大鼠线栓(MCAO)模型+灌注取脑+TTC染色

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针刺结合丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

针刺结合丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用曾兆禄;韩继超;薛云;马玉奎【摘要】目的：研究针刺结合丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤有无保护作用。

方法采用大脑中动脉内栓线阻断法（ MCAO）制备大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型，缺血2 h后将线拔出实现再灌注，分别于再灌注后立刻静脉注射丹红注射液2 mL／kg，并针刺百会、足三里，每天1次，连续3 d，72 h后采用Zea-Longa的5级4分制评分方法进行神经功能评分，TTC染色法测定脑梗死面积，Western blot法检测缺血侧脑皮层中Bcl-2与Bax的蛋白表达。

结果与模型和单用丹红注射液组比较，针刺结合丹红注射液治疗后大鼠神经功能缺陷评分明显降低，脑梗死面积减少，Bcl-2的蛋白表达增多，Bax蛋白表达减少。

结论针刺结合丹红注射液比单用丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤具有更明显的保护作用。

%Objective To investigate the neuroprotective effect of acupuncture combined with a Chinese medicine, Danhong injection, on focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats.Methods Middle cerebral artery ( MCA ) occlusion was prepared by putting a nylon suture in the MCA.The MCA blood flow in the animals was restored at two hours after the MCA occlusion by withdrawing the suture to the external carotid artery (ECA).The acupoints“Baihui”(DU20) and “Zusanli”(ST36) were acupunctured and stimulated by twirling the acupuncture needle after reperfusion, and the rats were also administered with Danhong injectionby intravenous injection, once every day for three days.Zea-Longa scores were recorded to assess the changes of neurological function. The rats were sacrificed at 72 h after reperfusion. Triphenyltetrazolium chloride( TTC) staining was used to measure cerebral infarction size.Western blot was used to test the level of Bcl-2 and Bax in the ischemicpenumbra.Results The acupuncture combined with Danhong injection treatment group displayed markedly lower neurologic deficit scores, reduced ischemic infarct surface, increased expression of Bcl-2 protein, and reduced expression of Bax protein, compared with those inthe model group and Danhong injection alone group.Conclusions Acupuncture combined with Danhong injection show more significant neuroprotective effect than Danhong injection treatment alone on rat models of cerebral ischemia/reperfusion injury.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2016(026)002【总页数】5页(P62-66)【关键词】针刺;脑缺血再灌注损伤;Bcl-2;Bax【作者】曾兆禄;韩继超;薛云;马玉奎【作者单位】山东省临朐县人民医院，临朐，山东262600;济南市第一人民医院，济南，山东250011;山东省药学科学院，济南，山东250033;山东省药学科学院，济南，山东 250033【正文语种】中文【中图分类】R-33临床上对于缺血性脑血管病的首要治疗原则是尽早重建血液再灌，恢复脑部的血氧供应，使缺血脑组织重新获得营养物质供应并及时地将有害的代谢产物清除掉。

大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化

大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化王祎媛;方莹莹;周小龙【摘要】目的:在局灶缺血模型中,研究再灌注后0h、6h、24 h、48 h、72 h对大鼠梗死灶体积的影响.方法:将大鼠分为假手术组(sham组)和实验组,实验组在激光多普勒血流仪的监测下进行手术,术后有3分症状的入主,然后随机分为0h组、6h 组、24 h组、48 h组、72 h组.在不同的时间点处死大鼠,行TIC染色,然后计算梗死体积.结果:再灌注24 h之前,随着再灌注时间的延长梗死体积逐渐增大,0～24h,梗死体积变化有显著性差异；但再灌注24 h之后,梗死体积不再发生实质性的增加,24 ～ 72 h,梗死体积无显著性差异.结论:在研究局灶脑缺血梗死体积的实验中,24 h是一个非常重要的时间点.【期刊名称】《赣南医学院学报》【年(卷),期】2012(032)004【总页数】2页(P489-490)【关键词】局灶性脑缺血;梗死体积;时间点【作者】王祎媛;方莹莹;周小龙【作者单位】广东省妇幼保健医院药剂科;南方医科大学基础医学院神经生物教研室,广东广州510010;赣南医学院,江西赣州341000【正文语种】中文【中图分类】R743Abstract:Objective:To study the infarct volum of the brain at different time point(0 h，6 h，24 h，48 h，72 h)after the reperfusion of middle cerebral artery occlusion(MCAO).Methord:The rats were divided into sham group and experiment group，the rats in experiment group were induced MCAO at the monitor of laser Doppler flowmetry，then randomly divided into 0 h group，6 h group，24 h group，48 h group，72 h group at different time point，rats were killed and stained with TTC solution，the infarct volum.Result:Reperfusion before 24 h，the infarct volum is becoming bigger and bigger as the time elapse，but after 24 hours，the infarct volum will not change.Conclusion:In the study of focal cerebral ischemia and infarct volum experiments，the 24h is a very important time point. Key words:MCAO;infarct volum;time point中风以其高发病率、高死亡率、高致残率已经成为严重威胁人类生命与健康的主要疾病之一［1］。

