第八章核酸分子杂交技术习题
分子生物学题库(含参考答案)
分子生物学题库（含参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、电脑显示和打印出的 DNA 碱基序列图谱中不出现的颜色：A、紫B、蓝C、绿D、黄E、红正确答案：A2、点突变引起的血友病 A 的分子诊断方法不包括A、PCR-SSCPB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、长距离 PCR正确答案：E3、巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和 (或) 量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案：E4、有下列哪项指征者应进行产前诊断A、夫妇之一有致畸因素接触史的B、习惯性流产的孕妇C、夫妇之一有染色体畸变的D、35 岁以上高龄的E、以上都是正确答案：E5、描述随机扩增多态性 DNA 技术不正确的是 ( )A、引物序列随机B、有多条引物C、电泳分离产物D、需要限制性内切酶酶切E、反应基因组多态性正确答案：D6、绝大多数β-地中海贫血系由位于第 11 号染色体上的β-珠蛋白基因中的基因突变所致，下列方法中不能用于分子生物学检验的技术是A、PCR-ASOB、PCR-RDBC、基因芯片D、多重 PCRE、MOEA-PCR正确答案：D7、关于测序策略的叙述正确的是A、应该具有最大重叠、最小数量的测序反应B、最小的目的DNA 片段 (如＜1kb) ，可以使用引物步移法C、最小的目的DNA 片段 (如＜1kb) ，可以使用随机克隆法D、大片段未知序列DNA 测序，可以直接测序E、大规模基因组计划，可以使用多个测序策略正确答案：E8、在人类基因组中，编码序列占的比例为A、5%B、1.5%C、21%D、3%E、23%正确答案：B9、PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案：B10、Tm 值主要取决于核酸分子的A、A-T 含量B、G-C 含量C、A-C 含量D、T-G 含量E、C-T 含量正确答案：B11、结构基因突变不包括A、基因扩增B、基因点突变C、基因表达异常D、基因缺失E、基因重排正确答案：C12、由于突变使编码密码子形成终止密码，此突变为：A、无义突变B、移码突变C、终止密码突变D、同义突变E、错义突变正确答案：A13、关于肺炎支原体的实验室检测，正确的是A、体外培养生长缓慢但阳性率很高B、免疫学方法检测的假阳性率较低C、体外培养在支原体感染的早期诊断上具有重要意义D、利用分子生物学方法可以进行流行病学调查和耐药基因分析E、PCR 技术可检测到极微量的 DNA，但特异性不高正确答案：D14、最早发现与 mtDNA 突变有关的疾病是A、肿瘤B、Leber 遗传性视神经病C、糖尿病D、耳聋E、MELAS 综合征正确答案：B15、关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案：E16、关于SYBR Green Ⅰ 的描述，不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案：D17、转录依赖扩增系统的描述错误的是A、以 RNA 为模板B、首先由靶 RNA 合成 DNA 拷贝C、再由DNA 转录生成大量 RNA 拷贝D、产物为 DNAE、为等温扩增正确答案：D18、目前已知感染人类最小的 DNA 病毒 ( )A、HIVB、HPVC、HBVD、HAVE、HCV正确答案：C19、核酸分子杂交的基础是A、碱基互补配对B、甲基化C、磷酸化D、抗原抗体结合E、配体受体结合正确答案：A20、基因芯片技术在移植配型中有着越来越广泛的应用，也具有其他技术不能比拟的优点，以下不属于基因芯片技术特点的是A、观察判断直观B、自动化程度高C、微缩化D、操作繁琐E、高通量正确答案：D21、关于 NC 膜下列描述不正确的是A、能吸附单链 DNAB、能吸附单链 RNAC、依赖于高盐浓度结合靶分子D、对小分子 DNA 片段 (<200bp) 结合力强E、易脆正确答案：D22、线粒体糖尿病属于A、新发现的第 5 种糖尿病B、特殊类型糖尿病C、妊娠期糖尿病D、1 型糖尿病E、2 型糖尿病正确答案：B23、一般来说核酸杂交的温度低于其 Tm 值多少度A、15~25℃B、40~50℃C、5~10℃D、10~15℃E、30~40℃正确答案：A24、K-ras 基因最常见的激活方式是A、染色体重排B、插入突变C、点突变D、缺失突变E、基因扩增正确答案：C25、检测目标是 RNA 的技术是：A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：C26、以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案：B27、关于 HPV 各亚型遗传物质的描述正确的是A、有的是脱氧核糖核酸，有的是核糖核酸B、都是核糖核酸C、同时存在脱氧核糖核酸和核糖核酸D、都是脱氧核糖核酸E、脱氧核糖核酸与核糖核酸可交替互换正确答案：D28、PCR 技术扩增 DNA，不需要的条件是 ( )A、目的基因B、引物C、四种脱氧核苷酸D、DNA 聚合酶E、mRNA正确答案：E29、延伸的温度通常为A、55℃B、95℃C、25℃D、37℃E、72℃正确答案：E30、下列密码子中，终止密码子是 ( )A、UUAB、UGAC、UGUD、UAUE、UGG正确答案：B31、影响DNA 分离纯化效果的是A、材料新鲜，低温保存B、加核酸酶抑制剂C、剧烈震荡D、除净蛋白质E、除净多糖正确答案：C32、丙型肝炎病毒基因组高变区位于A、E1 区B、C 区C、NS3 区D、NS4 区E、NS1/E2 区正确答案：E33、为封闭非特异性杂交位点，可在预杂交液中加入A、ssDNAB、1 ×SSCC、10×SSCD、5×TBECE、50×TAE正确答案：A34、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、沙眼衣原体B、鼠衣原体C、豚鼠衣原体D、鹦鹉热衣原体E、肺炎衣原体正确答案：A35、DNA 自动化测序技术中，不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案：B36、决定 PCR 反应特异性和PCR 长度的物质是( )A、引物B、模板C、dNTPD、Mg2+E、DMSO正确答案：A37、下列不是影响DNA 复性因素的是A、DNA 浓度B、DNA 的分子量C、温度D、碱基组成E、DNA 的来源正确答案：E38、下列不是目前用于 O157：H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案：E39、下列叙述哪项是错误的( )A、原核生物基因组具有操纵子结构B、原核生物结构基因是断裂基因C、原核生物基因组中含有插入序列D、原核生物基因组中含有重复序列E、原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA 正确答案：B40、指导合成蛋白质的结构基因大多数为：A、中度重复序列B、散在核原件C、单拷贝序列D、高度重复序列E、回文序列正确答案：C41、双链 DNA 的 Tm 值主要与下列哪项有关 ( )A、A-T 含量B、G-T 含量C、A-G 含量D、T-G 含量E、C-G 含量正确答案：E42、第三代测序技术测定人全基因组的目标：A、30 分钟的测序时间及 5 万美元的测序价格B、3 小时的测序时间及 5 千美元的测序价格C、3 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格D、3 小时的测序时间及 5 万美元的测序价格E、30 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格正确答案：C43、阳性质控品失控的原因不包括A、提取的核酸残留有抑制物B、扩增仪孔间温度不一致C、Taq 酶失活D、扩增产物污染E、核酸提取试剂失效正确答案：D44、关于 DNA 芯片描述不正确的是A、探针为已知序列B、有序地高密度地固定于支持物上C、理论基础是核酸杂交D、可研究基因序列E、不能研究基因功能正确答案：E45、下列关于 real-time PCR 引物设计的原则中，不正确的是A、两条引物的Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、引物过长可能提高退火温度正确答案：A46、Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案：A47、变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案：E48、纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8，可使比值升高的是：A、蛋白质B、酚C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案：C49、人类可遗传的变异中最简单、最常见的一种是 ( )A、RFLPB、VNTRC、STRD、SNPE、CNV正确答案：D50、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案：B51、判断 HBV 复制及传染性的直接指标是检测A、HBV DNA 多聚酶活力B、HBsAgC、HBV DNAD、HBeAgE、HBcAg正确答案：C52、病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案：C53、单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、携带者诊断B、产前诊断C、症状前诊断D、耐药基因检测E、携带者筛查正确答案：B54、mtDNA 突变不会导致A、综合征型耳聋B、非综合征型耳聋C、神经性耳聋D、药物性耳聋E、氨基糖苷类抗生素耳毒性正确答案：C55、关于真菌，以下描述正确的是A、真菌种类繁多，其中大多数对人类有害B、浅部真菌感染对治疗有顽固性，对机体的影响相对较小C、近年真菌病的发病率有明显下降趋势D、病原性真菌根据其入侵组织部位深浅的不同分为浅部真菌和内部真菌E、真菌感染对人体的危害不大正确答案：B56、利用DNA 芯片检测基因的表达情况，杂交条件应选( )A、高盐浓度、低温和长时间B、低盐浓度、低温和长时间C、高盐浓度、高温和长时间D、高盐浓度、低温和短时间E、高盐浓度、高温和短时间正确答案：A57、下列叙述不正确的是A、F 质粒的主要特征是带有耐药性基因B、R 质粒又称抗药性质粒C、Col质粒可产生大肠杆菌素D、F 质粒是一种游离基因E、F 和ColE1 质粒可以在同一菌株内稳定共存正确答案：A58、有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域，通常不被转录D、形式为 (CA) n/ (TG) n、 (AG) n、 (CAG) n 等E、又称为可变数目串联重复序列 (VNTR)正确答案：D59、以 SDA 技术检测结核杆菌时扩增靶点是A、SDAB、IS6110 和 18SrRNAC、IS6110 