中国154家实验室检测抗平滑肌抗体和抗线粒体抗体的对比分析

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抗线粒体抗体检测临床意义

抗线粒体抗体检测临床意义：免疫检验辅导由于抗M1抗体即抗心磷脂抗体，目前不列入抗线粒抗体中。

抗M2见于90%的PBC患者，常用作该病的重要实验室诊断指标，但AMA与PBC的病期、疾病严重程度、治疗效果均无相关性。

除PBC外，抗M2也见于慢性活动性肝炎（CAH）、HBsAg阴性的肝病。

抗M3AMA 见于吡唑酮（pyrazolone）系列药物诱发的假红斑狼疮（PLE）综合征患者；抗M4AMA也见于PBC；抗M9见于PBC早期；抗M5见于SLE、自身免疫性溶血性贫血；抗M6见于异丙烟肼（iproniazid，一种单胺氧化酶抑制药）诱导的肝炎医|学教育网整理；抗M7出现于一些原因不明的心肌病患者，它的靶抗原有器官特异性，存在于心肌细胞的线粒体中。

由于线粒体抗原成分复杂，对很多抗原的性质尚不了解，而原发性胆汁性肝硬化患者几乎都出现高效价抗M2AMA，因此，目前AMA（或抗M2AMA）测定主要用于PBC的诊断。

多克隆抗体的制备介绍大多数抗原是由大分子蛋白质组成，但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合，称此部位为抗原决定簇或表位。

一种天然抗原性物质（如细菌或其分泌的外毒素以及各种组织成分等）往往具有多种不同的抗原决定簇，而每一决定簇都可刺激机体一种抗体形成细胞产生一种特异性抗体医|学教育网整理。

在机体淋巴组织内可存在千百种抗体形成细胞（即B细胞），每种抗体形成细胞只识别其相应的抗原决定簇，当受抗原刺激后可增殖分化为一种细胞群，这种由单一细胞增殖形成的细胞群体可称之为细胞克隆（clone）。

同一克隆的细胞可合成和分泌在理化性质、分子结构、遗传标记以及生物学特性等方面都是完全相同的均一性抗体，亦可称之为单克隆抗体。

在早期传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经各种途径免疫动物，由于抗原性物质具有多种抗原决定簇，故可刺激产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌抗各种决定簇抗体分泌到血清或体液中，故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物，称这种用体内免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体，也是第一代抗体。

间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法检测抗线粒体抗体的分析与比较

Ｃｈｉｎａ－ＪａｐａｎＦｒｉｅｎｄｓｈｉｐＨｏｓｐｉｔａｌ，２０１５Ｊｕｎ，２９（３）：１５４－１５７
ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｉｔｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｗｏｍｅｔｈｏｄｓｔｈａｔｗａｓｃｏｍｍｏｎｌｙｕｓｅｄ
ｐｒｉｍａｒｙａｎｔｉｂｏｄｙｏｆｂｉｌｉａｒｙｃｉｒｒｈｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｏｔｈｅｒｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙａｎａｌｙｚｅｄｔｈｅ７２６ｐａｔｉｅｎｔｓｉｎｏｕｒｈｏｓｐｉｔａｌｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｗｏｍｅｔｈｏｄｓａｂｏｕｔａｎｔａｎｔｉｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉｌａａｎｔｉｂｏｄｙ：ｂｏｔｈ为其他ＣＴＤ。ＰＢＣ组ＡＭＡ— Ｍ２抗体滴度（中位数为６４．８ＲＵ／ｍ１）略高于其他ＣＴＤ组（中位数为
５４．９ＲＵ／ｍ１）。结论：将ＩＩＦ和ＥＬＩＳＡ同时应用于抗线粒体抗体的检测，有助于ＰＢＣ的临床诊断。关键词：抗线粒体抗体；抗线粒体抗体Ｍ２亚型；原发性胆汁性肝硬化；结缔组织病

