头发中微量元素锌测定

头发中微量元素锌、铁的测定
——原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法（亦称原子吸收光谱分析法）是近几十年来发展起来的 一种微量分析新技术。其优点有：灵敏度高、准确度高、精密度高、可进行少量样 品的测定、方法简便、仪器设备简单操作方便。但也有不足之处：测定难溶元素的 灵敏度还不能令人满意、测定每个元素都需要该元素的空心阴极灯作为特征谱 线光源，对于同时测定样品中多种元素是非常不方便的。
1．恢复仪器面板各旋钮至初始位置，能量键必须按下。 2．关闭负高压电源开关后关闭空心阴极灯电源，最后关闭仪器总电源。 3．待燃烧器冷却后将燃烧器狭缝清洁干净，关闭排气扇，罩上仪器罩。 [分析方法及结果计算] 标准曲线法：原子吸收分析的标准曲线形状，斜率与线性范围，同光源、火焰 、单色器的分辨率以及分析线等因素密切相关，故必须选择最佳条件，并且它不 象比色法标准曲线恒定，因此在每次测定中都必须带有标准溶液进行校正。 用各标准溶液浓度作为横坐标，用各标准溶液的吸光度作为纵坐标，绘制标 准曲线。从标准曲线上查得样品溶液的吸光度所对应的标准溶液浓度，根据下面 公式计算样品中待测元素的含量。 样品中待测元素含量=查得浓度×定容体积（ml）/样品量（g） [评价] 头发样品中微量元素测定的因素影响较多，头发样品中微量元素含量亦受地 区、种族、年龄等很多因素影响。正常参考范围为：锌（100~260 μg / g），铜（6~18μg / g）。 对所测定发样的微量元素含量及取样人微量元素营养状况进行评价，并提出 改进意见，进行膳食指导或药物治疗。 [注意事项] 1．美容过的头发对微量元素如锌、铜、铅等分析结果影响较大，故美容过的 发样不宜采用。 2．发样最好存放在干净的纸袋中，写上编号和姓名，不宜用塑料袋。 3．洗涤的影响：洗涤剂、洗涤时间、温度和pH值。 4．所用的酸均为强酸，操作过程中应注意防腐。
元素灯
→
燃烧器
→ 单色光器 → 光电转换、放大器 → 检流计
（或石墨炉）
主要辐射光源
原子化器
波长选择器
辐射检测器
读数
[仪器]
1．WYX-9003型原子吸收分光光度计（锌、铁空心阴极灯）
2．WM-5型无油空气压缩机
3．乙炔钢瓶（或乙炔发生器）
4．三用水浴箱（37 ~100℃） 5．玻璃仪器
1000ml容量瓶 100ml容量瓶 1ml刻度吸管 2ml刻度吸管 5ml刻度吸管 10ml刻度吸管
景低。由于原子不必激发故化学干扰也小。因此原子吸收分光光度法在测量的精
确度和准确度方面都是比较理想的。
头发中的微量元素常与大量有机物结合共存，在生物样品中加入强氧化剂，
使发样中的有机物氧化分解，而待测物呈离子状态保存在溶液中。样品经消化后
，利用原子吸收分光光度计进行测定。
[原子吸收分光光度计的结构]
1．按如下要求选择最佳测定条件：
锌：波 长：213.8nm 空气流量：1.5 L/min 燃烧器高度：
灯 电 流： 乙炔流量：
标尺扩展：
光谱通带：
进 样 量：
增 益：
铜：波 长：324.7nm 空气流量：
燃烧器高度：
灯 电 流： 乙炔流量：
标尺扩展：
光谱通带：
进 样 量：
增 益：
2．调整灯位，精选波长，使透光率仪表指针达最高峰值。 3．转动增益旋钮使表针指示满度（用透光检验工具使透光率达到95%以上为 佳），按下消光键（常用消光1或2）此时指针应指示零点，如不指示零点可转动增 益细调旋钮调节至零点，反复调节满度和零点2~3次。 （3）点火 1．打开室内排气扇开关。 2．打开空气压缩机开关，将压力调节至2Kg/CM2。 3．检查清洁燃烧器狭缝，检查管道是否水封良好，废液管应插入水平液面下 。 4．打开助燃气（空气）针阀，调好雾化器（可事先调好，一般不再动）。 5．开启乙炔气钢瓶，打开燃气针阀，检查气路系统是否漏气，乙炔输出压力 不超过0.5Kg/CM2。 6．调整乙炔气体流量至所需混合比后，点燃气体，预燃5~10分钟，即可开始 测定。 （4）测定 1．用1%硝酸调整零点，反复数次。 2．由低浓度到高浓度依次测定标准溶液系列（锌、铜），并记录各标准溶液的 吸光度数值。 3．再次校对零点。 4．测定样品溶液并记录各样品溶液的吸光度数值。 （5）灭火 1．关闭乙炔燃气气阀，待自行灭火后关闭乙炔钢瓶。 2．关闭空气压缩机，放净汽缸内空气。 （6）关机
