重组乙型肝炎疫苗ppt课件
重组乙型肝炎疫苗概述
重组乙型肝炎疫苗（recombinant Hepatitis B vaccine）
3. 原液的制备 • 发酵：锥形瓶、种子罐、生产罐三级发酵 • 纯化：细胞破碎（Triton X-100） 、硅胶吸附、
疏水色谱纯化、硫氰酸盐处理、稀释、过滤除菌 • 保存：2-8 ℃，不超过3个月
重组乙型肝炎疫苗（recombinant Hepatitis B vaccine）
4. 半成品的制备 • 甲醛处理：100μg/ml • 铝吸附 • 配制：与铝佐剂等量混合 5. 成品的制备 • 分批、分装及冻干后包装
重组乙型肝炎疫苗（recombinant Hepatitis B vaccine）
（二）检定要求
1. 原液检定 • 特异蛋白带：SDS-PAGE，20-25kD蛋白带 • N-端氨基酸序列测定：氨基酸序列分析仪 • 纯度：免疫印迹法、高效液相色谱法 2. 半成品的检定 • 吸附完全性≥95% • 硫氰酸盐含量＜1.0μg/ml • Triton X-100含量＜15.0μg/ml
重组乙型肝炎疫苗（recombinant Hepatitis B vaccine）
• 由重组酵母细胞表达的乙型肝炎表面抗原，经纯 化、灭活及加入佐剂吸附制成。
重组乙型肝炎疫苗（recombinant Hepatitis B vaccine）
（一）制备方法 1. 生产用菌种： 基因重组构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始
菌种
重组乙型肝炎疫苗（recombinant Hepatitis B vaccine）
2. 种子批的建立及检定 • 符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定 • 建立：原始菌种传代
培养物纯度：无细菌和其他真菌检出 HBsAg基因序列测定 • 检定 质粒保有率：平板复制法 活菌率：血细胞计数板 抗原表达率：蛋白质含量、 HBsAg含量 • 保存：工作种子批-70℃保存，其余液氮保存
重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)
重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu) Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques inSaccharomyces Cerevisciae Yeast本品系由重组酵母菌表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原（HBsAg）经纯化、加入铝佐剂制成，用于预防乙型肝炎。
1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2 制造2.1 生产用菌种2.1.1 名称及来源生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始菌种，菌种号为2150-2-3（pHBS56-GAP347/33）。
2.1.2 种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。
由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批，主种子批扩增1代为工作种子批。
2.1.3 种子批检定主种子批及工作种子批应进行以下项目的全面检定。
2.1.3.1 培养物纯度培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和酶化大豆蛋白琼脂平板，分别于20~25℃和30~35℃培养5~7天，应无细菌和其他真菌被检出。
2.1.3.2 HBSAg基因序列测定应与美国默克公司提供菌种的HBSAg基因序列保持一致。
2.1.3.3 质粒保有率采用平板复制法检测。
将菌种接种到复合培养基上培养，得到的单个克隆菌落转移到限制性培养基上培养，计算质粒保有率，应不低于95%。
PR%= [A /（A+L）] ×100式中PR为质粒保有率，（％）；A为在含腺嘌呤的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿；A+L为在含腺嘌呤和亮氨酸的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿2.1.3.4 活菌率采用血细胞计数仪器，分别计算每毫升培养物中总菌数和活菌数，活菌率应不低于50%活菌率=活菌数/总菌数×100%2.1.3.5抗原表达率取种子批菌种扩增培养，采用适宜的方法将培养后的细胞破碎，分别用Lowry法测定破碎液的蛋白质含量，并采用酶联免疫法或其他适宜方法测定HBsAg含量。
