蛋白质专用转染试剂
蛋白操作相关试剂
2)蛋白酶抑制剂
3)WestBlot 试剂
HRP偶联二抗
抗小鼠IgG AP 或HRP 偶联物
山羊抗鼠IgG AP 或HRP 偶联物专为Wstern 杂交，噬菌斑/克隆筛选实验中获得最大信噪比而设计。以抗IgG抗体亲和纯化。若用于ELISA ,推荐工作稀释度高于杂交。
Rabbit phosphorylase B 97,400 Dalton、
Bovine Serum Albumin 66,200 Dalton、
Ovalbumin 42,700 Dalton、
Carbonic Anhydrase 31,000 Dalton、
Trypsin Inhibitor 20,100 Dalton、
BugBuster （无一级氨基）蛋白抽提试剂
BugBuster(无一级氨基)是BugBuster的一种特殊配方，用于蛋白抽提物中一级氨基干扰的情况，如蛋白固定化或交联。BugBuster(无一级氨基)使用的PIPPS缓冲液具有与Tris-缓冲BugBuster相似的缓冲容量和PH范围，但不与金属离子形成复合物，使它特别适合于抽提金属依赖性蛋白。
从细胞或组织中纯化蛋白时，第一步是破碎样品和抽提相关蛋白组分，这一步骤十分关键，通常用激烈的机械或酶处理使蛋白暴露于降解性条件，会直接影响目的蛋白的完整性和活性。
为了解决这一问题，研究者用Novagen开发的BugBuster,YeasBuster和CytoBuster等蛋白抽提试剂，是特别组方的去污剂，分别用于从细菌，酵母和哺乳动物细胞中温和、有效的抽提可溶性蛋白，避免采用机械处理造成的蛋白破坏。rLysozyme?溶液与Bugbuster试剂配合使用可以增加细菌的裂解效果。加入Benzonase?核酸酶可特异性降解污染的DNA和RNA，以制备可以立即用于目的蛋白纯化的无核酸，低粘度的抽提物。蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”式混合试剂可防止粗提物中目标蛋白降解。
广东转染试剂类型
广东转染试剂类型
广东转染试剂类型
广东省作为全国经济重心之一，其科技实力在行业内也是一直走在前列。
转染试剂作为生物科研中不可缺少的试剂之一，在广东制造商也
有相当的生产水平和供应能力。
转染试剂，是指将外来的目的基因（DNA、RNA等）引入到靶细胞内，并使其表达的试剂。
其种类繁多，在广东也有着相应的常规类型。
1. 磷脂体基转染试剂
主要由磷脂体和质粒DNA组成，优点是容易制备和操作，适合于大规模生产。
缺点是转染率相对不高，有一定的毒性。
2. 聚乙烯酰胺转染试剂
聚乙烯酰胺（PEI）是一种化学合成剂，使用时与DNA分子组合形成
复合物，可以将DNA有效转染到细胞内。
优点是转染率高且毒性低，目前在广东科研中得到广泛应用。
3. 蛋白质/肽转染试剂
蛋白质/肽转染试剂通常是根据蛋白质或肽与DNA分子的作用机制设计制备的，可以有效地将目的分子转染到靶细胞内。
优点是转染效率高且无毒性，但缺点是价格昂贵。
4. 常规转染剂
常规转染剂是一类较为通用的转染试剂，主要包括羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、聚乙烯醇（PVA）、去离子水等，优点是价格低廉且易于操作，但其转染效率较低，通常适用于一些较为简单的试验。
总体来说，转染试剂在广东科研中扮演着不可或缺的角色，其种类繁多，需根据实验需要选择合适的试剂。
在使用转染试剂时，需注意试剂质量和实验条件，以确保实验结果的准确性和科学性。
fugene 4k 转染试剂 中文说明书
2022版 CTM694原英文技术手册TM694中 文 说 明 书适用产品目录号：E5911和E5912FuGENE ®4K TransfectionReagent普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：400 810 8133技术支持邮箱：*************************CTM 6942022制作1所有技术文献的英文原版均可在/ protocols 获得。
请访问该网址以确定您使用的说明书是否为最新版本。
如果您在使用该试剂盒时有任何问题，请与Promega 北京技术服务部联系。
电子邮箱：*************************1. 描述 (2)2. 产品组分和储存条件 (2)3. 一般注意事项 (2)3. A. 转染试剂与DNA的比例 (3)3. B. DNA (3)3. C. 时间 (3)3. D. 血清 (3)3. E. 细胞培养条件 (3)3. F. 稳定转染 (3)4. 推荐操作步骤 (4)4. A. 细胞铺板 (5)4. B. FuGENE® 4K Transfection Reagent准备 (5)4. C. 一般转染操作步骤 (6)4. D. 稳定转染操作步骤 (8)4. E. 转染优化 (9)4. F. 报告基因活性和细胞健康的多重检测方案 (11)5. 疑难解答 (12)FuGENE® 4K Transfection Reagent普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：400 810 8133技术支持邮箱：*************************CTM 6942022制作21. 描述FuGENE® 4K Transfection Reagent是一个多组分，非脂质体试剂，用于将DNA高效、低毒地转染至多种哺乳动物细胞系中，无需在加入试剂-DNA复合物后更换培养基。
