杀菌剂生物测定与农药穿透生物学
实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法
实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法一、实验目的掌握抑菌圈法测定杀菌剂的生物活性的方法及步骤。
二、实验原理本实验主要采用抑菌圈法来测定杀菌剂的生物活性。
抑菌圈法是利用杀菌剂在琼脂平板上产生的抑菌效果来对其生物活性进行测定的一种方法。
通常，将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，使其均匀地分布在琼脂上。
然后，将含有细菌培养物的琼脂平板放入恒温箱中进行培养。
在培养一段时间后，观察平板上是否出现了抑菌圈，并测量抑菌圈的直径来评估杀菌剂的生物活性。
三、实验仪器和材料1.显微镜2.恒温箱3.滴定管或移液管4.琼脂平板5.细菌培养物6.杀菌剂溶液四、实验步骤1.准备琼脂平板。
将琼脂平板置于恒温箱中，加热至溶化状态后取出，待其稍微冷却后均匀地倒入培养皿中。
2.滴加杀菌剂溶液。
将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，并用移液管在平板上转动，使杀菌剂均匀地分布在琼脂上。
3.检验杀菌剂效果。
取一定量的细菌培养物，将其在琼脂平板上均匀涂布。
4.培养细菌。
将含有细菌培养物的琼脂平板放入预先恒温箱中，设置合适的温度和培养时间。
5.观察抑菌圈。
在培养一段时间后，取出琼脂平板，用显微镜观察平板上是否出现了抑菌圈。
6.测量抑菌圈直径。
使用直尺或量角器等工具测量抑菌圈的直径，并记录结果。
五、实验注意事项1.操作时要注意无菌技术，以避免细菌污染。
2.滴加杀菌剂溶液时要均匀并轻柔，以保证杀菌剂能充分分散在琼脂平板上。
3.培养细菌时要控制好温度和培养时间，以确保细菌能够充分生长。
4.观察抑菌圈时要注意使用合适的放大倍数，以免错过细小的抑菌圈。
5.测量抑菌圈直径时要使用准确的测量工具，以获得准确的结果。
六、实验结果处理根据实验所得的抑菌圈直径数据，可以通过计算其平均值、标准差等统计指标来评估杀菌剂的生物活性。
较大的抑菌圈直径通常表示杀菌剂具有较强的抑菌效果，反之则表示其抑菌效果较弱。
可以将实验结果与已有的标准值进行比较，以判断杀菌剂的生物活性。
七、实验结果分析根据测得的抑菌圈直径结果，可以对杀菌剂的生物活性进行分析。
09第二章 第三节 杀菌剂的生物测定方法
水溶性药剂、乳油稀释液或稳定的悬浮液（胶悬剂的稀释液）可用此
法，而WP由于是悬浮性差，不宜采用。 优点：操作简单迅速，无需特殊设备
缺点：药剂和孢子始终充分接触，与病害防治的实际相差很大，测得
的毒力往往偏高。
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
二、杀菌剂温室植株测定方法
针刺法测定农药对番茄灰霉病防治效果的活体试验
二、杀菌剂温室植株测定方法
对照（3d）
40%多菌灵WP1500×（3d）
一种植物精油1000×
针刺法测定农药对番茄灰霉病防治效果的活体试验
二、杀菌剂温室植株测定方法
盆栽法测定农药对小麦白粉病的防治效果
二、杀菌剂温室植株测定方法
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法
3、孢子悬浮液的准备
菌种
无菌水，搅匀
菌种悬浮液
二层纱布过滤 除去菌丝体及破碎培养基
离心 无菌水洗
洗净的孢子
调至浓度5000个/mL（10×10倍，35个孢子）
Байду номын сангаас
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法
3、孢子悬浮液的准备
菌种应是标准菌种，供试菌种应符合以下条件： ①菌种纯粹，在一般培养基上易大量产生孢子； ②多代繁殖不易产生变异； ③孢子个体较大，易于在显微镜下观察萌发情况；
④在分类上有一定的代表性，而且是重要的植物病害病原菌。
2、生长速率法
农药生物测定(1)
1、标准目标昆虫：是指被普遍采用的，具有一定代表性和经济意义，以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。
2、毒力：是指药剂本身对不同生物发生直接作用的性质和程度。
3、药效：是在田间或接近田间的条件下所测定的药剂对生物的作用效果。
4、致死中量的置信限：即致死中量的可靠范围，亦即供试昆虫种群致死中量真值的波动范围。
5、内吸杀虫剂：凡是可以通过植物根茎叶以及种子等部位渗入植物内部组织，随着植物体液传导植株，不妨碍植物的生长发育，而对害虫具有很高毒效的化学物质，称为内吸杀虫剂。
6、内吸杀虫作用：昆虫由于受内吸杀虫剂的毒杀作用而致死亡的过程，称之为内吸杀虫作用。
7、杀菌剂室内生物测定：将杀菌物质作用于细菌、真菌或其它病原物（包括线虫）,根据其作用效果的大小来判断药剂毒力。
8、除草剂的生物测定：利用生物体（作物试材、杂草试材，主要指有害生物）对除草剂的反应，来测定除草剂的毒性及其效果的基本方法。
9、杀虫剂室内生物测定：在实验室条件下，以昆虫（包括螨类）对杀虫剂的反应来鉴别某一种农药或某一类化合物的生物活性测定的一种基本方法。
1、杀虫剂生物测定存在的问题（1）评判标准单一（2）人为地固定检查时间（3）无统一的标准试虫（4）一般用校正死亡率表示核心是没有系统评判生物测定结果的方法和标准。
2、影响杀虫剂毒力测定的主要因素分析（1）杀虫剂和溶剂杀虫剂：其理化性质是决定毒力的根本原因。
溶剂：对药剂本身的理化性质一般不产生影响，但不同溶剂会影响昆虫表皮。
（2）环境条件温度：影响到处理前---养虫；影响到处理过程中---挥发、吸收等；影响到处理后---昆虫的死亡率。
