无机磷标准曲线
水质分析铁、磷标准曲线的绘制
一、试剂的配制:2M硫酸溶液:56mL浓硫酸溶于944mL蒸馏水中。
过硫酸铵溶液:12g过硫酸铵溶于500mL蒸馏水中。
钼酸铵溶液:钼酸铵在110℃烘干一个半小时,用电子天平称取7g,称准至0.001g,溶于约500mL蒸馏水中,加入0.2g酒石酸锑钾及80mL浓硫酸,冷却后用蒸馏水稀释至1000mL,摇匀,贮于棕色瓶中,保质期2个月。
抗坏血酸溶液:称取17.6g抗坏血酸溶于约500mL蒸馏水中,加0.2gEDTA 及8mL甲酸,用蒸馏水稀释至1000mL,贮于棕色瓶中,保质期1个月。
10%盐酸羟胺溶液:10g盐酸羟胺溶于90mL蒸馏水中,贮于棕色瓶中。
0.12%邻啡啰啉溶液:0.12g邻啡啰啉溶于40mL蒸馏水中,加热至80℃(77℃时拿下),使其溶解,稀释至100mL,贮存于棕色瓶中,暗处保存一周。
二、磷标准曲线:1、磷酸根标准溶液的配制:称取0.7165g预先在100~105℃干燥过的磷酸二氢钾(分析纯),溶于约500mL蒸馏水中,移入1000mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,静置≥12小时,此溶液1L含0.5g磷酸根离子,再吸取10mL此溶液移入250mL容量瓶中,用水稀释至刻度,此溶液1L含0.02g磷酸根离子(PO43-)。
m(KH2PO4) 0.7165gm(PO43-)=————————×M(PO43-)=———————×94.97 g/mol M(KH2PO4) 136.09g/mol=0.5g即1L溶液中,n(PO43-)=0.5g/L稀释 0.5g/L10mL———→250mL n(PO43-)=—————=0.02g/L251mL此溶液移入50mL容量瓶中,n(PO43-)=0.02g/L÷50=0.0004 g/L=0.4 mg/L2、磷标准曲线的绘制:用10mL吸量管移0mL,1mL(10~9),2mL(10~8),3mL(10~7),4mL (10~6),5mL(10~5)于50mL容量瓶中,浓度分别为0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0(mg/L)。
实验七:土壤无机磷的测定
实验七:土壤无机磷的测定一、实验方法及目的采用SMT法测定土壤无机磷;掌握土壤无机磷的测定方法及分光光度法。
二、实验原理1)样品的前处理:用1mol/L的HCL溶液将土壤中无机磷转移到提取液中。
2)提取液中正磷酸盐的测定:在酸性条件下,试液中的P(正磷酸盐)与钼酸形成配合物-磷钼杂多酸(又叫磷钼酸杂聚配合物)。
H3PO4 + 12H2MoO4 = H3P(Mo3O10)4 + 12H2O P多时呈黄色,少时无色在一定酸度下,加入还原剂后,杂多酸中的Mo 被还原,产生特殊兰色(钼兰),其中一部分Mo6+被还原成Mo5+或Mo3+,或Mo3+、Mo5+都有。
在钼兰的吸收光谱曲线中有两个吸收峰(660nm或880nm)。
测定时可以根据分光光度计的性能选用。
我国国标采用700nm波长。
三、实验仪器与药品1仪器:多用调速振荡器,离心机,分光光度计。
2试剂:1)1mol•L-1HCl溶液:准确移取83.3ml浓HCl溶于定容至1L;2)(1+1)硫酸溶液3)磷标准贮备液(50.0 μg.mL-1):称取0.2197±0.001g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4),用水溶解后转移至1000mL容量瓶中,加入大约800mL水、加5mL1+1硫酸用水稀释至标线并混匀。
1.00mL此标准溶液含50.0 μg磷。