四种方法检测抗线粒体抗体M2亚型性能比较

四种方法检测抗线粒体抗体M ２亚型性能比较岳㊀燕１,王玥文２,白㊀婕１,杨本善１,何小魁１,张明珍３,郑宇淼３,李宜桐３,金㊀文３,刘向祎１(１．首都医科大学附属北京同仁医院检验科,北京１００７３０;２．香港大学李嘉诚医学院,香港９９９０７７;３．首都医科大学,北京１０００６９)D O I :１０．１１７４８/b j m y ．i s s n ．１００６－１７０３．２０２１．０５．０２９收稿日期:２０２１Ｇ２Ｇ２５;修回日期:２０２１Ｇ０３Ｇ１２基金项目:首都医科大学本科生科研创新项目(编号:X S K Y ２０２０１６９)通讯作者:刘向祎.摘要:目的㊀探讨抗线粒体抗体M ２亚型不同检测方法的分析性能㊁相关性及其对原发性胆汁性胆管炎的诊断价值.方法㊀选择２０１０年至２０１９年于北京同仁医院就诊的原发性胆汁性胆管炎(P B C )患者１０６例作为P B C 组,同期其他自身免疫病组患者１２０例,１００例体检健康人作为正常对照组.用免疫印迹㊁间接免疫荧光㊁酶联免疫吸附试验和胶体金４种方法分别测定三组的抗线粒体抗体M ２亚型水平,比较不同方法的分析性能㊁相关性及诊断价值.结果㊀灵敏度从高到低依次是酶联免疫吸附试验(９６．２％,１０２/１０６)㊁免疫印迹(８９．６％,９５/１０６)㊁胶体金(８７．７％,９３/１０６)㊁间接免疫荧光法(７３．６％,７８/１０６).特异性从高到低依次是间接免疫荧光(９８．２％,２１６/２２０)㊁酶联免疫吸附试验(９６．８％,２１３/２２０)㊁免疫印迹(８７．７％,１９３/２２０)㊁胶体金法(８５．５％,１８８/２２０).免疫印迹与胶体金法之间检出率差异无统计学意义(P ＝０．７３６).酶联免疫吸附试验与免疫印迹㊁酶联免疫吸附试验与间接免疫荧光㊁免疫印迹与胶体金法之间一致性较好(K a p p a ＞０．７５).结论㊀酶联免疫吸附试验是目前临床实验室检测抗线粒体抗体M ２亚型的最佳方法.关键词:抗线粒体抗体M ２亚型;㊀胶体金法;㊀免疫印迹法;㊀间接免疫荧光法;㊀酶联免疫吸附试验中图分类号:R ３９２Ｇ３３㊀㊀文献标识码:AAC o m p a r a t i v e S t u d y o f F o u rM e t h o d s f o r t h eD e t e c t i o n o fA n t i ＧM i t o c h o n d r i a lA n t i b o d y M２Y U E Y a n １,WA N G Y u e w e n ２,B A I J i e １,Y A N G B e n s h a n １,H E X i a o k u i１,Z H A N G M i n g z h e n ３,Z H E N G Y u m i a o ３,L IY i t o n g ３,J I N W e n ３,L I U X i a n g yi １(１．D e p a r t m e n t o fC l i n i c a l L a b o r a t o r y ,B e i j i n g T o n g r e nH o s p i t a l ,C a p i t a lM e d i c a lU n i v e r s i t y ,B e i j i n g １００７３０,C h i n a ;２．D e p a r t m e n t o f S u r g e r y ,L iK aS h i n g F a c u l t y o fM e d i c i n e ,T h eU n i v e r s i t y o fH o n g K o n g ,H o n g K o n g ９９９０７７,C h i n a ;３．C a p i t a lM e d i c a lU n i v e r s i t y ,B e i j i n g １０００６９,C h i n a )A b s t r a c t :O b j e c t i v e I n t h i s p a p e r ,w e e v a l u a t e d t h e a n a l y t i c a l pe rf o r m a n c e a sw e l l a s t h e c o r r e l a t i o no f d i f f e r e n t d e t e c t i o nm e t h o d s f o r a n t i Ｇm i t o c h o n d r i a l a n t i b o d y M ２s u b t y p ea n d i t sd i ag n o s t i cv a l u e f o r p r i m a r y b i l i a r y ch o l a n gi t i s ．M e t h o d s １０６p a t i e n t sw i t h p r i m a r y b i l i a r y c h o l a n g i t i s (P B C ),１２０p a t i e n t s w i t ho t h e r a u t o i m m u n ed i s e a s ea n d １００h e a l t h y c o n t r o l sw h ou n d e r w e n t p h ys i c a l e x a m i n a t i o nf r o m ２０１０t o ２０１９a tT o n g r e n H o s p i t a l (B e i j i n g )w e r ec o l l e c t e da sr e s e a r c ho b j e c t s ．A m o n g th e s et h r e e g r o u p s ,t h es e r u m a n t i ＧM ２a n t i b o d y l e v e l s w e r ed e t e r m i n e d b y w e s t e r n b l o t t i n g (WB ),i n d i r e c t i m m u n o Ｇf l u o r e s c e n c e (I I F ),e n z y m e Ｇl i n k e di m m u n o Ｇs o r b e n ta s s a y (E L I S A )a n d c o l l o i d a l g o l d c o l l o i di m m u n o c h r o m a t o g r a p h y a s s a y (C G C I A ),r e s p e c t i v e l y a n d t h e a n a l y t i c a l p e r f o r m a n c e ,c o r r e l a t i o na n dd i a g n o s t i cv a l u ew e r ea n a l y z e d t oc o m pa r e t h e p e r f o r m a n c e so f t h e s e f o u rm e t h o d s ．R e s u l t s A c c o r d i n g t os t a t i s t i c a l a n a l y s i s ,t h es e n s i t i v i t y o fE L I S A w a s t h e l a r g e s ta m o n g t h e s ef o u r m e t h o d s (９６．２％,１０２/１０６),f o l l o w e db y W B (８９．６％,９５/１０６),C G C I A (８７．７％,９３/１０６)a n dI I F (７３．６％,７８/１０６)．I na d d i t i o n ,I I Fh a d t h eh i g h e s t s p ec i f i c i t y (９８．２％,２１６/２２０),f o l l o w e db y EL I S A (９６．８％,２１３/２２０),W B (８７．７％,１９３/２２０)a n d C G C I A (８５．５％,１８８/２２０)．T h e r e w a sn os i gn i f i c a n t ３５８标记免疫分析与临床㊀２０２１年５月第２８卷第５期d i f fe r e n c e i n t h e d e t e c t i o n r a t e b e t w e e n i m m u n o b l o t t i n g a n d c o l l o i d a l g o l dm e t h o d(P＝０．７３６)．T h e r e s u l tm e a s u r e db y E L I S Aa n d W B,E L I S Aa n d I I F,WBa n dC G C I A w e r eh i g h l y c o n s i s t e n t(K a p p a v a l u e＞０．７５)．C o n c l u s i o n T h ec u r r e n t s t u d y s u g g e s t s t h a tE L I S Ai s t h eb e s tm e t h o dt od e t e c t t h e M２s u b t y p eof a n t iＧm i t o c h o n d r i a l a n t i b o d i e s(AMAＧM２)i nc l i n i c a l l a b o r a t o r i e s．K e y w o r d s:A n t iＧM２a n t i b o d y;㊀C G C I A;㊀W B;㊀I I F;㊀E L I S A㊀㊀原发性胆汁性胆管炎(p r i m a r y b i l i a r y c h o l a n g i t i s, P B C)是一种慢性胆汁淤积性肝病,其特征是进行性㊁非化脓性㊁破坏性小胆管炎,最终导致纤维化和潜在的合并肝硬化.该病男女比例为１ʒ９,以中老年女性多见[１].P B C发病与多种基因的多态性相关,研究[２Ｇ４]显示H L AＧⅡ基因与P B C发病具有强相关性,尤其是H L AＧD R B１㊁H L AＧD Q A１㊁H L AＧD Q B１.P B C进展经历４期,临床前期表现为抗线粒体抗体(a n t iＧm i t o c h o n d r i a l a n t i b o d y,AMA)阳性㊁碱性磷酸酶A L P正常;无症状期虽未出现明显症状但A L P逐渐升高;症状期出现瘙痒㊁乏力等症状;终末期出现腹水㊁消化道出血㊁肝性脑病等并发症[５].随访发现近５０％P B C早期患者在５年内会进展至中期或终末期.早期应用熊去氧胆酸治疗可改善高胆红素血症㊁延缓肝硬化.该病发展至终末期,则药物疗效甚微,唯一有效的治疗是肝移植[６].尽早诊断㊁及早给药能明显改善预后.㊀㊀２０１５年原发性胆汁性胆管炎诊断和治疗共识提出免疫学检查中AMA阳性是最具诊断价值的实验室检查.AMA分为９个亚型M１ＧM９,其中以M２最为重要,可在无症状期前被检测到.目前国内临床实验室检测AMAＧM２亚型的方法较多.本研究利用P B C组㊁其他自身免疫病组和正常对照组的临床样本,评价间接免疫荧光(i n d i r e c ti mm u n oＧf l u o r e s c e n c e,I I F)㊁胶体金(c o l l o i d a l g o l d c o l l o i d i mm u n o c h r o m a t o g r a p h y a s s a y,C G C I A)㊁酶联免疫吸附试验(e n z y m eＧl i n k e di mm u n oＧs o r b e n ta s s a y, E L I S A)和免疫印迹(W e s t e r nb l o t t i n g,W B)这４种方法检测AMAＧM２的分析性能㊁相关性及其对原发性胆汁性胆管炎的诊断价值.材料和方法㊀㊀１㊀研究对象㊀㊀２０１０年至２０１９年来北京同仁医院就诊的P B C 患者１０６例,其中男性３１例,女性７５例,年龄１７~７８岁,平均年龄４３．２岁.根据２０１８年美国肝病学会(A A S L D),P B C的诊断标准包括以下３条[７Ｇ８]:①存在６个月以上A L P升高的胆汁淤积的生化证据;②AMA阳性;③肝脏组织学与P B C相容,存在非化脓性破坏性胆管炎以及小叶间胆管损伤表现.以上３条标准中至少２条存在即可诊断P B C. AMA阴性者,需进行肝组织病理学检查确定诊断[９].另外纳入其他自身免疫病组１２０例,包括原发性干燥综合征５０例㊁自身免疫性肝炎２７例㊁系统性红斑狼疮３１例㊁混合性结缔组织病１２例.另选取１００例健康体检者作为正常对照组.㊀㊀２㊀主要试剂与仪器㊀㊀２．１㊀主要试剂㊀C G C I A法使用试剂购自上海科新生物技术股份有限公司抗线粒体抗体M２亚型检测试剂盒.W B法使用德国欧蒙医学实验诊断有限公司抗核抗体谱检测试剂盒.I I F法采用德国欧蒙医学实验诊断有限公司抗线粒体抗体M２亚型检测试剂盒.E L I S A采用德国欧蒙医学实验诊断有限公司抗线粒体抗体M２亚型测定用试剂盒.