和 5SrRNAD、IS6110 和 16SrRNAE、IS6110 和 15SrRNA正确答案：D60、下列不属于血友病 B 间接诊断方法的是A、PCR-RFLPB、PCR-SSCPC、双脱氧指纹图谱D、毛细管电泳E、变性高效液相色谱正确答案：D61、关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案：D62、关于 PCR 反应引物的描述，不正确的是A、引物的长度在 20~30bpB、引物自身或引物之间不应存在互补序列，防止产生二聚体和发夹结构C、引物中 G+C 的含量占 45%~55%D、引物的3’端可以带有生物素、荧光或酶切位点等作为标记E、两条引物的Tm 值应该尽量相近正确答案：D63、关于逆转录 PCR 的描述，不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外，还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案：E64、以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是 ( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基正确答案：A65、逆转录 PCR 扩增最终产物的特异性由A、随机引物决定B、oligo-d (T) 决定C、PCR 扩增的特异引物决定D、扩增效率决定E、逆转录酶决定正确答案：C66、有关 SNP 位点的描述，不正确的是A、生物芯片技术可提高 SNP 位点的检测准确性B、单个 SNP 位点信息量大，具广泛的应用前景C、在整个基因组中大概有 300 万个 SNP 位点D、被称为第三代 DNA 遗传标志E、SNP 位点是单个核苷酸的变异正确答案：A67、下列不属于单基因遗传病产前诊断常用方法的是A、巢式 PCRB、全基因组扩增C、多重 PCRD、Western blotE、PCR-SSCP正确答案：D68、Sanger 双脱氧链终止法使用的链终止物是A、α-35S-dNTPB、dNTPC、ddNTPD、α-32P-dNTPE、NTP正确答案：C69、标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、杂交B、复性C、变性D、复杂性E、探针正确答案：E70、关于 mtDNA 复制特点的描述正确的是A、线粒体密码子与核基因密码子相同B、mtDNA 以 D-环复制为主要模式，与核 DNA 复制同步C、mtDNA 两条链的复制是同步的D、mtDNA 为自主性复制，不受核内基因控制E、参与 mtDNA 复制所需的酶、调控因子等由核 DNA 编码正确答案：E71、Northern 印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是 RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案：C72、线粒体基因组与核基因组之间，下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录，之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍，影响细胞呼吸、氧化功能，进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制，但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立，但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ，相互影响，相互协调正确答案：A73、基因芯片技术的优点不包括A、高通量B、操作简单C、芯片检测稳定性高D、观察结果直观E、微缩化正确答案：C74、基因多态性连锁分析中，第一、二、三代遗传标记分别是A、RFLP、SSCP、STRB、RFLP、SNP、STRC、RFLP、STR、SNPD、VNTR、SSCP、SNPE、VNTR、STR、RFLP正确答案：C75、PCR 反应必需的成分是A、BSAB、DTTC、Tween20D、明胶E、Mg2+正确答案：E76、SYBR Green Ⅰ技术常要求扩增片段不大于A、50bpB、100bpC、200bpD、300bpE、400bp正确答案：D77、任意引物 PCR 的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组 DNA 图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案：A78、下列说法错误的是A、用于 RNA 检测的样本短期可保存在-20℃B、用于 PCR 检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入 1mol/L NaOH 初步处理正确答案：B79、以下哪种酶可用于 PCR 反应 ( )A、KlenowB、HindⅢC、Taq DNA 聚合酶D、RNaseE、Dnase正确答案：C80、相对于第一代测序技术，新一代测序技术不具有的优点：A、模板不需要克隆B、高通量C、并行D、较长的测序读长E、一次运行可产生海量的高质量数据正确答案：D81、下列几种 DNA 分子的碱基组成比例，哪一种的Tm 值最高 ( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案：A82、某基因位点正常时表达为精氨酸，突变后为组氨酸，这种突变方式为：A、同义突变B、移码突变C、错义突变D、无义突变E、动态突变正确答案：C83、聚合酶链式反应是一种A、体外特异转录 RNA 的过程B、体外翻译蛋白质的过程C、体外特异转录 DNA 的过程D、体外特异复制 DNA 的过程E、体内特异复制 DNA 的过程正确答案：C84、最能直接反映生命现象的是：A、蛋白质组B、基因组C、mRNA 水平D、糖类E、脂类正确答案：A85、下列哪种病毒在复制过程中可产生 RNA-DNA 杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案：A86、丙型肝炎病毒的核酸类型 ( )A、双链 RNAB、单链正链 RNAC、双链环状 DNAD、单链 DNAE、单链负链 RNA正确答案：B87、关于 p53 基因说法不正确的是A、属于抑癌基因B、在进化过程中高度保守C、编码蛋白为转录因子p53 蛋白，与调控细胞生长周期、调节细胞转化、DNA 复制及诱导细胞凋亡有关D、可单独作为乳腺癌预后的分子标志E、定位于人染色体 17q13 上正确答案：E88、不能作为 PCR 模板的是A、DNAB、RNAC、质粒 DNAD、蛋白质E、cDNA正确答案：D89、关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A90、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案：D91、单细胞基因扩增一般采用下列何种技术增加检测的敏感性和特异性A、巢式 PCRB、多重 PCRC、PCR-RFLPD、等位基因特异性 PCRE、PCR-SSCP正确答案：A92、构成完整的病毒颗粒的成分是A、糖蛋白B、蛋白质与核酸C、核酸D、结构蛋白E、蛋白质正确答案：B93、TaqMan 探针技术要求扩增片段应在A、250~300bpB、50~150bpC、150~200bpD、200~250bpE、300~350bp正确答案：B94、产前诊断临床应用尚不广泛，原因不包括A、单个细胞的遗传诊断困难B、诊断的准确性受到多种制约C、需要生殖医学与遗传学技术的结合D、已明确母亲为携带者的婴儿E、诊断技术不成熟正确答案：E95、关于 TaqMan 探针技术的描述，不正确的是A、R 基团与Q 基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高B、易受到Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案：C96、下面关于线粒体的描述不正确的是A、是真核细胞重要的细胞器B、线粒体的主要功能是氧化产能C、是细胞的能量工厂D、半寿期是 10 天左右，其数量和体积保存不变E、线粒体中存在基因，线粒体基因突变会导致疾病的发生正确答案：D97、关于特定突变位点探针的设计说法正确的是A、长度为 N 个碱基的突变区需要 2N 个探针B、检测变化点应该位于探针的中心C、检测变化点应该位于探针的两端D、探针设计时不需要知道待测样品中靶基因的精确细节E、采用等长移位设计法正确答案：B98、在人类基因组 DNA 序列中，DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案：D99、质粒的主要成分是A、多糖B、蛋白质C、氨基酸衍生物D、DNA 分子E、脂类正确答案：D100、HIV 最易发生变异的部位是A、核衣壳蛋白B、刺突蛋白C、逆转录酶D、包膜蛋白E、内膜蛋白正确答案：B。
核酸章节复习题答案
核酸章节复习题答案一、填空题1.维持DNA双螺旋结构稳定的因素是（氢键）和（碱基堆积力）。
杂合双链，这个过程称为（分子杂交）。
3.双链DNA热变性OD260值（增加）；单链DNA热变性OD260值（不变）。
4.Waton-Crick提出的B-DNA双螺旋结构的螺距为（3.4nm），相邻两个核苷酸之间的夹角为（36度）。
5.核苷三磷酸在代谢中起着重要作用。
（ATP）是能量和磷酸基团转移的重要物质，（UTP）参与单糖的转变和多糖的合成，（CTP）参与卵磷脂的合成，（GTP）供给肽链合成时所需要的能量。
6.给动物食用3H标记的（T），可使DNA带有放射性，而RNA不带放射性。
7.双链DNA中，若（G-C）含量多，则Tm值高。
8.如果来自物种A的DNA的Tm值比物种B的DNA的Tm值低，则前者的A-T含量比后者的（高）。
9.实验室常用（OD260nm某RNA溶液总体积某100/(0.02某L某RNA 称取量)）方法测定DNA含量，用（OD260nm某RNA溶液总体积某100/(0.024某L 某RNA称取量)）方法确定RNA含量。
10.用碱水解核酸，产物主要是（3′核苷酸）和（2′核苷酸）的混合物。
11.tRNA的二级结构为（三叶草）形结构，包含四个臂三个环，其中氨基酸臂的功能是（携带氨基酸），反密码子环的功能是（识别密码子）。
12.溶液中DNA分子最传统的构象为（B型双螺旋）。
13.各类核糖核酸中,稀有核苷酸含量百分比最高的是（tRNA）。
14.真核生物mRNA的5'末端有一个帽子结构是（7甲基鸟嘌呤）3'末端有一个尾巴是（polyA）15.应用紫外分析仪,测定DNA含量时,选用的波长是（260nm）。