4)抗坏血酸(10%):溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中,并稀释至100mL。
此溶液贮于棕色的试剂瓶中,在冷处可稳定几周。
如不变色可长时间使用。
5)钼酸盐溶液:溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24•4H2O]于100mL水中。
溶解0.35g酒石酸锑钾[KSbC4H4O7•½H2O]于100mL水中。
在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸(1+1)中,加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。
此溶液贮存于棕色试剂瓶中,在冷处可保存二个月。
6)过100目筛土样0.2g。
hj593-2010单质磷标准曲线
hj593-2010单质磷标准曲线一、概述hj593-2010单质磷标准曲线是针对磷元素测定的一种重要方法,适用于环境样品中磷的测定。
本标准曲线方法准确可靠,操作简便,在实验室广泛应用。
二、实验原理hj593标准曲线是通过一系列浓度梯度的标准样品,利用原子吸收光谱法、分光光度法或其他相关分析方法,绘制出磷元素的浓度与吸光度或荧光强度之间的关系曲线。
通过此曲线,可以对未知样品中磷元素的浓度进行测定。
三、实验步骤1.标准品准备:按照hj593规定,选取一系列不同浓度的磷标准样品,制备成标准工作液。
2.绘制标准曲线:将标准工作液逐个加入比色管中,设置浓度梯度,得到一系列标准样品溶液。
利用原子吸收光谱法、分光光度法等测定各溶液的磷含量,并记录数据。
根据吸光度或荧光强度与磷含量之间的关系,绘制出标准曲线图。
3.样品测定:将待测样品溶液加入比色管中,稀释至适当浓度,利用相同的方法进行测定,并在标准曲线上查找对应的磷含量。
4.结果计算:根据测得的磷含量,按照标准曲线所对应的计算公式,计算出待测样品的磷含量。
四、实验结果与分析根据实验数据,可以得出待测样品中磷含量的估计值,并与实际值进行比较,以评估实验结果的准确性。
实验结果与分析部分应包括对实验误差的分析与处理。
五、实验讨论与改进1.实验过程中可能存在哪些影响因素,如样品前处理、试剂纯度、仪器性能等,对实验结果产生何种影响?如何克服这些影响?2.在实验过程中,有哪些地方可以进一步优化和改进?比如,是否可以通过优化标准品制备过程、选择更合适的测定方法等来提高实验结果的准确性?3.实验结果与实际值存在较大差异时,应如何进行数据复核与确认?六、结论通过以上分析,可以得出以下结论:1.hj593标准曲线方法准确可靠,适用于环境样品中磷的测定。
2.在实验过程中,应注意控制各种影响因素,以提高实验结果的准确性。
3.如有需要,可以进行实验优化和改进,以提高实验效率。
总之,hj593标准曲线方法在磷元素测定中具有重要应用价值,通过掌握其原理、步骤、结果分析与改进等知识,可以更好地开展相关实验工作。
磷含量标准曲线
磷标液体积V(ml)1248
磷含量(微克)50100200400
吸光度0.0560.1370.2160.417
磷标准曲线绘制磷含量计算公式
y=0.0012x+0.0160随着所配试剂吸光度的变
x=y-0.016/0.0012=(1/0.0012)*y-0.016/0.0012
x=833.33y-13.33/100
x=833.33y-0.133
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算,得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
