大肠埃希菌检验记录

大肠埃希菌的鉴定流程及相应试验结果

大肠埃希菌的鉴定流程及相应试验结果下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!一、引言随着生活水平的提高，食品安全问题备受关注。

微生物限度、控制菌检查记录

检验编号：
产品名称
批号
数量
供货单位
取样量
检验日期
温度
湿度
报告日期
检验依据
供试液制备
取供试品（g），加pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液至ml，混匀，作为1:10的供试液；细菌检查：吸取本品1ml至5个平皿，每个平皿0.2ml；霉菌和酵母菌检查：吸取本品1ml至平皿
平皿号
细菌
培养基/批号
营养琼脂培养基/
供试品
阳性对照
阴性对照
结果
□检出□未检出（规定：）
备注
结论
本品按进行检验，结果。
检验人
复核人
2天
3天
3天
4天
4天
5天
5天
5
1天
1天
2天
2天
3天
3天
4天
4天
5天
5天
每组菌落总数
平均数
平均数
结果
（规定：）
结果
（规定：）
备注
结论
本品经按进行检验，结果。
检验人
复核人
控制菌检查记录
检验编号：
产品名称
批号
数量
供货单位
取样量
检验日期
温度
湿度
报告日期
检验依据
一、大肠埃希菌检查
供试品制备：取供试品（g/ml/cm2），加PH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液至ml，混匀，作为的供试液。
培养基信息：①营养肉汤培养基配制批号：②四硫磺酸钠亮绿培养基配制批号：
③胆盐硫乳琼脂培养基配制批号：④EMB配制批号：
培养温度：培养时间：培养箱编号：
营养肉汤预增菌（18～24h）
四硫磺酸钠亮绿增菌（18～24h）

大肠埃希氏菌O157H7方法学验证报告

大肠埃希氏菌O157H7方法学验证报告实验目的本实验的目的是验证大肠埃希氏菌O157：H7的存在与定量，并确定是否符合相关卫生标准。

实验设计本实验采用了标准菌落计数法和定量PCR法来定量大肠埃希氏菌O157：H7的数量。

实验组包括大肠埃希氏菌O157：H7菌液的不同浓度，作为对照组的菌液中没有大肠埃希氏菌O157：H7实验步骤1.培养基的准备：在制备LB固体培养基后，用无菌铁锹将培养基倒入无菌平板上，倒置放置，待凝固。

2.大肠埃希氏菌O157：H7菌液的准备：取一定量的大肠埃希氏菌O157：H7菌株液体培养物，接种入LB液体培养基中，放置在摇床上振荡培养。

3.菌液的稀释：将大肠埃希氏菌O157：H7菌液稀释成不同浓度，分别为10^-1、10^-2、10^-3、10^-44.菌液的接种：在已凝固的培养基表面均匀涂布不同浓度的大肠埃希氏菌O157：H7菌液，同时在一个区域以相同方式接种无菌菌液作为对照组。