脑卒中动物模型实验原理

脑卒中动物模型实验原理
1.1 缺血性脑卒中
2.1.2 线栓法
实验动物：MCAO大鼠、MCAO小鼠
模型特点：利用线栓闭塞大脑动脉血管，无需开颅，缺血时间和部位易控制，并发症少，是目前使用最广泛的脑卒中模型。

获取方法：可直接购买商品化模型
2.1.2 光化学法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：无需开颅，重复性较高，病灶部位可控，但缺乏缺血半暗带，无法模拟部分病例的生理变化，适用于慢性脑缺血研究。

获取方法：系统给与光敏剂后，利用高强度光源照射，以激活脑区的光敏剂，产生脑水肿和血小板微血栓，造成局部梗死。

2.1.3 开颅电凝法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：缺血效果稳定，出血量少，是目前公认的标准大脑中动脉闭塞模型，但开颅存在一定风险。

获取方法：右侧颞下入路进行开颅，采用双极电凝将大脑中动脉闭塞后切断。

1.2 出血性脑卒中
2.2.1 自体注入法
实验动物：ICH大鼠
模型特点：采集自体股动脉血注射至大鼠右侧基底节制作ICH模型，操作简便，出血部位稳定，与人类脑出血病理过程相似。

2.2.2 自发脑出血
实验动物：大鼠
模型特点：将高血压与出血性脑卒中有机结合，适用于高血压引起的脑出血病理生理机制研究。

获取方法：对SHR（自发性高血压）大鼠进行大脑中动脉结扎处
理
2.2.3 胶原酶注入法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：操作简便，重复性高，与临床脑出血病理生理相似性高，但实验影响因素较多，稳定性较差。

获取方法：将胶原酶通过微量注射器注射入动物尾壳核内。

TTC染色流程

TTC染色流程
TTC染色流程
【实验目的】：通过TTC 染色观察梗死病变及梗死体积。

【实验试剂】：2%红四氮唑溶液，PBS溶液，10%中性甲醛
【实验器械】：-20℃冰箱，脑切片机，取脑器械等
【实验流程】：
1.断头法取脑断头法处死动物后迅速取脑（10min内）,置于0-4℃PBS溶液中
转移，- 20℃冰箱冷冻30 min。

除去小脑、嗅球和低位脑干。

2.切取冠状位脑片,厚度为2 mm,将脑片放入2%红四氮唑溶液中37℃避光水浴
30 min，每5min轻微晃动容器，使充分染色。

3.取出脑片用PBS溶液洗涤3-5min，可马上拍照，用10% 中性甲醛固定脑片
6 h。

4.选择每一切片的尾侧面用病理图文分析系统进行图像分析,测量每片的梗死
面积和总面积,每层梗死体积为该层梗死面积和层厚的乘积,各层的梗死体积之和即为总的梗死体积。

线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO模型)的经验

线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型）的经验本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型），这方面的资料我查了一些，这个实验我也作了一段时间，不敢说很专业了，不过现在基本上我能在15min左右完成手术，而且手术过程中不出一滴血，造模后缺血程度基本一致。

虽然前面有很多前辈发了很多MCAO的很专业的贴子，不过我觉得比较凌乱，现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家，希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。

虽然做实验总会有郁闷的时候，不过风雨之后总会见到彩虹的，这可以也是我的心得体会。

衷心祝福大家能把实验做的成功、完美！实验前准备麻醉剂：水合氯醛（应较好的控制大鼠体温）保温：60W白炙灯高度为37cm直接照射能使肛温保持在 37℃栓线的制备：1.取熔点为56℃的固体石蜡一块，在瓷杯中加热熔化。