疫苗和乙肝疫苗相关知识简介ppt课件
乙肝小常识
1、3、5三项 同时是阳 性，就叫 “大三阳”； 1、4、5三项 同时是阳 性，就叫 “小三阳”。
5.核心抗原
4.e抗体
3.e抗原 2.表面抗体 1.表面抗原
7.乙肝疫苗注射注意事项
肝炎患者以及发热、急性传染病者，严重慢 性病患者，有免疫缺陷的人、严重过敏体质者和
正在使用免疫抑制剂的人不可接种乙肝疫苗。
谢 谢 ！
一般安全可靠，很少有不良反应。极个别人 可能有中、低度发热，或注射部位微痛，这种疼 痛与疫苗中含有的吸附剂有关。这些轻微反应一 般在24小时内消失。 注射疫苗侧上臂避免剧烈运动。
8.乙肝疫苗发展前景
我国已将乙肝疫苗纳入计划免疫中，新生儿均 应在出生后24小时内接种乙肝疫苗。 乙肝疫苗的趋势是由预防性疫苗向治疗性疫苗 发展。 每年我国在乙肝治疗方面的医疗支出是300 亿—500亿，目前我国有乙肝病毒携带者1.2亿多， 患者超过3000万，而仅有19%的患者接受以抗病 毒为主的方法进行治疗，因而治疗性乙肝疫苗一 旦研制成功并应用，面对的将是个庞大的市场。
2.我国乙肝现状
4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 3.8
乙肝携带者统计
1.2
乙肝携带者
全世界
中国
3.正确对待乙肝患者和携带者
乙肝病毒携带者 相同点 携带乙肝病毒 乙肝患者 携带乙肝病毒
肝病症状
肝功能 是不是病人 如何应对
没有
正常 不是；一般难以发病，保持良好心 态，80%-90%可平安一生。 健康生活，注意肝脏保护；定期检 查肝功能，不需要治疗。
无保护的性行为传播：乙肝病毒可以通过精液和阴道 分泌物进行传播。
5.乙肝疫苗
切断乙肝病毒传播的有效途径 2.10%
基因工程乙肝疫苗ppt课件
接种第三针。为达到最佳的效果，应按时全程接种。
接种乙肝疫苗的人群
• 处于HBV感染高度危险状态的易感者（未 感染过HBV的人）应接种乙肝疫苗。主要 包括： ①全部新生儿及幼儿园未接种过 乙肝疫苗的孩子； ②传染科、口腔科、 血液室、透析室和经常接触血液的工作 人员； ③新加入某一群体的人员，如新 入伍的战士、新入学的大学生； ④从事 食品服务行业者及保育工作人员； ⑤发 育障碍者，收容所中的患者和工作人员 ； ⑥血液透析患者； ⑦使用血液制品 者； ⑧器官移植前的患者；需长期应用 免疫抑制剂者； ⑨乙肝病毒携带者的家 庭接触者； ⑩注射毒品成瘾者；长期教 养机构中的犯人。
Bye bye~
部专门下发57号文件，具体部署用基因工程乙肝疫苗取代血源乙肝疫
苗事宜。
乙肝疫苗的制备
目的基因的获取
编码乙型肝炎表面抗原的基因的获取
一般的目的基因的获取方法有：
反转录法 化学合成法
反转录—聚合酶链反应法
工程菌的构建
CHO(中国仓鼠卵巢）细胞的特点 ①具有准确的转录后修饰功能 ,表达的糖基化药 物蛋白在分子结构、 理化特性和生物学功能方面最 接近于天然蛋白分子 ②具有产物胞外分泌功 能 ,便于下游产物分离纯化; ③具有重组基因的高效 扩增和表达能力; ④具有贴壁生长特性 ,且有较高的 耐受剪切力和渗透压能力 ,可以进行 悬浮培养 ,表达fibrob2last) ,很少分泌自身的内源蛋白 ,利 于外源蛋白的后分离
自身无法克服的缺点：
•
其一，乙肝表面抗原携带者由于已感染乙肝病毒，在此情况下，
再抽取其血浆作为乙肝疫苗原料，对携带者的身体健康有损害；
•
其二，疫苗的生产受到乙肝病毒表面抗原携带者血浆来源和质量
重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)
.....重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu)Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques inSaccharomyces Cerevisciae Yeast本品系由重组酵母菌表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原（HBsAg）经纯化、加入铝佐剂制成，用于预防乙型肝炎。
1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2 制造2.1 生产用菌种2.1.1 名称及来源生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始菌种，菌种号为2150-2-3（pHBS56-GAP347/33）。
2.1.2 种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。
由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批，主种子批扩增1代为工作种子批。
2.1.3 种子批检定主种子批及工作种子批应进行以下项目的全面检定。