二、判断题1.当DNA进行复制时，顺序为5′pTpApGpA3′的片段会产生下列哪一种互补结构？（A）A．5′pTpCpTpA3′B．5′pApTpCpT3′C．5′pUpCpUpA3′D．5′pGpCpGpA3′2.Waton-Crick的DNA双链螺旋结构模型表示（A）A．DNA的两条链走向相反；B．碱基A和G配对；C．碱基之间共价结合；D．磷酸-戊糖骨架位于DNA螺旋内侧3.下面哪一种说法对外显子是正确的？（C）A．存在于原核生物基因中B．也称居间顺序C．真核生物断裂基因中编码基因终产物的DNA片段D．一般比内含子长得多4.胰核糖核酸酶水解RNA，产物是（D）A．3′-嘧啶核苷酸；B．5′-嘧啶核苷酸C．3′-嘧啶核苷酸和以5′-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸D．3′-嘧啶核苷酸和以3′-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸5.dTMP的直接前体是（D）A．dAMP；B．dCMP；C．dGMP；D．dUMP6.下列哪种基因组在紫外照射下最容易发生突变？（B）A．双链DNA病毒；B．单链RNA病毒；C．细胞核基因组；D．线粒体基因组7.真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基联接，联接方式是：（D）A.2′-5′；B.3′-5′；C.3′-3′；D.5′-5′8.下列突变中，哪一种致死性最大？（D）A.胞嘧啶取代腺嘌呤；B.腺嘌呤取代鸟嘌呤；C.插入三个核苷酸；D.插入一个核苷酸9.tRNA分子上3′端的功能为：（C）A.形成局部双键；B.供应能量；C.提供-OH基与氨基酸结合；D.辨认mRNA上的密码子10.RNA经NaOH 水解，其产物是哪一种？（D）A.3′-核苷酸；B.5′-核苷酸；C.2′-核苷酸；D.3′核苷酸和2′核苷酸的混合物11.一个RNA片段（GICmDUA）中含有稀有碱基：（C）A.五个；B.四个；C.三个；D.二个12.核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是（C）A磷酸戊糖B核苷C碱基顺序D磷酸二酯键13.嘧啶与戊糖形成糖苷键，彼此连接的位置是（B）AN3—C1BN1—C1CN1—C5DC1—C114.核酸分子中单核苷酸的彼此连接是靠（A）A磷酸二酯键B 氢键C糖苷键D盐键15．多核苷酸链骨架的连接键是（D）A2’,3’-磷酸二酯键B2’,4’-磷酸二酯键C2’-5’-磷酸二酯键D3’-5’-磷酸二酯键16．关于Waton和Crick双螺旋模型特点描述错误的是（C）A两条链碱基之间形成氢键BDNA两条链相互平行，方向相反C磷酸和核糖在内侧，碱基在外侧DA-T和G-C配对17．维持DNA二级结构稳定的主要因素是（C）A盐键B糖苷键C氢键D磷酸二酯键18．DNA分子中，A的含量为15%，则C的含量为（C）A15%B20%C35%D30%19．关于DNA变性后特点的描述错误的是（D）A氢键断裂，双链分开B黏度下降C对紫外光的吸收增加D碱基相互聚合20．核酸紫外线吸收的特征来自（C）A5’-磷酸核糖B5’-磷酸脱氧核糖C嘌呤、嘧啶碱基D以上都错21．双链DNA的Tm值较高，是由于（B）含量高导致AA+GBC+GCC+TDA+C 22．RNA和DNA彻底水解后的产物（C）A核糖相同，部分碱基不同B碱基相同，核糖不同C碱基不同，核糖不同D碱基不同，核糖相同23．核酸变性后，可发生哪种效应（C）A失去紫外吸收的能力B减色效应C增色效应D溶液黏度增加24．关于tRNA的叙述不正确的是（C）A三级结构为倒―L‖型B参与蛋白质的生物合成C含有密码子环D 含有大量的稀有碱基25．单链DNA：5’-CGGTA-3’能与（A）RNA杂交A5’-UACCG-3’B5’–GCCAU-3’C5’-GCCAT-3’D5’-TACCG-3’26．核酸对紫外线的最大吸收在（B）A320nmB260nmC280nmD190nm27．真核生物mRNA结构特点是（C）A3’末端具有-CCAB3’末端有多聚鸟苷酸尾巴C有5’末端帽子和3’末端聚A尾D二级结构为三叶草型28.(C)由以3',5'-磷酸二脂键相连接的核苷酸组成的A.DNAB.RNAC.两者均可D.两者均不可29.有关DNA结构的正确说法是()A.双螺旋的两股链是相同的B.双螺旋两股链平行,也即走向同一方向C.双螺旋中的碱基平行于螺旋的轴D.双螺旋中的糖-磷酸基垂直于螺旋的轴E.每个糖成分上有一个自由的羟基三、是非题1.用3H胸腺嘧啶只能标记RNA，而不能标记DNA。
临床分子生物学检验技术知到章节答案智慧树2023年济宁医学院
临床分子生物学检验技术知到章节测试答案智慧树2023年最新济宁医学院第一章测试1.下列哪项检测需应用分子生物学检验技术（）参考答案:乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测2.1976年，简悅威应用DNA分子杂交技术成功进行了（）疾病的产前诊断。
参考答案:α-地中海贫血3.临床分子生物学检验最常用的分子标志物是（）参考答案:核酸4.下列核酸分子标志物中游离在体液细胞外的是（）。
参考答案:循环核酸5.下列关于循环核酸说法错误的是（）参考答案:利于肿瘤等疾病的早期检测，正常人体内不存在第二章测试1.下列关于分子生物标志物说法错误的是（）参考答案:分子生物标志物仅指能够反应机体病理状态的生物大分子2.下列叙述哪项是错误的（）参考答案:原核生物结构基因是断裂基因3.卫星DNA序列属于（）参考答案:串联重复序列4.以下哪项不是真核生物核基因组的特点（）参考答案:重复序列少见5.大肠杆菌类核结构的组成是（）参考答案:蛋白质+DNA1.下列关于DNA分离纯化说法错误的是（）参考答案:DNA提取过程要加入RNA酶抑制剂抑制RNA酶活性2.下列关于RNA分离纯化说法错误的是（）参考答案:RNA提取过程要加入DNA酶抑制剂抑制DNA酶活性3.常利用哪些性质进行分离纯化蛋白质（）参考答案:分子大小不同、溶解度不同、表面电荷不同、与配体的特异亲和力都是4.蛋白质分离纯化方法叙述错误的是（）参考答案:琼脂糖凝胶常用于蛋白质的分离5.纯DNA溶液的A260/ A280值为（）参考答案:1.81.以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针结合，则该样本为（）。
参考答案:携带者2.下列探针标记方法中，（）法在标记之前探针的长度已经确定.。
参考答案:化学法全程标记3.Southern杂交通常是指（）。
参考答案:DNA和DNA杂交4.基因芯片技术的本质是（）。
参考答案:核酸分子杂交技术5.检测的靶序列是RNA的技术是（）。
三基训练题-临床分子生物学检验
第八章临床分子生物学检验一、选择题1．下列核酸在波长为260 nm时，光吸收强度大小排列正确的是：( ) A．G>A>T>C B。
A>T>G>C．C>G>T>A D．G>C>A>T2．鉴别RNA靶分子的杂交是：( )A．Southern Blot B．Northern BlotC．WesternBlot D．斑点杂交3．在做RNA检测时，对全血抗凝抗凝剂最好选用：( )A．肝素B．EDTA-K2C．EDTA-Na2 D．草酸钾4．一般DNA分子中的碱基数组成规律，下列说法错误的是：( ) A．A二C，G＝TB．A+G＝C+TC不同DNA中碱基组成不相同‘D．同一个不同组织细胞中DNA碱基组成相同5．核酸分子储存和传递遗传信息是通过：( )A．核苷的结构B．磷酸二酯键C．碱基顺序D·核苷酸的结构6．分子生物学对医学的发展已经起到越来越大的作用，许多分子生物学的发现对分子生物学的发展都起到里程碑的作用，基因就是由转化功能的DNA所组成，最早的发现者是：( )A．Friderick Griffith B．A1hed HersheyC．Martha Chase D．Oswald Avery7．基因扩增检测方法也有检测的灵敏度，一般适时荧光定量PCR的检测下限是：( )A 103拷贝／ml B．104拷贝／m1C．102拷贝／ml D．105拷贝／m18．RNA和DNA彻底水解后的产物为：( )A．核糖相同，部分碱基不同B．核糖不同，碱基相同C．核糖相同，碱基相同D．核糖不同，部分碱基不同9．下列碱基仅存在于RNA中而不存在于DNA中的是：( )A．鸟嘌呤B．尿嘧啶C．胸腺嘧啶D．腺嘌呤二填空题1．核酸的最大紫外吸收波长在，蛋白质的最大吸收波长在。
2．双链DNA中的碱基对有、。
3．根据分子和结构不同，RNA可以分为、、、。
4．核酸变性过程中，紫外光吸收达到最大值50％时温度称为。
核酸分子杂交及PCR技术
核酸的分子杂交技术一、核酸分子杂交用标记的已知DNA或RNA片段（探针）来检测样品中未知核酸序列，通过核苷酸间碱基互补的原则发生异源性结合，再经显影或显色的方法，将结合核酸序列的位置或大小显示出来。
待测的核酸序列，可以是克隆的基因片段，也可以是未克隆化的基因组DNA和组织细胞的RNA。
二、核酸分子杂交的分类液相杂交核算分子杂交印记杂交固相杂交原位杂交1.固相杂交：将需要杂交的一条核酸链先固定在固体支持物上，另一条核酸链游离在液体中。
2.液相杂交：参与反应的两条核酸链都游离在液体中。
常用固相杂交类型：Southern印迹杂交、Northern印迹杂、菌落原位杂交、斑点杂交、狭缝杂交、组织原位杂交、夹心杂交等。
三、核酸分子杂交的基本原理1、变性：在某些理化因素的作用下，核酸双链分子碱基对的氢键断裂，疏水作用被破坏，双链螺旋或发夹结构被拆开，有规则的空间结构被破坏，形成单链分子，称为核酸的变性。
﹡引起核酸变性的因素：热、酸、碱、化学试剂（如：尿素、甲酰胺、甲醛等）。
﹡加热变性是最常用的方法，一般加热80-100℃数分钟即可使核酸分子氢键断裂，双链分开。
﹡变性的核酸分子失去了生物活性，同时理化性质也随之改变，其紫外吸收值（A260）也随之升高。
可用紫外吸收的变化来跟踪DNA的变性过程。
以A260吸收值对应温度作图，得到DNA的变性曲线或熔解曲线。
增色效应：DNA变性后对260nm紫外光收增加的现象。
DNA热变性现象双螺旋结构即发生解体，两条链分开形成无规则线团。
同时，一系列物化性质发生改变：260nm处紫外吸收值升高，粘度降低，浮力密度升高。
由于二级结构的丧失，也失去了部分或全部生物活性。
增色效应和减色效应当DNA分子加热变性后，其260nm的紫外吸收会急剧增加的现象称为增色效应。
变性DNA复性后，在260nm处的吸收值减少的现象称为减色效应。
A260值达到最大值1/2时的温度称为解链温度或熔解温度（melting temperature,Tm)，此时50%的DNA分子发生了变性。
分子生物学复习题 第八章重组DNA技术
第八章重组DNA技术一、选择单选1、下列哪项不属于生物工程？A. PCR技术B.重组DNA技术C.蛋白质工程D.酶工程E.细胞工程2、重组DNA技术中所用的限制酶是哪类？A.Ⅰ型限制酶B.Ⅱ型限制酶C.Ⅲ型限制酶D.Ⅳ型限制酶E.Ⅴ型限制酶3、可以利用蓝白筛选法筛选用pUC转化的重组DNA克隆，是因为pUC包含以下哪种元件？A.复制起点B. amp RC.acZ'D.多克隆位点MCSE.调节基因lacI4、关于λ噬菌体，以下叙述错误的是A.基因组DNA的部分序列并非溶原性生长所必需B.基因组DNA感染大肠杆菌后形成闭环结构C.在溶原性生长时进行滚环复制D.复制时形成多联体结构E.其转化的细菌经过培养形成噬菌斑5、pBR322质粒包含两个抗性基因：氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，据此可以利用哪种方法筛选重组DNA克隆？A.α互补B. PCRC.插入失活D.核酸分子杂交E.蓝白筛选6、制备重组DNA首先要制备目的DNA，要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。