直径为0.24mm、长5cm的鱼线一端5mm长的一段，垂直在熔化的石蜡中迅速浸入并提起，立即凝固的一薄层石蜡可牢固地粘附在鱼线一端的表面，其直径为0.26mm。

就这样，普通的鱼线即可变成规相一致头端光滑圆钝的栓线。

2.在鱼线18mm的位置用涂改液标记一个白色点。

TTC的配制：用0.2mol/L磷酸缓冲液（PBS）配成2%TTC溶液（pH7.5），避光保存体重与栓线直径：线栓直径0.24mm采用的SD大鼠，体重250-300g。

实验方法：动物用10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。

仰卧位固定，颈正中线切口，沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜，分离左侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA），在CCA远心端和近心端与ECA处挂线备用。

用微动脉夹暂时夹闭ICA，然后近心端结扎CCA、ECA。

然后在距CCA分叉部4mm处剪一小口，将拴线插入到ICA，这时用绕在CCA远心端的细线轻轻系牢拴线。

（不可过紧，否则进线困难，但松了又会出血。

）用眼科镊轻推拴线，从血管分叉处开始算距离，当插入深度在18 mm时（一定要将血管放松至原来状态, 且保证标记点在分叉处,由于标记的是白色的所以很容易看的），紧紧系牢CCA远心端的细线，此时的关键是动作轻柔，不要使ICA有任何的牵拉，否则栓线会脱出ACA，可能会造成缺血失败。

尼莫地平对MCAO／R模型大鼠不同时间点血流灌注量的影响

尼莫地平对MCAO／R模型大鼠不同时间点血流灌注量的影响目的：利用激光散斑血流成像技术观察尼莫地平对大鼠大脑中动脉栓塞模型脑血流灌注量的影响。

方法：成年雄性SD大鼠，采用改良线栓法制备大脑中动脉梗塞/再灌注模型。

利用激光散斑血流成像技术观测造模前，缺血再灌注05、1、2、24h后脑血流灌注量情况，并对选定区域血流进行分析，再灌注24h TTC染色观察脑梗死体积。

结果：造模成功后大鼠右侧脑血流明显减少，灌胃给4mg/kg 尼莫地平后，大鼠局部脑血流渐渐增加，脑梗死面积减少，脑组织含水量减少。

结论：尼莫地平能显著增加MCAO/R模型大鼠血流量。

标签：尼莫地平；脑缺血再灌注损伤；激光散斑血流成像；脑血流量Effect of Nimodipine on MCAO/R Rats Different Time Point Blood PerfusionZHANG Zhixue1，3HUANG Xi1，3LI Yue1，2，3YANG Zhibin1，2，3XIAO Huai1，2，3WU Xiumei1，2，3ZHANG Chenggui1，2，3*1.Yunnan Provincial Key Laboratory of Entomological Biopharmaceutical R&D，Institute of Entomoceutics Research，Dali University，Dali 671000，China；2.Yunnan Provincial 2011 Collaborative Innovation Center for Entomoceutics，Dali University，Dali 671000，China；3.National-Local Joint Engineering Research Center of Entomoceutics，Dali 671000，ChinaAbstract：Objective To study the effect of nimodipine on cerebral blood flow in MCAO/R rats by laser speckle imaging （LSI）. Methods To establish the MCAO/R model in male SD rats by the modified intraluminal filament technique. Measuring the cerebral blood flow before modeling and after ischemia-reperfusion for 05 h，1 h，2 h，24 h by LSI，meanwhile analysing the selected area blood flow，and observing the infarct size after perfusion for 24 h with TTC. Results The cerebral blood flow was decreased in right hemisphere after the models established successfully，and after the intragastric administration of nimodipine with 4 mg/kg，the regional cerebral blood flow of rats gradually increased，the cerebral infarction area reduced，and the brain water content was decreases. Conslusions Nimodipine significantly improve the cerebral blood flow of MCAO/R rats.Keywords：Nimodipine；Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury；Laser Speckle Imaging；Cerebral Blood Flow缺血性腦卒中（Ischemic Stroke，IS）指脑的供血主动脉发生狭窄或阻塞，脑的血液供应出现障碍，导致氧和营养物质的缺乏，从而引起脑的功能异常，脑局部组织坏死[1]。