㊀㊀２．２㊀主要仪器㊀德国Z e i s s公司L a b．A１荧光显微镜;瑞士T E C A N S u n r i s e酶标仪;德国欧蒙印迹法自动操作仪.㊀㊀３㊀方法㊀㊀P B C组㊁其他自身免疫病组和正常对照组均要求空腹采取静脉血５m L,３０００r/m i n离心５m i n,留取血清冻存于－８０ħ冰箱待检.每年取出收集的待测血清,平衡至室温.同时用４种方法测定AMAＧM２亚型,并记录数据.㊀㊀E L I S A方法测定AMAＧM２:将１０μL待测血清用样本缓冲液１m L进行１ʒ１００稀释.分别将１００μL３个不同浓度的标准品(C１~C３浓度分别为２００㊁２０㊁２R U/m L)㊁阳性对照㊁阴性对照或稀释后的样本,注入相应微孔,室温(１８~２５ħ)温育３０m i n.用稀释后的清洗缓冲液清洗３次,每次４５０μL.滴加１００μL酶结合物至每一微孔,室温温育３０m i n.倒掉微孔板内液体,重复上述清洗步骤.每孔滴加１００μL底物溶液,室温避光温育１５m i n.滴加１００μL终止液至每一微孔.４５０n m比色,参考波长６２０~６５０n m,加完终止液后３０m i n之内比色.以C１~C３标准血清的浓度为横坐标㊁吸光度为纵坐４５８L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d,M a y．２０２１,V o l．２８,N o．５标作标准曲线,并根据标准曲线点对点求出患者血清中AMAＧM２的浓度.以２０R U/m L作为C u tＧo f f值,ȡ２０R U/m L为阳性.㊀㊀C G C I A法测定AMAＧM２:直接将血清滴加在金标板上,５m i n后根据T线颜色判读实验结果.T 线出现着色均匀和清晰可见的颜色反应时,结果判为阳性.㊀㊀W B法测定AMAＧM２:将１５μL待测血清标本用标本缓冲液１．５m L进行１ʒ１００稀释.取出实验膜条平衡至室温.将膜条上有编号的一面朝上放入室温育槽中.预处理:每槽中加入１．５m L标本缓冲液,室温条件下在摇床上震荡５m i n.吸去槽内液体.血清温育:温育槽中分别加入１．５m L已稀释血清.于室温在摇床上震荡３０m i n.吸去槽内液体.清洗:在摇床上用１．５m L清洗缓冲液清洗膜条３次,每次５m i n.酶结合物温育:在温育槽中加入１．５m L 已稀释的碱性磷酸酶标记的羊抗人I g G,室温在摇床上温育３０m i n.清洗:重复上述清洗步骤.在温育槽中分别加入１．５m L底物溶液,于室温在摇床上温育１０m i n.将实验膜条放置在结果判定模板中,风干后判断结果.在相应抗原线处出现明显的蓝紫色条带,结果判为阳性.抗原带着色的深浅与相应抗体的滴度相关.㊀㊀I I F法测定AMAＧM２:将１０μL待检血清样本用９９０μLP B S吐温缓冲液进行１ʒ９９稀释.加样板每一反应区分别加人２５μL稀释后的血清样本.将生物载片有生物薄片的一面朝下,盖在加样板的凹槽里.室温温育３０m i n.用P B S吐温缓冲液短暂冲洗载片后,将生物载片浸入装有P B S吐温缓冲液的洗杯中,浸泡５m i n.将２０μL F I T C标记的抗人I g A GM加至洁净加样板的反应区上.室温温育３０m i n,避免阳光直射载片.如上述步骤清洗浸泡.封片,荧光显微镜下进行结果判读.滴度１ʒ１００及以上为阳性.大鼠肾是确认AMA的标准基质.近端肾小管和远端肾小管细胞胞浆显示明显颗粒状荧光,肾小球显示微弱荧光.阳性对照血清必须显示相同的特异性荧光模式.在刷状缘出现的荧光不作为判断依据.如果AMAＧM２亚型抗体阳性,在包被有M２抗原的生物薄片上出现点状荧光.㊀㊀４㊀统计学处理㊀㊀本研究数据采用S P S S２５．０软件进行统计学分析.用例数和百分比描述计数资料;用F i s h e r精密概率进行样本之间率的比较.４种方法检测结果采用配对χ２检验;采用K a p p a检验对不同方法的一致性进行分析.一致性强度的判断:当K a p p a＜０．４,一致性强度较差;０．４ɤK a p p a＜０．７５,两者一致性一般;K a p p aȡ０．７５一致性较好.所有统计学检验均以P＜０．０５为差异有统计学意义.结㊀㊀果㊀㊀１㊀P B C组㊁疾病对照组㊁健康对照组A M AＧM２亚型检测结果㊀㊀４种方法检测P B C组㊁其他自身免疫病组㊁正常对照组血清中的AMAＧM２亚型,结果见表１.P B C 组以E L I S A法阳性检出率最高(９６．２％),其次为W B法(８９．６％),C G C I A法(８７．７％),阳性检出率最低的是I I F法(７３．６％).其他自身免疫病组和正常对照组４种方法AMAＧM２检出率均显著低于P B C组.表１㊀不同分组AMAＧM２亚型阳性检出率[％(n)]组别W B法I I F法E L I S A法C G C I A法P B C组８９．６(９５)７３．６(７８)９６．２(１０２)８７．７(９３)其他自身免疫病组１９．２(２３)２．５(３)４．２(５)２２．５(２７)正常对照组４．０(４)１．０(１)２．０(２)５．０(５)㊀㊀㊀注:括号内数字为检测阳性例数㊀㊀２㊀E L I S A法㊁W B法㊁C G C I A法和I I F法的分析性能比较㊀㊀以P B C临床诊断为标准,分别计算４种方法的灵敏度㊁特异性㊁阳性预测值㊁阴性预测值㊁阳性似然比㊁阴性似然比等指标,对其分析性能进行评价.结果见表２.灵敏度最高的为是E L I S A(９６．２％,１０２/１０６),其次为W B法(８９．６％,９５/１０６)㊁C G C I A法(８７．７％,９３/１０６)㊁I I F法(７３．６％,７８/１０６).特异性从高到低依次是I I F法(９８．２％,２１６/２２０)㊁E L I S A 法(９６．８％,２１３/２２０)㊁W B法(８７．７％,１９３/２２０)㊁C G C I A法(８５．５％,１８８/２２０).５５８标记免疫分析与临床㊀２０２１年５月第２８卷第５期表２㊀４种方法测定AMA ＧM ２亚型分析性能比较方法临床诊断＋－灵敏度(％)特异性(％)阳性预测值阴性预测值阳性似然比阴性似然比W B ＋９５２７８９．６８７．７０．７８０．９５７．３００．１２－１１１９３I I F ＋７８４７３．６９８．２０．９５０．８９４０．４７０．２７－２８２１６E L I S A ＋１０２７９６．２９６．８０．９４０．９８３０．２４０．０４－４２１３C G C I A＋９３３２８７．７８５．５０．７４０．９４６．０３０．１４－１３１８８㊀㊀３㊀４种检测方法的一致性与相关性分析㊀㊀将４种方法测得的数据进行配对χ２检验,结果显示,W B 法与E L I S A 法㊁I I F 法与E L I S A 法㊁C G C I A 法与E L I S A 法㊁I I F 法与C G C I A 法㊁W B 法与I I F 法之间检测结果差异均有统计学意义(P ＜０．０５).C G C I A 法与W B 法之间差异无统计学意义(P ＝０．７３６).同时对测得的结果进行一致性K a p pa 检验,结果显示:C G C I A 法与E L I S A 法㊁I I F 法与C G C I A 法㊁W B 法与I I F 法之间一致性一般(０．４ɤK a p pa ＜０．７５).W B 法与E L I S A 法㊁I I F 与E L I S A 法㊁C G C I A 法与W B 法之间一致较好(K a p pa＞０．７５).表３㊀４种方法检测AMA ＧM ２亚型一致性分析＋㊀－方法W B 法I I F 法C G C I A 法＋－＋－＋－E L I S A 法＋９７１２７９３０９５１４－２５１９２３２１４３０１８７P 值０．０４７＜０．０１０．０２３K a p p a ０．７５２０．７５８０．７０７方法I I F 法C G C I A 法＋－＋－方法C G C I A 法＋－W B 法＋８０４２１０６１６I I F 法＋８１１－２２０２１９１８５－４４２００P 值＜０．０１０．７３６P 值＜０．０１K a p pa ０．６９２０．７７２K a p pa ０．６８８㊀㊀C G C I A 法与W B 法为定性检测方法,I I F 法为半定量检测方法,E L I S A 法为定量检测方法.对I I F 法㊁E L I S A 法检测结果的相关性进行分析,结果显示两种方法检测AMA ＧM ２亚型水平呈正相关,即I I F 滴度越高,E L I S A 法测得的水平越高(图１).图１㊀E L I S A 法与I I F 法的相关性讨㊀㊀论㊀㊀AMA 是针对线粒体内膜脂蛋白成分的自身抗体,其抗原决定簇存在于肝㊁肾组织细胞的线粒体内膜中,其靶抗原成分复杂,可分为M １~M ９共９个亚型,其中AMA ＧM ２为P B C 特异性抗体[１０Ｇ１１].存在于线粒体内膜上的２Ｇ含氧酸脱氢酶复合体(２ＧO A D C )是AMA ＧM ２针对的靶抗原,包括丙酮酸脱氢酶复合体(P D C )㊁αＧ酮戊二酸脱氢酶复合体(O G D C )和支链二酮酸脱氢酶复合体(B C O A D C ).P D C 又分为E １α亚基㊁E １ß亚基和E ２亚基.其中P D C ＧE ２亚基硫辛酰区域的特定氨基酸残基是抗体识别的关键部位[１２Ｇ１３].９０％~９５％的P B C 患者针对P D C ＧE ２发生阳性反应;５０％~８０％的P B C 患者对B C O A D C ＧE ２发生阳性反应;O G D C ＧE 的抗体阳性率则为２０％~６０％.P D C ＧE ２或B C O A D C ＧE ２㊁O G D C ＧE ２㊁P D C ＧE ２三者的融合重组蛋白M ２Ｇ３E 均可作为AMA ＧM ２试剂盒采用的靶抗原[１３Ｇ１５].检测AMA ＧM ２的方法较多,有C G C I A 法㊁E L I S A 法㊁６５８L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d ,M a y．２０２１,V o l ．２８,N o ．５W B法㊁I I F法等,目前尚无对该指标方法学选择的统一意见,故实验室对AMAＧM２检测方法的选择上存在一定的困扰.㊀㊀本研究通过对上述４种方法进行分析性能比较发现,I I F法特异性和阳性预测值最高,其次是E L I S A法㊁W B法和C G C I A法;E L I S A法灵敏度和阴性预测值最高,其次是W B法㊁C G C I A法和I I F 法,这可能是由于检测体系中使用不同的抗原所致.I I F法采用的M２抗原是线粒体内膜上３个酶复合体的组份之一.W B法和C G C I A法检测的M２抗原是提取纯化的P D C.E L I S A微孔板包被的抗原是从牛心分离得到的P D C和重组融合蛋白B P O的混合物.B P O在E．c o l i中表达,由B C O A D CＧE２㊁P D CＧE２和O G D CＧE２的抗原位点共同组成,故称为３E.从对比的情况看,３E抗原作为３种抗原融合表达的重组蛋白,提高了E L I S A法检测的灵敏度.I I F法采用天然抗原,由于结构相对更完整,因此检测的特异性优于其他方法.W B法和C G C I A法检测的M２抗原成分相同,两者检出率无显著性差异且一致性较好.㊀㊀E L I S A法灵敏度为９６．２％,特异性为９６．８％,并可对A M AＧM２进行定量检测,综合评价是检测A M AＧM２首选方法.E L I S A法适合大样本量操作,并可定量检测,但样本量少时,试剂成本偏高,不适合中小医院开展.W B法灵敏度㊁特异性较好,与E L I S A 法一致性也较好,且W B法操作方便㊁适合小样本检测,是中小实验室采用的最优方法.I I F法特异性最高为９８．２％,阳性预测值为０．９５;但其灵敏度为７３．６％,明显低于其他３种方法,容易导致漏诊.此外,I I F法检测需由具备专业能力的检验人员使用荧光显微镜才能准确分析和判读,结果易受主观因素影响.C G C I A法灵敏度８７．７％㊁特异性８５．５％,无突出优势,但该法操作简便快捷,仅一步操作,５m i n出结果.无需任何实验设备,对人员技术㊁标本量要求低,能够满足快速筛查的检测要求,且与W B法相关性及一致性较好,适合基层实验室开展.㊀㊀综上所述,E L I S A法是目前较为准确灵敏的AMAＧM２测定方法.W B法与E L I S A法相关性及一致性较好,是临床实验室样本量较少时替代E L I S A法检测AMAＧM２的最佳方法.根据标本量选择E L I S A法或W B法检测AMAＧM２,对于P B C 具有重要的辅助诊断价值.I I F法特异性最高,但灵敏度低,可结合E L I S A法或W B法提高检测的性能.C G C I A法操作非常简便,对人员㊁设备要求最低,适合基层实验室开展.对AMAＧM２亚型的检测方法进行选择时,应结合临床诊断的实际需求㊁检测方法的分析性能㊁实验室具备的条件进行综合判断.参考文献[１]T E R Z I R O L B E R E T T AＧP I C C O L I B,M I E L IＧV E R G A N I G, V E R G A N I D,e t a l．T h e c h a l l e n g e s o f p r i m a r y b i l i a r y c h o l a n g i t i s:W h a ti sn e w a n d w h a 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自身抗体检测在自身免疫性肝病中的应用及其临床分析