Xfect转染试剂操作中文手册(clontech)
Xfect 质粒DNA 转染试剂• 操作简便且兼容血清 • 转染效率高 • 细胞毒性极低 • 细胞类型广泛操作流程图：Xfect 质粒DNA 转染试剂操作步骤(6-孔板)：1. 转染前的准备贴壁细胞: 在转染的前1d ，接种1ml 合适密度的细胞于6-孔板的单孔中，使转染当天细胞融合度能够达到50–80%。
悬浮细胞: 在混匀Xfect Polymer 前，将细胞以5 x10e5–1.25 x10e6/1ml 接种于6-孔板中培养。
2. 漩涡混匀Xfect Polymer 。
3. 对于单孔转染，分别在2个离心管中混匀以下试剂： Tube 1 (质粒DNA)---μl (5 μg) 质粒DNA---μl Xfect 反应缓冲液 100 μl 总体积T ube 2 (Polymer) 1.5 μl Xfect Polymer (100μg /μl ) 98.5 μl Xfect 反应缓冲液 100 μl 总体积注意:• 上述为6-孔板单孔转染所需的量。
• 每1μg 质粒DNA 加0.3 μl Xfect Polymer 。
• 对于大多细胞来说，5 μg 的质粒DNA 是最佳使用量。
若您是首次使用Xfect 转染细胞，需要按照2.5 μg ，5 μg 和7.5 μg 的质粒DNA 的量进行梯度实验，确定质粒DNA 的最优使用量。
实验证明，质粒DNA 的量不能少于2.5 μg ，不然会造成转染效率低（经转染Hela 细胞实验验证）。
• Xfect Polymer 预混液室温放置不要超过30min 。
4. 漩涡混匀每管混合物。
5. 将Xfect Polymer 预混液和DNA 预混液混合，再将混合液以适中的速度漩涡10sec 。
6. 室温孵育10 min ，形成Xfect/DNA 复合物。
7. 将200μl 纳米复合物逐滴加入细胞培养基中，轻柔地前后摇晃混匀。
注意:无需去除培养基中的血清，当纳米复合物加入培养基后，培养基的颜色会有些改变，这是正常的。
lip3000转染说明书
Lip3000转染说明书一、引言本说明书旨在提供关于使用Lip3000进行转染实验的详细步骤和操作注意事项。
Lip3000是一种常用的基因转染试剂，适用于各种细胞类型的转染，无论是质粒DNA转染还是RNA干扰实验。
本转染试剂的使用方法简单且高效，能够快速将外源基因导入到细胞内。
在进行Lip3000转染实验之前，请阅读本说明书并仔细按照步骤进行操作。
二、实验材料•Lip3000转染试剂•承载目标基因的质粒DNA（或RNA）•细胞培养基•细胞培养器具（离心管、无菌培养皿等）•离心机•PCR仪（或其他适用于转染验证的仪器）三、实验步骤1. 细胞预处理在进行转染之前，首先需要对待转染细胞进行预处理。
以下是一般的细胞预处理步骤：1.将细胞培养在含有适宜培养基的培养皿中，以确保细胞处于最佳状态。
2.细胞密度应达到80%~90%的收缩。
注意不要使细胞超过90%的收缩，否则会影响转染效率。
3.在转染前，将培养皿中的培养基抽去，并用预暖的PBS洗涤细胞，以确保细胞表面不含有培养基或其他干扰物。
2. 转染操作请按照以下步骤进行转染操作：1.将Lip3000转染试剂放在室温下静置10分钟，使其回到室温并充分混匀。
2.在一个无菌离心管中，将转染试剂按照以下比例混合：–将500μl Opti-MEM培养基加入离心管中；–加入2.5μl Lip3000试剂，轻轻混匀；–静置20分钟，使转染试剂和培养基充分结合。
3.将预处理后的细胞培养皿中的PBS抽去，加入稀释后的Lip3000转染试剂。
注意：转染试剂的添加量需根据细胞的情况进行优化，典型的转染试剂与细胞的最佳比例为2:1。
4.搅拌培养皿或转动培养皿，使转染试剂均匀分布在培养皿上的细胞中。
5.保持培养皿平放，在37°C的细胞培养箱中孵育转染混合液4至6小时。
细菌转染时间的长短根据细胞的特性和转染效果进行调整。
3. 转染验证与后续处理待转染时间到达后，即可以进行转染效果的验证。
英格恩entranster转染试剂说明书
英格恩entranster转染试剂说明书一、产品概述英格恩 Entanster 转染试剂是一种用于转染外源 DNA/RNA 到细胞内的试剂。
它是经过优化的化学试剂组合，可以将外源 DNA/RNA 高效地传递到各种细胞中，并促进其定向表达。
本试剂适用于体外转染实验和基因工程研究，具有高转染效率、低细胞毒性、简单易用等优点。
二、试剂成分英格恩 Entanster 转染试剂主要成分包括转染缓冲液和转染增强剂。
转染缓冲液中包含有机溶剂、非离子表面活性剂等，用于稳定 DNA/RNA与转染剂的结合。
转染增强剂含有具有阴离子表面活性剂、脂质、蛋白质等物质，可以提高细胞膜通透性和转染效率。
三、使用说明1.储存和稀释：试剂应储存于-20℃的冰箱中，保持干燥和避光。
使用前需要将试剂溶解在适当体积的转染缓冲液中，最佳稀释比例为1：9、溶液需充分混匀，离心并去除任何沉淀物。