2.1.3.1 培养物纯度培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和酶化大豆蛋白琼脂平板，分别于20~25℃和30~35℃培养5~7天，应无细菌和其他真菌被检出。
2.1.3.2 HBSAg基因序列测定应与美国默克公司提供菌种的HBSAg基因序列保持一致。
2.1.3.3 质粒保有率采用平板复制法检测。
将菌种接种到复合培养基上培养，得到的单个克隆菌落转移到限制性培养基上培养，计算质粒保有率，应不低于95%。
PR%= [A /（A+L）] ×100式中PR为质粒保有率，（％）；A为在含腺嘌呤的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿；A+L为在含腺嘌呤和亮氨酸的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿2.1.3.4 活菌率采用血细胞计数仪器，分别计算每毫升培养物中总菌数和活菌数，活菌率应不低于50%活菌率=活菌数/总菌数×100%.....2.1.3.5抗原表达率取种子批菌种扩增培养，采用适宜的方法将培养后的细胞破碎，分别用Lowry法测定破碎液的蛋白质含量，并采用酶联免疫法或其他适宜方法测定HBsAg含量。
乙肝疫苗接种指南PPT课件
乙肝疫苗接种指南
副作用和注意事项：乙肝疫苗接种一般 是安全的，但可能会出现轻微副作用， 如注射部位疼痛、发红等。过敏反应和 严重不良反应较为罕见。
乙肝疫苗接种 的好处
乙肝疫苗接种的好处
预防乙肝感染：乙肝疫苗接种 可有效预防乙肝病毒感染，降 低患乙肝的风险。
- 新生儿：应在出生后24小时内接种 第一剂乙肝疫苗。
- 婴儿和儿童：应按照规划疫苗接种 日程表接种乙肝疫苗。
- 青少年和成人：未感染乙肝病毒的 人应接种乙肝疫苗以预防感染。
- 其他高风险人群：如医务人员、性 伴侣是乙肝病毒携带者的人等。
乙肝疫苗接种指南
接种次数和剂量：一般需接种3 剂乙肝疫苗以建立有效免疫， 接种间隔时间为0、1和6个月。
阻断病毒传播：接种乙肝疫苗 有助于阻断乙肝病毒的传播链 ，减少病毒在社区中的传播。
乙肝疫苗接种的好处
保护肝脏健康：乙肝病毒感染会导致肝 脏疾病，接种乙肝疫苗可以保护肝脏健 康，预防严重后果的发生。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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乙肝疫苗接种 指南PPT课件
目录 引言 乙肝疫苗接种指南 乙肝疫苗接种的好处
引言
引言
乙肝疫苗接种的重要性：乙肝 是一种严重的传染病，疫苗接 种是预防乙肝的最有效方法之 一。
本PPT旨在向用户介绍乙肝疫苗 接种的指南和注意事项。
乙肝疫苗接种 指南
乙肝疫苗接种指南接 的种 人对 群象 ，： 特乙 别肝 是疫 以苗 下适 人用群：于所有年龄段
重组乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗)
重组乙型肝炎疫苗（乙肝疫苗）【预防的疾病】乙肝疫苗可以预防乙型病毒性肝炎。
【种类】乙肝疫苗有重组乙肝疫苗（酿酒酵母）、重组乙肝疫苗（汉逊酵母）和重组乙肝疫苗（CHO细胞）3种。
【接种对象】主要为新生儿。
【免疫程序】共接种3剂次，其中第1剂在新生儿出生后24小时内接种，第2剂在1月龄时接种，第3剂在6月龄时接种。
【禁忌】（1）已知对该疫苗的任何成分，包括辅料以及甲醛过敏者；（2）患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者；（3）患未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者。
【注意事项】（1）接种疫苗之前，应如实向预防接种医生告知儿童身体健康状况。
若有感冒、发热等症状，待恢复健康后进行补种；（2）接种疫苗后，须在预防接种单位留观至少30分钟。
若儿童出现轻度发热等一般反应，通常不需任何处理。
若高烧不退或伴有其他并发症者，应及时到医院就诊。
1. 疾病概况乙肝是由乙肝病毒感染引起的传染病。
传染源为乙肝病人和乙肝病毒携带者。
主要通过血液、性接触和母婴传播。
人群对乙肝病毒普遍易感，感染结局与感染乙肝病毒时的年龄有关，年龄越小，转为慢性乙肝的可能越大。
约80%～90%的围生期感染者、30%的＜6岁儿童感染者可转为慢性乙肝，成人感染乙肝病毒后转为慢性乙肝的比例＜10%。
有15%～25%的慢性乙肝患者可发展为肝硬化和原发性肝细胞癌而导致死亡。
2. 主要症状乙肝发病比较隐匿，临床上常表现为低热、乏力、食欲减退、恶心、呕吐、厌油、腹胀、肝区疼痛，可出现巩膜黄、尿黄如茶水样等黄疸症状、轻度发热等。
重症者可能发展为肝硬化和原发性干细胞癌，甚至导致死亡。