自身抗体检测在自身免疫性肝病中的应用及其临床分析目的：探讨自身抗体检测在自身免疫性肝病中的应用，为临床上疾病的诊断提供一定参考意义。

方法：选取试验组32例自身免疫性肝病患者和对照组32例病毒性肝炎患者的自身抗体进行检测，比较其阳性率。

结果：试验组ANA、SMA、AMA-M2、SLA/LP、LKM-1、gp210、Sp100、LC-1抗体阳性率均显著高于对照组，两组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。

SLA/LP、LKM-1、LC-1 3种抗体为自身免疫性肝炎所特有，ANA、AMA-M2、gp210、Sp100抗体为原发性胆汁性肝硬化所特有。

结论：自身抗体谱的检测有助于临床上自身免疫性肝病的诊断，SLA/LP抗体、LKM-1抗体、LC-1抗体有助于自身免疫性肝炎的诊断，AMA-M2抗体、gp210抗体、Sp100抗体有助于原发性胆汁性肝硬化的诊断。

自身免疫性肝病是一种由自身免疫反应导致的肝胆系统损伤的慢性进展性疾病。

可以分为以肝炎为主的自身免疫性肝炎、以胆管损害和胆汁淤积为主型的原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎，以及兼具上述两组特征的重叠综合征[1-2]。

研究自身抗体谱检测在自身免疫性肝病中的应用，对于疾病的诊断、分型是十分有利的。

1 资料与方法1.1 一般资料选取本院2014年1-12月确诊的32例自身免疫性肝病患者为试验组，其中男7例，女25例；年龄19～67岁，平均（45.6±18.3）岁；自身免疫性肝炎有17例（53.1%），原发性胆汁性肝硬化有10例（31.3%），原发性硬化性胆管炎有5（15.6%）。

另外，再随机选取同时段本院收治的病毒性肝炎患者32例为对照组，其中男15例，女17例，年龄25～77岁，平均（52.1±22.7）岁。

自身免疫性肝炎诊断符合国际自身免疫性肝炎小组的诊断标准及积分系统，原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎诊断符合2003年美国肝病学会指导建议，重叠综合征的诊断参考文献标准[3-6]。

抗核抗体检测的质量要求及结果的合理判读-精选文档

自身免疫病的“病谱”
器官特异性
非器官特异性
桥本甲状腺炎扩张性心肌炎
自身免疫性溶血性贫血系统性红斑狼疮
原发性粘液水肿恶性贫血
特发性血小板减少性紫癜干燥综合征
甲状腺机能亢进自身免疫性胃炎
特发性粒细胞减少症
类风湿关节炎
Addisino病 1型糖尿病重症肌无力
自身免疫性肝炎原发性胆汁性肝硬化原发性硬化性胆管炎
抗核膜抗体(抗板层素抗体)
荧光模式: 在核膜区呈现线状荧光, 中心区域荧光强度弱(Hep2), 而肝细胞片:中心区域发暗,无荧光, 此点可与核均质荧光相区别. 靶抗原: 包括60kD, 68kD和74kD 3种蛋白组分,与中间丝相关, 以网状形式包被在核内膜的内部. 相关疾病: 慢性活动性自身免疫性肝炎的活动期.
每个实验室应根据各自情况，建立本室的cutoff值，以确保实验结果的精确性和可比性
部分自身抗体的国际参考品
参考品
特异性
WHO Wo80 dsDNA 100 IU/ampoule
WHO1064
均质型ANA 100 IU/ampoule
MRC 参考品A 均质型ANA 100 IU/ampoule
患病率↓： PPV↓ ，NPV↑ 理想的ANA试验：高PPV：大部分阳性结果者是CTD患者高NPV：大部分阴性结果者不患CTD
ANA检测的选择原则
临床医生选择ANA检测的目的： 1）在有典型症状患者中作出CTD的诊断 2）在症状不确定患者中排除CTD的诊断 3）明确CTD的类别 4）判断病情活动度
EUROIMMUN
粗颗粒型抗RNP/Sm抗体
荧光模式:
§ Hep-2细胞:间期时,整个细胞核呈现粗颗粒,但有时也出现中等到细的颗粒荧光,核仁为阴性;在分裂期细胞中,浓缩的染色体部位为阴性,而外周区几乎为均质型、光滑的荧光.

