豫马铃薯茎尖组织培养脱毒体系的建立
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点#亚龙组培分享#
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点在马铃薯栽培过程中，植株的逐年变小,叶片皱缩卷曲，叶色浓淡不均，茎块变形龟裂，产量逐年下降等现象。
就表明马铃薯已经发生“退化”,种薯“退化”是其产量降低和商品形状变差的主要原因。
科学家经过对马铃薯“退化”深入的研究，最终明确了病毒的侵染及其在薯块内积累是马铃薯“退化”的主要原因。
目前应用最广泛而且在农业生产和商业生产中取得巨大成功的植物脱毒技术，是生物技术中的植物茎尖分生组织培养脱毒技术，也就是马铃薯脱毒种薯生产中常说的“茎尖脱毒”，此项技术是根据植物细胞全能性学说、病毒在植株体内分布不均匀及茎尖分生组织带毒少的原理，结合使用钝化病毒的热处理方法，通过剥取茎尖分生组织进行培养获得脱毒植株，从而获得脱毒马铃薯。
现将马铃薯茎尖组织培养脱毒技术介绍一下，仅供参考。
@亚龙组培1.马铃薯茎尖组织培养脱毒技术1.1选择优质健康的材料田间选择要注意这样几方面的事项:所选的植株必须是表现典型的本品种特性的植株，符合准备脱毒品种的特征包括株型、叶形、花色等植物学性状及成熟期等农艺性状；植株生长健壮,无明显的病毒性、真菌性、细菌性病害症状;单株产量和大薯率高，适时早收，选择符合品种特性,无病斑、虫蛀和机械创伤的大薯块。
1.2 选择培养基一般MS培养基适用于大多数双子叶植物,B5和N6适合大多数单子叶植物,马铃薯茎尖培养基以MS+GA30.05mg/l+6-BA0.5-0.1mg/l+NAA0.1-0.2mg/l+2%蔗糖+0.9%琼脂效果比较好。
1.3 剥离和接种将薯块经渡过休眠后进行室内催芽,待芽长至1～2cm还未展叶时,将芽剪下,然后将其放入烧杯,用纱布封口,在自来水下冲洗半个小时,取出放到操作台上进行消毒。
消毒方法是将芽在75%的酒精中过一遍(约20秒),然后用次氯酸钠溶液稀释为2%～3%,浸泡2分钟,然后用无菌水清洗3～5次。
将消毒过的芽放在垫有吸水纸的培养皿上,每次消毒的芽不要太多,以防放置时间过长,茎尖褐变(消毒过程中所用器具均已事先高温灭菌)。
植物组织培养脱毒快繁技术在马铃薯育种中的应用
植物组织培养脱毒快繁技术在马铃薯育种中的应用摘要：脱除病毒是植物组织培养深入探讨研究中的一个技术难题。
本文简要介绍植物组织培养的基本原理和方法，综述植物脱除病毒的热处理、茎尖培养和抗病毒药剂三种方法的原理和技术方法，介绍了几种常用的病毒检测方法。
本文以马铃薯为例，重点介绍了利用热处理加茎尖组织培养法获得马铃薯脱毒苗的具体技术方法，脱毒率可达100%。
同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。
关键词：茎尖培养，脱毒快繁技术，病毒检测，应用前景.1．脱毒技术及其原理植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物，脱除病毒得到无毒苗株，继而在大田快速繁殖的技术。
脱毒及离体快繁，是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。
现在植物的脱毒技术有多种，其中应用最广泛的有三种：热处理法、茎尖培养脱毒法、抗病毒药剂法，将不同的方法相结合起来应用效果更好。
1.1 热处理法1.1.1 概述热处理法是利用病毒和寄主植物对高温的忍耐性的差异，使植物的生长速度超过病毒的扩散速度，得到一小部分不含病毒的植物分生组织，然后进行无毒个体培育。
热处理可通过热水浸泡或湿热空气进行。
热水浸泡对休眠芽效果较好，湿热空气对活跃生长的茎尖效果较好，既能消除病毒又能使寄主植物有较高的存活机会。
热空气处理比较容易进行，把旺盛生长的植物移入到1个热疗室中，在35~40℃下处理一段时间即可，处理时间的长短，可由几分钟到数月不等[3] 。
热处理的方法有恒温处理和变温处理，处理的材料可以是植株，也可以是接穗。
1.12原理热处理脱毒是根据病毒与寄生细胞对高温的忍耐程度不同，选择适当的温度和处理时间，植物组织中的很多病毒被部分地或完全地钝化而可控制其的活动，但很少伤害甚至不伤害寄主组织，从而让植物细胞加快生长，使生长点附近不带病毒，从而达到脱毒的目的。
1.2 茎尖培养脱毒法1.2.1 概述茎尖培养脱毒就是采取茎尖分生组织离体培养的方法获取无病毒试管苗，其方法是在解剖镜下，用解剖刀进行迅速准确地茎尖剥离，因为茎尖分生组织基本不带病毒，利用植物茎尖分生组织进行离体培养，再结合病毒检测，就可以获得无病毒的植株。
浅谈马铃薯脱毒种薯生产繁育技术
浅谈马铃薯脱毒种薯生产繁育技术【摘要】本文简要叙述了组织培养生产马铃薯脱毒试管苗以及脱毒种薯的发展情况以及生产方式。
通过试验总结出简单易行、低成本、高效益、高质量的原原种生产技术及主要经济指标。
【关键词】马铃薯;组织培养;原原种;经济指标0.前言根据马铃薯脱毒种薯国家标准的定义，原原种是指用脱毒苗在容器内生产的微型薯和在防虫网室、温室条件下生产的符合质量标准的种薯或小薯。
大量资料及研究表明在网室内生产脱毒原原种的方法，简单易行，且成本低，质量高，易操作并有很好的经济效益。
1.研究内容1.1马铃薯脱毒种薯生产技术发展情况在容器内生产原原种，是通过组织培养诱导产生微型薯。
由于隔离好，单位空间内的繁殖倍数高，又不受季节限制，可在短期内生产大量的合格微型薯。
但是微型薯体积小，生理状态差异较大，休眠期长，不易保存，必须使用育苗等措施，否则较难在田间直接利用。
而且成本高，效益低，技术性强，不容易掌握。