3. 治疗原则乙肝治疗主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎和抗氧化、抗纤维化和对症治疗，其中抗病毒治疗是关键。
只要有适应证，且条件允许，就应到专科医院和专科门诊进行规范化的治疗。
乙肝病毒携带者需定期随访。
4. 预防措施接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效措施。
目前对新生儿实行免费接种乙肝疫苗，在0、1、6月龄各接种1剂。
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)Chongzu Yixing Ganyan Yimiao(CHO Xibao ) Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques in CHO Cell本品系由重组CHO细胞表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原 (HBsAg) 经培养、纯化, 加入氢氧化铝佐剂后制成, 用于预防乙型肝炎。
1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物应符合“凡例”有关要求。
2 制造2.1 生产用细胞2.1.1 细胞名称及来源生产用细胞为DNA重组技术获得的表达HBsAg的CHO细胞C株。
282.1.2 细胞库的建立及传代应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
C株主细胞库的传代应不超过第21代，工作细胞库应不超过第26代，28生产疫苗的最终细胞代次应不超过第33代。
2.1.3 主细胞库及工作细胞库的检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
2.1.3.1 细胞外源因子检查无菌、支原体、细胞病毒外源因子检查均应符合规定。
2.1.3.2 细胞鉴别试验应用同功酶分析、生物化学方法、免疫学、细胞学和遗传标记物等任何方法进行鉴别，应为典型CHO细胞。
2.1.3.2.1 细胞染色体检查用染色体分析法进行检测，染色体应为20条。
2.1.3.2.2 目的蛋白鉴别采用ELISA检测，应证明为HBsAg。
2.1.3.3 HBsAg表达量主细胞库及工作细胞库细胞HBsAg表达量应不低于原始细胞库的表达量。
2.1.4 保存细胞种子应保存于液氮中。
2．2 原液2.2.1 细胞制备取工作细胞库细胞，复苏培养后，经胰蛋白酶消化, 置适宜条件下培养。
2.2.2 培养液培养液为含有适量灭能新生牛血清的DMEM液。
新生牛血清的质量应符合规定（附录XIII D）。
2.2.3 细胞收获培养适宜天数后，弃去培养液，换维持液继续培养适1－2天后，当细胞表达HBsAg达到1.0 mg/L以上时收获培养上清。
重组乙型肝炎疫苗
重组乙型肝炎疫苗一、疫苗针对疾病乙肝，是由乙型肝炎病毒引起的以肝脏病变为主的一种传染病。
临床上以食欲减退、恶心、上腹部不适、肝区痛、乏力为主要表现。
部分患者可有黄疸、发热和肝大伴有肝功能损害。
有些患者可慢性化，甚至发展成肝硬化，少数可发展为肝癌。
主要通过血液传播、母婴传播、性接触传播。
二、疫苗简介我国现批准上市的乙肝疫苗有重组（酿酒酵母）乙型肝炎疫苗、重组（汉逊酵母）乙型肝炎疫苗和重组（CHO）乙型肝炎疫苗三种，剂量分10μg、20μg和60μg三种。
三、疫苗作用我国是乙肝高发国，接种乙肝疫苗是预防乙型肝炎的重要手段。
接种乙肝疫苗后，尤其是对新生儿常规接种乙肝疫苗，可使机体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力，有效降低乙肝的发病率和患病率。
四、免疫程序（一）适用对象所有未感染乙肝病毒且未获得乙肝免疫力的无禁忌症人群。
（二）接种剂次和间隔10μg、20μg乙肝疫苗全程需接种3针，按照0、1和6个月的程序，即接种第1针疫苗后，在1个月和6个月时注射第2针和第3针。
新生儿首针乙肝疫苗应在出生24小时内尽早接种。
60μg乙肝接种对象为16岁及以上易感人群，只需接种一剂次。
具体操作按选用的适用疫苗的说明书执行。
（三）接种部位和途径上臂外侧三角肌肌肉注射。
五、其他事项（一）接种禁忌1、已知对该疫苗所含任何组分，包括辅料、甲醛以及硫酸庆大霉素过敏者；2、患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者；3、妊娠期妇女；4、患未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者。
（二）暂缓接种1、发热、急性感染或处于慢性疾病急性发作期的，待病愈或病情缓解后再进行接种；2、接种疫苗和开始化疗及免疫抑制治疗之间至少应间隔2周。