大鼠线栓(MCAO)模型+灌注取脑+TTC染色

第一部分线栓模型制作1、实验器材（从左到右）：第一行：干棉球、酒精棉球、10％水合氯醛＋注射器、碘伏＋棉签第二行：三种不同粗细的鱼线（鱼线最好在2.0、2.5mm处各用记号笔作好标记，便于观察进入距离）、弯盘内为手术器材第三行：记号笔、自制拉钩（皮筋+曲别针＋大头针）2、麻醉：可用饮料瓶自制捕鼠器（适用于不敢手抓大鼠的），用于打麻药，根据大鼠的重量选择不同粗细的饮料瓶（太粗了大鼠可在瓶中回头）。

效果图3、麻倒后绑在手术台上。

4、剪去颈前的鼠毛，碘伏消毒。

5、沿经部正中切开皮肤。

说明：切开皮肤前最好将结扎动脉的线事先剪好（后面会用到）。

6、钝性分离皮下组织。

如图：大鼠腹侧可见事先剪好的结扎线。

7、分离到气管前肌后，沿右侧胸锁乳突肌腱向下分离，见到颈动脉鞘后可上拉钩。

8、分离动脉鞘。

如图：分离好后见光滑的颈总动脉。

9、分离出颈总、颈外、颈内动脉，结扎颈总、颈外动脉，注意中间那根线不要系紧，用来插鱼线时防止出血的。

10、夹闭颈内动脉，用眼科剪将颈总动脉剪一小口。

11、插入鱼线，鱼线进入颈内动脉后按图中注释方法插（成功率在90%以上）。

说明：（1）这一步鱼线选择是关键，根据大鼠重量（作的多了后根据动脉粗细就可选择了）选鱼线。

我们的经验是：250g以下的选0.26mm的线，250-300g的选0.26mm蘸腊的或0.28的都可以。

（2）如果遇到鱼线怎么也查不进去的情况，可让大鼠休息一会，换细点的鱼线再试，这种情况不一定都是进到翼腭动脉了，我曾解剖过4例这种情况的大鼠，有三例都是在如颅的地方卡住了，可惜我们手里没有0.24mm的鱼线。

（3）通过实践，我们认为结扎或夹闭翼腭动脉没有必要，按我们的方法，熟练的话，从切开到缝合完毕也就是15分钟，算上准备工作（如麻醉、消毒等）半小时也可以搞定了，这样一上午两人作10只大鼠不成问题。

（4）我们体会最好用蘸腊的鱼线作模型，好处是进线深度控制的好，不容易出现蛛网膜下腔出血。

TTC染色流程

TTC染色流程
【实验目的】：通过TTC 染色观察梗死病变及梗死体积。

【实验试剂】：2％红四氮唑溶液，PBS溶液,10％中性甲醛
【实验器械】：-20℃冰箱，脑切片机，取脑器械等
【实验流程】：
1.断头法取脑断头法处死动物后迅速取脑(10min内），置于0—4℃PBS溶液
中转移，- 20℃冰箱冷冻30 min。

除去小脑、嗅球和低位脑干.
2.切取冠状位脑片,厚度为2 mm，将脑片放入2%红四氮唑溶液中37℃避光水浴
30 min,每5min轻微晃动容器，使充分染色。

3.取出脑片用PBS溶液洗涤3—5 min，可马上拍照,用10% 中性甲醛固定脑片
6 h.
4.选择每一切片的尾侧面用病理图文分析系统进行图像分析，测量每片的梗死
面积和总面积，每层梗死体积为该层梗死面积和层厚的乘积，各层的梗死体积之和即为总的梗死体积。