湿度：一般不影响杀虫剂的穿透性及作用速度，也不影响解毒过程，通常它只影响昆虫对杀虫剂的忍受力。
光照条件以及昆虫在药剂处理前后的食物供应，营养条件等也会影响到测定结果。
（3）供试昆虫：不同种类的昆虫敏感性不同；同种昆虫不同品系对杀虫剂的敏感性也不同；昆虫不同发育阶段对杀虫剂的敏感性也不同（卵期通常对杀虫剂的敏感性比较低，通常以为有杀虫卵作用的杀虫剂，有很多主要是杀了初孵幼虫）；昆虫的性别与生殖对杀虫剂的敏感性（一般雌性昆虫对杀虫剂的敏感性比雄性昆虫低，但对有机磷杀虫剂来讲，则雌性个体比雄性个体感受性低。
杀菌剂生物测定实验报告
多菌灵对小麦赤霉病病菌菌丝生长的毒力测定一、实验目的：掌握生长速率法的基本操作二、实验基本原理：琼脂平板培养法是在融化的培养基中加入一定浓度的杀菌剂，制成含梯度浓度药剂药剂的培养基平面，再在平面上接种病原菌。
以病原菌生长速率为指标评价药剂的毒力。
病原菌生长速率通常采用在一定时间内病原菌生长的菌落直径大小（即扣除接入病原菌菌落直径）表示，也可用菌落达到一定直径所需时间表示。
在测定中一定要同时设置不加药剂和只加药剂配置时的溶剂和助剂的空白对照，用于在计算毒力时溶剂和助剂对结果的影响。
该方法尤其适合在琼脂培养基上能够沿水平方向有一定生长速率且菌落接近于圆形的病原真菌或者在液体培养基中能够迅速培养的病原细菌。
三、实验步骤1，菌碟制备：以小麦赤霉病菌作供试菌株，取灭菌培养皿一套，分别加入已融化的马铃薯培养基17ml制成平板。
取已经活化的小麦赤霉病病原菌菌种一支，在培养皿中央分别接入赤霉病病原菌，置于25C恒温箱内倒赔84h后，用内径为5mm的打孔器沿菌落外周处打一周，制成菌碟。
2，含梯度浓度药剂平板的制备（1）药剂浓度处理设置处理药剂浓度为 0、0.125、0.25、0.5、1和2ppm，每处理3个重复。
（2）制备药剂母液用分析天平称取0.01g多菌灵原药，先加入到1ml 0.1mol/L盐酸水溶液中，再加9ml灭菌水，摇匀，制成1000ppm的母液（3）制备对照平板用量筒分别量取50ml培养基均匀家去到3个灭菌的培养皿中，制成对照平板（4）制备药剂浓度梯度在灭菌的三角瓶中用移液器先加入180ul母液，再用量筒1量取90ml培养基加入到三角瓶中，摇匀，用已灭菌的量筒2量取45ml 摇匀然后加入到无菌培养皿中，制成2ppm的含药平板，并标注。
以此重复上述过程，制成1ppm、0.5ppm、0.25ppm、0.125ppm的含药培养基平板。
3，接菌、培养和结果调查用接种针分别在含药培养基平板中央接入菌碟（气生菌丝朝上），每皿一个菌碟，在25度恒温箱内倒置培养72h，采用十字交叉法测量每皿菌落的直径。
农药生物测定名词解释+简答题
农药生物测定名词解释+简答题名词解释：1，生物测定：生物测定是通过生物活体产生的反应来评价一种物质或一种过程的本质、组成或效力的一种方法。
农药生物测定：度量农药对生物体群体、个体和活体组织、细胞产生效应大小的生物测定技术。
杀虫剂生物测定：度量杀虫剂对螨类及昆虫产生效应大小的生物测定方法引诱剂生物测定：通过诱聚昆虫数量的变化来反映引诱剂效力的生物测定方法杀菌剂生物测定：是将一种杀菌活性化合物作用于靶标生物或施药于植物或非靶标生物产生各种效应的测定技术除草剂生物测定：度量除草剂对杂草生物效应大小和对作物安全性的生物测定方法植物生长调节剂生物测定：利用某些敏感植物某些性状作为指标，对生理活性物质进行定性测量或定量测定的生物测定技术。
2，LD50：（致死中量）能使供试昆虫50%死亡的所用试剂剂量LC50：（致死中浓度）能使供试昆虫50%个体死亡所用的药剂浓度LT50：（致死中时）能使供试昆虫50%个体死亡所用的时间KT50：（击倒中时）能使供试昆虫50%个体中毒击倒所用的时间3，ED50：（有效中量）能使供试病原菌半数表现出某种药效所用的剂量EC50：（有效中浓度）能使供试菌体半数表现出某种药效所用的药剂浓度4，IC50：（抑制中浓度）能使某种杂草供试群体的生长发育和生理生化指标减少或抑制50%所需要的药剂浓度。
5，生物源农药：指直接利用生物活体或生物代谢过程中产生的具有生物活性的物质或从生物体提取的物质作为防治病虫草害的直接农药。
植物源农药：指利用植物杀菌、杀虫、杀草的某部位或提取的有效成分制成的农药。
6，触杀毒力测定：使杀虫剂经体壁进入虫体，到达作用部位而产生中毒致死反应，由此来衡量杀虫剂触杀毒力的生物测定。
胃毒毒力测定：通过试虫吞食带药食料，引起消化道中毒致死反应，由此来。
內吸毒力测定：使药剂经根茎叶或种子吸收传导后，通过供试昆虫吸食含毒汁液而引起中毒反应，由此来、、、、、、熏蒸毒力测定：使药剂从气门进入虫体，到达作用部位而引起昆虫中毒致死反应，由此来。
农药在植物体内的传导方式和农药传导生物学
农药在植物体内的传导方式和农药传导生物学一般来说，农药的使用是围绕植物进行的。
同样，农药生物的活性表达与其在植物体上的行为密不可分。
从“农药传导生物学”的角度来看，几乎所有的农药都会在植物体上表现出不同程度的吸收和传导作用，绝对的非传导作用的品种几乎不存在，只是它们因植物的种类、吸收部位、植物生长时期的不同而表现出较大的差异。
依据农药传导的形式将其大致区分为局部传导、向上传导和双向传导3种类型。
其中，局部传导主要是指药剂在同一叶片范围内的传导，包括从叶尖到叶柄和从叶的正面到背面或方向相反的传导，即所谓广义的传导。
向上和双向的传导是一种真正意义上（系统性）的传导，也可以称为狭义的传导。
需要强调指出的是所谓的双向传导的化合物通常情况下依然是以向上传导为主。
一般来说农药在植物体上的传导是一个涉及化合物、植物以及使用方法等多方面的综合性命题，传导的形式不仅影响其生物活性的表达，而且对其作用的范围及其使用技术产生十分重要的影响。
因此，正确地理解农药传导的本质及其影响因素，对于科学地理解农药的作用方式及其使用技术具有重要的现实意义。