5.培养：将接种好的培养基板置于恒温恒湿培养箱中，以37℃培养24小时。

6.菌落计数：观察培养基表面的菌落情况，使用菌落计数器进行菌落计数。

7.定量PCR：取培养基上菌落较多的区域，提取DNA，并进行PCR反应。

通过所得的PCR产物浓度，定量大肠埃希氏菌O157：H7的数量。

结果和讨论通过菌落计数法的结果，我们可以得到大肠埃希氏菌O157：H7在不同浓度时的菌落数。

根据定量PCR的结果，我们得到大肠埃希氏菌O157：H7的基因拷贝数，并与标准曲线进行比较。

根据对照组的结果，我们可以确定实验的准确性和可靠性。

本实验验证了大肠埃希氏菌O157：H7的存在与数量，并且发现大肠埃希氏菌O157：H7的菌落数与基因拷贝数具有相关性。

这些结果表明，我们可以通过菌落计数法和定量PCR法来定量大肠埃希氏菌O157：H7的数量，从而判断食品是否受到污染，是否符合相关卫生标准。

在实验过程中，我们还发现了一些问题和改进的方向。

大肠埃希菌检查原始记录

文件编号：************
大肠埃希菌检查原始记录
1.培养基及菌种
胰酪大豆胨液体培养基配制批号：麦康凯液体培养基配制批号：麦康凯琼脂培养基配制批号：菌种编号： 2.增菌预培养
取1：供试液 ml(相当于1g 或1ml 供试品),接种至 ml （经方法适用性试验确认）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，30-35℃培养18-24小时
3.选择和分离培养
①取上述培养物 ml 接种至
ml 麦康凯液体培养基中，42-44℃培养24-48小时
培养起止时间：；培养箱编号：；培养温度： ℃ 备注：“+”代表浑浊，“
-”代表未发生浑浊
②取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂平板上，30-35℃培养18-72小时培养起止时间：；培养箱编号：；培养温度： ℃ 结果判定： □检出 □未检出
检查人/日期：复核人/日期：。

20-6.大肠菌群检验原始记录

（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
3
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
4
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长大肠菌群检验原始记录来自检验项目大肠菌群
样品状态
□完好□异常
检验
方法
GB 4789.3—2016（第二法）
仪器
设备
样品
处理
□固体样品：无菌操作称取25g加入到225mL无菌生理盐水均质袋中，拍打1～2min
□液体样品：无菌吸管吸取25mL加入到225mL灭菌生理盐水中，充分混匀
样品
序号
培养过程
稀释倍数
结果计算
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
5
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
琼脂
对照
0 CFU/皿
盐水
对照
0 CFU/mL
检验人：
复核人：
检验日期：
报告CFU/g
100
10-1
10-2
10-3
1
(1)吸取1mL样液于VRBA平板36.0℃培养24h后，是否有沉淀环的紫红色菌落生长
（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）
（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数
2

大肠埃希氏菌检验原始记录

四、EMB平板分离：取接种环取产气管中培养物接于EMB平板，℃培养h，观察平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落。
五、革兰氏染色试验：用接种针接触菌落（典型菌落或可疑菌落）中心部位，接种至营养琼脂平板上，℃培养h，取培养物进行革兰氏染色试验。
六、鉴定：取营养琼脂培养物进行靛基质试验、MR-VP试验和柠檬酸利用试验。
大肠埃希氏菌检验原始记录
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB4789.38-2012（MPN计数法）
生产批号：样品数量：
检测日期：环境湿度：
环境温度：
大肠菌群检验过程：
1、称取样品g（ml）样品放入盛有225ml灭菌的磷酸缓冲液中，充分混匀，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
2、初发酵试验：每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤,每管接种1ml，℃培养h，观察倒管内产气情况，产气者进行复发酵试验，如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。如所有LST肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果。
三、复发酵试验：用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于已提前预稳至45℃的EC肉汤管中，放入带盖的℃水浴箱内，培养h，检查小倒管内是否有气泡产生，如未有产气则继续培养至48h±2h，记录产气的EC肉汤管数。如所有EC肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果；如有产气，则进行EMB平板分离培养。

大肠埃希氏菌检验原始记录

样品名称样品来源增菌培养分离培养初步生化试验生化试验血清学实验结果报告25g检样225ml普通肉汤361培养6h
***疾病预防控制中心
大肠样品名称：收样日期：年月日检测日期：年月日
检测项目：□大肠埃希氏菌检验方法：GB4789.6-2003GB4789.36-2008
□有/□无可疑菌落
TSI
尿素
营养琼脂斜面
氧化酶试验
革兰氏染色
靛基质
甲基红
VP试验
赖氨羧酶试验、
动力试验
麦康凯
平板
显色
平板
备注：
检验人：审核人：检毕日期：年月日
注：□内打“√”表示选定，□内打“×”表示不选定。
仪器设备：□生化培养箱□隔水恒温培养箱□显微镜实验地点：病原微生物室环境条件：℃％RH
样号
样品名称
样品来源
增菌培养
分离培养
初步生化试验
生化试验
血清学
实验
结果
报告
25g检样+225ml
□普通肉汤36±1℃培养6h；
□EC增菌肉汤44.5±0.2℃培养18～24h
接种麦康凯和显色平板，36±1℃分别培养18～24h，

