GBT22286-2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法

2.“瘦肉精”体内代谢
盐酸克伦特罗在动物体内主要发生氧化作用，也发生硫酸 化反应和葡萄糖醛酸络合反应(存在形式为结合态和游离 态)。其主要代谢场所是肝脏，最终大部分随尿液排出， 实验证明，盐酸克伦特罗在动物体内代谢周期长，易富集 和残留，耐热性较高，在100℃的沸水中很稳定。
3.检测方法及相应标准
克伦特罗
பைடு நூலகம்
沙丁胺醇
-NH- + H20
特布他林 莱克多巴胺
赛曼特罗
+
-
-NH2- + OH
水解作用
三、检测流程
✓ 检测流程： 酶解
提取
1.酶的最适pH 2.在酸性条件下溶于水， 易提取
水解作用 -NH- + H20
+
-
-NH2- + OH
净化
四、液相色谱-串联质谱条件
五、注意事项
✓ 1、每批检测样做样顺序为试剂空白、样品空白、空白样品加标曲线、样品。 ✓ 2、加标回收：取0.25 mL 10.0 ng/mL的四种兴奋剂混标到5g样品中，相当于
主要内容
背景介绍（特性及药理作用、危害、检测方法以及相应标准） GB/T22286-2008 检测原理及适用范围 检测流程（酶解、提取、净化） 仪器条件 注意事项
一、背景介绍
1.“瘦肉精”的危害
Β-受体激动剂是一类化学合成的苯乙醇胺类物质，早期主要 用于防治人、动物支气管哮喘和支气管痉挛，后来发现在饲料 中添加该类药物后具有营养再分配作用，可明显提高动物的瘦 肉率（提高10%），因此曾被作为促生长添加剂被广泛关注， 但是人们食用了该类药物残留的畜禽产品后会出现面色潮红、 头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等不良反应，严重的可危 及生命。因此欧盟、美国等都先后立法禁止在养殖业中使用该 类药物，我国政府也明令禁止其使用。
✓ 实验室还针对鳗鱼及烤鳗等动物源性食品进行了方法验证
检测原理
✓ 原理：试样中的残留物经酶解，用高氯酸调节pH值，沉淀蛋白后离心， 上清液用异丙醇-乙酸乙酯提取，再用阳离子交换柱净化，液相色谱串 联质谱法测定，内标法定量（沙丁胺醇-D3作为沙丁胺醇、特布他林和 莱克多巴胺的内标物，克伦特罗-D9作为其余β-受体激动剂的内标物质）
0.5μg /kg添加水平 ✓ 3、初测加标选用同等基质的任一样品，复测时做平行样，初测浓度较高的
样品复测时应先将样品稀释一定倍数后过固相萃取柱，保证最终浓度在曲 线范围之内，且最终对应内标浓度应与曲线保持一致 ✓ 4、检测结果无需校正回收率
Q&A
目前，针对β-兴奋剂有效检测方法主要集中在胶体金快速检测卡法、酶联免 疫法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱串联质谱法(LCMS/MS)、气相色谱-质谱法(GC-MS)
二、GB/T 22286-2008适用范围及原理
✓ 范围：本标准规定了动物源性食品中（适用于猪肝和猪肉）克伦特罗、 沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺、塞曼特罗、塞布特罗、溴布特罗、 苯氧丙酚胺、马布特罗、溴代克伦特罗残留量的检测方法，检出限均为 0.5μg/kg。