菌种及抗生素的保存方法

编号：SCHS-GL-2013-003版本：2013

审核人：胡宗秀审核日期：2013-1-1

批准人：王正武批准日期：2013-2-1

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菌种及抗生素的保存方法

1.目的：

规范四川宜宾横竖生物科技有限公司微生物检测实验室对菌种和抗生素保存，同时为技术人员提供可操作的技术标准。

2．范围：

适用于四川宜宾横竖生物科技有限公司猴场内所有涉及菌种和抗生素保存的工作人员。

3．标准菌株的来源和保存

3．1 标准菌株的来源

标准菌株是指具有典型的、稳定的生理生化特征，并被国际社会所认可的菌株。这些菌株可来源于专门的机构。本文件规定公司所采用的标

准菌株从中国卫生部药物制品鉴定所菌种保藏中心采购。

3．2 标准菌株的保存

3．2．1 一般保存方法

将细菌种于半固体培养基中，35℃培养18-24小时后封盖1cm厚的无菌石蜡油，置4℃保存。

适用于肠杆菌科等细菌的保存；对链球菌、脑膜炎奈瑟菌等苛养菌在血平板上或血清培养基中移种培养。由于细菌经多次移种，性状

可能发生变异，所以本文件规定本公司范围内使用的菌种传代次数不

超过15次。

3．2．2 常见细菌的保存方法及保存时间见表-1

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本公司使用的菌种保存的方法和保存时间，由质量监督小组监督执行。

表-1 常见细菌的一般保存方法及保存时间

菌种保存用培养基保存条件及时间

葡萄球菌

链球菌

肺炎链球菌

脑膜炎奈瑟菌

流感嗜血杆菌

百日咳鲍特菌

结核分支杆菌

白喉棒杆菌

大肠埃希菌

志贺菌属

沙门菌属

肺炎克雷白菌属

变形杆菌属

肠道杆菌科其他菌属铜绿假单胞菌

含Vi的沙门菌

肠致病性大肠埃希菌普通琼脂半固体培养基

血清半固体培养基

血清半固体培养基

血琼脂斜面

巧克力琼脂斜面培养基

血琼脂斜面培养

血清半固体培养基

巧克力或血琼脂斜面

鲍-金氏培养基

罗-琴氏培养基

吕氏血清培养基

普通琼脂斜面培养基

琼脂半固体培养基

鸡蛋斜面

加封石蜡油4℃保存3个月

加封石蜡油4℃保存3个月

半固体4℃保存14天

斜面4℃保存2-4天

37℃，斜面2-4个月

半固体7-10天

37℃，4-5天

4℃，14天

4℃，2月

4℃，14-30天

4℃

斜面：1个月，加封石蜡油3个月

半固体：2个月，加封石蜡油6个月

4℃，1-2个月，加封石蜡油6个月

3．2．3 冷冻干燥法：需要长期保存的菌种采用冷冻干燥法保存。需进行冻干保存的菌种报质量监督小组审批执行。

4、抗生素使用和保存

本公司使用的抗生素的标准品或参考品必须来自国家权威鉴定机构，如中国

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药品生物制品鉴定所，或来自生产厂商提供的标明效价的标准品或参考品。不能使用口服药、外用药的制成品做药敏试验。

许多种抗菌药物粉剂状态比配制成溶液稳定，但自生产日期起保存时间一般不超过一年。已配制成溶液的抗生素应尽快使用，保存条件及时间见表-2

表-2抗菌药物溶液的保存条件及时间

抗菌药物保存条件及时间

4℃-20℃

青霉素类（包括所有青霉素、半合成青霉素、头孢菌素）四环境素类氨基糖苷类（丁胺卡那霉素、庆大霉素、链霉素、妥布霉素）新生霉素、杆菌肽、万古霉素、氯林可霉素、红霉素、多粘菌素B

氯霉素、磺胺类、甲氧苄胺嘧啶7天

14天

长期保存

3个月

3个月

5．记录

操作完成后，认真、准确、完整的做好各项记录。