用脱毒苗扦插在温室的特殊基质上生产微型原原种，大多数采用蛭石或人工筛土为基质。
由于用喷施营养液的方法促进生根和发育，还可以控制温度和光照，因此生产周期短，单株块茎多，重量均5g左右。
但基质中易残留多余的无机盐，对下茬的产量和质量均有较大影响，需要1-2年就更换基质一次，成本较高。
大量资料及研究表明在网室内生产脱毒原原种的方法，简单易行，且成本低，效益好，质量高，易操作。
1.2组织培养生产马铃薯脱毒试管苗及原原种生产体系1.2.1脱毒试管苗的培养(1)茎尖组织培养与检测。
已经明确引起种薯退化、减产的主要病毒有PVX、PVY、PVS、PLRV 和类病毒PSTV以及细菌病害。
脱毒试管苗由茎尖组织培养获得，经过严格的病毒、类病毒、细菌病害的检测。
一般选用健壮植株的顶芽或块茎萌发的顶芽为外植体，借助解剖镜剥取0.2mm大小的生长点，接种在MS+IAA0.1mg/L+KT0.1mg/L培养基上培养，成苗后对其进行检测筛选。
马铃薯脱毒种薯中原北方两地三级繁育体系的建立
等省份 ， 由于 马铃薯 二季作 区生 育期 间要经 历高 温 、 多
蚜等利于病毒病发生、 积累和传播 的时期 ， 这使得马铃
薯 在 当地 建立繁 育体 系十 分 困难 如何 打破 气候条 件
高 寒地 区得 天独厚 的繁育 条件 ．建 立 了中原北 方两地 三 级脱毒 种薯 繁育体 系 。体系 流程见 图 Ｉ 。
【】 ２陈中赫 ， 刘敬娟 ， 贾德涛． 玉米 自交系铁 Ｃ ６ ５ ２的选育及应用． ８０ — 中国
种 业 ， ０ ８ ８６ ～ ３ ２０ ，： ６ ２
［】 伟 政 ， 万 志 ， 韶 ， ． 米 自交 系铁 ０ ５ ３高 张 徐 等 玉 ２ ５选 育 研 究 ． 国种 业 ， 中
２１，６ ４ ００４ ３６ ：
一
马铃薯为异 源四倍 体植物 ．遗传 规律较 为复杂 ． 通
过 杂交 育种选育 出优 良品种相对 而言 比较 困难 。 许多优 良的马铃 薯品种一旦育 成在生产 中应 用 的时 间较长 ： 另
一
Байду номын сангаас
代 原种 的产 量较低 ， 产效率 低下 。③ 管理 困难 ， 生 繁
育质 量难 以保 证 。农 民为 了降低投人 ．网棚选择 规格
综 上所 述 ．铁 ９ １ ３ １ 一 个 优 良的 玉米 自交 ８０ — 是 系。 利用美 国种 质资源选 育 的二环 系 ． 与我 国常用 的骨 干 系杂 交 ， 以选 育 出具 有一定 增产 潜力 的杂交 种 ： 可 同 时也 能够拓 宽我 国玉米 种质基 因库 ．推动 我 国玉米 育
呻 种业 阁
育 制 繁 种
马铃薯脱霉种薯中原： 两地三级繁育体系的建豆 ＝ ｌ 匕
马铃薯组织培养简化脱毒技术
马铃薯组织培养简化脱毒技术
马铃薯是我国重要的蔬菜作物之一，具有高蛋白、高淀粉、高营养价值，是人们必不
可少的食品之一。
然而，在种植和生产过程中，马铃薯会遭受各种病害和虫害的侵害，如
果不进行科学有效的防治，将会严重影响马铃薯的生产和收成。
其中，病毒病是马铃薯种
植中主要的一种病害，如果不及时控制，将对马铃薯产生较大的危害。
为了解决这个问题，科学家们开发了一种名为“组织培养简化脱毒技术”的方法，该
技术可以有效地使马铃薯保持无病毒状态，同时提高其种植质量和产量。
组织培养简化脱毒技术是一种采用组织培养和简化脱毒技术相结合的马铃薯繁殖方法。
该方法要先从健康的母株中取出组织，再将其在营养剂和生长抑制剂的作用下进行培养，
使其形成小植株，再进行脱毒处理，最后将其移栽到田间进行种植，达到规模化繁殖的目的。
这种技术的主要优点在于其快速、高效、节约的特点。
与传统的马铃薯种植方法相比，组织培养简化脱毒技术可以迅速获得种植质量稳定、无病毒、高产的马铃薯，并且可以大
大降低种植成本。
但是，组织培养简化脱毒技术也具有一定的局限性。
首先，它需要高水平的技术人员
操作，普通农民应用难度较大；其次，它的操作过程需要比较严格的环境和设备控制，对
研究条件提出了较高的要求；再者，该技术的成功率也与所选用的材料有关，在选材上也
需要有比较严格的要求。
总之，组织培养简化脱毒技术是一种非常有效的马铃薯繁殖方法。
它可以为农民提供
更为优质的马铃薯种苗，并且可以大大提高马铃薯的种植效益，但是该技术在操作和选材
上都存在一定的难度，需要科学家们进一步研究和优化。
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究
危害马铃薯的病毒有30种之多，如 X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A 病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒 等。由于马铃薯是无性繁殖作物， 病毒逐代积累，日益严重，引起严 重退化。马铃薯病毒可使块茎产量 减少50%~80%。
一、马铃薯脱毒技术:
马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染， 当条件适合时，病毒就会在植株内增殖， 转运和积累，随着世代传递，病毒危害 逐年加重，一般可造成减产50％以上。 研究发现，有30多种病毒易感染马铃薯， 并引起品种退化，严重影响马铃薯的生 产。通过微茎尖组织培养技术能从马铃 薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、 PVG、PVM、PSW等病毒。
因此，采用组织培养技术，通过一 定良种繁殖体系，生产优质种薯， 是保证马铃薯高产、稳产的一项有 效措施。
1．脱毒种薯生产程序
