三色堇组织培养技术研究
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表 １ 三 色 堇 的 初 代 培 养 基
序号 培养基
ＭＳ ＢＡ ／ ＋ＮＡＡ １ｍ Ｌ ＋ ２ ｍｇ Ｌ ０．
顶芽作为外植体 ， 分析不 同激素对三色堇培养过程
中 的污 染 率 、 亡 率 和 成 活率 的影 响 ， 选 适 合 的 死 筛 初 代 培 养 基 ， 现 三 色 堇 的快 速 繁 殖 ， 实 以满 足 市 场
以 ＭＳ（／ＭＳ 为基 本 培 养 基 ， 加 ３ １ ２ ） 添 ％蔗 糖 ，
０ ％琼 脂 ，Ｈ值 ５ ， ． ６ ｐ ． 附加 不 同质 量浓 度 的激 素 ８ （ Ａ、 Ａ 配制 １ 种 初 代 培 养 基 （ １ ， 过 Ｂ Ｎ Ａ） ０ 表 ）经
１ １ｏ ０１ ａ 温高 压处 理 ２ ｎ ２ Ｃ、． ＭＰ 高 ５ ０ ｍｉ。
１ ． 试 验方 法 ２
１ ． 外植体 消 毒 ．１ ２ 外 植 体 采 集 后 ， 用 清 水 冲 洗 ， 用洗 衣 粉 浸 先 再 泡、 清洗 ， 去泥 土 ， 洗 最后 用蒸 馏水 冲洗 干净 。
ＭＳ Ｂ ０ ￣Ｌ Ｎ ．ｍ ／ ＋ Ａ１ ｍ ＋ ＡＡ １ ｇＬ ０
将 配 好 的培 养基 分 装在 洗 净控 干 的 三角 瓶 中 ， 用双 层 封 口膜 封 口， 后 在高 压灭 菌 锅 中 高温 高压 然 灭 菌 ２ ｎ ０ｍｉ。在 超 净 工 作 台将 三 色 堇 顶 芽 分 别 转
７ｍｉ ， 理较 老顶 芽 ８ ｌ 、２ １ ｎ ｎ处 、０ ｌ 、４ ｍｉ。
③ 不 同顶 芽 消 毒 试 验 。对 带 叶较 多 和带 叶较 少 的三 色堇顶 芽 ， 先使 用酒 精处 理 ２ ， 使用 升 汞 ０Ｓ再
分别 处理 ６ ８ １ ｎ 、 、０ｍｉ。 １ ． 培养基 配置 及无 菌培 养 ．２ ２
等 ， 这 些 方 法 的繁殖 系数 较 小 ， 别 是 经 多 代 繁 但 特 殖后 ， 常造 成种 性 退化 ， 至 病毒 积 累 ， 响 三色 堇 甚 影 的产 量 和 品质 。利 用 组织 培养 技 术 ， 能够 加快 三 色 堇 的繁 殖 速度 ， 短 培育 周期 。本研 究 采用 三色 堇 缩
文 章编 号 ：０ １１ １ （０ ２ ０ —０ ６０ １ ０ —７ ４ ２ １ ）２０ ２ —３
三色 堇 （ｉ ａｒｏｏ） Ｖｏ ｉ ｌｒ属堇 菜科 堇菜属 １ ｌ ｔｃ 年生 或 多 年生 草 本 植 物 ， 名 蝴 蝶 花 、 脸 花 、 儿 脸 、 别 鬼 猫 人 面 花 等 。株 高 １ ～３ ｍ， 有 分 枝 ， ０ ０ｃ 茎 叶互 生 ， 长 有 叶柄 ， 期 ４～６ ， 花 月 果期 ５～ 月 。花 不 整 齐 ， ７ 花瓣 圆形 ， 常 每花 有 黄 、 、 通 紫 白等 ３ 颜 色 ， 名 “ 色 种 故 三 堇” 。三 色 堇原 产 南 欧 ，６ 纪 野 生 种就 被 用 于庭 １世