正在接受化疗或放疗患者等结束后数月内再接种；3、以上使用要求如和疫苗说明书有冲突，以疫苗说明书为准。
乙型肝炎疫苗接种39页PPT
26、我们像鹰一样，生来就是自由的 ，但是 为了生 存，我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子，然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索
•
27、法律如果不讲道理，即使延续时 间再长 ，也还 是没有 制约力 的。— —爱·科 克
•
28、好法律是由坏风俗创造出来的。 ——马 克罗维 乌斯
•
29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中，哪 里没有 法律， 那里就 没有自 由。— —洛克
•
Hale Waihona Puke 30、风俗可以造就法律，也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
乙型肝炎疫苗接种
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
重组乙型肝炎疫苗ppt课件
• 乙肝病毒属DNA病毒科，有三种外壳的基因编码。
乙肝病毒具有五种抗原抗体系统：即表面抗原抗 体(HBsAg与抗-HBs)、e抗原抗体(HBeAg与抗HBe)、核心抗原抗体(HBcAg与抗-HBc)、x抗原抗 体(HBxAg与抗-HBx)和HBv-DNA。有临床意义的 主要有HBsAg与抗-HBs、HBeAg与抗-HBe和抗HBc，简称“两对半”。 临床主要表现为食欲减退、恶心、厌油、乏 力、巩膜黄染、黄色尿、肝脏肿大、肝区痛等。
重组乙型肝炎疫苗
背景
• 乙型肝炎是由病毒引起的，约占所有病毒性
肝炎的40﹪，它可以急性发病，也可以形成 慢性肝炎，并进而引发肝硬化，肝癌，而其 中很大一部分人可以是健康的病毒携带者， 不出现症状，但表面抗原（HbsAg）阳性， 或者同e抗原（HbeAg）阳性，常常是重要 的传染源。在我国，人口众多，而这样的慢 性病毒携带者约有一亿人，是对公共卫生的 一个重要威胁。
乙肝疫苗的发展
• （一）联合疫苗： • 联合疫苗具有减少注射针次、接种副反应及
提高接种覆盖率的优点。已上市的联合疫苗如SB 公司的百白破-乙肝四联疫苗、甲-乙肝联合疫苗， MSD公司的流感嗜血杆菌乙型肝炎偶联疫苗等。 我国全细胞百白破-乙肝四联疫苗和无细胞百白破 -乙肝四联疫苗已完成临床前研究，甲-乙肝联合 疫苗的开发研究制也在进行。
（三） CHO疫苗
• 本疫苗系用基因工程技术将乙型肝炎表面
抗原基因片段重组到中国仓鼠卵巢细胞 (CHO)内，通过对细胞培养增殖，增殖分泌 乙肝表面抗原(HBsAg)于培养液中，经纯化 加佐剂氢氧化铝后制成。疫苗外观有轻微 乳白色沉淀。
国产酵母乙肝疫苗的效果
• 研究证明：国产血源乙肝疫苗的保护效果至少维
• 对应用0、1、2月程序免疫的400名小学生进行了
乙型肝炎的免疫预防ppt课件
编辑课件
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七、阻断母婴传播免疫程序
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八、未检测出抗体原因
• 1、疫苗贮存不当导致氢氧化铝胶体呈块状， 其接种效果将完全无效；
• 2、使用前未充分摇匀，使疫苗液体中的氢 氧化铝胶体完全悬浮均匀，其接种效果将 明显降低；
• 3、疫苗注射入脂肪层内；
• 4、有免疫缺陷；
• 5、目前检测表面抗体所用的包被抗原为血 源性抗原，而且现在使用的乙肝疫苗为基 因疫苗，故检测灵敏度较低。
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九、特殊情况接种
• 在意外接触HBV感染者的血液和体液后的预防：
• 1、血清学检测，应立即检测HBsAg、抗-HBs、 ALT等，并在3和6个月复查。
• 2、主动和被动免疫
• 如已接种过乙肝疫苗，且已知抗-HBs≧10mIU/ml 者，可不进行特殊处理。如未接种过乙肝疫苗， 或虽接种过乙肝疫苗，但抗-HBs≦10mIU/ml或抗HBs水平不详，应立即接种HBIG200-400IU，并 同时在不同部位接种一针乙肝疫苗，于1和6个月
• 如果出生后24小时内未能接种，仍需 按照上述0、1、6的要求尽早接种。如 果第2针或第3针滞后于接种程序的规 定，应尽快补种。第2针与第1针的间 隔时间不能少于1个月，如果第2针滞 后时间较长，第3针与第2针间隔时间 不能少于2个月，并且第1针和第3针间 隔时间要在4个月以上。
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三、接种率评价
后分别接种第2和第3针乙肝疫苗(各20μg）.