采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗， 采用联免疫吸附试验法或指示植物方法 鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后， 无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱 毒试管基础苗。
试管基础苗在无菌条件下，采用固体、 液体培养基相结合的方法，进行扩繁基 础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插， 生产出原原种（或称脱毒小薯）。用原 原种在一定隔离条件下产生原种1代， 以后逐级称为原种2代、良种1代、良种 2代。
培养条件：温度21~25℃、光量20003000 lx(勒克斯)、光照12h/d。 2-3周愈伤，4-5周绿点，3--6月长成2-3 厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。
（2） 继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒） 鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次） 鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩 繁。取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体 培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左 右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁 殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗 多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体 培养。
马铃薯茎尖脱毒及脱毒苗快繁技术操作规程
目录1 茎尖脱毒技术操作规程 (1)1.1 设备条件 (1)1.1.1 试剂配置室 (1)1.1.2 洗涤及灭菌室 (2)1.1.3 无菌室 (2)1.1.4 培养室 (2)1.2 材料的选择 (2)1.3 类病毒和病毒的检测 (2)1.3. 1 类病毒的检测 (2)1.3.2 病毒检测 (9)1.3.3 脱毒材料热处理 (13)1.4 培养基的制备 (13)1.4.1 培养基母液配制 (13)1.4.2 培养基配制 (15)1.5 外植体灭菌 (17)1.6 茎尖剥离前消毒 (17)1.7 茎尖剥离与接种 (17)1.8 培养 (17)1.9病毒检测筛选脱毒苗 (17)1.10 品种典型性鉴定 (18)2 脱毒苗快繁技术操作规程 (18)2.1 茎切段培养基繁殖 (19)2.1.1 扩繁前的准备工作 (19)2.1.2 茎切段和接种 (19)2.1.3 培养 (19)2.2 扦插苗扩繁 (21)2.2.1 培养基础苗 (21)2.2.2 基础苗移栽 (21)2.2.3 基础苗剪切 (21)2.2.4 基础苗切段后的管理 (22)2.2.5 扦插苗 (22)2.2.6 扦插苗管理 (23)马铃薯茎尖脱毒及脱毒苗快繁技术操作规程1 马铃薯茎尖脱毒技术操作规程马铃薯健康种薯的生产方法主要有利用茎尖脱毒快繁技术生产无病毒种薯、田间系选生产良种和实生种子生产无毒实生薯等，其中植物茎尖分生组织培养脱毒技术（即茎尖脱毒）在实际的农业生产中应用最为广泛并取得了巨大成功。
茎尖脱毒技术是根据病毒在植物体内分布不均和茎尖分生组织带毒少的原理，结合使用钝化病毒的热处理方法，通过剥离茎尖分生组织进行培养获得脱毒植株。
这一技术具有周期短、效率高、能与组织培养快速繁殖相结合等特点。
目前除一些类病毒外，绝大多数植株病毒都可以通过茎尖脱毒技术进行脱除。
经茎尖分生组织培养获得的植株经病毒检测并确认其不带病毒后可进一步利用，对仍带有病毒的株系进行淘汰或再脱毒。
马铃薯茎尖脱毒技术简介
品基地大气质量标准,灌溉水清洁无污染,符合无公害农产品基地水质标准。
土壤符合无公害农产品基地土壤质量标准。
田间管理的主要技术措施有:一是查田补苗。
当甜玉米长到3~4叶期时,间苗和移苗补缺,移苗时要带土,栽后即浇水,最好在傍晚或阴天进行。
5叶期定苗,每穴留1株,并结合追肥中耕除草。
拔节期至大喇叭口期前培土(耥)。
合理排灌,苗期土壤水分在持水量的50%~60%时,可不灌水。
拔节以后土壤水分应保持在持水量的70%。
甜玉米多具分蘖、分枝特性,为保证果穗产量和等级,应及早除蘖打杈,尽量避免损伤主茎及叶片。
分别在拔节期、抽穗扬花期与灌浆期各进行一次追肥。
二是做好虫害的防治工作。
甜玉米植株比普通玉米甜,极易招致玉米螟、金龟子、蚜虫等害虫,因此,必须抓好苗期害虫和中后期玉米螟的防治。
为了防止食物中毒,在中后期要慎用农药,授粉后要用生物防治虫害,尽量少用化学农药,决不能用残效期长的剧毒高毒农药。
防治地下害虫,每亩用3%米乐尔颗粒剂5千克,混细砂在播种沟撒施;防治玉米螟可在大喇叭口期接种赤眼蜂卵块,用杀螟杆菌、白僵菌粉等灌心叶。
药剂防治在抽雄前、花叶率达10%时为防治适宜期,可用80%敌敌畏乳油2500~3000倍液,每株10~15毫升灌心,防治效果达85%以上,并可兼治玉米蓟马。
用菊酯类农药制成毒土或稀释液灌心,效果也是比较理想的一种方式。
三是及时做好人工辅助授粉与去雄工作。
散粉期人工辅助授粉,可使籽粒饱满,如果在散粉期遇到连续阴雨时就更要加强人工辅助授粉。
为减少养分消耗,在授粉结束后,可把雄穗全部剪去。