常用的制备方法不包括A.PCR扩增B.从组织细胞分离基因组DNAC.化学合成D.逆转录合成cDNAE.限制酶截取7、第一种应用于临床的重组蛋白是A.基因工程疫苗B.基因工程抗体C.激素D. 生长因子E.细胞因子8、在重组DNA技术中，目的DNA与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。
体外重组的方法不包括：A.加人工接头连接B.加同聚物尾连接C.互补黏端连接D.连接E.平移连接9、重组DNA的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。
用于制备基因文库的宿主细胞主要是A.哺乳动物细胞B.大肠杆菌C.酵母D.枯草杆菌E.昆虫细胞10、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞？A.CaCl2法B.病毒感染法C.脂质体载体法D.显微注射法E.穿刺法11、蓝白筛选属于筛选重组DNA克隆方法的哪种？A.PCR分析B.插入失活分析C.核酸分子杂交分析D.酶切分析E.免疫分析12、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A. T病毒基因组DNA的一部分B. 细菌染色体外的独立遗传单位C. 细菌染色体DNA的一部分D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位E. 真核细胞染色体DNA的一部分13、某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生A. 5’突出末端B. 5’或3’突出末端C. 5’及3’突出末端D. 3’突出末端E. 平末端14、“克隆”某一目的DNA的过程不包括A. 重组DNA分子导人受体细胞B. 外源基因与载体的拼接C. 基因载体的选择与构建D. 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E. 表达目的基因编码的蛋白质15、关于基因文库及其构建，以下叙述错误的是A.基因文库包括基因组文库和cDNA文库B.构建基因组文库常用的克隆载体是λ噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统C.目前构建的cDNA文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列D.真核生物cDNA文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物E.构建cDNA文库要用到逆转录酶多选：1、用目的DNA和质粒制备重组DNA，下列哪些工具酶是必需的？A.DNA聚合酶B.核酸酶C.连接酶D.限制酶E.修饰酶2、影响限制酶切割效率的因素有那些？A.底物纯度B.底物甲基化程度C.底物结构D.反应温度E.反应体系组成3、哪些因素会降低限制酶的特异性?A.高浓度限制酶B.高浓度甘油C.低离子强度D.用Mn2+取代Mg2+E.高pH值4、限制酶的应用非常广泛，包括:A.DNA重组B.质粒改造C. DNA杂交D.探针制备E.基因定位5、关于重组DNA技术使用的DNA 连接酶A.用以将目的DNA与载体共价连接成重组DNAB.包括大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶C.大肠杆菌DNA连接酶需要NAD，而T4 DNA连接酶需要ATPD.大肠杆菌DNA连接酶用于连接切口或互补黏端E.T4 DNA连接酶用于连接互补黏端或平端6、重组DNA技术常用的DNA聚合酶有A.DNA聚合酶ⅠB. Klenow片段C. Taq DNA聚合酶D. 逆转录酶E. T4 DNA聚合酶7、载体分为克隆载体和表达载体两类。
核酸杂交技术
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核酸探针的种类
• 根据标记方法不同可粗分为放射性探 针和非放射性探针两大类；
• 根据探针的核酸性质不同又可分为 DNA探针，RNA探针，cDNA探针， cRNA探针及寡核苷酸探针等几类；
• 固相杂交： Bolton等1962年设计了第一种简单的固相杂交 方法，称为DNA-琼脂技术。
• 膜杂交：60年代中期Nygaard 等的研究为应用标记DNA或 RNA探针检测固定在硝酸纤维素（NC）膜上的DNA序列 奠定了基础。Brown等应用这一技术评估了爪蟾rRNA基 因的拷贝数。
• 原位杂交：Orth（1970）应用3H标记的兔乳头状瘤病毒 cRNA探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交，首次 用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位。
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核酸分子杂交的发展
• 液相杂交：Hall等1961年将探针与靶序列在溶液中杂交， 通过平衡密度梯度离心分离杂交体。该法很慢、费力且不 精确，但它开拓了核酸杂交技术的研究。
cDNA探针
• cDNA （ complementary DNA ） 是 指 互 补 于 mRNA的DNA分子。cDNA是由RNA经逆转录酶 （reverse transcriptase）的DNA聚合酶催化产 生的，这种逆录酶是Temin等在70年代初研究致 癌RNA病毒时发现的。该酶以RNA为模板，根据 碱基配对原则，按照RNA的核苷酸顺序合成DNA （其中U与A配对）。这一途径与一般遗传信息流 的方向相反，故称反向转录或逆转录。
核酸分子杂交试题(全打印)
核酸分子杂交试题（全打印）一.名词解释:1.核酸分子杂交2.DNA复性3.Southern杂交4.Northern杂交5.斑点印迹6.原位杂交二.单项选择题:1.在加热或紫外线照射下，可导致两条DNA链中间的氢链断裂，而核酸分子中所有的共价键则不受影响的称为（）。
A.DNA变性B.DNA复性C.DNA重组D.DNA杂交2.DNA变性的本质是（）的断裂。
A.盐键B.氢键C.离子键D.共价键3.一般影响核酸变性的温度可选在（）。
A.60—70℃B.70—80℃C.80—90℃D.90—100℃4.在核酸分子杂交时，一般对应温度作图得到的DNA复性曲线所用的紫外吸收值是（）。
A.A260吸收值B.A280吸收值C.A320吸收值D.A360吸收值5.进行核酸分子杂交时，一般适宜的探针浓度是（B）。
A.0.1μgB.0.1—0.5μgC.0.5--1μgD.1.0—1.5μg6.杂交时如果使用单链核酸探针，随着溶液中探针浓度的增加，杂交效率也会增加，所以探针长度控制在（）。
A.50—300bpB.20—200bpC.300—400bpD.200—5007.进行核酸杂交时，一般适宜的复性温度较Tm值低（）。
A.10℃B.15℃C.20℃D.25℃8.寡核酸探针杂交反应一般在低于Tm值（）下进行。
A.5℃B.10℃C.15℃D.25℃9.下列哪种试剂能降低核酸杂交的Tm 值（B）。
A．尿素B.甲酰胺C.甲醛D.乙醇10.在凝胶中核酸变性时，为了使DNA片段在合理的时间内从凝胶中移动出来，必须将最长的DNA片段控制在大约（）。
A.1KbB.2KbC.3KbD.4Kb11.将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜上，用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究，称为（）。
A.原位杂交B.核酸酶保护实验C.斑点印迹D.狭缝印迹12.核酸保持在细胞或组织切片中经适当方法处理细胞或组织后，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为（）。
8.印迹杂交技术
片段的大小和含量
40
41
第四节 核酸分子杂交的分类
根据杂交核酸分子的种类：
DNA与DNA杂交
DNA与RNA杂交 RNA与RNA杂交
42
根据杂交探针标记的不同： 同位素杂交
非同位素杂交
43
根据杂交介质的不同： 液相杂交 点杂交/狭缝杂交
菌落杂交 固相杂交 Northern 杂交 Southern杂交
②为单链核酸，双链核酸探针使用前需变性解链
③具有高度特异性，只与待测核酸杂交
④探针序列通常是基因编码序列，因为非编码序列 特异性低
⑤探针标记灵敏度高而稳定，标记方法简便而安全
10
二、探针的种类 1.基因组DNA探针 2. RNA探针 3. cDNA探针
4.寡核苷酸探针
11
⒈ 基因组DNA探针
基因组DNA探针多为某一基因的全部或部
第八章 印迹杂交技术
1
第一节 核酸分子杂交的基本原理
基本概念:
核酸分子杂交:
将一种核酸单链标记成为探针．再与另一种核 酸单链进行碱基互补配对，可以形成异源双链核酸 分子的过程。
杂交体:杂交形成异源双链核酸分子
2
核酸分子杂交
不同来源的核酸经变性和复性的过程，其中一些局 部碱基互补片段在复性时形成杂化双链，此过程称 分子杂交。
35
核酸的固定
烘烤：80℃ 2小时 紫外线固定：几分钟
碱固定：使用碱溶液转印DNA或
RNA过程中，DNA或RNA可以自动地
共价地结合到带正电荷或不带电荷的
尼龙膜上。
36
⒋预杂交
将固相膜上能够结合核酸的位点全部封闭
能够结合核酸片段的固相膜同样能够结合探针，
分子杂交技术(精)
1、检测受体细胞中的标记基因是否表达，即是否表现出标记基因的性状，从而判断受体细胞中是否已导入含有目的基因的运载体。
如果检测出标记基因表达的性状，说明运载体已导入受体细胞。
2、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。
检测方法是：采用DNA分子杂交技术。
先将转基因生物的基因组提取出来；把目的基因的DNA片段用放射性同位素作标记做成探针；使探针与基因组DNA杂交，如果出现杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。
3、检测目的基因是否转录出了mRNA，这是检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。
采用DNA与RNA分子杂交技术。
从转基因生物中提取出mRNA，把目的基因的DNA片段用放射性同位素作标记做成探针；使探针与mRNA杂交，如果出现杂交带，就表明目的基因转录出了mR NA。
4、检测目的基因是否翻译成蛋白质。
从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体（对抗进行同位素标记）进行抗原——抗体杂交；如果出现杂交带，表明目的基因已形成蛋白质产品。
5、个体生物学水平的鉴定。
如：一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后，是否具有了抗虫或抗病特性，需要做抗虫或抗病的接种实验，观察害虫的存活情况或植物的患病情况以确定是否具有抗性及抗性的程度。
又如：有的基因工程产品需要与天然产品的功能进行活性比较，以确定转基因产品的功能中否与天然产品相同，甚至超过天然产品。