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十、乙肝疫苗免疫效果
• 乙肝疫苗除可预防乙肝外，还可预防丁型肝 炎，因为丁型肝炎病毒必须依赖乙肝病毒才 能复制，但不能预防其它类型的肝炎。接种 第1针后有50%左右产生HBsAb ，而接种第 2针后有80%左右，完成3针次95%能产生 保护性抗体，母婴阻断率90％以上。但仍 有很少部分由于遗传因素，不能产生保护作 用。
国产重组乙型肝炎疫苗CHO细胞课件
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乙肝疫苗预防接种常见的问题
不同剂量乙肝疫苗母婴阻断效果
疫苗 剂量
10g3
调查 人数 171
母亲单阳性
阳性 阳性率 人数 （％）
2
1.17
母亲双阳性
调查 阳性 阳性率 人数 人数 （％）
急性乙型肝炎在成年人中90%可自愈，而慢性 乙型肝炎表现不一，分为慢性乙肝携带者、慢 性活动性乙型肝炎、乙肝肝硬化等。 我国目前乙肝病毒携带率为7.18%，其中约三 分之一有反复肝损害，表现为活动性的乙型肝 炎或者肝硬化。随着乙肝疫苗的推广应用，我 国乙肝病毒感染率逐年下降，5岁以下儿童的 HBsAg携带率仅为0.96%。(2006年我国进行的 乙型肝炎流行病毒调查结果 )
复旦新闻文化网 /fudannews/2011/1115/29282.html
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目前乙肝疫苗接种的问题
1、低无应答率高，情况普遍，10-15%接 种疫苗后无应答。
2、保护时间短，新生儿接种5微克3年后 抗体阳性率约30%。
死亡
病种
死亡数
艾滋病 9224
肺结核 2840
狂 犬 病 1879
乙肝 637
手足口病 509
丙肝 125
出 血 热 119
梅毒
75
甲型H1N1流感
75
乙脑
63
病死率(%)
病种
病死率
鼠 疫 100.00
人禽流感 100.00
狂 犬 病 98.02
乙肝疫苗课件
免疫效果
母婴阻断
未同时使用HBIG，保护效果为95% 同时使用HBIG，保护效果达98%
青少年和成人
大于95%受种者
无应答和低应答 是否加强免疫 是否要筛查 孕妇 早产儿 意外暴露后
参考文献
夏宪照 罗会明. 《实用预防接种手册》.