大肠埃希菌的鉴定流程及相应试验结果

大肠埃希菌的鉴定流程及相应试验结果下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!大肠埃希菌的鉴定流程与试验结果解析大肠埃希菌，通常简称为E.coli，是一种常见的肠道细菌，广泛存在于人体和动物的肠道中。

大肠菌检验原始记录

养生坊大肠菌群检验原始记录表检样名称：样品编号：检验依据：大肠菌群（MPN/100ml）检验方法：每个样品，选择三个连续稀释度的样品稀释液。

1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。

将接种管置于36±1℃培养48±2h。

观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性。

稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期：检验时间：检验员：检样名称：样品编号：检验依据：大肠菌群（MPN/100ml）检验方法：每个样品，选择三个连续稀释度的样品稀释液。

1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。

将接种管置于36±1℃培养48±2h。

观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性。

稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期：检验时间：检验员：检样名称：样品编号：检验依据：大肠菌群（MPN/100ml）检验方法：每个样品，选择三个连续稀释度的样品稀释液。

1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。

将接种管置于36±1℃培养48±2h。

观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性。

稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期：检验时间：检验员：。

大肠埃希氏菌原始记录表

大肠埃希氏菌检验数据原始记录
委托书编号：委托单位：
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB/T多管发酵法
样品名称：样品数量：
样品编号：样品状态：
收样日期：检测日期：
环境温度：环境湿度：
操作方法：
一、乳糖发酵实验
1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml(即水样）注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水，需经常检验或每天检验一次的，可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。
2、检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，，甚至，，,每个稀释度接种5管，每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后，取lml接种，每递增稀释一次，换用1支lml灭菌刻度吸管。
3、将接种管置36±l°C培养箱内，培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。
36±1°C
24h±2h
EC-MUG培养基
±°C
24h±2h
观察结果
序号
样品
编号
乳糖发酵
EC-MUG
结果报告(MPN/100mL)
10ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
操作人：复核人：

大肠菌群检验原始记录(平板计数法)

XX公司
食品微生物检验记录
检品编号：检品名称：
【大肠菌群】按GB 4789.3-2010第二法平板计数法进行检验
环境条件：温度：湿度：
仪器设备：超净工作台编号：；培养箱（36℃±1℃）编号：
电子天平编号：
培养基与试剂：（配制日期：年月日）
①结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）；②无菌生理盐水；③煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤
样品操作
取 5 份独立包装的样品，分别取（）、、、、做为测试样品，按如下述操作，测得结果；
每份测试样品加入225 mL无菌生理盐水，均质，制成1:10样品均液（调节pH值为6.5~7.5），吸取 1 mL（1:10）样品均液至9 mL灭菌生理盐水中做10倍递增稀释。

选、和稀释液检测，培养基为结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA），℃，培养h（从月日: 到月日: ）,
挑选10个不同类型典型和可疑菌落，接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管，℃培养h（从月日: 到月日: ）。

标准规定：（标准号：）
n=5 c= m= CFU/g（mL）M= CFU/g（mL）结论：□符合规定□不符合规定
检验者：复核者：检验日期：。

食品中大肠埃希氏菌检验原始记录

食品中大肠埃希氏菌检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB4789.38-2012一、MPN计数法（第一法）：1.样品稀释：无菌操作称（量）取样品25g加入盛有225ml的无菌磷酸盐缓冲液的无菌均质杯中，8000r/min~10000r/min均质2分钟，做成1∶10样品液；若样品为液态，吸取25ml 样品至盛有225ml无菌磷酸盐缓冲液的锥形瓶（预置适当数量的无菌玻璃珠）中，震荡混匀，作为1:10的样品匀液。