最后除以样品质量
2017.6.27上午
磷标液体积V(ml)0124
磷含量(微克)050100200
吸光度00.0690.1470.28
x=714.28y-0.714
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算,得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
2017.6.27下午
磷标液体积V(ml)0124磷含量(微克)050100200吸光度00.0990.1750.361
x=558.87y-1.22
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算,得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
16
800
0.776
量计算公式
随着所配试剂吸光度的变化,此公式只做参考用。
植物组织中无机磷含量的测定
目的意义磷参与植物体内多种代谢,促进碳水化合物的合成、转化和运输,施磷对提高作物产量和品质有明显的效果。
通过本实验掌握植物体内磷含量测定的方法及其原理。
一、实验原理测定磷含量的方法主要有磷钼蓝比色法(适宜含磷量较低)和钒钼黄比色法(适宜含磷量较高)等。
可直接用于植物组织可溶性磷的测定。
如用于植物材料全磷含量测定,需将材料用浓H2SO4—H202消煮转化为可溶性磷。
1.磷钼蓝比色法在适宜的酸性条件下,磷酸能与钼酸铵作用形成磷钼酸按,并被抗坏血酸或氯化亚锡等还原剂还原,生成蓝色的磷钼蓝,并在650 nm处有最大吸收蜂,其颜色深浅与含磷量成正比,可直接比色测定。
2.钒钼黄比色法待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸,溶液黄色的深浅与磷酸含量成正比,生成物在440nm波长有吸收高峰。
可用比色法定量磷。
此法的优点是黄色稳定,对显色条件要求不十分严格,操作简便,干扰物少,灵敏度较低,工作范围随选用的吸收波长而异。
选用波长(nm)400nm 440nm 470nm 490nm测磷工作范围(mg/g)0.75-5.5 2.0-15 4-7 7-20二、材料、设备及试剂1.材科玉米、接骨木、瓜类、葡萄等幼苗;各种植物的根、茎、叶、种子及全株过60-80目筛干粉。
2.设备电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、漏斗、小纸等。
3.试剂(1)2.5%钼酸铵溶液称取(NH4)2M o O4鸣’25g用蒸馏水溶解并定容至1000ml。
(2)10mg/L磷标准液精确称取烘至恒重的分析纯KH2PO40.4398g加蒸馏水溶解定容至1000m1,摇匀;取此液10ml定容至100ml即为10mg/L磷标准液。
(3)10%抗坏血酸溶液(现用现配)。
‘(4)定磷试剂按下列顺序及比例将各试剂混合即成。
蒸馏水、6mol/L硫酸、2.5%钼酸铵、10%抗坏血酸按2:1:1:1(体积比)混合,贮于棕色瓶内。
若变为棕黄色即不能使用。
无机磷测定方法
无机磷的测定方法1.1 原理在酸性条件下,无机磷酸与钼酸作用生成黄色磷钼酸铵,再用适当还原剂还原成深蓝色的钼蓝。
磷含量越高所形成的钼蓝物质越多,蓝色就越深,用分光光度计在650 nm处测吸光度,通过计算就能得知溶液中无机磷的含量。
1.2 试剂配制磷试剂Ⅰ:A称取钼酸铵24 g,用适量纯化水溶解,稀释至240 mL;B将360 mL浓硫酸缓慢倒入240 mL纯化水中;将A和B混匀,贮存于棕色玻璃瓶中。