三种ELISA诊断试剂盒检测抗_CCP抗体的性能比较_陈保锋

Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2012Dec 23（11）类风湿性关节炎（RA ）是一种发病率高、易致畸形的自身免疫性疾病。

该病可发生于任何年龄，在我国的发病率为0.3%～0.4%［1］。

RA 早期临床表现复杂多变，大多不典型，容易造成误诊或漏诊［2］。

抗环瓜氨酸肽抗体（CCP ）ELISA 法是1998年Schellkens 等建立起来辅助诊断RA 的检测方法，该技术一出现，立即备受关注，目前国内外多家公司研制出抗-CCP 抗体ELISA 诊断试剂盒，但是性能参差不一，因此有必要对这些试剂盒进行一个性能比较分析，为临床应用提供依据。

本研究通过对三种国外进口ELISA 诊断试剂盒进行比较，对三种国外试剂盒的诊断性能指标作一客观的评价。

报道如下。

1资料与方法1．1血清样本为2007年1月～2010年l2月门诊的RA 患者、非RA 患者及健康体检者共316例，分为3组。

（1）RA 组：风湿科门诊早期RA 患者137例，其中男67例，女70例，年龄31～69岁；临床表现和辅助检查均符合1987年ACR 修订的RA 诊断标准，且病程均<24个月；（2）非RA 患者组：101例，其中男45例，女56，年龄26～71岁，包括风湿性关节炎64例，系统性红斑狼疮21例，干燥综合征(SS)6例，强直性脊柱炎(AS)7例，混合结缔组织病(MCTD)3例。

均符合国内及国际相应疾病的诊断标准；（3）健康对照组：正常健康体检者78名，均无自身免疫性疾病及骨关节性疾病病史。

所有受检者抽取静脉血3m l ，分离血清，存放在－20℃低温冰箱待检。

1．2仪器与试剂检测用酶标仪为奥地利An-thos 2010，洗板机为美国伯乐公司全自动洗板机，所选用的三种试剂盒均为国外市场上最常见的品牌，生产厂家分别为美国INOVA ￣DIAGNOSTICA 公司、德国Medizinische Labordiagnostika AG公司，荷兰EURO ￣DIAGNOSTICA 公司。

血清抗线粒体抗体检查自身免疫

血清抗线粒体抗体检查自身免疫自身免疫性疾病是指机体免疫系统异常地攻击自身组织和器官，导致各种疾病的发生。

而抗线粒体抗体是一类自身抗体，其检测能够帮助医生判断和诊断自身免疫性疾病。

本文将从血清抗线粒体抗体的检查原理、检查方法以及临床应用等方面进行介绍。

一、检测原理血清抗线粒体抗体检测是通过检测血清中的特定抗体水平来判断机体是否存在自身免疫反应。

正常情况下，机体的免疫系统会抑制自身抗体的产生，防止免疫系统攻击自身组织。

而当机体的免疫系统出现异常时，自身抗体的产生会增加，对线粒体等自身组织发生免疫攻击，导致自身免疫性疾病的发生。

二、检查方法血清抗线粒体抗体检查可以通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）或间接免疫荧光法进行。

这些方法通过特定蛋白质抗原与抗体的结合反应，来测定血清中的抗线粒体抗体水平。

1. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）ELISA是目前常用的检测方法之一。

该方法通过将抗线粒体抗体与酶标记结合，再加入抗人IgG抗体与底物，产生颜色反应来进行定量测定。

ELISA法具有操作简便、结果准确等优点，被广泛应用于临床医学中。

2. 间接免疫荧光法间接免疫荧光法是另一种常用的检测方法。

该方法通过将患者血清和抗人免疫球蛋白荧光素标记结合，加入切片中的线粒体抗原，通过观察是否出现荧光信号来判断是否存在抗线粒体抗体。

三、临床应用血清抗线粒体抗体检查在临床中具有重要的应用价值。

它主要用于以下几个方面：1. 自身免疫性疾病的诊断抗线粒体抗体的检测可以帮助医生对自身免疫性疾病进行诊断。

例如，抗线粒体抗体的阳性结果可与系统性红斑狼疮、硬皮病等疾病的关联进行判断，有助于提供更准确的诊断依据。

2. 预测疾病进展和指导治疗抗线粒体抗体水平的变化可以作为评估疾病进展和治疗效果的重要指标。

医生可以通过定期检测抗体水平的变化，来了解疾病的活动性以及治疗效果，从而调整治疗方案，提高治疗效果。

3. 预防疾病的发生对于高危人群，如亲属中有自身免疫性疾病患者的人群，可以通过进行血清抗线粒体抗体的检测，了解自身免疫疾病的患病风险。

自身抗体检测对自身免疫性肝病的临床应用价值分析

自身抗体检测对自身免疫性肝病的临床应用价值分析摘要目的探讨自身抗体检测在自身免疫性肝病（ALD）诊断中的价值。

方法对400例不明原因肝功能反复异常的患者应用间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体（AMA）、抗平滑肌抗体（SMA）、抗纤维肌动蛋白抗体（F-actin）、抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA），应用欧蒙印迹法检测抗线粒体抗体M2型（AMA-M2）、抗M2-3E（BPO）、抗Ro52、抗Sp100、抗gp210、抗肝肾微粒体抗体（LKM-1）、抗肝细胞溶质抗原1（LC-1）、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）、抗早幼粒细胞白血病抗体（PML），观察检测结果。

结果400例患者自身抗体阳性55例，诊断自身免疫性肝炎（AIH）10例，阳性率2.50%；诊断原发性胆汁性肝硬化（PBC）18例，阳性率4.50%。

AIH患者检出的自身抗体有ANA、抗SMA、抗F-actin、抗Ro52、抗LKM-1、抗LC-1、抗SLA/LP，其中ANA、抗SMA抗体阳性率最高，其次为抗F-actin；PBC患者检出的自身抗体有ANA、AMA、AMA-M2、抗M2-3E、抗Sp100、抗Ro52、抗gp210、抗LKM-1，其中以ANA、AMA、抗M2-3E阳性率最高，其次为AMA-M2。

结论对于不明原因肝功能反复异常的患者，主要以检测ANA为主，对于怀疑AIH的患者检测SMA与F-actin，如果为阴性，应进一步联合检测LKM-1、LC-1、SLA/LP、Ro52，对于怀疑PBC的患者检测AMA、AMA-M2、M2-3E，如为阴性，应进一步联合检测Sp100、gp210、LKM-1、Ro52。

多种自身抗体的联合检测有助于ALD的早期诊断。

关键词自身抗体；自身免疫性肝病；自身免疫性肝炎；原发性胆汁性肝硬化自身免疫性肝病（autoimmune liver diseases，ALD）是一组原因未明、免疫介导的慢性肝脏疾病，包括自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）、原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）和原发性硬化性胆管炎（primary sclerosing cholangitis，PSC）。

抗平滑肌抗体、抗核抗体与慢性乙肝肝纤维化程度相关性研究

维普资讯
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论著・
２８１第６第期０年月４３０卷
抗平肌抗体、抗体与性乙纤维滑抗核慢肝肝化程度性研究相关
刘胜勇张冬平李学军
Hale Waihona Puke （中科技大学同济医学院附属孝感医院感染科，华湖北孝感４２０）３００
｛ｈｎｙｎＨＮＤｏｇ￣ＵＳｅｇｏｇＺＡＧａｐ１２Ｘｕｊｎｅｕ
ＤｐｒｎｏｆｃｏｓＤｓａｅ，ｉｇｎＨｓｉｌｏｇｄａＣｌｇ，ａｇｈｎｎｖｒｉｆｃｎｅａｄＴｃｎｌｙＨｂｉ３００ｅａｔｔｆｎｅｔｕｉｓｓＸａａｏｐｔ，ｎｊＭｅｉｌｏｅｅＨｕｎｚａｇＵｉｓｙｏｉｃｎｅｈｏｇ．ｕｅ４２０ｍｅＩｉｅｏａＴｉｃｌｅｔＳｅｏ
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自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断价值