大鼠脑梗死ttc染色体积计算公式

大鼠脑梗死ttc染色体积计算公式
大鼠脑梗死TTC染色体积计算公式是一种常用于评估大鼠脑梗死区域体积的方法。

TTC（triphenyltetrazolium chloride）是一种常
用的染色剂，可以被还原酶还原为可见的红色产物。

通过染色，
大鼠脑梗死区域可以被可视化，并且可以通过计算其体积来评估
梗死的程度。

计算大鼠脑梗死TTC染色体积的公式如下：
梗死体积（mm³）= 染色区域面积（mm²） ×厚度（mm）
需要使用大鼠脑梗死模型来诱导脑梗死。

模型的建立通常采用
颈总动脉单侧结扎或血栓栓塞等方法，以阻断大脑供血。

在实验结束后，需要取出大鼠的脑组织，并将其切片。

接下来，将脑组织切片浸泡在含有2% TTC的磷酸缓冲液中，培养一段时间，使之染色。

染色完成后，可以使用彩色图像处理软件或显微镜等工具，将
染色的切片进行拍照或观察。

通过软件可以将染色区域的面积测
量出来。

然后，需要测量切片的厚度。

可以使用显微镜的刻度尺进行测量，或者通过切片图像的分辨率来计算。

将染色区域的面积与切片的厚度代入上述公式，即可计算出大
鼠脑梗死的体积。

需要注意的是，在进行计算之前，必须确保使用的染色方法和
计算公式与实验室的标准操作规程相符，并且对梗死区域的染色
和测量要进行仔细准确的操作，以获得可靠的结果。

总结来说，大鼠脑梗死TTC染色体积计算公式是通过测量染色区域面积和切片厚度来评估脑梗死区域体积的一种方法。

此方法
可以用于研究脑梗死的发生和发展，以及评估针对脑梗死的治疗
效果。

线栓法大鼠脑缺血再灌注模型的制备

线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型的方法研究马贤德1孙宏伟1 柴纪严1 赵金茹1（1 辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110032；）摘要①目的建立一种比较系统，操作简单，成功率高的大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注动物模型，达到只要读者根据本文所述的方法操作就能制作出MCAO再灌注模型的目的。

②方法成年健康雄性 SD大鼠40只，参照Longa法并适当改进建立MCAO模型20只，假手术组20只。

本文将详细叙述手术过程以及再灌注时间点的合理选择。

最后利用行为学测试、四氮唑(TTC)染色对模型成功与否进行判定。

③结论线栓法是一种操作简单的制备MCAO 再灌注动物模型的方法，并且此方法的再灌注效果较为明显。

关键词动物模型；脑缺血；再灌注；线栓法Establishment a model of rat ischemia-reperfusion injury with intraluminal sutureMa Xian-de1 Sun Hong-wei1 Chai Ji-yan1 Zhao Jin-ru1(1.Liaoning University of Chinese Traditional Medicine, Shenyang, 110032) Abstract: Objective To establish a model of rat ischemia-reperfusion injury, in terms of the model, the operation will be simple, and the achievement ratio will be high. Methods: 40 Male Sprague-Dawley ( SD ) rats were separated into two groups randomly: 20 were model of rat ischemia-reperfusion injury based on Longa method, and the other 20 were sham-operated group. The process of the operation and the selection of different time point following ischemic-reperfusion were discussed in the paper. What’s more , the model was appraised by behavioral test and Triphenyl Tetrazolium Choloride（TTC）Staining. Conclusion: The operation of intraluminal suture method is very simple for the establishment of model of rat ischemia-reperfusion, what’s more, the effect of reperfusion is very obvious.Key words: Animal Model, ischemia, reperfusion, intraluminal suture脑缺血再灌注动物模型是研究缺血性脑血管病的一条重要途径，因为脑缺血再灌注动物模型具有很好的重复性并能最大程度模拟人类缺血性卒中的发生。

脑缺血模型讲义0505

线栓法局灶性大鼠脑缺血-再灌模型的制备（The intraluminal thread model of middle cerebral artery occlusion （MCAO））【实验目的】掌握线栓法制备局灶性大鼠脑缺血-再灌注模型的方法。

了解影响模型成功的的某些因素。

【实验原理】建立脑缺血动物模型是开展脑缺血损伤和治疗研究的基础，模型制备的方法较多，线栓法、光敏法、四血管夹闭法等。

本实验采用颈内动脉线栓法（theintraluminal thread model of middle cerebral arteryocclusion，MCAO ）。

由于啮齿类动物脑血管的解剖结构与人类相似，大鼠也由二条颈内动脉（ICA ），二条椎动脉（VA ）提供血运，颅底也有willis 环的吻合。

栓线进入ICA，前行至前交通动脉，阻塞大脑中动脉起始部及对侧血供。

TTC显示CP与背外侧皮质为典型缺血改变。

此模型优点在于：无需开颅，操作简单，动物损伤小。

有明确行为学和病理指标，适于进行运动功能和形态学观察研究。

梗死灶确切，重复性好，利于进行各种相关性研究。

可在无需再次麻醉时拔出栓线进行再灌研究。

现已被广泛应用于制备局灶性脑缺血模型。

MCAO法的难度较大，模型成功率不高。

在模型制作过程中要严格控制动物体重，线栓制备和手术操作过程的标准化。

【实验动物】动物：体重250-300g, SD雄性大鼠8-10只。

【实验器材】75%酒精、4%水合氯醛（或戊巴比妥钠）、1%肝素、氯化三苯基四氮唑（triphe nylte razoliumchloride ,TTC ）、PBS、工业酒精；大鼠板、绑线（线绳）、尼龙鱼线（直径0.28mm）、粗剪刀、手术刀、止血钳、眼科剪、眼科弯镊、外科剪、外科镊，玻璃分针，医用干棉球或纱布块、5ml注射器、酒精灯、石蜡、烧杯、平皿、毛细滴管、剃须刀片、角针、弯盘、自制拉钩、乳胶手套、劳动手套及长皮手套。