除此之外,当甜玉米大部分进入抽穗时期,会出现一株多穗现象,不及时去除会导致果穗不大且发育不良,影响商品价值,及时适当剥去多余的小穗就成为提高产量与果穗商品品质的关键措施。
甜玉米的最佳采收期,当玉米果穗在吐丝后22~25天含糖量最高,皮最薄,最适宜采收。
过早、过晚收获,都会影响甜玉米的品质和口味。
同时,甜玉米加工出售时,宜用水蒸气蒸熟,千万不要水煮,以免甜玉米品质下降。
马铃薯茎尖脱毒组培的理论依据及技术要点
马铃薯茎尖脱毒组培的理论依据及技术要点脱毒马铃薯具有很大的增产潜力，应使其尽快应用于生产。
马铃薯是以块茎作为繁殖器官举行无性繁殖，在育种上是采纳有性杂交、无性繁殖的程序。
首先按照育种任务挑选性状符合要求的亲本，举行杂交授粉。
采得实生种子后，播种育苗，从杂种实生苗中挑选符合育种任务的、综合性状优良的单株举行单独心得，再用其块茎举行无性繁殖。
在无性系里经比较、鉴定并继续挑选，直至挑选出适合在生产中推广的优良品种。
因为马铃薯经杂交后均采纳块茎举行无性繁殖，不再经过有性世代，所以目前生产中推广的优良品种均为杂种一代。
因为马铃薯在其无性繁殖过程中易受病毒感染，病毒随着无性世代在块茎中堆积，导致马铃薯病毒性退化，失去原有种薯的技术讨论，此项技术已在国内举行了推广。
脱毒种薯在国内生产上已大面积应用。
但在无性繁种过程中，还会受到病毒的再侵染，因此要在繁种过程中实行措施举行预防。
下面将马铃薯茎尖脱毒组培技术及马铃薯良种繁育技术作一介绍。
寄生在马铃薯块茎中的病毒，随着块茎芽眼萌发长成植株的生长过程，也在马铃薯植株体内举行病毒粒子的复制繁殖，但病毒在马铃薯植株内的分布是不匀称的。
据讨论，在代谢活跃的茎尖分生组织中没有病毒。
可能是因为茎尖分生组织中的细胞分裂速度很快。
超过病毒粒子的复制速度，使病毒粒子在复制过程中得不到养分而受到抑制。
也可能是因为分生组织中某些高浓度的激素抑制了病毒。
以上缘由的机理尚未搞清，但利用对茎尖(带有l～2个叶原基，小于0.2毫米)组培苗举行病毒检测末发觉带有病毒，而大于0.2毫米的茎尖却常能检测出病毒。
这点便成为茎尖脱毒组培繁殖无病毒株的重要依据。
马铃薯脱毒技术就是通过茎尖部分没有病毒的特性、利用延续切茎尖，在无菌环境条件下，通过人工配置的培养基，哺育出无毒试管苗，然后通过试管苗在防虫温室或网室内繁殖微型薯原原种。
在人工隔离或自然隔离条件下，通过原原种繁殖一级原种和二级原种。
二级原种在自然隔离条件(高纬度或高海拔冷凉地区、风速大的海岛等地)繁殖一级良种供生产中使用。
马铃薯微茎尖培养脱毒快繁技术
５１ 瓶 苗污 染 与 环 境 污 染 。① 培 养 基 及 使 用 器械 ．
灭 菌不 彻底 。② 外植 体 消毒不 彻底 或封 口不严 。③
操 作人 员不遵 操 作规程 。④ 无 菌操 作 和培 养环 境 不 清 洁 。⑤ 超净 工 作 台过滤 装置 失 效或 培养 容器 破损
以及 盖 子 口径 过大 。 ５２ 污染 的预 防措施 ．
关 键词 ：马铃 薯 ：组 织培养 ：脱毒 ；快繁
１ 脱毒前 的 准备
１１ 工 具 准 备 。７ ％ ～７ ％酒 精 、２ ． ０ ５ ％次 氯 酸 钠 溶 液 或 ０１ ～１ ． ％ ％升 汞 溶 液 、无 菌 水 、 手 表 、玻 璃
棒 、废 液缸 、解刨 刀 、镊 子 。
１ 培养 基准 备 。培 养基 ＭＳ＋ Ｎ ００ ／ ． ２ ＡＡ ．ｌ Ｌ＋ ｍｇ ６Ｂ Ｏ１ － Ａ ． ｍ Ｌ＋蔗 糖 ３ Ｌ＋琼 脂 ５ ／ （Ｈ 值 Ｏ ．５ｇ ｐ Ｌ
消毒 的无 菌纸 上吸干 水分 。
３ 茎 尖剥 离及诱 导培 养
在超 净工 作 台上 ，在 带 有适 当 光源 的解 剖镜 （ ８
～
５２１ 灭菌 。培养 基 以及 接种 过程 中使 用 的所 有 器 ．． 械 必须 在高压 灭菌 锅 里进 行灭 菌 。需注 意 ： 火菌 要 彻 底 。锅 内需 灭 菌 的培 养 基不 能堆 放 过满 。升 温和
马 铃 暮 徵 茎 尖 培 养 脱 毒 快 繁 技 术
摘 要 ：马铃 薯 生 产 中 多采 用 块 茎进 行 无性 繁
苗 ，用 清 水 洗 去 附着 于根 部 的 培养 基 ，动 作 要轻 ， 应避 免造 成伤 根 ，然后 栽入 准备 好 的基 质 中 。尽 量 不要 弄伤 植株 ，然 后把 苗周 围的基质 压 实浇透 水 。 ４３ 移栽 后 的管理 －
马铃薯茎尖超低温保存及超低温疗法脱毒技术体系的建立
马铃薯茎尖超低温保存及超低温疗法脱毒技术体系的建立植物种质资源的收集和保存是新品种选育的前提条件。
超低温保存被认为是植物种质资源长期保存最理想、最有效的方法。
马铃薯(Solanum tuberosum)是全球及中国第四大粮食作物。
国际上,马铃薯茎尖的超低温保存自上世纪70年代以来已有大量的研究。
马铃薯种质资源的超低温基因库已在国际马铃薯中心和德国建立,并投入应用。
中国是世界上马铃薯生产第一大国。
马铃薯茎尖超低温保存的研究起步晚,到目前为止仅有四例报道。
马铃薯病毒病害是制约马铃薯优质、高产的关键因素之一。
带毒种薯可导致马铃薯减产30-50%。
无毒化栽培是目前生产上防治马铃薯病毒病害最有效的方法,脱毒技术是生产无毒苗的关键技术。
茎尖培养被广泛用于马铃薯脱毒,但是茎尖培养取材困难、脱毒率低。
最新的研究表明,茎尖超低温疗法能有效地脱除包括病毒在内的病原菌,已成为一项新的脱毒技术。
有关马铃薯茎尖超低温脱毒仅有一例报道。
本研究旨在建立广谱高效的马铃薯茎尖超低温保存技术体系,为马铃薯种质资源超低温库的建立奠定基础,并以马铃薯茎尖超低温保存技术为平台,开展超低温疗法脱除马铃薯病毒的研究。
