孕产妇梅毒检测,技术要点

者）
或极早期梅毒 阴性 阴性 排除梅毒感染
或极早期梅毒
25
梅毒血清学试验基本实验室设备
检方法
RPR/TRUST
检测样本类型 血清
√
血浆
√
全血
必要设备
水平旋转仪
TPPA
ELISA POC检测
√
√ √
√
√ √ √
震荡仪
酶标仪、洗板机 无需特殊设备
26
梅毒实验室检测策略解读
？RPR：初筛试验
排除试验假阳性 确证梅毒螺旋体现症感染
非梅毒螺旋体抗原血清学原理

方法包括： （1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)
（2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）
（3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。

基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉 眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似


梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）
化学发光免疫分析法（CLIA）
梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT)
荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA

TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒人血清中的抗梅
毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应，具有较高
的敏感性和特异性。

非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
1、仪器：水平旋转仪，转速？转幅？
2、定性试验

ຫໍສະໝຸດ Baidu
加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，
并均匀地涂布在整个圈内

加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果 ？滴/mL，1滴=？ul

TPPA：确证试验
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
排除治愈的既往感染者 确证梅毒螺旋体现症感染

梅毒螺旋体抗原血清学试验
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非梅毒螺旋体抗原血清试验 （如 RPR）
阳性
阴性 报告： RPR 阴性
RPR 定量 试验
梅毒螺旋体抗 原血清试验 （如 TPPA）
阳性 报告： RPR 阳性及滴度 TPPA 阳性

梅毒血清学检测方法
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验
（非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）两类方法。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理

梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主可对螺旋体表面
的脂质作出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体
（非特异性抗体）。

未经治疗的病人，其血清内的非特异性抗体可长 期存在。经正规治疗后，非特异性抗体可以逐渐 减少滴度至转为阴性。


发现梅毒孕妇
先天梅毒的诊断 梅毒疗效判断：梅毒孕妇及先天梅毒
3
孕产妇梅毒检测技术要点相关问题

一旦感染梅毒，梅毒螺旋体特异性抗体常终身阳性？
RPR/TRUST只能用于梅毒初筛？
二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验100％阳性？ .TPPA（- ）/ RPR（+）结果一般可排除梅毒螺旋体感染 ？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
1、仪器：水平旋转仪，转速、转幅
100r/min 约18mm 2、定性试验

加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中， 并均匀地涂布在整个圈内


加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原
反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果

抗原为梅毒螺旋体特异蛋白（包括螺旋体重 组特异抗原），检测梅毒患者血中特异性抗 梅毒螺旋体抗原的抗体。 感染梅毒螺旋体后，一旦梅毒螺旋体抗体试 验呈阳性，则患者终身阳性。

问题：梅毒螺旋体抗原血清学试验的定量试验
在梅毒诊疗中有意义吗？
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法

梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA)
晚期 非梅 毒
73 98(93-99)
性，故可作为疗效观察、判愈、
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
假阳性反应

技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的 假阳性反应，经过重复试验即可排除。

生物学假阳性反应(一般滴度小于1:8），应采 用梅毒螺旋体抗原血清学试验如TPPA等进行排 除。
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
旋体抗原血清试验结果进行诊断。

TPPA等梅毒螺旋体抗原血清试验不能作为疗效 观察的指标。
梅毒血清学试验结果解释（梅毒临床诊断参考依据）
试验结果 梅毒螺旋体抗原 非梅毒螺旋体抗原 血清试验 血清试验 参考结果解释*
阳性
阴性 阳性
阳性
阳性 阴性
可能为现症梅毒
非梅毒螺旋体血清试验假阳性 临床治愈的早期梅毒（既往感染
出 现 1 次 阳 性 结 果
诊断梅毒感染 进行传染病 信息报告
孕产妇按照 未感染梅毒 处理
给 规 进 抗 定
予 范 行 原 量
两 治 非 血 检
个 疗 梅 清 测
疗 ； 毒 学 和
程的 螺旋体 试验 随访
继续进行常规 产前保健
三次检测 结果均为 阴性反应
住院分娩，产时 安全助产； 所生儿童按要求处理
预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播 工作实施方案具体工作目标
（梅毒相关部分）

孕产妇艾滋病、梅毒和乙肝检测率达95%以上，
孕期检测率达90%以上，提高孕早期检测比例

梅毒感染孕产妇梅毒治疗率达90%以上，所生儿
童预防性治疗率达90%以上。

先天梅毒报告发病率下降至15/10万活产以下
2
梅毒实验室检测目的
阴性 报告： RPR 阳性 TPPA 阴性
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梅毒螺旋体血清 试验 （ELISA）
阳性 RPR 定性/定量试验
阴性 报告： ELISA 阴性
阳性 报告： ELISA 阳性 RPR 阳性及滴度 果 报告： ELISA 阳性 RPR 阴性 果
阴性 推荐 TPPA 复检
阳性
报告： ELISA 阳性 TPPA 阳性 RPR 阴性
RPR试验假阳性即表明被检测标本中不存在梅毒螺旋体非特异性抗体？
60滴/mL，1滴=17ul
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
3、定量试验

稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。
问题：定量试验血清稀释需要使用试管吗？
1:4 1:8 1:16 ？


TPPA是梅毒螺旋体抗原检测试验检测方法的“金标准”？
病人接受梅毒第一次初筛可采用任何一种血清学检测方法 ？ TPPA是梅毒血清学检测确证方法,所以TPPA（+）即可诊断为梅毒？ RPR和TRUST的方法原理相同，所以两种方法的定量试验结果相同？ TPPA（+）/ RPR（-）可能是极早期梅毒？
RPR试验假阳性即表明被检测标本中不存在梅毒螺旋体非特异性抗体？
梅毒病人的自然病程与检测
感染梅毒螺旋体
感染梅毒螺旋体
2-6周
一期梅毒
1-3月
二期梅毒
1-3月
诊断依据 病史 症状 实验室检查
28%
梅毒
2-50年
72%
三期梅毒 30% 终生潜伏梅毒
常用梅毒实验室检测方法

病原学检测 血清学检测
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义

非梅毒螺旋体抗原血清试验方 法简单、快速、敏感性和特异 性较好。适用于大量人群的筛 查。
梅毒 病期
敏感性 (%)
86（77-99）
特异性 (%)
一期 二期 隐性
-
100
98(95-100)
（一般滴度>1:8， 但不排除<1:8）

因治疗后血清滴度可下降并阴 复发或再感染的指征。
？
1:2
定量试验结果判断
血清稀释度
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
结果
+ + +
+ +
+
+
-
？ ？ ？
问题：定量试验原倍血清滴度是多少？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
3、定量试验

稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。 1:1

TPPA是目前WHO公认的梅毒抗原血清学试验的“ 金标准”，常用于新方法、新试剂的参照标准。
ELISA/ CLIA

ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗原包被固相 板条，加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物， 形成抗原抗体复合物与酶标记物结合，用酶联 检测仪判定试验阳性反应。

本法可用于大样本血清检测。
化学发光法的临床应用意义基本同ELISA
化学发光法的敏感性？？
梅毒免疫层析快速检测方法（全血法）
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梅毒免疫层析快速检测方法（血清、血浆法）
梅毒快速检测新进展
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梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义

作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛 阳性标本的确证试验，排除RPR 假阳性。

不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺
1:2 1:4 1:8 1:16 1:1 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
定量试验结果判断
血清稀释度
1:2 1:4 1:8 1:16
结果
+ + +
+ +
+
+
-
1:1 1:2 1:8
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后

一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约 50%病人血清反应仍为阳性。


TPPA是梅毒螺旋体抗原检测试验检测方法的“金标准”？
病人接受梅毒第一次初筛可采用任何一种血清学检测方法 ？ TPPA是梅毒血清学检测确证方法,所以TPPA（+）即可诊断为梅毒？ RPR和TRUST的方法原理相同，所以两种方法的定量试验结果相同？ TPPA（+）/ RPR（-）可能是极早期梅毒？
采用非梅毒螺旋体 抗原血清学试验 进行复检 阴性反应 阳性反应
采用梅毒螺旋体抗原 血清学试验进行复检 阳性反应 阴性反应
孕产妇按照 未感染梅毒 处理
既往感染梅毒 极早期梅毒 部分晚期梅毒 立即给予孕妇一 个疗程的治疗 每 螺 学 连 月 旋 试 续 进 体 验 三 行 抗 定 个 非梅毒 原血清 量检测 月
继续进行常规 产前保健
*说 明 ： 有 条 件 地 区 首 选 梅 毒 螺 旋 体 抗 原 血 清 学 试 验 进 行 筛 查 。
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孕产妇梅毒检测技术要点相关问题

一旦感染梅毒，梅毒螺旋体特异性抗体常终身阳性？
RPR/TRUST只能用于梅毒初筛？
二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验100％阳性？ .TPPA（- ）/ RPR（+）结果一般可排除梅毒螺旋体感染 ？
阴性 报告： ELISA 阳性
TPPA 阴性
RPR 阴性
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接受初次产前保健的孕产妇
采用梅毒螺旋体抗原血清学试验* （ 如 TPPA、 ELISA或 快 速 试 验 等 ） 阴性反应 报 告 “梅 毒 螺 旋 体 抗原血清学试验” 阴性 阳性反应
选用一种梅毒 筛查试验进行 筛查
采用非梅毒螺旋体抗原血清学 试 验 （ 如 RPR或 TRUST等 ） 阳性反应 阴性反应 报 告 “非 梅 毒 螺旋体抗原血清学 试 验 ”阴 性