线栓法大鼠MCAO模型制作的要点及经验总结

线栓法大鼠MCAO模型制作的要点及经验总结林军;李艳芳;李冲;蒙兰青【摘要】大鼠大脑中动脉闭塞模型接近于人体活体局灶脑缺血的动物模型而被广泛用于局灶性脑缺血的科学研究,线栓法具有不开颅、易操作、创伤小、重复性好、可准确控制缺血及再灌注时间等优点,是广大研究者制作大鼠局灶性脑缺血模型首选的方法,线栓法大鼠大脑中动脉闭塞模型是目前研究局灶性脑缺血的理想模型.但其成功率仍受很多要素的影响,如大鼠的选择、麻醉剂的选用、线栓的制备、术前准备、手术流程及术后护理等要素均可影响造模成功.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2018(024)017【总页数】6页(P3398-3402,3408)【关键词】大脑中动脉闭塞模型;线栓法;经验总结【作者】林军;李艳芳;李冲;蒙兰青【作者单位】右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000【正文语种】中文【中图分类】R743.32脑卒中是一种急性脑血管病，具有高发病率、高病残率及高病死率的特点，严重危害患者身心健康，同时给社会造成巨大的负担，临床上分为缺血性和出血性，其中缺血性脑血管病占80%[1]。

因此，建立一种理想的脑缺血动物模型对脑缺血的发病机制、治疗途径等研究具有重要意义。

大鼠因具有与人类相近似的脑血管解剖结构、功能等特点，常被用于复制脑缺血的实验动物模型[2]，由于大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)为缺血性脑血管病的易患部位，故MCA 闭塞(MCA occlusion,MCAO)模型被广泛用于大鼠局灶性脑缺血的研究[3-5]。

线栓法具有不开颅、损伤小、易操作、可重复、可准确控制缺血及再灌注时间等优点，是制作大鼠脑缺血模型首选的方法[5-6]。

线栓法MCAO模型是目前研究局灶性脑缺血的理想模型[7]。

影响线栓法MCAO模型成功率的要素很多，但制模各要素目前尚未能达到统一标准，现就线栓法造模的制作要素予以综述和探讨。

两种不同ttc染色方法对于大鼠心肌缺血再灌注损伤中国实验动物学报

(大鼠心肌缺血再灌注两种不同TTC染色方法的比较李粮辉1，陈文华1，郑宏2（1.福建医科大学附属协和医院麻醉科，福州，350001；2.南京军区福州总医院麻醉科，福州，350025）【摘要】目的：比较应用不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色方法对大鼠心肌缺血再灌注损伤后梗死面积的检测效果。

方法：将20只SD大鼠(雄性、8周龄，体重250～300g)按随机数字表法分为两组，每组10只，A组：传统TTC 染色法组，B组：改进后的TTC染色法组，分别进行大鼠心肌染色,随后计算心肌梗死面积及测定血清cTnI浓度水平。

结果：A组和B组均能较好地标记梗死心肌;A组和B组心肌梗死面积百分比无统计学差异（48.69±5.37 % VS 47.41±3.28%，P>0.05）；A组和B组血清cTnI浓度水平无统计学差异（4.51±0.88ng/ml VS 4.70±0.71ng/ml，P>0.05）；但B组心肌切片染色色泽对比度及心肌非梗死区与梗死区区分度均高于A组。