2.样品准备：在转染前，将目标DNA/RNA溶解在适当的缓冲液中，浓度通常在0.1-1μg/μL最佳。
确保样品充分溶解并无明显沉淀。
3.转染操作：对于已经培养至适当倍数的细胞，将细胞用预先暖和的转染缓冲液洗涤一次，并去除缓冲液。
将转染缓冲液和溶解好的目标DNA/RNA混合，稍微搅拌均匀。
与此同时，将适量的转染增强剂加入到混合物中，充分混合。
然后将混合物直接滴加到细胞上，并轻轻摇晃培养板以确保混合物均匀分布。
4.培养和检测：将含有转染混合物的培养板放回恒温培养箱中，保持恒定的温度和CO2浓度。
培养时间和温度根据需要进行调整，通常在24-48小时后可以进行下一步实验或观察。
四、注意事项1.试剂需保存在干燥、阴凉、避光的环境中，避免结冰或暴露在高温环境中。
2.操作中需佩戴手套并遵循生物安全实验操作规范。
3.使用前需充分摇匀试剂瓶，确保所有试剂成分充分混合均匀。
4.转染缓冲液中的有机溶剂可能对一些细胞有毒性，因此在选择试剂时应参考相关文献或尝试不同的浓度和时间，以确定最佳条件。
转染试剂的作用原理
转染试剂的作用原理一、转染试剂的基本概念转染试剂是一种用于将外源基因或其他生物分子转移到目标细胞中的化学物质。
转染试剂可以通过物理或化学方法改变细胞的通透性，使外源物质能够进入细胞内，并达到转染的目的。
转染试剂在基因治疗、基因表达研究和细胞工程等领域广泛应用。
二、转染试剂的分类转染试剂按照机理和性质的不同可分为多种类型，常见的转染试剂包括：1.脂质体（Liposome）：脂质体是由磷脂双分子层构成的微小囊泡，可与细胞膜融合，将目标物质转移到细胞中。
2.内源蛋白介导的转染：通过利用特定的蛋白质，如病毒衣壳蛋白或细胞内运输蛋白，将目标物质转移到目标细胞中。
3.阳离子聚合物：阳离子聚合物具有正电荷，能够与负电荷的DNA或RNA结合形成复合物，进而转染入细胞。
4.高分子基质：高分子材料如凝胶、纤维或微球等可用于载体，将目标物质与细胞接触，实现转染。
5.电穿孔：利用电场或离子流导致细胞膜破裂，使目标物质通过细胞膜进入细胞质。
三、脂质体转染试剂的作用原理脂质体是一种常用的转染试剂，其作用原理主要包括以下几个步骤：1.与DNA结合：脂质体通过与目标DNA相互作用，形成脂质体-DNA复合物。
脂质体由于其亲油性能与DNA中的疏水部分相互作用，同时脂质体表面带有正电荷，可以与DNA的负电荷相吸引。
2.细胞摄取：脂质体-DNA复合物与细胞膜结合后，脂质体会在细胞膜上形成微囊泡。
随后，微囊泡与细胞膜融合，释放出脂质体-DNA复合物进入细胞质。
3.脱脂质体：脂质体在细胞质中逐渐失去其亲油性，释放出DNA。
由于脂质体-DNA复合物在细胞膜上的微囊泡中形成的电位差，使得DNA被吸引到细胞核附近。
4.核入：DNA由细胞质进入细胞核，最终与染色体结合或进入细胞核内的胞浆，实现转基因。
四、脂质体转染试剂的优缺点脂质体转染试剂具有一些优点和缺点，需要根据实际应用情况选择使用：优点：1.安全性：脂质体转染试剂大多采用合成非病毒载体，通常比病毒载体更安全，不会引起病毒感染及遗传毒性。
LIPOFECTAMINE2000转染试剂转染步骤
LIPOFECTAMINE2000转染试剂转染步骤转染是一种将外源DNA或RNA导入到细胞内的技术，以研究基因功能、蛋白质表达、细胞信号转导等方面的问题。
LIPOFECTAMINE2000是一种常用的转染试剂，广泛应用于多种细胞系中。
以下是LIPOFECTAMINE2000转染试剂转染步骤的详细介绍。
一、细胞种植与处理准备1.1细胞传代：将细胞进行传代，以保证其在良好的状态下进行实验。
1.2细胞密度调整：将细胞于适宜培养皿中培养至60-80%的密度，以保证细胞的适宜转染。
1.3细胞处理准备：在转染前，将细胞用无酶EDTA或胰酶剥离并重新悬浮在适宜的培养基中，以保持细胞的完整性和适宜的状态。
二、试剂配制2.1DNA或RNA的制备：将外源DNA或RNA在无菌条件下制备，并使用纯化试剂进行纯化和浓缩。
2.2转染试剂配制：将冻干的LIPOFECTAMINE2000转染试剂通过加入合适的无菌水，稀释成适宜浓度的转染试剂。
三、转染操作3.1转染试剂与DNA/RNA的混合：将适量的LIPOFECTAMINE2000转染试剂与DNA或RNA混合在无菌的管中，轻轻混合均匀。
注意，避免过量试剂和核酸的使用，以减少细胞的毒性和副作用。
3.2孵育混合物：将混合物在常温条件下孵育15-30分钟，以促使脂质体与核酸形成稳定的复合体。
四、转染过程4.1转染试剂与细胞的混合：将混合物缓慢滴加到处理好的细胞培养基上，缓慢摇晃培养皿以使混合物均匀分布。
4.2转染时间及培养条件：将细胞放置在转染液中，保持静止状态，同时将培养皿放回培养箱中，在37℃、5%CO2的恒温恒湿条件下进行转染。
转染时间需要根据细胞系和转染试剂的要求进行优化，一般为4-6小时。
4.3转染液的去除：将转染液小心去除，并将细胞用含有适宜抗生素或筛选剂的培养基洗涤一次，以去除残留的转染试剂。
五、细胞处理及分析5.1细胞培养：将细胞放回恒温恒湿培养箱中，用适宜培养基进行细胞的培养。
蛋白质转染技术制备方法
蛋白质转染技术是一种将表达出的目标蛋白直接转入细胞的过程。
这个过程中，通常会用到辅助蛋白或构建融合蛋白来帮助目标蛋白进入细胞质。
转染方法通常是共孵育。