基于此，笔者提出“农药传导生物学”的概念，以期完整地阐明农药传导与植物解剖学及其生理学的关系，强调化合物传导的相对性和可变性。
据此，“农药传导生物学”的概念可界定为“研究农药的传导方式与化合物的分子结构、被吸收部位、植物解剖学结构和营养输导与分布规律以及药剂使用技术等的关系的科学”。
1 农药的吸收与传导生物学1．1 植物叶片对药剂的吸收及其传导生物学植物叶片表面包着角质层，它是表皮细胞合成并沉积于细胞壁外的脂类物质。
角质层由无定形的角质基质组成。
其中还有联结的片层与纤丝，而纤丝则由分离的网状多糖组成。
不同种植物的角质层构造与厚度变化很大，而脂类则是其主要成分。
角质层中还有供极性物质通过的亲水小孔，主动吸收的外质连丝以及分布在叶表面的气孔。
农药通过角质层是一种扩散过程，然后从角质层解吸进入含水非原质体与细胞壁内。
杀菌剂的毒力测定方法
生长速率测定法注意事项：
1）带毒培养基的制作
应先加药液再加培养基（1：9）； 对一些受热易分解的药剂则要待培养基 冷却到50度左右时再加入。
2）接种病原菌
如果是菌丝接种，打孔制作菌饼时 取材要从种菌皿的外缘开始，避免使用 中心区的菌丝。
如果是孢子液接种，用接种针蘸取 孢子液后，在带药培养基上划一直线。
6 扩散法
原理：在已接种的培养基上加少量的 抗菌物质，使其接触培养基和病原菌，经 一定时间培养后，接触部分的周围由于抗 菌物质的扩散，而产生抑菌圈（或抑菌 带），其大小与药剂浓度有关系，以此来 比较杀菌剂的毒力大小。
此法主要用于抗生素的效价测定。
农用抗生素的效价
效价是衡量抗生素有效成份和质量好坏的 一个指标。
药剂抗菌力也即药剂毒力。
5 气体效力测定
原理：有些杀菌剂具有挥发性，且有杀 菌特性，在测定这类杀菌剂毒力时，可将麦 芽汁-琼脂培养基置于皿底内，冷凝后接种病 原菌孢子，然后盖上皿盖并倒过来使底成 “盖”，使盖成“底”，并将杀剂菌剂置于 “底”内，放到适于病菌孢子发芽生长的环 境中培养一定时间后观察。
如：嘧啶胺类化合物在室内，以 100ug/ml对灰霉病菌孢子没有抑制作用； 300ug/ml对菌丝生长也不能抑制； 1ug/ml的浓度在田间使用时，却能很好 的防治灰霉病。
药剂与病菌的作用关系
传统的：以其“毒力”抑制或杀死病菌。一 般是一致的。
病菌
药剂
环境
新类型的杀菌剂：
影响病菌的致病过程； 影响寄主的抗病性；
即在各处理组的调查孢子总数中增加调查 孢子数量，增加的数量根据对照组孢子萌发 率换算出来。
如：CK孢子萌发率达98%时，在调查处理 组时，拟定调查数量为100时，此时就要调查 102个，并对其不萌发孢子数减去2，然后计 算孢子萌发率。
杀菌剂生物测定与农药穿透生物学
ｇｚ ｉｅｓｙ， ｎ ｚ ｏ ｂ ｉ ３ ０ ５ Ｃ ｉａ ｔ Ｕｎｖｒｉ Ｊ ｇ ｈ ｕＨｕ ｅ ４ ４ ２ ， ｈｎ ） ｅ ｔ ｉ
Ａ ｂ ｔ ａ ｔ： ｓ ｄ ｏ ｈ ａ ｉ ｉｎ ｉ ｌｓｏｆｐ ｓｉｉ ｅ ｐ ｎ ｔａ ｉ ｎ ｂ ｏ ｏ ｙ ，ｈ ｕ ｇ ｃ ｄ ｃｉ ｎ ｃ ａ ａ ｔｒｓ ｓ ｒ ｃ Ｂａ ｅ ｎ ｔ ｅ ｂ ｓｃｐｒ ｃ ｐ ｅ ｅ ｔｃｄ ｅ ｅ ｒ ｔｏ ｉ ｌ ｇ ｔ ｅ ｆ ｎ ｉ ｉ ｅａ ｔ ｈ ｒ ｃ ｅ ｉ— ｏ ｔｃ ， ｃｉ ｎ ｍ ｏ ｅ， ｏ ｕ ｔ ｎ ｍ ｏ ｅ ａ ｄ ａ ｐ ｉ ａｉ ｎ ｅ ｖ ｒ ｍ ｅ ｔａ ｌ ａ ｔ ｏｇ ｎ ｉ ｔｕ ｉ ｎ ｂ ｈ ｖｉ ｒ ｉ ｓ ａ ｔｏ ｄ ｃ ｎｄ ｃｉ ｏ ｄ ｎ ｐ ｌｃ ｔｏ ｎ ｉｏｎ ｎ ｓ ｗｅ ｌ ｓｐａｈ ｅ ｎ ｒ ｓｏ ｅ ａ ｏ
杀 菌剂 生 物测定 方 法 与新化 合 物发 现 的密 切关
物 的发 现 ” 的断 言 毫 不 为过 。事６ ９ ０年 … 。上世 纪 ６ ０年 代初 日本 理 化研 究 所 采 用 “ 株 喷洒 法 ” 现 了多 氧 霉 植 发
方 法是 所 有 农 用 抗 生 素 适 合 的 生 测 方 法 。杀 菌
剂 的测 定方 法 在新产 品开发 中之 所 以受 到密 切关 注
是 因 为病原 菌 与寄 主 的关 系较其 他 有害 生物 更 为 紧 密 ， 菌剂 的作 用 方 式 更 为 复 杂 。病 原 菌 多 寄生 在 杀 寄 主体 内 ， 菌 剂施 用 时必 须 面 临穿 透 生 物 学 和 代 杀
谢 生物学 的双重 考 验 ， 有 可 能 到 达 病 原 部 位 发 生 才
１ 杀菌 剂 的作 用方 式 与农 药 穿透生 物 学 １ １ 农 药穿 透生 物 学 与 生 物 活 性 表 达 作 者 提 出 ．
杀菌剂生物测定技术
供试菌种 杀菌剂生测的应用 杀菌剂生测方法 杀线虫生测方法 杀菌剂盆栽试验 杀菌剂田间药效试验
杀菌剂室内生物测定的主要内容 是将杀菌物质作用于细菌、真菌或 其他病原微生物，根据其作用的大 小来判定药剂的毒力。或将杀菌物 质施于植物，对病害发生的有无或 轻重观察比较来判定药剂的效果。
在各管中加入供试菌悬浮液一滴，在该供 试菌最适温度下培养一定时间，取出观察 “终点”，一般以混浊度为准，即以某编号 试管以下不再发生明显混浊现象，这一试管 的浓度就是最低抑制浓度。
1
2
3
4
5
CK
固体培养基稀释法
用灭菌蒸馏水将供试药制按等比或 等差级数稀释一系列药液浓度。分别取 每 种 浓 度 的 药 液 Xml 分 放 50ml 灭 菌 三 角 瓶 ，加入 灭菌并 冷至 60 左右 的培 养基 Yml ， 立 即 摇 匀 倒 入 培 养 皿 内 凝 固 。 用 接种环沾取供试菌液进行划线培养，至 一定时间后观察抑制病菌生长的最高稀 释倍数即最低抑制浓度。
用十字交叉法测量抑菌圈的直径
孔碟法
用灭菌后的打孔器直接在凝固好的 含孢培养基上打成圆孔，将定量的药 液滴入圆孔中，恒温培后测量抑菌圏 的大小，进行杀菌剂毒力比较。
