11_酚试剂分光光度法及其影响因素

酚试剂分光光度法及其影响因素

采用酚试剂分光光度法，成分一般是这样：需要溶解进蒸馏水的东西是酚试剂，最后加入吸收液静止显色的是硫酸铁铵溶液，原理是这样的：空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化生成蓝绿色化合物，根据颜色深浅比色定量。

其中酚试剂为：盐酸-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙（MBTH），蓝绿色化合物为：二缩合甲醛-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙。反应原理如下图示：

（如显色为黄色系，则采用了乙酰丙酮法，若显色为红色系，则采用了AHMT 法，采用后两种方法的自测盒不多。）

目前我国检测室内环境中甲醛的方法有分光光度法、气相色谱法、电化学检测法、气相色谱法、液相色谱法、传感器法等。下文分析酚试剂分光光度法的影响因素。

空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成稳定的蓝绿色化合物。甲醛含量与颜色成正比，根据颜色深浅，比色定量。

1显色剂的影响

该显色反应原理为空气中的甲醛和酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中，被高铁离子氧化生成蓝绿色化合物，通过分光光度计测定吸光度。反应中，硫酸铁铵承担氧化、显色的作用。硫酸铁铵水溶液易水解而形成Fe(OH)3，乳浊现象，影响比色，故用酸性溶剂配制。但溶液酸度需严格控制，酸度过小，溶液反应速率慢；酸度过高，溶液本色太深，易造成分解结果的误差。

硫酸铁铵的加入量也不宜过多，否则空白管吸光度度值高，影响比色，以加1%硫酸铁铵0.4 mL 为宜。

2显色温度的影响

应注意环境温度对显色反应时的影响。室温＜15 ℃时，显色不完全；室温＞15 ℃或＜20 ℃时，反应速率慢，间接造成不必要的时间消耗；此时应在25℃水浴进行显色反应。20～35 ℃时15 min 显色达最完全，放置时间 4 h 稳定不变。

3显色时间的影响

显色时间对分析结果有明显的影响。前10 min 里吸光度呈明显的上升趋势，说明溶液显色反应正在迅速进行；10～15 min 吸光度缓慢增加，表明显色反应达到尾声，但不完全；15 min 后吸光度变化幅度很小，显色反应基本达到平衡，所以选取15 min 作为显色时间。