调样品匀液pH至6.5~7.5。

取1∶10样品匀液1ml加入到盛有9ml磷酸盐缓冲液稀释管中，混匀，做成1∶100样品均液。

根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。

每递增一次，换用1支1ml无菌吸头。

2.初发酵：每个样品，选取3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1ml（接种量超过1ml，则用双料LST肉汤），36±1∶培养24±2h，观察倒管内是否有气泡产生，对于24±2h产气者进行复发酵。

对于未产气者，则继续培养48±2h，观察，产气者进行复发酵实验。

如所有LST肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌结果。

3.复发酵：用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于提前预温至45∶EC 肉汤管中，放入带盖的44.5±0.2∶水浴箱中。

水浴的水面应高于肉汤培养基页面，培养24±2h，检查小导管是否有气泡产生，如未有气泡产生则继续培养至48±2h。

记录24h和48h内产气的EC肉汤产气管数，如所有EC肉汤管均为产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果；如有产气，则进行EMB平板分离。

4.EMB平板分离：用接种环取培养物分别划线接种于EMB平板，36±1∶培养18~24h，观察平板上有无具有黑色中心光泽或无光泽的典型菌落。

大肠埃希氏菌报告

EMB琼脂上大肠埃希氏菌典型菌与可疑菌落

典型菌落：具黑色中心有光泽或无光泽的菌落。非典型的可疑菌落：粉红色，无黑心。
5.2.5 营养琼脂斜面或平板培养

从每个平板上挑5个典型菌落，如无典型菌落则挑取可疑菌落。用接种针接触菌落中心部位，移种到营养琼脂斜面或平板上36 ℃±1 ℃，培养18 h～24 h。取培养物进行革兰氏染色和生化试验
3 设备和材料

3.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。 3.8 无菌锥形瓶：容量500 mL。 3.9 无菌培养皿：直径90mm。 3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 3.11 菌落计数器。 3.12 紫外灯：波长360nm～366nm，功率≤6 W。
EC肉汤

EC肉汤主要成分：乳糖、胆盐、胰蛋白胨。大肠埃希氏菌因分解乳糖而产气，使小倒管中可见气泡。
5.2.4 伊红美蓝平板分离培养

轻轻振摇各产气管，用接种环取培养物分别划线接种于EMB平板，36 ℃±1℃培养 18 h～24 h。观察平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落。
VRBA－MUG平板计数法

常规方法不能检出不产气菌株和乳糖迟缓发酵菌株，而且由于O157:H7菌株不能耐受44℃的培养温度而同样不能检出 O157:H7菌株，普通变形杆菌等某些杂菌的存在对大肠埃希氏菌发酵乳糖的产气能力具有抑制作用，但对分解MUG产生荧光的能力没有抑制作用。
VRBA－MUG平板计数法
大肠埃希氏菌平板计数法程序
检样25g(mL)+225mL稀释液

微生物限度检查记录版

表：2.1-024微生物限度检查记录（通用）1. 常规法：取供试品10為1,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml ，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。

2. 薄膜过滤法：取供试品10mi ,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml ，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。

吸取1:10的供试液10ml ,过滤，加0.1%无菌蛋白胨水溶液 300ml 分三次冲洗，每次100ml ;冲洗后，将滤膜正贴于胰酪大豆胨固体培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基上，每种培养基平行制备 2个平皿。

按平皿法测定其菌数。

胰酪大豆胨液体培养基（配制批号:）、麦康凯液体培养基（配制批）麦康凯琼脂培养基（配制批号: ）供试液制备微生物限度检查记录、需氧菌总数检查30〜353〜5）、霉菌、酵母菌总数检查20C〜25C,5〜7天）三糖铁琼脂斜面穿刺接种（18〜24h ）三、控制菌检查（30-35 C ）检验者:表：2.1-024号:结论本品经按《中国药典》2015年版“非无菌产品微生物限度检查法”进行检验，结果审核者:微生物限度检查记录（丸剂）供试液制备供试液。