具体制备方法如下：
1.准备实验材料，包括细胞（如鼠成纤维细胞）、试剂和试剂盒（如丙戊酸培养液）、仪器和耗材
（如培养皿、移液枪和枪头等）。
2.将目标蛋白（如重组重新编程蛋白质，包括Oct4-11R、Sox2-11R、Klf4-11R和c-Myc-11R）
与培养基混合，并可能添加其他辅助剂（如丙戊酸和HDAC抑制剂）来提高编程效率。
3.将处理过的细胞在特定条件下培养一段时间（如36小时），使目标蛋白有机会进入细胞并发挥
作用。
4.在完成多次（如四次）蛋白转导后，处理过的细胞可能需要进行后续处理，如转移到其他类型的
细胞上，并在特定培养基中保存和扩增。
另外，值得注意的是，由于蛋白质转染技术并不涉及基因的导入，因此它只适用于瞬时转染，即目标蛋白的作用会在一段时间后消失。
如果需要长期的蛋白表达，可能需要考虑其他方法，如基因转染。
此外，对于蛋白质转染，也有一些专门的试剂，如PULSinTM，这是一种由Polyplus Transfection公司开发的新型转染试剂，它可以通过正电荷外衣包裹许多蛋白质/抗体，使其能够有效地转染到活细胞中。
蛋白 共定位 步骤 质粒 转染
蛋白共定位步骤质粒转染
蛋白共定位是一种研究蛋白质相互作用的方法，其可以描述两个或多个蛋白质之间的关系，包括它们的结合位置、交互作用、功能等。
在进行蛋白共定位实验时，质粒转染是一个重要的步骤，下面我们来了解一下质粒转染的具体步骤。
首先，我们需要准备好需要转染的质粒和目标细胞。
质粒是一种可以被细胞摄取并在其中进行表达的DNA分子。
而目标细胞是我们希望进行共定位实验的细胞，通常选择表达目标蛋白质的细胞。
在准备好这些材料之后，我们可以进行质粒转染实验了。
第一步，我们需要将质粒与转染试剂（例如聚乙烯亚胺）混合均匀，并在室温下静置一段时间，使其形成复合物。
这种复合物可以帮助质粒进入细胞。
第二步，我们需要将转染复合物加入到目标细胞中。
在加入复合物之前，需要将细胞培养在适当的培养基中，并保证细胞处于生长状态。
第三步，我们需要对转染后的细胞进行处理，以保证蛋白质表达和共定位实验能够进行。
例如，可以使用药物或化合物来诱导或抑制蛋白质表达，或者对细胞进行特定的处理，以激活或抑制某些基因表达。
第四步，我们需要对转染后的细胞进行共定位实验。
在这一步中，我们可以使用各种分析方法，例如共免疫共沉淀、荧光共定位、双杂交等方法，来研究蛋白质之间的相互作用。
最后，在完成共定位实验后，我们可以通过分析和解释实验结果，来深入了解蛋白质之间的相互作用和功能，并为后续研究提供重要的信息和指导。
总之，质粒转染是蛋白共定位实验的重要步骤之一，其可以帮助我们将质粒有效地引入到目标细胞中，为后续的共定位实验提供必要的条件和保证。
聚焦转染：8大品牌转染试剂强中强[选购宝典]
![聚焦转染：8大品牌转染试剂强中强[选购宝典]](https://img.taocdn.com/s3/m/66b7e9b6960590c69ec376a0.png)
聚焦转染：8大品牌转染试剂强中强[选购宝典]生物通技术专评：数百万年来原核生物如大肠杆菌就经常相互分享它们的遗传物质的——受到自然的启发，出现了将DNA导入哺乳动物培养细胞的技术——这是分子生物学的又一个重要的里程碑。
也多谢这种技术的不断进步，我们终于可以在各种哺乳动物细胞中进行各种克隆化基因的表达，从而达到不同的目的－－比如，生产制备大量经过真核特有的翻译后加工的活性蛋白；研究表达蛋白的结构和生化特性；研究基因表达的调控机理；甚至调控基因的表达等等。
可以说在哺乳动物细胞中表达外源基因的2个关键：一个是选择构建合适的表达载体和表达细胞株，另一个就是选择合适的方法将克隆的基因导入培养细胞中进行表达。
转染技术的广泛使用促进了人们对外源基因在哺乳动物细胞中的表达等方面的认识，并在方法学上促进了该领域及相关领域的发展。
从磷酸钙到脂质体，到多胺，可用于转染的细胞种类已越来越多，转染试剂也不断更新换代，而转染也不再仅限于将DNA转入细胞中了，RNA，siRNA，蛋白质等等生物大分子也进入了转染的行列。
在纷纭的产品中，你会选择哪种转染试剂？生物通这个转染试剂专辑希望为大家介绍市面上主流的转染试剂和各自的个性特点和适用范围－－可以说，针对不同的细胞株，不同的转染实验目的，还有不同的转染要求，很难找到一种能满足所有的要求，十全十美的产品。
你需要一一尝试和优化条件——但是了解市面上各种产品的特点与长短，无论是对于转染新手，或者是“老革命遇到新问题”，都是有益的。
在生物通这个转染试剂专辑系列我们将分别介绍国外几个经典好用的王牌产品，以及国内物美价廉的后起之秀，以及总结一些使用心得和注意事项。
如果你有自己的心得并愿意和大家分享，欢迎投稿生物通哦:)一、打开转染之门：基本概念作为篇首还是要把老调调再弹弹。
请原谅我有点“唐僧”的回顾几种经典转染方法。
DEAE-葡聚糖（Diethylaminoethyl (DEAE)-dextran）：这个早在1965年出现的转染方法差不多是最古董级的方法之一了，直到现在竟然还有少数人坚持采用。
常用生化试剂作用
常用生化试剂作用：1、蛋白酶K：能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白，在尿素和SDS中稳定。