本研究以中国主栽马铃薯品种“紫花白”为试材,通过优化影响小滴玻璃化法(droplet-vitrification)超低温保存成活与植株再生的关键因素,成功地建立了中国马铃薯离体茎尖的小滴玻璃化法超低温保存技术。
技术要点是:从3周龄的试管苗上,取0.5 cm带有顶芽的茎段,培养在Murashige and Skoog (1962, MS)培养基上,置于4℃黑暗条件下炼苗3周后,剥取长2-3 mm的茎尖,在含有0.3M蔗糖的MS培养基上预培养3天。
预培养后的茎尖在室温下转入加载液(2M甘油+ 0.4M蔗糖+ MS)中加载20分钟,然后在0℃条件下用植物玻璃化液(Plant vitrification solution 2, PVS2)处理40分钟。
马铃薯茎尖培养脱毒程序
马铃薯茎尖培养脱毒程序马铃薯，大家都知道，是咱们日常生活中常见的美味食材。
煮、炒、烤，怎么做都好吃，百吃不厌。
但你知道吗，马铃薯可不仅仅是餐桌上的美味，它还是农业里很重要的一员。
为了保证我们吃到的马铃薯都是健康无病的，脱毒技术就派上了大用场。
听起来挺高大上的对吧，其实简单来说，脱毒就是通过一些技术手段把马铃薯中的病毒去掉，确保它们在生长过程中不被病菌打扰。
要说这过程，真的是一门技术活儿，得耐心、得细心，别看马铃薯这么“朴实无华”，背后可有不少学问。
咱得说说这“茎尖培养”是什么。
其实它就是从马铃薯的茎尖部位取出一小块组织，然后把它放进试管里，给它提供适宜的环境让它慢慢生长。
茎尖看起来可不大，但其实它里面藏着大大的潜力。
就像是咱们生活中，许多人看起来平凡无奇，但一旦给了适当的机会，就能大放光彩。
这茎尖的好处呢，最大的就是它相对比较“纯净”，病毒的侵入机会少，给它一点关照，就能生长成一株健康的马铃薯了。
就像是种田一样，挑一块好土壤种下去，才有机会长出好的作物嘛！然后，咱们得处理这茎尖，得小心翼翼地切割、消毒。
就像是给马铃薯“做手术”，一点点小心情疏忽，可能就会引来一些不可预见的问题。
手术之后，茎尖被移到培养基上。
培养基其实就是一种混合物，里面有各种营养成分，能给马铃薯的茎尖提供生长所需的养分。
这就像是咱们给植物送去的“营养餐”，有了这个，马铃薯的茎尖可以安心地成长。
通常呢，这个培养基会设置在一个温暖而且湿润的环境里，温度不宜太高，湿度要合适，简直就是给马铃薯开了个五星级酒店的待遇。
经过一段时间，茎尖就开始长出小小的根和芽了。
就像是给宝宝喂养，渐渐长大，渐渐健壮。
这时候，咱就要开始观察它有没有受到病毒的影响了。
病毒在植物中是非常隐蔽的，不容易被发现，但它的危害却无处不在。
为了确保没有病毒，咱们还得采取一些特殊的病毒检测方法。
这就像是做健康体检，万一马铃薯染了病，咱就能第一时间发现。
没病的茎尖，就可以开始加速生长了，进入真正的脱毒阶段。
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁工作流程
【】李 浚 明． 物 组 织培 养 教 程 【 ４ 植 Ｍ】． 京 ： 中 国农 业 大 学 北
出版 社 ，１ ９ ９ １，２ ．
ＮＡ Ａ， 增 殖 系 数 为 ９—１ 。通 过 组 培 扩 繁 可 以获 得 大量 的 组 ２
０ ４ ０ 河 北 省 邢 台学 院 生 物 ・ 学 系 石 晓 云 ５０１ 化 王僧虎 张雪 辉 唐
培苗壮苗数量 是效益 的保 障。马铃薯 种植逐步走 向规模化 、
标 准 化 、 区域 化 。各 科研 单位 与 企 业 要 摸 索 创 立 出 一 套合 适 的 可规 范化 生产 马铃 薯种 薯 的 工 艺 流程 ，提 高 繁 殖 效 率 ，简
酶联 免疫 吸 附检 测 病 毒 是 根 据 病 毒 颗 粒 能 够 与 它 们 的 特 异 性 抗 体 在 离 体 情 况 下相 互 反 应 ，并 用 酶 检 测 放 大 这 个 反 应 ，最 后 测 得 病 毒 的有 无 。它 是 鉴 定 马 铃 薯 病 毒 的 比较 便捷 的方 法 ，可 以检 测 Ｐ Ｘ、Ｐ Ｙ、Ｐ Ｓ Ｖ 、Ｐ Ｒ 等 常 见 Ｖ Ｖ Ｖ 、Ｐ Ｍ ＬＶ 病 毒 ， 比较 适 合 样 品 数 量 多 时 的 病 毒 检测 。 另 外还 可 以 用指
４周 后 组 培 苗茎 芽 长 高 ，茎 变 粗 、 叶 片 增 大 、 叶 色 浓 绿 ，茎 叶表 面 有 明 显 的 细 毛 。 加 入 ２５ｇｔＰ ． ／ ＶＡ 可 以一 定 程 度 上 防 ． 止 组 培 苗 玻 璃 化 ，增 加 壮 苗 率 。 马铃 薯 是 喜 光 作 物 ，在 培 养 室 内也 要 给 予 其 充 足 的 光 照 条 件 ，光 照 强 度 为 ２０ ０～ ０ ０ ４０ ０ ｌ ｘ的条 件 下 生 长 较 好 。一 般 认 为 组 培 苗健 壮 与 否 也 与 继 代 次 数 有 很 大 的 关 系 ，增 殖 时 间 长 ， 生 长 势 下 降 ， 生 活 力 较 弱 ，
浅谈马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展
２０Ｉ３（２）
西 昌 农 业 科 技
·１５·
的发 育 ，但 可 以提高 脱 毒率 ． 制 剂对 马 铃薯 茎 尖 培养脱 毒是 否有 相 同 的效果 ，值 得研 究和探 讨 。刘 华 、冯高 采用 不 同浓 度 高 锰 酸钾 、过 氧 化氢 、新 洁 尔灭 、尿素稀 释 液对 马铃 薯进 行浸 种处 理 ，发 现 病毒 钝 化 明显 。用处 理 过 的薯 块 做种 薯 ，产 量 明显 提 高 。 而Ｃａｓｓｅｌｌｓ，Ａ．Ｃ等 （ｍ 将 病 毒 唑加 入 培养 基 中 ，培 养 马 铃薯 的分 生组 织 和外 植 体 ，可脱 除 马铃 薯 的Ｘ、Ｙ、Ｓ 和Ｍ病 毒 。 ２．３ 热 处理 的使 用
愈伤组织再生马铃薯脱毒菌生产体系的建立杨春.