理 三色 堇幼 嫩 顶芽 ３ ５ ７ ｎ 处 理较 老 顶芽 ８ １ 、 、 、 ； ｍｉ 、０
ｌ １ ｉ ２、 ４ｍ ｎ。
② 使 用酒 精 和 升 汞作 为 消毒 剂 处 理 顶 芽 。先
１ ２
３
用 酒 精 处 理 ２ ， 用 升 汞 处 理 幼 嫩 顶 芽 ３ ５ ０Ｓ 再 、、
①使用升汞作为消毒剂处理顶 芽。用升汞处
收稿 日期 ：０ ２ ０ — ２ ２ １— １ １
—
２６ 一
接 入 １ ０ 培养基 进行 培养 。 ～１ 号 １ ． 培养 条件 ．３ ２ 温度 ２ ３～２ ５℃ ， 照 强 度 １２０～１５０ｌ， 光 ０ ０ 光 ｘ 照 ９～１ ｄ ６ｈ 。培养 期 间定期 调查幼 苗 的生长情 况 。 ／
院种植 ，８ １ 世纪开始育种 ，０ ２ 世纪 中期得到花色艳
丽 而 又纯 净 的 品种 ， 在 世 界 各 地 广 为栽 种 ， 色 现 其
彩丰富 ， 有纯紫 、 金黄 、 砖红 、 、 白色等 ， 橙 纯 是现今 流行 的花 坛 、 盆栽及 庭 院花卉 。 传统 的三色堇 主要 采用种 子繁殖 、 扦插 繁殖
需求 。
１ 材料 与方法 １１ 试 验材 料 ．
ＭＳ Ｂ ＋ Ａ２ｍ￣Ｌ Ｎ Ａ ．ｒｅＬ ＋ Ａ ０２ｅ ＭＳ Ｂ ｍ ＋ Ａ ．ｍ ＋ Ａ２ ￣Ｌ Ｎ Ａ０５ Ｌ （／） ＋ Ａ０２ ￣Ｌ Ｎ ．ｍ ／ １ ＭＳ Ｂ ．ｍ ＋ ＡＡ０１ ｇＬ ２ ＭＳ Ｂ ｍ ＋ Ａ ．ｒｅＬ ＋ Ａ ３ ￣Ｌ Ｎ Ａ０２ｅ
ＭＳ Ｂ ．ｍ ＋ ＡＡ０１ Ｌ ＋ Ａ０２ ￣Ｌ Ｎ ．ｍ
ＭＳ Ｂ ｍ￣ ＋ ＡＡ０４ Ｌ ＋ Ａ４ Ｌ Ｎ －ｍ ＭＳ Ｂ ｍ￣ ＋ ＡＡ０６ Ｌ ＋ Ａ６ Ｌ Ｎ ．ｍ
ＭＳ ＋ＢＡ ８ ／ ＮＡＡ ０ ８ ｍｇＬ＋ ． ｍ Ｌ
以三色堇顶芽作为供试材料。
摘 要 ： 以三 色堇顶 芽为材料 ， 采用升汞消毒 ， 酒精与升汞混合消毒 ， 经不同时间、 不同材料 、 同培 不 养基对比试验 ， 结果发现 ： 色堇初代培养基最适配方为ＭＳ Ｂ ｍｇ ＋ Ａ ２ ／ 。项 芽先用 三 ＋ Ａ２ ／ Ｎ Ａ ０ Ｌ Ｌ ．ｍｇ 酒精 消毒 ２ 后 用升汞 消毒 ， ０ｓ 幼嫩顶 芽用升汞 处理 ５ ｎ 而较 老 顶 芽处理 ８ ０ｍｉ， 活 率均最 高 。 ， ｍｉ ～１ ｎ 成 关键词 ： 三色堇； 消毒 方法； 初代培养 中图分类 号 ：７ ２３ Ｓ２ ． 文 献标识 码 ： Ａ
２ ２正 ０１
辽来自百度文库宁 林
业 科
技
２ ２ ０１ Ｎ ｏ２
第 ２期
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ Ｌｉ ｏ ｉ ｇ ｏ ｒ ａ ｏ ａ ｎ ｎ Ｆｏ ｅ ｔｙ ｃ ｅ ｅ＆ Ｔ ｃ ｎ ｏ ｙ ｒ ｓｒ Ｓ ｉｎｃ ｅ ｈ ｏｌ ｇ
三色堇组织培养技术研究