谢谢！
接种部位为上臂三角肌肌内注射 不同国家生产的疫苗对注射对象的年龄要求不同
接种对象
免疫程序
3剂（第0、1、6个月） 血液透析者4剂（第0、1、2、6个月） 16岁以上人群有HepB接种史
≤10mlIU/ml 全程基础免疫 10~100mlIU/ml 加强1剂20ug ≥100mlIU/ml 不接种
国产HepB 啤酒酵母 CHO 汉逊酵母
进口HepB 啤酒酵母（安在时） 汉逊酵母（益可欣）
剂量和用法
啤酒酵母 CHO 汉逊酵母 进口HepB
新生儿和＜19岁 ≥19岁每次1.0ml 每次0.5ml（5ug） （10ug） ≤15岁每次1ml ＞15岁每次1ml （10ug） （20ug） 婴儿和成人每次均为0.5ml（10ug） ≤15岁每次0.5ml （10ug） ＞15岁每次1.0ml （20ug）
禁忌症
患急性或慢性严重疾病者 对疫苗已知的任何成分过敏者 发热暂缓接种
接种反应
一过性疼痛10%-20% 低热1.8% 上呼吸道症状1-2% 胃肠道症状1% 偶合晚发性维生素K缺乏 症（2周-3月龄新生儿）
注意事项
HepB不应皮下或皮内注射 HIV感染、血透和免疫缺陷的患者，初种后要 追加接种
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个月及6个月后注射第2、3针;其他人群免 疫程序为第0、1、6个月，剂量均为5ug/支。
疫苗制备
• 取国家批准的重组酵母乙型肝炎疫苗的原始菌种，经一代
扩增，制成生产菌种，逐级扩增后接种于发酵罐，在适宜 温度和时间内进行三级发酵，收集细胞，经破碎，吸附粗 提，疏水色谱法精提乙型肝炎表面抗原，再经硫氰酸盐处 理，除菌滤过，甲醛灭活，氢氧化铝吸附等，加入硫柳汞 作为防腐剂。 取国家批准的重组CHO乙型肝炎疫苗的细胞株，用静置培 养或旋转法培养细胞，当乙型肝炎表面抗原的分泌量达到 每1.0mg/L时，收获培养液，经硫酸铵盐析，2～3次密度 梯度离心和色谱法纯化后，再经浓缩，除菌滤过，甲醛灭 活，氢氧化铝吸附等，加硫柳汞作为防腐剂，分装制成。
•
简介
• 重组乙型肝炎疫苗是由重组酵母或重组
CHO工程细胞表达的乙型肝炎表面抗原， 经纯化、灭活及加入佐剂吸附制成。前者 为重组酵母乙型肝炎疫苗，后者为重组 CHO乙型肝炎疫苗。其性状为白色混悬液， 静置形成可摇散的沉淀。
疫苗用法
• (2)注射部位为上臂三角肌肌内。 • (1)本疫苗注射时要充分摇匀。 • (3)新生儿第1针在出生后24小时内注射，1
持9-10年，国产重组乙肝疫苗（主要为酵母疫苗） 的免疫效果和免疫持久性如何，是人们关心的重 点。因为乙肝病毒缺乏易感动物模型，乙肝疫苗 的免疫效果考核只能应用人体考核来评价，既往 研究证明应用乙肝苗阻断HbsAg、HbeAg双阳性 母亲的新一儿传播HBV是评价乙肝疫苗的效力的 最直接指标，且1-10岁儿童对乙肝疫苗反应较好。 我们选择新生儿和儿童作为疫苗考核对象，进行 国产酵母乙肝疫苗的免疫效果和持久性研究。阶 段结果报告如下：
重组乙型肝炎疫苗
背景
• 乙型肝炎是由病毒引起的，约占所有病毒性
肝炎的40﹪，它可以急性发病，也可以形成 慢性肝炎，并进而引发肝硬化，肝癌，而其 中很大一部分人可以是健康的病毒携带者， 不出现症状，但表面抗原（HbsAg）阳性， 或者同e抗原（HbeAg）阳性，常常是重要 的传染源。在我国，人口众多，而这样的慢 性病毒携带者约有一亿人，是对公共卫生的 一个重要威胁。
• 【检查】照《中国生物制品规程》规定的方法检 • • • • • • •
• 【效价测定】取本品，照《中国生物制品规程》
• •• • • •Fra bibliotek测定，应符合规定。 酵母乙型肝炎疫苗的ED50不得过1.5μg。体 外相对效力试验抗原含量与参比苗的抗原比值不 低于0.5。 CHO乙型肝炎疫苗的ED50与参比苗的ED50比 值不低于1.0。 【类别】亚单位疫苗。 【规格】酵母乙型肝炎疫苗 0.5ml:5μg CHO乙型肝炎疫苗 1ml:10μg 【贮藏与效期】在2～8℃的暗处保存。有效 期2年。