100ml烧杯
10ml具塞比色管
10ml具塞试管
漏斗 滤纸
实验所用玻璃仪器使用前必须先用（1+2）浸泡8小时以上，用去离子水反复冲洗 并晾干。
[试剂] 1．1%硝酸（特纯或优级纯） 2．1+1硝酸
3．盐酸（特纯或优级纯） 4．1+1盐酸 5．高氯酸（特纯或优级纯） 6．光谱纯铁、光谱纯锌 7．去离子水 8．乙炔气 [标准溶液的配制] 标准溶液可分为储备液和应用液，储备液可在冰箱中（4~7℃）保存较长时间， 应用液必须临用时配制。 1．标准储备液的配制： 锌标准储备液配制：用分析天平准确称取光谱纯金属锌1.0000g 溶解于20ml 1+1盐酸中，并用去离子水稀释到1000ml，此标准储备液1.00ml相当于1.00mg锌。 2．标准应用液的配制： 锌标准应用液配制：取25.00ml锌标准储备液配制，置于1000ml容量瓶中，用1 %硝酸稀释到刻度。浓度为25.00mg/L。 [操作步骤] 1．头发样品的采集：头发样品的采集应取距头皮头皮1~2cm近期生长的头发 ，取样部位应相对一致如枕部、颞部，以利于个体和群体间的相互比较。 2．头发样品的预处理： （1）发样清洗：将采集的发样剪成约0.5cm长，然后用1%洗涤剂中性漂洗浸泡 3~5分钟后，用自来水冲洗数次，然后用去离子水冲洗2~3次，凉干，置80~100℃ 恒温干燥箱中烘干备用。 （2）样品消化：在扭力天平上精确称取烘干的发样0.200g，放入具塞试管中， 加浓硝酸约1ml，高氯酸3滴，加塞放置过夜，同时做试剂空白对照。将经过放置
5．原子吸收分光光分析法的精确度影响因素较多，主要包括仪器条件的选择 、玻璃仪器的校准与清洁程度、水与试剂的纯度、样品的预处理以及工作环境等 。应严格控制实验条件，以免影响实验结果。
6．所用燃气为易燃易爆气体，使用中应严格遵守操作规程，乙炔钢瓶应放于 远离火源通风良好的地方，以免发生危险。
7．实验完毕一定要先关闭燃气钢瓶开关，等火焰熄灭后再关闭仪器上的气体 开关和空气压缩机。
8．测定过程中仪器零点有时发生漂移，应注意检查调整。 9．燃烧器经过使用后，会出现狭缝堵塞，火焰接近狭缝口的浅蓝色燃烧层出 现局部锯齿状，影响测定结果。可用单面刀片或滤纸条清除狭缝口两侧的沉积物 。
用1%硝酸定容至刻度
0
1.00 2.00 4.00 6.00 8.00
[仪器操作步骤] （1）开机
1．打开稳压电源使稳压电压稳定在220V。
2．开启仪器总电源开关及锌、铁空心阴极灯电源开关，逐渐调节至所要求的
灯电流。
3．预热20~30分钟后按下能量键，打开负高压开关。
（2）测试条件的选择
根据测定时的具体情况选择仪器最佳分析条件。
样品放入沸水浴中消化2~3小时，取出，冷却后加去离子水至10ml。过滤至另一试
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管中，与标准溶液一起在原子吸收分光光度计上测定锌、铁等微量元素含量。
2．标准系列溶液配制：
取25ml容量瓶6只，按如下步骤操作：
编号 标准应用液（ml）
浓度（μg / g）
0
1
2
3
4
5
0
1.00 2.00 4.00 6.00 8.00
[目的] 1．了解头发中微量元素测定原理。 2．掌握头发样品的采集、预处理方法及注意事项。 3．熟悉原子吸收分光光度法的原理。 4．熟悉原子吸收分光光度计的操作及注意事项。 [原理] 原子吸收分光光度分析，简称为原子吸收法，它所使用的仪器叫做原子吸收光谱 仪或原子吸收分光光度计，习惯上亦简称为原子吸收。火焰原子吸收分光光度法 是将经过预处理的样品溶液喷入火焰，待测元素的化合物解离出原子蒸汽，当由 空心阴极灯发射出的锐线光源（待测元素的特征谱线光辐射）经过原子蒸汽层时 ，该元素的基态原子对特征谱线产生吸收。在一定条件下，基态原子对特征谱线 光强度的吸收量与试样中被测元素的浓度成正比例关系。原子吸收法就是通过 测定基态原子对特征谱线的吸光度，并与标准溶液进行对照来计算出样品中被 测元素的含量。 原子吸收分光光度法对分析样品无需进行原子激发，仅将化合物热解离成基 态原子即可，这是测定中的有利因素。原子吸收分光光度法的发射光源（例如常 用的空心阴极灯）仅发射被测元素的特征光谱（锐线光谱），因而光谱干扰小、背