影响抑菌圈法测定结果的因素
主要有以下几个方面的
1 对供试菌的要求 在较粗放的比较 杀菌剂毒力的测定中，对菌种的要求不 必过严，只要在培养基中容易培养而且 抑菌圈清楚的均可采用。
抑菌圏法的优缺点
抑菌圏法的优点
精确度高 操作简单
抑菌圏法的缺点
溶解性 扩散性
抑菌圈法示意图
含有孢子 的培养基
不同浓度 的药液
根据施加药剂在洋菜培养基表 面的方式，抑菌圈法又分为管碟法 （牛津杯法）、滤纸片法、孔碟法。
实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法
实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法work Information Technology Company.2020YEAR实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法一、实验目的学习并掌握杀菌剂的离体活性测定方法——抑菌圈法。
二、实验原理抑菌圈法即水平扩散法基本原理是在已接种供试菌的琼脂培养基上施以少量抗菌性物质或杀菌剂，使之接触培养基和病菌，经定温培养一定时间后，因药剂的渗透扩散作用，施药部位周围因杀死了病菌而抑制了其在培养基上的生长，从而产生了抑菌圈。
在一定范围内，抑菌圈直径的平方或面积与药剂浓度的对数呈直线函数关系，从而可比较供试样品杀菌活性大小。
其最大优点是精确度高，操作简单，能较快得出结果。
但测定结果受药剂溶解性和扩散能力影响很大，具一定局限性。
根据药剂施加在琼脂培养基表面方式不同，又分为管碟法（牛津杯法）、滤纸片法、孔碟法、滴下法等，其中以管碟法和滤纸片法应用最广。
三、实验材料供试药剂：速克灵或扑海因。
供试病原菌：番茄灰霉病菌。
实验器材：无菌水、无菌接种针、灭菌三角瓶、玻璃珠、灭菌双层纱布、75%酒精棉球、消毒摄子、移液管、试剂瓶、吸耳球、超净工作台、胶头滴管、尺子。
四、实验方法采用管碟法。
将供试药剂加于放置在琼脂培养基表面的用不锈钢制成的小圆筒（又称为牛津杯，一般为外径8 mm，内径6 mm，高10 mm）内，定温培养一定时间后测量抑菌圈大小。
1．配制药液：用灭菌蒸馏水将供试药剂配成一系列梯度浓度，一般5-7个浓度。
灭菌蒸馏水为对照。
2．制备一定“浓度”的供试菌悬浮液：如真菌，则宜用孢子悬浮液。
在培养好的菌种上倒入10 mL灭菌水，用接种针轻轻刮动平面孢子悬浮，倾于灭菌三角瓶内（事先装数粒玻璃珠）摇动5 min，将孢子悬浮液用灭菌双层纱布过滤入另一灭菌三角瓶内。
用低倍（15×20倍）显微镜检查，调节孢子浓度，每视野80-100个孢子为宜；以上操作应在无菌条件下进行，动作要迅速准确。
实验二 杀菌剂生物活性测定-生长速率法
实验二杀菌剂生物活性测定-生长速率法一、实验原理将不同浓度的药液与融化的培养基混合，制成带毒培养基平面，在平面上接种病原菌，以病菌生长速度的快慢来判定药剂毒力的大小。
病菌生长速率可用两种方法表示：①一定时间内菌落直径的大小；②菌落达到一定直径所需的时间。
二、实验目的通过本试验要基本掌握杀菌剂室内（离体）活性的生物测定操作技术，掌握杀菌剂毒力回归曲线的制作及LC50的求解。
三、实验材料1．供试药剂：70%甲基托布津2．供试病原菌：苹果炭疽病菌3．马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基（PDA）配方：马铃薯200g；葡萄糖20g；琼脂粉10g（或琼脂条18g）；自来水1000 mL；pH自然偏酸（5-6）制作方法：选择质量较好的马铃薯，削皮，去芽眼，切成薄片，称取200g，加自来水1000mL，煮沸后改小火煮30min（直至马铃薯片呈半透明状），然后用4层沾湿纱布过滤，滤液用水补足至1000mL。
再加入琼脂10g，用玻棒搅拌使其溶解（可适当加热）后加入葡萄糖20g，搅匀，再补足水1000 mL，最后分装于试管（用于接斜面）或三角瓶（250mL三角瓶盛约150mL培养基），用无菌封口膜封好灭菌备用。
采用湿热灭菌法，121℃下保持30min。
4、实验器材：φ90cm的培养皿（72个），PDA培养基，1mL移液管（10个），酒精灯，10mL具塞刻度试管（10个），接种针（4个），超净工作台（2台）。
四、方法与步骤1．菌种准备实验室准备有菌源，在生测前一个星期请自行转接。
对菌种的要求：病原菌应容易培养，菌丝生长快速、整齐，产生孢子缓慢；菌丝最好在培养基平面上呈平伏放射状生长（有利于结果的测量）。
在φ90cm的培养皿中，倒入约10-15mL PDA。
从培养皿或者斜面培养基上取一块病菌，放在培养皿中间，于26℃下培养（3-7d）备用。
2．药液准备将供试药剂70%甲基托布津用无菌水分别稀释成800、400、200、100、50、25mg/L 六个浓度的药液。
杀菌剂生物测定
管碟法
E26细菌素粗提物抑菌活性测定 E26细菌素粗提物抑菌活性测定
2.滤纸片法
操作步骤是：与管碟法不同处在于将药液定 操作步骤是：与管碟法不同处在于将药液定 量地滴加在小滤纸片上(直径1 量地滴加在小滤纸片上(直径1一8mm) 。晾 干，放于带菌的培养基上,,测定抑菌圈直径。 干，放于带菌的培养基上,,测定抑菌圈直径。 特 点：精确度较高,用药量少,操作较简便, 点：精确度较高,用药量少,操作较简便, 应用面广
二、毒力测定方法（离体实验）
菌体生长率测定方法及步骤（续） 菌体生长率测定方法及步骤（续）
②打菌饼：用直径0.4-0.5厘米打孔器在培养好 打菌饼：用直径0.4-0.5厘米打孔器在培养好 的菌落外缘切下菌饼。 ③移植菌饼：用消毒接种针或镊子将切好的菌饼 反转移植到含药的培基上, 反转移植到含药的培基上,置于菌的适宜生长条 件下培养 ④测量 测量菌饼扩展的直径,与不混药对照菌盘 测量菌饼扩展的直径, 扩展的直径相比, 扩展的直径相比,求出药剂的抑制生长率。结果 表示方法有：一是一定时间内菌落直径的大小； 二是菌落达到一定直径所需时间。常用前者表示。