一般工作浓度是50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2。
2、SDS：十二烷基硫酸钠，溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中的核蛋白，SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。
3、IPTG：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷，常用于蓝白斑筛选及IPTG 诱导的细菌内的蛋白表达等。
IPTG和乳糖的结构相似，所以它和乳糖一样，可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白的空间构像变化，四聚体解聚成单体，失去与操纵子特异性结合的能力，从而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。
与乳糖不同的是，IPTG不被β-半乳糖苷酶水解。
常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。
作用极强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定。
4、X-gal：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是IPTG的显色试剂，在IPTG的催化下显蓝色。
常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。
5、G418：一种抗生素，对几乎所有的细胞都有毒性，是稳定转染最常用的选择试剂。
当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后，则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA，从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达，使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。
Ｇ418的这一选择特性，已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
6、DMSO：二甲基亚砜。
实验室常用于作液体层析溶剂，同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。
能溶于所有烷烃和烯烃。
7、曲拉通X-100：TritonX-100，用的细胞裂解液成分之一，在保护蛋白活性方面有一定作用，能力介于NP40和SDS之间，偏向于NP40。
8、NP-40：很温和的去垢剂，1%浓度的基本可以破坏掉胞膜，而对核膜破坏的作用弱，结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
UltraFection 3.0高效转染试剂 ELS300-005 说明书
Tel:86-20-31955379Techsupport:86-20-31955379E-mail:****************GUANG ZHOU ELGBIO Co.,Ltd UltraFection 3.0 高效转染试剂保存条件: -20℃保存，2 年有效；产品介绍：UltraFection 3.0 是一款新型的非脂质体聚合物转染试剂，应用于体外高效转染，细胞毒性低，适用于含血清的培养基，特别适于大量高表达蛋白的DNA 转染、高通量筛选cDNA 芯片和RNA 以及SiRNA 等。
UltraFection 3.0 可高效富集DNA，通过内吞作用将DNA 摄入胞内，具有结合保护DNA 能力强，毒性低的特点。
适用范围和特点：1. 与目前最常用的转染试剂相比，转染效率更高。
2. 可适用于瞬时转染和稳定转染。
3. 细胞毒性低，且可通过瞬时转染增加蛋白表达量。
4. 有血清和无血清培养基均可使用，不受介质变化的影响。
使用说明：尽管以下转染的方法已经充分的验证过，此试剂具有高效的转染效率，但针对每种细胞，还是建议试验人员进行条件优化，通常要考虑以下问题：1.细胞密度：大多数贴壁细胞密度在50-70%之间，适合转染。
确定转染最佳的细胞密度为每一个细胞类型的最大效率和维护密度在所有实验的重现性。
2. 培养环境：含血清的培养基对UltraFection3.0 转染无影响。
3. 本产品为-20℃保存，使用前建议分装冻存，尽量避免多次反复冻存对转染试剂的影响。
4. D NA 纯度和浓度要求：建议选用经过离子交换柱制备的高纯度、无菌的DNA，去除DNA 中内毒素的污染是保证最大转染效率的关键步骤。
以HEK293 细胞为例，24 孔板最适DNA 转染浓度为每孔转染0.5μg DNA。
5. U ltraFection 3.0 和DNA 的标准比例是UltraFection 3.0 ：DNA=3：1，即3μl的UltraFection 3.0 对应加入1μg的DNA。
上海常用转染试剂配方
上海常用转染试剂配方
转染试剂是在细胞培养研究中必不可少的试剂。
它将核酸或蛋白质带入目标细胞中，以达到研究目的。