磷试剂Ⅱ:称取米吐尔0.8 g,无水亚硫酸钠4 g,溶于40 mL纯化水中;称取重亚硫酸钠176 g(或亚硫酸氢钠),溶于760 mL纯化水中,两溶液混合后过滤,滤液贮存于棕色玻璃瓶中,避光保存。
10%三氯醋酸:称取三氯醋酸100 g,加纯化水溶解,稀释至1000 mL。
备注:配制本岗位各种溶液均用分析纯试剂,各试剂开瓶1年后不得再使用。
1.3 标准曲线的绘制精确称取于105℃烘箱干燥3 h的KH2PO4 0.4394 g于1000 mL容量瓶中,加入20 mL 0.05 mol/L H2SO4,加纯化水至刻度(即得磷浓度为100μg/mL的标准溶液,贮棕色瓶中备用)。
吸取10 mL至100 mL容量瓶中,加纯化水至刻度使成10 μg / mL,作为标准液。
分别吸取标准液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL于25 mL容量瓶中,加磷试剂Ⅰ、Ⅱ各1 mL,加纯化水使成10 mL,在沸水浴中加热30 min,取出冷却后加蒸馏水至刻度,摇匀,用721型分光光度计在650 nm处测定吸光度,用纯化水作空白对照,以吸光值为横坐标,磷浓度为纵坐标作标准曲线备用。
1.4 测定步骤吸取样品离心上清液5 mL于50 mL容量瓶中,加入10%三氯醋酸溶液10 mL,沸水浴中加热7 min,加纯化水至刻度,摇匀、过滤。
吸取滤液2 mL于25 mL容量瓶中,加磷试剂Ⅰ、Ⅱ各1 mL,再加纯化水6 mL,摇匀,在沸水浴中加热30 min后取出冷却,补加纯化水至刻度,摇匀,用721型分光光度计在650 nm处测定吸光度,用纯化水作空白对照。
2421-2013 磷 标准曲线
2421-2013 磷标准曲线磷是生物体中不可或缺的元素,它在植物和动物的生长发育中发挥着重要的作用。
然而,磷的过量排放会导致水体富营养化,严重影响水生态环境的稳定性。
监测和控制水体中磷的浓度是环境保护和水质管理的重要任务之一。
根据《水和废水监测分析方法》中的规定,2421-2013《水质监测第4部分:总磷的测定高分子物质亮光消解-分光光度法》是用于测定水体中总磷含量的标准方法之一。
该标准方法主要适用于地表水、地下水、饮用水、污水和工业废水等水体样品的监测和分析。
其中,磷的测定是通过高分子物质亮光消解-分光光度法进行的,该方法具有操作简便、准确度高、灵敏度强等特点。
2421-2013标准还规定了磷标准曲线的构建和应用。
磷标准曲线是通过一系列已知浓度的磷标准溶液测定其吸光值,进而构建磷浓度与吸光值之间的线性关系曲线。
通过这条标准曲线,可以将未知水样的吸光值对应到磷浓度,从而准确地测定水样中磷的含量。
建立2421-2013标准曲线的步骤如下:1. 准备磷标准溶液。
根据实际需要,配制一系列不同浓度的磷标准溶液,覆盖待测样品中磷浓度的范围。
要求标准溶液的制备精确、浓度准确。
2. 测定磷标准溶液的吸光值。
使用高分子物质亮光消解-分光光度法,分别对各个磷标准溶液进行吸光值的测定。
3. 绘制标准曲线。
将磷标准溶液的浓度作为横坐标,吸光值作为纵坐标,在坐标纸上绘制出浓度与吸光值之间的线性关系曲线。
通常情况下,经过线性拟合,可以得到一条斜率和截距均为已知数值的直线。
4. 验证标准曲线。
用一定浓度的磷标准溶液对标准曲线进行验证,检查曲线的线性程度和预测精度等指标。
2421-2013标准曲线的应用主要包括以下几个方面:1. 测定未知水样中的磷含量。
将未知水样的吸光值代入标准曲线方程,即可计算出该水样中磷的浓度。
2. 质量控制和质量保证。
标准曲线可以用于对测定结果的准确性进行验证,确保实验数据的可靠性。
3. 比较不同水样中磷的含量。
核酸的定量测定-定磷法