自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断价值作者：张伟锋来源：《中国保健营养·上旬刊》2014年第05期【摘要】目的对自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断价值进行探讨。

方法采用间接免疫荧光法来对抗核机体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）以及抗线粒体抗体（AMA）进行检测，利用免疫印迹法来对与肝脏疾病有关的抗肝肾微粒体抗体I型（抗LKM-1）、抗肝特异性胞浆抗原I型抗体（抗LC-1）以及可溶性肝抗原进行检测，用酶联免疫吸附实验对AMA-M2进行检测。

结果自身免疫性肝病组中PBC和AIH的阳性检出率明显优于非自身免疫性肝病组。

P【关键词】自身抗体；自身免疫性肝病；间接免疫荧光法doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.05.729文章编号：1004-7484（2014）-05-2970-02本文选取我院2010年5月——2013年5月期间就诊的肝功能生化指标反复异常的患者60例，60例患者中，经过初步诊断，AIH患者有20例，PBC患者有29例，PSC患者有11例。

另外再选择60例肝功能异常，但属于非自身免疫性肝病的患者作为对照组。

现报道如下。

1资料与方法1.1临床资料选取我院2010年5月——2013年5月期间就诊的肝功能生化指标反复异常的患者60例，60例患者中，经过初步诊断，AIH患者有20例，PBC患者有29例，PSC患者有11例。

另外再选择60例肝功能异常，但属于非自身免疫性肝病的患者作为对照组。

两组患者年龄在22-46岁之间，平均年龄为（29.1±1.3）岁。

1.2方法采用间接免疫荧光法来对抗核机体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）以及抗线粒体抗体（AMA）进行检测，选用HEP-2细胞与大鼠肝、肾以及胃三种组织的冰冻切片来作为抗原，待检测的血清按1：100进行稀释，和各种组织进行共同孵育30min，再加入异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗体孵育进行洗片，使用甘油进行封片之后在显微镜下进行观察。

自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中作用

自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的作用【摘要】目的：探讨自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的作用。

方法：以间接免疫荧光法和elisa法对本院2009.1～2010.1期间76例自身免疫性肝病患者和20例健康体检者的ana、ama、sma。

结果：自身免疫性肝病组患者的抗核抗体、抗平滑肌抗体及抗线粒体抗体的阳性率均高于对照组；且女性患者自身抗体的检出率明显高于男性患者。

结论：自身抗体检测在自体免疫性肝病的鉴别诊断中能发挥重要作用。

【关键词】自身免疫性肝病；自身抗体检测；间接免疫荧光法【中图分类号】r593.2【文献标识码】a【文章编号】1008-6455（2011）08-0075-01their own antibody test in autoimmune liver disease diagnosis in the rolezhao yongmei【abstract】objective: to study the antibodies in detection of autoimmune liver disease diagnosis in the role. methods: indirect immunofluorescence and elisa method to the 2009.1～2010.1 during 76 cases of autoimmune liver disease patients and 20 cases of the healthy check-up ana, the ama, sma. results: of autoimmune liver disease patients nuclear antibody, the resistance of smooth muscle antibodies andantimitochondrial antibodies are higher than those in the control group; the positive rate of and women with antibodies detection rate was higher than male patients. conclusion: autoantibody detection in the differential diagnosis of autoimmune liver disease can play an important role.【key words】autoimmune liver disease; their own antibody test; indirect immunofluorescence自身免疫性肝病（ald）又称“自身免疫性肝病”、“自身免疫活动性慢性肝炎”。

自身免疫性疾病的实验室检测

几种疾病RF的检出率
抗角蛋白抗体AKA 主要见于RA患者，阳性率为30-55%，特异性可达95%-99%。其他疾病中检出率极低。AKA是判断RA预后的一个标志性抗体，高滴度常提示疾病较为严重，AKA与RF很少平行出现。
抗环瓜氨酸肽抗体CCP： ELISA法检测。对RA的特异性为96%。在 RA早期阶段就可测出，其特异性明显高于 RF，抗CCP阳性者更容易发生关节损害。
自身免疫性疾病的主要实验检测
张富强
自身免疫性疾病
机体免疫系统受环境或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原的免疫应答（自身抗体或致敏T细胞），导致自身组织器官损伤或功能障碍所致的疾病。
常见自身抗体的检测
抗核抗体的检测与应用抗ENA抗体谱的检测与应用与小血管炎相关的自身抗体检测与应用与RA相关自身抗体的检测与应用与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用
常见ＡＮＡ荧光染色模型
均质型（H）：高滴度均质型主要见于SLE患者。颗粒型（S）：高滴度的颗粒型常见于MCTD，同时也见于SLE，硬化症、SS等。核膜型（M）：主要见于原发性胆汁性肝硬化。核仁型（N）：高滴度对诊断硬皮病具有一定特异性。
常见自免的ＡＮＡ检出率
抗ｄｓＤＮＡ抗体的检测与应用
抗ENA抗体谱的检测与应用
抗ENA抗体谱：可提取核抗原抗体的总称。临床常检测的主要包括：抗Sm抗体：SLE标记性抗体（30%-40%阳性检出率）抗nRNP抗体：MCTD 95%阳性检出率（高滴度）抗SSA/Ro、抗SSB/La抗体：SS 阳性检出率分别为：70-80%和40%，抗 SSB的特异性高于抗SSA。可达50-60%。抗Sc1-70抗体：几乎仅在 PSS患者检出，在PSS的阳性检出率40%-60% 抗Jo-1抗体：常见于多发性肌炎DM，检出率40-50%，在PM/DM检出率 25%，单独皮肌炎检出率不足10% 抗ACA抗体：与局限性系统性硬化症有关，亦可见于原发性胆汁性肝硬化（PBC）

中级临床医学检验主管技师专业实践能力-10_真题(含答案与解析)-交互

中级临床医学检验主管技师专业实践能力-10(总分100, 做题时间90分钟)案例分析题以下提供若干个案例，每个案例下设若干个提问，请根据题干所提供的信息和提示信息，在每题下面备选答案中选出全部正确答案。

答案可能为一个或多个。

(注：案例分析题答题在机考中不可逆，即答完一问后不能返回修改)患儿男，6岁。

3周前曾因发热，咽喉疼痛，咳嗽，服用“感冒灵”后症状消退。

1天前突发颜面浮肿，查体：BP 150/90mmHg，尿常规：RBC(+++)，WBC：12/HP，尿蛋白(++)。

SSS_MULTI_SEL1.该患儿可能的诊断是A 肾病综合征B 急进性肾炎C 急性肾小球肾炎D 慢性肾炎E 肾盂肾炎F 肾结核G 尿路感染H 急性间质性肾炎分值: 1答案:C[解析] 急性链球菌感染后肾小球肾炎常在上呼吸道感染、皮肤感染、猩红热等链球菌感染后发生。

主要发生在儿童。

临床表现为血尿，高血压，水肿等。

患儿的发病符合急性肾小球肾炎的临床表现。

SSS_MULTI_SEL2.为进一步进行诊断，需要做的实验室检查是A ASOB 血沉C 血常规D 肾功能检查E 血培养F 补体C3测定G 抗核抗体测定分值: 1答案:A,B,C,D,F[解析] 患儿考虑为链球菌感染后肾小球肾炎，故应检查ASO、血沉、血常规，可见白细胞升高，血沉加快，ASO上升；患儿有血尿、浮肿，要了解肾功能情况，可表现为一过性氮质血症；补体C3降低对诊断有重要价值。

此时血培养一般阴性，咽拭子培养阳性率为20%～30%。

SSS_MULTI_SEL3.导致急性肾小球肾炎的相关病原菌是A 金黄色葡萄球菌B A群链球菌C B群链球菌D 肺炎链球菌E 肠球菌F 大肠杆菌分值: 1答案:B[解析] 急性链球菌感染后肾小球。