本文将介绍上海常用的几种转染试剂配方。
1. Lipofectamine 2000转染试剂
Lipofectamine 2000是一种常用的脂质体转染试剂，其用途广泛且转染效率高。
其配方如下：
无血清培养基：500μL
要转染的DNA：2μg（根据实验需要调整）
将Lipofectamine 2000试剂与无血清培养基混合，放置5分钟，再加入要转染的DNA 液体，混合后放置15分钟，滴加在细胞上。
2. PEI转染试剂
聚乙烯亚胺（PEI）是一种阳离子高分子，由于其能够形成与DNA负电荷的缔合物，使其成为一种有效的转染试剂。
PEI转染试剂可用于转染细胞以获得较高的转染效率。
其配方如下：
PEI试剂：4μg/μL，将其与等体积的无血清培养基混合。
3. PolyJet转染试剂
PolyJet是一种高效、无毒、具有低细胞损伤的DNA转染试剂。
其配方如下：
4. FuGENE HD转染试剂
细胞的转染操作应该注意以下几点：
1. 转染时间应该控制在半小时至1小时内，过长或过短都会对转染效率造成影响。
2. 转染的DNA浓度应该适当，过高的DNA浓度会对细胞产生毒性。
3. 转染试剂与DNA的混合比例也应该适当，过多或过少都会导致转染效率降低。
总之，合理选择转染试剂和配方，并严格按照操作步骤进行转染可以提高实验的可靠性和成功率。
polyplus转染试剂INTERFERin的应用
polyplus转染试剂INTERFERin的应用近年来，基因转染技术在生物医学研究中发挥着越来越重要的作用。
Polyplus是一家专门从事转染试剂研发的公司，其INTERFERin转染试剂在研究领域得到了广泛的应用。
本文将探讨INTERFERin在多个研究领域的应用，旨在帮助读者更好地了解该转染试剂的功能和优势。
一、INTERFERin转染试剂概述INTERFERin转染试剂是Polyplus公司专门为RNA干扰实验设计的一种转染试剂。
其特点是可以高效地导入siRNA和miRNA到细胞内，并且具有良好的毒副作用。
采用INTERFERin进行基因转染，可以有效地抑制靶向基因的表达，从而实现基因功能的研究。
该转染试剂适用于各种哺乳动物细胞，包括常用的人类和小鼠细胞系。
二、INTERFERin在研究中的应用1. RNA干扰实验INTERFERin转染试剂在RNA干扰实验中得到了广泛应用。
研究人员可以将设计好的siRNA或miRNA转染到感兴趣的细胞系中，通过靶向基因的沉默来研究其在细胞中的功能。
INTERFERin在转染过程中可以高效地导入RNA分子，从而实现RNA干扰的目的。
2. 基因表达调控实验除了RNA干扰实验，INTERFERin转染试剂还可用于基因表达调控实验。
研究人员可以将设计好的表达载体转染到目标细胞中，通过增加目标基因的表达来研究其生物学功能。
INTERFERin的高转染效率可以确保表达载体能够高效地导入细胞，并达到较高的表达水平。
3. 蛋白质相互作用研究INTERFERin转染试剂在蛋白质相互作用研究中也有重要的应用。
研究人员可以将编码不同融合蛋白的表达载体转染到不同的细胞系中，通过共转染的方式研究这些蛋白质之间的相互作用。
INTERFERin的高转染效率和低毒性可以确保共转染的有效率，从而提高实验的可靠性。
4. 疾病模型的构建基因转染技术在构建疾病模型方面也能发挥重要作用。
INTERFERin转染试剂可以用于将特定基因或突变基因转染到相关细胞中，从而模拟与某种疾病相关的生理过程或病理过程。
蛋白质专用转染试剂
蛋白质专用转染试剂● 多肽及小蛋白（如组蛋白，~11 kDa ）， ● 大蛋白（如抗体，~150 kDa ）● 多分子蛋白复合物（半乳糖苷酶四聚体，~465 kDa ）将蛋白导入细胞可以用于蛋白－蛋白相互作用，蛋白运转，细胞周期，信号传导通路，细胞凋亡通路，转录因子介导的基因调节等研究。
将蛋白直接转染到细胞里也是研究特定蛋白对哺乳动物细胞的影响的最为迅速的方法。
Novagen 的ProteoJuice TM 和Stratagene 的BioTrek TM 是目前市售产品中适用细胞品种较多，对于哺乳动物细胞毒性极小的两种经过广泛测试的高效蛋白转染试剂。
BioTrek TM 蛋白转染试剂已成功转染的细胞：293 B16-F0，BHK-21，CHO-K1，COS-1，COS-7， CV-1， HeLa ，HeLa-S3，HepG2，Jurkat ， K562Ki-Ras 267 β1， MDCK ，NIH 3T3，P19 转染试剂冻干粉 β-半乳糖苷酶对照10 μg FITC 标记山羊IgG 对照10 ug包装 货号 24rxn#204140ProteoJuice 蛋白转染试剂已成功转染的细胞：A549，COS-7，HepG2，MCF-7，PC12，BHK-21，CV-1，HEK-293，Neuro2A ，Raw 264.7，CHO-K1，HeLa L6，NIH-3T3包装 货号0.125 ml 71281-3 4 × 0.125 ml71281-4质谱法（MS ）是蛋白质组学中鉴定蛋白品种的核心技术。
蛋白MS 分析需要将蛋白按特定要求消化成多肽，再利用软件得到其序列及特性信息。
胰蛋白酶能特异性地从赖氨酸和精氨酸残基的羧基端进行切割，产生符MS 分析所需要大小的肽段，因此胰蛋白酶是MS 实验中的重要工具之一。