• 优点：易于控制、操作简便迅速、精确度
较高。 • 缺点：测定结果与生产实际距离较大，而 有些化合物必须在寄主植物体内活化后才 起杀菌作用
二、毒力测定方法（离体实验）
•孢子萌发法(spore germination methods) 孢子萌发法(spore
通过药剂与病菌孢子接触后, 通过药剂与病菌孢子接触后,根所抑制病菌 孢子萌发率来判定药剂效力。此法可用於筛 选杀菌剂、药剂毒力及作用方式的测定。
生 长 速 率 测 定 法
生 长 7
生 长 3
HX HX HX HX 2
实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法
实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法摘要：本实验主要研究了七杀菌剂的生物活性测定方法，抑菌圈法。
该方法通过在琼脂平板上播种细菌，再在平板上施加一定浓度的七杀菌剂，观察并测量周围的抑菌圈直径，从而评估七杀菌剂对细菌的抑制作用。
实验结果表明，抑菌圈直径与七杀菌剂浓度呈正相关关系，且抑菌圈直径越大，表示七杀菌剂的抑菌效果越好。
通过该方法可以快速、简便地评估七杀菌剂的生物活性，为进一步研究其抗菌机制和优化配方提供了参考。
关键词：七杀菌剂；抑菌圈法；生物活性；抑菌圈直径一、引言七杀菌剂是一类特殊作用机制的植物杀菌剂，具有广谱杀菌、低滴效、低残留、不发生抗性等优点，被广泛应用于农业防病生产中。
评估七杀菌剂的生物活性是研究抗病机理、筛选优良品种和优化配方的重要手段。
目前，常用的七杀菌剂生物活性测定方法包括最小抑菌浓度法、抑菌圈法和微量滴定法等。
本实验采用抑菌圈法对七杀菌剂的生物活性进行测定，该方法简单易行、时间短，能够客观直观地评估抗菌剂的抑菌效果，被广泛应用于杀菌剂的筛选和评估中。
二、材料与方法2.1实验材料-七杀菌剂：根据实验需要选择合适的七杀菌剂；-革兰氏染色培养基：包括琼脂和所需培养成分；-细菌：根据实验需要选择合适的细菌菌种；- 培养皿：直径90 mm的培养皿；-无菌棉花：消毒后用于吸水；-直尺：用于测量抑菌圈的直径。
2.2实验步骤步骤一：制备琼脂平板1)按照革兰氏染色培养基的配方将琼脂和所需培养成分溶解在适量的蒸馏水中；2)加热溶液，使其均匀溶解；3)微量加热，使溶液达到沸腾状态；4)关火，冷却至50-60°C左右；5)待溶液冷却至室温，但还能滴落时，加入适量的细菌菌液；6)快速均匀摇晃培养皿，使菌液均匀分布；7)等待琼脂凝固，形成琼脂平板。
步骤二：制备七杀菌剂根据使用七杀菌剂的需要，按照使用说明书中的配方调配适量的七杀菌剂浓度。
步骤三：进行抑菌实验1)在琼脂平板表面平均涂布一层细菌菌液；2)在涂布完成后，使用消毒的锥形杯钻按规定距离在琼脂平板上扎孔；3)将七杀菌剂溶液滴入孔内，注意控制滴入的量和浓度；4)将培养皿倾斜，使溶液均匀涂布在琼脂平板上；5)撤去孔内的溶液，用无菌棉花吸干孔内的溶液；6)将培养皿倒置放置于恰当的环境中进行培养；7)培养一定时间后，观察并测量抑菌圈的直径。
农药室内生物测定试验准则 杀菌剂8部分
农药室内生物测定试验准则杀菌剂8部分示例文章篇一：《农药室内生物测定试验准则之杀菌剂8部分》杀菌剂在农业生产中可是非常重要的角色呢，就像守护庄稼的小卫士。
今天咱们就来说说农药室内生物测定试验准则里关于杀菌剂的8部分。
我记得有一次去爷爷的田里，看到那些农作物有的叶子上长满了奇怪的斑点，爷爷就很发愁。
他说这可能是病菌在捣乱，如果有合适的杀菌剂就好了。
这就让我想到了科学家们做的这些室内生物测定试验，那可真是为了找到好的杀菌剂费尽心思啊。
在这第8部分里呢，首先是试验材料的准备。
这就像是做菜之前要准备食材一样重要。
对于杀菌剂的室内测定，要选好合适的病菌。
这病菌啊，不能随便乱选，得是那种经常危害农作物的病菌才行。
比如说小麦的锈病病菌，它可是让好多小麦都生病的罪魁祸首。
那怎么得到这些病菌呢？科学家们会从生病的农作物上小心地采集，就像寻宝一样仔细。
而且采集来的病菌还要好好保存，就像照顾小婴儿一样精心，要给它们合适的温度、湿度，不然它们就可能“罢工”，不好好配合试验了。
然后就是试验的植物啦。
这植物就像是舞台上的演员，没有它们，试验可没法进行。
要选择健康的植物，比如说要测试一种针对番茄的杀菌剂，那就要选那种叶子翠绿、茎干挺拔的小番茄苗。
这些小番茄苗要在合适的环境下生长，就像我们人要住在舒适的房子里一样。
不能太晒，也不能太阴暗，水分也要刚刚好，不然小番茄苗长得不好，试验结果就不准了。
接下来就是杀菌剂的配置了。
这就像是调一杯魔法药水。
杀菌剂要按照一定的比例和方法进行稀释。
我想啊，这就像我们冲果汁，果汁粉放多了太甜，放少了没味道。
杀菌剂如果浓度太高，可能会把植物也“毒死”，浓度太低呢，又杀不死病菌。
科学家们得小心翼翼地操作，用那些精确的仪器，就像厨师用天平称调料一样仔细。
在进行试验的时候，那可是很严谨的过程。
要把配置好的杀菌剂喷洒到植物上，就像给植物穿上一层防护衣。
不过这喷洒也有讲究呢，不能这里喷得多那里喷得少，得均匀地喷洒。
农药生物测定
▪ 优点：快速、试验当天即可得结果
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法 ▪ 1、萌发表面的处理 ▪ 萌发表面是孢子萌发的场所，必须符合以下条件： ▪ A.对孢子的萌发即无抑制作用又无促进作用； ▪ B.能使承受的液滴展布面积一致。
菌，以病菌的生长进度快慢来判定药剂毒力的大小。
▪ 病菌生长速度表示方法
▪ （1）药剂达到一定大小所需时间；
▪ （2）一定时间药剂直径的大小。
▪ 优点：操作比较简单；重现性好；病菌易于培养。