肾炎多为β溶血性链球菌“致肾炎菌株”，常为A群链球菌感染后所致。

B群是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌。

肺炎链球菌是大叶性肺炎和支气管炎的病原菌。

大肠杆菌、肠球菌所致感染最多见于尿路感染。

血清抗平滑肌抗体检测风湿

血清抗平滑肌抗体检测风湿【血清抗平滑肌抗体检测风湿】随着医学科技的不断发展，越来越多的检测项目成为了临床常规，其中血清抗平滑肌抗体检测风湿就是其中之一。

本文将介绍该检测项目的背景、原理、应用以及注意事项。

一、背景风湿性疾病是一类常见的自身免疫性疾病，其中包括风湿关节炎、系统性红斑狼疮等。

这些疾病的发生和发展过程中，平滑肌细胞受到免疫系统的攻击，导致相应器官和组织的炎症损害。

因此，抗平滑肌抗体的检测对于早期诊断和疾病监测具有重要意义。

二、原理血清抗平滑肌抗体是指针对平滑肌细胞成分的抗体，可以通过免疫荧光技术（IIF）进行检测。

该技术基于抗体与特定抗原结合后的荧光现象，通过观察荧光强度和分布情况，可以判断抗体的存在及其相关疾病的发生程度。

三、应用1. 早期诊断：血清抗平滑肌抗体检测可作为风湿性疾病早期诊断的一项辅助指标。

疾病早期，抗平滑肌抗体水平通常会升高，在其他症状不典型的情况下，可以提供更准确的诊断依据。

2. 疾病评估：对于已经确诊的风湿性疾病患者，血清抗平滑肌抗体的检测可以用于监测疾病的进展和治疗效果。

抗体水平的持续升高可能意味着疾病活动性的增加，而抗体的下降则可能预示着治疗的有效性。

3. 潜在风险筛查：对于一些与风湿性疾病相关的人群，如家族史阳性者，血清抗平滑肌抗体的检测可以用于早期筛查可能存在的风险。

及早发现患者有助于进行密切监测并采取相应的干预措施。

四、注意事项1. 抗体水平的升高并不一定表示患有风湿性疾病，因此需要结合其他临床表现和检测结果进行综合判断。

2. 检测结果可能受到一些因素的影响，如年龄、性别、病程和治疗等。

因此，在解读结果时需要考虑个体差异和临床背景。

3. 血清抗平滑肌抗体检测属于一种辅助诊断手段，不能作为单独的诊断依据，应结合其他临床资料进行综合分析。

4. 检测过程中要严格遵守无菌操作和规范操作流程，确保结果准确可靠。

【结束语】血清抗平滑肌抗体检测风湿是一项重要的临床检测项目，在风湿性疾病的早期诊断、疾病评估和潜在风险筛查中具有举足轻重的作用。

抗线粒体抗体与γ-GG及ALP的关系

抗线粒体抗体与γ－ＧＧ及ALP的关系发表时间：2015-01-30T09:36:48.557Z 来源：《医药界》2014年11月第11期供稿作者：高红梅史微[导读] 原发性胆汁性肝硬化（ＰＢＣ）是一种自身免疫性肝脏慢性炎症性疾病，病理学表现为非脓性肝内胆管慢性炎症和汇管区淋巴细胞浸润［１］。

高红梅史微（红河州第一人民医院云南红河６６１４００）【中图分类号】Ｒ５４２【文献标识码】Ａ【文章编号】１５５０－１８６８（２０１４）１１【摘要】目的：探讨抗线粒体抗体与γ－ＧＧＴ及ＡＬＰ之间的相关性。

方法：将我院收治的６０例原发性胆汁性肝硬化患者设为观察组，将来我院健康门诊接受体检的６０名健康体检者设为对照组，检测两组的ＡＬＰ（碱性磷酸酶）、γ－ＧＧＴ（谷氨酰转移酶）和抗线粒体抗体（ＡＭＡ）。

对比两组上述指标的差异，分析抗线粒体抗体与γ－ＧＧＴ和ＡＬＰ的关系。

结果：观察组患者的γ－ＧＧＴ和ＡＬＰ明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），观察组患者６０例患者中，５６例患者的抗线粒体抗体检测结果为阳性，对照组则均为阴性（Ｐ＜０．０５）患者γ－ＧＧＴ和ＡＬＰ的水平越高，抗线粒体的阳性检出率越高。

结论：抗线粒体抗体、γ－ＧＧＴ及ＡＬＰ均可作为临床诊断原发性胆汁性肝硬化患者的指标。

抗线粒体抗体阳性可能与患者γ－ＧＧＴ和ＡＬＰ的升高有关。

【关键词】抗线粒体抗体；γ－ＧＧＴ；ＡＬＰ原发性胆汁性肝硬化（ＰＢＣ）是一种自身免疫性肝脏慢性炎症性疾病，病理学表现为非脓性肝内胆管慢性炎症和汇管区淋巴细胞浸润［１］。

临床研究发现有９０％以上的原发性胆汁性患者的抗线粒体抗体（ＡＭＡ）呈阳性，且在患者临床症状出现之前即可检测出较高的阳性率，同时当患者的ＡＭＡ呈阳性时，其ＡＬＰ和γ－ＧＧＴ水平也会有所升高，因此推测三者之间存在一定的相关性［２］。

我院本次针对抗线粒体抗体和γ－ＧＧＴ、ＡＬＰ之间的相关性进行了研究，现将研究结果报告如下。

１．资料与方法１．１一般资料随机选取２０１３年１月至２０１４年１月期间我院收治的６０例原发性胆汁性肝硬化患者参与本次研究，并将其设为观察组，将在同一时间段内来我院健康门诊接受体检的６０名健康体检者设为对照组。

医学检验·检查项目：抗平滑肌抗体(ASMA)_课件模板

医学检验·各论：抗平滑肌抗体（ASMA） >>>
相关症状：腹水、消瘦、发热。
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相关疾病：
肝炎后综合征、肝炎双重感染、肝硬化男性性功能减弱综合征、胆汁性肝硬化、丁型病毒性肝炎、营养不良性肝硬化、心原性肝硬化、新生儿肝炎综合征、小儿自身免疫性淋巴细胞增生综合征、药物性肝硬化、暴发性肝炎样综合征、丙型病毒性肝炎、戊型病毒性肝炎、肝硬化、先天性梅毒性肝硬化、新生儿肝炎、甲型
医学检验·各论：抗平滑肌抗体（ASMA） >>>
相关疾病：肝炎、原发性胆汁性肝硬化、病毒性肝炎、缺血性肝炎。
谢谢！
性肝硬化、慢性活动性肝炎等，以及老年人。
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正常值：间接免疫荧光法：小于1:10（阴性）。
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相关检查：
自身免疫性疾病14项、乙肝两对半（定量）、乙肝两对半（定性）、抗庚型肝炎病毒IgG抗体、抗庚型肝炎病毒E2抗体、抗戊型肝炎病毒IgM抗体。
医学检验·各论抗平滑肌抗体（ASMA）
内容课件模板
医学检验·各论：抗平滑肌抗体（ASMA） >>>
简介：肝、肾等组织与平滑肌肌动蛋白具有
共同的抗原性，当肝受损后刺激机体产生能与平滑肌抗原发生交叉SMA） >>>
临床意义：阳性：见于狼疮性肝炎、原发性胆汁

自勉6项检验方式

自勉6项检验方式
自身免疫性肝病抗体6项检测，包括以下六种：
一、抗平滑肌抗体，约85%的一型自身免疫性肝炎患者中可以检测到抗平滑肌抗体，高低度的抗平滑肌抗体对于自身免疫性肝炎有重要的诊断意义。