•
鉴别与检查
• 【鉴别 】 取本品，照《中国生物制品规程》酶
联免疫吸附法，与已知乙型肝炎表面抗体确证其 为乙型肝炎表面抗原。 查如下项目。 纯度 不得低于98%。 氢氧化铝 每1ml不得过1mg。 硫柳汞 不得过0.01%。 甲醛 不得过0.01%。 异常毒性 取本品，依法检查，应符合规定。 热原 取本品，依法检查，应符合规定。 无菌 取本品，用直接接种法检查，应符合规 定。
（三） CHO疫苗
• 本疫苗系用基因工程技术将乙型肝炎表面
抗原基因片段重组到中国仓鼠卵巢细胞 (CHO)内，通过对细胞培养增殖，增殖分泌 乙肝表面抗原(HBsAg)于培养液中，经纯化 加佐剂氢氧化铝后制成。疫苗外观有轻微 乳白色沉淀。
国产酵母乙肝疫苗的效果
• 研究证明：国产血源乙肝疫苗的保护效果至少维
• 乙肝病毒属DNA病毒科，有三种外壳的基因编码。
乙肝病毒具有五种抗原抗体系统：即表面抗原抗 体(HBsAg与抗-HBs)、e抗原抗体(HBeAg与抗HBe)、核心抗原抗体(HBcAg与抗-HBc)、x抗原抗 体(HBxAg与抗-HBx)和HBv-DNA。有临床意义的 主要有HBsAg与抗-HBs、HBeAg与抗-HBe和抗HBc，简称“两对半”。 临床主要表现为食欲减退、恶心、厌油、乏 力、巩膜黄染、黄色尿、肝脏肿大、肝区痛等。
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（一）酿酒酵母
• 1982年Valenzuela首先在酿酒酵母中成功表达乙
型肝炎病毒表面抗原（HBsAg），1986年9月美国 默克公司的重级酵母乙肝疫苗首次取得专利并得 到美国FDA的批准。1989年7月比利时史克比成公 司的另一重组酵母乙肝炎疫苗也取得专利。目前 重组酵母乙肝疫苗的生产厂家除默克公司，史克 公司外，我国北京天坛生物，深圳康泰公司也大 量生产该种疫苗。其优点为：酵母为低等真核微 生物，易于在营养成份简单的培养基中高密中发 酵培养，利用工业化生产，表达量高，目前世界 上大规模生产和上市的疫苗大多数由该表达系统 制备而成。
重组乙型肝炎疫苗的种类及生产现 状
• 血源乙肝疫苗经过十年上亿人份人群接种，证明
具有良好的安全性的免疫原性，但存在对生产者 和献血者健康有潜在危险性，生产成本高等缺陷， 我国已经完成同重组乙肝疫苗对血源疫苗的替代 工作。 目前重组乙肝疫苗主要分为酵母，（酿酒酵 母和甲基营养型酵母）以及中国仓鼠卵巢细胞 （Chinese Hamster Ovary cell,CHO）表达疫苗。
免疫效果
新生儿 • （1） 母婴传播阻断保护率：应用6批国产量5 μg酵母疫 苗对163例HbsAg，HbeAg双阳性母亲的新生儿进行母婴 传播阻碍断效果考核，结果保护率在81.48-92.07%之间， 远高于文献报道的10 μg（59.2%）和20 μg（74.3%）血 源乙肝疫苗,与30 μg血源乙肝疫苗的保护率(85.1%)相当, 而进口5 μg M苗(46例,)10 μgA苗(58例)和10 μg S酵母疫 苗(30例)的保护率分别为90.33%、86.59%和92.58%。表 明国产酵母疫苗免疫效果达到国外同类产品和30 μg国产 血源乙肝疫苗的保护水平。 • 2） 抗体GMT：未发现第一针免后3、9、12月时，HbsAg、 HbeAg双阳性孕妇所生新生儿的抗体GMT与HbsAg单阳性 及健康孕妇所生新生儿抗体GMT有显著差异。
（二） 甲基营养型酵母
• 共有4种表达系统。甲基营养型酵母生产
HbsAg具有培养基廉价，目的基因与酵母染 色整合的优点， 不仅可克服质粒丢失，还 可提高表达量。汉逊酵母（Hansenula Polymorpha，H.P.）和毕赤酵母（Pichia Pastoris，P.P.）系统已应用于工业化生产。 已上市的酿酒酵母和甲基营养型酵母表达 乙肝疫苗为含HbsAg成份的疫苗。