手折断，影响标本的美观，对纤维长而强韧的枝干等，尤应注意。

（2）叶部病害标本的采集

大型叶植物，它们的叶子和花序均很大，采集标本时可采一部分或分段采集，以同株上幼小叶加上花果组成一份标本（同时标明叶实际大小）；或把叶、叶柄各自分段取其一部分；

对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集，并记录寄主的名称。

（3）肉质或多汁植物（花、果实）病害标本的采集

应将其纵切或横切，有时需将其内部的组织挖出，还要考虑是否将一半的材料浸泡在保

存液中保存。在野外干燥时，要在切开的茎表面洒大量食盐，用盐包裹的材料应置于夹有多

层报纸的标本夹中，24小时后要把浸有盐水的报纸移去，或者用开水将材料烫死，然后放

置在薄纸板－铝板的三明治层中烘干。

（二）病害标本的制作

从田间采回的标本，除一部分用作分离鉴定外，对于典型的病害症状最好是先摄影然后再压制或浸渍保存。压制或浸渍的标本尽可能保持其原有性状，微小的标本可以制成玻片，如双层玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。

（三）病害标本的保存

1干燥法适用于一般含水较少的茎、叶等病害标本的制作，最简单、最经济、应用最广。

将采集的标本夹在吸水纸中，同时放入写有采集地点、日期和寄主名称的标签，再用标本夹压紧后日晒或加温烘烤，使其干燥，干燥愈快愈能保持原有的色泽，标本质量亦愈高。夏季采的标本在温湿度高的情况下，容易发霉变色，换纸宜勤，通常在压制的最初三、四天每天换纸l－2次（视标本含水多少，及温湿度情况而定），以后每二、三天换一次，至完全干燥为止。在第一次换纸的同时，应将标本加以整理，因经初步干燥，标本变软易于铺展。烟草、蚕豆、梨、马铃薯的茎叶等很易发黑变色，都是很难保存颜色的标本，在制作过程中特别要注意快速干燥。需要保持绿色的干制标本，可先将标本在2－4％硫酸铜溶液中浸24小时，或经过醋酸铜溶液（配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法）处理后再压制。也可以在叶面抹一层液体石蜡后再压，可以保持鲜绿色2-3天。

2 浸渍法适用于多汁的病害标本，

如果实、块根或担子菌的子实体等，必须用浸渍法保存。浸渍液体种类很多，有纯属防腐性的，亦兼有保持标本原色的，现介绍数种常用及效果较好的方法。

（1）防腐浸渍法：此类浸渍法仅能防腐而没有保色作用，如萝卜、甘薯等，不要求保色的标本，洗净后直接浸于以下溶液中。

①5％福尔马林浸渍液。

②亚硫酸浸渍液：l000ml水中加5%-6%亚硫酸15ml（一般市售的亚硫酸含量为5—

6％）或用亚硫酸钠10.5g，浓硫酸8ml，水500ml配成混合液。

（2）保持绿色标本的浸渍液及浸泡法：

①醋酸铜保（绿）色浸渍法：往50％的醋酸中逐渐加入醋酸铜结晶溶解至饱和作为母

液（大约1000ml50％的醋酸中加入l5g醋酸铜即可达饱和），使用时兑水稀释1－4倍（稀释倍数视标本颜色而异，色深者稀释倍数可小些）。将此液加热煮沸，投入标本，开始时标本的绿色被漂去，再经数分钟后标本又恢复绿色，此时立即将标本取出，用清水洗净，保存于5％的福尔马林溶液中，此法称为热处理。冷处理的办法是将标本置于上述稀释液中浸3小时后标本退色，再经72小时后标本恢复绿色，此时将标本取出，取水冲净，保存于5％的福尔马林溶液中。此法保持色泽时间较长，其保色原理大致是铜离子与叶绿素中的镁离子发生置换作用。所以，溶液经多次处理标本后，铜离子会逐渐减少。如要继续使用，应补入适量的醋酸铜。此法保存标本往往略带蓝色，与植物标本原色稍有出入。

②硫酸铜保（绿）色浸渍法：用清水冲洗标本，直接浸泡在5％的硫酸铜溶液中1—7天，待标本略带褐色时取出用清水漂洗，去除标本表面多余的硫酸铜溶液，然后保存在亚硫酸浸渍液中。

③保存黄色和桔红色标本的浸渍液：保存杏、梨、柿、红辣椒等果实标本用亚硫酸浸

渍液，亚硫酸浸渍液有漂白作用，因此使用时要注意浓度，一般用1 ％即可（浸杏时浓度可再稀些），因浓度太小，防腐力不够，可加入适量酒精。为了防止果实崩裂，可加入少许甘