互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。
杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。
目的基因的检测与鉴定的补充课本Southern杂交法一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
8第八章原位杂交组织化学gil
3 杂交（Hybridisation）
杂交:核酸探针进入细胞或组织与其内的靶核苷酸相结合。 是ISHH中关键的而且是最重要的一个环节。
杂交方式:是将杂交液滴于切片组织上，加盖硅化的盖玻片。 加盖片的目的 防止孵育过程中的高温（50℃左右）导致杂交液的蒸发; 硅化的盖玻片的优点是清洁无杂质，光滑,无气泡,不会影响 组织切片与杂交液的接触; 盖玻片自身重量能与杂交液吸附达到覆盖和防蒸发的作用。
❖ 光敏生物素试剂种类：
光生物素（乙酸盐）
补骨脂素生物素。
生物素-聚乙二醇-当归素（BPA）：在长波UV下它可与 DNA碱基共价键结合。BPA反应物与DNA结合比光敏生 物素更特异，在可见光下它不与核酸反应，这个特异性可 使BPA只标记粗制细胞裂解物中的核酸，而不标记蛋白、 多糖和其他细胞大分子。
❖ 光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序如下：
（二）核酸探针
❖ 1 核酸探针的种类
❖ 2 探针的标记与应用
1 核酸探针的种类
（1）按标记方式分类
直接法和间接法：
１）直接标记探针
应用藕联异硫氰酸荧光素（FITC）或罗丹明Rhodamine 等荧光物质的dNTP或NTP直接标记探针，杂交洗涤后即 可在显微镜下检测。
２）间接标记探针 采用生物素或地高辛等半抗原分子作为分子标记探针，杂 交洗涤后分别用抗生物素抗体和抗地高辛抗体作为配体进 行检测，配体上分别连有不同的荧光物质，在荧光显微镜 下观察分析。
原位杂交组织化学（ISHH）
原理： 用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核
酸 序列的方法。 特点：杂交在载玻片上的细胞进行。 分类： 根据所用探针和靶核苷酸不同--
DNA-DNA杂交、 DNA-RNA杂交、 RNA-RNA杂交 根据探针标记物是否直接被检测—
2020年智慧树知道网课《临床分子生物学检验技术(哈尔滨医科大学)》课后章节测试满分答案
绪论单元测试1【判断题】(20分)临床分子生物学检验技术学科建立在分子生物学学科之前。
A.对B.错2【判断题】(20分)临床分子生物学检验技术是从分子水平研究解决临床诊断与治疗问题。
A.对B.错3【多选题】(20分)现代临床医学的发展方向：（）A.预测医学B.预防医学C.个体化医学D.中西医结合4【多选题】(20分)下列技术为临床分子生物学检验常用检测技术的是（）A.基因测序B.SouthernblotC.分子杂交D.其余均不对5【判断题】(20分)临床分子生物学检验技术学科发展第一阶段的代表性技术为分子杂交技术。
A.错B.对第一章测试1【单选题】(20分)在人类基因组DNA序列中，DNA甲基化主要发生在（）A.鸟嘌呤的N-7位B.鸟嘌呤的C-5位C.胞嘧啶的C-5位D.胞嘧啶的N-4位E.腺嘌呤的N-6位2【单选题】(20分)下列DNA序列中的胞嘧啶（）易发生甲基化修饰的是。
A.5'-CGCGCG-3'B.5'-GGGGCC-3'C.5'-CCCCCT-3'D.5'-GCACAC-3'E.5'-CTCTCCC-3'3【单选题】(20分)某基因位点正常时表达为精氨酸，突变后为组氨酸，这种突变方式为（）A.移码突变B.动态突变C.无义突变D.同义突变E.错义突变4【单选题】(20分)由于突变使编码密码子形成终止密码，此突变为（）A.无义突变B.移码突变C.终止密码突变D.同义突变E.错义突变5【单选题】(20分)下列叙述哪项是的（）A.原核生物基因组具有操纵子结构B.原核生物结构基因是断裂基因C.原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNAD.原核生物基因组中含有插入序列E.原核生物基因组中含有重复顺序第二章测试1【单选题】(20分)DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的（）A.T－G含量B.A－G含量C.A－C含量D.A－T含量E.G－C含量2【单选题】(20分)Southern杂交通常是指（）A.DNA和RNA杂交B.DNA和蛋白质杂交C.蛋白质和蛋白质杂交D.RNA和RNA杂交E.DNA和DNA杂交3【单选题】(20分)下列哪些不是影响DNA复性的因素（）A.碱基组成B.DNA浓度C.温度D.DNA的分子量E.DNA的来源4【单选题】(20分)探针基因芯片技术的本质就是（）A.基因重组技术B.蛋白质分子杂交技术C.酶切技术D.聚合酶链反应技术E.核酸分子杂交技术5【单选题】(20分)DNA探针的长度通常为（）A.1000～2000个碱基B.400～500个碱基C.<100个碱基D.500～1000个碱基E.100～400个碱基第三章测试1【单选题】(20分)以mRNA为模板合成cDNA的酶是()A.DNA酶B.逆转录酶C.RNA酶D.限制性内切酶E.TaqDNA聚合酶2【单选题】(20分)有关PCR的描述下列不正确的是（）A.引物决定了扩增的特异性B.由变性、退火、延伸组成一个循环C.循环次数越多产物量就越大，可增加循环次数提高产物量D.是一种酶促反应E.扩增的对象是DNA序列3【单选题】(20分)下列关于TaqDNA聚合酶的描述，的是（）A.扩增的DNA片段越长，碱基错配率越低B.催化形成3´,5´-磷酸二酯键C.不具有3´5´外切酶活性D.使DNA链沿5´→3´方向延伸E.以dNTPs为原料4【单选题】(20分)PCR反应过程中，退火温度通常比引物的Tm值（）A.低15℃B.高5℃C.低5℃D.相等E.高15℃5【单选题】(20分)PCR反应中延伸的时间取决于（）A.待扩增片段的长度B.模板的含量C.模板的纯度D.TaqDNA聚合酶的量E.引物长度第四章测试1【单选题】(20分)关于TaqMan探针技术的描述，不正确的是（）A.解决了荧光染料技术非特异的缺点B.R基团与Q基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高C.易受到TaqDNA聚合酶5′-3′核酸外切酶活性的影响D.无需进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E.操作亦比较简单2【单选题】(20分)以下为比较Ct法的相对定量的描述，不正确的是（）。
分子生物学练习题库+答案
分子生物学练习题库+答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、α互补筛选法属于：A、原位杂交筛选B、抗药性标志筛选C、免疫化学筛选D、酶联免疫筛选E、标志补救筛选正确答案：E2、原核生物染色体基因组是A、线性双链DNA分子B、环状双链DNA分子C、线性单链DNA分子D、线性单链RNA分子E、环状单链DNA分子正确答案：B3、进行蛋白质溶液凝胶过滤脱盐时,宜选用的葡萄糖凝胶是A、G-75B、G-100C、G-150D、G-25E、G-200正确答案：D4、关于DNA双螺旋结构模型的叙述中，除了哪一项外其余都是正确的A、两股核苷酸链呈反向平行B、两股链间有严格的碱基配对关系C、为右手螺旋，每个螺距含10对碱基D、极性磷酸二酯键位于双螺旋内侧E、螺旋直径为2nm正确答案：D5、已知序列的情况下，获得目的DNA最常用的是A、筛选cDNA文库B、化学合成法C、DNA合成仪合成D、聚合酶链式反应E、基因组DNA文库分离正确答案：D6、分子生物学领域中，分子克隆主要是指A、DNA的大量复制B、DNA的大量剪切C、RNA的大量剪切D、RNA的大量复制E、蛋白质分子的大量复制正确答案：A7、Southem杂交通常是指A、DNA与RNA杂交B、DNA与DNA杂交C、RNA与RNA杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA与蛋白质杂交正确答案：B8、下述哪一条对质粒的描述是错的？A、从细菌体内分离出的质粒DNA在体外呈现超螺旋，开环和线性三种状态的混合物B、质粒DNA往往是闭环状态C、质粒小则转化效率较高D、质粒对宿主细胞的转化效率高于噬菌体E、大片段DNA与质粒重组较困难正确答案：D9、tRNA的结构特点不包括A、含甲基化核苷酸B、5’-末端具有特殊的帽子结构C、有局部的双链结构D、三叶草型的二级结构E、倒L型三级结构正确答案：B10、下列哪种不是癌基因产物A、生长因子类似物B、酪氨酸蛋白激酶C、转录调控中的反式作用因子D、细胞骨架蛋白E、RNA聚合酶正确答案：E11、Taq-DNA聚合酶可以不要模板在dsDNA的末端加上A、dCTPB、dGTPC、dATPD、dTTPE、dNTP正确答案：C12、确切地讲，cDNA文库包括含:A、一个物种的全部基因信息B、一个物种的全部mRNA信息C、一个生物体组织或细胞的全部基因信息D、一个生物体组织或细胞的全部mRNA信息E、一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息正确答案：E13、有关真核基因组的说法错误的是A、基因组DNA以染色体的形式储存在细胞核内B、结构基因大多为断裂基因C、真核基因的转录产物为单顺反子D、基因组的编码序列所占比例远低于非编码序列E、真核生物基因组不包括线粒体基因组正确答案：E14、下述哪项不是重组DNA的连接方式A、平端与平端的连接B、黏性末端与黏性末端的连接C、黏性末端与平端的连接D、人工接头连接E、同聚物加尾连接正确答案：C15、关tRNA分子的恰当解释是A、tRNA的功能主要在于结合蛋白质合成所需要的各种辅助因子B、tRNA分子多数由80个左右的氨基酸组成C、tRNA的D、反密码环中的反密码子的作用是结合DNA中相互补的碱基E、以上都不正确正确答案：C16、以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称为A、转位B、感染C、转染D、转化E、转导正确答案：D17、有关PCR的描述，不正确的为A、引物决定扩增的特异性B、是一种酶促反应C、以DNA或RNA作为模板D、扩增的序列是氨基酸残基E、是在体外进行的核酸复制过程正确答案：D18、菌落杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、用于基因定位分析C、不仅可以检置DNA样品中是否存在某特定的基因,还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息D、阳性菌落的筛选E、检测目标是正确答案：D19、分子杂交实验不能用于：A、单链DNA与RNA分子之间的杂交B、双链DNA与RNC、分子之间的杂交D、单链RNA分子之间的杂交E、单链DNA分子之间的杂交F、抗原与抗体分子之间的杂交正确答案：B20、右手DNA双螺旋模型是何年提出的A、1950年B、1953年C、1958年D、1955年E、1919年正确答案：B21、适用于DNA序列中单个碱基突变的检测方法是A、多重PCRB、巢式PCRC、锚定PCRD、LCRE、原位PCR正确答案：D22、核酸分子杂交的原理是：A、核苷酸分子间形成磷酯键配对B、抗原抗体结合C、碱基互补配对D、氨基酸残基配对E、配体受体结合正确答案：C23、有关核酸的变性与复性的恰当叙述为A、热变性后相同的DNA经缓慢冷却后可复性B、不同的DNA分子变性后，在合适温度下都可复性C、复性的最佳温度为25摄氏度D、热变性的DNA迅速降温过程也称作退火E、以上都不正确正确答案：A24、原核生物的基因主要存在于A、质粒B、类核C、线粒体D、核糖体E、转座因子正确答案：B25、PCR技术的发明人是A、穆利斯B、史蒂文·沙夫C、兰德尔·才木D、沃森E、施莱登正确答案：A26、DNA和RNA共有的成分是A、D-2-脱氧核糖B、D-核糖C、鸟嘌呤D、尿嘧啶E、胸腺嘧啶正确答案：C27、关于癌基因论述正确的是A、癌基因只存在于病毒中B、甲基化程度增高导致原癌基因被激活C、细胞癌基因是细胞的正常基因D、细胞癌基因来源于病毒癌基因E、有癌基因的细胞一定发生癌变正确答案：C28、下列哪一种概念不属于印迹技术：A、DNA杂交B、RNA杂交C、WesternD、斑点杂交E、氨基酸层析正确答案：E29、核酸中含量相对恒定的元素是A、氮B、氧D、碳E、磷正确答案：E30、下列有关DNA变性的叙述，不正确的是A、两条多核苷酸链间氢键断裂B、分子中磷酸二酯键断裂C、DNA中含GC碱基对多则Tm值高D、两条多核苷酸链分离E、A正确答案：B31、质粒DNA提取中,沉淀DNA的是A、70%乙醇B、无水乙醇C、酚-氯仿D、SDSE、异丙醇正确答案：B32、RNA和DNA彻底水解后的产物A、核糖相同，部分碱基不同B、碱基相同，核糖不同C、碱基不同，核糖不同D、碱基不同，核糖相同E、部分碱基不同，核糖不同正确答案：E33、核酸的基本组成单位是A、戊糖和磷酸B、戊糖和碱基C、核苷酸D、戊糖、碱基和磷酸E、以上均不正确正确答案：C34、用于蛋白质检测的标本长期保存于A、-20℃C、8℃D、温室E、-70℃正确答案：E35、蛋白质水平的检测，主要采用A、原位杂交法B、Southern印迹法C、Northern印迹法D、斑点杂交法E、Western印迹法正确答案：E36、关于 PCR 的基本成分叙述错误的是：A、特异性引物B、耐热性DNA聚合酶C、ddNTPD、含有MgE、模板正确答案：C37、构成核酸的基本单位是A、核苷酸B、多核苷酸C、磷酸戊糖D、核苷E、环核苷酸正确答案：A38、DNA的二级结构是A、β-折叠B、α-螺旋C、双螺旋结构D、三叶草结构E、锌指结构正确答案：C39、不属于乳糖操纵子结构的是A、启动子B、操纵原件C、通透酶相关基因D、外显子区域E、LacZ正确答案：D40、下列有关mRNA的叙述，正确的是A、为线状单链结构，5’端有多聚腺苷酸帽子结构B、可作为蛋白质合成的模板C、链的局部不可形成双链结构D、3’末端特殊结构与mRNA的稳定无关E、三个相连核苷酸组成一个反密码子正确答案：B41、核酸的最大紫外光吸收值一般在哪一波长附近A、280nmB、260nmC、220nmD、240nmE、200正确答案：B42、组织DNA提取中,苯酚-氯仿抽提离心分三层,DNA位于A、上层B、中间层C、下层D、中间层和下层E、上下均有正确答案：A43、基因芯片显色和分析测定方法主要为A、32P法B、荧光法C、放射法D、生物素法E、地高辛法正确答案：B44、多重PCR反应体系中引物数量为A、不加引物B、半对引物C、一对引物D、两对引物E、两对以上引物正确答案：E45、下列有关加热导致DNA变性的叙述，不正确的是A、黏度降低B、紫外光吸收值降低C、50％链结构被解开时的温度称为DNA的TmD、热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性E、变性后的DNA紫外吸收增强正确答案：B46、重组DNA技术中实现目的的基因与载体DNA拼接的酶是A、限制性核酸内切酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、DNA聚合酶正确答案：C47、从细菌体内分离出的质粒DNA，在体外的状态是A、多聚体B、超螺旋C、开环D、线性E、单链正确答案：B48、下列几种DNA分子的碱基组成比例各不相同，哪一种DNA的解链温度最低A、DNA中A+T含量占15％B、DNA中C+C含量占25％C、DNA中C+C含量占40％D、DNA中A+T含量占60％E、DNA中C+C含量占70％正确答案：B49、DNA携带生物遗传信息意味着A、病毒的侵染是靠蛋白质转移至宿主细胞来实现的B、不论哪一物种碱基组成均应相同C、同一生物不同组织的DNA，其碱基组成相同D、DNA碱基组成随机体年龄及营养状况而改变E、同一物种碱基组成不同正确答案：C50、分离纯化核酸的原则是A、保持二级结构完整并保证纯度B、保持空间结构完整C、保持一级结构完整并保证纯度D、保证纯度与浓度E、保证一定浓度正确答案：C51、核酸变性后可发生A、增色效应B、减色效应C、沉淀D、最大吸收峰波长发生转移E、失去对紫外线的吸收能力正确答案：A52、世界上首次用已经分化成熟的体细胞核通过克隆技术培育的动物是A、克隆绵羊B、克隆奶牛C、克隆猴D、克隆鼠E、克隆猪正确答案：A53、目前,临床实验室最常用的PCR技术是A、定性PCRB、实时荧光定量PCRC、反转录PCRD、多重PCRE、数字PCR正确答案：B54、有关DNA的变性是A、DNA分子中糖苷键的断裂B、DNA分子中磷酸二酯键的断裂C、DNA分子中碱基的水解D、DNA分子由正超螺旋转变成负超螺旋E、DNA分子中碱基间氢键的断裂正确答案：E55、α-互补筛选法属于A、抗生素抗性筛选B、免疫化学筛选C、分子杂交筛选D、标志补救筛选E、酶联免疫筛选正确答案：D56、克隆的基因组DNA不宜在以下哪种系统中表达A、E.coli表达体系B、酵母表达体系C、COS细胞表达体系D、昆虫表达体系E、哺乳动物细胞表达体系正确答案：A57、具有里程碑意义的.、标志着现代分子生物学开端的是A、遗传规律B、发现DNA聚合酶C、PCR技术D、基因编辑技术E、DNA双螺旋结构正确答案：E58、重组体中切出插入片段，最常用的方法是A、用DNA酶将其切出B、用多种限制性内切酶将其切出C、用核酶将其切出D、用重组时所用的限制性内切酶将其切出E、用DNA聚合酶I将其切出正确答案：D59、DNA序列测定中，待测DNA克隆到质粒载体后，通过下列哪种方法处理重组载体，使测序引物便于结合模板DNA？A、碱变性B、加热C、紫外线照射D、酸变性E、乙醇处理正确答案：A60、以等位基因特异的寡核行微探针余交法给诊断某常染色体隐性道遗传病时,若能与突变研及正常探针结合,则该样本为A、不能确定B、正常人C、纯合体患者D、携带者E、杂合体患者正确答案：E61、对于tRNA的叙述哪一项是不正确的A、tRNA分子中含有稀有碱基B、tRNA=级结构呈三叶草形C、tRNA的=级结构有=氢尿嘧啶环D、反密码环是有CCA三个碱基组成反密码子E、以上均不正确正确答案：D62、下列关于DNA碱基组成的的叙述正确的是A、DNA分子中A与T的含量不同B、同一个体成年期与少儿期碱基组成不同C、同一个体在不同营养状态下碱基组成不同D、同一个体不同组织碱基组成不同E、不同生物来源的DNA碱基组成不同正确答案：E63、在分子生物学领域,重组DNA又称A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNA工程正确答案：D64、基因工程中，将目的基因与载体DNA拼接的酶是A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶ⅢC、限制性内切核酸酶D、DNA连接酶E、反转录酶正确答案：D65、M13噬菌体适用于A、构建基因组文库B、构建CDNA文库C、克隆较小DNA片段D、克隆待测序的E、以上都对正确答案：D66、tRNA分子上3’端CCA-OH的功能为A、辨认mRNA上的密码子B、提供-OH基与氨基酸结合C、被剪接的组分D、形成局部双链E、识别并结合核蛋白体正确答案：B67、外显子的特点通常是A、不编码蛋白质B、不被转录也不被翻译C、调节基因表达D、只被转录但不翻译E、编码蛋白质正确答案：E68、下面哪一种技术不能用于鉴别核酸分子序列：A、斑点印迹B、原位杂交C、Southern印迹杂交D、WesternE、Northern印迹杂交正确答案：D69、用于检测HPV的分子生物学检测方法中,哪个具有高特异、高敏感、高通量、操作期便快速的特点A、核酸杂交技术B、飞行时间质谱技术C、荧光定量PCRD、基因芯片技术E、流式荧光技术正确答案：C70、已知一段设计好的引物的序列为GTGGATCCATGGCTCCTCTGAAGATTC，其Tm值为A、80B、78C、82D、84E、55正确答案：C71、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞A、CaClB、病毒感染法C、脂质体转染法D、显微注射法E、磷酸钙共沉淀法正确答案：A72、核酸的紫外吸收特性来自A、脱氧核糖B、磷酸二酯键C、磷酸基团D、嘌呤嘧啶碱基E、核糖正确答案：D73、DNA 链末端合成终止法不需要：A、ddNTPB、dNTPC、逆转录酶D、DNA聚合酶E、模板正确答案：C74、目前常用的基因表达体系细胞包括A、大肠埃希菌B、哺乳动物细胞C、昆虫细胞D、酵母细胞E、以上都是正确答案：E75、下列有关核酸分子杂交的叙述，不正确的是A、杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间B、杂交可发生在碱基序列完全互补的核酸分子之间C、具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交D、不同来源的DNA分子之间可以杂交E、以上都不正确正确答案：C76、一个DNA分子中，若A所占的摩尔比为17.2％，则C的摩尔比应为A、67.2％B、32.8％C、65.6％D、17.2％E、50.3%正确答案：B77、核酸变性后，可产生的效应是A、溶液黏度增加B、溶液黏度减小C、增色效应D、最大吸收波长发生转移E、失去对紫外线的吸收能力正确答案：C78、对于镰刀型红细胞贫血的基因诊断不可以采用A、PCR-RFLPB、DNA测序C、核酸分子杂交D、等位基因特性性PCRE、Western正确答案：E79、离子交换层有效分离蛋白质的依据是A、蛋白质的pIB、配体的特异性亲和力C、蛋白的分子大小D、蛋白的溶解度E、蛋白所带电荷正确答案：E80、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB是一种可视物质B、EB是核酸传性染料C、EB特异性结合核酸分子D、EB在紫外光下放射荧光E、插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光正确答案：E81、DNA受热变性时，出现的现象是A、多聚核苷酸链水解成单核苷酸B、在260nm波长处的吸光度增高C、碱基对以共价键连接D、溶液黏度增加E、最大光吸收峰波长发生转移正确答案：B82、属于核糖核酸二级结构的描述是A、核苷酸在核酸长链上的排列顺序B、tRNA的三叶草结构C、DNA双螺旋结构D、DNA的超螺旋结构E、DNA的核小体结构正确答案：B83、真核生物染色质DNA的三级结构是A、结构域B、超螺旋C、锌指结构D、核小体E、模体正确答案：D84、提出右手DNA双螺旋模型的科