Stratagene 的MS 级胰蛋白酶纯度极高，克服了天然胰蛋白酶和非MS 级的胰蛋白酶的主要缺限，成为MS 的必然之选：● 决无自我消化之虞：不会干扰目的蛋白的分析经过甲基化修饰，消化活性只会针对目的蛋白；更不会产生糜蛋白酶这种活性更广的副产物 ● 杜绝任何可能的糜蛋白酶活性干扰特别经过TCPK 处理，解决了其它胰蛋白酶产品的主要质量问题 ● 专为MS 应用而设计Stratagene 著名的QuikChange 定点突变试剂盒家族的新成员QuikChange TM Multi 多点突变试剂盒用QuikChange TMMulti 多点突变试剂盒可以在短短1天时间内完成克隆在如何质粒上多达5个点的突变，而不是通常方法的几天甚至数周！ ● 简单、高效、1天完成多点突变的全新方法● 可以从任何质粒开始，完全没有任何前处理步骤（如：亚克隆）● 每个突变点设计一条引物，可以使用简并引物，省钱省时 ● 决无意外突变● 提供高效XL-10 Gold 超级感受态细胞第1步 生成突变链 进行温度循环： 1) 模板DNA 变性 2) 突变引物退火(所有的引物结合于同一条链)3) 引物延伸，并用QuikChange Multi enzyme TM 封闭缺刻第2步Dpn I 消化模板DNA用Dpn I 消化甲基化和半甲基化DNA第3步 转化 将突变产物ssDNA 转入XL10-Gold 超级感受态细胞QuikChange TM Multi 多点突变试剂盒是亲和纯化得到的极高纯度产品，以冻干粉形式提供包装货号100 μg #2043105 ×100 μg #204311货号包装#200514 30rxn。
pei转染原理
pei转染原理首先，我们来了解一下pei是什么。
PEI是聚乙烯亚胺（polyethylenimine）的缩写，是一种阳离子聚合物，具有良好的DNA或RNA结合能力和细胞内转染效率。
pei转染原理主要是通过pei与DNA或RNA形成复合物，然后与细胞膜结合，最终将DNA或RNA导入细胞内。
pei转染原理的关键步骤包括复合物形成、细胞内摄入和释放。
首先，pei与DNA或RNA形成复合物，这一过程主要是通过静电作用和氢键相互作用来实现的。
复合物形成后，pei能够与细胞膜结合，并被细胞摄入。
在细胞内，复合物会通过一系列的内吞作用进入细胞质，然后释放出DNA或RNA分子。
这些外源分子在细胞内会参与到基因表达、蛋白质合成等生物学过程中。
pei转染原理的优点之一是其高效性。
相比于其他转染试剂，pei具有较高的转染效率，能够有效地将DNA或RNA导入细胞内。
此外，pei转染还具有较低的细胞毒性，对细胞的影响相对较小，有利于细胞的存活和稳定转染。
除此之外，pei转染原理还具有较好的适用性。
不同类型的细胞对pei转染都具有较好的响应，因此在不同的细胞系中都能够实现高效的转染效果。
这为研究人员在细胞水平上开展基因功能研究、蛋白质表达调控等方面的工作提供了有力支持。
需要注意的是，在进行pei转染实验时，研究人员需要根据具体的实验目的和细胞类型选择合适的pei/DNA或RNA比例、转染时间和条件等参数，以确保转染效果的最大化。
总的来说，pei转染原理是一种简单、高效、适用性广泛的转染技术，为基因工程、细胞治疗等领域的研究提供了重要的工具和支持。
通过深入了解pei转染原理，研究人员可以更好地利用这一技术手段开展相关领域的研究工作，推动科学技术的发展和应用。
丁酸钠促进转染蛋白表达的原理
在细胞学和分子生物学领域，转染蛋白表达是一项非常重要的技术。
当我们想要研究特定的蛋白质在细胞内的功能、机制或定位时，常常需要将外源的DNA或RNA转染入细胞内，使其表达或干预细胞内的生物过程。
为了提高转染效率，常常需要借助一些辅助剂，其中丁酸钠就是一种常用的转染增效剂。
本文将对丁酸钠促进转染蛋白表达的原理进行详细解析。
1. 丁酸钠的作用机制丁酸钠，又称丁酸氢钠，是一种带正电荷的化合物。
在转染过程中，它的作用主要是通过中和DNA或RNA的负电荷，帮助其穿过细胞膜进入细胞内。
通常情况下，细胞膜是一层由脂质组成的疏水屏障，对于带有负电荷的核酸分子来说，很难自行穿越细胞膜，因此需要丁酸钠等转染增效剂的辅助。
2. 丁酸钠的增效作用丁酸钠的带正电荷可以与DNA或RNA的负电荷相吸引，形成复合物。
这些复合物在与细胞膜接触时，可以改善核酸分子的穿膜能力，从而增加转染效率。
丁酸钠还可以促进转染后的内吞作用，帮助DNA或RNA更快速地进入细胞质，并避免被溶酶体降解，从而提高外源基因的表达水平。
3. 丁酸钠的使用注意事项尽管丁酸钠在转染过程中可以起到促进作用，但过量使用也可能对细胞产生毒性。
在进行转染实验时，需要根据细胞类型、转染试剂的浓度和转染时间等因素进行调整，以确保最佳的转染效果。
4. 个人观点和理解从我个人的实验经验来看，丁酸钠的确能够显著增加外源基因的表达水平。
然而，在使用过程中也发现，不同细胞株对丁酸钠的耐受性存在差异，需要根据具体情况进行优化。
丁酸钠也可能影响细胞的生长和代谢，因此在实验设计和数据解读时需要考虑到这一点。
总结回顾，本文详细介绍了丁酸钠促进转染蛋白表达的原理，包括其作用机制、增效作用以及使用注意事项。
通过本文的阅读，相信读者能够更全面、深刻地理解丁酸钠在转染实验中的作用，为今后的实验设计和数据解读提供有益的参考。