试验过程中发现，茎尖愈伤组织有直接形成块 茎的现象，块茎顶端着生２。３片小叶；生长素／细 胞分裂素高愈伤组织易形成粗壮的根，生长素／细 胞分裂素低易分化成芽，细胞分裂素高易形成丛 芽，细胞分裂素低则形成单芽（图１．３）。
万方数据
愈伤组织再生马铃薯脱毒苗生产体系的建立——杨春，王桂梅
随着继代培养次数的增加，愈伤组织生长速度 越来越快，选择色泽好，生长快的各种愈伤组织， 转移到诱导培养基上，培养基的组成为ＭＳ＋６一ＢＡ １．５ ｍｇ·Ｌ『１（或ｚＴ ２．０ ｍｇ·Ｌ一’）＋ＮＡＡ０．５ ｍｇ·Ｌ＿１＋ＧＡ３ ５ ｍｇ·Ｌ一＋３％蔗糖＋０．６％琼脂，ｐＨ值为５．８。培养在 室温下，补充光２ ０００ ｌｘ，１６ ｈ·一。统计分化率。
收稿日期：２００７－０６＿２７ 基金项目：山西省农科院青年基金项目。 作者简介：杨春（１９６７一），男，助理研究员，从事马铃薯育种 与种薯开发。
１材料与方法
１．１材料 从田间选取具有原品种特性的典型植株（紫花
白），剪切顶端部分，用自来水冲洗干净，在超净 工作台上，用７０％的乙醇浸泡ｌＯ ｓ，再在０．１％的 氯化汞中浸泡１０￣１５ ｍｉｎ，然后用无菌水漂洗３～５次， 切取５～７ ｍｍ不同大小的外植体接种到ＭＳ培养基 上，附加不同浓度的６一ＢＡ、ＺＴ、ＮＡＡ、２，４一Ｄ 等，３％蔗糖，ｏ．６％琼脂，ｐＨ ５．８。置于室内散射 光下自然生长。 １．２愈伤组织的诱导
将充分洗净、消毒的供试品种的茎尖、茎段、 叶片（半叶、全叶）分别接在４种不同的培养基（表 １）上进行愈伤组织的诱导。每处理３瓶，观察并统 计出愈时间（ｄ）、出愈率、愈伤组织的状态，包括颜 色、形状、质地、生长速度等，其中出愈率＝（形成 愈伤组织的外植体数＾总接种的外植体数）×１００％。
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点分析
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点分析作者：李东玉封志明张淑青樊建英相丛超来源：《现代园艺·下半月园林版》 2017年第12期摘要:随着人们生活水平的提高，人们已经不再停留于原先的温饱，而是更加注重饮食的均衡和健康，追求一种更健康的生活方式。
而马铃薯作为一种健康的食物，也越来越被更多人所喜爱和接受。
本文主要就马铃薯茎尖组织的脱毒培养技术展开论述，希望对相关部门有所帮助。
关键词:马铃薯；茎尖；组织培养；脱毒技术1 茎尖组织培养脱毒技术在马铃薯的培养过程中，会出现“退化”情况，具体表现为，植株会随着年份的增长而变得越来越小，叶子变得蜷曲不光滑，叶色变得不均匀，茎块变形甚至产生裂痕，产量一年不如一年。
产生这一现象最主要原因就是马铃薯体内有病毒的入侵，并在马铃薯体内积累。
就目前而言，在农业生产和商业生产中取得最大成效和成果的植物脱毒技术，即植物茎尖分生组织培养脱毒技术，也就是我们日常生活中所说的“茎尖脱毒”。
植物茎尖分生组织培养脱毒技术，是根据植物细胞全能性学说和病毒在植物体内分布不均匀等原理，再加上使用钝化病毒的热处理方法，通过剥取茎尖分生组织对植株进行培养，从而获得脱毒植株。
2 马铃薯茎尖组织培养脱毒技术2.1 准备工作（1）药品的配置和无菌水的准备。
在茎尖脱毒前应准备好75%的医用酒精，6%的次氯酸钠溶液和经过高压灭菌的蒸馏水。
（2）培养基的配置。
脱毒茎尖培养选用茎尖培养基培养，应事先准备好。
（3）超净工作台和操作人员的消毒灭菌。
在茎尖剥离操作之前，操作人员应首先穿好操作服，其次用香皂洗手，最后75%酒精擦拭双手；超净工作台应首先打开紫外线和风机进行消毒约30min，关闭紫外线后30min上机操作。
2.2 茎尖剥离和接种2.2.1 马铃薯优质芽的培养选择。
将马铃薯薯块经过休眠之后再进行室内催芽，等到芽长到1~2cm并且叶子还没有展开时，将马铃薯的芽剪下并放入烧杯中。
2.2.2 马铃薯优质芽的消毒灭菌。
马铃薯茎尖脱毒技术 (1)精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版马铃薯茎尖脱毒技术作者：刘学武方大雨关永明来源：《吉林蔬菜》2014年第03期马铃薯（Solanurn tuberosurn），茄科、茄属作物，作为一种蔬菜，深受人们的喜爱。
目前在我国的栽培面积大约有500多万公顷，已经成为世界上栽培面积最大的国家，但在其繁殖过程中退化问题比较严重，症状是叶片卷缩，产量降低，实验研究表明，病毒浸染是其退化的根源。
因此生产脱毒种薯成了在马铃薯生产过程中的关键环节，常用的马铃薯脱毒技术是茎尖组织培养，下面介绍一下马铃薯的茎尖脱毒技术。
1 取材进行脱毒培养的材料，可以直接从大田取。
一般当苗高约15厘米时，将顶端切下6～8厘米，去掉下面2片叶，在切口处涂上生根激素后，把切条植入一个口径为10厘米、内装有消毒营养土的花盆中，然后用玻璃烧杯罩上，保持10天。
然后将其转入生长箱中，光照3 000～4 000Lx，每天光照16小时。
两周后去掉顶芽，以促使腋芽的生长。
当腋芽长出约1～2厘米时，折下腋生枝，用于消毒，接种。
2 消毒及接种一般来说，茎尖分生组织由于彼此重叠的叶原基的严密保护，只要仔细解剖，不进行表面消毒也能得到无菌的外植体，但分生组织不带菌，并不等于包在它外面的叶片及其下部的茎段不带菌，将外植体从超净台外面的空间拿进去可能会带进一些菌。
因此，在切取外植体之前仍需对茎芽进行表面消毒。
常用的消毒方法是，先剥去大叶片，用自来水冲洗干净，在75%酒精中浸泡30秒钟左右，用1%～3%次氯酸钠或5%～7%的漂白粉溶液消毒10～20分钟（或用0.1%HgCl2消毒数分钟），最后用无菌水冲洗材料4～5次。