学家是A、Watson和CrickB、PaulingC、SmithD、Sanger，Maxam和GilbertE、Cech正确答案：A85、斑点/夹缝杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、用于基因定位分析C、不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，哈可以获取基因片段的大小及酶切位点分布的信息D、阳性菌落的筛选E、蛋白水平的检测正确答案：A86、重组DNA、技术常用的限制性核酸内切酶为A、I类酶B、II类酶C、III类酶D、IV类酶E、V类酶正确答案：B87、长期保存核酸样品的适宜温度是A、-50℃B、-20℃C、室温D、0~4℃E、-80℃正确答案：E88、催化聚合酶链反应的酶是：A、DNA连接酶B、反转录酶C、末端转移酶D、DNA聚合酶IE、Taq正确答案：E89、同一种哺乳细胞中，下列哪种情况是正确的A、在过剩的DNA存在下，所有RNA都能与DNA杂交B、在过剩的RNA存在下，所有DNA片段能与RNA杂交C、RNA与DNA有相同核苷酸组成D、RNA与DNA有相同的碱基比例E、以上都不正确正确答案：A90、下列几种DNA分子的碱基组成比例各不相同，哪一种DNA的解链温度（Tm）最低A、DNA中A+T含量占15％B、DNA中G+C含量占25％C、DNA中G+C含量占40％D、DNA中A+T含量占60％E、DNA中G+C含量占70％正确答案：B91、PCR技术的本质是A、核酸杂交技术B、核酸重组技C、核酸扩增技术D、核酸变性技术E、核酸连接技术正确答案：C92、下列说法错误的是A、用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃B、用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入1mol/L正确答案：B93、以下哪种PCR技术，广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究?A、原位PCRB、差异显示PCRC、反向PCRD、不对称PCRE、RT-PCR正确答案：A94、基因工程操作中转导是指A、重组质粒导入宿主细胞B、把DNA重组体导入真核细胞C、DNA重组体导入原核细胞D、把外源DNA导入宿主细胞E、以噬菌体或病毒为载体构建的重组DNA导入宿主细胞正确答案：E95、寡核苷酸探针的最大优势是A、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列B、易合成C、杂交分子稳定D、易标记E、易分解正确答案：A96、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶正确答案：C97、寡核苷酸探针一般A、长度50bp-100bpB、虽然不用太长，但越长越好C、就是一段人工合成的寡核苷酸序列D、长度＜15bpE、长度在18bp左右正确答案：E98、一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。
《动物生物化学》第八章核酸的生物合成试卷
院系动物科技学院年级专业动物医学动物药学姓名学号考试课程动物生物化学(√) 5、在细菌的细胞内有一类能识别DNA特定核苷酸序列的核酸内切酶，称为限制性内切酶。
(√) 6、所有核酸合成时，新链的延长方向都是从5’→3’。
(×) 7、引物是指DNA复制时所需要的一小段RNA，催化引物合成的引物酶是一种特殊的DNA聚合酶。
(×) 8、DNA半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是5’→3’，另一条链的合成方向为3’ →5’。
(√) 9、原核细胞的每一条染色体只有一个复制起点，而真核细胞的每一条染色体有多个复制起点。
(×) 10、在真核细胞中，三种主要RNA的合成都是由一种RNA聚合酶催化。
(×) 11、逆转录酶仅具有RNA指导的DNA聚合酶的活力。
(×) 12、抑制RNA合成酶的抑制剂不影响DNA的合成。
(√) 13、一个动物细胞内的DNA可以与该动物的所有RNA杂交。
(×) 14、真核细胞的mRNA两个末端都有3’-OH基团。
(√) 15、基因表达是指遗传信息从DNA经RNA传递给蛋白质的过程。
六、问答题1.大肠杆菌DNA复制所需要的酶及复制体系中参与的物质？答：反应体系包括下列成分。
①底物：dATP、dTTP、dGTP和dCTP；②DNA聚合酶：催化dNTP 加到生长链的3′端；③模板：解开成单链的DNA母链；④引物：具有3′-OH的一段RNA；⑤ Mg2+：为聚合酶发挥催化活性所必需；⑥其他酶和蛋白质因子。
所涉及的酶及蛋白质因子有：（1）DNA解旋酶(2)DNA拓扑异构酶；（3）SSB 蛋白（4）引物酶（5）DNA聚合酶Ⅲ（6）DNA聚合酶Ⅰ(7) DNA连接酶。
2.大肠杆菌DNA半保留复制时保证复制忠实性的主要机制。
（1）DNA复制时必须严格遵守碱基互补配对规律，这对于保证复制的忠实性是至关重要的。
（2）DNA聚合酶的3′→5′外切核酸酶功能可以检测并消除偶然出现错误。
分子生物学 第八章 杂交与芯片技术
探针的体外标记法分为化学法和酶法 ①化学法：利用标记物分子上的活性基因与探针
分子上的基因（如磷酸基因）发生的化学反应， 将标记物直接结合到探针分子上。
探针标记
②酶法标记：预先将放射性同位素或非放射性标 记物连接于NTP或dNTP上，然后利用酶促反应将 标记的核苷酸分子掺人到探针分子中去，或将核 苷酸分子上的标记基因交换到探针分子上。
然后筛选适当的阳性克隆，再进一步扩增、酶切及 纯化该cDNA片段，标记即可。
cDNA探针
也可采用PCR方法扩增。 该方法的优点：双链探针，长度较长，可与靶序列
形成的杂交体稳定性、特异性比寡核苷酸探针高， 杂交信号强。 缺点是由于是双链，必须先变性再杂交，在杂交过 程中还存在自我复性现象。
4．RNA探针
寡核苷酸探针
③比活度高，适用于大多数杂交。如DNA序列测 定、Southern杂交、Northern杂交、原位杂交等。
缺点是探针短，特异性差，杂交体稳定性差，杂 交及漂洗的温度、盐浓度等条件要求高，操作难 度大，背景噪音也大。
2．基因组DNA探针
基因组DNA经机械剪切或限制性内切酶消化制备 成一定大小的DNA片段，再将这些片段插入到适当 的学习目标
掌握：1．核酸分子杂交的基本概念。 2．探针的种类与标记方法。 3．常见核酸分子杂交技术的原理。 4．DNA芯片的设计与制备。
熟悉：1．核酸分子杂交信号的检测方法。 了解：1．核酸杂交与DNA芯片技术的应用。
第一节
杂交的基本概念
杂交
杂交（hybridization）是指不同来源的单链核酸， 根据碱基互补配对原则，在适当的条件下形成杂化 双链的过程。
1．缺口平移法 缺口平移法 （nick translation，NT）
分子生物学技术复习题2
一、单项选择题1. 下列哪项属于多基因遗传病（）A. 脆性X综合征B. Duchenne肌营养不良C. 血友病D.α-地中海贫血E. 原发性高血压2. 下列叙述错误的是（）A. 原核生物基因组具有操纵子结构B. 原核生物结构基因是断裂基因C. 原核生物基因组中含有插入序列 C. 原核生物基因组中含有重复序列E. 原核生物结构基因的转录产物为多顺反子3. 下列哪项不能被列入可以动基因的范畴（）A. 插入序列B. 质粒C. 染色体DNAD. 转座子E. 可转座噬菌体4. 操纵子不存在于（）A. 细菌基因组中B. 病毒基因组中C. 真核生物基因组中D. 大肠杆菌基因组中E. 原核生物基因组中5. 构成完整的病毒颗粒是（）A. 糖蛋白B. 结构蛋白C. 蛋白质与核酸D. 蛋白质E. 核酸6. 质粒的主要成分是（）A. 多糖B. 蛋白质C. 氨基酸衍生物D. DNA分子E. 脂类7. 基因组是（）A. 一个二倍体细胞中的染色体数B. 遗传单位C. 重复序列D. 生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量E. 一个生物体内所有分子的总量8. 下列说法正确的是（）A. 质粒的主要成分是RNAB. 质粒的复制依赖于宿主细胞C. 宿主细胞离开了质粒就不能生存D. 质粒的存在对宿主细胞没有任何影响E. 不同种类的质粒不能共存于同一菌株中9. 人类体细胞中含有（）条染色体A. 44B. 45C. 23D. 47E. 4610. 波长260nm的紫外线下，A值等于1OD的光密度大约相当于多少的双链DNA ( )A. 38ug/mlB. 33ug/mlC. 50ug/mlD. 20ug/mlE. 40ug/ml11. 下面哪个方法不能用于mRNA的分离（）A. olig(dt)-纤维素柱层析法B.（异）硫氰酸胍-酚氯仿法C. Poly(U)-凝胶层析法D. 磁珠分离法E. 碱裂解法12. SDS的作用是（）A. 螯合剂，可以一直DNA酶的活性，同时降低细胞膜的稳定性B. 高效水解RNAC. 引起细胞膜的降解并能乳化脂质和蛋白质，并使它们沉淀D. 增加溶液黏度，维持渗透压，防止受机械力作用而降解E. 沉淀DNA13. 有关核酸的鉴定描述错误的是（）A. 荧光光度法可以鉴定核算样品的纯度B. 紫外分光光度法可以鉴定核算样品的浓度C. 纯DNA样品的A260/A280为2.0D. 琼脂糖凝胶电泳发可以判定核酸样品的完整性E. 蛋白质与在核酸提取过程中加入的酚均使比值下降14. 酚抽提法裂解缓冲液不包括哪些成分（）A. EDTAB. SDSC. RNAD. 蛋白酶KE. 醋酸钾15. RNA中数量最多的是（）A. mRNAB. rRNAC. tRNAD. hnRNAE. snRNA16. 纯DNA的A260/A280比值为1.8，可使比值升高的是（）A. 蛋白质B. 酚C. Mg离子D. 氯仿E. RNA17. 下列不属于分离纯化质粒DNA的方法（）A. 碱裂解法B. 异硫氰酸胍-酚氯仿一步法C. 煮沸裂解法D. SDS裂解法E. 牙签少量制备法18. 限制性内切酶切割后产生的DNA双链末端带（）A. 5’磷酸基和3’羟基B. 3’磷酸基和5’羟基C. 5’磷酸基和3’磷酸基D. 3’羟基和5’羟基E. 以上都不是19. 能识别并切割双链DNA分子特异序列的酶称（）A. 限制性核酸内切酶B. 限制性核酸外切酶C. 核酸酶D. 核酶E. DNase20. 识别和切割靶序列不同，而产生相同的黏性末端的酶是（）A. 同裂酶B. 同工异源酶C. 同尾酶D. 同工异构酶E. 甲基化酶21. 在DNA重组技术中，催化重组DNA分子形成的酶（）A. DNA聚合酶IB. Klenow片段C. 连接酶D. 末端转移酶E. 内切酶22. 克隆质粒载体不应具备的特性（）A. 复制子B. 筛选标记C. 多克隆位点D. 较高的拷贝数E. 分子量相对较大23. 关于感受态细胞性质的描述，下列说法错误的是（）A. 具有可诱导性B. 具有可转移性C. 细菌生长的任何时期都可以出现D. 不同细菌出现感受态的比例是不同的E. 细菌处于对数生长期24. 质粒扩增时加入氯霉素的目的是（）A. 利用抗药性标记进行筛选B. 抑制大肠杆菌蛋白质合成，提高质粒拷贝数C. 抑制杂菌污染D. 抑制阴性克隆E. 以上都不是25. 