胰酪大豆胨增菌（18〜24h ）RV 沙门选择培养木糖赖氨酸脱氧胆酸分离培养（18〜48h ）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号:）麦康凯琼脂培养基（配制批号:）四、沙门菌检查（30 °C 〜35C ）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、RV 沙门增菌液体培养基（配制批号：）,木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基（配制批号:）、三糖铁琼脂（配制批号：五、耐胆盐革兰阴性菌检杳胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配制批号：）,紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配制批号：审核者：检验者: 表：2.1-024阴性对照阳性对照三、大肠埃希菌检查）、麦康凯液体培养基（配制批结果□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出/g）四、沙门菌检查（30°C〜35C）胰酪大豆东液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配制批号：）,紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配制批号：、表: 2.1-024 微生物限度检查记录（蛇胆川贝液）三、大肠埃希菌检查胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、麦康凯液体培养基（配制批号：）麦康凯琼脂培养基（配制批号：）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、RV沙门增菌液体培养基（配制批号：）,木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基（配制批号：）、三糖铁琼脂（配制批号：）审核者：检验者:表：2.1-024 微生物限度检查记录（30〜353〜5天）、霉菌、酵母菌总数检查20C〜25C, 5〜7天）1、口服液体药用聚酯瓶：取数个试瓶，加入1/2标示容量的氯化钠注射液，将盖旋紧，振摇1分钟，即得供试液。

菌落总数、大肠菌群原始检验记录

产品名称：生产批号：
大肠菌群检验原始记录
规格：
生产数量：
样品状态：
完好
异常
检验日期：
检验环境：温度： ℃
湿度：RH
%
检验依据：《食品安全国家标准蜜饯CB14884-2016》
检验方法：GB4789.3-2016（第二法）
操作过程：（1）吸取1ml样液于VRBA平板36℃培养24小时后，是否有沉淀环的紫红色菌落生产；（2）从合适稀释度上挑取典型和可疑菌落数（个）；（3）BGLB肉汤证实试验阳性管数。
样品序号
1 2 3 4 5 空白对照典型和可疑菌落
稀释倍数
10-1
10-2
无有
1
2
3
4
典型和可疑菌落
证实试验
最终结果结论判定检验员：
10-3
空白对照数量
5
6
结果计算（Cห้องสมุดไป่ตู้G/g）
备注
CFU/ml
7
8
9
10
复核员：

大肠埃希氏菌O157H7检验原始记录

样品制备
□固体和半固体样品：无菌称取25g样品，置于盛有225mLmEC+n肉汤的无菌均质袋内，拍击式均质器均质1min～2min。
□液体样品：吸取25mL于样品置于盛有225mLmEC+n肉汤的无菌均质袋内,振荡混匀。
检验程序
1.实验采集抽样方案来自GB4789.1；
2.上述样品匀液于36℃±1℃培养18～24h；
赖氨酸脱羧酶
鸟氨酸脱羧酶
纤维二糖
山梨醇
斜面
底层
产气
H2S
ABΒιβλιοθήκη CDE阳性
报告
检验员：审核员：
大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验原始记录表
样品名称
样品编号
检验项目
大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验
检验日期
检验地点
BSL-2实验室
温湿度（℃，RH%）
检验依据
GB 4789.36—2016
判定依据
检验仪器
生化培养箱均质器电子天平
生物安全柜显微镜三用紫外分析仪
检验试剂
mEC+n肉汤，CT-SMAC平板， O157显色平板，MUG-LST肉汤，生化鉴定试剂盒，乳胶凝结试剂
3.划线于CT-SMAC平板和大肠埃希氏菌O157显色琼脂，36℃±1℃培养18～24h；
4.挑取典型可疑菌落初步生化实验和血清学实验；
5.据生化鉴定试剂盒要求做大肠埃希氏菌O157：H7/NM生化鉴定。
样品
结果
项目
是否典型菌落
MUG试验
动力实验
血清学试验
MR
VP
三糖铁琼脂
靛基质
棉子糖
西蒙氏柠檬酸盐