结论：改进后的心肌TTC 染色法采用在体染色，不仅操作简便，节省了实验时间和经费，而且提高了染色效果，能更准确地反映心肌缺血再灌注损伤的程度。

因此改进后的心肌TTC染色法是一种经济、简便、快捷、高效的染色方法。

【关键词】缺血再灌注;心肌梗死面积;2，3，5-氯化三苯基四氮唑;染色A Comparison of Two Different TTC Staining Methods for Ischemia- reperfusion Myocardium in RatsLI Liang-hui1，CHEN Wen-hua1， ZHENG Hong2(1. Department of Anesthesiology,Fujian medicine university affiliated xiehe hospital ,Fuzhou 350001, China;Department of Anesthesiology,Fuzhou general hospital of Nanjing military command,Fuzhou 350025,China)【Abstract】Objective To compare the different TTC staining methods of measuring myocardial infarct size after ischemia-reperfusion in rats. Methods 20 Rats were randomly divided into two groups including group A with traditional TTC dyeing method and group B with the modified TTC作者简介：李粮辉(1990-)，女，硕士，研究方向：心肌保护，E-mail:huixiaoyi68@163通讯陈文华，男，教授、研究生导师，E-mail:whc6202@163dyeing method for ischemia-reperfusion myocardium ,then infract size was caculated and the levels of their serum cTnI were determined. Results Both group A and group B detected the infarcted myocardium well;there were no significant difference in the myocardial infarct size between groupA and group B（48.69±5.37 % VS 47.41±3.28%，P>0.05）; there were no significant difference in the levels of serum cTnI between group A and group B（4.51±0.88ng/ml VS 4.70±0.71ng/ml，P>0.05）;but compare with A ,the colour contrast of dyed myocardial slice and the differentiation of infarction area and non-infarction area were much clearer in group B. Conclusions The modified TTC dyeing method using In vivo staining is a kind of economic, convenient, fast and efficient method with being easy to control ,saving experimental time and expense, improving the dyeing effects ,evaluating the size of myocardial ischemia/reperfusion injury more accurately.【Key words】 ischemia/reperfusion ； myocardial infarct size ；2,3,5 -triphenyltetrazolium chloride ；staining心肌缺血再灌注损伤是近十几年来医学界研究的热点之一,其重要的病理特征之一是出现心肌梗死区。

傣药龙血竭对脑缺血大鼠的脑保护作用

傣药龙血竭对脑缺血大鼠的脑保护作用张晓燕;蔡宇宇;王玉瑶;孙海珍【期刊名称】《粮油食品科技》【年(卷),期】2022(30)3【摘要】观察龙血竭对脑缺血大鼠的神经功能评分、脑水肿、脑梗死面积、细胞形态和氧化应激指标的影响,探讨其脑保护作用。

采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将大鼠随机分为六组,连续给药14天,记录大鼠神经功能缺损评分(m NSS);取脑组织做2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测定脑梗死体积;测定脑组织含水量(%);用大鼠血清进行超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P)、丙二醛(MDA)氧化应激指标检测。

结果与假手术组(Sham)相比,模型组的脑组织含水量、脑梗死面积、神经功能评分都高,氧化应激的指标SOD、GSH-Px、CAT活力显著性下降(P<0.05),MDA含量升高。

与模型(Model)组相比,给药组均能降低神经行为学评分,减少脑梗死体积,有显著性差异(P<0.05),且龙血竭高/中(DBH/M)组优于脑心通胶囊(NXT)组;给药组能降低脑组织含水量,升高SOD、GSH-Px、CAT活力,降低MDA含量,DBH组有显著性差异(P<0.05),NXT组无显著性差异(P>0.05)。

得出龙血竭能降低脑组织含水量,降低脑梗死面积,改善细胞形态,减少氧化应激反应和改善神经损伤而产生脑保护作用。

【总页数】8页(P148-155)【作者】张晓燕;蔡宇宇;王玉瑶;孙海珍【作者单位】黑龙江中医药大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.芪红脑苏汤对急性不完全性脑缺血模型大鼠的脑保护作用2.人参总皂甙对大鼠脑缺血时脑微血管及脑组织中一氧化氮合酶的影响及脑保护作用3.亚低温对脑缺血大鼠脑组织富含脯氨酸的 Akt底物40与磷酸化的富含脯氨酸的 Akt 底物40表达的影响及其脑保护作用的研究4.四种开窍药对急性不完全性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的脑保护作用5.通络清脑注射粉针对脑缺血-再灌注损伤大鼠的脑保护作用及神经元自噬相关蛋白表达的影响研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

TTC染色流程

TTC染色流程
【实验目的】：通过TTC 染色观察梗死病变及梗死体积。

除去小脑、嗅球和低位脑干.
2.切取冠状位脑片,厚度为2 mm，将脑片放入2%红四氮唑溶液中37℃避光水浴
30 min,每5min轻微晃动容器，使充分染色。