下述双链DNA中不属于会问结构的是（）A. GTTAACB. ATCGATC. CCAATTGGD. GATTAGE. TTCCGGAA26. DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的（）A. G-C含量B. A-T含量C. A-G含量D. A-C含量E. T-G含量27. 检测靶序列是DNA的技术是（）A. Southern杂交B. Northern杂交C. Werthern杂交D. Eastern杂交E. 杂交淋巴瘤28.具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链，这一过程称（）A.变性B. 复性C. 复杂性D. 杂交E. 探针29.标记的参与杂交反应的核酸分子，称（）A.变性B. 复性C. 复杂性D. 杂交E. 探针30.Southern杂交通常是指（）A.DNA和RNA的杂交B. DNA和DNA的杂交C. RNA和RNA的杂交D. 蛋白质和蛋白质的杂交E. DNA和蛋白质的杂交31.以mRNA为模板合成cDNA的酶是（）A.DNA连接酶B. TaqDNA聚合酶C. 末端转移酶D. RNA酶E. 逆转录酶32.下列是PCR反应体系中必须存在的成分，除外（）A.引物B. 模板C. dNTPD. Mg2+E. DMSO33.下列因子不影响聚合酶链反应忠实性的是（）A. 退火温度B. 反应PH值C. 牛血清白蛋白D. Mg2+E. TaqDNA聚合酶34.聚合酶链反应是一种（）A.体外特异转录RNA的过程B. 体外翻译蛋白质的过程C. 体外特异转录DNA的过程D. 体外特异复制DNA的过程E. 体外特异转录复制RNA的过程35.基因芯片技术的临床应用不包括（）A.疾病的诊断B. 药物的筛选C. 指导个体用药D. 基因突变的检测E. 由于蛋白质翻译后的修饰的改变而引起的疾病三、名词解释1.质粒2.基因组3.核酸分子杂交技术4.增色效应5.聚合酶链反应6.基因芯片7.核酸探针8.DNA重组9.原位杂交10.Southern杂交11.限制性内切酶。
核酸分子杂交及PCR技术
核酸的分子杂交技术一、核酸分子杂交用标记的已知DNA或RNA片段（探针）来检测样品中未知核酸序列，通过核苷酸间碱基互补的原则发生异源性结合，再经显影或显色的方法，将结合核酸序列的位置或大小显示出来。
待测的核酸序列，可以是克隆的基因片段，也可以是未克隆化的基因组DNA和组织细胞的RNA。
二、核酸分子杂交的分类液相杂交核算分子杂交印记杂交固相杂交原位杂交1.固相杂交：将需要杂交的一条核酸链先固定在固体支持物上，另一条核酸链游离在液体中。
2.液相杂交：参与反应的两条核酸链都游离在液体中。
常用固相杂交类型：Southern印迹杂交、Northern印迹杂、菌落原位杂交、斑点杂交、狭缝杂交、组织原位杂交、夹心杂交等。
三、核酸分子杂交的基本原理1、变性：在某些理化因素的作用下，核酸双链分子碱基对的氢键断裂，疏水作用被破坏，双链螺旋或发夹结构被拆开，有规则的空间结构被破坏，形成单链分子，称为核酸的变性。
﹡引起核酸变性的因素：热、酸、碱、化学试剂（如：尿素、甲酰胺、甲醛等）。
﹡加热变性是最常用的方法，一般加热80-100℃数分钟即可使核酸分子氢键断裂，双链分开。
﹡变性的核酸分子失去了生物活性，同时理化性质也随之改变，其紫外吸收值（A260）也随之升高。
可用紫外吸收的变化来跟踪DNA的变性过程。
以A260吸收值对应温度作图，得到DNA的变性曲线或熔解曲线。
增色效应：DNA变性后对260nm紫外光收增加的现象。
DNA热变性现象双螺旋结构即发生解体，两条链分开形成无规则线团。
同时，一系列物化性质发生改变：260nm处紫外吸收值升高，粘度降低，浮力密度升高。
由于二级结构的丧失，也失去了部分或全部生物活性。
增色效应和减色效应当DNA分子加热变性后，其260nm的紫外吸收会急剧增加的现象称为增色效应。
变性DNA复性后，在260nm处的吸收值减少的现象称为减色效应。
A260值达到最大值1/2时的温度称为解链温度或熔解温度（melting temperature,Tm)，此时50%的DNA分子发生了变性。
生化药选做题
生物化学作业集一、选择题选做题1.从组织提取液沉淀活性蛋白而又不使之变性的方法是加入A.硫酸铵B. 三氯醋酸C.氯化汞D.对氯汞苯甲酸E. 1mol/L HCL2. 维系蛋白质一级结构的化学键是A.盐键B. 疏水键C. 氢键D. 二硫键E. 肽键3. 对具四级结构的蛋白质进行一级结构分析时A.只有一个自由的α-氨基和一个自由的α-羧基B.只有自由的α-氨基，没有自由的α-羧基C.只有自由的α-羧基，没有自由的α-氨基D.既无自由的α-氨基，也无自由的α-羧基E.有一个以上的自由α-氨基和α-羧基4. 蛋白质分子中的α螺旋和β片层都属于A.一级结构B.二级结构C.三级结构D.四级结构E.五级结构5. 螺旋每上升一圈相当于几个氨基酸？A.2.5B.2.7C.3.0D.3.6E. 4.5二、填空题选做题1. 蛋白质改变而导致蛋白质分子功能发生改变的现象称为变构效应。
引起变构效应的小分子称。
2. 蛋白质在处于大于其等电的pH环境中，带，在电场中的向移动。
反之，则向电场移动。
3. 稳定和维系蛋白质三级结构的重要因素是，有、及等非共价键。
4. 构成蛋白质四级结构的每一条肽链称为。
5. 蛋白质溶液是亲水胶体溶液，维持其稳定性的主要因素是及。
三、名词解释选做题1.蛋白质一级结构：2.蛋白质的构象：3.α-螺旋：4.β-折迭：5.β-转角：6.无规则卷曲：7.蛋白质的三级结构：8.蛋白质的四级结构：9.盐析：10.变构效应：11.肽四、问答题选做题1． -螺旋的结构特点是什么？2. 简述蛋白质空间结构第二章核酸一、选择题选做题1.多核苷酸链骨架的连接键是A. 2′,3′--磷酸二酯键B. 2′,4′--磷酸二酯键C. 2′,5′--磷酸二酯键D. 3′,4′--磷酸二酯键E. 3′,5′--磷酸二酯键2. 使DNA溶液有最大吸光度的波长是：A.240nmB.260nmC.280nmD.360nmE.420nm3. 碱基配对，下列哪一项是错的？A. 嘌呤与嘧啶相配对B. A与T，C与G相配对C. A与T之间有二个氢键D. G与C之间有三个氢键E. 核糖与碱基4.关于tRNA分子的下述各项，哪一项是错误的？A. 在RNA中它是最小的单链分子B. tRNA的二级结构通常均为三叶草形C. 在RNA 中tRNA含稀有碱基最多D. 它可在二级结构基础上进一步盘曲为倒“L”形的三级结构E. 以上都不对5.核酸紫外线吸收的特征来自A. 5′-磷酸核糖B. 5′-磷酸脱氧核糖C. 磷酸二酯键D. 嘌呤和嘧啶碱基E. 以上都不对6. 双链DNA的Tm值较高是由于下列哪一组碱基含量较高所致？A. A+GB. C+GC. A+TD. C+TE. A+C二、填空题选做题：1.组成RNA和DNA的碱基不同之处是__，戊糖不同之处是__。
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第八章核酸分子杂交技术
习题
-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
第八章核酸分子杂交技术
一．选择题
【A型题】
1.DNA链的Tm值取决于核酸分子的
A.G-C含量
B.A-T含量
C.A-G含量
D.A-C含量
E.T-G含量
2.研究得最早的核酸分子杂交种类是
A.菌落杂交
B. Southern杂交
C. Northern杂交
D.液相杂交
E.原位杂交
3.Southern杂交通常是指
A．DNA和RNA杂交 B．DNA和DNA杂交C．RNA和RNA杂交 D．蛋白质和蛋白质杂交 E．DNA和蛋白质杂交
4.基因芯片技术的本质是
A.核酸分子杂交技术
B.蛋白质分子杂交技术
C.聚合酶链反应技术
D.基因重组技术
E.酶切技术
5.寡糖苷酸探针的最大的优势是
A.杂化分子稳定
B.可以区分仅仅一碱基辑差别的靶序列
C.
易标记 D.易合成 E.易分解
6.血友病是一种
A.染色体病
B.X链锁遗传病
C.先天性代谢缺陷病
D.先天
畸形 E.常染色体隐性遗传病
7.检测的靶序列是RNA的技术是
A. Southern杂交
B. Western杂交
C. Northern杂交
D. Eastern杂交
E.杂交淋巴瘤
8. 检测的靶序列是DNA的技术是
A. Southern杂交
B. Western杂交
C. Northern杂交
D. Eastern杂交
E.杂交淋巴瘤
9.DNA双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，DNA分子成为单链，这一过程称
A.变性
B.复性
C.复杂性
D.杂交
E.探针
10.具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链，这一过程称
A.变性
B.复性
C.复杂性
D.杂交
E.探针
11.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称
A.变性
B.复性
C.复杂性
D.杂交
E.探针
12.标记的参与杂交反应的核酸分子，称
A.变性
B.复性
C.复杂性
D.杂交
E.探针
13.点/缝杂交可以用于
A.快速确定是否存在目的基因
B.不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息
C.用于基因定位分析
D.阳性菌落的筛选
E.蛋白水平的检测
14.菌落杂交可用于
A.快速确定是否存在目的基因
B.不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息
C.检测的目标是RNA
D.用于基因定位分析
E.阳性菌落的筛选
15.以等位基因特异的寡糖苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针接合，则该样本为
A.正常人
B.杂合体患者
C.纯合体患
D.携带者
E.不能确定
【X型题】
1.DNA探针的优点有
A.制备方法简单
B.DNA探针易降解
C.DNA探针的标记方法成熟，有多种方法可以选择
D.克隆在质粒载体中，可以无限繁殖，取之不尽
E.单链，不存在竞争性的自身复性
2.以下哪些方法可以用于探针的全程标记
A.DNA加尾法
B.DNA切口平移标记法
C.随机引物标记法
D.末端标记
E.尾端标记
3.以下哪些因素可以是DNA变性
A.增加溶液的浓度
B.加热
C.改变溶液的pH值
D.有机溶剂
E.冷藏
4.基因芯片的支持介质可以是
A.硝酸纤维薄膜片
B.玻片
C.尼龙片
D.琼脂糖
E.聚丙烯酰胺
5.以下哪些方法可以用于从凝胶上转移DNA
A.毛细转移
B.真空转移
C.负压转移
D.电泳转移
E.冷冻转移
6.整个杂交反应主要以下哪些步骤组成
A.预固定
B.杂交
C.洗脱
D.固定
E.转移
7.放射自显影可以被分为
A.直接放射自显影
B.氧化显影
C.封闭显影
D.间接放射自显影
E.固定显影
8.预杂交的主要目的是
A.平衡滤膜
B.封闭非特异性杂交的位置
C.提高杂交信号的检测效率
D.便于从滤膜上去除探针
E.清除用于杂交反应检测的显色物质
9.典型的预杂交溶液含
A.去垢剂
B.封闭剂
C.与探针和靶基因不同的核酸
D.固定剂
E.氧化剂
10.下列哪些可以作为核酸探针使用
A. microRNA
B.单链DNA
C.寡糖苷酸
D. mRNA
E.双链RNA。