二、抗肝肾微粒体抗体。

抗肝肾微粒体抗体包括三种与微粒体酶、细胞色素p450反应的亚型抗体。

其中第一型被认为是二型自身免疫性肝炎的特异性抗体，敏感性为90%。

也有发现2%~10%的丙型肝炎患者体内也会出现该抗体阳性。

三、抗肝细胞胞浆抗原一型抗体，其阳性率率大于30%。

四、抗线粒体抗体。

抗线粒体抗体是一种以线粒体为靶抗原，无种属和器官特异性的自身抗体，是自身免疫性肝硬化患者的特异性抗体，敏感性能达95%以上。

特异性为97%。

五、抗SP100抗体。

六、抗可溶性肝抗原抗体。

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Ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
Ｍｕｓｃｌｅ，ｓｍｏｏｔｈ；
自身免疫性肝病是一类由自身免疫系统介导的，慢性的、进展性的肝胆炎症，主要包括自身免疫
性肝炎（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｈｅｐａｔｉｔｉｓ，ＡＩＨ），原发性胆汁性肝硬化（ｐｒｉｍａｒｙ
ｂｉｌｉａｒｙ
广及转化应用研究”项目组研制，为自身免疫性疾病患者血清，经滤膜除菌、去除纤维蛋白原和添加稳
ｏｆＭｅｄｉｃａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ＆ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎ
ｏｆ
ＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ
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【Ａｂｓｔｒａｃｔ】
ａｎｄＡＭＡｉｎｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ａｔ
ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
和提高自身免疫性肝病相关自身抗体谱检测质量。ｒ乒华检验医学杂志，２０１４，３７：１２７—１３１）抗体
Ａｍｕｌｔｉ－ｃｅｎｔｅｒｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎ１５４ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓｏｆＣｈｉｎａＳｏｎｇＮｉｎｇ，ＳｈｉＤｅｎｇＣｈｕｉｗｅｎ．ＨｕＣｈｎｏｊｕｎ，ＢａｉＦｅｎｇｃｈｕｎ，ＬｉＹｉｎａ．ＤｏｎｇＸｉａｏｊｕａｎ，ＬｉＰｉＴｌｇ，Ｌｉ
ｂｙｔｈｅｇｒｏｕｐｏｆＣｌｉｎｉｃａｌｐｒｏｍｏｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｋｅｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅｓｏｆｔｈｅＲｅｓｅａｒｃｈＳｐｅｃｉａｌＦｕｎｄｆｏｒＰｕｂｌｉｃＷｅｌｆａｒｅＩｎｄｕｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ（“ｔｈｅｇｒｏｕｐ”ｆｏｒｓｈｏｒｔ），ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ５ＡＳＭＡｓａｍｐｌｅｓａｎｄ５ＡＭＡｓａｍｐｌｅｓ（ｆｏｒＡＭＡ—Ｍ２，ｔｏｏ），ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｍａｉｌｅｄｔｏｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓｕｎｄｅｒｎｏｒｍａｌｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｎ１５ｔｈＤｅ（－２０１２．Ｔｈｅｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓｗｅｒｅｒｅｑｕｉｒｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅ
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ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－９１５８．２０１４．０２．０１３基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１０７２４８６，８１１７２８５７）；同家十一五科技支撑计划资助项目（２００８ＢＡｌ５９８０３）；卫生公益性行业科研专项（２０１２０２００４）作者单位：１０００３２中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院风湿免疫科风湿免疫病教育部重点实验室通信作者：李永哲，电子信箱：ｙｏｎｇｚｈｅｌｉｐｕｍｃｈ＠Ｉ
ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ，ＰＢＣ）和原发性硬
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括抗平滑肌抗体（ａｎｔｉ—ｓｍｏｏｔｈ
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ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＡＭＡ）和ＡＭＡ—Ｍ２亚型，其在疾病的诊断、判断疾病活动性和预后判断等方面有重要意义。２Ｊ。近年，越来越多的实验室开展以上自身抗体
生堡堕堕匡堂盘查！！！！生！旦筮！！鲞筮！塑堡生！』！：些丛鲴：！！！里！型！！！！！！！！：！！：丛！．！
１２７
．论著．
中国１５４家实验室检测抗平滑肌抗体和抗线粒体抗体的比对分析
邓垂文
胡朝军
白依娜
董晓娟
李萍
李丽君
宋宁
史艳萍张奉春李永哲
【摘要】目的调查分析中国检测平滑肌抗体（ＡＳＭＡ）和抗线粒体抗体（ＡＭＡ）‘１ｊ作现状，为改
ｌｅａｓｔｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｏｎｅｉｔｅｍ）ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｖｏｌｕｎｔａｒｉｌｙｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｍｕｌｔｉ—ｃｅｎｔｅｒｏｆａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｔｅｓｔｉｎｇｏｆａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｔｈｅｓａｍｐｌｅｓ（ｓｅｒｕｍｌｉｑｕｉｄ）ｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄ
Ｃｈｉｎａｆｏｒｅｖｉｄｅｎｃｅ
ＳｕｒｖｅｙａｎｄａｎａｌｙｓｅｓｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎｏｆａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｔｅｓｔｉｎｇｏｆＡＳＭＡｏｆｆｕｒｔｈｅｒｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｄｅｔｅｃｔｉｎｇｑｕａｌｉｔｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＳｕｒｖｅｖｓｔｕｄｖ．１５４
病相关自身抗体检测质量现状，促进各实验室提高检测质量，向临床提供准确的检测结果，本研究对２０１２年１５４家实验室ＡＳＭＡ、ＡＭＡ和ＡＭＡ—Ｍ２亚型的检测结果进行分析，以发现问题，提高检测质量。
材料与方法一、参加比对实验室由卫生公益性行业科研专项“风湿免疫病诊疗
进其检测质量提供依据。方法调查性研究。共有１５４家实验室（至少参加１个项目的检测比对１二作）自愿报名参加全国自身免疫性肝病相关抗体检测多中心比对分析，、由卫生公益性行业科研专项 “风湿免疫病诊疗关键技术临床推广及转化应用研究”项目组（以下称“项Ｖｔ组”）制备比对样品（液体血清），包括５份ＡＳＭＡ比对样品和５份ＡＭＡ（包括ＡＭＡ—Ｍ２亚型抗体检测）比对样品，并于２０１２年１２月１５日常温下将比对样品发放至各实验室。要求各实验室在２０１２年１２月３１日之前按照各自实验室常规方法检测比对样品，并于２０１３年１月１４日前将检测结果以及检测所用方法填入统一表格寄回项目组。项目组采用Ｅｘｃｅｌ软件对检测结果进行分析，主要包括符合率分析和滴度回报率分析。结果ＡＳＭＡ一１为ＡＳＭＡ阳性，余为ＡＳＭＡ阴性。ＡＭＡ一３和ＡＭＡ－４为ＡＭＡ及ＡＭＡ—Ｍ２双阳性，余为ＡＭＡ及ＡＭＡ—Ｍ２双阴性。参加ＡＳＭＡ、ＡＭＡ和ＡＭＡ—Ｍ２检测比对：ｒ作的实验室数目分别为１０３家、１０３家和１３８家。ＡＳＭＡ、ＡＭＡ和ＡＭＡ—Ｍ２比对品检测结果阳性符合率分别为５７．３％、６６．５％和９３．５％，阴性符合率分别为９６．８％、９９．０％和９７．８％。间接免疫荧光法是检测ＡＳＭＡ和ＡＭＡ的主要方法，但该法阳性符合率较低，分别为５７．６％和６５．２％，且２个项目的滴度回报率亦较低，分别为３９．１％和４３．５％。同时回报ＡＭＡ和ＡＭＡ—Ｍ２检测结果的实验室占总回报实验室的５７．０％。结论２０１２年我国临床实验室检测ＡＳＭＡ和ＡＭＡ比对品的阳性符合率尚不理想，阴性符合率较好。ＡＭＡ—Ｍ２检测符合率均较好。ＩＩＦ法检测ＡＳＭＡ和ＡＭＡ的滴度回报率较低。目前亟需规范
ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ
ｒａｔｅ
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５７．３％．６６．５％ａｌｌ（ｉ９３．５％．ｍｅａｎｗｈｉｌｅｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ
ｗｅｒｅ
９６．８％、９９．０％和９７．８％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．１ｎｄｉｒｅｅｔｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓ（＇ｅｎｃｅ（ＩＩＦ）ｗａｓｔｈｅ
ｒａｔｅ
ｒａｔｅ
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