3. 苔黑酚(地衣酚)法:用于测定RNA的含量 RNA与浓盐酸共热, 降解形成的核糖转变为 糠醛,后者与地衣酚(3,5-二羟甲苯)作用生成 绿色化合物,在670nm处有最大吸收,RNA浓 度在10~100微克/毫升范围内,光密度与RNA的 浓度成正比关系。
注意事项: 1.地衣酚反应特异性较差,凡戊糖均有此反应,DNA及 其他杂质也有影响。故一般测定RNA时,可先测定样品 中DNA含量,再算出RNA含量。 2.本法较灵敏。样品中蛋白质含量高时,应先用5%三氯 醋酸溶液将蛋白质沉淀后再测定,否则将发生干扰。
钼兰(Mo4+)兰色
钼兰在一定浓度范围内(无机磷含量在1—25μg范围内)。兰色的深浅和磷酸的含 量成正比(660nm),可用比色法测定其光吸收值。 1、标准曲线的制作 2、总磷的测定 3、无机磷的测定
▪用强酸使核酸分子中的有机磷消化成无机磷
▪无机磷再与钼酸铵结合成磷钼酸铵。 PO43- + 3NH4 + + 12MoO4 2- + 24H+ (NH4)3PO4· 12MoO3· 2O↓(黄色)+6H2O 6H ▪ 当有还原剂存在时,Mo6+被还原成Mo4+,此4价钼再 与试剂中的其它MoO42-结合成Mo(MoO4)2或Mo3O8呈兰 色,称为钼兰。
倒入容量瓶,再加水至刻度。
混匀后,吸取3.0ml置于试管中,加定磷试剂3.0ml,摇匀, 45℃保温15分钟,冷却。测其A660nm。
3、无机磷的测定 吸取样品液(2mg/1ml)1.0 ml,置于100 ml容 量瓶中,加水至刻度,摇匀后,吸取3.0 ml置于试 管中,加定试剂3.0 ml,45℃水浴保温15分钟,冷 却,测其光吸收值。
优点:简单、快速、灵敏度高(可达3μg/ml的检测水平)。 缺点: 受蛋白质和核苷酸的干扰影响。
磷标准溶液配制方法和标准曲线
磷标准溶液配制方法和标准曲线嘿,咱今儿就来讲讲磷标准溶液配制方法和标准曲线这档子事儿!你知道吗,这磷标准溶液就像是个神奇的魔法药水,调配得好那可是大有用处。
先来说说怎么配制吧。
咱得准备好各种材料,就像厨师准备食材一样。
要有高纯的磷化合物,这可是关键的原料呢!然后呢,精确地称取一定量的磷化合物,这可不能马虎,得像给宝贝称体重一样仔细。
把称好的磷化合物放到容量瓶里,就像给它找了个舒适的家。
接着加入适量的溶剂,慢慢摇匀,让它们充分融合。
这时候,你就仿佛能看到那些磷分子在瓶子里欢快地跳舞呢!这就是磷标准溶液的初步配制啦。
那标准曲线又是啥呢?这就好比是给磷标准溶液画了一幅专属画像。
咱通过一系列不同浓度的磷标准溶液,然后用特定的方法去测量它们的响应值。
嘿,这不就像给它们拍了一组照片嘛!把这些浓度和响应值对应起来,连成一条线,这就是标准曲线啦。
想象一下,这标准曲线就像是一条指引我们的路,让我们能根据测量的结果,准确地找到对应的磷含量。
它就像一把神奇的钥匙,能打开磷含量这个神秘大门。
在配制和绘制的过程中,可千万别掉以轻心啊!每一个步骤都得小心翼翼,就跟走钢丝似的,稍微有点偏差可能就前功尽弃啦。
比如说,称取的时候多了一点或少了一点,那后面的结果还能准吗?那肯定不行呀!而且,操作的时候还得注意环境条件呢,温度啦、湿度啦,这些都可能会影响到最终的效果。
就像天气会影响人的心情一样,环境对磷标准溶液和标准曲线也是有影响的哟!咱再回过头来看看配制方法,是不是感觉挺有意思的?其实这当中的学问可大着呢!只有掌握了正确的方法,才能配出好用的磷标准溶液。
总之呢,磷标准溶液配制方法和标准曲线这事儿,看似简单,实则暗藏玄机。
得用心去琢磨,去实践,才能真正掌握其中的奥秘。
咱可不能小瞧了它,这可是在化学领域里非常重要的一部分呢!大家可得好好对待,让它为我们的实验和研究发挥出最大的作用呀!。