花烛组织培养的研究

　文章编号:100724961(2000)0120069206

花烛组织培养的研究

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王进茂,郑均宝,高秀丽,徐振华,张法勇

(河北农业大学林业生物技术实验室,保定　071000)

摘要:为了找出一条适合花烛工厂化生产的最佳组织培养程序,以茎尖、叶、根等作为外植体诱导愈伤组织发生,进而诱导不定芽的发生。结果表明:黑暗有利于花烛愈伤组织的诱导和生长,其最佳培养基为MS +6-BA 017mg/L +K T 013mg/L 。光照有利于芽的发生,其最佳培养基为MS +6-BA 015mg/L +K T 015mg/L 。生长素不利于花烛愈伤组织和芽的诱导及增殖培养。花烛增殖培养合适的代数以20次为宜。生根培养基为1/2MS +I BA015mg/L 。关键词:花烛;愈伤组织;不定芽增殖;生根中图分类号:Q94311　文献标识码:A

花烛(Anthuriun andreanum Lind.)又名火鹤、灯台花、安祖花,为天南星科花烛属多年生草本植物,是世界名贵的切花及观赏植物。其原产地为哥伦比亚,因此又名哥伦比亚安祖花。现世界各地均有栽培。我国从80年代开始大批引进,在香港、广州、福建偶有露地栽培,多在温室中培养。其繁殖方法除分株外,也可以种子繁殖,但从授粉到种子成熟需6～7个月,甚至更长,且种子不能储藏。播种后历经2～3a 才能长到产花、分株的大小,另外

种子繁殖有较大的变异[1]。早在70年代,国外就开始了花烛组织培养的研究,并已取得较大成功[2,3,4]。国内也已开始了这方面的研究[5,6]。我国北方温室培养的切花用花烛及盆栽花烛,也多用组织培养法繁殖,本文意在找出一条适合花烛工厂化生产的较好的培养程序。

1　材料与方法

111　材料

盆栽花烛植株及花烛无菌生根试管小植株。112　方法

11211　盆栽花烛叶片的灭菌和接种　盆栽花烛叶片按发育状态分为幼叶(叶片紫红色,未

展开)、初展叶(叶片刚展开,叶片开始变绿)、中龄叶(叶片生长发育到最大,呈黄绿色)、老龄叶(已停止生长的叶子,呈深绿色)。从盆栽花烛植株上取不同叶龄的叶片,用清水冲洗干净。在无菌条件下,先用75%的酒精漂洗2min ,接着用无菌水冲洗1次,再用1‰的氯化汞溶液漂洗5min ,然后用无菌水冲洗4～5次,切成约015cm ×015cm 的方块接种到培养基中。

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收稿日期:1999-04-09;修改稿收期:1999-07-06

王进茂:男,1970年生,讲师,主要从事组织培养研究工作。

第15卷第1期河　北　林　果　研　究

V ol 115N o 112000年3月HEBEI JOURNAL OF FORESTR Y AN D ORCHAR D RESEARCH Ma r.2000

11212　愈伤组织的诱导　花烛试管生根小植株上的叶片、茎段、根及花烛盆栽植株的叶片

等,均可作为外植体。试管苗的叶片,用剪刀横向剪2～3道伤口至叶中脉,茎段、根切成015cm 的小段,接种到不同处理的培养基上,每瓶2个样本,每种处理10瓶。光照或黑暗条件下培养,50d 后统计愈伤组织诱导情况。11213　诱导不定芽的分化　把诱导出的愈伤组织在最适培养基中继代培养,待愈伤组织长到直径015～110cm 大小时,接种到诱导不定芽的培养基中。每处理20个样本,40d 后统计不定芽发生情况。11214　芽的增殖和生根培养　将高015～110cm 的嫩茎接到诱导不定芽分化和诱导生根的培养基中,40d 后观察统计结果。113　培养条件及所用培养基

培养室温度为(25±2)℃,光照强度1500～3000lx ,光照时间16h/d 。试验所用培养基统一编号如下:

(1)MS +6-BA 015(8)MS 0

(2)MS +6-BA 015+K T 013(9)1/2MS +I BA 011(3)MS +6-BA 017+K T 013

(10)1/2MS +I BA 012(4)MS +6-BA 017+K T 013+NAA 011(11)1/2MS +I BA 015(5)MS +6-BA 115+K T 110(12)1/2MS +I BA 110(6)MS +K T 015+2,4-D 015(13)1/2MS +NAA 015

(7)MS +6-BA 011

(14)1/2MS +I AA 015

其中外源植物激素的浓度单位均为mg/L ,(1)～(8)培养基加蔗糖25g/L ,(9)～(14)加蔗糖15g/L 。

2　结果与分析

211　诱导愈伤组织发生与不定芽分化

21111　外植体和外源植物激素　试验结果表明,外植体是诱导愈伤组织发生的重要因素。

从表1可以看出,相同培养条件下茎段最容易诱导愈伤组织的发生,诱导率最高可达73%;其次是叶片,为44%;根尖最低,只有8%。表1的试验结果还表明,在培养基(2)、(3)上诱导叶片和茎段愈伤组织发生,其诱导率明显高于其他3种培养基。培养基(4)添加的外源植物激素与培养基(2)、(3)相比只是多加了NAA 011mg/L ,可见,011mg/L 的NAA 对愈伤组织分化的诱导有一定的抑制作用。培养基(5)诱导率低的原因是6-BA 和K T 的浓度过高。培养基(1)诱导率低于(2)、(3),因为只添加了6-BA ,而未添加K T 。

盆栽花烛植株不同龄期的叶片愈伤组织诱导率也不同,以中龄叶最高(见表2)。且从盆栽花烛叶片诱导愈伤组织发生,添加的外源植物激素与试管小植株不同,需添加低浓度的2,4-D 。

愈伤组织经过继代培养,仍然接种到(1)～(5)号培养基中,在光下诱导不定芽分化,继而发育为嫩茎。试验结果仍是(2)、(3)号培养基较适宜,来源于叶片的每块愈伤组织平均产生415～515个嫩茎,茎段产生515～713个;而在(4)号培养基上,叶片为211个,茎

07 河　北　林　果　研　究 第15卷