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定
（二）含毒介质培养法
▪ 2、生长速率法
▪ 步骤：
▪ 1、配制药液
▪ 2、制备带毒培养基
▪ 3、打制菌饼
▪ 4、移菌饼
▪ 5、培养（定时间或定半径）
▪ 6、结果检查
对照的菌落直径－处理的菌落直径
生长抑制率（%）＝
对照菌落直径
×100
2、生长速率法
2、生长速率法
2、生长速率法
2、生长速率法
2、生长速率法
2、生长速率法
2、生长速率法
一、杀菌剂皿内生物测定
（一）孢子萌发法 ▪ 4、高温、保湿培养
▪ 温度、湿度、pH、氧气
▪ 5、结果检查及表示
▪ 一定时间后检查孢子萌发率，一般在低倍镜下，随机检查200个孢子 ▪ 标准：孢子芽管大于孢子的短半径时，即算萌发，否则不算萌芽
农药生物测定实验指导书
②粘虫：选取健康的 3—4 日令的雌成螨，用小毛笔挑起雌成螨，将其背贴 在粘胶上，注意螨足、触须及口器不要被粘着，每张玻片粘成螨 20-30 头，分三 行排列，在玻片上的另一端写上农药种类及浓度等。
③饲虫：将上述贴有雌成螨的玻片，放在干净无毒的塑料盒（或培养皿）内， 并垫上湿滤纸保湿，盖上盖，置室温为 25℃条件下培养。
表 1 杀虫剂触杀毒力精密测定原始数据记录表
供试药 剂浓度
每微升药液含有药 剂
µg/mL
每头试虫接 试虫平 单位虫体重
受药量 µg/头 均
接受药量
克）
体重（g） (µg/g)
死亡率 %
校正死亡 率
（%）
对照
3
供试药 剂浓度
表 2 杀虫剂触杀毒力精密测定数据换算表
单位体重受药量或每头试虫受 药量
(微克/克体重或微克/头)
⑦检查：经 24 h 后，在双目解剖镜下检查死亡数及存活数。以小毛笔轻轻 触动螨足或口器，不动者即为死亡。
五、试验数据的处理 根据测试结果，如对照组有死亡，先求校正死亡率。查表转换为死亡率机率 值，将药剂的有效成分百分浓度转化为对数值，求出直线回归方程式 y=a+bx， 并从直线回归方程中求出 LC50 值。
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实验三 杀虫剂胃毒毒力精密测定——夹毒叶片法
目前常用的杀虫剂胃毒毒力测定试验方法是夹毒叶片法，在两张叶片中间均 匀地放入一定量的杀虫剂后饲喂目标昆虫，按吞食的叶片面积计算食药量。适用 于咀嚼式口器昆虫。 一、实验目的：
熟练掌握胃毒毒力精密测定技术——叶片夹毒法，学习计算致死中量的方 法。 二、实验材料
的点药液量应一致。先做对照（点滴丙酮）再从药剂浓度低浓度至高浓度依次点
滴，处理完毕后，给一定量新鲜饲料，置于 25-27 ℃恒温条件下培养。
杀菌剂生物测定
第一节 体壁的构造与功能
4.搅乱寄主和病菌间的生长关系，增强植物抗病性
提高寄主的抗病性
烯丙苯噻唑（probenazole）防治稻瘟病，又叫噻瘟唑
离体下对稻瘟病菌几乎无毒性，但是在水稻植株体内能够
启动防卫机制，诱导寄主细胞形成木质素化壁等物理屏障，阻 止病原菌进一步向邻近细胞蔓延；诱导寄主植物产生和积累
孢子萌发表面
普通的载玻片
普通的 载玻片 洗 液 10min 自来水冲 洗干净 蒸馏水 冲洗 防尘条件 下干燥
缺点：
供试菌的孢子悬浮液（或与药剂混合液）滴在
第一节 体壁的构造与功能
一、杀菌剂的毒杀作用方式
同一种药剂，由于使用浓度、处理时间的不同可能表
现出不同的毒杀作用方式。
生产上，为了保证对植物的安全和节约用药，一般多 利用杀菌剂的抑菌作用，因为这样（抑制病菌孢子萌 发或病菌生长）就能达到防病的目的。
但为了研究杀菌剂的作用机制，就必须区分清楚毒杀
本节重点
杀菌剂对病菌的毒杀作用方式 杀菌剂生物测定技术的基本类型
第二节 杀菌剂毒力、药效测定的基础操作及原理 一、试验器材的清洁及灭菌
常用的洗涤剂
试验器材的灭菌
二、植物病原菌的培养
培养基
菌种的培养与保存
一、试验器材的清洁及灭菌
（一）常用的洗涤剂
洗液
K2Cr2O7重铬酸钾（60g）+ 浓H2SO4（460mL）+水（300mL）
的作用。
杀菌剂毒力、药效测定方法尽管多种多样，但它的基本原 理离不开杀菌剂的毒力作用方式和使用方式。
一、杀菌剂的毒作用方式 二、杀菌剂的使用方式
三、杀菌剂生物测定技术的基本类型
杀菌剂和农药在生态系统中的生物监测研究
杀菌剂和农药在生态系统中的生物监测研究在现代化的农业生产中，杀菌剂和农药的使用越来越广泛。
但是，随着对环境保护的日益关注，人们开始越来越担忧这些化学品对生态系统的影响。
因此，生物监测研究应运而生，以保护自然资源和生物多样性。
生物监测是一种分析和评估环境变化的技术，可以检测环境中的生物指标，并评估环境的健康状况和生态健康。
在农业生产中，常用的生物指标包括土壤微生物、水生生物、鸟类和昆虫等。
通过监测这些生物群落的群体数目、生长情况和活动性等指标，可以诊断农药和杀菌剂对生态系统的影响。
下面，我们将以土壤微生物和水生生物为例，阐述杀菌剂和农药在生态系统中的生物监测研究。
一、土壤微生物的生物监测研究土壤微生物是农业生产中不可或缺的组成部分，可以促进作物的生长和植物营养素吸收。
然而，杀菌剂和农药的使用却可能对土壤微生物造成负面影响。
因此，研究土壤微生物的生物监测变得至关重要。
在种植玉米和小麦等作物的区域研究中，科学家发现，杀菌剂的使用有可能导致土壤微生物的种类和数量降低。
例如，在一项研究中，研究人员发现喹啉酮类杀菌剂可以抑制某些细菌的生长，造成土壤微生物的减少。
这些微生物的减少可以导致土壤有机质的降解，从而影响作物的营养素吸收，导致产量减少。
除此之外，研究人员还发现，滴灌技术可以减少杀菌剂的使用，并在一定程度上减缓土壤微生物的损伤。
通过与传统喷洒比较，滴灌技术可以减少药物的泄漏和浪费，并且在土壤表面形成更加均匀和稳定的药物沉积，使得土壤微生物不易受到杀菌剂和农药的侵害。