接种时，先把解剖显微镜置于超净工作台，然后把茎芽置于解剖镜下，左手用一把镊子将它按住，右手用解剖针将叶片和叶原基剥掉。
当形似一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来后，用锋利的长颈刀片将分生组织切下来，一般以0.2～0.3毫米，带1～2个叶原基为好，然后再用刀片将其接种到培养基上。
豫马铃薯茎尖组织培养脱毒体系的建立
豫马铃薯茎尖组织培养脱毒体系的建立庞淑敏;方贯娜;周建华【摘要】针对豫马铃薯种性退化严重的问题,利用茎尖组织培养技术及EUSA病毒检测技术,获得豫马铃薯一号、二号的脱毒株系,建立了豫马铃薯茎尖组织培养脱毒的技宋体系.【期刊名称】《长江蔬菜》【年(卷),期】2008(000)020【总页数】2页(P25-26)【关键词】豫马铃薯;茎尖组织培养;脱毒【作者】庞淑敏;方贯娜;周建华【作者单位】郑州市蔬菜研究所,河南郑州,450015;郑州市蔬菜研究所,河南郑州,450015;郑州市蔬菜研究所,河南郑州,450015【正文语种】中文【中图分类】S5马铃薯（Solanum tuberosumL.）为一年生草本块茎植物，是世界上仅次于稻、麦、玉米的4大粮食作物之一。
我国是世界马铃薯种植第一大国，常年种植面积近500万hm2，占全球种植面积的20%以上。
地处中原腹地的河南省，马铃薯常年栽培面积9万hm2，大部分平原地区属马铃薯二季作区，部分山区为一季作区，每年4～8月，10～11月都有产品供应上市，能补充北方淡季需求。
河南省主栽品种豫马铃薯一号、二号（郑薯五号、六号）是20世纪80年代末育成，90年代初推广的优良早熟品种，由于种植时间较长，病毒病引起的种性退化问题，严重影响了河南省马铃薯产业的发展，因此，郑州市蔬菜研究所于2000年开展了豫马铃薯系列品种的脱毒快繁及产业化应用研究，现将茎尖组织培养脱毒体系建立的部分研究介绍如下。
1．1 供试材料根据豫马铃薯一号、二号的品种特性，在大田选择种性退化较轻的植株作为脱毒材料，收获后，对薯块外观进行严格挑选，待被挑选的材料通过自然休眠期后，在室内育苗盘中切块育苗。
当苗高6～7 cm、有3～4片叶时，掐取2 cm左右的顶芽进行剥离培养，侧芽长成后可作为第2批材料进行剥离，依次循环。
1.2 茎尖培养基制备以MS为基础培养基，生长素类激素选择IAA，NAA，细胞分裂素类激素选择KT，每种激素选用3种浓度配比，共配制如表1所示18种培养基作为茎尖培养的诱导培养基。
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（学术版） ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＨＡＮＧＪＩＡＮＧ ＶＥＧＥＴＡＢＬＥＳ
DOI:10.3865/j.issn.1001-3547(x).2008.10.009
2008，10b：25－26
豫马铃薯茎尖组织培养脱毒体系的建立
庞淑敏 方贯娜 周建华 （郑州市蔬菜研究所，河南郑州，450015）
63
74.1
59
37
62.7
素。
PVY
85
54
63.5
59
46
78.0
除此之外， 不同基因型马铃薯茎尖
PVS
85
4
4.7
59
3
5.1
培养的差异也是研究者常常考虑的问
同浓度配比下，茎尖诱导成苗的情况差异也很大。 从 表 2 可以看出， KN3，KN6，KN9 的成苗率较高， 其中 KN3 的最高，豫马铃薯一号达到 44.6%，豫马铃薯二号 达 36.5%。 2.3 品种对茎尖培养的影响
选用快捷灵敏的 ELISA 方法进行病毒检测，主要 检测 PLRV，PVY，PVX，PVS 等 4 类病毒。 试剂盒购于 上海华瑞生物技术有限公司。 检测方法遵照试剂盒说 明，根据酶联板显色情况，定性判断试管苗带病毒情 况。
2 结果与分析
2．1 激素种类对茎尖培养的影响 茎尖培养 2 个月后，调查 2 个品种在不同培养基
1 材料与方法
1．1 供试材料 根据豫马铃薯一号、二号的品种特性，在大田选
择种性退化较轻的植株作为脱毒材料，收获后，对薯 块外观进行严格挑选，待被挑选的材料通过自然休眠 期后， 在室内育苗盘中切块育苗。 当苗高 6~7 cm、有 3~4 片叶时， 掐取 2 cm 左右的顶芽进行剥离培养，侧 芽长成后可作为第 2 批材料进行剥离，依次循环。 1.2 茎尖培养基制备
收 稿 日 期 ：2008-07-21
浓度配比， 共配制如表 1 所示 18 种培养基作为茎尖 培养的诱导培养基。 1.3 外植体的消毒处理
将顶芽剥去外叶在自来水下冲洗 30 min，然后在 75%酒精中蘸 2 s,放入 0.1%升汞溶液中消毒 20 min， 用无菌水冲洗 4~5 次，在无菌室进行茎尖剥离。 1.4 剥离与培养
表 3 病毒检测结果
病毒
豫马铃薯二号
豫马铃薯一号
种类 检测数/个 阴性数/个 脱毒率/% 检测数/个 阴性数/个 脱毒率/%
PLRV 85
70
82.4
59
42
71.2
较难脱除的病毒， 建议结合高温处理等 综合的手段提高其脱毒率。
④培养基中激素的类别和激素浓度 的不同配比也是影响成苗率的关键因
PVX
85
KN2
MS+1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA
从表 3 的检测结果看出， 在本研究
KI3
MS+1 mg/L KT+30 mg/L IAA
KN3
MS+1 mg/L KT+0.05 mg/L NAA
检 测 的 4 类 病 毒 中 ，PVS 的 脱 除 最 为 困