姚 立 平
（ 辽宁省森林 经营研究所 ， 辽宁 丹东 １８ ０ ） １ ０２
序号 培养基
ＭＳ ＢＡ ／ ＋ＮＡＡ １ｍ Ｌ ＋ ２ ｍｇ Ｌ ０．
顶芽作为外植体 ， 分析不 同激素对三色堇培养过程
中 的污 染 率 、 亡 率 和 成 活率 的影 响 ， 选 适 合 的 死 筛 初 代 培 养 基 ， 现 三 色 堇 的快 速 繁 殖 ， 实 以满 足 市 场
以 ＭＳ（／ＭＳ 为基 本 培 养 基 ， 加 ３ １ ２ ） 添 ％蔗 糖 ，
０ ％琼 脂 ，Ｈ值 ５ ， ． ６ ｐ ． 附加 不 同质 量浓 度 的激 素 ８ （ Ａ、 Ａ 配制 １ 种 初 代 培 养 基 （ １ ， 过 Ｂ Ｎ Ａ） ０ 表 ）经
１ １ｏ ０１ ａ 温高 压处 理 ２ ｎ ２ Ｃ、． ＭＰ 高 ５ ０ ｍｉ。
１ ． 试 验方 法 ２
１ ． 外植体 消 毒 ．１ ２ 外 植 体 采 集 后 ， 用 清 水 冲 洗 ， 用洗 衣 粉 浸 先 再 泡、 清洗 ， 去泥 土 ， 洗 最后 用蒸 馏水 冲洗 干净 。
ＭＳ Ｂ ０ ￣Ｌ Ｎ ．ｍ ／ ＋ Ａ１ ｍ ＋ ＡＡ １ ｇＬ ０
将 配 好 的培 养基 分 装在 洗 净控 干 的 三角 瓶 中 ， 用双 层 封 口膜 封 口， 后 在高 压灭 菌 锅 中 高温 高压 然 灭 菌 ２ ｎ ０ｍｉ。在 超 净 工 作 台将 三 色 堇 顶 芽 分 别 转
７ｍｉ ， 理较 老顶 芽 ８ ｌ 、２ １ ｎ ｎ处 、０ ｌ 、４ ｍｉ。
③ 不 同顶 芽 消 毒 试 验 。对 带 叶较 多 和带 叶较 少 的三 色堇顶 芽 ， 先使 用酒 精处 理 ２ ， 使用 升 汞 ０Ｓ再
分别 处理 ６ ８ １ ｎ 、 、０ｍｉ。 １ ． 培养基 配置 及无 菌培 养 ．２ ２
等 ， 这 些 方 法 的繁殖 系数 较 小 ， 别 是 经 多 代 繁 但 特 殖后 ， 常造 成种 性 退化 ， 至 病毒 积 累 ， 响 三色 堇 甚 影 的产 量 和 品质 。利 用 组织 培养 技 术 ， 能够 加快 三 色 堇 的繁 殖 速度 ， 短 培育 周期 。本研 究 采用 三色 堇 缩
文 章编 号 ：０ １１ １ （０ ２ ０ —０ ６０ １ ０ —７ ４ ２ １ ）２０ ２ —３
三色 堇 （ｉ ａｒｏｏ） Ｖｏ ｉ ｌｒ属堇 菜科 堇菜属 １ ｌ ｔｃ 年生 或 多 年生 草 本 植 物 ， 名 蝴 蝶 花 、 脸 花 、 儿 脸 、 别 鬼 猫 人 面 花 等 。株 高 １ ～３ ｍ， 有 分 枝 ， ０ ０ｃ 茎 叶互 生 ， 长 有 叶柄 ， 期 ４～６ ， 花 月 果期 ５～ 月 。花 不 整 齐 ， ７ 花瓣 圆形 ， 常 每花 有 黄 、 、 通 紫 白等 ３ 颜 色 ， 名 “ 色 种 故 三 堇” 。三 色 堇原 产 南 欧 ，６ 纪 野 生 种就 被 用 于庭 １世