二、水生生物的生物监测研究水生生物是水环境监测的重要指标，也可以用来评估水污染程度。
水中存在许多原生动物、藻类和鱼类等生物，可以被杀菌剂和农药污染物所侵害。
因此，研究水生生物的生物监测对于预测和控制水污染非常重要。
在华北平原的生态环境监测研究中，科学家发现，农药和杀菌剂的使用可以导致水生生物的寿命缩短和繁殖能力下降，特别是对某些较大、较复杂的鱼类。
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rum Sch lech.t f. sp. elae id is T oovey) 的离体测定中有 很多杀菌剂具有优秀的生物活性, 但在田间条件下 的生物活性都不高。所以杀菌剂的生物活性并不是 唯一由其自身的杀菌活性来决定的, 多数情况下要 取决于药剂能否向植物感病的部位传导和积累 [ 17] 。 植物的根部病害多由低等病原所致, 该类病原菌一 般具有 嗜水性 而生活在湿度较大的环境或寄主 组织中 [ 18] , 药剂处理土壤后一方面很容易受到土壤 中的生物或非生物因子的影响而难于在植物根部感 病期间形成有效的保护, 杀菌剂本身的疏水性也影 响到化合物与病原菌的有效接触 ( 这可能是作用于 低等病原菌的内吸性杀菌剂如甲霜灵、乙磷铝、霜霉 威等一般具有较低的脂水分配系 数的原因 ) , 而通 过茎叶处理后向根部进行有效输导的杀菌剂的品种 还很有限, 且仅有的杀菌剂也不能通过向下的传导 方式防治根部病害。萝卜根肿病发生后很难通过杀 菌剂的使用达到防治的目的, 其中最主要的原因就 是所有有效的化合物均无法输导到病原菌侵染的部 位发挥杀菌作用。
中国森林病虫 2011年 5月 第 30卷 第 3期
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剂如烯酰吗啉、氟吗啉、霜霉威、霜脲氰及氟啶酰菌 胺等 [ 20- 21] , 其防病作用仍然有赖于药剂在寄主体内 的输导, 针对此类杀菌剂的生物测定方法亦要考虑 其在寄主体内的穿透行为尤其是传导方向对其生物 活性的影响。
2. 2 杀菌剂的作用方式与生物测定 杀菌剂的作 用方式也是决定其生测方法的重要因素之一。杀菌
2 杀菌剂穿透生物学与生物测定方法
2. 1 病原菌的侵染行为与生物测定 植物病原菌 的侵染行为包括病原菌侵染器官的产生、侵染寄主 的部位及其途径、侵染寄主的生育时期、病原菌侵染 机制等, 其中侵染部位、侵染时期及侵染机制与杀菌 剂穿透生物学的关系最为紧密, 因而正确的生测方 法必须符合药剂穿透生物学的基本原理。首先病原 菌的侵染部位是决定一个化合物是否需要良好的传 导性的重要前提。对于大多数的内部寄生性病害而 言, 一个优秀的治疗性杀菌剂同时必须是一个优秀 的内吸性杀菌剂, 其生物测定方法尤其是新品种的 筛选必须以活体测定为基准。其次有些病原菌具有 比较特殊的侵入途径, 阻断其侵入途径是防止病害 发生的关键。比如苹果霉心病原, 病菌必须在开花 期经花柱侵入, 通过萼筒陆续进入心室, 病菌一旦进 入, 药剂即失去作用靶标 [ 19] , 因此阻止病原菌进入 的作用较杀灭病原菌本身意义更加重要。在设计此 类病原菌的杀菌剂筛选方 案时不仅要强调 活体测 定, 而且必须以阻止病原从花萼进入为目标。某些 杀菌剂并不直接作用于病原菌本身的代谢过程, 而 是通过中和病原菌分泌的毒素来抵消病原菌对植物 带来的毒害。这类杀菌剂的生物测定宜以寄主经过 处理后的最终生长表现来判定杀菌剂的活性, 比如 阿魏酸对枯萎病的防治作用即表现为对镰刀菌酸的 中和效应。即使专门作用于病原菌侵染器官的杀菌
1 杀菌剂的作用方式与农药穿透生物学
1. 1 农药穿透生物学与生物活性表达 作者提出 农药穿透生物学 的概念旨在强调农药在田间使 用后如何进入生物体内, 其穿透途径和速率如何受 到靶标生物学及环境条件的影响。在此基础上弄清 楚穿透生物学对室内生物测定结果准确性的指导意 义。所谓 农药穿透生物学 是关 于农药在田间状 态下的穿透途径及其速率与药剂的物理状态、作用 方式、靶标生物行为学及其环境条件之间关系的科 学。任何一种农药要对有害生物产生效应, 首要的
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Forest P est and D isease M ay 2011 No. 3
条件是要和靶标生物接触, 进而进入生物体内到达 作用部位。而影响农药进入生物体内的途径及其速
率的关键因素是靶标的生物学和药剂的作用方式。 病原菌多寄生在植物体内, 较其他有害生物而言, 药 剂的生物活性更有赖于药剂遵循穿透生物学的原理 进入到寄主体内, 通过药剂、寄主和病原菌之间的相 互作用而达到防治病害的目的。这是杀菌剂区别于
穿透生物学与杀菌剂活性评价方法的关系对于正确 地阐明杀菌剂的作用原理, 指导杀菌剂的活性筛选 和抗性监测具有重要的理论和实践意义。
1. 2 保护性杀菌剂的穿透生物学 按防病原理可 以将杀菌剂分为保护剂和治疗剂。对于前者而言一 般只需要杀菌剂在植物罹病前用药阻止病原菌的侵
染或者调动寄主的抗病性即可。传统的保护剂直接 作用于病原菌的呼吸系统, 因此离体测定法的结果 与其田间生物活性一般具有较好的相关性; 但杀菌 剂在植物体表面的持留特性及其渗透作用对于其活 性的表达仍然重要。而对于内吸性的保护剂而言则
影响, 这是离体测定结果与生产实践常常表现不一 致的主要原因。抑菌作用的杀菌剂的作用方式相对 比较复杂。当他们作为治疗剂使用时需要经过寄主
植物的吸收和传导到达病原菌的部位, 其生物活性 的大小取决于其吸收和传导的特性, 如传导方向与 病原侵染部位的一致性、药剂在侵染部位的积累性
及其代谢性质等; 而具有活化代谢的杀菌剂只有在 寄主体内才显示或增加生物活性, 因此这类杀菌剂 的生物测定离不开寄主的参与。甲基托布津在离体