KI4 MS+5 mg/L KT+5 mg/L IAA KN4 MS+5 mg/L KT+0.05 mg/L NAA 难，2 个品种脱毒率只有 5％左右，其他 3
育的主要技术基础， 目前被广泛应用于
表 2 茎尖培养基筛选试验结果
培养基
豫马铃薯二号Biblioteka 豫马铃薯一号编号 接种数/个 成苗数/个 成苗率/% 接种数/个 成苗数/个 成苗率/%
KI1
18
3
16.7
19
3
15.7
KI2
23
0
0
12
0
0
KI3
18
0
0
23
0
0
KI4
9
0
0
12
0
0
KI5
23
0
0
6
0
0
KI7
26
摘 要 针对豫马铃薯种性退化严重的问题，利用茎尖组织培养技术及 ELISA 病毒检测技术，获得豫马铃薯一号、二号的 脱毒株系，建立了豫马铃薯茎尖组织培养脱毒的技术体系。 关键词 豫马铃薯 茎尖组织培养 脱毒
马 铃 薯 （Solanum tuberosum L.） 为 一 年 生 草 本 块 茎植物，是世界上仅次于稻、麦、玉米的 4 大粮食作物 之一。 我国是世界马铃薯种植第一大国，常年种植面 积近 500 万 hm2，占全球种植面积的 20%以上。 地处中 原腹地的河南省，马铃薯常年栽培面积 9 万 hm2，大部 分平原地区属马铃薯二季作区， 部分山区为一季作 区，每年 4~8 月，10~11 月都有产品供应上市，能补充 北方淡季需求。 河南省主栽品种豫马铃薯一号、二号 （郑薯五号、六号）是 20 世纪 80 年代 末 育 成 ，90 年 代 初推广的优良早熟品种，由于种植时间较长，病毒病 引起的种性退化问题，严重影响了河南省马铃薯产业 的发展，因此，郑州市蔬菜研究所于 2000 年开展了豫 马铃薯系列品种的脱毒快繁及产业化应用研究，现将 茎尖组织培养脱毒体系建立的部分研究介绍如下。
KN1
32
8
25.0
6
1
16.7
要在保证存活的情况下， 尽量剥较小的
KN2
49
4
8.2
7
0
0
茎尖进行培养以保证脱毒效果， 试验显
KN3
52
19
36.5
47
21
44.6
示， 带一个叶原基的茎尖是比较合适的
KN4
27
3
11.1
24
2
8.3
茎尖大小，还应注意的是，茎尖的大小和
KN5
42
2
4.8
4
0
0
品种以及发芽状态有关， 同一品种顶芽
上的成苗情况。 从表 2 可以看出，不同生长素类激素 的培养基上马铃薯茎尖诱导成苗的情况差异很大，在 18 类培养基中， 使用 NAA 的培养基成苗率普遍比使 用 IAA 的高， 说明 NAA 在这 2 个马铃薯品种的茎尖 培养中是比较适合的生长素类激素；同类生长激素不
2008/10(下)
庞淑敏,等.豫马铃薯茎尖组织培养脱毒体系的建立
在 40 倍解剖镜下， 剥取 0.2~0.3 mm 带 1 个叶原 基的茎尖分生组织接种在各类培养基上。 培养条件为 光 强 3 000 lx、光 照 时 间 16 h/d、温 度 25℃，在 培 养 过 程中观察并调查茎尖转绿成苗情况。 1.5 试管苗的少量扩繁
以不添加任何激素的 MS 为扩繁培养基， 将获得 的豫马铃薯一号、二号的试管苗切成带 1 个叶片的茎 段，接种到培养基上进行培养，培养条件同上，培养 20 d 后，取一部分试管苗进行病毒检测。 1.6 病毒检测
从表 2 中还可以看出，就本试验而言，豫马铃薯
题， 在本研究中的 2 个品种在同一培养 基成苗率和成苗周期都差异不显著，然而，笔者在随 后的茎尖培养中利用这一培养基对多个马铃薯品种 进行了茎尖培养时发现， 虽然都得到了较好的成苗 率，但在培养成苗的周期上，某些品种间出现了显著 性差异，因此不同基因型马铃薯茎尖培养的各项差异 还有待进一步研究。
以 MS 为 基 础 培 养 基 ， 生 长 素 类 激 素 选 择 IAA， NAA，细胞分裂素类激素选择 KT，每种激素选用 3 种
庞 淑 敏 （1967－），女 ，副 研 究 员 ，主 要 从 事 马 铃 薯 脱 毒 及 生 物 技 术 育 种 研 究 ，电 话 ：0371－68797863 ，13503863969 。 E-mail：psmm9508@
2
7.7
4
0
0
KI8
37
1
2.7
8
0
0
生产。 茎尖培养脱毒效果主要取决于 4 个因素。
①用于茎尖培养材料本身的带病毒 情况。 一般不选择退化较严重的马铃薯 做脱毒原始材料，避免增加脱毒的难度， 影响脱毒效果；
②所培养茎尖的大小。 茎尖的大小 是影响成苗的直接因素， 同时也是影响 脱毒效果的重要因素，茎尖越小，成苗率 越低而脱毒率越高， 因此在茎尖培养中
KI5 MS+5 mg/L KT+15 mg/L IAA KN5 MS+5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA 类病毒的脱毒率都高于 50％以上。
KI6
MS+5 mg/L KT+30 mg/L IAA
KN6
MS+5 mg/L KT+0.005 mg/L NAA
3 小结与讨论
KI7
MS+10 mg/L KT+5 mg/L IAA
- 26 -
表 1 茎尖培养基配方
培养基编号
培养基配方
培养基编号
培养基配方
KI1
MS+1 mg/L KT+5 mg/L IAA
KN1
MS+1 mg/L KT+0.005 mg/L NAA
一号、 二号， 在同一浓度配比的培养基 上，成苗时间和成苗率差别不是很大。 2.4 病毒检测结果
KI2
MS+1 mg/L KT+15 mg/L IAA
KN6
83
27
32.4
39
15
38.4
的茎尖较大，侧芽较单薄。
KN7
18
1
5.6
13
1
7.6
③病毒种类。 不同病毒脱毒难易程
KN8
41
KN9
54
合计
0
0
20
14
25.9
52
85