大肠埃希氏菌报告

靛基质（I） + + -
+
-
+ +
+ +
典型产气肠杆菌非典型产气肠杆菌
生化鉴定

注1：如出现表1以外的生化反应类型，表明培养物可能不纯，应重新划线分离，必要时做重复试验。注2：生化试验也可以选用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统等方法，按照产品说明书进行操作
5.3大肠埃希氏菌MPN计数的报告

6.4 大肠埃希氏菌平板计数的报告

两个平板上发荧光菌落数的平均数乘以稀释倍数，报告每g（mL）样品中大肠埃希氏菌数，以CFU/g (mL)表示。若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告。
质量控制

人员培训标准菌株：大肠埃希氏菌ATCC 25922，产气肠杆菌ATCC 13048 消耗性材料技术性验收
6.3平板菌落数的选择

数在10 CFU～100 CFU之间的平板，暗室 360nm～ 366nm 波长紫外灯照射下，计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。
6.2 操作步骤
检验时用已知MUG阳性菌株（如大肠埃希氏菌ATCC25922）和产气肠杆菌（如 ATCC 13048）做阳性和阴性对照。
EMB琼脂上大肠埃希氏菌典型菌与可疑菌落

典型菌落：具黑色中心有光泽或无光泽的菌落。非典型的可疑菌落：粉红色，无黑心。
5.2.5 营养琼脂斜面或平板培养

从每个平板上挑5个典型菌落，如无典型菌落则挑取可疑菌落。用接种针接触菌落中心部位，移种到营养琼脂斜面或平板上36 ℃±1 ℃，培养18 h～24 h。取培养物进行革兰氏染色和生化试验

大肠埃希氏菌生化鉴定结果

大肠埃希氏菌生化鉴定结果
摘要：
1.大肠埃希氏菌的概述
2.大肠埃希氏菌的生化鉴定方法
3.大肠埃希氏菌在食品、药品、化妆品行业的应用
4.大肠埃希氏菌ATCC25922 菌株的特点和用途
正文：
大肠埃希氏菌（Escherichia coli，简称E.coli）是一种革兰氏阴性的短杆菌，大小约为0.51～3 微米，具有周生鞭毛，能运动，无芽孢。

大肠埃希氏菌在人和动物的肠道中广泛存在，可以发酵多种糖类产酸、产气。

大肠埃希氏菌的生化鉴定方法通常包括发酵乳糖产酸产气实验和IMViC 试验。

发酵乳糖产酸产气实验中，大肠埃希氏菌在乳糖发酵培养基中会产生酸和气体，使培养基颜色由紫色变为黄色，导管中有气体产生。

IMViC 试验则是通过检测大肠埃希氏菌在靛基质、甲基红、V-P 试验和柠檬酸盐中的反应，来初步鉴别革兰氏阴性杆菌。

大肠埃希氏菌在食品、药品、化妆品等行业中有着广泛的应用。

例如，在食品工业中，大肠埃希氏菌常被用作指示菌，以检测食品的卫生质量。

在药品和化妆品行业中，大肠埃希氏菌则可用于检测生产过程中的污染情况。

大肠埃希氏菌ATCC25922 是一种常用的实验菌株，主要用于阳性对照反应和培养基质量控制等实验。

该菌株的特点是采用真空冷冻干燥技术，菌株质量稳定，保存时间长。

同时，大肠埃希氏菌ATCC25922 菌株还配套有菌株复苏液和复活说明书，菌株复活简单、方便。

此外，该菌株还附带完整的菌株鉴
定报告，安全、放心。