体条件下对水稻纹枯病菌基本没有生物活性, 但在 活体条件下对纹枯病有很好的防治效果 [ 6] 。二、有
些杀菌剂需要在特殊条件下激活对病原菌的生物活 性, 如 霉灵经过土壤中的金属离子结合后可提高 抑制病菌孢子的萌发 能力 [ 7] 。由此 可见对杀菌剂
而言 一个新的生测方法的诞生就等于一个新化合
物的发现 的断言毫不为过 [ 8] 。事实上在设计杀菌 剂的生物测定方法时, 优先考虑其穿透生物学对生 物活性的影响就可能使生物测定尤其是室内测定的 方法能 够 准确 阐明 杀 菌剂 的 生物 活 性 及其 作 用 原理。
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杀菌剂生物测定与农药穿透生物学
杨健, 王真, 姚安庆*
( 长江大学农学院, 湖北 荆州 434025)
摘要: 基于农药穿透生物学的基本原理, 通过对病原菌入侵行为, 杀菌剂的作用特点、作用方式、传 导方式以及杀菌剂应用环境的分析, 指出杀菌剂的生测离不开靶标寄主的参与, 生物测定方法应尽 可能真实地反映药剂在应用实践中的行为学特点, 以准确地表达化合物的生物活性或抗药性变化 程度。 关键词: 杀菌剂; 生物测定; 农药穿透生物学 中图分类号: S767 文献标志码: A 文章编号: 1671- 0886( 2011) 03- 0029- 04
无论使用何种作用方式都必须具有到达病原菌寄生 部位的传导途径并在其位点积累到 有效浓度的特
征。到目前为止植物病害中的根部和维管束病害通 过化学药剂防治还很难达到理想的效果, 一个很重 要的原因就是药剂很难通过常规的用药方式进行传
导或在这两个部位积累到对病原菌的有效剂量而发 挥杀菌作用。比如棕树枯萎病菌 Fusa rium oxyspo
收稿日期: 2010- 08 - 03 基金项目: 农业部公益性行业计划 ( 200903033 ) 作者简介: 杨健 ( 1987 - ) , 男, 湖北荆 州人, 硕士, 主要从 事有害生物
防治研究。 * 通信作 者, 教授, 主 要从 事农 药学 教学 与科 研, E m ai:l yao990@
杀菌剂生物测定方法与新化合物发现的密切关 系最早受到关注是在 1960年 [ 1] 。上世纪 60年代初 日本理化研究所采用 植株喷洒法 发现了多氧霉 素防治水稻纹枯病的 生物活性 [ 2 ] 。后来发现这一 方法是所有农用抗生 素适合的生测方 法 [ 3] 。杀菌
剂的测定方法在新产品开发中之所以受到密切关注 是因为病原菌与寄主的关系较其他有害生物更为紧
密, 杀菌剂的作用方式更为复杂。病原菌多寄生在 寄主体内, 杀菌剂施用时必须面临穿透生物学和代 谢生物学的双重考验, 才有可能到达病原部位发生 作用, 此外较多的杀菌剂对病原并没有直接的致死 效应, 而是通过干扰病原菌的致病过程或改变寄主 植物的代谢而达到防 病的目的 [ 4 ] 。杀菌剂的这些
特点导致: 一、离体测定在很多情况下无法表达化合 物的防病原理的全部 信息 [ 5] 。例如 井冈霉素在离
其他农药的一个很重要的特点, 也是导致杀菌剂的 生物测 定要更 多地依 赖活 体测 定的 根本 原因 [ 9 ] 。 某些情况下杀菌剂是否能够进入植物体内, 然后在 病原部位持留甚至决定了该化合物对病原物的生物 活性是否具有实践意义 [ 10] , 此外在杀菌剂的移动过 程中, 吸附、生物化学固定或转化都可能影响到其生 物活性的变化。遗憾的是大多数研究者并没有真正 注意到这个问题的重要性 [ 11- 13] 。因此研究农药的
剂的作用方式大体可以区分为杀菌作用、抑菌作用 和抗致病作用三类。一般来说具有杀菌作用的药剂 可以采用离体测定的方法或者结合活体测定的方法
进行, 因为大多数此类杀菌剂并不能进入植物体内, 多半是作为保护剂使用。它们多具有强烈的影响病 原菌呼吸作用的生物活性, 从这个意义上来说它们 对病原菌的作用是一种直接的杀菌过程。当然它们 在植物表面的持留仍然受到药剂穿透生物学特性的
Fungicide bioassay and pestic ide pene tration b iology /YANG Jian, et a.l ( A gricu lture Schoo ,l Y an g tze U niversity, Jingzhou H ubei 434025, Ch ina) Abstract: B ased on the basic pr inciples o f pest icide penetra tion bio logy, the fung ic ide action characteris t ics, action m ode, conduction m o de and app lication env ironm ent as w e ll a s patho gen intrusion behav io r w ere ana lyzed, It w as em phasized that fung ic ide b io assay co uldn t be m ade w itho ut target p lan.t B io as say m ethod should tru ly ref lect fung ic ide behav io ra l characterist ics in production practice to accurate ly express bionom ic act iv ity o r resistance deg ree o f fung icides. K ey w ord s: fung ic ide; b io assay; pe sticide penetration bio logy