理 三色 堇幼 嫩 顶芽 ３ ５ ７ ｎ 处 理较 老 顶芽 ８ １ 、 、 、 ； ｍｉ 、０
ｌ １ ｉ ２、 ４ｍ ｎ。
② 使 用酒 精 和 升 汞作 为 消毒 剂 处 理 顶 芽 。先
１ ２
３
用 酒 精 处 理 ２ ， 用 升 汞 处 理 幼 嫩 顶 芽 ３ ５ ０Ｓ 再 、、
①使用升汞作为消毒剂处理顶 芽。用升汞处
收稿 日期 ：０ ２ ０ — ２ ２ １— １ １
—
２６ 一
接 入 １ ０ 培养基 进行 培养 。 ～１ 号 １ ． 培养 条件 ．３ ２ 温度 ２ ３～２ ５℃ ， 照 强 度 １２０～１５０ｌ， 光 ０ ０ 光 ｘ 照 ９～１ ｄ ６ｈ 。培养 期 间定期 调查幼 苗 的生长情 况 。 ／
院种植 ，８ １ 世纪开始育种 ，０ ２ 世纪 中期得到花色艳
丽 而 又纯 净 的 品种 ， 在 世 界 各 地 广 为栽 种 ， 色 现 其
彩丰富 ， 有纯紫 、 金黄 、 砖红 、 、 白色等 ， 橙 纯 是现今 流行 的花 坛 、 盆栽及 庭 院花卉 。 传统 的三色堇 主要 采用种 子繁殖 、 扦插 繁殖
需求 。
１ 材料 与方法 １１ 试 验材 料 ．
ＭＳ Ｂ ＋ Ａ２ｍ￣Ｌ Ｎ Ａ ．ｒｅＬ ＋ Ａ ０２ｅ ＭＳ Ｂ ｍ ＋ Ａ ．ｍ ＋ Ａ２ ￣Ｌ Ｎ Ａ０５ Ｌ （／） ＋ Ａ０２ ￣Ｌ Ｎ ．ｍ ／ １ ＭＳ Ｂ ．ｍ ＋ ＡＡ０１ ｇＬ ２ ＭＳ Ｂ ｍ ＋ Ａ ．ｒｅＬ ＋ Ａ ３ ￣Ｌ Ｎ Ａ０２ｅ
ＭＳ Ｂ ．ｍ ＋ ＡＡ０１ Ｌ ＋ Ａ０２ ￣Ｌ Ｎ ．ｍ
ＭＳ Ｂ ｍ￣ ＋ ＡＡ０４ Ｌ ＋ Ａ４ Ｌ Ｎ －ｍ ＭＳ Ｂ ｍ￣ ＋ ＡＡ０６ Ｌ ＋ Ａ６ Ｌ Ｎ ．ｍ
ＭＳ ＋ＢＡ ８ ／ ＮＡＡ ０ ８ ｍｇＬ＋ ． ｍ Ｌ
以三色堇顶芽作为供试材料。
摘 要 ： 以三 色堇顶 芽为材料 ， 采用升汞消毒 ， 酒精与升汞混合消毒 ， 经不同时间、 不同材料 、 同培 不 养基对比试验 ， 结果发现 ： 色堇初代培养基最适配方为ＭＳ Ｂ ｍｇ ＋ Ａ ２ ／ 。项 芽先用 三 ＋ Ａ２ ／ Ｎ Ａ ０ Ｌ Ｌ ．ｍｇ 酒精 消毒 ２ 后 用升汞 消毒 ， ０ｓ 幼嫩顶 芽用升汞 处理 ５ ｎ 而较 老 顶 芽处理 ８ ０ｍｉ， 活 率均最 高 。 ， ｍｉ ～１ ｎ 成 关键词 ： 三色堇； 消毒 方法； 初代培养 中图分类 号 ：７ ２３ Ｓ２ ． 文 献标识 码 ： Ａ
２ ２正 ０１
辽来自百度文库宁 林
业 科
技
２ ２ ０１ Ｎ ｏ２
第 ２期
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ Ｌｉ ｏ ｉ ｇ ｏ ｒ ａ ｏ ａ ｎ ｎ Ｆｏ ｅ ｔｙ ｃ ｅ ｅ＆ Ｔ ｃ ｎ ｏ ｙ ｒ ｓｒ Ｓ ｉｎｃ ｅ ｈ ｏｌ ｇ
三色堇组织培养技术研究
姚 立 平
（ 辽宁省森林 经营研究所 ， 辽宁 丹东 １８ ０ ） １ ０２