在文章中多次提及了“丁酸钠促进转染蛋白表达”的关键词，并以从简到繁、由浅入深的方式探讨了这一主题。
per转染剂用途
per转染剂用途PER转染剂是一种常用的转染试剂，广泛应用于生物学研究中。
PER （Polyethylenimine）是一种天然聚合物，具有多种功效，如改变物质的表面性质、促进材料溶胀和黏附等。
在细胞生物学领域，PER转染剂可用于有效地将外源基因材料引入到细胞内，并在细胞内稳定表达。
本文将详细介绍PER转染剂的用途。
1.基因转染：PER转染剂被广泛用于基因转染研究中，它能高效地将外源DNA引入到细胞内。
PER转染剂能与DNA形成稳定的复合物，通过电荷吸引力将DNA载体转染到细胞膜上，然后由细胞摄取进入细胞内。
这种转染方法可应用于各种类型的细胞，包括哺乳动物细胞、植物细胞和微生物细胞等。
2.表达载体转染：除了基因转染，PER转染剂还可用于表达载体的转染。
表达载体是一种含有目标基因的质粒DNA，在细胞内可以驱动目标基因的表达。
将表达载体转染入细胞后，PER转染剂能够稳定地结合于质粒DNA，并促进质粒从细胞膜中内吞进入细胞质，然后进入细胞核，最终使质粒DNA能够被转录和翻译机器所识别和表达。
这种方法可以应用于基因治疗、基因工程以及其他相关研究。
3.RNA干扰（RNAi）：RNA干扰是一种通过RNA分子抑制特定基因表达的方法。
PER转染剂可用于RNA干扰实验中，通过将siRNA（小干扰RNA）引入细胞内。
siRNA 是一种双链RNA分子，其中一个链通过PER转染剂与细胞膜结合，然后通过细胞摄取进入细胞质。
一旦siRNA被降解成单链小干扰RNA，它将与特定的mRNA靶点结合，使其降解或抑制翻译，从而达到抑制基因表达的效果。
这为基因的功能研究提供了重要工具。
4.蛋白质转染：除了核酸转染，PER转染剂还可以用于蛋白质转染。
这种转染方法主要应用于细胞外或胞内蛋白质递送研究。
PER转染剂能够与蛋白质相互作用，形成复合物，并通过细胞摄取进入细胞内。
这种方法可以用于给细胞表达特定蛋白质，从而实现对细胞功能的研究。
综上所述，PER转染剂在基因转染、表达载体转染、RNA干扰以及蛋白质转染等许多研究领域中发挥着重要作用。
per转染剂用途
per转染剂用途
Per转染剂是一种常用的实验试剂，主要用于将外源DNA导入细胞内。
它在基因转染和基因编辑等生物学实验中具有重要作用，可以用来研究基因功能、基因调控以及治疗基因缺陷疾病等方面。
Per转染剂的主要用途包括以下几个方面：
1. 基因转染：Per转染剂可用于将外源DNA导入细胞内，使目标细胞表达外源基因。
通过基因转染，研究人员可以研究目标基因的功能、调控和相互作用等。
2. 基因编辑：Per转染剂能够将CRISPR-Cas9系统所需的Cas9蛋白和sgRNA导入细胞内，实现基因组编辑。
经过合适的设计，研究人员可以利用Per转染剂将Cas9蛋白和sgRNA 导入细胞内，使其与目标基因特异性结合，然后使用Cas9蛋白对目标基因进行剪切或修复。
3. 基因治疗：Per转染剂可以帮助将修复或纠正基因突变的基因载体导入患者的细胞内。
这样，患者的细胞可以通过表达正常的基因来治疗基因缺陷引起的疾病。
这在基因治疗研究和临床实践中有潜在的应用前景。
总之，Per转染剂在细胞和基因研究领域中起着重要作用，可以实现基因转染、基因编辑和基因治疗等研究目的。
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蛋白质专用转染试剂
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● 多分子蛋白复合物（半乳糖苷酶四聚体，~465 kDa ）
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ProteoJuice 蛋白转染试剂
已成功转染的细胞：A549，COS-7，HepG2，MCF-7，PC12，BHK-21，CV-1，HEK-293，Neuro2A ，Raw 264.7，CHO-K1，HeLa L6，NIH-3T3
包装 货号
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71281-4
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Stratagene 的MS 级胰蛋白酶
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(所有的引物结合于同一条链)
3) 引物延伸，并用QuikChange Multi enzyme TM 封闭缺刻
第2步
Dpn I 消化模板DNA
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第3步 转化 将突变产物ssDNA 转入XL10-Gold 超级感受态细胞
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是亲和纯化得到的极高纯度产品，以冻干粉形式提供包装货号
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